咔唑磺酰胺衍生物或其可药用盐及其制备方法和应用转让专利
申请号 : CN201610323036.2
文献号 : CN107382967B
文献日 : 2021-02-19
发明人 : 胡来兴 , 刘永华 , 武燕彬
申请人 : 中国医学科学院医药生物技术研究所
摘要 :
本发明提供一种咔唑磺酰胺衍生物或其可药用盐及其制备方法和应用。其中，咔唑磺酰胺衍生物或其可药用盐具有如下通式(1)。本发明提供的咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐作为小分子的微管蛋白抑制剂不仅具有抗微管作用，还具有显著的抗肿瘤活性，同时该咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐分子量小，合成简单且毒副作用小。
权利要求 :
1.一种咔唑磺酰胺衍生物或其可药用盐，其特征在于，所述咔唑磺酰胺衍生物为：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(乙酰胺-2-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(N,N-二甲基乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(吡咯-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(哌啶-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(吗啉-4-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(硫代吗啉-4-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(N-甲基哌嗪-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{2-[4-(吡咯-1-基)-哌啶-1-基]-乙基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{2-(8-甲基-2,8-二氮螺[4,5]葵烷-2-基)-乙基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(咪唑-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[(3-N,N-二甲基)丙基-1-基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[3-(N-甲基哌嗪-1-基)-丙基-1基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{2-[4-(吡咯-1-基)-哌啶-1-基]-丙基-1基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{3-(8-甲基-2,8-二氮螺[4,5]葵烷-2-基)-丙基-1基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[3-(咪唑-1-基)-丙基-1-基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-氨乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基)-3-羟基-2(s)-氨基-丙酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-羟基乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(3-羟基丙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺；
2-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺乙基二羟基磷酸酯；
2-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺乙基磷酸二钠盐；
2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基-2-(N-甲基哌嗪-4-基)乙酸酯；或，
2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙氧基-甲酸铵。
2.权利要求1所述咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐在制备微管蛋白抑制剂中的应用。
3.权利要求1所述咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐在制备抗肿瘤药物中的应用。
4.一种抗肿瘤药物组合物，其包括治疗有效量的权利要求1所述的咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐和药学上可接受的药用辅料。
5.权利要求1所述的咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐的制备方法，其特征在于，包括将化合物(1)与有机金属试剂反应制成金属盐，再将其产物与Br(CH2)nCONR1R2反应，反应过程如下所示，其中，n为1；R1和R2为氢。
说明书 :
咔唑磺酰胺衍生物或其可药用盐及其制备方法和应用
技术领域
[0001] 本发明涉及一种咔唑磺酰胺衍生物或其可药用盐及其制备方法和应用，属于医药技术领域。
背景技术
[0002] 肿瘤细胞具有快速增值能力，通过有丝分裂来维持细胞的形态、功能和增值，若阻断有丝分裂的过程即可导致肿瘤细胞增值受阻。基于微管在有丝分裂过程中发挥的重要作用，以微管蛋白为靶点的抗肿瘤药物成为研究的热点。传统的抗有丝分裂剂，主要是微管蛋白抑制剂，如紫杉醇和长春碱类抗肿瘤药物，可以通过与微管蛋白的特殊位点相结合，抑制微管的聚合或解聚，使肿瘤细胞在有丝分裂过程中，纺锤体难以形成，进而阻断肿瘤细胞的生长。
