用作IRAK抑制剂的杂芳基化合物及其用途转让专利
申请号 : CN201580073060.9
文献号 : CN107108561B
文献日 : 2020-08-28
发明人 : C·乔兰德-勒布伦 , R·琼斯 , A·C·温 , N·恩古耶 , T·L·约翰逊 , L·C·德赛尔姆 , K·潘达
申请人 : 默克专利有限公司
摘要 :
权利要求 :
1.通式I所示的化合物,
或药学上可接受的盐,式中:
X是CH或者N;
A-R3是-H、-CH3、-CF3、X’是CH或者N;
a
R不存在;
选自
其中当X是N时,那么A-R3不是H。
2.如权利要求1所述的化合物,选自:
3.一种药物组合物,所述药物组合物包含如权利要求1或2所述的化合物以及药学上可接受的佐剂、载体或媒介质。
4.如权利要求1或2所述的化合物或其生理学上可接受的盐在制备用于抑制在病人或生物样品中的IRAK或其突变体的活性的药物中的应用。
5.如权利要求1或2所述的化合物在制备用于治疗有需要的病人中由IRAK介导的疾病的药物中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其中所述疾病选自类风湿性关节炎、银屑病关节炎、骨关节炎、全身性红斑狼疮、狼疮性肾炎、强直性脊柱炎、骨质疏松、系统性硬化病、多发性硬化症、银屑病、I型糖尿病、II型糖尿病、炎性肠病、高免疫球蛋白血症和周期性发热综合征、Cryopyrin-相关周期性综合征、施尼茨勒综合征、全身型幼年特发性关节炎、成人发病性斯提耳氏病、痛风、假性痛风、SAPHO综合征、卡斯尔曼氏病、败血症、中风、动脉粥样硬化、腹腔病、DIRA(IL-1受体拮抗剂缺乏)、阿尔茨海默氏病、帕金森病、癌症。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述疾病选自克罗恩病和溃疡性结肠炎。
8.如权利要求1或2所述的化合物或其生理学上可接受的盐在制备用于治疗病人的癌症的药物中的应用。
9.一种制备如权利要求1所述的通式I所示的化合物的方法,包括以下步骤:将通式(A)化合物,
与 反应;
式中,X、Y、A、Ra、Rb、R2和R3具有权利要求1指明的含义,每个R独立地是氢或C1–6脂族基团;
得到通式(B)化合物:
以及将通式(B)化合物与 反应;
式中,每个R独立地是氢或C1–6脂族基团;
得到如权利要求1所述的通式I所示的化合物,并且所述通式I中的X’是CH。
说明书 :
用作IRAK抑制剂的杂芳基化合物及其用途
技术领域
途。
质或刺激(例如生长因子、细胞因子或趋化因子)来控制细胞的活化、生长、分化和生存的信
号转导事件。一般而言,蛋白激酶被分类成两组,优先地磷酸化酪氨酸残基的组以及优先地
磷酸化丝氨酸和/或苏氨酸残基的组。
特别感兴趣的激酶靶点是IRAK家族的成员。
可以介导来自各种细胞受体(包括toll样受体(TLR))的信号。IRAK4被认为是在白细胞介
素-1(IL-1)受体和除TLR3外的所有toll样受体(TLR)的下游被活化的最初蛋白激酶,并且
通过IRAKI的快速活化和IRAK2的较慢活化而在先天免疫系统中启动信号转导。IRAKI是首
先通过对与IL-1I型受体共同免疫沉淀的IL-1依赖性激酶活性的生物化学纯化而确认(Cao
等人,1996年.Science271(5252):1128-31)。IRAK2是通过在人表达序列标签(EST)数据库
搜索与IRAKI同源的序列而得到确认(Muzio等人,1997年.Science278(5343):1612-5)。
IRAK3(也称为IRAKM)是使用对具有通过筛选人植物凝集素活化外周血白细胞(PBL)CDNA库
而发现与IRAKI显着同源性的多肽进行编码的小鼠EST序列而得到确认(Wesche等人,
1999.J.Biol.Chem.274(27):19403-10)。IRAK4是利用IRAK样序列的数据库搜索和通用
cDNA库的PCR而确认(Li等人,2002年.Proc.Natl.Acad.Sc1.USA99(8):5567-5572)。
活性的儿童易发生由脓生成菌所引起的复发感染。IRAK-依赖性TLR和IL-1R似乎对于针对
一些脓生成菌的儿童免疫力是至关重要的,但在针对成年人大部分感染的保护性免疫中却
发挥多余的作用。因此,IRAK4抑制剂可用于治疗成年人的慢性炎症性疾病,并且不使他们
对细菌和病毒感染太敏感(Cohen,2009年.CurrentOpinion in CellBiology21,1-8)。先已
开发强效IRAK4抑制剂(Buckley等人,2008年.Bioorg MedChem Lett.18(12):3656-60)。
IRAKI对于IRF7的TLR7介导和TLR9介导活化和干扰素-a(IFN-α)的生成是必不可少的,这表
明IRAKI抑制剂可用于系统性红斑狼疮(SLE)的治疗。IRAK2在IRAK4的下游被活化并且在促
炎性细胞因子生成中发挥作用。因此,IRAK2抑制剂可用于炎症性疾病。
发明内容
人)疾病状态中的活性或功能的化合物。
元素是根据元素周期表(the Periodic Table of the Elements)(化学文摘社版本(CAS
version),化学与物理手册(Handbook of Chemistry和Physics),第75版)来识别。另外,有
机化学的一般原理描述于“有机化学(Organic Chemistry)”(托马斯·索瑞尔(Thomas
Sorrell),大学自然科学图书公司(University Science Books),索萨利托(Sausalito):
1999)和“马奇高等有机化学(March′s Advanced Organic Chemistry)”(第5版,编辑:史密
斯(SmitH,M.B.)和马奇(MarcH,J.),约翰威立父子出版公司(John Wiley&Sons),纽约(New
York):2001)中,这些书籍的全部内容都以引用的方式并入本文中。
以上不饱和单元但不为芳香族的单环烃或双环烃,其具有单个连接点与分子的其余部分相
连接。除非另外说明,否则脂肪族基含有1-6个脂肪族碳原子。在一些实施例中,脂肪族基含
有1-5个脂肪族碳原子。在一些实施例中,脂肪族基含有1-4个脂肪族碳原子。在一些实施例
中,脂肪族基含有1-3个脂肪族碳原子,并且在一些实施例中,脂肪族基含有1-2个脂肪族碳
原子。在一些实施例中,“环脂肪族基”(或“碳环”或“环烷基”)是指完全饱和或含有一个或一个以上不饱和单元但非芳香族的单环C3-C6烃,其具有单个连接点与分子的其余部分相连
接。示例性脂族基团是直链或支链的取代的或未取代的C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基及
其杂化物,例如(环烷基)烷基、(环烯基)烷基或(环烷基)烯基。
(如在吡咯烷基中)或NR+(如在N-取代的吡咯烷基中))。
原子经取代基置换的聚亚甲基。合适的取代基包括下文关于经取代的脂肪族基所描述的取
代基。
那些。
等,其任选地包括一个或多个取代基。。如本文中所用,术语“芳基”的范围内也包括芳环与
一个或一个以上非芳环稠合而成的基团,例如茚满基、邻苯二甲酰亚胺基、萘二甲酰亚胺基
(naphthimidyl)、菲啶基或四氢萘基等。
(cyclic array)中共享6、10或14个π电子;并且除碳原子外,还具有1到5个杂原子。术语“杂原子”是指氮、氧或硫,并包括氮或硫的任何氧化形式和碱性氮的任何季铵化形式。杂芳基
包括(但不限于)噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚嗪基、嘌呤基、萘啶基和蝶啶基。如本文所用的术语“杂芳基”和“杂芳-”也包括杂芳环与一个或一个以上芳环、环脂肪族环或杂环稠合而成的基团,其中连接基团或连接点在杂芳环上。非限制
性实例包括吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、吲唑基、苯并咪唑
基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、4H-喹嗪基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基和吡啶并[2,3-b]-1,
4-噁嗪-3(4H)-酮。杂芳基可为单环或双环的。术语“杂芳基”与术语“杂芳环”或“杂芳香族基”可互换使用,任一术语都包括任选经取代的环。术语“杂芳烷基”是指经杂芳基取代的烷
基,其中烷基和杂芳基部分独立地任选经取代。
“氮”包括经取代的氮。举例来说,在具有0-3个选自氧、硫或氮的杂原子的饱和或部分不饱
和环中,氮可能是N(如3,4-二氢-2H-吡咯基中)、NH(如吡咯烷基中)或+NR(如N-取代的吡咯
烷基中)。
基、四氢噻吩基、吡咯烷基、哌啶基、吡咯啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、噁唑烷基、哌嗪基、二噁烷基、二氧戊环基、二氮杂卓基、氧氮杂卓基、硫氮杂卓基、吗啉基和奎宁环基。术语“杂环”、“杂环基”和“杂环部分”在本文中可互换使用,并且也包括杂环与一个或一个以上芳环、杂芳环或环脂肪族环稠合而成的基团,例如吲哚啉基、3H-吲哚基、色满
基、菲啶基或四氢喹啉基,其中连接基团或连接点在杂环上。杂环基可为单环或双环的。术
语“杂环基烷基”是指经杂环基取代的烷基,其中烷基和杂环基部分独立地任选经取代。
杂芳基部分。
代基置换。“取代的”适用于结构上明确的或暗示的一个或多个氢原子(例如, 至
少指 以及 至少指
除非另外指示,否则“任选经取代”的基团可能在此基团的各可取代位置上都具有合适的取
代基,并且当任何给定结构中的一个以上位置可经一个以上选自规定基团的取代基取代
时,每个位置上的取代基可能相同或不同。本发明所预想的取代基组合优选是会形成稳定
或化学上可行的化合物的取代基组合。如本文所用的术语“稳定”是指化合物在经受允许其
制造、检测和在某些实施例中允许其回收、纯化以及用于达成一个或一个以上本文中所揭
示的目的的条件时实质上不发生改变。
4SR°;–(CH2)0–4PH,其可经R°取代;–(CH2)0–4O(CH2)0–1PH,其可经R°取代;–CH=CHPH,其可经R°取代;–(CH2)0–4O(CH2)0–1-吡啶基,其可经R°取代;–NO2;–CN;–N3;-(CH2)0–4N(R°)2;–(CH2)0–4N(R°)C(O)R°;–N(R°)C(S)R°;–(CH2)0–4N(R°)C(O)NR°2;-N(R°)C(S)NR°2;–(CH2)0–4N(R°)C(O)OR°;–N(R°)N(R°)C(O)R°;-N(R°)N(R°)C(O)NR°2;-N(R°)N(R°)C(O)OR°;–(CH2)0–4C(O)R°;–C(S)R°;–(CH2)0–4C(O)OR°;–(CH2)0–4C(O)SR°;-(CH2)0–4C(O)OSiR°3;–(CH2)0–4OC(O)R°;–OC(O)(CH2)0–4SR°,SC(S)SR°;–(CH2)0–4SC(O)R°;–(CH2)0–4C(O)NR°2;–C(S)NR°2;–C(S)SR°;–SC(S)SR°,-(CH2)0–4OC(O)NR°2;-C(O)N(OR°)R°;–C(O)C(O)R°;–C(O)CH2C(O)R°;–C(NOR°)R°;-(CH2)0–4SSR°;–(CH2)0–4S(O)2R°;–(CH2)0–4S(O)2OR°;–(CH2)0–4OS(O)2R°;–S(O)
2NR°2;-(CH2)0–4S(O)R°;-N(R°)S(O)2NR°2;–N(R°)S(O)2R°;–N(OR°)R°;–C(NH)NR°2;–P(O)
2R°;-P(O)R°2;-OP(O)R°2;–OP(O)(OR°)2;SiR°3;–(C1–4直链或支链亚烷基)O–N(R°)2;或(C1–4直链或支链亚烷基)C(O)O–N(R°)2,其中各R°可如下文所定义经取代并且独立地为氢、C1-6
脂肪族基、-CH2Ph、-O(CH2)0-1Ph、-CH2-(5-6元杂芳基环)、或具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-6元饱和环、部分不饱和环或芳环,或不管以上定义,两个独立存在的R°连
同插入其间的原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的3-12元饱和、部分
不饱和或芳基单环或多环,此环可如下文所定义经取代。
、–(C1–4直链或支链亚烷基)C(O)OR 、或–SSR ,其中各R 未经取代或在前面有“卤代”的情况下仅经一个或一个以上卤素取代,并且独立地选自C1-4脂肪族基、–CH2Ph、–O(CH2)0–1Ph、或具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-6元饱和环、部分不饱和环或芳环。R°的饱和
碳原子上的合适二价取代基包括=O和=S。
0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的未经取代的5-6元饱和环、部分不饱和环或芳环。与
“任选经取代”的基团的邻位可取代碳结合的合适二价取代基包括:–O(CR*2)2–3O–,其中各独立存在的R*是选自氢、可如下文所定义经取代的C1-6脂肪族基或具有0-4个独立地选自氮、
氧或硫的杂原子的未经取代的5-6元饱和环、部分不饱和环或芳环。
的-OPh或具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的未经取代的5-6元饱和环、部分不饱
和环或芳环,或不管以上定义,两个独立存在的 连同插入其间的原子一起形成具有0-4个
独立地选自氮、氧或硫的杂原子的未经取代的3-12元饱和、部分不饱和或芳基单环或双环。
1PH,或具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-6元饱和环、部分不饱和环或芳环。
个或更多个氢原子,所述典型的取代基不限于:
基、-NHCO2-芳基、-NHCO2-杂芳基、-NHCO2-杂环基、-NHC(O)NH2、-NHC(O)NH-烷基、-NHC(O)
NH-烯基、-NHC(O)NH-烯基、-NHC(O)NH-碳环基、-NHC(O)NH-芳基、-NHC(O)NH-杂芳基、-NHC
(O)NH-杂环基、NHC(S)NH2、-NHC(S)NH-烷基、-NHC(S)NH-烯基、-NHC(S)NH-炔基、-NHC(S)
NH-碳环基、-NHC(S)NH-芳基、-NHC(S)NH-杂芳基、-NHC(S)NH-杂环基、-NHC(NH)NH2、-NHC
(NH)NH-烷基、-NHC(NH)NH--烯基、-NHC(NH)NH-烯基、-NHC(NH)NH-碳环基、-NHC(NH)NH-芳
基、-NHC(NH)NH-杂芳基、-NHC(NH)NH-杂环基、-NHC(NH)-烷基、-NHC(NH)-烯基、-NHC(NH)-
烯基、-NHC(NH)-碳环基、-NHC(NH)-芳基、-NHC(NH)-杂芳基、-NHC(NH)-杂环基,
SO2NH-芳基、-SO2NH-杂芳基、-SO2NH-杂环基,
与合理的效益/风险比相称的那些盐。药学上可接受的盐是公知的现有技术。例如,SM
Berge等人在J.Pharmaceutical ScienceS,第1977年,66,1-19,详细描述了药学上可接受
的盐,纳入其内容作为参考。本发明的化合物的药学上可接受的盐包括从适合的无机酸和
碱以及有机酸和碱衍生而来的那些盐。药学上可接受的无毒性酸加成盐的实例是氨基与无
机酸如盐酸,氢溴酸,磷酸,硫酸和高氯酸,或者与有机酸如乙酸,草酸,马来酸、酒石酸,柠檬酸,琥珀酸或丙二酸形成的盐,或者通过使用诸如离子交换等本领域的其他方法形成的
盐。其他药学上可接受的盐包括己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯
甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊丙酸盐、葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐、戊酸盐等。
季铵盐和胺阳离子。
体、以及Z和E构象异构体。因此,本发明化合物的混合物的单个立体化学异构体以及对映
体、非对映体、互变异构体和几何(或构象)异构体的混合物在本发明的范围之内。除非另有
说明,本发明的化合物的所有互变异构形式都在本发明的范围之内。
13 14
个 C-或 C-富集碳置换碳,这些化合物都本发明的范围之内。在一些实施方案中,基团包
含一个或多个氘原子。
常是天然存在的原子的原子量或质量数不同的一个或多个原子取代。市场上容易买到且可
通过已知方法被结合到具有通式I的化合物中的同位素的例子包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和
