苯基吡啶类化合物及其应用

摘要

本发明公开了如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物及其在降糖药物制备中的应用。具体地，本发明公开了式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物或其盐以及其在制备用于治疗和/或预防非胰岛素依赖性糖尿病、高血糖或胰岛素抗性的药物中的应用。本发明的苯基吡啶类化合物及其盐对DPP‑4具有良好的抑制效果，具有良好的市场应用前景；此外，还为DPP‑4抑制剂的研发提供了一个新方向。

权利要求

1.一种如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物或其盐，

其中，X选自N且Y选自CH，或X选自CH且Y选自N，R1选自H、C1-C6的烷基、羧基、烷氧基甲酰基、氨基甲酰基、N-烷基氨基甲酰基或N,N-二甲基氨基甲酰基，R2选自H、甲基、乙基、环己基甲基或苄基；所述C1-C6的烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基或异戊基；所述烷氧基甲酰基中的烷氧基选自甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基或异戊氧基；所述N-烷基氨基甲酰基中的烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、或叔丁基。

2.如权利要求1所述的苯基吡啶类化合物或其盐，其特征在于：X选自N。

3.如权利要求2所述的苯基吡啶类化合物或其盐，其特征在于：Y选自CH，R1选自H或甲基且R2选自H、甲基、乙基、环己基甲基或苄基。

4.如权利要求2所述的苯基吡啶类化合物或其盐，其特征在于：Y选自CH，R1选自羧基、乙氧甲酰基、氨基甲酰基或N-甲基氨基甲酰基，且R2选自H。

5.如权利要求1所述的苯基吡啶类化合物或其盐，其特征在于：X选自CH，Y选自N，R1选自H或N,N-二甲基氨基甲酰基，且R2选自H。

6.如权利要求1-5任一项所述的苯基吡啶类化合物或其盐，其特征在于：所述的如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物的盐是指所述的如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物与酸所形成的盐，所述的酸为有机酸或无机酸，所述的有机酸选自甲酸、乙酸、三氟乙酸、苹果酸、马来酸、富马酸、琥珀酸、苯甲酸、甲磺酸或苯磺酸；所述的无机酸为盐酸、氢溴酸、磷酸、磷酸氢盐、硫酸或硫酸氢盐。

7.如权利要求6所述的苯基吡啶类化合物或其盐，其特征在于：所述的有机酸选自乙酸或三氟乙酸；所述的无机酸为盐酸、氢溴酸或磷酸。

8.如权利要求1-5任意一项所述的苯基吡啶类化合物或其盐的制备方法，其包括下述任一方法：方法一：包括如下步骤：在溶剂中，化合物Ⅱ经无机碱水解或有机碱氨解或胺解得到化合物Ⅰ；任选的，化合物Ⅰ与酸酸碱反应而形成盐；

其中，化合物I中的X、Y以及R2与化合物II的中的X、Y以及R2定义及范围相同，并同上述权利要求1-5任一项中的化合物Ⅰ中的X、Y以及R2定义及范围相同；而化合物Ⅱ中的R3选自乙氧甲酰基；当碱为无机碱时，化合物Ⅰ中的R1为羧基；当有机碱为氨时，化合物Ⅰ中的R1为氨基甲酰基；当有机碱为甲胺时，化合物Ⅰ中的R1为N-甲基氨基甲酰基；

方法二：包括如下步骤：在溶剂中，还原体系作用下，将化合物Ⅲ的氰基-CN进行氢化还原反应，得到化合物Ⅰ；任选的，化合物Ⅰ与酸酸碱反应而形成盐；

其中，化合物I中的X、Y、R1以及R2与化合物III的中的X、Y、R1以及R2定义及范围相同，并同上述权利要求1-5中任一项的化合物Ⅰ中的X、Y、R1以及R2定义及范围相同。

9.如权利要求8所述的苯基吡啶类化合物或其盐的制备方法，其特征在于：其中方法一中：化合物Ⅱ中的X选自N，Y选自CH，R2选自H，R3选自乙氧甲酰基；当碱为无机碱时，化合物Ⅰ中的R1选自羧基；当有机碱为氨时，化合物Ⅰ中的R1选自氨基甲酰基；当有机碱为甲胺时，化合物Ⅰ中的R1选自N-甲基氨基甲酰基。

10.如权利要求8所述的苯基吡啶类化合物或其盐的制备方法，其特征在于：其中方法二中：化合物Ⅲ中的X选自N，Y选自CH，R1选自甲基且R2选自H、甲基、乙基、环己基甲基或苄基；或者X选自N，Y选自CH，R1选自H或乙氧甲酰基，且R2选自H；或者X选自CH，Y选自N，R1选自H或N,N-二甲基氨基甲酰基，且R2选自H；化合物Ⅰ中的取代基同化合物Ⅲ中的相应取代基。

11.如权利要求8或9中所述的苯基吡啶类化合物或其盐的制备方法，其特征在于：在制备化合物Ⅰ的方法一中，所述的溶剂为醚类溶剂、醇类溶剂、腈类溶剂和水中的一种或多种；

所述的无机碱为氢氧化钾、氢氧化钠和氢氧化锂中的一种或多种；所述的无机碱与所述的化合物Ⅱ的摩尔比为1:1～5:1；所述的有机碱与所述的化合物Ⅱ的体积质量比为10mL/g～

50mL/g；所述的水解、氨解或胺解反应的温度为-10℃～50℃。

12.如权利要求8或10中所述的苯基吡啶类化合物或其盐的制备方法，其特征在于：在制Ⅰ的方法二中，所述的溶剂为醚类溶剂、醇类溶剂、有机酸和水中的一种或多种；所述的还原体系为雷尼镍和水合肼的组合试剂、雷尼镍和氢气的组合试剂、雷尼镍和甲酸的组合试剂、硼氢化钠和六水合氯化钴的组合试剂或LiAlH4；所述的还原反应的温度为0℃～100℃。

13.用于合成如权利要求1所述的苯基吡啶类化合物或其盐的中间体，化合物Ⅱ、化合物Ⅲ，其结构式如下：式Ⅱ中，X选自N，Y选自CH，R2选自H，R3选自乙氧甲酰基；

式Ⅲ中，X选自N，Y选自CH，R1选自甲基且R2选自H、甲基、乙基、环己基甲基或苄基；

或X选自N，Y选自CH，R1选自H、乙氧甲酰基，且R2选自H；

或X选自CH，Y选自N，R1选自H或N,N-二甲基氨基甲酰基，且R2选自H。

14.一种药物组合物，其特征在于，包含如权利要求1-5任意一项所述的如式I所示的苯基吡啶类化合物或其盐以及一种或多种药学上可接受的载体。

15.权利要求1-5任意一项所述的苯基吡啶类化合物或其盐在制备人二肽基肽酶-4抑制剂中的应用。

16.权利要求1-5任意一项所述的苯基吡啶类化合物或其盐在制备用于治疗和/或预防非胰岛素依赖性糖尿病、高血糖或胰岛素抗性的药物中的应用。

说明书

苯基吡啶类化合物及其应用

技术领域

[0001] 本发明属于新药设计与合成领域，具体涉及新型的苯基吡啶类化合物及其在降糖药物制备中的应用。

背景技术

[0002] 二肽基肽酶-4(Dipeptidyl peptidase-4,简称DPP-4酶或DPP-4)是降糖药研究领域的一个重要靶点，于1966年首次在大鼠肝脏中分离得到，2003年确定其蛋白质三维结构。DPP-4是以二聚体形式存在的高特异性丝氨酸蛋白酶，它的天然底物为胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和葡萄糖促胰岛素多肽(GIP)，两者均具有促进胰岛素分泌的功能。抑制DPP-4可有效提高体内GLP-1和GIP水平，进而通过促进胰岛素分泌发挥降糖作用。DPP-4抑制剂可有效避免传统降糖药物所导致的低血糖、体重增加、β-细胞功能损伤等不良反应，在用药安全性方面具有显著的优势，被普遍认为是一类很有前景的降糖药物。

[0003] 近年来涌现了许多结构新颖、强效高选择性的“列汀”类的DPP-4抑制剂；例如默克公司研发的磷酸西格列汀(1,Sitagliptin phosphate,2006年美国上市)，诺华公司研究开发的维格列汀(2,Vildagliptin,2007年欧洲上市)及百时美施贵宝公司与阿斯利康公司合作开发的沙格列汀(3,Saxagliptin,2009年美国上市)，武田公司的苯甲酸阿格列汀(4,Alogliptin benzoate,2010年日本上市)和琥珀酸曲格列汀(5,Trelagliptin succinate,2015年日本上市)，勃林格殷格翰公司的利格列汀(6,Linagliptin,2011年美国上市)，三菱田边与第一三共合作开发的特力利汀(7,Teneligliptin,2012年日本上市)，LG Life Sciences公司的吉格列汀(8,Gemigliptin,2012年韩国上市)及Sanwa Kagaku Kenkyusho公司的阿拉格列汀(9,Anagliptin,2012年日本上市)。

[0004]

[0005]

[0006] 目前，含有氨甲基联芳基的在研DPP-4抑制剂成为降糖药物开发的一个新方向。因此，研究结构新颖、氨甲基苯基吡啶类化合物对开发潜在的DPP-4抑制剂具有重要意义。

发明内容

[0007] 本发明所要解决的技术问题是提供了一种与现有技术完全不同的苯基吡啶类化合物、中间体、制备方法、药物组合物及其应用。本发明的苯基吡啶类化合物或其盐对于DPP-4具有良好抑制活性，为DPP-4抑制剂的研发提供了一个新方向，具有良好的应用前景。

[0008] 一方面，本发明提供了如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物或其盐，

[0009]

[0010] 其中，X选自N或CH，Y选自N或CH，R1选自H、C1-C6的烷基、羧基、烷氧基甲酰基、氨基甲酰基、N-烷基氨基甲酰基或N,N-二甲基氨基甲酰基，R2选自H、甲基、乙基、环己基甲基或苄基；且X及Y不同时选自CH；所述C1-C6的烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、环丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基或环戊基；所述烷氧基甲酰基中的烷氧基选自甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、环丙氧基、正丁氧基、环丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、异戊氧基或环戊氧基；所述N-烷基氨基甲酰基中的烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、环丁基或叔丁基。

[0011] 优选地，如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物或其盐，X选自N。

[0012] 优选地，如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物或其盐，X选自N，Y选自N或CH，R1选自H、甲基、羧基、乙氧甲酰基、氨基甲酰基、N-甲基氨基甲酰基或N,N-二甲基氨基甲酰基，R2选自H、甲基、乙基、环己基甲基或苄基。

[0013] 优选地，如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物或其盐，X选自N，Y选自CH，R1选自H或甲基，R2选自H、甲基、乙基、环己基甲基或苄基。

[0014] 优选地，如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物或其盐，X选自N，Y选自CH，R1选自羧基、乙氧甲酰基、氨基甲酰基或N-甲基氨基甲酰基，且R2选自H。

[0015] 优选地，如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物或其盐，X选自CH，Y选自N，R1选自H或N,N-二甲基氨基甲酰基，且R2选自H。

[0016] 如上所述的如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物的盐是指所述的如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物与酸所形成的盐，所述的酸为有机酸或无机酸，所述的有机酸选自甲酸、乙酸、三氟乙酸、苹果酸、马来酸、富马酸、琥珀酸、苯甲酸、甲磺酸、苯磺酸、乙酸、丙酸、丁酸、辛酸、己二酸、乙二酸、丙二酸、丁二酸、酒石酸、苯乙酸、邻苯二甲酸、对苯二甲酸、戊酸、己酸、癸酸、硬脂酸、软脂酸、丙烯酸等；所述的无机酸为盐酸、氢溴酸、磷酸、磷酸氢盐、硫酸或硫酸氢盐等。