[0003] 作用于微管蛋白的紫杉醇和长春碱类抗有丝分裂剂已广泛地应用于临床治疗各类恶性肿瘤。但是，这些微管蛋白抑制剂类药物的应用和制备中都具有如下的问题：作为一种大分子的天然产物，其合成的难度很大；生物利用度差，具有神经毒副作用，特别是，多重耐药的糖蛋白(P-gp)的出现，使其治疗的有效性受到了严重的挑战，在某种程度上限制了紫杉醇和长春碱类微管蛋白抑制剂的开发和应用。因此，合成具有新型的作用机制，良好药理学性质，并对各类肿瘤细胞有效的小分子抗有丝分裂剂是非常有必要的。
发明内容
[0004] 本发明提供一种咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐，其作为小分子的微管蛋白抑制剂不仅具有抗微管作用，还具有显著的抗肿瘤活性，同时该咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐分子量小，合成简单且毒副作用小。
[0005] 本发明还提供了制备该类咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐的方法。
[0006] 本发明还提供了含有该咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐作为活性成分的药物组合物。
[0007] 本发明还提供了该类咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐作为抗肿瘤药物的应用，其可以作为微管蛋白抑制剂，尤其是治疗实体肿瘤中的应用，包括与其它抗肿瘤的化疗药物和放疗等的联合应用。
[0008] 为实现上述目的，本发明首先提供一种咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐，其具有如下通式(1)：
[0009]
[0010] 其中，n为1-6，R为通式(i)、通式(i)或通式(iii)表示的结构，
[0011]
[0012] 该式(i)和式(ii)中，R1和R2分别代表相同或不同的以下基团：氢、低级烷基、羟基烷基、胺基烷基、氨基酸或上述基团形成的盐，或者R1、R2和N原子共同形成5-7元环，例如吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基等或上述基团形成的盐；
[0013] -CH2-O-R3 式(iii)
[0014] 该通式(iii)中，R3代表以下基团：氢、酰胺基、磺酰胺基、磷酸基或上述基团形成的盐。
[0015] 其中，以上定义中所述的“低级烷基”尤其是指碳原子数在1-6的直链烷基或碳原子数在3-6的支链烷基或环烷基。碳原子数在1-6的直链烷基例如可列举甲基、乙基、丙基、烯丙基、正丁基、正戊基、正己基或正庚基等；碳原子数在3-6的支链烷基例如可列举异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基或异己基等；碳原子数在3-6的环烷基例如可列举环丙基、环丁基、环戊基或环己基等。
[0016] 进一步地，R1和R2例如可为甲基或乙基。所述R3可为经亲水性基团取代的酰胺基、磺酰胺基或磷酸基。例如为经N杂环或氨基酸等取代基取代，其中N杂环可为取代或非取代的吡咯环、哌啶环、哌嗪环或吗啉环。上述N杂环或氨基酸等取代基是将酰胺基、磺酰胺基或磷酸基中的氢进行取代。
[0017] 所述“氨基酸”一般可以是极性氨基酸，如甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸或赖氨酸等。
[0018] 所述“酰胺基”一般可以是甲基酰胺基、乙基酰胺基、正丙基酰胺基、异丙基酰胺基、烯丙基酰胺基、环丙基酰胺基、正丁基酰胺基、异丁基酰胺基、正戊基酰胺基、正己基酰胺基、苯基酰胺基或甲苯基酰胺基等。
[0019] 本发明中的咔唑磺酰胺衍生物的示例可以有：
[0020] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(乙酰胺-2-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(1)；
[0021] N-(2-溴乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(2)[0022] N-(3-氯丙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(3)[0023] N-(N,N-二甲基乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(4)；
[0024] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(吡咯-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(5)；
[0025] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(哌啶-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(6)；
[0026] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(吗啉-4-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(7)；
[0027] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(硫代吗啉-4-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(8)；