氯,例如分别为2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36CI。含有一或多个上述同位素和/或其他原子的同位素的通式I化合物、其前药或它们中任一个的药学上可接受的盐都应
理解为本发明的一部分。可以多种有利的方式使用同位素标记的通式I化合物。例如,结合
了诸如3H或14C的放射性同位素的同位素标记的通式1化合物可用于药物和/或底物组织分
布试验。由于其制备简单及可检测性良好而尤其优选这两种放射性同位素,即氚(3H)和碳-
14(14C)。由于诸如氘(2H)的较重的同位素具有较高的代谢稳定性,将这种同位素标记化合
物结合到通式I化合物中在治疗上是有好处的。较高的代谢稳定性直接导致体内半衰期延
长或剂量减少,这在多数情况下代表了本发明的优选实施例。通常可通过进行本文本的实
施例部分和制备部分中的合成方案和相关描述中公开的步骤来制备同位素标记的通式I化
合物,用容易得到的同位素标记反应物代替非同位素标记反应物。
这是由于所述同位素替换之后形成共价键所需的基态能量的变化而引起的。较重的同位素
的替换通常导致化学键的基态能量降低,从而引起速率限制的键断裂反应的速率降低。如
果键断裂发生在沿着多产物反应的坐标的鞍点区中或其附近,产物分布比率可被显着改
变。解释如下:如果氘被键合到碳原子的非可替换位置上,通常速率差异km/kd=2-7。如果该
速率差异被成功地应用于易于氧化的通式I化合物,则该化合物在体内的性质可被显着地
改变,从而改善药物动力学特性。
的体外肝微粒体试验提供了关于这种类型的氧化代谢过程的有价值的信息,这些信息使得
可以合理地设计具有通式I的含氘化合物,使其由于抗氧化代谢而提高稳定性。因此,通式I
化合物的药物动力学性质显着地改善了,这种改善可用体内半衰期(t/2)的延长、疗效最好
的浓度(Cmax)、剂量响应曲线下的面积(AUC)以及F来定量地表示,也可用降低的清除率、剂
量和材料成本来定量地表示。
在所述类似物中各种组合的氢原子被氘原子取代,因此所述氢原子中的一部分、大多数或
全部被氘原子取代。半衰期的确定使得可以有利地及准确地确定对氧化代谢的抵抗能力提
高的程度。通过这种方式确定了,由于这种类型的氘-氢替换,母化合物的半衰期可被提高
高达100%。
以合理地认为,含氘类似物将会显着地减少或消除不良代谢物的产生,即使该具体的氧化
反应并不是速率决定步骤。更多现有技术中关于氘-氢替换的信息可参见例如Hanzlik等,
J.Org.Chem.55,3992-3997,1990,Reider等,J.Org.Chem.52,3326-3334,1987,FosteR,
Adv.Drug Res.14,1-40,1985,Gillette等,Biochemistry 33(10)2927-2937,1994,和
Jarman等Carcinogenesis 16(4),683-688,1993。
间的IRAK活性发生可测量的变化。
本文详述的各种目的(例如,向受试者治疗性或预防性给药)。
方案或与任何其他实施方案结合。
氧或硫的杂原子的5-6元单环杂芳环;上述每个基团任选经取代;
杂原子的5-6元单环杂芳环;上述每个基团任选经取代;或者
个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-6元单环杂芳环;上述每个基团任选经取代;
环;上述每个基团任选经取代。
的杂原子的5-6元单环杂芳环;上述每个基团任选经取代。
唑基,苯并咪唑啉基,咔唑基,NH-咔唑基,咔啉基,色满基,色烯基,噌啉基,十氢喹啉基,2H,
6H-1,5,2-二噻嗪基,二氢呋喃并[2,3-b]四氢呋喃基,呋喃基,呋咱基,咪唑烷基,咪唑啉
基,咪唑基,1H-吲唑基,吲哚烯基,二氢吲哚基,中氮茚基,吲哚基,3H-吲哚基,异二氢吲哚,异吲哚烯基,异苯并呋喃基,异色满基,异吲唑基,异二氢吲哚,异吲哚基,异喹啉基,异噻唑基,异噁唑基,吗啉基,萘啶基,八氢异喹啉基,噁二唑基,1,2,3-噁二唑基,1,2,4-噁二唑
基;1,2,5-噁二唑基,1,3,4-噁二唑基,噁唑烷基,噁唑基,噁唑烷基,嘧啶基,菲啶基,菲咯啉基,吩嗪基,吩噻嗪基,苯并氧硫杂环己二烯基,吩噁嗪基,酞嗪基,哌嗪基,哌啶基,蝶啶基,嘌呤基,吡喃基,吡嗪基,吡唑烷基,吡唑啉基,吡唑基,哒嗪基,吡啶并噁唑,吡啶并咪唑,吡啶并噻唑,吡啶基,吡啶基,嘧啶基,吡咯烷基,吡咯啉基,2H-吡咯基,吡咯基,喹唑啉基,喹啉基,4H-喹嗪基,喹喔啉基,奎宁环基,四氢呋喃基,四氢异喹啉基,四氢喹啉基,6H-
1,2,5-噻二嗪基,1,2,3-噻二唑基,1,2,4-噻二唑基,1,2,5-噻二唑基,1,3,4-噻二唑基,噻
蒽基,噻唑基,噻吩基,噻吩并噻唑基,噻吩并噁唑基,噻吩并咪唑基,硫代苯基,三嗪基,1,
2,3-三唑基,1,2,4-三唑基,1,2,5-三唑基,1,3,4-三唑基,氧杂环丁烷基,氮杂环丁烷基,
或呫吨基,上述每个基团任选经取代。
取代。
1,2,5-噁二唑基,1,3,4噁二唑基,噁唑烷基,噁唑基,噁唑烷基,嘧啶基,哌嗪基,哌啶基,吡喃基,吡嗪基,吡唑烷基,吡唑啉基,吡唑基,哒嗪基,吡啶基,吡啶基,嘧啶基,吡咯烷基,吡咯啉基,2H-吡咯基,吡咯基,噻唑基,噻吩基,三嗪基,噻二唑,1,2,3-三唑基,1,2,4-三唑基,1,2,5-三唑基或1,3,4三唑基;上述每个基团任选经取代。
2,5-噁二唑基,1,3,4-噁二唑基,噁唑烷基,噁唑基,噁唑烷基,嘧啶基,哌嗪基,哌啶基,吡喃基,吡嗪基,吡唑烷基,吡唑啉基,吡唑基,哒嗪基,吡啶基,吡啶基,嘧啶基,吡咯烷基,吡咯啉基,2H-吡咯基,吡咯基,噻唑基,噻吩基,三嗪基,噻二唑,1,2,3-三唑基,1,2,4-三唑基,1,2,5-三唑基或1,3,4三唑基;上述每个基团任选经取代。
能在生物样品或病人中有效地可测量抑制IRAK或其变体。在某些实施例中,在本发明的组
合物中化合物的量要能在生物样品或病人中有效地可测量抑制IRAK或其变体。在某些实施
例中,本发明的组合物被配制用于施用至有需要该组合物的病人。
受的载体、佐剂或媒介物包括,但不限于,离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(如人血清白蛋白)、缓冲物质(如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏
甘油酯混合物、水、盐或电解质(如硫酸鱼精蛋白)、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙基烯乙二醇、羧甲基纤维
素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、聚乙基烯乙二醇和羊毛脂。
性的代谢物或残余物。
中已知的技术使用适合的分散或润湿剂和悬浮剂配制。无菌可注射制剂也可以是用无毒的
肠胃外可接受的稀释剂或溶剂(例如在1,3-丁二醇中的溶液)制成的无菌可注射溶液或悬
浮液。所使用的可接受的媒介物和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外,无菌
不挥发性油通常用作溶剂或悬浮介质。
油,尤其是它们的聚氧乙基化油。这些油溶液或悬浮液还含有长链醇稀释剂或分散剂,例如
羧甲基纤维素或类似的分散剂,它们常用于制备药学上可接受的剂型制剂中,包括乳剂和
混悬剂。其它常用的表面活性剂,如吐温(Tweens)、司盘(Spans)和其它乳化剂或生物利用
度增强剂,它们常用于制备药学上可接受的固体、液体,或者其它剂型也可以用于配制的目
的。
通常也会加入润滑剂如硬脂酸镁。对于以胶囊形式的口服给药,有用的稀释剂包括乳糖和
干玉米淀粉。当需要口服水悬浮液时,活性成分与乳化剂和悬浮剂结合。如果需要的话,任
选地可加入某些甜味剂、调味剂或着色剂。
度下为液体,因此将在直肠中熔融并释放出药物。这样的材料包括可可脂、蜂蜡和丙二醇。
局部制剂。
油、液体凡士林、白凡士林、丙基烯二醇、聚氧乙基烯、聚氧丙基烯化合物、乳化蜡和水。可替代地,在合适的洗液或乳膏中配制药学上可接受的组合物,所述洗液或乳膏含有悬浮或溶
解于一种或多种载体中的活性成分。合适的载体包括,但不限于,矿物油、脱水山梨醇单硬
脂酸酯、聚山梨醇酯60、十六烷基酯蜡、CETE芳基醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。
腐剂、吸收促进剂以提高生物利用度,也可采用碳氟化合物和/或其它常规增溶剂或分散
剂。
其他实施方案中,本发明的药学上可接受的组合物与食物施用。
kg体重/化合物之间的剂量,可以每天给予病人接受这些组合物。
率、药物组合、以及治疗医师的判断和具体疾病的严重程度。在组合物中本发明化合物的量
还将取决于组合物中的特定化合物。
方法,包括以有效治疗所述免疫调节异常的量给所述对象施用通式(I)及相关式的化合物。
性关节炎、I型糖尿病、炎症性肠病、胆汁性肝硬化、葡萄膜炎、多发性硬化症、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、大疱性类天疱疮、结节病、银屑病、自身免疫性肌炎、韦格纳肉芽肿、鱼鳞癣、Graves眼病和哮喘。
甲状腺炎、多发性硬化症、系统性硬化病、重症肌无力、I型糖尿病、葡萄膜炎、后葡萄膜炎、变态反应性脑脊髓炎、肾小球性肾炎、感染后自身免疫性疾病(包括风湿热和感染后肾小球
性肾炎)、炎症性和过度增生性皮肤病、银屑病、特应性皮炎、接触性皮炎、湿疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔癣、天疱疮、大疱性类天疱疮、大疱性表皮松解、荨麻疹、血管性水肿、血管
炎、红斑、皮肤嗜酸性粒细胞增多症、红斑狼疮、痤疮、斑秃、角膜结膜炎、春季结膜炎、与白塞氏病相关的葡萄膜炎、角膜炎、疱疹性角膜炎、圆锥形角膜、角膜上皮营养不良、角膜白
斑、眼天疱疮、角膜侵蚀性溃疡、巩膜炎、Graves’眼病、沃格特-小柳-原田三氏综合征、结节病、花粉过敏、可逆阻塞性气道疾病、支气管哮喘、过敏性哮喘、内源性哮喘、外源性哮喘、灰尘哮喘、慢性或顽固性哮喘、迟发性哮喘和气道高反应性、支气管炎、胃溃疡、由缺血性疾病
和血栓形成引起的血管损伤、缺血性肠病、炎性肠病、坏死性小肠结肠炎、与热灼伤有关的
肠损伤、腹腔病、直肠炎、嗜酸细胞性胃肠炎、肥大细胞增多症、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、偏头痛、鼻炎、湿疹、间质性肾炎、古德帕斯丘综合征、溶血性尿毒综合征、糖尿病性肾病、多发性肌炎、格林-巴利二氏综合征、美尼尔氏病、多神经炎、多发性神经炎、单神经炎、神经根病、甲状腺功能亢进、巴塞多氏病、单纯性红细胞再生不良、再生障碍性贫血、再生不良性贫
血、原发性血小板减少性紫癜、自身免疫性溶血性贫血、粒性白细胞缺乏症、恶性贫血、巨幼
红细胞性贫血、红细胞发生不能、骨质疏松、结节病、纤维化肺、特发性间质性肺炎、皮肤肌
炎、寻常型白癜风、寻常性鱼鳞病、光变应性敏感、皮肤T细胞淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、动脉硬化、动脉粥样硬化、主动脉炎综合征、多发性结节性动脉炎、心肌病、硬皮病、韦格纳
坏死性肉芽肿、斯耶格伦综合征、肥胖病、嗜酸性筋膜炎、牙龈损伤、牙周组织、牙槽骨、牙骨质龋、肾小球性肾炎、通过防止头发脱落或者通过毛发发芽和/或促进生发和毛发生长治疗
男性型秃发或老年脱发、肌肉萎缩症、脓皮病和赛杂瑞综合征、阿狄森氏病、保存时发生的
器官的局部缺血再灌注损伤、移植或缺血性疾病、内毒素休克、假膜性结肠炎、由药物或辐
射引起的结肠炎、缺血性急性肾功能不全、慢性肾功能不全、由肺氧或药物引起的毒素病、
肺癌、肺气肿、白内障、铁质沉着、色素性视网膜炎、老年性黄斑变性、玻璃体结疤、角膜碱烧伤、皮炎多形性红斑、线状IgA大疱性皮肤病和水泥皮炎(cement dermatitis)、齿银炎、牙
周炎、败血症、胰腺炎、由环境污染引起的疾病、老化、致癌作用、癌的转移和低气压病、由组胺或白细胞三烯-C4释放引起的疾病、白塞氏病、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、硬
化性胆管炎、部分肝切除、急性肝坏死、由毒素引起的坏死、病毒性肝炎、休克、或缺氧症、B病毒性肝炎、非A/非B型肝炎、肝硬化、酒精性肝硬化、肝功能衰竭、暴发性肝功能衰竭、迟发性肝功能衰竭、慢加急性(acute-on-chronic)肝衰竭、化疗效果增强、巨细胞病毒感染、
HCMV感染、艾滋病、癌症、老年性痴呆、帕金森病、外伤、和慢性细菌感染。
化症、银屑病、I型糖尿病、II型糖尿病、炎性肠病(克罗恩病和溃疡性结肠炎)、高免疫球蛋
白血症和周期性发热综合征、Cryopyrin-相关周期性综合征、施尼茨勒综合征、全身型幼年
特发性关节炎、成人发病性斯提耳氏病、痛风、假性痛风、SAPHO综合征、卡斯尔曼氏病、败血症、中风、动脉粥样硬化、腹腔病、DIRA(IL-1受体拮抗剂缺乏)、阿尔茨海默氏病、帕金森病、癌症。
素瘤和胰岛细胞癌),间皮瘤,神经鞘瘤(包括听神经瘤),脑膜瘤,腺癌,黑素瘤和白血病或
淋巴恶性肿瘤。这样的癌症的更具体实例包括鳞状细胞癌(例如,上皮鳞状细胞癌),肺癌
(包括小细胞肺癌,SCLC),非小细胞肺癌(NSCLC),肺腺癌和鳞状细胞癌肺癌,腹膜癌,肝细
胞癌,胃腺癌或胃癌(包括胃肠癌),胰腺癌,成胶质细胞瘤,子宫颈癌,卵巢癌,肝癌,膀胱
癌,肝癌,乳腺癌(包括转移性乳腺癌),结肠癌,癌症,结肠直肠癌,子宫内膜或子宫癌,唾液腺癌,肾或肾癌,前列腺癌,外阴癌,甲状腺癌,肝癌,肛门癌,阴茎癌,睾丸癌,食管癌,胆道肿瘤,以及头颈癌。
中,癌症是结肠直肠癌。在一些实施方案中,癌症是结肠癌。
发明化合物足够时间,其时间使活性药物得以抑制IRAK的活性,培养时间常介于1小时与1
周之间。可用活检样品或细胞系的培养细胞进行体外处理。
联反应所处的某些阶段,可采用相互作用的化合物来调节信号。可将本发明化合物用作试
剂来检测动物模型和/或细胞培养模型或本申请书中所提及临床疾病中的IRAK依赖性信号
转导通路状况。
化合物抑制IRAK活性的用途。
I所示的化合物和/或其生理学上可接受的盐在制备用于预防性或治疗性治疗和/或监测由
IRAK活性引致、介导和/或蔓延的疾病的药物中的用途。在某些实施例中,本发明提供了通
式I所示的化合物和/或其生理学上可接受的盐在制备用于预防性或治疗性治疗由IRAK介
导的疾病的药物中的用途。
或半液体载体或赋形剂结合,任选地在合适的剂型中掺合一或多种其他活性物质。
病症状,或部分或完全地将与疾病或病理相关的或导致疾病或病理改变的一种或多种生理
或生化参数逆转成正常状态。假如化合物以不同的时间间隔给予,监测可被认为是一种治
疗,以增强应答和完全根除疾病病原体和/或症状。可以施加同一种或不同种化合物。也可
以使用药物来减低发展疾病或者甚至预先防止与IRAK活性相关的病症出现,或者治疗出现
的或持续有的病症。
含至少一种本发明化合物和/或其生理学上可接受的盐的药物。
关的疾病的病人,所述病人至少暂时地显示整体病况或病人机体个别部分的病理改变。
的至少一种其他药剂联用,该其他药剂可以是通式I的另一种化合物或者具有不同结构骨
架的化合物。该些活性成分可以同时或依次使用。
物、皮质类固醇、甲氨蝶呤、肿瘤坏死因子(TNF)拮抗剂、免疫抑制剂和甲氨蝶呤。
药的实例还包括对COX-2具有特异性的抑制剂,如塞来考昔、伐地考昔、芦米考昔DND/或艾
托考昔。
种抗肿瘤坏死因子α单克隆抗体。
向治疗,可包括一种或多种,但是优选地为一种以下抗肿瘤药物:
抗、奥奴珠单抗、ocaratuzumab、奥戈伏单抗、雷莫芦单抗、利妥木单抗、司妥昔单抗、托珠单
1,2,3 1,3 1
抗、扎鲁木单抗、扎木单抗、马妥珠单抗、达妥珠单抗 、onartuzumab 、雷妥莫单抗 、
tabalumab1,3,EMD-5257974,纳武单抗(nivolumab1,3);
besudotox、依多曲肽、奥英妥珠单抗、那莫单抗、莫奥珠单抗、锝(99mTc)阿西莫单抗、
vintafolide1,3;
地有效量的其他活性成分所组成。该药盒包含合适的容器,例如,盒子、各种瓶子、袋子或安
瓿。例如,该药盒可包含分置的安瓿,每个安瓿装有溶解形式或冻干形式的有效量本发明化
合物和/或其药学上可接受的盐、衍生物、溶剂化物和立体异构体,包括它们的各种比例混
合物,和有效量的其他活性化合物。
在一或多种症状已经出现后给予治疗。在其他实施方案中,治疗是在没有症状的情况下给
予。例如,在易感个体的症状发作之前给予治疗(例如,基于症状历史和/或遗传或其它感受
因素)。在症状消失后可继续治疗,例如防止或延迟其复发。
种、年龄和受试者的一般状况、感染的严重程度、特定药物、给药方式等。本发明的化合物优
选配制成剂量单元形式,易于给药和保持剂量均一。如本文中所使用的术语“单位剂型”指