[0017] 优选地，如上所述的苯基吡啶类化合物的盐，所述的有机酸选自甲酸、乙酸、三氟乙酸、苹果酸、马来酸、富马酸、琥珀酸、苯甲酸、甲磺酸或苯磺酸。

[0018] 更优选地，如上所述的苯基吡啶类化合物的盐，所述的有机酸选自乙酸或三氟乙酸；所述的无机酸为盐酸、氢溴酸或磷酸。

[0019] 如上所述的苯基吡啶类化合物的盐，是通过苯基吡啶类化合物与酸酸碱反应而形成的盐。其酸碱反应为本领域常规的技术人员所知悉。

[0020] 再一方面，本发明提供了如上所述的如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物的制备方法，其为下述任一方法：

[0021] 方法一：包括如下步骤：在溶剂中，化合物Ⅱ经无机碱水解或有机碱氨解或胺解得到化合物Ⅰ；

[0022]

[0023] 其中，化合物I中的X、Y以及R2与化合物II的中的X、Y以及R2定义及范围相同，并同上述化合物Ⅰ中的X、Y以及R2定义及范围相同；而化合物Ⅱ中的R3选自乙氧甲酰基；当碱为无机碱时，化合物Ⅰ中的R1为羧基；当有机碱为氨时，化合物Ⅰ中的R1为氨基甲酰基；当有机碱为甲胺时，化合物Ⅰ中的R1为N-甲基氨基甲酰基。

[0024] 方法二：包括如下步骤：在溶剂中，还原体系作用下，将化合物Ⅲ的氰基-CN进行氢化还原反应，得到化合物Ⅰ；

[0025]

[0026] 其中，化合物I中的X、Y、R1以及R2与化合物III的中的X、Y、R1以及R2定义及范围相同，并同上述化合物Ⅰ中的X、Y、R1以及R2定义及范围相同。

[0027] 优选地，如上所述的苯基吡啶类化合物的制备方法，其特征在于：其中方法一中：化合物Ⅱ中的X选自N，Y选自CH，R2选自H，R3选自乙氧甲酰基；当碱为无机碱时，化合物Ⅰ中的R1选自羧基；当有机碱为氨时，化合物Ⅰ中的R1选自氨基甲酰基；当有机碱为甲胺时，化合物Ⅰ中的R1选自N-甲基氨基甲酰基。

[0028] 优选地，如上所述的苯基吡啶类化合物的制备方法，其特征在于：其中方法二中：化合物Ⅲ中的X选自N，Y选自CH，R1选自甲基且R2选自H、甲基、乙基、环己基甲基或苄基；或者X选自N，Y选自CH，R1选自H或乙氧甲酰基，且R2选自H；或者X选自CH，Y选自N，R1选自H或N,N-二甲基氨基甲酰基，且R2选自H；化合物Ⅰ中的取代基同化合物Ⅲ中的相应取代基。

[0029] 更优选地，如上所述的苯基吡啶类化合物的制备方法，其特征在于：在制备化合物Ⅰ的方法一中，所述的溶剂为醚类溶剂、醇类溶剂、腈类溶剂和水中的一种或多种；所述的无机碱为氢氧化钾、氢氧化钠和氢氧化锂中的一种或多种；所述的无机碱与所述的化合物Ⅱ的摩尔比为1:1～5:1；所述的有机碱与所述的化合物Ⅱ的体积质量比为10mL/g～50mL/g；所述的水解、氨解或胺解反应的温度为-10℃～50℃。

[0030] 更优选地，如上所述的苯基吡啶类化合物或其盐的制备方法，其特征在于：在制备化合物Ⅰ的方法二中，所述的溶剂为醚类溶剂、醇类溶剂、有机酸和水中的一种或多种；所述的还原体系为雷尼镍和水合肼的组合试剂、雷尼镍和氢气的组合试剂、雷尼镍和甲酸的组合试剂、硼氢化钠和六水合氯化钴的组合试剂或LiAlH4；所述的还原反应的温度为0℃～100℃。

[0031] 如上所述的本发明的苯基吡啶类化合物或其盐的制备方法，本领域的常规技术人员可就具体的优化的实验或反应条件，可依据常识进行常规选取。例如，反应溶剂通过反应类型进行选取，而反应的温度可通过反应类别及反应所采用的溶剂进行选取，反应的物料配比也可以依据反应类型及对各类物料及试剂成本的考虑来适当选取，此外，反应进行程度以及反应时间的确认也可以通过的常规的层析方法(例如气相、液相以及薄层层析选取)。

[0032] 但为了进一步的阐明如上所述的本发明的苯基吡啶类化合物或其盐的制备方法，以下就通式中的部分化合物为例，进行更进一步详细说明。

[0033] 本发明还提供了所述的如式Ⅰ所示的苯基吡啶类化合物或其盐的制备方法，其为下述任一方法：

[0034] 方法一包括如下步骤：在溶剂中，化合物Ⅱ经无机碱水解或有机碱氨解或胺解得到化合物Ⅰ；其中，化合物Ⅱ的结构中X选自N，Y选自CH，R2选自H，R3选自乙氧甲酰基；

[0035]

[0036] 当碱为无机碱时，得到的化合物Ⅰ的结构中R1选自羧基；当有机碱为氨(例如氨水或氨气)时，得到的化合物Ⅰ的结构中R1选自氨基甲酰基；当有机碱为甲胺时，得到的化合物Ⅰ的结构中R1选自N-甲基氨基甲酰基；

[0037] 方法二包括如下步骤：在溶剂中，还原体系作用下，将化合物Ⅲ进行还原反应，得到化合物Ⅰ；

[0038]

[0039] 其中，

[0040] 化合物Ⅲ的结构中X选自N，Y选自CH，R1选自甲基且R2选自H、甲基、乙基、环己基甲基或苄基；

[0041] 或者X选自N，Y选自CH，R1选自H、乙氧甲酰基，且R2选自H；

[0042] 或者X选自CH，Y选自N，R1选自H或N,N-二甲基氨基甲酰基，且R2选自H。

[0043] 制备化合物Ⅰ的方法一可以为本领域中该类水解或氨解反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物Ⅱ与有机溶剂、碱混合，进行水解、氨解或胺解反应。

[0044] 在制备化合物Ⅰ的方法一中，所述的溶剂优选醚类溶剂、醇类溶剂、腈类溶剂和水中的一种或多种；进一步优选醇类溶剂。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃。所述的醇类溶剂优选甲醇和/或乙醇。所述的腈类溶剂优选乙腈。

[0045] 在制备化合物Ⅰ的方法一中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅱ的体积质量比优选5mL/g～50mL/g，进一步优选10mL/g～30mL/g。

[0046] 在制备化合物Ⅰ的方法一中，所述的无机碱优选氢氧化钾、氢氧化钠和氢氧化锂中的一种或多种，进一步优选氢氧化钠。

[0047] 在制备化合物Ⅰ的方法一中，所述的无机碱与所述的化合物Ⅱ的摩尔比优选1:1～5:1，进一步优选1:1～3:1。

[0048] 在制备化合物Ⅰ的方法一中，所述的有机碱与所述的化合物Ⅱ的体积质量比优选10mL/g～50mL/g，进一步优选20mL/g～50mL/g。

[0049] 在制备化合物Ⅰ的方法一中，所述的水解、氨解或胺解反应的温度优选-10℃～50℃，进一步优选0℃～30℃。

[0050] 在制备化合物Ⅰ的方法一中，所述的水解、氨解或胺解反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅱ消失时作为反应得终点，反应时间优选0.5h～6h，进一步优选0.5h～3h。

[0051] 制备化合物Ⅰ的方法一优选包括以下任一后处理步骤：当R1选自羧基时，优选采用方法(1)。当R1选自氨基甲酰基或N-甲基氨基甲酰基时，优选采用方法(2)。

[0052] 方法(1)包括如下步骤：反应结束后，将反应体系的pH值调至7，析出固体抽滤，有机溶剂洗涤，干燥，即可。其中，优选采用摩尔浓度为2mol/L盐酸调节pH值。所述的用于洗涤的有机溶剂优选醇类溶剂和/或酯类溶剂，所述的醇类溶剂优选甲醇和/或乙醇，所述的酯类溶剂优选乙酸乙酯。

[0053] 方法(2)包括如下步骤：反应结束后，抽滤，有机溶剂洗涤，干燥，即可。其中，所述的用于洗涤的有机溶剂优选醇类溶剂和/或酯类溶剂，所述的醇类溶剂优选甲醇和/或乙醇，所述的酯类溶剂优选乙酸乙酯。

[0054] 在制备化合物Ⅰ的方法一中，所述的化合物Ⅱ采用制备化合物Ⅰ的方法二的类似方法制备：在溶剂中，还原体系作用下，将化合物Ⅲ进行还原，得到化合物Ⅱ；

[0055]

[0056] 其中，化合物Ⅲ的结构中X选自N，Y选自CH，R1选自R3选自乙氧甲酰基，R2选自H；再按照制备化合物Ⅰ的方法一，制得化合物Ⅰ即可。

[0057] 制备化合物Ⅰ(以及由化合物Ⅲ，其中X选自N，Y选自CH，R1选自R3选自乙氧甲酰基，R2选自H制备化合物Ⅱ)的方法二可以为本领域中该类还原反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：

[0058] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，所述的还原体系优选雷尼镍/水合肼(雷尼镍和水合肼的组合试剂，Raney Ni/水合肼)、雷尼镍/氢气(雷尼镍和氢气的组合试剂，Raney Ni/H2)、雷尼镍/甲酸(雷尼镍和甲酸的组合试剂)、硼氢化钠/六水合氯化钴(硼氢化钠和六水合氯化钴的组合试剂)或LiAlH4；

[0059] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，所述的溶剂优选醚类溶剂、醇类溶剂、有机酸和水中的一种或多种；所述的醇类溶剂优选C1～C4的醇溶剂；所述的C1～C4的醇溶剂优选甲醇、乙醇、丙醇和异丙醇中的一种或多种；所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的有机酸优选甲酸和/或乙酸。

[0060] 在本文中，Raney Ni也称为雷尼镍，二者可互换。

[0061] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅲ的体积质量比优选5mL/g～50mL/g，进一步优选10mL/g～30mL/g。

[0062] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，所述的还原剂与所述的化合物Ⅲ的摩尔比优选1:1～10:1，进一步优选1:1～3:1。

[0063] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，所述的还原反应的温度优选0℃～100℃。

[0064] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，所述的还原反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅲ消失时作为反应得终点，反应时间优选1h～36h。

[0065] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，当采用雷尼镍和水合肼的组合试剂做还原体系时，优选采用方法1：将化合物Ⅲ与溶剂混合，在雷尼镍催化下，滴加水合肼，进行还原反应。

[0066] 方法1中，所述的溶剂优选醚类溶剂，所述的醚类溶剂优选四氢呋喃。

[0067] 方法1中，所述的水合肼优选常规市售水合肼试剂，进一步优选质量百分比为50％～85％的水合肼试剂，再进一步优选质量百分比为85％的水合肼试剂，所述的质量百分比是指水合肼的质量占水合肼溶液总质量的百分比。

[0068] 方法1中，所述的还原反应的温度优选0℃～60℃，进一步优选10℃～30℃。

[0069] 方法1中，所述的还原反应的时间优选1h～10h，进一步优选2h～6h。

[0070] 方法1优选包括以下后处理步骤：反应结束后，抽滤、浓缩，经柱层析或重结晶纯化，即可。所述的柱层析和重结晶的方法和条件按照本领域常规的柱层析和重结晶的方法和条件进行选择。

[0071] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，当采用雷尼镍和氢气的组合试剂做还原体系时，优选采用方法2：密闭体系中，将化合物Ⅲ与氨气的溶液混合，在雷尼镍催化下，与氢气进行还原反应。

[0072] 方法2中，所述的氨气的溶液中所用的溶剂优选醇类溶剂和/或水；所述的醇类溶剂优选C1～C4的醇溶剂；所述的C1～C4的醇溶剂优选甲醇或乙醇。所述的氨气的溶液优选氨气的乙醇溶液或氨气的甲醇溶液。所述的氨气的溶液的摩尔浓度优选1mol/L～10mol/L，进一步优选2mol/L～5mol/L.所述的摩尔浓度是指10℃～30℃时，氨气的摩尔量与氨气的溶液的体积的比例。

