一种可用于首发精神分裂症诊断的外周血生物标志物

摘要

本发明涉及一种可用于首发精神分裂症诊断的外周血生物标志物，及其用于诊断首发精神分裂症的用途。具体地，通过检测外周血中的游离IL‑15Rα的水平诊断首发精神分裂症患者。

权利要求

1.IL15Rα在制备用于通过检测外周血中IL15Rα含量诊断首发精神分裂症患者的试剂盒中的用途。

2.IL15Rα在制备用于通过检测外周血中IL15Rα含量区分首发精神分裂症患者和双相情感障碍患者的试剂盒中的用途。

3.IL15Rα在制备用于通过检测外周血中IL15Rα含量区分首发精神分裂症患者和抑郁症患者的试剂盒中的用途。

4.检测IL15Rα的试剂在制备用于通过检测外周血中IL15Rα含量诊断首发精神分裂症患者的试剂盒中的用途。

5.检测IL15Rα的试剂在制备用于通过检测外周血中IL15Rα含量区分首发精神分裂症患者和双相情感障碍患者的试剂盒中的用途。

6.检测IL15Rα的试剂在制备用于通过检测外周血中IL15Rα含量区分首发精神分裂症患者和抑郁症患者的试剂盒中的用途。

7.根据权利要求5-6的用途，其中所述检测IL15Rα的试剂选自：IL15Rα的配体或IL15Rα的配体的抗体，IL15Rα的抗体。

说明书

一种可用于首发精神分裂症诊断的外周血生物标志物

技术领域

[0001] 本公开涉及精神疾病客观诊断、精神分裂症病程严重程度诊断、首发精神分裂症与双相情感障碍的鉴别诊断、客观生物标志物、外周血生物标记物。

背景技术

[0002] 精神分裂症(Schizophrenia)是一种常见的精神疾病，全球人群中的患病率为0.3％-0.7％。精神分裂症多起病于青壮年，常有感知、思维、情感、行为等多方面的障碍和精神活动的不协调，严重影响患者的身体功能和生活质量。尽管一些患者可以通过治疗得以康复，但大多数会经历长期反复发作，因此精神分裂症不仅是个人的疾病，同时也是一个不可小觑的社会问题，对其家庭、卫生保健系统和整个社会都会造成明显的经济负担。

[0003] 目前，临床上对精神分裂症的诊断主要是根据病人的详细病史与精神症状，再参考其发病年龄、病期、病程等来做综合判断，因此总体上是一个依赖于医生主观经验的过程，诊断结果常常因人而异。为了使精神分裂症的诊断更加客观化，提高诊断的一致性和准确度，近年来，世界各地的科研工作者一直致力于寻找精神分裂症的生物标志物，建立有效的检测方法。生物标志物指可供客观测定和评价的普通生理或病理或治疗过程中的某种特征性的生化指标，通过对它的测定可以获知机体当前所处的生物学过程中的进程。生物标志物的化学本质可以是DNA、RNA、蛋白或代谢物，一般从体液获得。将生物标志物应用于精神分裂症，可以有效辅助当前诊断中不确定的人为因素，减少错/误诊率并有助于指导用药和康复过程。

[0004] 因此，本领域急需可用于诊断首发精神分裂症的生物标志物，该标志物应该可靠，还应具备良好的灵敏度和特异度。

[0005] 精神病性症状是精神分裂症的标志性症状，双相情感障碍患者在躁狂和抑郁发作期间也可以有这些症状，比如幻觉和妄想。而这两者的治疗方法相去甚远，精神分裂症主要采用抗精神病药物，而双相情感障碍主要采用情感稳定剂治疗。另一方面，精神分裂症患者常出现阴性症状，即寡言少语，行为减少，神情淡漠等，这与严重抑郁症的表现很像，但治疗方法完全不同，对于抑郁症，主要采用抗抑郁药。错误诊断将导致患者得不到有效治疗，同时也将极大打击患者的治疗信心和对医生医院的信任，降低依从性，进一步造成各种严重的后果，因此迫切需要对精神分裂症与上述两种疾病进行鉴别诊断。

