本发明涉及一种应用于韭菜地的微生物有机肥及其制备方法，微生物有机肥中包括昆虫病原线虫SF‑SN、蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母和曲霉菌。制备方法为蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌发酵液的制备；原料混合物的制备和堆肥发酵。本发明微生物有机肥中不仅含有昆虫病原线虫SF‑SN，还含有蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母和曲霉菌，病原线虫与菌群相互作用，对韭菜根部的害虫韭蛆起到了很好的防治效果，防治效果高达98%以上，避免了化学防治对环境造成的危害，且本发明有利于韭菜的生长，韭菜长势明显优于使用普通肥料的韭菜。
1.一种应用于韭菜地的微生物有机肥，其特征在于，微生物有机肥中包括昆虫病原线虫SF-SN、蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母和曲霉菌；微生物有机肥制备方法，具体步骤如下：（1）发酵液的制备 分别通过LB液体培养基培养蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌后，利用混合发酵培养基对四种菌进行混合发酵，蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌的接种量均为5%（v/v），发酵时间为48-60h，发酵温度为37℃；
LB液体培养基（g/L）：酵母膏5g、蛋白胨10g、氯化钠10g，用氢氧化钠调整pH为7；
四种菌混合发酵培养基（g/L）：酵母粉3g、豆粕粉20g、磷酸二氢钾0.5g、氯化钙0.6g、硫酸亚铁0.05g、硫酸铵1g，用氢氧化钠调整pH为7；
（2）原料混合物的制备 将秸秆、苹果树的枯枝落叶粉碎后与鸡粪混合，秸秆、枯枝落叶和鸡粪的质量比为1:1:10-15；
（3）向原料混合物中加入蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌共同发酵的发酵液，以及昆虫病原线虫SF-SN，进行堆肥发酵，其中蜡样芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液、产朊假丝酵母发酵液和曲霉菌发酵液与原料混合物的质量比为1:100-
150，每千克原料混合物中加入50-100条昆虫病原线虫SF-SN，发酵温度为25-30℃，堆肥发酵时间为5天。
2.根据权利要求1所述的微生物有机肥，其特征在于，所述步骤（1）中发酵时间为54h。
3.根据权利要求1所述的微生物有机肥，其特征在于，所述步骤（2）中秸秆、枯枝落叶和鸡粪的质量比为1:1:11-14。
4.根据权利要求3所述的微生物有机肥，其特征在于，所述步骤（2）中秸秆、枯枝落叶和鸡粪的质量比为1:1:13。
5.根据权利要求1所述的微生物有机肥，其特征在于，所述步骤（3）中蜡样芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液、产朊假丝酵母发酵液和曲霉菌发酵液与原料混合物的质量比为1:110-140。
6.根据权利要求1所述的微生物有机肥，其特征在于，所述步骤（3）中每千克原料混合物中加入60-80条昆虫病原线虫SF-SN。
7.根据权利要求1所述的微生物有机肥，其特征在于，所述步骤（3）中发酵温度为28℃。
8.根据权利要求5所述的微生物有机肥，其特征在于，所述步骤（3）中蜡样芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液、产朊假丝酵母发酵液和曲霉菌发酵液与原料混合物的质量比为1:130。
9.根据权利要求6所述的微生物有机肥，其特征在于，所述步骤（3）中每千克原料混合物中加入70条昆虫病原线虫SF-SN。
一种应用于韭菜地的微生物有机肥及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种应用于韭菜地的微生物有机肥及其制备方法，属于微生物肥料技术领域。
背景技术
[0002] 微生物肥料是指含有微生物活体的特定制剂，微生物有机肥具有不破坏土壤结构，对人、畜等无毒无害；肥效持久；可提高作物产量和改善作物品质以及成本较低的特点，但是微生物有机肥具有较强的选择性，容易受到土壤和环境等因素的制约。
[0003] 韭菜蛆是迟眼蕈蚊的幼虫，常群集与韭菜根部，蛀食其假茎和鳞茎，导致菜叶发黄甚至植株死亡。由于韭蛆栖息部位和危害场所隐蔽，抗药性强，甲酯虫害发生世代严重重叠，一般的化学农药很难达到理想的防治效果，且常用化学药物防治，不仅对环境造成严重污染，而且容易使得韭蛆产生抗药性，昆虫病原线虫作为一种有潜能的生物防治因子通常以3龄感染期幼虫通过害虫身体的自然孔口或节间膜侵入寄主体内，释放携带的共生细菌，在害虫体内繁殖后产生毒素，导致害虫死亡。