[0073] 方法2中，所述的雷尼镍优选常规市售雷尼镍试剂，进一步优选质量百分比为50％～95％的雷尼镍试剂，所述的质量百分比是指镍的质量占雷尼镍试剂总质量的百分比。

[0074] 方法2中，所述的还原反应的温度优选20℃～60℃，进一步优选20℃～35℃。

[0075] 方法2中，所述的还原反应的压强优选0.1MPa～1MPa，进一步优选0.3MPa～0.6MPa。

[0076] 方法2中，所述的还原反应的时间优选1h～20h，进一步优选2h～12h。

[0077] 方法2优选包括以下后处理步骤：反应结束后，抽滤、浓缩，经柱层析或重结晶纯化，即可。所述的柱层析和重结晶的方法和条件按照本领域常规的柱层析和重结晶的方法和条件进行选择。

[0078] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，当采用雷尼镍和甲酸的组合试剂做还原体系时，优选采用方法3：将化合物Ⅲ与甲酸混合，在雷尼镍催化下进行还原反应。

[0079] 方法3中，所述的溶剂优选羧酸，所述的羧酸优选甲酸。

[0080] 方法3中，所述的还原反应的温度优选0℃～100℃，进一步优选20℃～50℃。

[0081] 方法3中，所述的还原反应的时间优选1h～36h，进一步优选6h～24h。

[0082] 方法3优选包括以下后处理步骤：反应结束后，抽滤、浓缩，经柱层析或重结晶纯化，即可。所述的柱层析和重结晶的方法和条件按照本领域常规的柱层析和重结晶的方法和条件进行选择。

[0083] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，当采用硼氢化钠和六水合氯化钴的组合试剂做还原体系时，优选采用方法4：将化合物Ⅲ、六水合氯化钴与溶剂混合，0℃下分批加入硼氢化钠，再升至室温进行还原反应。

[0084] 方法4中，所述的溶剂优选醇类溶剂，所述的醇类溶剂优选C1～C4的醇溶剂；所述的C1～C4的醇溶剂优选甲醇和/或乙醇。

[0085] 方法4中，所述的还原反应的时间优选1h～20h，进一步优选2h～10h。

[0086] 方法4优选包括以下后处理步骤：反应结束后，冰水浴冷却下，滴加饱和的氯化铵水溶液，水相以有机溶剂萃取，干燥、抽滤、浓缩，经柱层析或重结晶纯化，即可。所述的有机溶剂优选酯类溶剂，所述的酯类溶剂优选乙酸乙酯。所述的柱层析和重结晶的方法和条件按照本领域常规的柱层析和重结晶的方法和条件进行选择。

[0087] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，当采用LiAlH4做还原体系时，优选采用方法5：在-10℃～0℃下，将化合物Ⅲ与溶剂形成的溶液滴入LiAlH4与溶剂的混合液中，再升至室温进行还原反应。

[0088] 方法5中，所述的溶剂优选醚类溶剂，所述的醚类溶剂优选四氢呋喃。

[0089] 方法5优选包括以下后处理步骤：反应结束后，冰水浴冷却下，依次滴加水和15％的氢氧化钠水溶液，抽滤、浓缩，经柱层析或重结晶纯化，即可。所述的柱层析和重结晶的方法和条件按照本领域常规的柱层析和重结晶的方法和条件进行选择。

[0090] 在制备化合物Ⅰ的方法二中，所述的化合物Ⅲ采用下述任一方法制备：

[0091] 方法一包括如下步骤：在溶剂中，碱的作用下，化合物Ⅳ与1,2,4-三唑发生取代反应，得到化合物Ⅲ；

[0092]

[0093] 其中，化合物Ⅲ的结构中X选自N，Y选自CH，R1选自乙氧甲酰基，R2选自H；再按照制备化合物Ⅱ的方法，制得化合物Ⅱ即可。

[0094] 方法二包括如下步骤：在气体保护下，溶剂中，碱的作用下，将化合物Ⅴ与R2X进行取代反应，得到化合物Ⅲ；

[0095]

[0096] 其中，化合物Ⅴ的结构中X选自N，Y选自CH，R1选自甲基，R2X的结构中R2选自甲基、乙基、环己基甲基或苄基，X选自I或Br；再按照制备化合物Ⅰ的方法二，制得化合物Ⅰ即可；

[0097] 方法三包括如下步骤：在溶剂中，化合物Ⅵ与1,2,4-三唑发生Mitsunobu反应得到化合物Ⅲ；

[0098]

[0099] 其中，化合物Ⅵ的结构中X选自N，Y选自CH，R1选自H或甲基，R2选自H；或者X选自CH，Y选自N，R1选自H或N,N-二甲基氨基甲酰基，且R2选自H；再按照制备化合物Ⅰ的方法二，制得化合物Ⅰ即可。

[0100] 制备化合物Ⅲ的方法一可以为本领域中该类取代反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：化合物Ⅳ与溶剂混合，在碱的作用下，与1,2,4-三唑发生取代反应。

[0101] 在制备化合物Ⅲ的方法一中，所述的溶剂优选卤代烃类溶剂、醚类溶剂、腈类溶剂、酰胺类溶剂和醇类溶剂中的一种或多种；进一步优选腈类溶剂。所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃。所述的腈类溶剂优选乙腈。所述的酰胺类溶剂优选N,N-二甲基甲酰胺。所述的醇类溶剂优选甲醇和/或乙醇。

[0102] 在制备化合物Ⅲ的方法一中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅴ的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～30mL/g。

[0103] 在制备化合物Ⅲ的方法一中，所述的碱优选碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、三乙胺、二异丙基乙胺、氢氧化钾和氢氧化钠中的一种或多种；进一步优选碳酸钾。

[0104] 在制备化合物Ⅲ的方法一中，所述的碱与所述的化合物Ⅴ的摩尔比优选1:1～3:1，进一步优选1:1～2:1。

[0105] 在制备化合物Ⅲ的方法一中，所述的1,2,4-三唑与所述的化合物Ⅴ的摩尔比优选1:1～3:1，进一步优选1.1:1～2.5:1。

[0106] 在制备化合物Ⅲ的方法一中，所述的取代反应的温度优选-10℃～50℃，进一步优选10℃～35℃。

[0107] 在制备化合物Ⅲ的方法一中，所述的还原反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅴ消失时作为反应得终点，反应时间优选0.5h～12h，进一步优选0.5h～3h。

[0108] 制备化合物Ⅲ的方法一优选包括以下后处理步骤：反应结束后，抽滤、浓缩，经柱层析纯化，即可。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。

[0109] 在制备化合物Ⅲ的方法一中，所述的化合物Ⅳ采用下述方法制备：在溶剂中，将化合物Ⅶ与卤化试剂进行卤化反应，此处的卤化试剂优选溴化试剂，得到化合物Ⅳ；

[0110]

[0111]

[0112] 再按照制备化合物Ⅲ的方法一，制得化合物Ⅲ即可。

[0113] 制备化合物Ⅳ的方法可以为本领域中该类卤化反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：

[0114] 制备化合物Ⅳ的方法优选包括以下步骤：在0℃～10℃下，将卤化试剂滴入化合物Ⅶ与溶剂形成的溶液中，进行卤化反应。

[0115] 在制备化合物Ⅳ的方法中，所述的溶剂优选卤代烃类溶剂、醚类溶剂和芳烃类溶剂中的一种或多种；进一步优选卤代烃类溶剂。所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃。所述的芳烃类溶剂优选甲苯。

[0116] 在制备化合物Ⅳ的方法中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅶ的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0117] 在制备化合物Ⅳ的方法中，所述的卤化试剂可以是氯化试剂或溴化试剂,所述的氯化试剂优选氯化亚砜、三氯化磷、五氯化磷或三氯氧磷；所述的溴化试剂优选三溴化磷、五溴化磷或三溴氧磷，进一步优选三溴化磷。就活性而言，溴化试剂优于氯化试剂；而从成本考虑，一般而言则是氯化试剂比溴化试剂价廉。

[0118] 在制备化合物Ⅳ的方法中，所述的卤化试剂与所述的化合物Ⅶ的摩尔比优选1:1～3:1，进一步优选1:1～2:1。

[0119] 在制备化合物Ⅳ的方法中，所述的取代反应的温度优选0℃～50℃，进一步优选10℃～35℃。

[0120] 在制备化合物Ⅳ的方法中，所述的卤化反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅶ消失时作为反应得终点，反应时间优选1h～6h，进一步优选1h～3h。

[0121] 制备化合物Ⅳ的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，将反应液加入冰水中，以碱调pH至7，萃取、浓缩，经柱层析纯化，即可。其中，所述的碱优选无机碱，所述的无机碱优选碳酸钠。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。

[0122] 在制备化合物Ⅳ的方法中，所述的化合物Ⅶ采用下述方法制备：在溶剂中，酸的催化下，化合物Ⅷ发生酯化反应，得到化合物Ⅶ；

[0123]

[0124] 再按照化合物Ⅳ的制备方法，制得化合物Ⅳ即可。

[0125] 制备化合物Ⅶ的方法可以为本领域中该类酯化反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将酸滴入化合物Ⅷ与溶剂的混合溶液中，进行酯化反应。

[0126] 在制备化合物Ⅶ的方法中，所述的溶剂优选醚类溶剂、腈类溶剂和醇类溶剂中的一种或多种；进一步优选醇类溶剂。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃。所述的腈类溶剂优选乙腈。所述的醇类溶剂优选乙醇。

[0127] 在制备化合物Ⅶ的方法中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅷ的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0128] 在制备化合物Ⅶ的方法中，所述的酸优选有机酸、无机酸或路易斯酸，所述的有机酸优选对甲基苯磺酸；所述的无机酸优选浓硫酸或氯化氢；所述的路易斯酸优选三氯化铝或三氯化铁；所述的酸进一步优选浓硫酸。

[0129] 在制备化合物Ⅶ的方法中，所述的酸与所述的化合物Ⅷ的摩尔比优选0.1:1～1:1，进一步优选0.1:1～0.8:1。

[0130] 在制备化合物Ⅶ的方法中，所述的取代反应的温度优选30℃～90℃，进一步优选45℃～65℃。

[0131] 在制备化合物Ⅶ的方法中，所述的取代反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅷ消失时作为反应得终点，反应时间优选3h～12h，进一步优选6h～9h。

[0132] 制备化合物Ⅶ的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，以碱调pH至7～8，浓缩，经柱层析纯化，即可。其中，所述的碱优选有机碱，所述的有机碱优选三乙胺。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。

[0133] 在制备化合物Ⅶ的方法中，所述的化合物Ⅷ采用下述方法制备：在溶剂中，还原剂作用下，将化合物Ⅸ进行还原反应，得到化合物Ⅷ；

[0134]

[0135] 再按照化合物Ⅶ的制备方法，制得化合物Ⅶ即可。

[0136] 制备化合物Ⅷ的方法可以为本领域中该类还原反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：

[0137] 制备化合物Ⅷ的方法优选包括以下步骤：将化合物Ⅷ与溶剂混合，在0℃～10℃下，分批加入还原剂，进行还原反应。

[0138] 在制备化合物Ⅷ的方法中，所述的溶剂优选醚类溶剂、醇类溶剂、芳烃类溶剂和水中的一种或多种；所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的醇类溶剂优选C1～C4的醇溶剂；所述的C1～C4的醇溶剂优选甲醇、乙醇、丙醇和异丙醇中的一种或多种；所述的芳烃类溶剂优选甲苯；所述的溶剂进一步优选四氢呋喃和水的混合溶剂；所述的四氢呋喃和水的混合溶剂中四氢呋喃和水的体积比优选1:1～5:1，进一步优选1:1～3:1。

[0139] 在制备化合物Ⅷ的方法中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅸ的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0140] 在制备化合物Ⅷ的方法中，所述的还原剂优选硼氢化钠或二异丁基氢化铝，进一步优选硼氢化钠。

[0141] 在制备化合物Ⅷ的方法中，所述的还原剂与所述的化合物Ⅸ的摩尔比优选1:1～10:1，进一步优选3:1～8:1。

[0142] 在制备化合物Ⅷ的方法中，所述的还原反应的温度优选0℃～60℃，进一步优选15℃～35℃。

[0143] 在制备化合物Ⅷ的方法中，所述的还原反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅸ消失时作为反应得终点，反应时间优选1h～6h，进一步优选1h～3h。