[0006] 目前检测精神分裂症的生物标志物存在检测灵敏度和准确度不高，尚没有能够区分精神分裂症和双相精神障碍以及抑郁症的检测方法。

[0007] IL-15是白介素家族之一，属4α超螺旋细胞因子超家族，其受体是由α、β和γ亚基构成的三聚体，α亚基可特异性的结合IL-15。IL-15/IL-15Rα广泛分布于各种组织细胞，除了能促进T细胞、NK细胞、树突状细胞等免疫细胞增殖分化以及功能成熟外，还可调节各种非免疫细胞功能，如促进纤维母细胞、上皮细胞、肌细胞、肝细胞、角化细胞、脂肪细胞等的增殖和分化，抑制凋亡。

[0008] 本发明人通过检测常见精神疾病患者及对照人群中的血清中游离IL-15Rα的水平提供了上述技术问题的解决方案。

[0009] 本公开提供了一个用于诊断首发精神分裂症的客观检测方法，即检测外周血中的游离IL-15Rα的水平。有如下突出优点和特点：

[0010] 1.对首发精神分裂症的诊断有较高的特异性和灵敏度。

[0011] 2.属于外周血指标，可方便获取。

[0012] 3.单指标检测方法，只需测一个指标，方便将来推广使用。也可方便联合其它检测方式得出更可靠的结果。

[0013] 4.可以对首发精神分裂症的发病严重程度进行监控。

[0014] 5.可以对首发精神分裂症和双相情感障碍以及抑郁症进行区分或者鉴别诊断，为精确化治疗奠定基础。

发明内容

[0015] 在一方面，本公开涉及IL15Rα在制备用于诊断首发精神分裂症患者的试剂盒中的用途。

[0016] 在一方面，本公开涉及IL15Rα在制备用于诊断首发精神分裂症患者预后的试剂盒中的用途。

[0017] 在另一方面，本公开涉及IL15Rα在制备用于区分首发精神分裂症患者和双相情感障碍患者的试剂盒中的用途。

[0018] 在另一方面，本公开涉及IL15Rα在制备用于区分首发精神分裂症患者和抑郁症患者的试剂盒中的用途。

[0019] 在一方面，本公开涉及检测IL15Rα的试剂在制备用于诊断首发精神分裂症患者的试剂盒中的用途。

[0020] 在一方面，本公开涉及检测IL15Rα的试剂在制备用于诊断首发精神分裂症患者预后的试剂盒中的用途。

[0021] 在另一方面，本公开涉及检测IL15Rα的试剂在制备用于区分首发精神分裂症患者和双相情感障碍患者的试剂盒中的用途。

[0022] 在另一方面，本公开涉及检测IL15Rα的试剂在制备用于区分首发精神分裂症患者和抑郁症患者的试剂盒中的用途。

[0023] 在一方面，本公开涉及判断首发精神分裂症风险的方法，其中外周血中IL15Rα的含量相比正常对照水平下降，指示患有首发精神分裂症的风险上升。

[0024] 在一方面，本公开涉及区分首发精神分裂症患者和抑郁症患者的方法，其中IL15Rα的含量相比正常对照水平下降指示患有首发精神分裂症的风险上升。

[0025] 在一方面，本公开涉及区分首发精神分裂症患者和双相情感障碍患者的方法，其中IL15Rα的含量相比正常对照水平下降指示患有首发精神分裂症的风险上升。

[0026] 在一方面，本公开涉及区分首发精神分裂症患者和抑郁症患者的方法，其中IL15Rα的含量相比正常对照水平无显著性差异指示患有抑郁症的风险上升。

[0027] 在一方面，本公开涉及区分首发精神分裂症患者和双相情感障碍患者的方法，其中IL15Rα的含量相比正常对照水平无显著性差异指示患有双相情感障碍的风险上升。

[0028] 根据前述任一方面，所述检测IL15Rα的试剂可以是IL15或其抗体，IL15Rα的配体或其抗体，IL15Rα的抗体，显色试剂，发光标志物，染料，荧光标志物等。

[0029] 根据前述任一方面，本公开涉及检测外周血、血浆、血清中IL15Rα的含量。

[0030] 根据前述任一方面，本公开通过ELISA、western-blot、质谱分析、色谱分析、受体-配体亲和实验等检测IL15Rα的含量。

[0031] 在一方面，本公开涉及用于诊断首发精神分裂症、双相情感障碍、或抑郁症的试剂盒，其中试剂盒中含有检测IL15Rα含量的试剂，任选地，所述试剂盒可以含有IL15或其抗体，IL15Rα的配体或其抗体，IL15Rα的抗体，显色试剂，发光标志物，染料，荧光标志物等。