在物理上分开的单位,适于给待治疗的病人单一剂量使用。然而,可以理解的是,本发明的
化合物与组合物的每日总用量将由主治医师在合理的医学判断范围内决定。任一具体病人
或生物的特定剂量水平取决于多种因素,包括,需要治疗的具体病情及其严重程度、所选用
具体化合物的活性、所使用的具体组合物、年龄、体重、健康状况、性别、饮食状态、给药时间和途径、具体化合物的排泄率、治疗的持续时间、与所述用具体化合物联用或共享的药物等
等本领域内公知的因素。
物,这取决于感染的严重程度。在某些实施例中,本发明的化合物以剂量水平约0.01mg/kg
受试者体重至100mg/kg受试者体重,优选约1mg/kg受试者体重至50mg/kg受试者体重经口
服或肠胃外给药,每天一次或更多次,以获得所需的治疗效果。
剂的性质和给药的方法,并且最终由治疗医生或兽医决定。然而,化合物的有效量通常在
0.1至100mg/kg接受者(哺乳动物)体重/天的范围内,特别是通常在I至10mg/kg体重/天的
范围内。因此,体重70kg的成年哺乳动物每天的实际剂量通常在70和700mg之间,其中此量
可以采用单独剂量/天、或者通常以一系列部分剂量(例如,2、3、4、5或6次)/天的形式给药,因此总的日剂量是相同的。可以作为化合物本身有效量的分数,来确定其生理功能衍生物
的盐或溶剂化物的有效量。
量可以包含例如0.5mg至lg、优选Img至700mg、特别优选5mg至100mg的本发明化合物;或者
药物制剂可以以剂量单位的形式给药,所述剂量单位包含每单位剂量预定量的活性成分。
优选的剂量单位剂型是包含每日剂量或者部分剂量(如上所述),或者其相应分数的活性成
分的剂型。此外,此类型的药物制剂可以利用药学领域所一般所知的方法制备。
(例如水或其他溶剂),增溶剂和乳化剂(例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙基烯二醇、1,3-丁基烯二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇、脱水山梨醇的脂肪酸酯、以及它们的混合物。除了惰性稀释剂,口服组合物还可以包括助剂如润湿剂、乳化剂和悬浮
剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。
剂或溶剂(例如在1,3-丁二醇中的溶液)配制成无菌注射溶液、悬浮液或乳液。可采用的可
接受的载体和溶剂中有水、林格氏溶液、U.S.P和等渗氯化钠溶液。此外,通常使用无菌的不
挥发性作为油溶剂或悬浮介质。为此,可以使用任何温和的固定油,包括合成的单甘油酯或
二甘油酯。此外,制备注射剂可使用脂肪酸例如油酸。
它的溶解速率,而溶解速率又取决于晶体大小和结晶形式而变化的。或者,通过将化合物溶
解或悬浮在油类载体中,延迟肠胃外给药的化合物的吸收。在可生物降解的聚合物(聚交
酯-聚乙醇酸交酯)中形成化合物的微胶囊基质,制备注射剂的储库形式。根据化合物与聚
合物的比例和所用特定聚合物的性质,可以控制化合物的释放速率。其它可生物降解的聚
合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。将化合物包埋在与机体组织兼容的脂质体或微乳
液中,也可制备贮库式可注射制剂。
形剂在室温下为固体,但在体温下为液体,因此将在直肠或阴道腔中熔融并释放出活性化
合物。
括柠檬酸钠或磷酸二钙和/或a)填料或补充剂,例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖和硅
酸,b)粘合剂,例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯树胶,c)致湿剂,例如甘油,d)崩解剂,例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、特定的硅酸盐和碳酸钠,e)溶液阻滞剂,例如石蜡,f)吸收促进剂,例如季铵化合物,g)湿润剂,例如十六烷
醇和甘油单硬脂酸酯,h)吸收剂,例如高岭土和膨润土,以及i)润滑剂,例如滑石、硬脂酸
钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基磺酸钠及其混合物。在胶囊、片剂或丸剂的情况下,
剂型中还可含有缓冲剂。
剂的固体剂型可以采用包衣和外壳制备,例如肠溶衣和药物配制领域公知的其它包衣。它
们任选地含有不透明剂,并且成为组合物,任选地以滞后的方式,仅仅(或优选)在肠道的特
定部位释放活性成分。可使用的包埋组合物的例子包括聚合物和蜡。相似类型的固体组合
物还可以作为填料用于软或硬填充的明胶胶囊,所述胶囊使用例如乳糖或奶糖,以及大分
子量的聚乙二醇等作为赋形剂。
衣、控释包衣和药物配制领域公知的其它包衣。在所述固体剂型中,活性化合物与至少一种
惰性稀释剂混合,所述稀释剂例如是蔗糖、乳糖或淀粉。正常实践中,这样的剂型也包括除
惰性稀释剂之外的压片润滑剂和其它压片助剂,例如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂
或丸剂的情况下,剂型中还可含有缓冲剂。它们任选地含有不透明剂,并且成为组合物,任
选地以滞后的方式,仅仅(或优选)在肠道的特定部位释放活性成分。可使用的包埋组合物
的例子包括聚合物和蜡。
需要的防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。眼用的制剂、滴耳剂和滴眼剂也在本发明考虑的范围
内。另外,本发明涵盖使用经皮贴片,其额外优点是能够可控地向机体递送化合物。在适当
的介质中溶解或分散化合物,可制成这种剂型。也可使用吸收增强剂,用于增加化合物通过
皮肤的通量。提供速率控制膜或将化合物分散在聚合物基质或凝胶中,可以控制所述速率。
合物接触的步骤。
IRAK的相互作用所影响的许多因子。本发明的化合物也可用在研发与IRAK相互作用的其他
化合物,这是因为本发明的化合物提供了进行这种研发的重要的结构-活性关系(SAR)信
息。本发明的化合物与IRAK结合,其用作试剂可检测活细胞上、固定细胞上、生物流体内、组
织匀浆内、纯的天然材料内的IRAK,等等。例如,通过标记所述化合物,人们就能够鉴定到表
达IRAK的细胞。另外,由于本发明的化合物具有能够与IRAK结合的能力,它们可用在原位染
色、FACS(荧光活化细胞分拣)、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、ELISA(酶
联免疫吸附试验)、酶纯化中,或者用于纯化在透化细胞内表达IRAK的细胞。本发明的化合
物也可用作各种医学研究和诊断用途的商业研究试剂。这样的用途包括但不限于:在各种
功能性试验中用作定量候选IRAK抑制剂的活性的校准标准;在随机化合物筛选中用作阻断
剂,即在寻找新的IRAK配体家族时,可使用化合物来阻断本发明要求保护的IRAK化合物的
恢复;与IRAK酶在共结晶中使用,即本发明的化合物允许化合物与IRAK结合形成晶体,从而
通过X射线晶体照相术来确定酶/化合物的结构;用于其他研究和诊断应用,其中IRAK较佳
地被启动,或这样的启动相对于已知量的IRAK抑制剂能方便地进行校准;用在分析试验中
作为探针来确定细胞内IRAK的表达;以及用于研发分析试验中检测IRAK结合配体所在的位
点的化合物。
新方法,可应用在各种不同的治疗中,能直接和实时改善人或动物的健康状况。本发明的口
服生物利用度和新的活性化学物质更加方便了病人和医生的顺从性。
成能重复再现作用的基础,其中包括没有交叉反应,并且可靠安全地与靶结构相互作用。
或其提取物。
具体实施方式
本领域普通技术人员所公知的其他方法的也适用于合成本文描述的所有化合物及每个化
合物的子类和种类。
多重性,表示如下:s(单峰),d(双峰),t(三重峰),q(四重峰),m(多重峰),br(宽)。
0.1%TFA;溶剂B:ACN;流量:2毫升/分钟;梯度:0分:5%B,8分钟:100%B,8.1分钟:100%B,
8.5分:5%B,10分钟,5%B或LC/MS水s ZMD(ESI)。
ACN+0.1%TFA)。流量:2毫升/分钟。梯度方法是:0分:5%B,8分钟:100%B,8.1分钟:100%B,8.5分:5%B,10分钟,5%B,除非另有指明。
DMA(二甲基乙酰胺)、DMSO(二甲基亚砜)、DMF(N,N-二甲基甲酰胺)、Dppf(1,1'-双(二苯基
膦)二茂铁)、乙酸乙酯(乙酸乙酯)、EtOH(乙醇)、eq(当量)、g(克)、cHex(环己烷)、HATU(六
氟磷酸N-[(二甲基氨基)(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-N-甲基甲
铵)、HPLC(高效液相色谱法)、h(小时)、LDA(二异丙基胺锂)、LiHMDS(双(三甲基硅烷基)氨
基锂)、MHz(兆赫)、甲醇(甲醇)、min(分钟)、mL(毫升)、mmol(毫摩尔)、mM(毫摩尔/升)、mp
(熔点)、MS(质谱法)、MW(微波)、NMR(核磁共振)、O/N(过夜)、PBS(磷酸盐缓冲生理盐水)、RT(室温)、TEA(三乙胺)、TFA(三氟乙酸)、THF(四氢呋喃)、TLC(薄层层析法)。
通式(I)及相关式的任何单个化合物的合成路径将取决于各分子的具体取代基,此类因子
正如本领域普通技术人员所理解的。可采用下文实施例中所描述的以下一般方法和步骤来
制备通式(I)及相关式的化合物。下面合成路线中所描述的反应条件(例如温度、溶剂、或共
试剂)只是作为例子给出而并不是限制性的。应当理解的是,在给出典型的或优选的实验条
件(即反应温度、时间、试剂的摩尔数、溶剂等)的情况下,除非另有说明也可以采用其他实
验条件。最佳反应条件可视所使用的具体反应剂或溶剂而变化,但这种条件可以由本领域
技术人员利用常规的优化步骤来确定。对于所有的保护和脱保护方法,参见
PhilipJ.Kocienski的“保护基(Protecting Groups),Georg Thieme Verlag Stuttgart,
纽约(1994年)、以及Theodora W.Greene和Peter G.M.Wuts in“有机合成中的保护基
(Protective Groups in Organic Synthesis),Wiley Interscience,第三版(1999年)。
乙酸乙酯稀释,水洗涤。有机层用乙酸乙酯反萃取,有机层合并,经MgSO4干燥,过滤,浓缩,获得3-(5-溴吡啶-2-基)苯胺(438mg,100%)。将3-(5-溴吡啶-2-基)苯胺(435mg;
1.75mmol;1.00eq.)、4-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼戊烷-2-基)-吡唑-1-基]-
哌啶-1-羧酸叔丁酯(659mg;1.75mmol;1.00eq.)、碳酸钾(965mg;6.98mmol;4.00eq.)和Pd
(PPh3)4(101mg;0.09mmol;0.05eq.)在密封小瓶中悬于二噁烷(6.5mL)和水(3.4mL)中。反应
混合物在120℃微波加热30分钟,然后用乙酸乙酯稀释,水洗涤。有机层用乙酸乙酯反萃取。
有机层合并,经MgSO4干燥,过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:DCM,梯度从
50%至100%),获得标题化合物,为米色固体(390mg;37%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):
8.87(dd,J=2.0Hz,0.6Hz,1H),8.42(s,1H),8.02-7.98(m,2H),7.79(dd,J=8.4Hz,0.6Hz,
1H),7.34(t,J=2.0Hz,1H),7.19(dt,J=7.8Hz,1.5Hz,1H),7.11(t,J=7.8Hz,1H),6.62-
6.58(m,1H),5.18(s,2H),4.43-4.34(m,1H),4.07-3.99(m,2H),2.93(m,2H),2.07-2.03(m,
2H),1.88-1.74(m,2H),1.43(s,9H)。
(212mg;1.12mmol;1.20eq.)和二碘甲烷(377μl;4.65mmol;5.00eq.)在干THF(15.6mL)中的
溶液中,反应混合物回流1小时。反应混合物再经由硅藻土垫过滤,滤液浓缩至干。通过硅胶
快速色谱法纯化(乙酸乙酯:庚烷,梯度:由20%至100%乙酸乙酯),获得标题化合物
(215mg;43.6%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):8.94(dd,J=2.0Hz,0.7Hz,1H),8.47-8.45(m,
2H),8.13-7.95(m,4H),7.79-7.76(m,2H),7.29(t,J=7.8Hz,1H),4.45-4.35(m,1H),4.08-
4.00(m,2H),2.94(m,2H),2.04-2.03(m,2H),1.88-1.74(m,2H),1.43(s,9H)。LC/MS:531.5(M+1)。
5.50mmol;1.10eq.)、Pd(PPh3)4(289mg;0.25mmol;0.05eq.)和碳酸钾(2.07g;15.00mmol;
3.00eq.)在二噁烷(38mL)中的混合物在100℃加热过夜。反应混合物用乙酸乙酯稀释,水洗
涤。有机层用乙酸乙酯反萃取,有机层合并,经MgSO4干燥,过滤,浓缩。将获得的固体悬于乙酸乙酯中过滤,真空干燥,获得标题化合物,为米色固体(1g,70%)。HPLC:(254nm)95%;Rt(min)2.60;LC/MS:344.3(M+1)。
(390mg;0.86mmol)。HPLC:(254nm)68%;Rt(min)4.44.LC/MS:455.4(M+1)。
(87mg;0.36mmol;1.10eq.)为起始材料,依据以下实施例1步骤1的方法制备标题化合物,为
褐色胶状物(180mg,定量)。LC/MS:440.4(M+1)。
加入3-氨基甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g;4.67mmol;1.00eq.)。在0℃下搅拌过夜,用甲
醇稀释,经硅藻土过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:己烷,梯度:由0至
100%,然后换成甲醇:DCM,梯度:由0至20%),在第二次洗脱馏分中获得标题化合物,为白
色粉末(587mg,31%)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.22(s,1H),4.84(brs,1H),4.37-4.12(m,
2H),3.25-3.09(m,2H),3.03(m,1H),2.99-2.86(m,1H),1.90(m,2H),1.81(m,1H),1.67(m,
1H),1.46(s,9H),1.32(m,1H)。LC/MS:405.0(M+1)。
0.93mmol;1.50eq.)、K3PO4(264mg;1.24mmol;2.00eq.)和Pd(dppf)Cl2(23mg;0.03mmol;
0.05eq.)在水(0.2mL)和2-甲基四氢呋喃(5.6mL)中的混合物脱氩气,并在密封试管中加热
至100℃,保持2小时。然后经硅藻土垫过滤,减压浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙
酯:己烷,梯度:由0至100%),获得标题化合物,为白色固体(97mg,38%)。LC/MS:407.7(M+
1)。
黄色固体1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.24(s,1H),4.81(s,1H),4.27(t,J=13.7Hz,2H),3.16(m,2H),3.10–3.02(m,1H),3.02–2.85(m,1H),1.98–1.86(m,2H),1.81(m,1H),1.74–1.61(m,1H),1.48(s,9H),1.42–1.23(m,1H)。LC/MS:405.1(M+1)。
(462mg;2.22mmol;1.20eq.)、磷酸钾(785mg;3.70mmol;2.00eq.)和Pd(dppf)Cl2.DCM
(135mg;0.18mmol;0.10eq.)在水(0.60mL)和2-甲基四氢呋喃(5.6mL)中的混合物脱氩气,
并在密封试管中加热至100℃,保持2小时。然后经硅藻土垫过滤,减压浓缩。通过硅胶快速
色谱法纯化(乙酸乙酯:己烷,梯度:由0至100%),获得标题化合物,为黄色泡沫(640mg,
85%)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.94(s,1H),7.55(s,1H),7.49(s,1H),4.85(t,J=6.4Hz,