[0144] 制备化合物Ⅷ的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，淬灭反应，以酸调pH至2～3，析出固体，抽滤、干燥，所得的化合物Ⅶ粗品不经进一步纯化，直接投入下步反应。其中，所述的淬灭反应的温度优选-10℃～10℃，进一步优选-10℃～0℃。所述的酸优选盐酸水溶液或乙酸水溶液，所述的盐酸水溶液的摩尔浓度优选1mol/L～1mol/L，所述的乙酸水溶液的质量百分浓度优选50％～60％。

[0145] 在制备化合物Ⅷ的方法中，所述的化合物Ⅸ采用下述方法制备：在溶剂中，氧化剂作用下，将化合物Ⅹ进行氧化反应，得到化合物Ⅸ；

[0146]

[0147] 再按照化合物Ⅷ的制备方法，制得化合物Ⅷ即可。

[0148] 制备化合物Ⅸ的方法可以为本领域中该类氧化反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：

[0149] 制备化合物Ⅸ的方法优选包括以下步骤：在0℃～10℃下，分批将氧化剂加入化合物Ⅹ与溶剂形成的溶液中，进行氧化反应。

[0150] 在制备化合物Ⅸ的方法中，所述的溶剂优选卤代烃类溶剂、醚类溶剂、酮类溶剂和水中的一种或多种；进一步优选酮类溶剂。所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的酮类溶剂优选丙酮。

[0151] 在制备化合物Ⅸ的方法中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅹ的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0152] 在制备化合物Ⅸ的方法中，所述的氧化剂优选三氧化铬和硫酸的组合试剂或高锰酸钾，进一步优选高锰酸钾。

[0153] 在制备化合物Ⅸ的方法中，所述的氧化剂与所述的化合物Ⅹ的摩尔比优选1:1～5:1，进一步优选1:1～3:1。

[0154] 在制备化合物Ⅸ的方法中，所述的氧化反应的温度优选-10℃～50℃，进一步优选15℃～35℃。

[0155] 在制备化合物Ⅸ的方法中，所述的还原反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅹ消失时作为反应的终点，反应时间优选0.5h～5h，进一步优选0.5h～2h。

[0156] 制备化合物Ⅸ的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，减压蒸除溶剂，淬灭反应，以酸调pH至2～3，有机溶剂萃取，合并有机相，无水硫酸镁干燥，抽滤、浓缩，所得的化合物Ⅸ粗品不经进一步纯化，直接投入下步反应。其中，所述的淬灭反应的温度优选-10℃～10℃，进一步优选0℃～5℃。所述的淬灭反应所用的试剂优选亚硫酸钠或硫代硫酸钠，进一步优选亚硫酸钠。所述的酸优选盐酸水溶液，所述的盐酸水溶液的摩尔浓度优选1mol/L～1mol/L。所述的有机溶剂优选酯类溶剂，所述的酯类溶剂优选乙酸乙酯。

[0157] 在制备化合物Ⅸ的方法中，所述的化合物Ⅹ采用下述方法制备：在溶剂中，三氟乙酸酐作用下，将化合物Ⅺ进行重排反应，得到化合物Ⅹ；

[0158]

[0159] 再按照化合物Ⅸ的制备方法，制得化合物Ⅸ即可。

[0160] 制备化合物Ⅸ的方法可以为本领域中该类重排反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物Ⅺ与溶剂、三氟乙酸酐混合，进行重排反应。

[0161] 在制备化合物Ⅹ的方法中，所述的溶剂优选卤代烃类溶剂、醚类溶剂、酮类溶剂和腈类溶剂中的一种或多种；进一步优选卤代烃类溶剂。所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的酮类溶剂优选丙酮；所述的腈类溶剂优选乙腈。

[0162] 在制备化合物Ⅹ的方法中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅺ的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0163] 在制备化合物Ⅹ的方法中，所述的三氟乙酸酐与所述的化合物Ⅺ的体积质量比优选1mL/g～15mL/g，进一步优选1mL/g～5mL/g。

[0164] 在制备化合物Ⅹ的方法中，所述的重排反应的温度优选10℃～90℃，进一步优选25℃～45℃。

[0165] 在制备化合物Ⅹ的方法中，所述的重排反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅺ消失时作为反应的终点，反应时间优选2h～10h，进一步优选3h～5h。

[0166] 制备化合物Ⅹ的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，减压蒸除溶剂，加入醇类溶剂搅拌，滤除不溶物，母液浓缩，所得粗品打浆纯化，即可。其中，所述的醇类溶剂优选甲醇和/或乙醇，进一步优选甲醇。所述的打浆纯化的方法和条件按照本领域常规的打浆纯化的方法和条件进行选择。

[0167] 在制备化合物Ⅹ的方法中，所述的化合物Ⅺ采用下述方法制备：在溶剂中，氧化剂存在下，将化合物Ⅻ进行氧化反应，得到化合物Ⅺ；

[0168]

[0169] 再按照化合物Ⅹ的制备方法，制得化合物Ⅹ即可。

[0170] 制备化合物Ⅺ的方法可以为本领域中该类氧化反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物Ⅻ与溶剂混合，在氧化剂作用下，进行氧化反应。

[0171] 在制备化合物Ⅺ的方法中，所述的溶剂优选卤代烃类溶剂、醚类溶剂、腈类溶剂、有机酸和水中的一种或多种；进一步优选卤代烃类溶剂。所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的腈类溶剂优选乙腈；所述的有机酸优选甲酸和/或乙酸。

[0172] 在制备化合物Ⅺ的方法中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅻ的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0173] 在制备化合物Ⅺ的方法中，所述的氧化剂优选30％双氧水或间氯过氧苯甲酸，进一步优选间氯过氧苯甲酸。

[0174] 在制备化合物Ⅺ的方法中，所述的氧化剂与所述的化合物Ⅻ的摩尔比优选1:1～5:1，进一步优选2:1～4:1。

[0175] 在制备化合物Ⅺ的方法中，所述的氧化反应的温度优选0℃～100℃，进一步优选15℃～35℃。

[0176] 在制备化合物Ⅺ的方法中，所述的氧化反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅻ消失时作为反应的终点，反应时间优选12h～36h，进一步优选20h～25h。

[0177] 制备化合物Ⅺ的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，滤除不溶物，淬灭反应，有机相经碱液洗涤，水相再以有机溶剂萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，抽滤、浓缩，所得的化合物Ⅺ粗品不经进一步纯化，直接投入下步反应。其中，所述的淬灭反应的温度优选-10℃～10℃，进一步优选0℃～5℃。所述的淬灭反应所用的试剂优选亚硫酸钠或硫代硫酸钠，进一步优选亚硫酸钠。所述的碱液优选饱和碳酸氢钠水溶液。所述的有机溶剂优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。

[0178] 在制备化合物Ⅺ的方法中，所述的化合物Ⅻ采用下述方法制备：在溶剂中，将化合物XIII与乙酰丙酮酸乙酯进行环合反应，得到化合物Ⅻ；

[0179]

[0180] 再按照化合物Ⅺ的制备方法，制得化合物Ⅺ即可。

[0181] 制备化合物Ⅻ的方法可以为本领域中该类环合反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物XIII与溶剂、乙酰丙酮酸乙酯混合，进行环合反应。

[0182] 在制备化合物Ⅻ的方法中，所述的溶剂优选醚类溶剂、腈类溶剂和有机酸中的一种或多种；进一步优选有机酸。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的腈类溶剂优选乙腈；所述的有机酸优选甲酸和/或乙酸，进一步优选乙酸。

[0183] 在制备化合物Ⅻ的方法中，所述的溶剂与所述的化合物XIII的体积质量比优选1mL/g～15mL/g，进一步优选1mL/g～5mL/g。

[0184] 在制备化合物Ⅻ的方法中，所述的乙酰丙酮酸乙酯与所述的化合物XIII的摩尔比优选1:1～3:1，进一步优选1:1～2:1。

[0185] 在制备化合物Ⅻ的方法中，所述的环合反应的温度优选0℃～60℃，进一步优选15℃～35℃。

[0186] 在制备化合物Ⅻ的方法中，所述的环合反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物XIII消失时作为反应的终点，反应时间优选20h～40h，进一步优选24h～36h。

[0187] 制备化合物Ⅻ的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，滤除产品，干燥，滤液加入水中析晶，所得粗品以有机溶剂打浆，合并两部分产品，即可。其中，所述的打浆所用有机溶剂优选醇类溶剂，所述的醇类溶剂溶剂进一步优选甲醇和/或乙醇。所述的打浆纯化的方法和条件按照本领域常规的打浆纯化的方法和条件进行选择。

[0188] 在制备化合物Ⅻ的方法中所述的化合物XIII可以参考文献Journal  of Medicinal Chemistry,2006,49,p.3332-3344报道的方法制备。

[0189] 制备化合物Ⅲ的方法二可以为本领域中该类取代反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：

[0190] 制备化合物Ⅲ的方法二优选包括以下步骤：气体保护下，0℃～10℃下，将化合物Ⅴ与溶剂形成的溶液滴入碱与溶剂的混合液中，再滴加R2X，进行取代反应。

[0191] 在制备化合物Ⅲ的方法二中，所述的“气体保护”中的气体优选氮气、氩气和氦气中的一种或多种

[0192] 在制备化合物Ⅲ的方法二中，所述的溶剂优选亚砜类溶剂、醚类溶剂和酰胺类溶剂中的一种或多种；进一步优选酰胺类溶剂。所述的亚砜类溶剂优选二甲基亚砜；所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的酰胺类溶剂优选N,N-二甲基甲酰胺。

[0193] 在制备化合物Ⅲ的方法二中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅴ的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0194] 在制备化合物Ⅲ的方法二中，所述的碱优选钠氢、氢氧化钾、氢氧化钠和叔丁醇钾中的一种或多种，进一步优选钠氢。

[0195] 在制备化合物Ⅲ的方法二中，所述的碱与所述的化合物Ⅴ的摩尔比优选1:1～3:1，进一步优选1:1～2:1。

[0196] 在制备化合物Ⅲ的方法二中，所述的R2X与所述的化合物Ⅴ的摩尔比优选1:1～3:1，进一步优选1.5:1～2.5:1。

[0197] 在制备化合物Ⅲ的方法二中，所述的取代反应的温度优选-10℃～50℃，进一步优选15℃～35℃。

[0198] 在制备化合物Ⅲ的方法二中，所述的取代反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅴ消失时作为反应的终点，反应时间优选1h～6h，进一步优选1h～3h。

[0199] 制备Ⅲ的方法二优选包括以下后处理步骤：反应结束后，淬灭反应，有机溶剂萃取，水洗有机相，分离出有机相，干燥、抽滤、浓缩，经柱层析纯化，即可。其中，所述的淬灭反应的试剂优选饱和氯化铵水溶液。所述的有机溶剂优选酯类溶剂，酯类溶剂优选乙酸乙酯。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。

[0200] 制备化合物Ⅲ的方法三可以为本领域中该类Mitsunobu反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：在溶剂中，在三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯存在下，化合物Ⅵ与1,2,4-三唑发生Mitsunobu反应。

[0201] 制备化合物Ⅲ的方法三优选包括以下步骤：在0℃～10℃下，将偶氮二甲酸二乙酯滴入化合物Ⅵ、三苯基膦和1,2,4-三唑与溶剂形成的溶液中，进行Mitsunobu反应。

[0202] 在制备化合物Ⅲ的方法三中，所述的溶剂优选腈类溶剂、醚类溶剂和卤代烃类溶剂中的一种或多种；进一步优选醚类溶剂。所述的腈类溶剂优选乙腈；所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。

[0203] 在制备化合物Ⅲ的方法三中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅵ的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0204] 在制备化合物Ⅲ的方法三中，所述的偶氮二甲酸二乙酯与所述的化合物Ⅵ的摩尔比优选1:1～3:1，进一步优选1:1～2:1。