[0032] 在另一方面，本发明的试剂盒还含有其他检测精神分裂症、双相情感障碍、或抑郁症的标志物检测试剂。

附图说明

[0033] 下面参照附图来描述本发明的优选实施方式，附图中：

[0034] 图1是可溶性IL15Rα在正常对照，精分超高危人群，首发精神分裂症患者人群中的血清含量。*，P<0.05；****，P<0.0001。

[0035] 图2是可溶性IL15Rα在正常对照，首发精神分裂症患者,双向情感障碍人群中的血清含量。*，P<0.05；****，P<0.0001。

[0036] 图3是可溶性IL15Rα在正常对照，首发精神分裂症患者,抑郁症人群中的血清含量。*，P<0.05；****，P<0.0001。

具体实施方式

[0037] 使用IL15Rα制备用于诊断首发精神分裂症患者的试剂盒可以包括表达纯化IL15Rα多肽、突变体、片段、抗原表位、融合蛋白等，然后制备相应的抗体或抗原结合片段用于检测对应的配体或抗原，也可以使用IL15Rα多肽、突变体、片段、抗原表位、融合蛋白在试剂盒中作为阳性对照或竞争性结合蛋白等。

[0038] 使用IL15Rα制备用于诊断首发精神分裂症患者预后的试剂盒可以包括表达纯化IL15Rα多肽、突变体、片段、抗原表位、融合蛋白等，然后制备相应的抗体或抗原结合片段用于检测对应的配体或抗原，也可以使用IL15Rα多肽、突变体、片段、抗原表位、融合蛋白在试剂盒中作为阳性对照或竞争性结合蛋白等。

[0039] 使用IL15Rα制备用于区分首发精神分裂症患者和双相情感障碍患者的试剂盒可以包括表达纯化IL15Rα多肽、突变体、片段、抗原表位、融合蛋白等，然后制备相应的抗体或抗原结合片段用于检测对应的配体或抗原，也可以使用IL15Rα多肽、突变体、片段、抗原表位、融合蛋白在试剂盒中作为阳性对照或竞争性结合蛋白等。

[0040] 使用IL15Rα制备用于区分首发精神分裂症患者和抑郁症患者的试剂盒可以包括表达纯化IL15Rα多肽、突变体、片段、抗原表位、融合蛋白等，然后制备相应的抗体或抗原结合片段用于检测对应的配体或抗原，也可以使用IL15Rα多肽、突变体、片段、抗原表位、融合蛋白在试剂盒中作为阳性对照或竞争性结合蛋白等。

[0041] 检测IL15Rα的试剂可以包括IL15或其抗体，IL15Rα的配体或其抗体，IL15Rα的抗体，显色试剂，发光标志物，染料，荧光标志物等。本领域技术人员明白，本公开的检测外周血中的游离IL-15Rα的水平可以使用商品化的ELISA试剂盒，也可以使用western-blot、质谱分析、色谱分析、受体-配体亲和实验等检测IL15Rα的含量。根据具体实验条件和需要，本领域技术人员可以知道如何选择常规检测手段，只要该手段可以检测外周血中的游离IL-15Rα的水平即可。本公开使用了市场销售的商品化可溶性IL-15RαELISA检测试剂盒对外周血中IL15Rα的水平进行了检测，根据IL15Rα的水平高低比较可以进行判断。本领域技术人员可以理解，其他检测方法，例如western-blot可以根据检测条带的粗细、深浅、发光强度等对IL15Rα的水平进行比较，质谱分析可以进行定量比较、色谱分析可以根据外周血中IL15Rα的特征峰面积等进行对应的含量比较，受体配体亲和实验可以采用IL15Rα的配体例如IL15或IL15Rα的抗体作为特异性亲和配体来检测IL15Rα的水平。