1H),3.96(s,3H),3.87–3.73(m,1H),3.73–3.58(m,1H),3.04(dt,J=12.8,5.8Hz,1H),2.87(m,3H),1.86–1.68(m,2H),1.68–1.54(m,1H),1.43(brs,11H);LC/MS:407.2(M+1)。
色固体(1.6g,83%)。LC/MS:405(M+1)。
(参照WO 2014008992描述的方法制备;231mg;1.11mmol;1.50eq)为起始材料,依据中间体9
的方法制备标题化合物(125mg,42%)。LS/MS:407.2(M+1)。
物加入(四氢-吡喃-2-基)-甲醇(1.7mL;14.6mmol;1.00eq.)。在0℃下搅拌过夜,用甲醇稀
释,经硅藻土过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化((乙酸乙酯:己烷,0至50%),获得标题
化合物,为白色固体(1.61g,34%)。LC/MS:307.0(M+H)。
1.50eq.)、K3PO4(552mg;2.60mmol;2.00eq.)和Pd(dppf)Cl2*DCM(95mg;0.13mmol;0.10eq.)在水(0.30mL)和2-甲基四氢呋喃(3.00mL;29.95mmol;23.03eq.)中的溶液鼓泡15分钟,脱
氩气,然后加热至100℃,保持30min。冷却至室温,经硅藻土垫过滤。硅藻土垫用乙酸乙酯洗
涤,减压浓缩滤液。通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:己烷,梯度:由0至100%,再换成甲醇/DCM,梯度:由10至20%),获得标题化合物,为浅黄色固体(272mg,64.4%)。LC/MS:309.9(M+1)。
2,4-二氯-嘧啶(8.92g;39.2mmol;2.00eq.)在THF(50mL)中的悬液中。减压移除溶剂,粗残
留物经硅胶柱快速色谱法(乙酸乙酯:己烷,梯度:由0至100%,再换成甲醇:DCM梯度:由10
至20%)纯化,获得标题化合物,为白色固体(375mg,6.5%)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.47(s,1H),4.63(d,J=6.1Hz,2H),4.55(s,2H),4.47(d,J=6.1Hz,2H),1.46(s,3H)。
1.92mmol;1.50eq.)为起始材料,依据中间体13的方法制备标题化合物,为黄褐色固体
(165.1mg,44%)。LC/MS:407.72(M+1)。
(308mg;1.48mmol;1.50eq.)为起始材料,依据中间体9的方法制备标题化合物,为褐色固体
(680mg,定量)。LC/MS:407.2(M+1)。
油(500mg,31.5%)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.42(d,J=1.1Hz,1H),4.84(ddd,J=7.7,
6.3,1.1Hz,2H),4.67(dd,J=6.7,1.1Hz,2H),4.62–4.42(m,2H),3.48(qt,J=5.8Hz,1H)。
1.50eq.)为起始材料,依据中间体9的方法制备标题化合物,为白色固体(109mg,22%)。LC/
MS:281.1(M+1)。
(615mg;2.96mmol;1.50eq.)为起始材料,依据中间体9的方法制备标题化合物,为褐色固体
(541mg,67%)。LC/MS:407.2(M+1)。
1.64mmol;1.50eq.)为起始材料,依据中间体7的方法制备标题化合物,为褐色油(206mg,
49%)。LC/MS:308.2(M+1)。
合物在室温和氮气气氛下搅拌90分钟。减压除去溶剂,粗产物经硅胶快速色谱法(乙酸乙
酯:己烷,梯度:由60%to 100%)纯化,获得标题化合物,为白色固体(318mg,8%)。LC/MS:
369.0(M+1)。
8.78mmol;1.50eq.)为起始材料,依据中间体7的方法制备标题化合物,为米色固体(870mg,
32%)。LC/MS:371.1(M+1)。
溶液室温搅拌3小时。反应混合物用水洗涤,有机层经硫酸钠干燥,过滤,浓缩。通过硅胶快
速色谱法纯化获得标题化合物,为无色液体(7.6g;30.28mmol;88.1%)。1H NMR(400MHz,
DMSO)8.61(s,1H),8.24(d,J=7.6Hz,1H),4.32-4.27(m,2H),4.25-4.22(m,1H),1.30(t,J=7.0Hz,3H),1.21(d,J=6.5Hz,6H);HPLC:(254nm)96%;Rt 4.69min;LC/MS:244(M+1)。
5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-吡唑(11g;30.80mmol;1.10eq.)在二噁
烷-1,4(140mL)和水(35mL)中的溶液中。反应混合物在100℃搅拌过夜。再经硅藻土垫过滤,
减压浓缩。残留物用水(50mL)稀释,乙酸乙酯(2 x 50mL)萃取。有机层合并,无水Na2SO4干
燥,过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:PE,50:50),获得标题化合物,为白色固体(3.5g,29%)。HPLC:(254nm)90%;Rt 3.88min;LC/MS:366.3(M+1)。
(6.00mL)中的溶液中。反应混合物在90℃回流过夜。然后冷却至室温,减压浓缩(一半体
积)。滤出沉淀物,用冷冻乙醇洗涤,获得标题化合物,为白色固体(180mg,73%)。1H NMR
(400MHz,DMSO):9.94(s,1H),8.66(s,1H),8.60(d,J=7.4Hz,1H),8.48(s,1H),8.21(s,
1H),8.17(d,J=7.9Hz,1H),7.88(s,1H),7.70(d,J=7.8Hz,1H),7.48(t,J=7.8Hz,1H),
4.52(brs,2H),4.47-4.39(m,1H),3.88(s,3H),1.28(d,J=6.52Hz,6H)。HPLC:(254nm)
94%;Rt 2.9min;LC/MS:352.3(M+1)。
TEA(1.05mL;8.05mmol;3.00eq.)在DCM(28.50mL)中的溶液中。反应混合物升至室温,搅拌
30分钟。加入饱和NaHCO3溶液淬灭反应物,再用DCM萃取。有机层合并,经Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(DCM:甲醇),获得标题化合物,为黄色固体(1g,70%)。
HPLC:(254nm)92%;Rt 3.36min;LC/MS:452.2(M+1)。
硫杂二磷杂环丁烷(dithiadiphosphetane)2,4-二硫化物(1.49g;3.57mmol;2.20eq.)在
THF(39mL)中的溶液回流加热3小时。反应混合物用乙酸乙酯稀释,10%NaHCO3溶液洗二次。
有机层经Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(DCM:甲醇),获得标题化合物,为黄色固体(1g,82%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.99(s,1H),8.85(d,J=7.24Hz,1H),
8.55(s,1H),8.31-8.21(m,2H),7.90(s,1H),7.75(d,J=7.40Hz,1H),7.52(t,J=8.08Hz,
1H),5.75(s,2H),4.65-4.60(m,1H),4.49-4.44(m,2H),3.89(s,3H),3.80-3.60(m,1H),
1.39-1.35(m,9H)。HPLC:(254nm)99%;Rt 4.33min;LC/MS:450.2(M+H)。
物,为黄色胶状物(8.50g;17.14mmol;79.7%)。HPLC:(254nm)72%;Rt 5.27min;LC/MS:385(M+1)。
基]-1H-吡唑(6.29g;17.61mmol;1.10eq.)为起始材料,依据中间体24的方法制备标题化合
物,为胶状物(5.0g,59%)。HPLC:(254nm)93%;Rt 4.51min;LC/MS:507.2(M+1)。
题化合物,为乳白色固体(2g,69%)。HPLC:(254nm)89%;Rt 3.53min;LC/MS:493.2(M+H)。
(0.12mL;1.03mmol;1.05eq.)为起始材料,依据中间体26步骤1的方法制备标题化合物,为
黄色固体(420mg,66%)。HLPC:(254nm)89%;Rt 3.94min;LC/MS:593.3(M+H)。
26步骤2的方法制备标题化合物,为黄色固体(150mg,52%)。HPLC:(254nm)88%;Rt
5.05min;LC/MS:591.2(M+H)。
备标题化合物,为无色胶状物(2.0g,54%)。HPLC:(254nm)98%;Rt 6.35min;LC/MS:369.0(M+H)。
2-基)-苯基]-1H-吡唑(2.28g;6.40mmol;1.10eq.)为起始材料,依据中间体24的方法制备
1
标题化合物,为白色固体(2.0g,54%)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.86(s,1H),8.51-8.47(m,1H),8.21-8.19(m,2H),7.89(d,J=0.44Hz,1H),7.75-7.72(m,1H),7.49(t,J=7.76Hz,
1H),4.36-4.30(m,2H),3.88(s,6H),3.74-3.80(m,2H),3.20-3.00(m,1H),1.35-1.31(m,
12H)。HPLC(XBridge C8(50x4.6mm,3.5μm):(254nm)96%;Rt 4.0min;LC/MS:493.2(M+H)。
LC/MS:479.2(M+H)。
0.82mmol;1.05eq.)为起始材料,依据中间体26步骤1的方法制备标题化合物,为黄色固体
(300mg,66%)HPLC:(254nm)94%;Rt 3.55min;LC/MS:565.3(M+H)。
始材料,依据中间体26步骤2的方法制备标题化合物,为黄色固体(150mg;52%)。HPLC:
(254nm)92%;Rt 4.44min;LC/MS:563.3(M+H)。
二乙醚中研磨,获得所希望的产物,为白色固体(6g,79%)。LC/MS:229.00(M+1)。
(s,1H),8.56(s,1H),8.40(s,1H),6.70(s,1H),3.82(s,3H),3.48-0.00(m,1H),1.16-1.09(m,6H)。
67%)。LC/MS:313.0(M+1)。
小时。减压除去溶剂,粗产物经硅胶快速色谱法(石油醇,乙酸乙酯)纯化,获得标题化合物,
为浅黄色固体(1g,41%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76(d,1H),8.55(s,1H),6.95(s,
1H),5.08(d,1H),4.39(d,1H),4.19-3.93(m,3H),3.68-3.53(m,2H),1.99(m,2H),1.27(d,
6H)。
(166mg;0.79mmol;1.05eq.)、四(三苯基膦)钯(4.35mg;0.002mmol;0.01eq.)、碳酸钾
(125mg;0.90mmol;1.20eq.)在二噁烷(6mL)和水(0.6mL)中的混合物在密封小瓶中在90℃
搅拌过夜。反应混合物再在减压下浓缩,经KPNH快速色谱法纯化(乙酸乙酯:甲醇梯度:由0:
100至30:70),获得标题化合物,为白色固体(183mg,87%)。LC/MS:267.1(M+H)。
(166mg;0.80mmol;1.05eq.)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(2.81mg;0.002mmol;0.01eq.)和
碳酸钾(126mg;0.91mmol;1.20eq.)在二噁烷(6mL)和水(0.60mL)中的混合物在密封小瓶中
在90℃搅拌过夜。反应混合物再在减压下浓缩,经硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:己烷,梯
度:由10至50%),获得标题化合物,为白色固体(63mg,30%)。LC/MS:264.6(M+H)。
3.00eq.)在NMP(5.0mL)中的混合物在密封小瓶中在50℃搅拌过夜。反应混合物再在减压下
浓缩,经硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:己烷,梯度:由0至40%),获得标题化合物,为白色固体(1.2g,100%)。LC/MS:403(M+H)403。
(155mg;0.74mmol;1.50eq.)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(1.83mg;0.002mmol;0.01eq.)和
碳酸钾(82mg;0.59mmol;1.20eq.)在二噁烷(5mL)和水(0.5mL)中的混合物在密封小瓶中在
100℃搅拌过夜。反应混合物再在减压下浓缩,经硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:己烷,梯
度:由20至100%),获得标题化合物,为黄色固体(201mg,95%)。LC/MS:405.2(M+H)。
气气氛下搅拌2小时。反应混合物用水(150mL)和乙酸乙酯(75mL)稀释。分离两层,水层用乙
酸乙酯(3x 50mL)萃取。有机层合并,用水和盐水洗涤,Na2SO4干燥,过滤,浓缩,获得无色油。
通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:己烷,梯度:由10至30%),获得标题化合物,为白色固
体(4.0g,75%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.24(s,1H),7.75(t,1H),3.92(d,2H),3.27(t,
2H),2.79–2.59(bs,2H),1.81(m,1H),1.60(dd,2H),1.40(s,9H),1.02(qd,2H)。LC/MS:349((M-tBu)+H)。
1.00eq.)和甲胺(850mg,26.82mmol,10.1eq.,)在甲醇(10mL)中的溶液在密封试管中在45
℃加热16小时。得到的混合物在真空下浓缩,经硅胶快速色谱法(甲醇/DCM,1:10)纯化,获
得标题化合物,为浅黄色油(800mg,97%)。
(甲醇/DCM,1:15)纯化,获得标题化合物,为浅黄色固体(1g,92%)。
在甲醇(4mL)中的溶液中。混合物在氢气球内在室温下进行加氢反应16小时。滤出固体,得
到的混合物在真空下浓缩,获得标题化合物,为浅黄色固体(630mg,98%)。
4.64mmol,2.00eq.)在THF(10mL)中的溶液在室温加热2小时。得到的混合物在真空下浓缩,
经硅胶快速色谱法(乙酸乙酯/石油醚,1:2)纯化,获得标题化合物,为黄色固体(630mg,
56%)。LC/MS(柱:Shim-pack XR-ODS,3.0*50mm,2.2um;流动相A:水/0.05%TFA,流动相B:
ACN/0..05%TFA;流速:1.0mL/min;2.2分钟梯度:5%B至100%B,保持1.0min;254nm):(纯度)90%;[M+H]+计算结果:435.1;实验结果:435.1。
基)-1H-吡唑(415mg,1.95mmol,1.50eq.,98%)、Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(108mg,0.13mmol,
0.10eq.,98%)和K3PO4(566mg,2.61mmol,2.01eq.)在二噁烷(10mL)和水(2mL)中的混合物
脱氮气,并在密封试管内在100℃加热2小时。得到的混合物在真空下浓缩,经硅胶快速色谱
法(乙酸乙酯/石油醚,1:12)纯化,获得标题化合物,为黄色固体(420mg,66%)。
(220mg,57%)。LC/MS(柱:Shim-pack XR-ODS,3.0*50mm,2.2um;流动相A:水/0.05%TFA,流动相B:ACN/0..05%TFA;流速:1.0mL/min;2.2分钟梯度:5%B至100%B,保持1.0min;
254nm):(纯度)90%;[M+H]+计算结果:428.2;实验结果:428.2。