发明内容
[0004] 本发明的目的在于一种应用于韭菜地的微生物有机肥及其制备方法，本发明为含有昆虫病原线虫SF-SN的有机肥，昆虫病原线虫Steinernema fetuae SF-SN（简称SF-SN）为常用昆虫病原线虫，可以通过普通商业途径获得。本发明克服了韭蛆防治过程对环境造成的危害，以及韭蛆抗药性的产生。本发明的技术方案如下：
[0005] 一种应用于韭菜地的微生物有机肥，微生物有机肥中包括昆虫病原线虫SF-SN、蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母和曲霉菌。制备方法如下：
[0006] （1）发酵液的制备 分别通过LB液体培养基培养蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌后，利用混合发酵培养基对四种菌进行混合发酵，蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌的接种量均为5%（v/v），发酵时间为48-60h，发酵温度为37℃；优选的，发酵时间为54h。
[0007] LB液体培养基（g/L）：酵母膏5g、蛋白胨10g、氯化钠10g，用氢氧化钠调整pH为7；
[0008] 四种菌混合发酵培养基（g/L）：酵母粉3g、豆粕粉20g、磷酸二氢钾0.5g、氯化钙0.6g、硫酸亚铁0.05g、硫酸铵1g，用氢氧化钠调整pH为7；
[0009] （2）原料混合物的制备 将秸秆、苹果树的枯枝落叶粉碎后与鸡粪混合，秸秆、枯枝落叶和鸡粪的质量比为1:1:10-15；优选的，秸秆、枯枝落叶和鸡粪的质量比为1:1:11-14；更优选的，秸秆、枯枝落叶和鸡粪的质量比为1:1:13。
[0010] （3）向原料混合物中加入蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌共同发酵的发酵液，以及昆虫病原线虫SF-SN，进行堆肥发酵，其中蜡样芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液、产朊假丝酵母发酵液和曲霉菌发酵液与原料混合物的质量比为1:100-150，每千克原料混合物中加入50-100条昆虫病原线虫SF-SN，发酵温度为25-30℃，堆肥发酵时间为5天。优选的，蜡样芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液、产朊假丝酵母发酵液和曲霉菌发酵液与原料混合物的质量比为1:110-140；每千克原料混合物中加入60-80条昆虫病原线虫SF-SN；发酵温度为28℃；蜡样芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液、产朊假丝酵母发酵液和曲霉菌发酵液与原料混合物的质量比为1:130；每千克原料混合物中加入70条昆虫病原线虫SF-SN。
[0011] 蜡样芽孢杆菌具有促进植物生长发育的作用；解淀粉芽孢杆菌具有较强的有机质分解能力，能够产生多种贵植物病原真菌有抑制效果的物质；产朊假丝酵母的主要作用是利用植物的根部分泌物、其他菌合成的糖类、氨基酸等产生发酵，产生促进根系生长的活性物质。
[0012] 本发明与现有技术相比具有以下优点：
[0013] 本发明微生物有机肥中不仅含有昆虫病原线虫SF-SN，还含有蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母和曲霉菌，病原线虫与菌群相互作用，对韭菜根部的害虫韭蛆起到了很好的防治效果，防治效果高达98%以上，避免了化学防治对环境造成的危害，且本发明有利于韭菜的生长，韭菜长势明显优于使用普通肥料的韭菜。
具体实施方式
[0014] 下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
[0015] 本发明微生物有机肥中昆虫病原线虫SF-SN、蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母和曲霉菌均为市售。
[0016] 实施例1 一种应用于韭菜地的微生物有机肥制备方法如下：
[0017] （1）发酵液的制备 分别通过LB液体培养基培养蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌后，利用混合发酵培养基对四种菌进行混合发酵，蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌的接种量均为5%（v/v），发酵时间为54h；