[0042] 本领域技术人员同样可以理解，检测IL15Rα在外周血中的水平可以检测全血、血浆或血清中的IL15Rα的水平，根据具体情况可以检测外周血全血中IL15Rα的水平，或者分离血浆后检测IL15Rα的水平，或者分离血清后检测IL15Rα的水平。

[0043] 根据本公开的方法，当使用现有的心理学评定量表或精神疾病诊断量表或手册等无法判断时，检测外周血中IL15Rα的水平可以提供更客观的判断依据。例如，外周血中IL15Rα的含量相比正常对照水平下降，指示患有首发精神分裂症的风险上升。

[0044] 根据本公开涉及区分首发精神分裂症患者和抑郁症患者的方法，其中IL15Rα的含量相比正常对照水平下降指示患有首发精神分裂症的可能性增加。

[0045] 根据本公开的区分首发精神分裂症患者和双相情感障碍患者的方法，其中IL15Rα的含量相比正常对照水平下降指示患有首发精神分裂症的可能性增加。

[0046] 根据本公开的区分首发精神分裂症患者和抑郁症患者的方法，其中IL15Rα的含量相比正常对照水平无显著性差异指示患有抑郁症的可能性增加。

[0047] 根据本公开的区分首发精神分裂症患者和双相情感障碍患者的方法，其中IL15Rα的含量相比正常对照水平无显著性差异指示患有双相情感障碍的可能性。

[0048] 本公开还涉及用于诊断精神分裂症、双相情感障碍、或抑郁症的试剂盒，其中试剂盒中含有检测IL15Rα含量的试剂，任选地，所述试剂盒可以含有IL15或其抗体，IL15Rα的配体或其抗体，IL15Rα的抗体，显色试剂，发光标志物，染料，荧光标志物等。

[0049] 在另一方面，本发明的试剂盒还含有其他检测精神分裂症、双相情感障碍、或抑郁症的标志物检测试剂。

[0050] 例如本发明的试剂盒可以同时包含检测IL15Rα含量的试剂和精神分裂症的其他生物标志物检测试剂，所述精神分裂症的其他生物标志物的检测试剂例如检测a)3-羟基丁酸或其类似物；b)甘油酸或其类似物；和c)半胱氨酸或其类似物的一种或多种的试剂；还例如检测microRNA分子标志物的试剂，所述血液microRNA分子标志物是has-miR-132，miR-132成熟序列为：UAACAGUCUACAGCCAUGGUCG；再例如检测用于精神分裂症诊断的lncRNA标志物的检测试剂或者检测精神分裂症诊断的circRNA标志物的检测试剂等。

[0051] 如本发明的试剂盒可以同时包含检测IL15Rα含量的试剂和抑郁症的其他生物标志物检测试剂，所述抑郁症的其他生物标志物的检测试剂例如检测脑源性神经营养因子、皮质醇、表皮生长因子、髓过氧化物酶、催乳素、抵抗素、可溶性肿瘤坏死因子α受体II型的水平的试剂；还例如检测microRNA分子标志物的试剂和检测用于抑郁症诊断的lncRNA标志物的检测试剂或者检测抑郁症诊断的circRNA标志物的检测试剂等。

[0052] 如本发明的试剂盒可以同时包含检测IL15Rα含量的试剂和双相情感障碍的其他生物标志物检测试剂。

[0053] 通过与其他生物标志物的检测试剂组合使用，本公开的试剂盒可以提供更客观、准确的诊断结果。

[0054] 本公开所述的精神分裂症超高危或精分超高危指精神分裂症患者在首次发病前所处的精神分裂症前驱期(prodromal stage)，有前驱期表现的人群发展为精神分裂症的可能性较大，这类人群目前被称为超高危人群(ultra high risk for psychosis,UHR)。

[0055] 本公开所述的首发精神分裂症是指患者处于首次精神病发作期，未用药或发病以来连续用抗精神病药不超过1个月的状态。

[0056] 实施例

[0057] 方法：

[0058] 所有参加实验的对象自愿签署知情同意书，并能依从研究方案；右利手，年龄在16～40岁之间。各组间年龄、性别、教育程度匹配，无统计学差异。

[0059] 出现以下情况之一者需排除此研究之外：

[0060] 妊娠，哺乳期妇女；

[0061] 极度兴奋、冲动、不合作者；

[0062] 有严重自杀企图者；

[0063] 头部外伤史，意识丧失超过一小时者；

[0064] 伴随严重躯体疾病者或器质性脑功能疾病，明显影响精神疾病治疗者；

[0065] 排除继发抑郁症状(躯体疾病、药物或其它原因)；

[0066] 近期3个月内接受电痉挛(MECT)治疗者。

[0067] 首发精神分裂症组入组标准：符合美国精神疾病诊断与统计手册第四版(DSM-IV)的精神分裂症诊断标准；发病年龄15岁以上，处于首次精神病发作期，未用药或发病以来连续用抗精神病药不超过1个月。