(3x15mL)萃取。有机层合并,真空浓缩,经硅胶快速色谱法(乙酸乙酯/石油醚,1:5)纯化,获得标题化合物,为褐色固体。
2.55mmol,1.00eq.)在二氯甲烷(3mL)中的溶液,得到的混合物在0℃搅拌2小时。用饱和碳
酸氢钠(水溶液)调溶液的pH值至7。用20mL水稀释后,得到的混合物用DCM(3x15mL)萃取。有
机层合并,用盐水(20mL)洗涤,无水Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯/石油醚,1:15至1:4),获得标题化合物,为浅黄色固体(700mg,93%产率)。
(300mg,86%)。
LC/MS(柱:Shim-pack XR-ODS,3.0*50mm,2.2um;流动相A:水/0.05%TFA,流动相B:ACN/
0..05%TFA;流速:1.0mL/min;2.2分钟梯度:5%B至100%B,保持1.0min;254nm):(纯度)
90%;[M+H]+计算结果:324.0;实验结果:324.0。
为黄色固体(360mg,82%)。LC/MS(柱:Shim-pack XR-ODS,3.0*50mm,2.2um;流动相A:水/
0.05%TFA,流动相B:ACN/0..05%TFA;流速:1.0mL/min;2.2分钟梯度:5%B至100%B,保持
1.0min;254nm):[M+H]+计算结果:326.0;实验结果:326.0。
小时,然后加入(1R,6R)-2,2-二氟-7-氧杂双环[4.1.0]庚烷(外消旋体,相对立体化学,
2.260g,14.32mmol,1.00eq.)在DCM(50mL)中的溶液。得到的溶液在室温搅拌2天。加入
NH4Cl溶液淬灭反应物。水层再用二氯甲烷萃取,有机层合并,经盐水洗涤,无水Na2SO4干燥,过滤,真空浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(MTBE/石油醚,1:10),获得标题化合物(第一洗
脱异构体),为白色固体(1.36g,33%)。
60%)。将反应混合物置于氢气(1atm.)气氛下,室温搅拌过夜。混合物经硅藻土垫过滤,浓
缩,获得标题化合物,为白色固体(765mg,95%)。1H NMR(300MHz,甲醇-d4,ppm)3.40-3.30
(m,1H),2.73(m,1H),2.05(m,1H),1.90-1.39(m,4H),1.34-1.17(m,1H)。
(208mg,58%)。
16小时。反应混合物减压浓缩,残留物重溶解在DCM中。有机层用饱和NaHCO3溶液和盐水洗
涤,无水硫酸镁干燥,过滤,浓缩,获得标题化合物,可直接用在下一步骤中。
0.35mmol,1.00eq.)在乙醇(10mL)中的溶液中。得到的溶液在40℃搅拌16小时。加入盐酸溶
液(1M)淬灭反应物,混合物最后在减压下浓缩,获得标题化合物,为白色固体(140mg)。中间
体50:N-[(3aS,4S,8aR)-2,2-二甲基-八氢环庚[d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基]-5-溴-2-
氯嘧啶-4-胺(外消旋体–相对立体化学)
为乳白色固体(210mg,44%)。1H NMR(300MHz,氯仿-d)8.11(s,1H),6.01(d,J=8.2Hz,1H),
4.49(t,J=7.3Hz,1H),4.34(d,J=8.3Hz,1H),4.23(t,J=9.1Hz,1H),2.22-1.90(m,2H),
1.73(dd,J=11.4,5.8Hz,3H),1.54(s,6H),1.37(s,3H)。
方法制备标题化合物,为黄色油(185mg,77%)。LC/MS(柱:Shim-pack XR-ODS,3.0*50mm,
2.2um;流动相A:水/0.05%TFA,流动相B:ACN/0..05%TFA;流速:1.0mL/min;2.2分钟梯度:
5%B至100%B,保持1.0min;254nm):(纯度)87.3%;[M+H]+计算结果:378.2;实验结果:
378.2。
2.01eq.)和乙酸(5mL)的混合物在100℃搅拌30分钟。将反应混合物冷却至室温,用60mL水
稀释。加入碳酸氢钠溶液调pH至7。得到的溶液用DCM(3x)稀释。有机层合并,用盐水洗涤,硫
酸钠干燥,过滤,真空浓缩,获得标题化合物,为乳白色固体(300mg,69%)。LC/MS(柱:Shim-pack XR-ODS,3.0*50mm,2.2um;流动相A:水/0.05%TFA,流动相B:ACN/0..05%TFA;流速:
1.0mL/min;2.2分钟梯度:5%B至100%B,保持1.0min;254nm):[M+Na]+23计算结果:330.0;
实验结果:330.0。
1.51eq.)在DMF(15mL)中的溶液在70℃和氮气气氛下搅拌3小时。加入饱和NaHCO3溶液淬灭
反应物,再用DCM(3x)萃取。有机层合并,用盐水洗涤,硫酸镁干燥,过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯/石油醚,1:6),获得标题化合物,为黄色固体(270mg,94%)。LC/
MS:[M+H]+计算结果:352.1;实验结果:352.1。
色油(150mg,97%)。LC/MS:[M+H]+计算结果:218.2;实验结果:218.2。
(560mg,80%)。MS:m/z=408.1[M+H]+。
备标题化合物,为黄色固体(330mg,59%)。
302.0。
MS:[M+H]+计算结果:304.1;实验结果:304.0。
(84mg;0.41mmol;1.00eq.)、Pd(PPh3)4(23mg;0.02mmol;0.05eq.)和碳酸钾(168mg;
1.22mmol;3.0eq.)在二噁烷(3.2mL)和水(1.61mL)中的混合物装在密封试管内在120℃微
波加热30分钟。反应混合物用乙酸乙酯稀释,水洗涤。有机层用乙酸乙酯反萃取,有机层合
并,用MgSO4干燥,过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:庚烷,梯度:由50至
100%),获得标题化合物,为黄色胶状物(110mg;56%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)8.94(dd,J=2.0Hz,1.0Hz,1H),8.46(s,1H),8.26-8.05(m,2H),8.07-8.05(m,3H),7.96(d,J=
1.0Hz,1H),7.93(ddd,J=7.9Hz,2.0Hz,1.0Hz,1H),7.61(ddd,J=7.9Hz,2.0Hz,1.0Hz,
1H),7.46(t,J=7.9Hz,1H),4.46-4.35(m,1H),4.09(m,2H),3.89(s,3H),2.94(m,2H),
2.09-2.04(m,2H),1.89-1.75(m,2H),1.43(s,9H)。LC/MS:485.6(M+1)。
15eq.)在DCM(1.1mL)和甲醇(1.10mL)中的溶液在室温下搅拌1小时。滤出反应混合物,用
DCM洗涤得到的固体。通过自动式制备型LC/MS纯化,获得标题化合物,为黄色粉末(65mg;
67%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)9.35-9.26(m,1H),9.13-9.06(m,1H),9.05(d,J=2.0Hz,
1H),8.63(s,1H),8.45(d,J=9.1Hz,1H),8.36(t,J=2.0Hz,1H),8.32-8.29(m,2H),8.26(s,1H),8.03(d,J=1.0Hz,1H),7.96-7.92(m,1H),7.73(dt,J=7.8Hz,1.0Hz,1H),7.55(t,J=7.8Hz,1H),4.61-4.51(m,1H),3.90(s,3H),3.42-3.38(m,2H),3.16-3.06(m,2H),2.29-
2.14(m,4H);HPLC:(254nm)100%;Rt(min)2.02。LC/MS:385.5(M+1)。
0.20eq.)、氟化铯(134.7mg;0.89mmol;3.00eq.)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二
氧杂硼戊烷-2-基)-1H-吡唑(92mg;0.44mmol;1.50eq.)在1,2-二甲氧基-乙烷(2.2mL)中的
混合物在密封小瓶中在100℃加热过夜。混合物经硅藻土垫过滤。水相用DCM萃取,有机层合
并,用水洗涤,MgSO4干燥,过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:庚烷,80:20),获得标题化合物(104mg,72%)。LC/MS:486.3(M+1)。
标题化合物,为米色固体(10mg,13%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)8.97(d,J=1.7Hz,1H),
8.52(d,J=8.0Hz,1H),8.46-8.43(m,2H),8.32(bs,1H),8.17-8.10(m,4H),7.89(t,J=
8.0Hz,1H),7.67(dd,J=8.0Hz,1.0Hz,1H),4.41-4.28(m,1H),3.92(s,3H),3.23-3.19(m,
2H),2.86-2.73(m,2H),2.13-1.89(m,4H)。HPLC:(254nm)98%;Rt(min)1.61。LC/MS:386.4(M+1)。
(参照WO 2014008992描述的方法制备;79mg;0.28mmol;1.20eq.)在脱气后的二噁烷
(1.1mL)中的混合物在密封小瓶中在150℃微波加热20分钟。再经硅藻土垫过滤,减压浓缩。
通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:己烷s,梯度:由0至100%,再换成甲醇:DCM,梯度:由0
1
至20%),获得标题化合物,为黄色泡沫(48mg,34%)。H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.53(s,
1H),8.33(s,1H),8.27(d,J=7.8Hz,1H),7.86(s,1H),7.75(s,1H),7.71(s,1H),7.64–7.53(app m,2H),7.47(d,J=7.6Hz,1H),4.56(s,1H),4.00(s,3H),3.97(s,3H),3.86(d,J=
12.3Hz,1H),3.04(t,J=6.5Hz,2H),2.94–2.80(t,1H),2.72(t,J=11.5Hz,1H),1.95–1.76(app m,3H),1.71(d,J=12.9Hz,1H),1.64–1.50(m,1H),1.44(s,9H),1.23(td,J=13.9,
13.4,8.0Hz,1H);HPLC:(254nm)95.8%;RT(min)3.629;LC/MS:429.4(M+1)。
中的溶液;0.2mmol;3.3eq.)在甲醇(3.00mL)中的溶液在室温搅拌30分钟。反应混合物与5x
10mL乙醚共蒸发,减压干燥,获得标题化合物,为白色固体(26mg,81%)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.61(s,1H),8.56(s,1H),8.50(s,1H),8.23(s,1H),8.21(s,1H),8.09(s,1H),8.01(d,J=7.7Hz,1H),7.85(s,1H),7.74(t,J=7.7Hz,1H),4.74(m,1H),4.28(brs,1H),4.15(s,3H),4.05(s,3H),3.21(d,J=10.5Hz,2H),3.07–2.83(m,2H),2.19(brs,1H),2.05(d,J=12.6Hz,1H),1.84(d,J=13.2Hz,1H),1.68(m,1H),1.50(m,1H)。HPLC:(254nm)100%;RT(min)2.29。LC/MS:429.2(M+1)。
(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-吡唑(参照WO 2014008992描述
的方法制备;238mg,0.84mmol,1.2eq.)和碳酸钾(0.2mL of a 2M solution in水)在脱气
后的二噁烷(3.3mL)中的混合物在密封小瓶中在150℃加热80分钟。再经硅藻土垫过滤,减
压浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:己烷,梯度:由0:100%,再换成甲醇:DCM梯
度:由0至20%),接着经制备型HPLC进行第二次纯化,获得标题化合物,为白色固体。1H NMR
(400MHz,氯仿-d)δ8.54(s,1H),8.35(s,1H),8.29(d,J=7.8Hz,1H),7.88(s,1H),7.77(s,
1H),7.72(d,J=3.3Hz,1H),7.62(s,1H),7.57(d,J=2.5Hz,1H),7.49(d,J=7.5Hz,1H),
4.56(brs,1H),4.02(s,3H),3.99(s,3H),3.94(d,J=3.0Hz,2H),3.06(t,J=6.5Hz,2H),
2.94–2.85(t,2H),2.74(t,J=11.7Hz,1H),2.35(t,J=7.3Hz,1H),1.87(d,J=11.5Hz,
2H),1.46(s,9H),1.00(t,J=7.6Hz,1H)。HPLC:(254nm)97.9%;RT(min)3.48;LC/MS:529.3(M+1)。
实施例4的方法制备标题化合物,为黄色粉末(30mg,30%)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.38
(s,1H),8.21(s,1H),8.17(s,1H),8.10(d,J=7.9Hz,1H),8.05(s,1H),8.00(s,1H),7.95(d,J=7.8Hz,1H),7.76(s,1H),7.68(t,J=7.8Hz,1H),4.73(brs,1H),4.25(brs,1H),4.15(s,3H),4.05(s,3H),3.23(m,2H),3.08–2.84(m,2H),2.21(m,1H),2.05(brs,1H),1.84(brs,1H),1.68(brs,1H),1.51(brs,1H),1.32(m,1H)。HPLC:(254nm)94.6%;RT(min)
2.231;LC/MS:429.3(M+1)。HPLC:(254nm)94.6%;RT(min)2.23;LC/MS:429.3(M+1)。
烷-2-基)-苯基]-1H-吡唑(105mg;0.37mmol;1.20eq.)为起始材料,依据实施例3的方法制
备标题化合物,为黄色泡沫(87mg,48%)。LC/MS:529.4(M+1)。
中的溶液;0.16mmol;1.00eq.)在甲醇(3.00mL)中的溶液在室温下搅拌30分钟。反应混合物
与5x 10mL乙醚共蒸发,减压干燥,获得标题化合物,为黄色油(68mg,定量)。1H NMR
(400MHz,甲醇-d4)δ8.48(s,1H),8.40(s,1H),8.26(s,1H),8.17(s,1H),8.13(d,J=7.9Hz,
1H),8.04(s,1H),7.95(d,J=7.8Hz,1H),7.78(s,1H),7.68(d,J=7.8Hz,1H),4.77–4.54(m,1H),4.06(s,3H),4.01(s,3H),3.21(t,J=12.6Hz,2H),2.91(d,J=6.9Hz,2H),2.19–
2.00(m,1H),2.00–1.84(m,2H),1.57–1.37(m,2H);HPLC:(254nm)98.3%;RT(min)2.21;LC/MS:429.3(M+1)。
基]-1H-吡唑(参照WO 2014008992描述的方法制备;231mg;0.81mmol;1.20eq.)为起始材
料,依据实施例3的方法制备标题化合物,为米色粉末(38mg,12%)。1H NMR(400MHz,氯仿-
d)δ9.23(s,1H),8.58(d,J=1.9Hz,1H),8.33(dt,J=7.7,1.4Hz,1H),7.88(s,1H),7.75(s,
1H),7.59(dt,J=7.7,1.5Hz,1H),7.49(t,J=7.8Hz,1H),7.45(s,1H),6.94(d,J=2.2Hz,
1H),4.64(d,J=5.2Hz,2H),4.00(s,3H),3.99(s,3H),3.88(m,1H),3.61–3.47(m,2H),