[0205] 在制备化合物Ⅲ的方法三中，所述的三苯基膦与所述的化合物Ⅵ的摩尔比优选1:1～3:1，进一步优选1:1～2:1。

[0206] 在制备化合物Ⅲ的方法三中，所述的1,2,4-三唑与所述的化合物Ⅵ的摩尔比优选1:1～3:1，进一步优选1:1～2:1。

[0207] 在制备化合物Ⅲ的方法三中，所述的取代反应的温度优选-10℃～35℃，进一步优选0℃～20℃。

[0208] 在制备化合物Ⅲ的方法三中，所述的取代反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅵ消失时作为反应的终点，反应时间优选0.5h～4h，进一步优选0.5h～2h。

[0209] 制备Ⅲ的方法三优选包括以下后处理步骤：反应结束后，减压蒸除溶剂，经柱层析纯化，即可。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。

[0210] 在制备化合物Ⅲ的方法二中，所述的化合物Ⅴ采用制备化合物Ⅲ的方法三制备；再按照制备化合物Ⅲ的方法二，制得化合物Ⅲ即可。

[0211] 在制备化合物Ⅲ的方法三中，所述的化合物Ⅵ采用下述任一方法制备：

[0212] 方法一包括如下步骤：在溶剂中，还原剂作用下，将化合物Ⅻ进行还原反应，得到化合物Ⅵ；

[0213]

[0214] 其中，化合物Ⅵ的结构中X选自N，Y选自CH，R1选自甲基；再按照权利要求8所述的方法三，制得化合物Ⅲ即可；

[0215] 方法二包括如下步骤：在溶剂中，还原剂作用下，将化合物XIV进行还原反应，得到化合物Ⅵ；

[0216]

[0217] 其中，化合物Ⅵ的结构中X选自N，Y选自CH，R1选自H；再按照权利要求8所述的方法三，制得化合物Ⅲ即可；

[0218] 方法三包括如下步骤：在溶剂中，将化合物XV与三氟乙酸酐进行重排反应，得到化合物Ⅵ；

[0219]

[0220] 其中，化合物Ⅵ的结构中X选自CH，Y选自N，R1选自H或N,N-二甲基氨基甲酰基；再按照制备化合物Ⅲ的方法三，制得化合物Ⅲ即可。

[0221] 制备化合物Ⅵ的方法一或方法二可以为本领域中该类还原反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：

[0222] 制备化合物Ⅵ的方法一或方法二优选包括以下步骤：将化合物Ⅻ或化合物XIV与溶剂混合，在0℃～10℃下，分批加入还原剂，进行还原反应。

[0223] 在制备化合物Ⅵ的方法一或方法二中，所述的溶剂优选醇类溶剂、醚类溶剂、芳烃类溶剂和水中的一种或多种；进一步优选醇类溶剂。所述的醇类溶剂优选C1～C4的醇溶剂；所述的C1～C4的醇溶剂优选甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇或叔丁醇中的一种或多种；进一步优选叔丁醇。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的芳烃类溶剂优选甲苯。

[0224] 在制备化合物Ⅵ的方法一或方法二中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅻ或化合物XIV的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0225] 在制备化合物Ⅵ的方法一或方法二中，所述的还原剂优选硼氢化钠或二异丁基氢化铝，进一步优选硼氢化钠。

[0226] 在制备化合物Ⅵ的方法一或方法二中，所述的还原剂与所述的化合物Ⅻ或化合物XIV的摩尔比优选1:1～10:1，进一步优选2:1～5:1。

[0227] 在制备化合物Ⅵ的方法一或方法二中，所述的还原反应的温度优选0℃～60℃，进一步优选25℃～45℃。

[0228] 在制备化合物Ⅵ的方法一或方法二中，所述的还原反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅻ或化合物XIV消失时作为反应的终点，反应时间优选3h～10h，进一步优选3h～6h。

[0229] 制备化合物Ⅵ的方法一或方法二优选包括以下后处理步骤：反应结束后，淬灭反应，析出固体，抽滤、干燥，经打浆纯化，即可。其中，所述的淬灭反应的温度优选-10℃～10℃，进一步优选-10℃～0℃。所述的淬灭反应的试剂优选盐酸水溶液或乙酸水溶液，所述的盐酸水溶液的摩尔浓度优选1mol/L～1mol/L，所述的乙酸水溶液的质量百分浓度优选50％～60％。所述的打浆纯化的方法和条件按照本领域常规的打浆纯化的方法和条件进行选择。

[0230] 在制备化合物Ⅵ的方法二中，所述的化合物XIV采用下述方法制备：在溶剂中，将化合物Ⅸ进行脱羧反应，得到化合物XIV；

[0231]

[0232] 再按照制备化合物Ⅵ的方法二，制得化合物Ⅵ即可。

[0233] 制备化合物XIV的方法可以为本领域中该类脱羧反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物Ⅸ与溶剂混合，进行脱羧反应。

[0234] 在制备化合物XIV的方法中，所述的溶剂优选醚类溶剂、酰胺类溶剂和亚砜类溶剂中的一种或多种；进一步优选酰胺类溶剂。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的酰胺类溶剂优选N-甲基吡咯烷酮；所述的亚砜类溶剂优选二甲基亚砜。

[0235] 在制备化合物XIV的方法中，所述的溶剂与所述的化合物Ⅸ的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0236] 在制备化合物XIV的方法中，所述的脱羧反应的温度优选100℃～200℃，进一步优选150℃～170℃。

[0237] 在制备化合物XIV的方法中，所述的脱羧反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物Ⅸ消失时作为反应的终点，反应时间优选6h～12h，进一步优选8h～10h。

[0238] 制备化合物XIV的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，加入有机溶剂和水，水相以有机溶剂萃取，合并有机相，干燥、抽滤、浓缩，经柱层析纯化，即可。其中，所述的有机溶剂优选酯类溶剂，所述的酯类溶剂优选乙酸乙酯。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。

[0239] 在制备化合物Ⅵ的方法三中，所述的化合物XV采用下述任一方法制备：

[0240] 方法一包括如下步骤：在溶剂中，氧化剂作用下，将化合物XVI发生氧化反应，得到化合物XV；

[0241]

[0242] 其中，化合物XV的结构中R1选自H；再按照制备化合物Ⅵ的方法三，制得化合物Ⅵ即可；

[0243] 方法二包括如下步骤：在溶剂中，碱和缩合剂作用下，将化合物XVII与二甲胺盐酸盐发生缩合反应，得到化合物XV；

[0244]

[0245] 其中，化合物XV的结构中R1选自N,N-二甲基氨基甲酰基；再按照制备化合物Ⅵ的方法三，制得化合物Ⅵ即可。

[0246] 制备化合物XV的方法一可以为本领域中该类氧化反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物XVI与溶剂混合，在氧化剂作用下，发生氧化反应。

[0247] 在制备化合物XV的方法一中，所述的溶剂优选卤代烃类溶剂、醚类溶剂、腈类溶剂、有机酸和水中的一种或多种；进一步优选有机酸。所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的腈类溶剂优选乙腈；所述的有机酸优选甲酸和/或乙酸。

[0248] 在制备化合物XV的方法一中，所述的溶剂与所述的化合物XVI的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选1mL/g～10mL/g。

[0249] 在制备化合物XV的方法一中，所述的氧化剂优选30％双氧水或间氯过氧苯甲酸，进一步优选30％双氧水。

[0250] 在制备化合物XV的方法一中，所述的氧化剂与所述的化合物XVI的摩尔比优选1:1～5:1，进一步优选1:1～3:1。

[0251] 在制备化合物XV的方法一中，所述的氧化反应的温度优选0℃～100℃，进一步优选65℃～80℃。

[0252] 在制备化合物XV的方法一中，所述的氧化反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物XVI消失时作为反应的终点，反应时间优选2h～8h，进一步优选3h～5h。

[0253] 制备化合物XV的方法一优选包括以下后处理步骤：反应结束后，加入水和有机溶剂，有机相经碱液洗涤，水相再以有机溶剂萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，抽滤、浓缩，经柱层析纯化，即可。其中，所述的有机溶剂优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。所述的碱液优选饱和碳酸钠水溶液。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。

[0254] 在制备化合物XV的方法一中，所述的化合物XVI采用下述方法制备：在溶剂中，将化合物XVIII进行脱羧反应，得到化合物XVI；

[0255]

[0256] 再按照制备化合物XV的方法一，制得化合物XV即可。

[0257] 制备化合物XVI的方法可以为本领域中该类脱羧反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物XVIII与溶剂混合，进行脱羧反应。

[0258] 在制备化合物XVI的方法中，所述的溶剂优选醚类溶剂、酰胺类溶剂和亚砜类溶剂中的一种或多种；进一步优选酰胺类溶剂。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的酰胺类溶剂优选N-甲基吡咯烷酮；所述的亚砜类溶剂优选二甲基亚砜。

[0259] 在制备化合物XVI的方法中，所述的溶剂与所述的化合物XVIII的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0260] 在制备化合物XVI的方法中，所述的脱羧反应的温度优选150℃～250℃，进一步优选195℃～215℃。

[0261] 在制备化合物XVI的方法中，所述的脱羧反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物XVIII消失时作为反应的终点，反应时间优选1h～6h，进一步优选1h～3h。

[0262] 制备化合物XVI的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，加入有机溶剂和水，水相以有机溶剂萃取，合并有机相，干燥、抽滤、浓缩，经柱层析纯化，即可。其中，所述的有机溶剂优选酯类溶剂，所述的酯类溶剂优选乙酸乙酯。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。

[0263] 制备化合物XV的方法二可以为本领域中该类缩合反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：

[0264] 制备化合物XV的方法二优选包括以下步骤：将化合物XVII、二甲胺盐酸盐和缩合剂与溶剂混合，滴加碱，进行缩合反应。

[0265] 在制备化合物XV的方法二中，所述的溶剂优选卤代烃类溶剂、醚类溶剂和酰胺类溶剂中的一种或多种；进一步优选酰胺类溶剂。所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的酰胺类溶剂优选N,N-二甲基甲酰胺。

[0266] 在制备化合物XV的方法二中，所述的溶剂与所述的化合物XVII的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选5mL/g～20mL/g。

[0267] 在制备化合物XV的方法二中，所述的碱优选碳酸钠、碳酸钾、三乙胺、二异丙基乙胺、氢氧化钠和氢氧化钾中的一种或多种，进一步优选三乙胺。

[0268] 在制备化合物XV的方法二中，所述的碱与所述的化合物XVII的摩尔比优选1:1～5:1，进一步优选3:1～5:1。

[0269] 在制备化合物XV的方法二中，所述的缩合剂优选HOBT和EDC的组合试剂或DMAP和DCC的组合试剂，进一步优选HOBT和EDC的组合试剂。

[0270] 在制备化合物XV的方法二中，所述的HOBT与所述的化合物XVII的摩尔比优选1:1～5:1，进一步优选1:1～2:1。

[0271] 在制备化合物XV的方法二中，所述的EDC与所述的化合物XVII的摩尔比优选1:1～3:1，进一步优选1:1～2:1。

[0272] 在制备化合物XV的方法二中，所述的二甲胺盐酸盐与所述的化合物XVII的摩尔比优选1:1～5:1，进一步优选3:1～5:1。

[0273] 在制备化合物XV的方法二中，所述的缩合反应的温度优选0℃～50℃，进一步优选15℃～35℃。

[0274] 在制备化合物XV的方法二中，所述的脱羧反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物XVII消失时作为反应的终点，反应时间优选1h～6h，进一步优选3h～6h。

[0275] 制备化合物XV的方法二优选包括以下后处理步骤：反应结束后，加入有机溶剂和水，水相以有机溶剂萃取，合并有机相，水洗、干燥、抽滤、浓缩，经柱层析纯化，即可。其中，所述的有机溶剂优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。

[0276] 在制备化合物XV的方法二中，所述的化合物XVII采用下述方法制备：在溶剂中，氧化剂作用下，将化合物XVIII发生氧化反应，得到化合物XVII；

[0277]

