雷公藤红素的A晶型和B晶型，及其制备方法和用途

摘要

本发明涉及了雷公藤红素的A晶型和B晶型，其制备方法及应用。运用X‑射线衍射、红外光谱、拉曼光谱、差示扫描量热、热重分析、吸湿性分析等手段对雷公藤红素的A晶型和B晶型进行了全面表征，发现A晶型和B晶型具有更加优良的物理化学和成药性能。该雷公藤红素的A晶型和B晶型的制备方法操作简单，容易控制，重现性好，溶解度高，具有良好的稳定性。

权利要求

1.一种雷公藤红素的A晶型，其特征在于，所述A晶型的X-射线粉末衍射图谱在衍射角2θ角为8.5。±0.2。，9.0。±0.2。，9.2。±0.2。，9.4。±0.2。，12.1。±0.2。，12.9。±0.2。，14.5。±

0.2。，14.8。±0.2。，16.1。±0.2。，17.2。±0.2。处具有特征峰。

2.如权利要求1所述的雷公藤红素的A晶型，其特征在于，所述A晶型的X-射线粉末衍射图谱还在衍射角2θ角为10.8。±0.2。，11.7。±0.2。，18.2。±0.2。，18.9。±0.2。，19.4。±0.2。

处有特征峰。

3.如权利要求1所述的雷公藤红素的A晶型，其特征在于，所述的A晶型的X-射线粉末衍射图谱，具有如附图1所示的X-射线粉末衍射图谱。

4.如权利要求1所述的雷公藤红素的A晶型，其特征在于，所述的A晶型的热失重分析的分解温度为200±1℃。

5.一种制备如权利要求1 4任一项所述的雷公藤红素的A晶型的方法，其特征在于，所~述方法为将雷公藤红素与一定量溶剂混合，搅拌混悬，离心，取离心后的固体，真空干燥，再放入高温烘箱中加热，即得雷公藤红素的A晶型，或，将雷公藤红素溶解于一定量的溶剂中，超声使其完全溶解后，在室温下挥发干燥，再放入高温烘箱中加热，即得雷公藤红素的A晶型；

所述溶剂为选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃、硝基甲烷、甲基叔丁基醚、甲苯、正己烷、正庚烷、石油醚、二氯甲烷、氯仿或水中的一种或几种；

所述雷公藤红素与溶剂的质量体积比为1g:（10mL～1L）。

6.如权利要求5所述的制备雷公藤红素的A晶型的方法，其特征在于，所述的搅拌混悬的温度为室温；

所述加热的温度为100℃～190℃；

所述溶剂为选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃、硝基甲烷、甲基叔丁基醚、甲苯、正己烷、正庚烷、石油醚、二氯甲烷、氯仿或水中的一种或几种；

所述雷公藤红素与溶剂的质量体积比为1g:（10mL～1L）。

7.如权利要求5所述的制备雷公藤红素的A晶型的方法，其特征在于，所述溶剂为乙腈、硝基甲烷或二氯甲烷。

8.一种药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的权利要求1 4中任一项所述的~雷公藤红素的A晶型以及药学上可接受的载体。

9.如权利要求1 4中任一项所述雷公藤红素的A晶型或如权利要求8所述的药物组合物~在制备用于治疗减肥、抗炎、抗癌、抗病毒药物中的应用。

说明书

雷公藤红素的A晶型和B晶型，及其制备方法和用途

技术领域

[0001] 本发明属药物化学技术领域，具体涉及雷公藤红素的A晶型和B晶型、其制备方法及应用。

背景技术

[0002] 多晶型现象是指固体物质以两种或两种以上的不同空间排列方式，形成的具有不同物理化学性质的固体状态的现象。在药物研究领域，多晶型包括了有机溶剂化物、水合物等多组分晶体形式。药物多晶现象在药物开发过程中广泛存在，是有机小分子化合物固有的特性。多晶型现象不光受到分子本身的空间结构和官能基团性能，分子内和分子间的相互作用等内在因素的控制，它还受药物合成工艺设计、结晶和纯化条件、制剂辅料选择、制剂工艺路线和制粒方法、以及储存条件、包装材料等诸方面因素的影响。不同晶型具有不同的颜色、熔点、溶解、溶出性能、化学稳定性、反应性、机械稳定性等，这些物理化学性能或可加工性能有时直接影响到药物的安全、有效性能。因此晶型研究和控制成为药物研发过程中的重要研究内容。