1.87–1.76(m,2H),1.64–1.52(m,4H);UPLC:(254nm)93%;RT(min)3.9;LC/MS:431.2(M+1)。
2-基)-苯基]-1H-吡唑(参照WO 2014008992描述的方法制备;175mg;0.62mmol;1.20eq.)为
起始材料,依据实施例3的方法制备标题化合物,为白色固体(165mg,44%)。1H NMR
(400MHz,甲醇-d4)δ8.87(s,1H),8.55(d,J=1.9Hz,1H),8.31(s,1H),8.25(d,J=7.8Hz,
1H),8.09(s,1H),8.03(s,1H),7.90(s,1H),7.67(d,J=7.7Hz,1H),7.48(t,J=7.7Hz,1H),
4.83(d,J=6.1Hz,2H),4.70(s,2H),4.59(d,J=6.0Hz,2H),3.96(s,3H),3.95(s,3H),1.51(s,3H);UPLC:(254nm)100%;RT(min)3.27;LC/MS:417.2(M+1)。
烷-2-基)-苯基]-1H-吡唑(219mg;0.77mmol;1.20eq.)为起始材料,依据实施例3的方法制
备标题化合物,为米色固体(19mg,55%)。LC/MS:529.4(M+1)。
施例3的方法制备标题化合物,为白色固体(10mg,80%)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.71
(s,1H),8.47–8.40(m,1H),8.18(s,1H),8.13(d,J=7.7Hz,1H),8.01(s,1H),7.95(d,J=
7.8Hz,1H),7.87–7.81(m,1H),7.69(t,J=7.8Hz,1H),7.08–6.99(m,1H),4.08(s,3H),4.05(s,3H),3.61–3.48(d,2H),2.96(q,J=13.5,12.4Hz,2H),2.42(brs,2H),2.08(dd,J=
25.8,14.3Hz,2H),1.84(t,J=13.1Hz,2H),1.64–1.42(m,2H),1.20(s,1H);HPLC:(254nm)
100%;RT(min)2.462。LC/MS:计算结果:429.2(M+1)。
基]-1H-吡唑(67mg;0.24mmol;1.20eq.)为起始材料,依据实施例3的方法制备标题化合物,
为白色固体(13mg,16%)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.83(s,1H),8.56(d,J=1.8Hz,1H),
8.30(d,J=7.8Hz,1H),8.07(s,1H),7.98(s,1H),7.88(s,1H),7.75(s,1H),7.60(d,J=
7.7Hz,1H),7.50(t,J=7.7Hz,1H),5.06–4.96(m,2H),4.88(d,J=5.6Hz,2H),4.75(t,J=
6.0Hz,2H),3.99(s,6H),3.59(qt,J=5.5Hz,1H);UPLC(H2O TFA 0.1%-ACN TFA 0.1%;梯度8分钟TFA):(254nm)80%;RT(min)2.97;LC/MS:403.2(M+1)。
烷-2-基)-苯基]-1H-吡唑(453mg;1.60mmol;1.20eq.)为起始材料,依据实施例3的方法制
备标题化合物,为米色固体(53mg mg,7%)。LC/MS:529.3(M+1)。
例4的方法制备标题化合物,为米色固体(40mg,94%)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.69(d,J=0.9Hz,1H),8.41(d,J=2.2Hz,1H),8.16(s,1H),8.11(d,J=8.3Hz,1H),8.00(s,1H),
7.95(d,J=7.8Hz,1H),7.85(d,J=2.4Hz,1H),7.68(t,J=7.8Hz,1H),7.04(d,J=2.4Hz,
1H),4.08(s,3H),4.00(d,J=3.2Hz,3H),3.52–3.44(m,2H),3.12–3.00(m,2H),2.35–2.21(m,1H),2.14(d,J=14.4Hz,2H),1.75–1.54(m,2H),1.20(t,J=7.0Hz,2H);UPLC:(254nm)
100%;RT(min)1.9;LC/MS:429.3(M+1)。
基)-苯基]-1H-吡唑(228mg;0.80mmol;1.20eq.)为起始材料,依据实施例3的方法制备标题
化合物,为米色固体(93mg,32%)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.54–8.49(m,1H),8.25(m,
2H),7.88(s,1H),7.75(s,1H),7.68(s,1H),7.63–7.59(m,1H),7.49(t,J=7.7Hz,1H),5.39(t,J=6.1Hz,1H),5.12(brs,2H),4.03(s,3H),3.99(s,3H),3.58(t,J=6.4Hz,2H),3.42(t,J=11.8Hz,2H),2.00(m,1H),1.77–1.65(m,2H),1.46(m,2H);UPLC(H2O TFA 0.1%-ACN TFA 0.1%;梯度8分钟TFA):(254nm)100%;RT(min)2.39;LC/MS:430.2(M+1)。
基)-苯基]-1H-吡唑(780mg;2.82mmol;1.20eq.)为起始材料,依据实施例3的方法制备标题
化合物,为白色固体(600mg,52%)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.51(brs,1H),8.26(d,J=
1.2Hz,1H),8.21(dd,J=7.8,1.5Hz,1H),7.88(s,1H),7.74(s,1H),7.67(s,1H),7.60(dd,J=7.8,1.6Hz,1H),7.56(s,1H),7.49(t,J=7.7Hz,1H),5.09(d,J=7.2Hz,1H),4.36(m,
1H),4.04(s,3H),4.00(s,3H),3.88(d,J=11.9,2H),3.06–2.91(m,2H),2.87(s,3H),2.29(m,2H),1.67(m,2H);UPLC(H2O TFA 0.1%-ACN TFA 0.1%;梯度8分钟TFA):(254nm)
100%;RT(min)2.17;LC/MS:493.2(M+1)。
(0.2mL,1.51mmol;3.00eq.)在DCM(4.5mL)中的溶液中。反应混合物升至室温,搅拌30分钟。
然后加入饱和NaHCO3溶液淬灭反应,混合物用DCM萃取。有机层用Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通
1
过硅胶快速色谱法纯化(DCM:甲醇),获得标题化合物,为黄色胶状物(160mg,74%)。H NMR
(400MHz,DMSO-d6)δ:10.44(s,1H),9.88(s,1H),8.79(s,1H),8.50-8.49(m,2H),8.22(s,
1H),8.19(d,J=7.9Hz,1H),7.89(s,1H),7.72(d,J=8.2Hz,1H),7.49(t,J=7.8Hz,1H),
4.50-4.42(m,1H),3.88(s,3H),1.93(s,3H),1.28(d,J=6.52Hz,6H)。HPLC(254nm)90%;Rt
2.88min;LC/MS:394.2(M+H)。
N'-乙酰基-肼(160mg;0.37mmol;1.00eq.)在THF(8.0mL)中的溶液回流加热2小时。反应混
合物用乙酸乙酯稀释,10%NaHCO3溶液洗涤。分离出有机层,经Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过
1
硅胶柱快速色谱法纯化(DCM:甲醇),获得标题化合物,为黄色固体(80mg,52%)。H NMR
(400MHz,DMSO-d6)δ:8.85(d,J=7.2Hz,1H),8.80(s,1H),8.53(s,1H),8.23(s,1H),8.20(s,1H),7.89(s,1H),7.72(d,J=7.7Hz,1H),7.51(t,J=7.8Hz,1H),4.62-4.57(m,1H),
3.89(s,3H),2.80(s,3H),1.37(d,J=6.48Hz,6H)。HPLC:(254nm)94%;Rt 3.58min。LC/MS:
392.3(M+H)。
[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-嘧啶-5-基}-[1,3,4]噻二唑-2-羧酸乙酯(150mg;
0.30mmol;1.00eq.)在THF(3.00mL)中的溶液中。反应混合物在密封试管中回流加热8小时。
冷却至室温,用乙酸乙酯稀释,1.5N HCl溶液洗涤。分离出有机层,用Na2SO4干燥,过滤,浓
缩。通过硅胶快速色谱法(DCM/甲醇)纯化,获得标题化合物,为黄色固体(80mg,51%)。1H
NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.96(s,1H),8.88(d,J=7.20Hz,1H),8.55(t,J=1.52Hz,1H),
8.23(t,J=7.04Hz,2H),7.90(d,J=0.56Hz,1H),7.74(d,J=7.84Hz,1H),7.52(t,J=
7.72Hz,1H),5.10(d,J=3.48Hz,1H),4.66-4.61(m,1H),4.38(d,J=24.84Hz,1H),4.21(d,J=8.92Hz,2H),3.89(s,3H),3.72-3.51(m,2H),2.05-1.86(m,2H),1.40-1.22(m,6H)。
HPLC:(254nm)95%;Rt 3.53min。LC/MS:491.2(M+H)。
标题化合物,为黄色固体(500mg,70%)。HPLC(柱:XBridge C8,3.5μm,4.6x 50mm):(254nm)
81%;Rt 3.5min;LC/MS:535.2(M+H)。
骤2的方法制备标题化合物,为黄色固体(350mg;71.2%)。HPLC:(254nm)74%;Rt 4.21min;
LC/MS:533.3(M+H)。
中的溶液)在二噁烷(0.5mL)中的溶液在室温搅拌4小时。反应混合物减压浓缩,滤出沉淀
物,用二乙醚(20mL)洗涤,干燥,获得标题化合物,为白色固体(20mg,29%)。1H NMR
(400MHz,DMSO-d6)δ:9.06(d,J=7.12Hz,1H),8.83(s,1H),8.54(t,J=1.56Hz,1H),8.26(d,J=7.92Hz,1H),8.22(s,1H),7.91(s,1H),7.74-7.72(m,1H),7.51(t,J=7.72Hz,1H),
4.60-4.50(m,1H),3.89(s,3H),2.99-2.93(m,1H),2.90-2.82(m,1H),2.81-2.80(m,4H),
2.30-2.00(m,1H),1.82-1.73(m,3H)。HPLC:(254nm)91%;Rt 2.6min。LC/MS:433.3(M+H)。
二噁烷中的溶液)在二噁烷(5mL)中的溶液在室温搅拌4小时。反应混合物减压浓缩,通过制
备型HPLC纯化,获得标题化合物,为黄色固体(45mg,51%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:
9.08(s,1H),8.91(d,J=7.20Hz,1H),8.7-8.8(brs,2H),8.57(s,1H),8.31(d,J=7.88Hz,
1H),8.24(s,1H),7.94(s,1H),7.77(d,J=7.96Hz,1H),7.54(t,J=7.72Hz,1H),4.71(s,
1H),4.01(s,3H),3.90(s,3H),3.32-3.29(m,1H),3.18-3.16(m,1H),2.98-2.95(m,1H),
2.17-2.15(m,1H),2.01-1.98(m,1H),1.89-1.84(m,2H)。HPLC:(254nm)98%;Rt 3.01min;
LC/MS:477.2(M+H)。
酸甲酯(100mg;0.17mmol;1.00eq.)在DCM(5mL)中的溶液中。反应混合物升至室温,搅拌2小
时。减压浓缩,通过制备型HPLC纯化,获得标题化合物,为黄色固体(20mg;20%)。1H NMR
(400MHz,DMSO-d6)δ9.09(t,J=5.84Hz,1H),9.03(s,1H),8.54(s,2H),8.43(s,1H),8.27(d,J=8.00Hz,1H),8.23(s,1H),7.93(s,1H),7.76(d,J=8.12Hz,1H),7.53(t,J=7.76Hz,
1H),4.03-3.94(m,9H),3.90(s,3H),3.36-3.29(m,1H)。HPLC:(254nm)93%;Rt 2.76min。
LC/MS:463.3(M+H)。
烷-3-醇(32.22mg;0.36mmol;1.50eq.)为起始材料,依据实施例16步骤1的方法制备标题化
合物,为黄色固体(100mg,63%)。HPLC:(254nm)94%;Rt 4.07min;LC/MS:632.2(M+H)。
1.00eq.)为起始材料,依据实施例18步骤1的方法制备标题化合物,为黄色固体(20mg,
23%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.04(s,1H),8.96(d,J=7.24Hz,1H),8.75(s,2H),8.56(s,1H),8.31(d,J=7.84Hz,1H),8.24(s,1H),7.94(s,1H),7.76(d,J=8.12Hz,1H),7.54(t,J=7.80Hz,1H),4.72(s,1H),4.42-4.36(m,1H),4.22-4.17(m,1H),4.01-3.99(m,2H),
3.90(s,3H),3.61-3.60(m,2H),3.32-3.29(m,1H),3.19-3.17(m,1H),2.97(s,1H),2.17-
2.16(m,1H),1.98-1.96(m,2H),1.88-1.84(m,2H)。HPLC(XBridge C8(50X4.6)mm,3.5μm;A:
10mM NH4HCO3水溶液,B:ACN;):(254nm)98%;Rt 4.55min。LC/MS:532.1(M+H)。
基]-((R)-3-羟基-吡咯烷-1-基)-甲酮(324mg;0.88mmol;1.00eq.)、K2CO3(365mg;
2.64mmol;3.00eq.)和反式-二氯二(三环己基膦)钯(II)(6.49mg;0.01mmol;0.01eq.)在二
噁烷(4mL)和水(0.4mL)中的混合物脱气,在100℃加热0.5小时。完成后,反应物过滤,有机
层浓缩,经硅胶快速色谱法纯化,洗脱梯度:10-100%乙酸乙酯在己烷中的溶液,获得标题
1
化合物,为米色固体(115mg,27%)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.81(s,1H),8.67(d,1H),
8.28–8.21(m,2H),7.99–7.92(m,2H),7.65(d,1H),7.48(t,1H),7.36(s,1H),3.94–3.87(m,
3H),5.75(s,1H),5.07(d,1H),4.39(d,1H),4.24(m,2H),4.09–3.97(m,2H),3.73–3.50(m,
2H),1.34(d,6H)。HPLC:(254nm)96.6%;Rt(min)3.09。LC/MS:490.2。
3-羟基-吡咯烷-1-基)-甲酮(511.00mg;1.39mmol;1.00eq.)、K2CO3溶液(575.94mg;
4.17mmol;3.00eq.)和反式-二氯二(三环己基膦)钯(II)(10.25mg;0.01mmol;0.01eq.)在
水(0.4mL)和二噁烷(4mL)中的混合物脱气数分钟,在100℃加热0.5小时。完成后,反应物过
滤,有机层浓缩,经硅胶快速色谱法纯化,洗脱梯度:10-100%乙酸乙酯在己烷中的溶液,获
得标题化合物,为米色固体(175mg;15.8%)。
481.41eq.)中。然后一次性加入1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼戊烷-2-
基)-1H-吡唑(33.35mg;0.16mmol;1.50eq.),再加入NaHCO3(10.77mg;0.13mmol;1.20eq.)