[0028] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(N-甲基哌嗪-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(9)；
[0029] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{2-[4-(吡咯-1-基)-哌啶-1-基]-乙基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(10)；
[0030] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{2-(8-甲基-2,8-二氮螺[4,5]葵烷-2-基)-乙基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(11)；
[0031] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(咪唑-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(12)；
[0032] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[(3-N,N-二甲基)丙基-1-基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(14)；
[0033] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[3-(N-甲基哌嗪-1-基)-丙基-1基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(15)；
[0034] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{2-[4-(吡咯-1-基)-哌啶-1-基]-丙基-1基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(16)；
[0035] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{3-(8-甲基-2,8-二氮螺[4,5]葵烷-2-基)-丙基-1基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(17)；
[0036] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[3-(咪唑-1-基)-丙基-1-基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(18)；
[0037] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-氨乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(24)；
[0038] N-(2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基)-2-氨基乙酰胺(28)；
[0039] N-(2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基)-3-羟基-2(s)-氨基-丙酰胺(26)；
[0040] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-羟基乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(31)；
[0041] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(3-羟基丙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(32)；
[0042] 2-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺乙基二羟基磷酸酯(35)；
[0043] 2-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺乙基磷酸二钠盐(37)；
[0044] 2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基-2-(N-甲基哌嗪-4-基)乙酸酯(39)；或者
[0045] 2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙氧基-甲酸铵(40)。
[0046] 作为一类新的小分子微管蛋白抑制剂，经药理实验表明，该类化合物不仅能将肿瘤细胞阻断在有丝分裂(M)期，还具有显著的抗肿瘤活性。
[0047] 本发明进一步提供了该咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐作为微管蛋白抑制剂的应用，及在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0048] 本发明另一方面还提供了一种抗肿瘤药物组合物，其包括治疗有效量的上述咔唑磺酰胺衍生物或其药用盐及药学上可接受的药用辅料，可将化合物本身或其药用盐与可药用赋形剂、稀释剂等混合制备成片剂、胶囊、颗粒剂、散剂、糖浆剂或注射剂等剂型。