[0003] 晶型研究包括晶体发现和晶型优选的两个阶段，在晶体发现阶段，主要采用多种结晶手段，如熔融结晶，溶液挥发，快速冷却和混悬法的结晶方法，通过改变结晶条件，溶剂，温度，速度和混悬溶剂比例等影响药物结晶的外部因素。采用高通量样品制备平台，同时制备数百次结晶试验，运用微量样品制备技术和分析测试手段。制备和发现新的晶型。在晶型优选阶段，要对于新的晶型晶型工艺放大和制备条件摸索，采用多种固体表征手段，如X-射线衍射，固体核磁共振，拉曼光谱，红外光谱等手段晶型晶体表征，另外，要采用差示扫描量热(DSC)、热重分析(TG)、吸湿性分析(DVS)、高效液相色谱法(HPLC)等对晶型进行物化性能研究，比较不同晶型的吸湿性、化学稳定、物理状态稳定性、可加工性等进行研究。最后选择最为优选的固体形态进行开发。

[0004] 雷公藤红素(Celastrol)的化学结构如下：

[0005]

[0006] 雷公藤红素是从卫矛科植物雷公藤中提取的五环三萜类单体化合物，它可以在多方面发挥其抗癌作用，包括抑制肿瘤细胞生长、阻滞细胞周期和诱导凋亡等作用，是一种潜在的天然抗肿瘤药物。此外，雷公藤红素还具有减肥、抗炎、抗病毒等药理作用。

[0007] 因雷公藤红素水溶性差、生物利用度低、尤其是其较强的毒性阻碍了其成药的发展。

[0008] 本发明报道雷公藤红素的两种新晶型：A晶型和B晶型。研究发现，新晶型的吸湿性小，稳定性好，因而有利于药物的工艺处理和物化性能的改善，提高成药性能。同时，研究发现，A晶型具有明显提高的溶解度，有利于提高药物的生物利用度，减低剂量，从而降低药物毒性。

发明内容

[0009] 本发明的目的之一在于提供两种稳定的雷公藤红素的新晶型，在此，将这两种晶型分别称为A晶型和B晶型。

[0010] 本发明的目的之二在于提供所述的雷公藤红素的A晶型和B晶型的制备方法。

[0011] 本发明的目的之三在于提供一种药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的上述雷公藤红素的A晶型和/或B晶型以及药学上可接受的载体。

[0012] 本发明的目的之四在于提供一种雷公藤红素的A晶型和/或B晶型在制备用于治疗肥胖、抗炎、抗癌、抗病毒的药物中的应用。

[0013] 本发明一方面，提供了两种稳定的雷公藤红素的新晶型。

[0014] 本发明提供的雷公藤红素的第一种新晶型，该晶型命名为A晶型。所述A晶型为非溶剂合物或非水合物。

[0015] 雷公藤红素的A晶型，所述A晶型的X-射线粉末衍射图谱(XRPD图谱，铜靶波长为1.54nm的KαX-射线)在衍射角2θ角约为8.5°±0.2°，9.0°±0.2°，9.2°±0.2°，9.4°±0.2°，
12.1°±0.2°，12.9°±0.2°，14.5°±0.2°，14.8°±0.2°，16.1°±0.2°，17.2°±0.2°处具有特征峰；

[0016] 优选地，所述的雷公藤红素的A晶型的XRPD图谱，还在衍射角2θ角约为10.8°±0.2°，11.7°±0.2°，18.2°±0.2°，18.9°±0.2°，19.4°±0.2°处有特征峰；

[0017] 特别地，所述的雷公藤红素的A晶型的X-射线粉末衍射图谱，具有基本上如附图1所示的XRPD图谱。

[0018] 所述A晶型的热失重分析的分解温度约为200±1℃，分解温度之前未有失重；特别地，所述A晶型具有基本如图2所示的热失重分析(TG)图谱。

[0019] 所述A晶型的吸湿性很小，在高湿度下较为稳定，且在0-95％的湿度条件下，X-射线粉末衍射保持不变。

[0020] 所述A晶型的红外图谱至少在约3276，2943，2871，1730，1703，1635，1589，1545，-11512，1442，1377，1286，1223，1086，868cm 处具有特征峰；