在水(0.40mL;22.20mmol;207.74eq.)中的溶液。反应物脱氮气,加入双(三苯基膦)二氯化
钯(II)(0.38mg;0.00mmol;0.01eq.)。反应混合物在80℃搅拌过夜。反应混合物冷却至室
温,用200mL水稀释,乙酸乙酯(3x80mL)萃取。有机相合并,用水(2x75mL)和盐水(1x75mL)洗
涤;用Na2SO4干燥,过滤,浓缩至金色油,经制备型HPLC纯化,获得标题化合物,为蓬松的黄色固体(32.1mg,61.2%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.73(s,1H),8.84(s,2H),8.42(s,3H),
8.26–8.19(m,3H),8.16(d,4H),8.00(s,3H),7.98–7.90(m,3H),7.75(d,3H),5.09(s,3H),
4.43(s,2H),4.38(s,2H),4.22(d,6H),4.06(t,5H),3.99–3.92(m,9H),3.75–3.51(m,6H),
1.99(dd,5H),1.47–1.36(m,17H)。HPLC:(254nm)100%;Rt(min)2.25.LC/MS:491.4。
(三苯基膦)钯(11mg;0.01mmol;0.01eq.)和碳酸钾(0.32g;2.30mmol;1.20eq.)在二噁烷
(10.00mL)和水(1mL)中的混合物在密封试管中在90℃搅拌过夜。减压浓缩,经硅胶快速色
谱法(乙酸乙酯:己烷,梯度:由10至50%)纯化,获得标题化合物,为黄色固体(285mg,
42%);LC/MS:338.1(M+1)。
唑(35mg;0.12mmol;1.05eq.)、四(三苯基膦)钯(0.68mg;0.0006mmol;0.01eq.)和碳酸钾
(0.02g;0.14mmol;1.20eq.)在二噁烷(1mL)和水(0.1mL)中的混合物在密封小瓶中在150℃
搅拌过夜。减压浓缩,先经硅胶快速色谱法(己烷:乙酸乙酯,梯度:由80:20至100:0,再换成乙酸乙酯:甲醇,100至80%),再经制备型HPLC纯化,获得标题化合物,为白色固体(35mg,
62%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.94(s,1H),8.32(d,J=15.7Hz,3H),8.20(s,1H),8.06–
7.99(m,2H),7.79(s,1H),7.70(d,J=7.5Hz,1H),7.53(t,J=7.8Hz,1H),4.53(td,J=
10.2,5.1Hz,1H),4.00(dt,J=13.6,2.7Hz,2H),3.91(d,J=1.4Hz,3H),3.50(td,J=11.2,
3.8Hz,2H),2.04(dtd,J=12.0,6.7,5.2,2.2Hz,4H)。HPLC:99.8%(254nm);Rt(min)4.45;
LC/MS:454.2(M+1)。
1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物(1:1)(158mg;0.19mmol;
0.20eq.)、碳酸铯(947mg;2.91mmol;3.00eq.)在二噁烷(5.00mL)和水(0.50mL)中的混合物
在密封试管中在90℃搅拌过夜。减压浓缩,经硅胶快速色谱法(己烷:乙酸乙酯,梯度:由80
至20%)纯化,获得标题化合物,为黄色固体(170mg,63%)。LC/MS:278.1(M+1)。
(54mg;0.19mmol;1.05eq.)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络
合物(1:1)(0.74mg;0.0006mmol;0.01eq.)、碳酸铯(90mg;0.27mmol;1.50eq.)在二噁烷
(2mL)和水(0.20mL)中的混合物在密封小瓶中在120℃搅拌过夜。减压浓缩,经KPNH快速色谱
法(己烷:乙酸乙酯,梯度:由70至20%)纯化,获得标题化合物,为白色固体(15mg,21%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(s,1H),8.30–8.21(m,4H),7.99–7.86(m,5H),7.61(d,J=
7.4Hz,2H),7.47(t,J=7.7Hz,1H),4.49(p,J=8.4,7.6Hz,1H),4.04–3.97(m,3H),3.90(d,J=1.3Hz,3H),3.55–3.46(m,3H),2.04(td,J=10.6,9.2,3.7Hz,5H)。;HPLC:91%(254nm);
LC/MS:400.2(M+1)。
唑-4-基)-苯基]-嘧啶-4-基氨基}-乙酸甲酯
(80mg;0.28mmol;1.50eq.)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II).CH2Cl2(15mg;
0.02mmol;0.10eq.)和碳酸铯(91.6mg;0.28mmol;1.50eq.)在二噁烷(2mL)和水(0.20mL)中
的混合物在120℃搅拌过夜。反应混合物减压浓缩,经KPNH快速色谱法(乙酸乙酯:甲醇梯
度:由0至100%)纯化,获得标题化合物的混合物。通过制备型HPLC分离开这两个化合物:
唑-4-基)-苯基]-嘧啶-4-基氨基}-乙酰胺甲酸酯):白色固体(9mg,11%):H NMR(400MHz,
DMSO-d6)δ8.55(d,J=1.9Hz,1H),8.42(s,0H),8.28(s,1H),8.23–8.15(m,2H),8.11(s,
1H),7.94(s,1H),7.81(s,1H),7.66(d,J=7.8Hz,1H),7.53(s,1H),7.45(t,J=7.7Hz,1H),
7.12(s,1H),6.93(t,J=5.4Hz,1H),6.63(s,1H),4.03–3.88(m,8H);HPLC:98.8%(254nm);
LC/MS:389.2(M+H)。
d6)δ8.51(s,1H),8.30(s,1H),8.20–8.14(m,2H),8.07(s,1H),7.91(s,1H),7.78(s,1H),
7.66(d,J=8.0Hz,1H),7.45(t,J=7.7Hz,1H),7.08(t,J=5.5Hz,1H),6.52(s,0H),4.08(s,2H),3.92(d,J=15.5Hz,4H)。HPLC:98.6%(254nm);LC/MS:390.2(M+1)。
(97mg;0.34mmol;1.50eq.)、、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II).CH2Cl2(18mg;
0.02mmol;0.10eq.)和碳酸铯(111mg;0.34mmol;1.50eq.)在二噁烷(2.00mL)和水(0.20mL)
中的混合物在密封小瓶中在120℃搅拌过夜。反应混合物减压浓缩,经KPNH快速色谱法(乙
酸乙酯:己烷,梯度:由40至70%)纯化,获得标题化合物,为白色固体(17mg,17%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.21(s,1H),8.78(s,1H),8.53(t,J=1.8Hz,1H),8.27–8.12(m,2H),
7.98–7.87(m,2H),7.74(dt,J=7.7,1.4Hz,1H),7.54(t,J=7.7Hz,1H),7.04(d,J=2.4Hz,
1H),4.81(H,J=8.0Hz,1H),3.96(d,J=34.9Hz,6H),2.18–2.05(m,2H),1.96–1.81(m,2H);
HPLC:98.0%(254nm);LC/MS:386.2(M+H)。
硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-吡唑(160mg;0.56mmol;1.20eq.)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂
铁]二氯化钯(II).CH2Cl2(38mg;0.05mmol;0.10eq.)、碳酸铯(229mg;0.70mmol;1.50eq.)在二噁烷(3.00mL)和水(0.30mL)中的混合物在密封试管中在120℃搅拌过夜。反应混合物减
压浓缩,经硅胶快速色谱法(甲醇:乙酸乙酯,梯度:由0:100至20:80)纯化,获得标题化合
物,为黄色固体(156mg,63%)。LC/MS:527.3(M+H)。
庚烷-2-羧酸叔丁酯(150mg;0.28mmol;1.00eq.)在甲醇(3.00mL)中的溶液。反应混合物在
室温搅拌过夜。
(400MHz,DMSO-d6)δ8.53(d,J=1.9Hz,1H),8.25–8.15(m,3H),8.06(s,1H),7.90(s,1H),
7.76(s,1H),7.66(d,J=7.7Hz,1H),7.47(t,J=7.6Hz,1H),6.77(d,J=6.3Hz,1H),4.73(m,1H),3.99–3.86(m,7H),2.67(s,2H),2.35–2.27(m,2H),2.05–1.96(m,2H)。;HPLC:
97.0%(254nm);LC/MS:463.3(M+H)。
1.44mmol;1.10eq.)、乙酸钾(193mg;1.97mmol;1.50eq.)和PdCl2(PPh3)2(9mg;0.01mmol;
0.01eq.)在二噁烷(7.50mL)中的混合物在100℃和氮气气氛下搅拌22小时。
酯(586mg;1.44mmol;1.10eq.)在二噁烷(2mL)中的溶液以及K2CO3(544mg;3.94mmol;
3.00eq.)在水(2.50mL)中的溶液。让氮气鼓泡5分钟,逸出溶液,加入PdCl2(PPh3)2(9mg;
0.01mmol;0.01eq.),混合物在90℃搅拌过夜。冷却至室温,用乙酸乙酯(10mL)和水(2mL)稀
释。移除水层,有机层过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(乙酸乙酯:己烷,梯度:由20至
70%,再换成甲醇:DCM,10:90),获得标题化合物,为金色泡沫(390mg,32%)。LC/MS:559(M+H)。
4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-吡唑(179mg;0.63mmol;1.50eq.)
和[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II).CH2Cl2(34mg;0.04mmol;0.10eq.)和碳酸
铯(629μl;1.26mmol;3.00eq.)在二噁烷(6.0mL)中的混合物在100℃和氮气气氛下搅拌过
夜。反应混合物冷却至室温,用乙酸乙酯(10mL)和水(3mL)稀释。分离出有机层,经硅藻土过
滤,减压浓缩。通过快速色谱法(乙酸乙酯,100%,再换成甲醇:DCM,梯度:由0至10%)过滤,获得标题化合物,为金色油(229mg,80%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.50(s,1H),8.23(s,
1H),8.18(d,2H),8.12(s,1H),7.86(s,1H),7.78(s,1H),7.65(d,1H),7.47(t,1H),6.76(t,
1H),4.27(m,1H),4.02–3.91(m,2H),3.90(s,3H),3.47(t,2H),2.71(m,1H),2.68(s,3H),
2.28(t,2H),2.14(d,2H),2.10–1.86(m,6H),1.73(d,2H),1.55(d,2H),1.39(s,9H),1.13(qd,2H)。LC/MS:680(M+1)。
苯基]-嘧啶-4-基氨基}-甲基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(225mg;0.33mmol;1.00eq.)在甲醇
(3mL)中的溶液。反应混合物在室温搅拌2小时。用乙醚稀释,过滤。高真空干燥固体,获得标
题化合物,为白色固体(180mg,79%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.93(brs,2H),8.68(s,
1H),8.64(m,1H),8.37(s,1H),8.33(s,1H),8.23(s,1H),8.17(d,1H),8.06(s,1H),7.91(d,
2H),7.65(t,1H),4.32(m,1H),3.64(t,2H),3.28(d,2H),2.93–2.77(m,2H),2.68(s,3H),
2.28(t,2H),2.20–1.91(m,9H),1.91–1.80(d,2H),1.57(m,4H)。LC/MS:580(M+1)。
氮杂-螺[4.5]癸-2-酮盐酸盐(3)(50mg;0.07mmol;1.00eq.)和TEA(40μl;0.29mmol;
4.00eq.)在N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)中的溶液中。澄清溶液在室温搅拌过夜,减压浓缩,
经制备型HPLC纯化(C-18(10um),30x150mm,0.1%NH4OH修饰的流动相(A=水,B=ACN),方
1
法:25分钟内25至75%ACN,流速:60mL/min),获得标题化合物,为白色固体(8mg,17%)。H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.49(t,1H),8.21(s,1H),8.16(d,2H),8.10(s,1H),7.84(s,1H),
7.76(s,1H),7.66–7.61(m,1H),7.46(t,1H),6.73(t,1H),4.31–4.19(m,1H),3.88(s,3H),
3.44(t,2H),2.75(d,2H),2.66(s,3H),2.26(t,2H),2.11(s,5H),2.05–1.88(m,6H),1.85–
1.72(m,3H),1.68(d,2H),1.52(d,2H),1.27(m,2H);LC/MS:594(M+1)。
基-1H-吡唑-4-基)-2-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-嘧啶-4-基氧基}-环己醇(外消
旋体-相对构型)
5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-吡唑(411mg;1.45mmol;1.20eq.)、
[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II).CH2Cl2(98mg;0.12mmol;0.10eq.)和碳酸铯
(589mg;1.81mmol;1.50eq.)在二噁烷(4mL)和水(0.40mL)中的悬液在密封试管中在120℃
搅拌过夜。反应混合物冷却至室温,经硅藻土垫过滤,浓缩,经制备型HPLC(23-25%CH3CN在
0.1%NH4OH水溶液中的溶液)纯化,获得标题化合物(175mg,36%),是(1S,2R,3R)和(1R,
2S,3R)-3-{5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-嘧啶-4-基
氨基}-环己烷-1,2-二醇(175.00mg;0.39mmol)的外消旋体混合物,为白色固体。1H NMR
(400MHz,DMSO-d6)d8.53(s,1H),8.23–8.15(m,3H),8.07(s,1H),7.86(s,1H),7.78(s,1H),
7.66(d,J=7.7Hz,1H),7.48(t,J=8.5Hz,1H),6.06(d,J=6.8Hz,1H),4.59(d,J=6.4Hz,
1H),4.52–4.48(m,1H),4.40(m,1H),3.93(s,3H),3.90(s,3H),3.63–3.56(m,1H),2.21–
2.11(m,1H),1.77(m,2H),1.48–1.26(m,3H)。LC/MS446.2(M+H)。
1
旋体混合物,分离得到白色固体(24mg)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)8.49(s,1H),8.25(s,
1H),8.20–8.14(m,2H),8.07(s,1H),7.87(s,1H),7.80(s,1H),7.65(d,J=7.7Hz,1H),
7.50–7.44(m,1H),6.69(s,1H),5.07–4.84(m,2H),4.40(s,1H),3.95(s,3H),3.88(s,3H),
3.74(m,2H),1.64(m,4H),1.52(s,1H),1.31(s,1H)。LC/MS:446.3(M+H)。
0.78mmol;1.00eq.)和TEA(0.22mL;1.55mmol;2.00eq.)在DMF(3mL)中的溶液中。反应混合
物室温搅拌过夜。减压浓缩,经制备型HPLC(25-28%CH3CN在0.1%NH4OH水溶液中的溶液)纯
化,获得标题化合物,为顺式和反式异构体:
1H),7.47(t,J=7.7Hz,1H),7.17–7.06(m,1H),6.66(d,J=6.5Hz,1H),4.77(m,1H),3.93(s,3H),3.91(s,3H),3.17(t,J=6.7Hz,2H),2.95(s,3H),2.29(m,5H)。LC/MS:493.3(M+H)。
493.3(M+H)。
基-1H-吡唑-4-基)-2-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-嘧啶-4-基氨基}-甲基)-环戊
基]-乙酰胺
0.11mmol;1.00eq.)和TEA(0.03ml;0.22mmol;2.00eq.)在DMF(2mL)中的溶液中。反应混合