[0049] 上述制剂可通过常规制药方法制备。可用的药用辅剂的例子包括赋形剂(例如糖类衍生物如乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和山梨糖醇；淀粉衍生物如玉米淀粉、土豆淀粉、糊精和羧甲基淀粉；纤维素衍生物如结晶纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠；阿拉伯胶；右旋糖酐；硅酸盐衍生物如偏硅酸镁铝；磷酸盐衍生物如磷酸钙；碳酸盐衍生物如碳酸钙；硫酸盐衍生物如硫酸钙等)、粘合剂(例如明胶、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙二醇)、崩解剂(例如纤维素衍生物如羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮)、润滑剂(例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、鲸蜡、硼酸、苯甲酸钠、亮氨酸)、稳定剂(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯等)、矫味剂(例如常用的甜味剂、酸味剂和香料等)、稀释剂和注射液用溶剂(例如水、乙醇和甘油等)。
[0050] 本发明化合物的给药量随患者的年龄、性别和病情等的不同而不同。一般成人的给药量为大约50-5000mg/次，优选100-3000mg/次。
[0051] 本发明的再一方面还提供上述咔唑磺酰胺衍生物或其可药用盐的制备方法，其中，
[0052] 1、R为式(i)时，式(1)化合物的制备方法包括将化合物(1)与有机金属试剂反应制成金属盐，再将其与Br(CH2)nCONR1R2反应，反应过程如下所示。反应溶剂可使用干燥的四氢呋喃或DMF，有机金属试剂可例如NaH或叔丁醇钾。
[0053]
[0054] 其中，n为1-6，R1和R2分别代表相同或不同的以下基团：氢、低级烷基、羟基烷基、胺基烷基、氨基酸或上述基团形成的盐，或者R1、R2和N原子共同形成5-7元环或其盐。
[0055] 上述化合物(1)N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-取代)-9-甲基咔唑-3-磺酰胺(IMB105)可以通过参考文献(Mitsumori,Susumu；Tsuri,Tatsuo；Honma,Tsunetoshi；et al.Journal of Medicinal Chemistry(2003),46(12),2436-2445)的方法或其它相关报道的方法合成。
[0056] 2、R为式(ii)时，通式(I)化合物的制备方法包括将化合物(1)与卤代烷基醇通过反应得到卤代衍生物，再与二级胺或酰胺反应，反应过程如下所示，
[0057]
[0058] 其中，n为1-6，R1和R2分别代表相同或不同的以下基团：氢、低级烷基、羟基烷基、胺基烷基、氨基酸或上述基团形成的盐，或者R1、R2和N原子共同形成5-7元环或其盐。
[0059] 在上述合成路线中，式(ii)基团R1R2N-的具体示例可如表1所示。
[0060] 表1
[0061]
[0062] 3、R为式(iii)时，通式(I)化合物的制备方法包括将化合物(1)与有机金属试剂反应制成金属盐，并将其与Br(CH2)nCH2OTBDMS反应获得咔唑磺酰胺的硅醇类衍生物，再将其中的-TBDMS转化为相应基团以制备具有通式(I)结构的咔唑磺酰胺，反应过程如下所示，[0063]
[0064] 其中，n为1-6，R3代表氢、酰胺基、磺酰胺基、磷酸基或上述基团形成的盐。
[0065] 得到的咔唑磺酰胺衍生物可以参照现有技术中的方法制备成药用盐，该药用盐例如可包括与无机酸，如盐酸、硫酸形成的盐，与有机酸，如乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、马来酸、草酸、琥珀酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、扁桃酸、抗坏血酸或苹果酸形成的盐，以及氨基酸，如丙氨酸、天冬氨酸、赖氨酸形成的盐或与磺酸，如甲磺酸、对甲苯磺酸形成的盐。具体的制备方法可例如，在冰浴条件下，将得到的咔唑磺酰胺衍生物溶于适量的无水甲醇中，滴入盐酸甲醇溶液并搅拌，反应结束后提纯并固化得盐酸盐固体。
[0066] 此外，得到的咔唑磺酰胺衍生物可以参照现有技术中的方法制备成前药。以下以化合物31和32以及其磷酸酯衍生物35和36为例，对其合成路线做详细说明。
[0067]
[0068] 如上述式(6)所示，IMB105在干燥的四氢呋喃或DMF中与有机金属试剂如NaH反应制成金属盐，端基溴取代的烷基硅醇类化合物(Br(CH2)nCH2OTBDMS)通过Sn2反应，得到硅醇类衍生物(29,30)，进一步在TBAF条件下脱去硅基保护基，得到醇类衍生物(31,32)，醇与氯代亚磷酸苄酯在吡啶中反应，得到苄基保护的磷酸酯衍生物(33,34)，钯碳催化下氢化脱去苄基，得到磷酸酯衍生物(35,36)，根据设计需要再进一步与甲醇钠反应得到相应的钠盐(37,38)。醇类衍生物(31,32)与2-(4-N-甲基)哌嗪乙酸在偶连试剂作用下偶连，合成乙酸酯类衍生物39。
[0069] 本发明化合物的抗肿瘤活性和药理实验
[0070] 利用本发明所制备出的部分咔唑磺酰胺化合物，发明人同时提供了以下的实验结果，旨在说明本发明化合物的药用功效。
[0071] 一、体外抗肿瘤活性和水溶解度的测定
[0072] 测试方法：磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B，SRB)法。
[0073] 试验材料：人肝癌细胞HepG2和Bel-7402，人乳腺癌细胞MCF-7，人胰腺癌细胞MIAPaCa-2
[0074] 细胞培养：将以上的几种肿瘤细胞置于含有10％的胎牛血清(FBS)、1％双抗(青霉素和链霉素)的DMEM培养液中，37℃、5％CO2饱和湿度培养.
[0075] 试验步骤：
[0076] 1)取培养瓶中细胞至96孔板中，使每孔中的细胞数在4000-8000之间，置37℃，5％CO2，培养24小时；
[0077] 2)加入不同浓度的药物(DMSO的浓度不超过0.5％,v/v)，药物组一般设立5个浓度梯度，设3-4个复孔；
[0078] 3)继续培养48小时后，贴壁细胞用经4℃预冷的50％TCA固定，96孔板置于4℃冰箱放置1小时；
[0079] 4)1小时后，用蒸馏水或者自来水洗涤细胞孔5次，以除去TCA、培养液、低分子量代谢物以及血清蛋白等；