[0278] 再按照制备化合物XV的方法二，制得化合物XV即可。

[0279] 制备化合物XVII的方法可以为本领域中该类氧化反应的常规方法，本发明中特别优选如下反应方法和条件：将化合物XVIII与溶剂混合，在氧化剂作用下，发生氧化反应。

[0280] 在制备化合物XVII的方法中，所述的溶剂优选卤代烃类溶剂、醚类溶剂、腈类溶剂、有机酸和水中的一种或多种；进一步优选有机酸。所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。所述的醚类溶剂优选四氢呋喃；所述的腈类溶剂优选乙腈；所述的有机酸优选甲酸和/或乙酸。

[0281] 在制备化合物XVII的方法中，所述的溶剂与所述的化合物XVIII的体积质量比优选1mL/g～40mL/g，进一步优选1mL/g～10mL/g。

[0282] 在制备化合物XVII的方法中，所述的氧化剂优选30％双氧水或间氯过氧苯甲酸，进一步优选30％双氧水。

[0283] 在制备化合物XVII的方法中，所述的氧化剂与所述的化合物XVIII的摩尔比优选1:1～5:1，进一步优选1:1～3:1。

[0284] 在制备化合物XVII的方法中，所述的氧化反应的温度优选0℃～100℃，进一步优选80℃～95℃。

[0285] 在制备化合物XVII的方法中，所述的氧化反应的进程可以通过本领域中的常规测试方法(如TLC或HPLC)进行监测，一般以化合物XVIII消失时作为反应的终点，反应时间优选2h～8h，进一步优选2h～4h。

[0286] 制备化合物XVII的方法优选包括以下后处理步骤：反应结束后，加入水和有机溶剂，有机相经碱液洗涤，水相再以有机溶剂萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，抽滤、浓缩，经柱层析纯化，即可。其中，所述的有机溶剂优选卤代烃类溶剂，所述的卤代烃类溶剂优选氯代烃类溶剂，进一步优选二氯甲烷。所述的碱液优选饱和碳酸钠水溶液。所述的柱层析的方法和条件按照本领域常规的柱层析的方法和条件进行选择。

[0287] 在制备化合物XVI和XVII的方法中所述的化合物XVIII可以参考文献Journal of Heterocyclic Chemistry,2011,48,p.792-798报道的方法制备。

[0288] 本发明还提供了化合物Ⅱ、化合物Ⅲ、化合物Ⅳ、化合物Ⅴ、化合物Ⅵ、化合物Ⅶ、化合物Ⅷ、化合物Ⅸ、化合物Ⅹ、化合物Ⅺ、化合物Ⅻ、化合物XIV、化合物XV、化合物XVI或化合物XVII，其结构式如下：

[0289]

[0290] 式Ⅱ中，X选自N，Y选自CH，R2选自H，R3选自乙氧甲酰基；

[0291]

[0292] 式Ⅲ中，X选自N，Y选自CH，R1选自甲基且R2选自H、甲基、乙基、环己基甲基或苄基；

[0293] 或X选自N，Y选自CH，R1选自H、乙氧甲酰基，且R2选自H；

[0294] 或X选自CH，Y选自N，R1选自H或N,N-二甲基氨基甲酰基，且R2选自H；

[0295]

[0296] 式Ⅴ中，X选自N，Y选自CH，R1选自甲基；

[0297]

[0298] 式Ⅵ中，X选自N，Y选自CH，R1选自H或甲基；

[0299] 或X选自CH，Y选自N，R1选自H或N,N-二甲基氨基甲酰基；

[0300]

[0301] 式XV中，R1选自H或N,N-二甲基氨基甲酰基。

[0302]

[0303] 本发明还提供了所述的如式I所示的的苯基吡啶类化合物或其盐在制备人二肽基肽酶-4抑制剂中的应用。

[0304] 本发明还提供了所述的如式I所示的苯基吡啶类化合物或其盐在制备用于治疗和/或预防非胰岛素依赖性糖尿病、高血糖或胰岛素抗性的药物中的应用。

[0305] 本发明还提供了一种药物组合物，其特征在于包含如式I所示的苯基吡啶类化合物和/或其盐，以及一种或多种药学上可接受的载体。

[0306] 本发明的化合物可与药学上各种常用添加剂(如稀释剂和赋形剂等)制成药物组合物。根据治疗目的，可将药物组合物制成各种类型的给药单位剂型，如片剂、丸剂、粉剂、液体、悬浮液、乳液、颗粒剂、胶囊、栓剂和针剂(溶液及悬浮液)等。

[0307] 为了使片剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何已知的并广泛使用的赋形剂。例如，载体，如乳糖、白糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、淀粉、碳酸钙、高岭土、结晶纤维素和硅酸等；粘合剂，如水、乙醇、丙醇、普通糖浆、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明教溶液，羧甲基纤维素、紫胶、甲基纤维素和磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，如干淀粉、藻酸钠、琼脂粉和海带粉，碳酸氢钠、碳酸钙、聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯、十二烷基硫酸钠、硬脂酸单甘酯、淀粉和乳糖等；崩解抑制剂，如白糖、甘油三硬脂酸酯、椰子油和氢化油；吸附促进剂，如季胺碱和十二烷基硫酸钠等；润湿剂，如甘油、淀粉等；吸附剂，如淀粉、乳糖、高岭土、膨润土和胶体硅酸等；以及润滑剂，如纯净的滑石，硬脂酸盐、硼酸粉和聚乙二醇等。如果需要的话，还可以用通常的涂渍材料使片剂作为糖衣片剂、涂明胶膜片剂、肠衣片剂、涂膜片剂、双层膜片剂及多层片剂。

[0308] 为了使丸剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何已知的并广泛使用的赋性剂，例如，载体，如乳糖，淀粉，椰子油，硬化植物油，高岭土和滑石等；粘合剂，如阿拉伯树胶粉，黄著胶粉，明胶和乙醇等；崩解剂，如琼脂和海带粉等。

[0309] 为了使栓剂形式的药物组合物成形，可使用本领域任何已知并广泛使用的赋性剂，例如，聚乙二醇，椰子油，高级醇，高级醇的酯，明胶和半合成的甘油酯等。

[0310] 为了制备针剂形式的药物组合物，可将溶液和悬浮液消毒，并最好加入适量的氯化钠，葡萄糖或甘油等，制成与血液等渗压的针剂。在制备针剂时，也可使用本领域内任何常用的载体。例如，水，乙醇，丙二醇，乙氧基化的异硬脂醇，聚氧基化的异硬脂醇和聚乙烯脱水山梨醇的脂肪酸酯等。此外，还可加入通常的溶解剂、缓冲剂和止痛剂等。根据需要，在治疗精神分裂症期间，也可加入着色剂、防腐剂、香料、调味剂、香化剂和其它药物等。

[0311] 本发明的如式I所示的化合物及其药学上可接受的盐在药物组合物中的含量无特殊限制，可在很宽的范围内进行选择，通常可为质量百分比1-90％，较佳的为质量百分比1-30％。

[0312] 本发明中，所述的药物组合物的给药方法没有特殊限制。可根据病人年龄、性别和其它条件及症状，选择各种剂型的制剂给药。例如，片剂、丸剂、溶液、悬浮液、乳液、颗粒剂和胶囊是口服给药；针剂可以单独给药，或者和注射用输送液(如葡萄糖溶液及氨基酸溶液)混合进行静脉注射，如有必要可以单纯用针剂进行肌肉、皮内、皮下或腹内注射；栓剂为给药到直肠。

[0313] 本发明中，可以根据服药方法、病人年龄、性别和其它条件以及症状适当地选择用药剂量。

[0314] 本发明还提供了包含所述的如式I所示的的苯基吡啶类化合物或其盐的药物组合物在制备人二肽基肽酶-4抑制剂中的应用。

[0315] 本发明还提供了包含所述的如式I所示的的苯基吡啶类化合物或其盐的药物组合物在治疗和/或预防非胰岛素依赖性糖尿病、高血糖或胰岛素抗性的药物。

[0316] 在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

[0317] 本发明中所述的室温指环境温度，为10℃～30℃。

[0318] 本发明所用试剂和原料均市售可得。

[0319] 本发明的积极进步效果在于：本发明的苯基吡啶类化合物及其盐对DPP-4具有良好的抑制效果，为DPP-4抑制剂的研发提供了一个新方向，具有良好的市场开发前景。

具体实施方式

[0320] 下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商用说明书选择。

[0321] 在以下实施例中，未定义的缩写具有其普遍接受的含义，除非另外声明。表1、表2分别为化合物I-1～I-12的理化数据和I-1～I-12体外抑制活性数据。

[0322] 方法实施例1

[0323] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氨甲基-4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-6-甲基吡啶(I-1)[0324]

[0325] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-6-甲基吡啶(0.60g,1.74mmol)、Raney Ni(0.12g 1.2ml)、3ml NH3/EtOH(3mol/L)和7ml EtOH置于氢化反应釜中，通入氢气，压力0.4MPa，室温反应4h。抽滤，母液浓缩，柱层析(二氯甲烷:甲醇)得淡黄色油状物0.32g，加入少量乙酸乙酯静置，析出固体，石油醚/乙酸乙酯(2ml/1ml)打浆得白色固体0.18g，收率29.7％。

[0326] I-6、I-7的合成方法与I-1相同，I-1、I-6、I-7理化数据见表1。

[0327] 方法实施例2

[0328] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氨甲基-4-(甲基(1,2,4-三唑-1-基))甲基-6-甲基吡啶(I-2)

[0329]

[0330] 钠氢(0.17g,4.36mmol)与8ml DMF混合，N2保护，冰水浴冷却，滴加2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-6-甲基吡啶(1.00g,2.91mmol)的DMF溶液2ml，加毕搅拌20min，滴加碘甲烷(0.83g,5.82mmol)，加毕升至室温搅拌2h。反应液加入50ml饱和氯化铵溶液，水相以乙酸乙酯萃取(15ml×3)，合并有机相，以饱和食盐水洗涤(10ml×3)，无水硫酸钠干燥，浓缩得油状物1.12g，柱层析(二氯甲烷:甲醇＝100:1)得淡黄色固体0.78g，收率75.3％，m.p:110-111℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.34(s,1H),8.08(s,1H),7.58(s,1H),7.44-7.41(d,1H,J＝8.4Hz),7.40-7.38(d,1H,J＝8.4Hz),7.13(s,1H),6.00-5.95(q,1H,J＝6.8Hz),2.66(s,3H),2.07-2.05(d,3H,J＝6.8Hz)。

[0331] 将上述固体(0.55g,1.54mmol)、Raney Ni(0.10g)、3ml NH3/EtOH(3mol/L)和7ml EtOH置于氢化反应釜中，通入氢气，压力0.4MPa，室温反应2h。抽滤，母液浓缩，柱层析(二氯甲烷:甲醇)得淡黄色油状物0.28g，加入少量乙酸乙酯静置，析出固体，石油醚/乙酸乙酯(1ml/0.5ml)打浆得白色固体0.21g，收率37.9％。

[0332] I-3～I-5的合成方法与I-2相同，I-2～I-5理化数据见表1。

[0333] 方法实施例3

[0334] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氨甲基-4-(乙基(1,2,4-三唑-1-基))甲基-6-甲基吡啶盐酸盐(I-4盐酸盐)

[0335]

[0336] 钠氢(0.22g,5.67mmol)与8ml DMF混合，N2保护，冰水浴冷却，滴加2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-6-甲基吡啶(1.30g,3.78mmol)的DMF溶液2ml，加毕搅拌20min，滴加碘乙烷(1.18g,7.57mmol)，加毕升至室温搅拌2h。反应液加入50ml饱和氯化铵溶液，水相以乙酸乙酯萃取(15ml×3)，合并有机相，以饱和食盐水洗涤(10ml×3)，无水硫酸钠干燥，浓缩得油状物1.36g，柱层析(二氯甲烷:甲醇＝100:1)得淡黄色固体0.98g，收率69.0％，m.p:105-106℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.35(s,1H),8.10(s,1H),
7.58-7.57(d,1H,J＝1.6Hz),7.44(s,1H),7.44-7.41(dd,1H,J＝8.4Hz 1.6Hz),7.40-7.37(d,1H,J＝8.4Hz),5.68-5.64(m,1H),2.61-2.53(m,1H),2.35-2.26(m,1H),1.02-0.99(t,
3H,J＝7.2Hz)。