[0021] 所述A晶型的拉曼光谱至少在约1637，1605，1548，1511，1444，1384，1372，1139，1077，541，464cm-1处具有特征峰。

[0022] 本发明提供的雷公藤红素的第二种新晶型，该晶型命名为B晶型。所述B晶型为非溶剂合物或非水合物。

[0023] 雷公藤红素的B晶型，所述B晶型的X-射线粉末衍射图谱(XRPD图谱，铜靶波长为1.54nm的KαX-射线)在衍射角2θ角约为：6.6°±0.2°，9.4°±0.2°，13.5°±0.2°，14.7°±
0.2°，16.9°±0.2°，18.2°±0.2°，18.8°±0.2°，19.2°±0.2°，21.7°±0.2°，22.9°±0.2°，处具有特征峰；

[0024] 优选地，所述的雷公藤红素的B晶型的XRPD图谱，还在衍射角2θ角约为24.4°±0.2°，25.7°±0.2°，26.5°±0.2°处有特征峰；

[0025] 特别地，所述的雷公藤红素的B晶型的X-射线粉末衍射图谱，具有基本上如附图8所示的XRPD图谱。

[0026] 所述B晶型的热失重分析的分解温度约为200±1℃，分解温度之前未有失重；特别地，所述B晶型具有基本如附图9所示的热失重分析(TG)图谱。

[0027] 所述B晶型的吸湿性很小，在高湿度下较为稳定，且在0-95％的湿度条件下，X-射线粉末衍射保持不变。

[0028] 所述B晶型的红外图谱至少在约2939，2868，1732，1649，1589，1549，1510，1441，-11377，1286，1271，1213，1153，1088，864cm 处具有特征峰；特别地，所述的雷公藤红素的B晶型的红外图谱，具有基本上如附图12所示的红外图谱。

[0029] 所述B晶型的拉曼光谱至少在1650，1586，1552，1510，1439，1385，1272，1147，604，477cm-1处具有特征峰；特别地，所述的雷公藤红素的B晶型的拉曼光谱，具有基本上如附图
13所示的拉曼光谱。

[0030] 由于测量条件的不同，XRPD衍射图上各峰2θ角和相对强度会有所变动，一般2θ角变化在±0.2°以内，但也能稍溢出该范围，本领域技术人员应理解，衍射的相对强度可取决于，例如，样品制剂或所用设备。

[0031] 本发明另一方面提供了雷公藤红素A晶型和B晶型的制备方法。

[0032] 所述雷公藤红素的A晶型的制备方法为，

[0033] 将雷公藤红素与一定量溶剂混合，搅拌混悬，离心，取离心后的固体，真空干燥，再放入高温烘箱中加热，即得雷公藤红素的A晶型，或，

[0034] 将雷公藤红素溶解于一定量的溶剂中，超声使其完全溶解后，在室温下挥发干燥，再放入高温烘箱中加热，即得雷公藤红素的A晶型；

[0035] 所述的搅拌混悬的温度为室温；

[0036] 所述加热的温度为100℃～190℃；

[0037] 所述溶剂为选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃、硝基甲烷、甲基叔丁基醚、甲苯、正己烷、正庚烷、石油醚、二氯甲烷、氯仿或水中的一种或几种；优选为乙腈、硝基甲烷或二氯甲烷。

[0038] 所述雷公藤红素与溶剂的质量体积比为1g:(10mL～1L)。

[0039] 所述雷公藤红素的B晶型的制备方法为，

[0040] 将雷公藤红素与一定量溶剂混合，搅拌混悬，离心，取离心后的固体，真空干燥，即得雷公藤红素的B晶型，或，

[0041] 将雷公藤红素溶解于一定量的的溶剂中，超声使其完全溶解后，在室温下缓慢挥发干燥，即得雷公藤红素的B晶型；

[0042] 所述的搅拌混悬的温度为50℃；

[0043] 所述溶剂为选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃、硝基甲烷、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚、正己烷、正庚烷、石油醚、二氯甲烷、氯仿、乙酸异丙酯或水中的一种或几种；优选为乙酸异丙酯、石油醚或甲醇。

[0044] 所述雷公藤红素与溶剂的质量体积比为1g:(10mL～1L)。

[0045] 本发明另一方面提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括治疗有效量的所述的雷公藤红素的A晶型或B晶型，以及药学上可接受的载体。