[0080] 5)待其细胞板晾干后，用0.4％的SRB染色15-30分钟；
[0081] 6)用1％的乙酸洗涤5次，晾干；
[0082] 7)加入10mmol/L Tris溶液150μL溶解，低速震荡5-10分钟，用酶联免疫检测仪在波长490nm处测定吸收值。实验同时设置空白孔(加培养基、S RB和DMSO)、对照孔(加细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、SRB和DMSO)，每孔设定3个复孔。根据所测得的OD值，按照下列公式计算药物对细胞的抑制率IC50，结果参见表2。
[0083] 抑制率＝(对照孔OD值-加药孔OD值)/(对照孔OD值-空白孔OD值)×100％[0084] 表2
[0085]
[0086]
[0087] 由表2可知，所列举的咔唑磺酰胺化合物对于多种肿瘤细胞有抑制活性，尤其对于HepG2和MIA PaCa-2具有较强的抑制活性。
[0088] 此外，本发明人还对上述咔唑磺酰胺化合物的水溶解度进行了测定，结果参见表2，具体方法可参照现有技术。如表2所示，表中所列举的咔唑磺酰胺化合物或其盐酸盐的水溶解度大多在20mg/mL以上，与IMB105(IMB105的水溶解度为<0.009mg/mL)相比，有较大幅度的提高。
[0089] 三、体内抗肿瘤活性测定
[0090] 通常，咔唑磺酰胺化合物的水溶解度和其体内活性成一定程度上的正相关性。根据上述咔唑磺酰胺化合物的水溶解度试验，本发明人进一步对咔唑磺酰胺化合物的体内抗肿瘤活性进行了如下试验。
[0091] 抗人体肝癌BALB/c裸鼠10只(雌性，4-8周龄，体重15-20克)，裸鼠右侧腋窝皮下接种HepG2细胞瘤块，10天后瘤体积长到100mm3左右开始分空白对照组和治疗组给药各5只。
[0092] 试验样品：将IMB-105用5％的Tween-80氯化钠注射液配制成10mg/mL的浓度每只裸鼠每次腹腔注射0.2ml，即100mg/kg；将化合物4,9,10和14用氯化钠溶液配成1mg/ml溶液，每只裸鼠每次腹腔注射0.2ml，即10mg/kg。空白对照组隔天给以腹腔注射氯化钠注射液0.2mL，治疗组隔天腹腔注射不同浓度的试验样品0.2mL，共4次。
[0093] 每周测量肿瘤体积直到超过2000mm3时，结束实验。肿瘤体积＝长×宽2×0.52。按照下式计算给药组与对照组的肿瘤生长抑制率，结果如表2所示。
[0094] 生长抑制率(％)＝(C-T)/C×100
[0095] T：给药组平均肿瘤体积-给药前平均肿瘤体积
[0096] C：对照组平均肿瘤体积-给药前平均肿瘤体积
[0097] 表2
[0098]
[0099] 表2为本发明化合物对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型的作用情况。由表2、图1和图2的数据结果表明，空白对照组和治疗组裸鼠的体重均有缓慢增长；且与空白对照组相比，治疗组裸鼠的肿瘤体积明显较小，说明本发明化合物具有显著的体内肿瘤抑制活性；与对照药IMB105和紫杉醇相比，可以看出本发明化合物在使用剂量较小的情况下，能够达到与对照药IMB105和紫杉醇相类似的抗肿瘤效果。
[0100] 综上，本发明提供的含咔唑磺酰胺类衍生物及其可药用盐，在抗肿瘤方面表现出良好的活性，为开发新型抗肿瘤药物提供了可能，具有良好的应用前景；同时，本发明提供的含咔唑磺酰胺类衍生物及其可药用盐的合成路线简单，成本较低，利于工业化实施。
附图说明
[0101] 图1为本发明的咔唑磺酰胺衍生物用于治疗人肝癌HepG2时肿瘤体积随接种后天数的变化曲线；
[0102] 图2为本发明的咔唑磺酰胺衍生物用于治疗人肝癌HepG2时小鼠体重(g)随接种后天数的变化曲线。
具体实施方式
[0103] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0104] 实施例1：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(乙酰胺-2-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(1)
[0105] N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(IMB105)的制备按照Mitsumori,Susumu；Tsuri,Tatsuo；Honma,Tsunetoshi等，Journal of Medicinal Chemistry(2003),46(12),2436-2445中的方法合成得到。将N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(IMB105)(0.30g,0.78mmol)溶于5mL无水DMF中，加入碘代乙酰胺(0.20g,1.1mmol)和氢化钠(40mg,60％in oil,1.0mmol)，70℃条件下反应8h，TLC检测反应完全。减压除去DMF，二氯甲烷提取剩余物，水和饱和食盐水依次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液柱层析(CDM/MeOH/浓氨水＝40/1/0.1)分离纯化得固体0.35g(产率98％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm 3.73(3H,s),3.94(3H,s),3.98(3H,s),4.17(2H,br s),6.39(1H,d,J＝8.4Hz),7.20(1H,d,J＝8.4Hz),7.39(1H,t,J＝8.0Hz),7.41(1H,br s),7.49(1H,d,J＝
8.8Hz),7.53(1H,d,J＝8.0Hz),7.63(1H,td,J＝8.4,1.6Hz),7.81(1H,dd,J＝8.4,1.6Hz),
8.14(1H,d,J＝8.0Hz),8.47(1H,d,J＝2.0Hz)；HRMS(ESI+)455.1392,Calcd for C22H23N4O5S 455.1384[M+H]+.