[0337] 将上述固体(0.60g,1.62mmol)、Raney Ni(0.12g)、3ml NH3/EtOH(3mol/L)和7ml EtOH置于氢化反应釜中，通入氢气，压力0.4MPa，室温反应2h。抽滤，母液浓缩，柱层析(二氯甲烷:甲醇)得淡黄色油状物，溶于5ml乙酸乙酯，滴加3mol/L的HCl/MeOH(0.2ml)溶液成盐，蒸除溶剂得白色固体0.28g，还原和成盐两步收率40.3％。

[0338] 方法实施例4

[0339] 4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-5-氨甲基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸盐酸盐(I-8盐酸盐)

[0340]

[0341] 4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-5-氨甲基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸乙酯(0.06g,0.15mmol)溶于1.5ml甲醇，滴加0.12ml 3N NaOH溶液，加毕室温搅拌1h。滴加2N HCl溶液调pH至中性，析出白色固体，抽滤，滤饼以适量甲醇、乙酸乙酯依次洗涤，干燥得白色固体，将其溶于二氧六环，滴加4mol/L的HCl/二氧六环(0.1ml)溶液成盐，蒸干溶剂得白色固体0.045g，收率72.7％。

[0342] 方法实施例5

[0343] 4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-5-氨甲基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸甲酰胺(I-9)

[0344]

[0345] 4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-5-氨甲基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸乙酯(0.06g,0.15mmol)溶于1ml乙醇，加入2ml 40％甲胺水溶液，室温搅拌1h。抽滤，滤饼依次以适量乙醇、乙酸乙酯洗涤，干燥得白色固体0.043g，收率73.5％。

[0346] I-10的合成方法与I-9相同，理化数据见表1。

[0347] 方法实施例6

[0348] 2-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-3-氨甲基-4-(2,4-二氯苯基)吡啶盐酸盐(I-11盐酸盐)

[0349]

[0350] 将2-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-3-腈基-4-(2,4-二氯苯基)吡啶(0.19g,0.6mmol)、Raney Ni(0.04g)、3ml NH3/EtOH(3mol/L)和17ml EtOH置于氢化反应釜中，通入氢气，压力0.4MPa，室温反应4h。抽滤，母液浓缩，柱层析(二氯甲烷:甲醇)得黄色油状物，溶于1ml甲醇，滴加3mol/L的HCl/MeOH(0.1ml)溶液成盐，蒸除溶剂得灰白色固体0.027g，还原和成盐两步收率14.1％。

[0351] I-12的合成方法与I-11相同，理化数据见表1。

[0352] 方法实施例7

[0353] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氨甲基-4-(乙基(1,2,4-三唑-1-基))甲基-6-甲基吡啶氢溴酸盐(I-4氢溴酸盐)

[0354]

[0355] 将2-(2,4-二氯苯基)-3-腈基-4-(乙基(1,2,4-三唑-1-基))甲基-6-甲基吡啶(0.10g,0.29mmol)、Raney Ni(0.02g)与12ml四氢呋喃混合，冰水浴降温，滴加85％水合肼(0.43g,7.25mmol)，加毕室温反应5h。抽滤，母液浓缩，柱层析(二氯甲烷:甲醇)得淡黄色油状物，溶于2ml乙酸乙酯，滴加3mol/L的HBr/MeOH(0.2ml)溶液成盐，蒸除溶剂得类白色固体0.064g，还原和成盐两步收率44.6％。

[0356] 方法实施例8

[0357] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氨甲基-4-(乙基(1,2,4-三唑-1-基))甲基-6-甲基吡啶三氟乙酸盐(I-4三氟乙酸盐)

[0358]

[0359] 将2-(2,4-二氯苯基)-3-腈基-4-(乙基(1,2,4-三唑-1-基))甲基-6-甲基吡啶(0.15g,0.43mmol)溶于5ml甲酸，加入Raney Ni(0.03g)，室温反应6h。抽滤，母液浓缩，加入5ml乙酸乙酯和5ml水，以2mol/L氢氧化钠溶液调pH至8，滤除沉淀。水相以乙酸乙酯(5ml×
3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，抽滤，母液浓缩，柱层析(二氯甲烷:甲醇)得淡黄色油状物。溶于1ml三氟乙酸中，蒸干溶剂得白色固体0.082g，还原和成盐两步收率35.1％。

[0360] 方法实施例9

[0361] 4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-5-氨甲基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸三氟乙酸盐(I-8三氟乙酸盐)

[0362]

[0363] 将4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-5-氨甲基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸(0.40g,1.06mmol)溶于1ml三氟乙酸中，室温搅拌1h，蒸干溶剂得白色固体，收率100％。

[0364] 方法实施例10

[0365] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-6-甲基吡啶(III-1)[0366]

[0367] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-羟甲基-6-甲基吡啶(2.00g,6.83mmol)、1,2,4-三氮唑(0.66g,9.57mmol)、三苯基膦(2.51g,9.57mmol)与20ml四氢呋喃混合，冰水浴冷却，滴加DEAD(1.67g,9.57mmol)的四氢呋喃溶液1ml，控温在0-5℃，加毕升至室温搅拌2h。反应液浓缩，以35ml CH2Cl2溶解，滴加4ml 3N HCl/MeOH成盐，抽滤得米色固体2.9g。将上述固体加入10ml水和10ml CH2Cl2中，以2N NaOH溶液调pH至8-9，水相以CH2Cl2萃取(10ml×5)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，抽滤，蒸干溶剂得米色固体2.1g，收率82.7％，m.p:125-127℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.31(s,1H),8.06(s,1H),7.56-7.55(d,1H,J＝1.6Hz),7.42-7.39(dd,1H,J＝8.4Hz 1.6Hz),7.37-7.35(d,1H,J＝8.4Hz),7.00(s,1H),5.60(s,2H),2.65(s,
3H)。

[0368] III-6、III-11、III-12的合成方法与III-1相同。

[0369] 方法实施例11

[0370] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-(甲基(1,2,4-三唑-1-基))甲基-6-甲基吡啶(III-2)

[0371]

[0372] 钠氢(0.17g,4.36mmol)与8ml DMF混合，N2保护，冰水浴冷却，滴加2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-6-甲基吡啶(1.00g,2.91mmol)的DMF溶液2ml，加毕搅拌20min，滴加碘甲烷(0.83g,5.82mmol)，加毕升至室温搅拌2h。反应液加入50ml饱和氯化铵溶液，水相以乙酸乙酯萃取(15ml×3)，合并有机相，以饱和食盐水洗涤(10ml×3)，无水硫酸钠干燥，浓缩得油状物1.12g，柱层析(二氯甲烷:甲醇＝100:1)得淡黄色固体0.78g，收率75.3％，m.p:110-111℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.34(s,1H),8.08(s,1H),7.58(s,1H),7.44-7.41(d,1H,J＝8.4Hz),7.40-7.38(d,1H,J＝8.4Hz),7.13(s,1H),6.00-5.95(q,1H,J＝6.8Hz),2.66(s,3H),2.07-2.05(d,3H,J＝6.8Hz)。

[0373] III-3、III-4、III-5的合成方法与III-2相同。

[0374] 方法实施例12

[0375] 4-(1,2,4-三唑-1-基)甲基-5-氰基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸乙酯(III-7)[0376]

[0377] 4-溴甲基-5-氰基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸乙酯(1.45g,3.51mmol)、1,2,4-三氮唑(0.18g,5.27mmol)溶于15ml乙腈，冰水浴冷却，30min内分3批加入碳酸钾(0.36g,
5.27mmol)，加毕搅拌30min。反应液浓缩，柱层析(二氯甲烷:甲醇＝100:1)得粉红色泡沫状固体0.87g，收率61.7％，m.p:143-146℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.36(s,1H),8.08(s,1H),
7.96(s,1H),7.58(s,1H),7.43(s,2H),5.70(s,2H),4.50-4.45(q,2H,J＝7.2Hz),1.43-
1.39(t,3H,J＝7.2Hz)。

[0378] 方法实施例13

[0379] 4-溴甲基-5-氰基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸乙酯(Ⅳ)

[0380]

[0381] 4-羟甲基-5-氰基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸乙酯(2.3g,6.55mmol)溶于25mlCH2Cl2，冰水浴冷却，滴加三溴化磷(1.7g,6.55mmol)，控温在0-5℃，加毕升至室温搅拌
2h。将反应液滴入冰水中，以饱和Na2CO3溶液调pH至中性，水相以CH2Cl2萃取(20ml×3)，合并有机相，无水硫酸镁干燥，抽滤，浓缩得棕褐色油状物2.5g，柱层析(二氯甲烷)得淡黄色油状物1.45g，收率53.7％。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.32(s,1H),7.59-7.58(d,1H,J＝
1.2Hz),7.47-7.45(d,1H,J＝8.4Hz),7.44-7.42(dd,1H,J＝8.4Hz 1.2Hz),4.69(s,2H),
4.56-4.51(q,2H,J＝7.2Hz),1.48-1.45(t,3H,J＝7.2Hz)。

[0382] 方法实施例14

[0383] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-羟甲基-6-甲基吡啶(Ⅵ-1)

[0384]

[0385] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-甲酸乙酯-6-甲基吡啶(12.00g,35.82mmol)、NaBH4(3.40g,89.55mmol)与125ml叔丁醇混合，升至35℃搅拌5h30min。将反应液滴加入200ml冰水中，以10ml 50％冰醋酸水溶液调pH至中性，析出黄色固体，抽滤得浅黄色粗品7.7g。石油醚/乙酸乙酯(20ml/10ml)打浆得米色固体6.83g，收率65.0％，m.p:148-150℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):7.56-7.55(d,1H,J＝2.0Hz),7.42-7.40(dd,1H,J＝8.4Hz 2.0Hz),7.39-7.37(d,1H,J＝8.4Hz),4.96-4.95(d,2H,J＝5.2Hz),2.72(s,3H),2.57-2.55(t,1H,J＝
5.2Hz)。

[0386] Ⅵ-2的合成方法与Ⅵ-1相同。

[0387] 方法实施例15

[0388] 2-羟甲基-3-氰基-4-(2,4-二氯苯基)吡啶(Ⅵ-3)

[0389]

[0390] 2-甲基-3-氰基-4-(2,4-二氯苯基)吡啶-N-氧化物(0.91g,3.3mmol)、3ml TFAA与10ml CH2Cl2混合，回流4h，蒸干溶剂，加入5ml甲醇，室温搅拌1h，蒸除溶剂得棕黄色固体粗品0.85g，重结晶(石油醚10ml/乙酸乙酯12ml)得类白色固体0.65g，收率70.8％，m.p:154-
158℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.85-8.83(d,1H,J＝4.8Hz),7.62-7.61(d,1H,J＝1.6Hz),
7.46-7.43(dd,1H,J＝8.4Hz 1.6Hz),7.38-7.36(d,1H,J＝4.8Hz),7.31-7.29(d,1H,J＝
8.4Hz),5.05(s,2H),3.94-3.91(m,1H,加重水消失)。

[0391] Ⅵ-4的合成方法与Ⅵ-3相同。

[0392] 方法实施例16

[0393] 4-羟甲基-5-氰基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸乙酯(Ⅶ)

[0394]

[0395] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-甲酸乙酯-6-羟甲基吡啶(17.60g,50.14mmol)溶于180ml丙酮中，冰水浴冷却，1h内分6批加入高锰酸钾(15.85g,100.28mmol)，加毕升至室温搅拌30min。蒸除溶剂至近干，剩余物加入100ml饱和Na2SO3溶液、6.8g Na2SO3固体及150ml 
2N HCl溶液，室温搅拌30min。水相以乙酸乙酯萃取(50ml×3)，合并有机相，以饱和食盐水洗涤(10ml×3)，无水硫酸镁干燥，抽滤，浓缩得米黄色泡沫状固体16.25g。