[0046] 本发明另一方面提供了雷公藤红素A晶型或B晶型以及包括雷公藤红素的A晶型或B晶型的药物组合物在减肥、抗炎、抗癌、抗病毒等药物中的应用。

[0047] 有益效果

[0048] 本发明提供的雷公藤红素的A晶型和B晶型，及其制备方法，其中A晶型制备方法简单，吸湿性小，具有良好的稳定性，可形成规整的晶型形态，并具有更高的溶解度，因而有利于药物的工艺处理、物化性能的改善，和成药性能的提高。

附图说明

[0049] 图1是本发明实施例1制备的雷公藤红素A晶型的X-射线粉末衍射(XRPD)图；

[0050] 图2是本发明实施例1制备的雷公藤红素A晶型的热失重分析(TG)图；

[0051] 图3是本发明实施例1制备的雷公藤红素A晶型的差示扫描量热分析(DSC)图；

[0052] 图4是本发明实施例1制备的雷公藤红素A晶型的吸湿性分析(DVS)图；

[0053] 图5是本发明实施例1制备的雷公藤红素A晶型的红外光谱(IR)图；

[0054] 图6是本发明实施例1制备的雷公藤红素A晶型的拉曼光谱(Raman)图；

[0055] 图7是本发明实施例1制备的雷公藤红素A晶型的0d，5d，10d，15d，30d，45d的稳定性X-射线粉末衍射(XRPD)图。

[0056] 图8是本发明实施例9制备的雷公藤红素B晶型的X-射线粉末衍射(XRPD)图；

[0057] 图9是本发明实施例9制备的雷公藤红素B晶型的热失重分析(TG)图；

[0058] 图10是本发明实施例9制备的雷公藤红素B晶型的差示扫描量热分析(DSC)图；

[0059] 图11是本发明实施例9制备的雷公藤红素B晶型的吸湿性分析(DVS)图；

[0060] 图12是本发明实施例9制备的雷公藤红素B晶型的红外光谱(IR)图；

[0061] 图13是本发明实施例9制备的雷公藤红素B晶型的拉曼光谱(Raman)图；

[0062] 图14是本发明实施例9制备的雷公藤红素B晶型的0d，5d，10d，15d，30d，45d的稳定性X-射线粉末衍射(XRPD)图。

[0063] 图15是本发明实施例1和9制备的雷公藤红素两种晶型的平衡溶解度比较图。

具体实施方式

[0064] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

[0065] X-射线粉末衍射(XRPD)所使用的仪器为BrukerD8Advance diffractometer，采用铜靶波长为1.54nm的KαX-射线，在40kV和40mA的操作条件下、θ-2θ测角仪、Mo单色仪、Lynxeye探测器。仪器在使用前用仪器自带的标准样品校正峰位。采集软件是Diffrac Plus XRD Commander，分析软件是MDI Jade 5.0。样品在室温条件下测试，把需要检测的样品放在玻片上。详细检测条件如下：角度范围：3～40° 2θ；扫描速度：12°/min；步长：0.02° 2θ；速度：0.1秒/步。除非特别说明，样品在检测前未经研磨。

[0066] 热重分析(TG)数据采自于德国耐驰科学仪器有限公司TG209F3型，仪器控制软件是Thermal Advantage，分析软件是Universal Analysis。通常取2～5mg的样品放置于氧化铝坩埚内，采用分段高分辨检测的方式，以10℃/min的升温速度在20mL/min干燥N2的保护下将样品从室温升至400℃，同时TA软件记录样品在升温过程中的重量变化。

[0067] 差示扫描量热分析(DSC)数据采自于美国TA仪器公司DSC Q2000差示扫描量热仪，分析软件是TAUniversalAnalysis。通常取1～10毫克的样品放置于加盖(除非特别说明)的铝坩埚内，以10℃/min的升温速度在50mL/min干燥N2的保护下将样品从室温升至250℃，同时TA软件记录样品在升温过程中的热量变化。在本申请中，熔点是按起始温度来报告的。

[0068] 进行红外分析(IR)采用美国尼高力公司的Nicolet-Magna FT-IR 750红外光谱分析仪于室温检测，检测范围为：4000-350cm-1波数。