[0068] 精神分裂症超高危组入组标准：经精神病风险综合征定式访谈(Structured Interview for Psychosis-risk Syndromes,SIPS)筛查符合精神病风险综合征诊断。

[0069] 双向情感障碍入组标准：符合美国精神疾病诊断与统计手册第四版(DSM-IV)的双相情感障碍诊断标准。

[0070] 抑郁症入组标准：符合美国精神疾病诊断与统计手册第四版(DSM-IV)的抑郁症诊断标准。

[0071] 健康对照组：与上述各组年龄、性别、受教育程度相匹配的健康人。

[0072] 根据已通过的伦理审查实验方案，以及诊断标准，筛选出正常对照人群、首发精神分裂症、超高危人群、双相情感障碍和抑郁症人群。受试者例数：首发精神分裂症患者70例，抑郁患者98例，双相患者86例，精分超高危64例，健康97例。共395例。抽取外周血5毫升，常温下促凝管内凝固，500g离心10分钟，分离上层血清，并即刻分装，储藏于-80℃超低温冰箱，备用。

[0073] 购买市场销售的商品化可溶性IL-15RαELISA检测试剂盒，按照使用说明，每名被试取100ul血清进行检测。本实验采用的试剂盒为武汉华美生物的人白介素15受体α亚基(IL15RA)ELISA kit(货号CSB-EL011594HU)。

[0074] 实施例1：首发精神分裂症的诊断以及首发精神分裂症患病严重程度的判定[0075] 取精神分裂症人群，精分超高危人群和健康对照人群的血清，用商品化可溶性IL-15RαELISA检测试剂盒检测血清中的可溶性IL15Rα浓度。采用t检验判断不同组之间的统计学差异。结果如图1中所示，首发精神分裂症患者的可溶性IL15Rα浓度最低，并与健康对照组有极显著差异，而超高危人群介于正常人与患者之间，表现出良好的量效关系。该结果表明可以利用可溶性IL15Rα浓度检测来进行首发精神分裂症的诊断以及首发精神分裂症患病严重程度的判定。

[0076] 实施例2：首发精神分裂症的诊断以及首发精神分裂症与双相情感障碍的鉴别诊断

[0077] 取首发精神分裂症人群，双相情感障碍人群和健康对照人群的血清，用商品化可溶性IL-15RαELISA检测试剂盒检测血清中的可溶性IL15Rα浓度。采用t检验判断不同组之间的统计学差异。结果如图2中所示，首发精神分裂症患者的可溶性IL15Rα浓度最低，并与健康对照组有极显著差异，而双相情感障碍人群与健康对照组类似而与首发精神分裂症患者的可溶性IL15Rα浓度存在显著性差异。该结果表明可以利用可溶性IL15Rα浓度检测来进行首发精神分裂症的诊断以及首发精神分裂症与双相情感障碍的鉴别诊断。

[0078] 实施例3：首发精神分裂症的诊断以及首发精神分裂症与抑郁症的鉴别诊断[0079] 取首发精神分裂症人群，抑郁症人群和健康对照人群的血清，用商品化可溶性IL-15RαELISA检测试剂盒检测血清中的可溶性IL15Rα浓度。采用t检验判断不同组之间的统计学差异。结果如图2中所示，首发精神分裂症患者的可溶性IL15Rα浓度最低，并与健康对照组有极显著差异，而抑郁症人群与健康对照组类似而与首发精神分裂症患者的可溶性IL15Rα浓度存在显著性差异。该结果表明可以利用可溶性IL15Rα浓度检测来进行首发精神分裂症的诊断以及首发精神分裂症与抑郁症的鉴别诊断。