[0018] LB液体培养基（g/L）：酵母膏5g、蛋白胨10g、氯化钠10g，用氢氧化钠调整pH为7；
[0019] 四种菌混合发酵培养基（g/L）：酵母粉3g、豆粕粉20g、磷酸二氢钾0.5g、氯化钙0.6g、硫酸亚铁0.05g、硫酸铵1g，用氢氧化钠调整pH为7；
[0020] （2）原料混合物的制备 将秸秆、苹果树的枯枝落叶粉碎后与鸡粪混合，秸秆、枯枝落叶和鸡粪的质量比为1:1:13；
[0021] （3）向原料混合物中加入蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌共同发酵的发酵液，以及昆虫病原线虫SF-SN，进行堆肥发酵，其中蜡样芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液、产朊假丝酵母发酵液和曲霉菌发酵液与原料混合物的质量比为1:130，每千克原料混合物中加入70条昆虫病原线虫SF-SN，发酵温度为28℃，堆肥发酵时间为
5天。
[0022] 实施例2 一种应用于韭菜地的微生物有机肥制备方法如下：
[0023] （1）发酵液的制备 分别通过LB液体培养基培养蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌后，利用混合发酵培养基对四种菌进行混合发酵，蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌的接种量均为5%（v/v），发酵时间为48h；
[0024] LB液体培养基（g/L）：酵母膏5g、蛋白胨10g、氯化钠10g，用氢氧化钠调整pH为7；
[0025] 四种菌混合发酵培养基（g/L）：酵母粉3g、豆粕粉20g、磷酸二氢钾0.5g、氯化钙0.6g、硫酸亚铁0.05g、硫酸铵1g，用氢氧化钠调整pH为7；
[0026] （2）原料混合物的制备 将秸秆、苹果树的枯枝落叶粉碎后与鸡粪混合，秸秆、枯枝落叶和鸡粪的质量比为1:1:11；
[0027] （3）向原料混合物中加入蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌共同发酵的发酵液，以及昆虫病原线虫SF-SN，进行堆肥发酵，其中蜡样芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液、产朊假丝酵母发酵液和曲霉菌发酵液与原料混合物的质量比为1:110，每千克原料混合物中加入60条昆虫病原线虫SF-SN，发酵温度为25℃，堆肥发酵时间为
5天。
[0028] 实施例3 一种应用于韭菜地的微生物有机肥制备方法如下：
[0029] （1）发酵液的制备 分别通过LB液体培养基培养蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌后，利用混合发酵培养基对四种菌进行混合发酵，蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌的接种量均为5%（v/v），发酵时间为60h；
[0030] LB液体培养基（g/L）：酵母膏5g、蛋白胨10g、氯化钠10g，用氢氧化钠调整pH为7；
[0031] 四种菌混合发酵培养基（g/L）：酵母粉3g、豆粕粉20g、磷酸二氢钾0.5g、氯化钙0.6g、硫酸亚铁0.05g、硫酸铵1g，用氢氧化钠调整pH为7；
[0032] （2）原料混合物的制备 将秸秆、苹果树的枯枝落叶粉碎后与鸡粪混合，秸秆、枯枝落叶和鸡粪的质量比为1:1:15；
[0033] （3）向原料混合物中加入蜡样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、产朊假丝酵母液和曲霉菌共同发酵的发酵液，以及昆虫病原线虫SF-SN，进行堆肥发酵，其中蜡样芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液、产朊假丝酵母发酵液和曲霉菌发酵液与原料混合物的质量比为1:145，每千克原料混合物中加入90条昆虫病原线虫SF-SN，发酵温度为30℃，堆肥发酵时间为
5天。
[0034] 试验例
[0035] 对照例：腐熟的鸡粪有机肥，每亩地施肥1000千克；
[0036] 将本发明实施例1、实施例2和实施例3作为追肥施用后，每亩地施肥500千克，30天后，实施例1对韭蛆的防治效果为99.3%、实施例1对韭蛆的防治效果为98.5%、实施例1对韭蛆的防治效果为98.2%，对照例对对韭蛆的防治效果为20.1%；同时，观察施用本发明微生物有机肥后，韭菜健壮浓郁，且比对照例生长较快。