[0069] 拉曼光谱(Raman)分析采用美国热电公司的DXR显微拉曼光谱仪于室温检测，检测范围为：3500-50cm-1拉曼位移。

[0070] 吸湿性分析(DVS)采用英国SMS仪器公司DVS Intrinsic型动态水分吸附仪测定。测定条件：温度：25℃；相对湿度范围：0％-95％。

[0071] 高效液相色谱(HPLC)测定条件：

[0072] 仪器：安捷伦1260

[0073] 色谱柱:Agilent Zorbax Extend Plus C18柱(4.6×250mm，5μm)

[0074] 流动相：乙腈:0.1％三氟乙酸，洗脱梯度如下：

[0075]时间(分钟) 0.1％三氟乙酸(体积占比，％) 乙腈(体积占比，％)
5.00 30 70
12.00 10 90
14.00 10 90
14.01 30 70
15 30 70

[0076] 柱温：35℃

[0077] 流速：1毫升/分钟

[0078] 进样量：20μL

[0079] 检测波长：252nm。

[0080] 所有温度以℃(摄氏度)表示，室温是指20～25℃。

[0081] 雷公藤红素，硝基甲烷，二氯甲烷，正己烷，正庚烷等试剂均为分析纯，由国药集团化学试剂有限公司提供，所用试剂和溶剂除特别说明外，均未经特别处理。

[0082] 实施例1

[0083] 取20mg雷公藤红素原料，加入1mL乙腈溶剂，室温混悬2天，离心后取粉末状固体，真空干燥后，放入150℃烘箱中加热，即可得到雷公藤红素的A晶型，为红色粉末。

[0084] 对实施例1制得的雷公藤红素的A晶型固体样品进行X-射线粉末衍射分析，其分析结果见图1。采用德国耐驰科学仪器有限公司TG209F3型热重分析仪对实施例1制得的雷公藤红素的A晶型进行热失重分析，其分析结果见图2。从图2中可以看出，这种A晶型为非水合物或非溶剂合物。

[0085] 采用美国TA仪器公司的DSC Q2000差示扫描量热仪检测对实施例1制得的雷公藤红素的A晶型进行差示扫描量热分析，其分析结果见图3。

[0086] 并且，实施例1制得的雷公藤红素的A晶型还通过吸湿性分析(DVS)、红外(IR)以及拉曼(Raman)光谱等固态方法进行了分析，其分析结果分别见图4、图5和图6。

[0087] 实施例2

[0088] 取10mg雷公藤红素原料，加入5mL乙腈溶剂，超声使其溶解，在室温下挥发干燥后，将所得粉末状固体放入150℃烘箱中加热，即可得到雷公藤红素A晶型，为红色粉末。

[0089] 实施例3

[0090] 取50mg雷公藤红素原料，加入2mL硝基甲烷溶剂，25℃下混悬2天，离心后取粉末状固体，真空干燥后，放入130℃烘箱中加热，即可得到雷公藤红素的A晶型，为红色粉末。

[0091] 实施例4

[0092] 取20mg雷公藤红素原料，加入1mL二氯甲烷溶剂，25℃下混悬2天，离心后取粉末状固体，真空干燥后，放入160℃烘箱中加热，即可得到雷公藤红素的A晶型，为红色粉末。

[0093] 实施例5

[0094] 取20mg雷公藤红素原料，加入1mL乙腈和硝基甲烷的混合溶剂(体积比1:1)，混悬2天，离心后取粉末状固体，真空干燥后，放入150℃烘箱中加热，即可得到雷公藤红素的A晶型，为红色粉末。

[0095] 实施例6

[0096] 取20mg雷公藤红素原料，加入1mL二氯甲烷和正庚烷的混合溶剂(体积比1:4)，25℃下混悬2天，离心后取粉末状固体，真空干燥后，放入150℃烘箱中加热，即可得到雷公藤红素的A晶型，为红色粉末。

[0097] 实施例7

[0098] 取50mg雷公藤红素原料，加入3mL二氯甲烷和正庚烷的混合溶剂(体积比1:4)，25℃下混悬2天，离心后取粉末状固体，真空干燥后，放入150℃烘箱中加热，即可得到雷公藤红素的A晶型，为红色粉末。