[0396] 将上述固体与200ml四氢呋喃/水(1:1)混合溶剂混合，冰水浴冷却，1h内分6批加入NaBH4 11.84g，加毕升至室温搅拌2h。冰浴下将反应液倒入200ml水中，以2N HCl溶液酸化至pH 2～3，析出黄色絮状沉淀，抽滤，100ml水洗涤，干燥得黄色颗粒状固体11.9g。将上述固体溶于120ml无水乙醇，滴加浓硫酸2.61g，加毕升至55℃搅拌8h。冰水浴冷却，滴加三乙胺调pH值至7～8，反应液浓缩得黄色油状粗品，柱层析(二氯甲烷:甲醇＝100:1)得白色固体7.15g，三步收率40.6％，m.p:130-132℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.47(s,1H),7.58(s,1H),7.43(s,2H),5.09-5.07(d,2H,J＝5.6Hz),4.56-4.51(q,2H,J＝7.2Hz),2.38-2.35(t,
1H,J＝5.6Hz),1.48-1.45(t,3H,J＝7.2Hz)。

[0397] 方法实施例17

[0398] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-甲酸乙酯-6-羟甲基吡啶(Ⅹ)

[0399]

[0400] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-甲酸乙酯-6-甲基吡啶(26.54g,79.22mmol)溶于260ml CH2Cl2中，加入间氯过氧苯甲酸(53.08g,308.60mmol)，室温搅拌24h。将白色不溶物滤除，以10ml CH2Cl2洗涤滤饼，滤液中加入200ml饱和Na2SO3溶液、300ml饱和NaHCO3溶液，搅拌30min，水相以CH2Cl2萃取(50ml×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得淡黄色固体29.86g。将上述固体与70ml TFAA、260ml CH2Cl2混合，回流4h。蒸除溶剂，加入100ml甲醇，搅拌1h，再重复上述操作2次，滤除不溶物，蒸除溶剂得橙黄色粗品28g，石油醚/乙酸乙酯(25ml/20ml)打浆得淡黄色固体17.6g。母液浓缩，柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)得白色固体3.50g，总收率75.9％，m.p:66-67℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.06(s,1H),7.60-
7.59(d,1H,J＝2.0Hz),7.45-7.43(dd,1H,J＝8.4Hz 2.0Hz),7.41-7.39(d,1H,J＝8.4Hz),
4.97(s,2H),4.58-4.52(q,2H,J＝7.2Hz),3.08(s,1H),1.51-1.47(t,3H,J＝7.2Hz)。

[0401] 方法实施例18

[0402] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-甲酸乙酯-6-甲基吡啶(Ⅻ)

[0403]

[0404] 1-氨基-1-(2,4-二氯苯基)丙烯腈(20.86g,97.93mmol)、乙酰丙酮酸乙酯(17.79g,112.62mmol)与75ml乙酸混合，升至30℃搅拌36h，析出白色不溶物。抽滤得白色固体26.54g，将滤液滴入265ml水中，析出黄色固体4.81g，加入15ml乙醇打浆，抽滤得白色固体3.52g，总收率91.6％，m.p:111-112℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):7.86(s,1H),7.58-7.57(d,1H,J＝2.0Hz),7.44-7.41(dd,1H,J＝8.4Hz 2.0Hz),7.39-7.37(d,1H,J＝8.4Hz),4.56-4.51(q,2H,J＝7.2Hz),2.77(s,3H),1.50-1.47(t,3H,J＝7.2Hz)。

[0405] 方法实施例19

[0406] 2-(2,4-二氯苯基)-3-氰基-4-甲酸乙酯吡啶(XIV)

[0407]

[0408] 4-甲酸乙酯-5-氰基-6-(2,4-二氯苯基)吡啶-2-甲酸11.40g溶于110ml NMP中，升至165℃搅拌9h。反应液加入400ml水中，水相以乙酸乙酯萃取(100ml×3)，合并有机相，无水硫酸镁干燥，抽滤，浓缩得黑色油状物11.00g，柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)得淡黄色固体5.56g，收率55.5％，m.p:119-121℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):9.00-8.99(d,1H,J＝1.2Hz),7.99-7.98(d,1H,J＝1.2Hz),7.58-7.57(d,1H,J＝2.0Hz),7.43-7.41(dd,1H,J＝
8.0Hz 2.0Hz),7.39-7.37(d,1H,J＝8.0Hz),4.56-4.51(q,2H,J＝7.2Hz),1.49-1.46(t,
3H,J＝7.2Hz)。

[0409] 方法实施例20

[0410] 2-甲基-3-氰基-4-(2,4-二氯苯基)吡啶-N-氧化物(XV-1)

[0411]

[0412] 2-甲基-3-氰基-4-(2,4-二氯苯基)吡啶(1.27g,4.8mmol)与4ml乙酸混合，加入30％H2O2(0.8ml,7.3mmol)，70℃下反应4h，停止反应，加水20ml，加入CH2Cl2与饱和Na2CO3溶液，CH2Cl2萃取3次，合并有机相，无水硫酸钠干燥、抽滤、浓缩得黄色油状物粗品1.55g，柱层析(EA:THF)得白色固体0.91g，收率67.9％，m.p:162-165℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.46-
8.44(d,1H,J＝6.8Hz),7.61(s,1H),7.45-7.43(d,1H,J＝8.4Hz),7.34-7.32(d,1H,J＝
8.4Hz),7.28-7.27(d,1H,J＝6.8Hz),2.81(s,3H)。

[0413] 方法实施例21

[0414] N,N-二甲基-4-(2,4-二氯苯基)-5-氰基-6-甲基吡啶-2-甲酰胺-N-氧化物(XV-2)[0415]

[0416] 4-(2,4-二氯苯基)-5-氰基-6-甲基吡啶-N-氧化物-2-羧酸(7.76g,24.0mmol)、HOBt(3.90g,29.0mmol)、EDC·HCl(5.52g,29.0mmol)、二甲胺盐酸盐(5.85g,72.0mmol)与60ml DMF混合，滴加Et3N(9.73g,96.0mmol)，反应4h，原料基本消失完全，停止反应，后处理加入水300ml，CH2Cl2萃取(200ml×2)，合并有机相，水洗(200ml×2)，无水硫酸钠干燥有机相、抽滤、浓缩，柱层析得4.39g类白色固体，收率52.2％，m.p:186-188℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):7.61-7.60(d,1H,J＝2.0Hz),7.45-7.43(q,1H,J＝8.4Hz 2.0Hz),7.35-7.34(d,1H,J＝8.4Hz),7.33(s,1H),3.20(s,3H),2.98(s,3H),2.82(s,3H)。方法实施例22

[0417] 2-甲基-3-氰基-4-(2,4-二氯苯基)吡啶(XVI)

[0418]

[0419] (E)-4-(2,4-二氯苯基)-2-氧代-3-丁烯酸(9.8g,40.0mmol)溶于200ml CH3CN中，加热至内温25℃，分批加入t-BuOK(9.0g,80.0mmol)，室温下反应24h，停止反应，蒸干溶剂，加水溶解，无水乙醚洗水相2次，水相用2mol/L HCl酸化至pH 3-5，CH2Cl2萃取(100ml×2)，合并有机相，无水硫酸钠干燥、抽滤浓缩得棕色泡沫状固体4-(2,4-二氯苯基)-5-氰基-6-甲基吡啶-2-羧酸11.0g。

[0420] 上述固体加入100ml NMP中回流2h，停止反应，加入水400ml和乙酸乙酯400ml，分出有机相，饱和NaCl溶液洗2次、饱和Na2CO3洗2次，有机相干燥、抽滤、浓缩得7.50g棕褐色泡沫状粗品，柱层析(乙酸乙酯)得2.30g棕色固体，两步收率21.9％，m.p:97-100℃。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.76-8.74(d,1H,J＝4.8Hz),7.60-7.59(d,1H,J＝2.0Hz),7.44-7.41(dd,1H,J＝8.4Hz 2.0Hz),7.31-7.28(d,1H,J＝8.4Hz),7.25-7.24(d,1H,J＝4.8Hz),2.89(s,3H)。

[0421] 方法实施例23

[0422] 4-(2,4-二氯苯基)-5-氰基-6-甲基吡啶-N-氧化物-2-羧酸(XVII)

[0423]

[0424] (E)-4-(2,4-二氯苯基)-2-氧代-3-丁烯酸(11.3g,46.0mmol)溶于160ml CH3CN中，加热至内温25℃，分批加入t-BuOK(10.4g,93.0mmol)，室温下反应24h，停止反应，蒸干溶剂，加水溶液，无水乙醚洗水相2次，水相用2mol/L HCl酸化至pH 3-5，CH2Cl2萃取(100ml×2)，合并有机相，无水硫酸钠干燥、抽滤浓缩得棕色泡沫状固体4-(2,4-二氯苯基)-5-氰基-6-甲基吡啶-2-羧酸8.23g。

[0425] 上述固体与8ml乙酸混合，再加入8ml 30％H2O2，85℃下2.5h，停止反应，加水40ml和CH2Cl2 40ml，CH2Cl2萃取3次，合并有机相，饱和Na2CO3溶液洗涤3次，分离出有机相，无水硫酸钠干燥、抽滤、浓缩得黄色泡沫状固体粗品，10ml EtOH中回流分散，抽滤、烘干得固体粉末2.86g，环合、N-氧化两步收率19.1％。1H-NMR(CDCl3),δ(ppm):8.41(s,1H),7.66-7.65(d,1H,J＝1.6Hz),7.50-7.48(dd,1H,J＝8.0Hz 1.6Hz),7.35-7.33(d,1H,J＝8.0Hz),2.96(s,3H),1.63(brs,1H)。

[0426] 表1化合物I-1～I-12理化数据

[0427]

[0428]

[0429]

[0430] a：氰基还原收率

[0431] b：氰基还原和成盐两步收率

[0432] c：将I-4进行Cl元素分析：28.13％，推测结构中含有1.5个HCl盐

[0433] d：水解和成盐两步收率

[0434] e：氨解收率

[0435] f：1HNMR(δppm in DMSO/DMSO+D2O)

[0436] 表2.化合物I-1～I-12的1HNMR数据

[0437]

[0438]

[0439]

[0440] 24.活性测试实施例

[0441] 部分苯基吡啶类化合物进行了体外DPP-4酶抑制试验

[0442] DPP-4酶活测定方法是以甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺(Gly-Pro-p-nitroanilide)为底物的发色法。在碱性条件下DPP-4酶催化底物Gly-Pro-p-nitroanilide水解，生成甘氨酰脯氨酸和黄色的对硝基苯胺，对硝基苯胺在波长405nm处有特征性吸收峰，通过酶标仪在405nm处测得的吸收值大小即发色基团PNA生成量多少反映酶活性高低，反应式如下。

[0443]

[0444] 一分钟水解1μmol的Gly-Pro-p-nitroanilide所需的DPP-4酶量定义为1U，在DPP-4酶活测定体系中(底物0.4mM，DPP-4酶适量，缓冲液50mM Tris-HCl，pH8.3)加入不同浓度的各种抑制剂，37℃反应一小时后由酶标仪测定405nm处吸光值，再根据Beer-Bouguer定律以405nm处测得的吸光值换算成p-nitroaniline的生成量。对于某种抑制剂来说，将抑制1U酶活所需抑制剂的量定义为一个单位抑制活性，以此来评价各种抑制剂的活性。

[0445] 抑制剂的筛选是以一定量的酶组成酶活测定体系，加入不同量的各种抑制剂及空白对照，数据见表3。

[0446] 表3.I-1～I-12部分化合物对DPP-4酶的IC50值

[0447]NO. IC50(nM) NO. IC50(nM)
I-1 2.6 I-7 2
I-2 5.4 I-8 0.57
I-3 12.9 I-9 8.5
I-4 4.3 I-10 6.5
I-5 28 I-11 24
I-6 2.7 I-12 67

[0448] 由表3数据表明，本发明中的所有化合物具有良好的DPP-4酶抑制活性，部分化合物优于上市药物西格列汀(IC50＝15nM)。对今后开发全新结构的DPP-4酶抑制剂和结构改造起到了指导作用。