8.8Hz),7.53(1H,d,J＝8.0Hz),7.63(1H,td,J＝8.4,1.6Hz),7.81(1H,dd,J＝8.4,1.6Hz),
8.14(1H,d,J＝8.0Hz),8.47(1H,d,J＝2.0Hz)；HRMS(ESI+)455.1392,Calcd for C22H23N4O5S 455.1384[M+H]+.
[0106] 实施例2：N-(N,N-二甲基乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(4)
[0107] (1)N-(2-溴乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺的制备(2)
[0108] 将IMB105(1.0g,2.5mmol)溶于20mL无水四氢呋喃中，加入溴乙醇(0.22mL,3.0mmol)，三苯基磷(1.3g,5.0mmol)，0℃条件下，加入DEAD(偶氮二甲酸二乙酯40％in toluene，2.0mL,4.25mmol)，搅拌约10min，室温搅拌至TLC检测反应完全(约5h)。乙酸乙酯(50mL)加入反应液中，水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，柱层析(PE/AcOEt＝4/
1-2/1)分离纯化得固体1.2g(产率95％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm 3.39(3H,s),3.51(2H,t,J＝7.2Hz),3.90(3H,s),3.96(5H,br s),6.36(1H,d,J＝8.4Hz),7.37(1H,t,J＝8.4Hz),
7.45(2H,d,J＝8.8Hz),7.51(1H,d,J＝8.4Hz),7.61(1H,dd,J＝8.8,1.6Hz),7.62(1H,d,J＝8.4Hz),7.81(1H,dd,J＝8.8,2.0Hz),8.14(1H,d,J＝8.4Hz),8.46(1H,d,J＝1.6Hz)；
13CNMR(CDCl3,125Hz)δppm 29.57,30.09,51.37,53.23,54.00,101.57,108.17,109.21,
113.51,120.38,120.91,122.46,122.56,125.24,127.06,129.62,141.79,142.96,144.54,
159.03,162.70；HRMS(ESI+)504.0591,Calcd for C22H23Br N3O4S 504.0587[M+H]+.[0109] (2)N-(N,N-二甲基乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺的制备(4)
1-2/1)分离纯化得固体1.2g(产率95％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm 3.39(3H,s),3.51(2H,t,J＝7.2Hz),3.90(3H,s),3.96(5H,br s),6.36(1H,d,J＝8.4Hz),7.37(1H,t,J＝8.4Hz),
7.45(2H,d,J＝8.8Hz),7.51(1H,d,J＝8.4Hz),7.61(1H,dd,J＝8.8,1.6Hz),7.62(1H,d,J＝8.4Hz),7.81(1H,dd,J＝8.8,2.0Hz),8.14(1H,d,J＝8.4Hz),8.46(1H,d,J＝1.6Hz)；
13CNMR(CDCl3,125Hz)δppm 29.57,30.09,51.37,53.23,54.00,101.57,108.17,109.21,
113.51,120.38,120.91,122.46,122.56,125.24,127.06,129.62,141.79,142.96,144.54,
159.03,162.70；HRMS(ESI+)504.0591,Calcd for C22H23Br N3O4S 504.0587[M+H]+.[0109] (2)N-(N,N-二甲基乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺的制备(4)
[0110] 将N-(2-溴乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(2)(0.5g,1.0mmol)溶于干燥的DMF(10.0mL)中，加入碘化钠(1.5g,10.0mmol)和二甲胺(2.5mL,2.0M in THF,5.0mmol)，70℃加热反应至原料反应完全(TLC检测，约4h)。减压除去DMF，剩余物用二氯甲烷提取，饱和碳酸氢钠溶液、水和饱和食盐水依次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝15/1/0.1)分离纯化得油状物0.46g(产率98％)。1HNMR(CDCl3,