[0099] 实施例8

[0100] 取30mg雷公藤红素原料，加入0.5mL硝基甲烷溶剂，25℃下混悬2天，离心后取粉末状固体，真空干燥后，放入150℃烘箱中加热，即可得到雷公藤红素的A晶型，为红色粉末。实施例2～8中的制备的雷公藤红素的A晶型，通过X-射线粉末衍射(XRPD)、热重分析(TG)、差示扫描量热分析(DSC)、吸湿性分析(DVS)、红外(IR)以及拉曼(Raman)光谱等固态方法分析后，其结果同实施例1制备的雷公藤红素的A晶型基本一致。

[0101] 实施例9

[0102] 取40mg雷公藤红素原料，加入0.5mL乙酸乙酯溶剂，在50℃下混悬1天，离心后取粉末状固体，真空干燥后即可得到雷公藤红素的B晶型，为红色粉末。对实施例9制得的雷公藤红素的B晶型X-射线粉末衍射分析，结果见图8。对实施例9制得的雷公藤红素的B晶型热失重分析，结果见图9。从图9中可以看出，这种B晶型为非水合物或非溶剂合物。对实施例9制得的雷公藤红素的B晶型差示扫描量热分析，结果见图10。

[0103] 并且，实施例9制得的雷公藤红素的B晶型还通过吸湿性分析(DVS)、红外(IR)以及拉曼(Raman)光谱等固态方法进行了分析，其分析结果分别见图11、图12和图13。

[0104] 实施例10

[0105] 取20mg雷公藤红素原料，加入1mL石油醚溶剂，在50℃下混悬1天，离心后取粉末状固体，真空干燥后即可得到雷公藤红素的B晶型，为红色粉末。

[0106] 实施例11

[0107] 取20mg雷公藤红素原料，加入1mL甲醇溶剂，超声得到澄清溶液，在室温下挥发干燥即可得到雷公藤红素的B晶型，为红色粉末。

[0108] 实施例12

[0109] 取20mg雷公藤红素原料，加入1mL乙酸异丙酯溶剂，超声得到澄清溶液，在室温下挥发干燥即可得到雷公藤红素的B晶型，为红色粉末。

[0110] 实施例10～12中的制备的雷公藤红素的B晶型，通过X-射线粉末衍射(XRPD)、热重分析(TG)、差示扫描量热分析(DSC)、吸湿性分析(DVS)、红外(IR)以及拉曼(Raman)光谱等固态方法分析后，其结果同实施例9制备的雷公藤红素的B晶型基本一致。

[0111] 实施例13

[0112] 雷公藤红素两种晶型的稳定性实验：

[0113] 实验条件：将实施例1制得的雷公藤红素的A晶型和实施例9制备的雷公藤红素的B晶型，铝箔塑封，置于药物稳定性存放箱内，维持温度在40℃，相对湿度75％的条件下分别存放0天(0d)、5天(5d)、10天(10d)、15天(15d)、30天(30d)，45天(45d)取样，采用XRPD对所取样品进行X-射线粉末衍射检测。

[0114] 对不同存放天数的A晶型和B晶型进行XRPD分析所得的结果分别见图7和图14。

[0115] 从图7和14中可以看出，雷公藤红素的两种晶型均具有良好的稳定性。

[0116] 实施例14

[0117] 雷公藤红素的A、B晶型的平衡溶解度试验：

[0118] 实验使用实施例1制得的雷公藤红素的A晶型和实施例9制备的雷公藤红素的B晶型进行测试。

[0119] 实验方法：

[0120] 1)参照Cryst.Growth Des.2014,14,4562-4573中的方法配制含有0.5％(w/v)吐温的pH为2.0的甘氨酸-盐酸缓冲液，含有0.5％(w/v)吐温的pH为4.6的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液，含有0.5％(w/v)吐温的pH为6.8的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液。

[0121] 2)取雷公藤红素的两种晶型各3mg，每种晶型的样品平均分为三份。向每种晶型的三份样品中加入1mL步骤(1)中配制好的0.5％(w/v)吐温的pH为2.0的甘氨酸-盐酸缓冲液，含有0.5％(w/v)吐温的pH为4.6的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液或含有0.5％(w/v)吐温的pH为6.8的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液后，在室温下搅拌24h。

[0122] 3)搅拌24h后，离心过滤取上清液，用高效液相色谱监测每种pH下A晶型和B晶型的雷公藤红素的浓度。

[0123] 试验结果见图15。显然，雷公藤红素的A晶型平衡溶解度更高。