物室温搅拌过夜。减压浓缩,经制备型HPLC(25-28%CH3CN在0.1%NH4OH水溶液中的溶液)纯
化,获得标题化合物,为顺式和反式异构体:
1H),6.75(m,1H),4.22(m,1H),3.92(s,3H),3.90(s,3H),3.86(m,1H),3.11(m,1H),2.27(m,
1H),1.87(s,3H),1.81–1.71(m,3H),1.60–1.49(m,2H),1.41(m,1H)。LC/MS:471.2(M+H)。
法制备标题化合物。LC/MS:486.3(M+H)。
2-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-嘧啶-4-基}-胺(240mg;0.49mmol;1.00eq.)在甲醇
(3.0mL)中的溶液。反应混合物在室温搅拌过夜。减压浓缩,经制备型HPLC(20-24%CH3CN在
1
0.1%NH4OH水溶液中的溶液)纯化,获得标题化合物,为白色固体(180mg;82%)。H NMR
(400MHz,DMSO-d6)d 8.53(s,1H),8.24–8.14(m,3H),8.07(s,1H),7.86(s,1H),7.78(s,
1H),7.66(d,J=7.7Hz,1H),7.48(t,J=7.8Hz,1H),6.06(d,J=6.9Hz,1H),4.73–4.35(m,
3H),3.92(m,7H),3.59(d,J=9.7Hz,1H),2.20–2.11(m,1H),1.77(m,2H),1.37(m,3H)。LC/MS:446.2(M+H)。
208和209的方法制备标题化合物。
1H),7.47(td,J=7.8,2.0Hz,1H),6.64(d,J=6.6Hz,1H),4.79(m,1H),3.93(s,3H),3.90(s,3H),3.28(t,J=7.3Hz,2H),2.33–2.14(m,5H),1.85(s,3H)。LC/MS:457.3(M+H)。
7.48(t,J=8Hz,1H),6.60(d,J=8Hz,1H),4.55(m,1H),3.93(s,3H),3.90(s,3H),3.13(m,
2H),2.45(m,2H),2.17(m,1H),1.85(m,1H),1.77(s,3H)。LC/MS:457.3(M+H)。
型)
1.00equiv,90%)、1-甲基-4-[3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)苯基]-1H-吡唑
(440mg,1.30mmol,1.50equiv,84%)、Pd(PPh3)2Cl2(62mg,0.09mmol,0.10equiv,98%)和碳酸钾(245mg,1.74mmol,2.01equiv,98%)在二噁烷(10mL)和水(1mL)中的混合物脱氮气,并
在150℃微波加热30分钟。得到的混合物真空浓缩,经硅胶快速色谱法(甲醇/DCM,1:5)纯
化,获得标题化合物,为黄色固体(390mg,73%)。LC/MS(柱:Shim-pack XR-ODS,3.0*50mm,
2.2um;流动相A:水/0.05%TFA,流动相B:ACN/0.05%TFA;流速:1.0mL/min;3.6分钟梯度:
5%B至100%B,保持1.0min;254nm):(纯度)90%;[M+H]+计算结果:559.3;实验结果:
559.3。
1.00equiv,90%)和浓盐酸(0.5mL,6.01mmol,74eq.,36.5%)在甲醇(2mL)中的溶液在25℃
搅拌2小时。用碳酸氢钠调溶液的pH值至7,得到的混合物在真空下浓缩。残留物溶解在10mL
DCM中,滤出固体,得到的混合物真空浓缩。粗产物(25mg)经HPLC纯化后,获得标题化合物,
为黄色固体(5mg,15%)。熔点:88-92℃。LC/MS(柱:Shim-pack XR-ODS,2.0*50mm,1.6um;流动相A:水/0.05%TFA,流动相B:ACN/0.05%TFA;流速:0.7mL/min;2.0分钟梯度:5%B至
100%B,保持0.5min;220nm):(纯度)98%;[M+H]+计算结果:459.3;实验结果:459.3。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ8.52(t,J=1.7Hz,1H),8.24-8.12(m,3H),8.06(s,1H),7.89(s,1H),7.75(s,1H),7.71-7.60(m,1H),7.47(t,J=7.7Hz,1H),5.84(d,J=7.7Hz,1H),
5.07(d,J=4.4Hz,1H),4.55(s,1H),3.93(s,3H),3.89(s,3H),3.75(q,J=3.9Hz,1H),2.60(d,J=3.8Hz,1H),2.33(s,3H),1.69(m,5H),1.41(m,2H)。
唑-4-基)-2-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-嘧啶-4-基}-哌啶-3-基胺
方法制备标题化合物,为白色固体(135mg,44%)。LC/MS(柱:Shim-pack XR-ODS,2.0*50mm,
1.6um;流动相A:水/0.05%TFA,流动相B:ACN/0.05%TFA;流速:0.7mL/min;2.1分钟梯度:
5%B至100%B,保持0.5min;220nm):(纯度)83.7%;[M+H]+计算结果:551.4;实验结果:
551.4。
甲酸叔丁酯(125mg,0.19mmol,1.00eq.)在二氯甲烷(4mL)中的溶液中。得到的溶液在25℃
搅拌2小时。真空浓缩,经制备型HPLC(XBridge C18)纯化,获得标题化合物,为外消旋体混
合物(30mg)。再通过手性制备型HPLC(Lux 5u Cellulose-4,AXIA Packed,100.0%甲醇,
0.1%DEA)分离开这两种异构体。
451.3;实验结果:451.3。1H NMR(400MHz,DMSO,ppm):8.49(m,2H),8.21-8.18(m,2H),8.03(s,1H),7.90(s,1H),7.73(s,1H),7.68-7.66(m,1H),7.49-7.45(m,1H),4.10-4.08(m,1H),
3.94-3.85(m,7H),3.35(s,1H),3.30-3.17(m,1H),2.69-2.63(m,1H),2.49-2.47(m,1H),
2.31(m,1H),1.83-1.72(m,1H)。
果:451.3。
1H-吡唑-4-基)-2-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-嘧啶-4-基氨基}-环己醇
XBridge BEH130Prep C18OBD柱,19x 150mm,5μm,13nm;流动相:水(10mmol/L NH4HCO3)和乙醇(12分钟内梯度:55%至67%);检测器:UV 254nm]纯化所述混合物,得到标题化合物,为
白色固体(200mg,43%)。熔点:176-180℃。HPLC(UV 254nm):94.57%纯度。MS:m/z=448.2[M+H]+;1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm):δ8.51(s,1H),8.26(s,1H),8.17-8.14(m,2H),8.07(s,1H),7.86(s,1H),7.77(s,1H),7.67-7.65(m,1H),7.50-7.44(m,1H),5.91(d,J=7.8Hz,
1H),5.55(d,J=4.8Hz,1H),4.87-4.65(m,1H),4.52-4.42(m,1H),4.07-4.02(m,1H),3.93(s,3H),3.88(s,3H),1.85-1.55(m,6H)。
点:144-148℃。HPLC(UV 254nm):98.26%纯度。手性纯度:e.e.%>99.99%。
(9%)。熔点:200-202℃。HPLC(UV 254nm):99.25%纯度。手性纯度:e.e.%>99.99%。
2-基)苯基]-1H-吡唑(53mg,0.18mmol,1.45eq.)、Pd(PCy3)2Cl2(11mg,0.01mmol,0.12eq.)
和K3PO4(62mg,0.28mmol,2.27eq)在二噁烷(2mL)和水(0.5mL)中的混合物在密封试管中在
100℃和氮气气氛下加热3小时。得到的混合物真空浓缩。残留物用DCM稀释。分离出水相,用
DCM萃取二次。有机相合并,用盐水洗涤,硫酸镁干燥,过滤,浓缩。经制备型HPLC(XBridge
BEH130Prep C18OBD柱)纯化,获得标题化合物,为白色固体(35mg,61%)。LC/MS(柱:Shim-
pack XR-ODS,2.0*50mm,1.6um;流动相A:水/0.05%TFA,流动相B:ACN/0.05%TFA;流速:
0.7mL/min;2.1分钟梯度:5%B至100%B,保持0.5min;220nm):(纯度)99.9%;[M+H]+计算
结果:466.3;实验结果:466.3。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)8.48(s,1H),8.23(s,1H),
8.17(s,1H),8.13(d,J=8.1Hz,1H),8.05(s,1H),7.84(s,1H),7.78(s,1H),7.65(d,J=
7.5Hz,1H),7.48(t,J=7.7Hz,1H),6.36(d,J=7.6Hz,1H),5.62(d,J=6.4Hz,1H),4.31(m,
1H),3.92(s,3H),3.89(s,3H),2.13(m,2H),1.75(m,2H),1.53(m,2H)。
吡唑-4-基)-2-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-嘧啶-4-基氨基}-环庚烷-1,2-二醇
材料,依据实施例287的方法,制备标题化合物,为黄色油(220mg,92%)。LC/MS(柱:Shim-
pack XR-ODS,2.0*50mm,1.6um;流动相A:水/0.05%TFA,流动相B:ACN/0.05%TFA;流速:
0.7mL/min;2.1分钟梯度:5%B至100%B,保持0.5min;220nm):(纯度)90.0%;[M+H]+计算
结果:500.3;实验结果:500.0。
基)-2-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯基]-嘧啶-4-基氨基}-环庚烷-1,2-二醇
唑-4-基)-2-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基]嘧啶-4-胺(220mg,0.40mmol,1.00eq.)在甲
醇(2mL)中的溶液中。得到的溶液在室温搅拌16小时。加入氨水调溶液的pH值至8。反应混合
物真空浓缩,经快速色谱法(H2O:甲醇,1:1)纯化,获得标题化合物,为外消旋体的混合物
(130mg)。通过手性制备型HPLC(Chiralpak IC,甲醇)分离开这两种异构体。
7.75(s,1H),7.68(s,1H),7.56(d,J=10.6Hz,2H),7.45(t,J=7.7Hz,1H),6.00(d,J=
7.4Hz,1H),4.62-4.42(m,1H),4.12(d,J=2.8Hz,1H),4.10-4.01(m,1H),3.97(d,J=
8.0Hz,5H),2.21-2.01(m,1H),1.93(q,J=9.8,9.1Hz,1H),1.86-1.76(m,3H),1.69(d,J=
6.3Hz,3H),1.63-1.45(m,2H)。
依据实施例287的方法,制备标题化合物,为黄色固体(480mg,100%)。MS:m/z=532.5[M+H]+。
1.00eq.)和氢氧化钠(100mg,2.45mmol,3.02eq.)在THF(10mL)和水(2mL)中的溶液在25℃
搅拌2小时。然后减压浓缩,用水(20mL)稀释。得到的混合物用DCM(3x10mL)萃取。有机层合
并,用盐水洗涤,无水Na2SO4干燥,过滤,真空浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(甲醇/DCM,1:
100至1:25),获得标题化合物,为褐色固体(340mg,77%)。MS:m/z=490.4[M+H]+。
340mg,0.56mmol,1.00eq.,80%纯度)在二氯甲烷(1mL)中的溶液滴加入XtalFluor-E
(195mg,0.83mmol,1.50equiv,98%纯度)在DCM(10mL)中的溶液。然后在0℃向得到的混合
物滴加入TEA.3HF(147mg,0.89mmol,1.61equiv,98%纯度)。反应混合物升至室温,搅拌1小
时。然后加入20mL水淬灭反应,用DCM(3x10mL)萃取。有机层用盐水(1mL)洗涤,无水硫酸钠
干燥,过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(甲醇/DCM,1:100至1:20),获得标题化合物,为+
黄色固体(144mg,47%)。MS:m/z=492.4[M+H]。
(外消旋体,139mg,0.28mmol,1.00eq.)在二噁烷(2mL)中的溶液。反应混合物在25℃搅拌2
小时。用饱和碳酸氢钠水溶液调溶液的pH值至7,得到的混合物真空浓缩。用10mL DCM稀释
残留物。滤出固体。滤液真空浓缩,粗产物(100mg)经制备型HPLC[SHIMADZU:柱:XBridge
BEH130Prep C18OBD柱,19x 150mm,5μm,13nm;流动相:水s(10mmol/L NH4HCO3)和ACN(10分钟梯度:35%至41%);检测器:UV 254nm]纯化,获得标题化合物,为白色固体(73mg,56%)。
熔点:116-120℃。HPLC(UV 254nm):97.85%纯度。MS:m/z=448.3[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm):δ8.51(s,1H),8.26(s,1H),8.17-8.14(m,2H),8.07(s,1H),7.86(s,1H),
7.77(s,1H),7.69-7.63(m,1H),7.50-7.43(m,1H),5.90(d,J=7.7Hz,1H),5.54(d,J=
4.8Hz,1H),4.87-4.67(m,1H),4.52-4.42(m,1H),4.06-4.02(m,1H),3.93(s,3H),3.88(s,
3H),1.82-1.56(m,6H)。
(130mg,0.27mmol,1.00eq.)在DCM(8mL)中的溶液中。加入碳酸氢钠(78mg,0.88mmol,
3.21eq.),得到的混合物在20℃搅拌6小时。混合物用DCM稀释,并用碳酸钠溶液和盐水洗
涤。有机层用无水硫酸钠干燥,过滤,浓缩。通过硅胶快速色谱法纯化(DCM:甲醇,20:1),获得标题化合物,为黄色油(70mg,46%)。LC/MS:[M+H]+计算结果:442.2;实验结果:442.0。
啶-4-胺(外消旋体,65mg,0.13mmol,1.00equiv,85%纯度)。得到的反应混合物在80℃搅拌
36小时。然后真空浓缩,粗产物(50mg)经制备型HPLC[SHIMADZU:柱:XBridge BEH130 Prep
C18 OBD柱,19x 150mm,5μm,13nm;流动相:水(10mmol/L NH4HCO3)和ACN(8分钟梯度:27%至
34%);检测器:UV 254nm]纯化,获得标题化合物(10mg,16%产率),为乳白色固体。熔点:
120-122℃。HPLC(UV 254nm):96.53%纯度。MS:m/z=473.2[M+H]+;1H NMR(400MHz,氯仿-d,ppm):δ8.46(s,1H),8.21-8.17(m,2H),7.85(s,1H),7.73(s,1H),7.66(s,1H),7.61(s,1H),
7.58-7.53(m,1H),7.48-7.42(m,1H),5.93(d,J=6.8Hz,1H),4.53(brs.,1H),4.13-4.09(m,1H),3.94(s,3H),3.00-2.92(m,1H),2.63(s,3H),2.01-1.92(m,2H),1.85-1.74(m,5H),
1.51-1.40(m,1H)。
(PerkinElmer#SMP410A)中进行。
无脂肪酸BSA 0.1%、二硫苏糖醇DTT 2mM、MgCl2 10mM、EGTA 0.5mM、Triton-X-100
0.01%)中于30℃下保温培养3小时。通过添加EDTA而中止激酶反应。丢弃上清液,将培养板
用150mM NaCl清洗三次,然后在Microbeta Trilux读数器中测量放射性。
CisBio International公司)。
冲液(包含:Hepes pH7.0 50mM、无脂肪酸BSA 0.1%、二硫苏糖醇DTT 2mM、MgCl2 10mM、
EGTA 0.5mM、Tween-20 0.01%、MnCl2 5mM)中于30℃下保温培养3小时。
全血)的白细胞层(新鲜或冷冻)制备人PBMC,铺在测定培养基(RPMI+2%P/S/L-glu+10%
HI-FBS)中,在37℃下用溶解在DMSO/培养基中的化合物(浓度的范围为25μM至0.4nM)或对
照(0.25%DMSO)预处理在测定培养基中的人PBMC 30分钟。然后用IRAK1和IRAK4抑制剂预
处理,在37℃下用TLR7特异性配体(2μM)刺激PBMC,过夜(16-18小时)。温育后,把上清液转
移至384孔PE AlphaPlate-384板(6005350),使用Perkin Elmer IL-6 Alpha LISA试剂盒
(AL223C)定量IL-6。在Alpha 的 板读数器中读取上述板。
条件下密封。每个注射液瓶含有5mg活性成分。
再将该溶液配至1L,放射灭菌。该溶液以眼药水形式使用。
(约0.1ml)相当于一剂约0.14mg。
而非以示例方式提供的具体实施例限定。