500MHz)δppm 2.28(6H,s),2.50(2H,t,J＝8.0Hz),3.41(3H,s),3.75(2H,br s),3.91(3H,s),3.94(3H,s),6.32(1H,d,J＝8.4Hz),7.34(1H,t,J＝8.0Hz),7.42(2H,d,J＝8.4Hz),
7.48(1H,d,J＝8.6Hz),7.54(1H,d,J＝8.0Hz),7.58(1H,t,J＝8.6Hz),7.81(1H,dd,J＝
8.6,2.0Hz),8.11(1H,d,J＝8.0Hz),8.48(1H,d,J＝2.0Hz)；HRMS(ESI+)469.1916,Calcd for C24H29N4O4S469.1904[M+H]+。冰浴条件下，将油状物(0.30g,0.64mmoL)溶于无水甲醇中，滴入3M盐酸甲醇溶液(0.25mL,0.77mmoL),低温搅拌1h，将反应液浓缩，加入适量无水乙醚，搅拌，析出白色固体，过滤得盐酸盐产物0.3g.
500MHz)δppm 2.28(6H,s),2.50(2H,t,J＝8.0Hz),3.41(3H,s),3.75(2H,br s),3.91(3H,s),3.94(3H,s),6.32(1H,d,J＝8.4Hz),7.34(1H,t,J＝8.0Hz),7.42(2H,d,J＝8.4Hz),
7.48(1H,d,J＝8.6Hz),7.54(1H,d,J＝8.0Hz),7.58(1H,t,J＝8.6Hz),7.81(1H,dd,J＝
8.6,2.0Hz),8.11(1H,d,J＝8.0Hz),8.48(1H,d,J＝2.0Hz)；HRMS(ESI+)469.1916,Calcd for C24H29N4O4S469.1904[M+H]+。冰浴条件下，将油状物(0.30g,0.64mmoL)溶于无水甲醇中，滴入3M盐酸甲醇溶液(0.25mL,0.77mmoL),低温搅拌1h，将反应液浓缩，加入适量无水乙醚，搅拌，析出白色固体，过滤得盐酸盐产物0.3g.
[0111] 实施例3：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(吡咯-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(5)
[0112] 合成方法同上述化合物(4)的合成。N-(2-溴乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(2)(0.5g,1.0mmol)与四氢吡咯(0.42mL,5.0mmoL)反应,柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝20/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm 1.60(4H,br s),2.48(4H,br s),2.58(2H,br s),3.40(3H,s),3.82(2H,br s),3.88(3H,s),3.91(3H,s),6.32(1H,d,J＝8.4Hz),7.35(1H,t,J＝8.0Hz),7.44(2H,d,J＝8.8Hz),7.50(1H,d,J＝
8.4Hz),7.54(1H,d,J＝8.0Hz),7.59(1H,t,J＝8.4Hz),7.83(1H,dd,J＝8.0,1.6Hz),8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.47(1H,d,J＝1.6Hz)；HRMS(ESI+)495.2070,Calcd for C26H31N4O4S495.2061[M+H]+.
8.4Hz),7.54(1H,d,J＝8.0Hz),7.59(1H,t,J＝8.4Hz),7.83(1H,dd,J＝8.0,1.6Hz),8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.47(1H,d,J＝1.6Hz)；HRMS(ESI+)495.2070,Calcd for C26H31N4O4S495.2061[M+H]+.
[0113] 实施例4：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(哌啶-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(6)
[0114] 合成方法同上述化合物(4)的合成。N-(2-溴乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(2)(0.5g,1.0mmol)与哌啶(0.50mL,5.0mmoL)反应,柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝20/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(CDCl3,500MHz)δppm 1.60(2H,br s),
1.84(4H,m),2.89(6H,m),3.42(3H,s),3.90(3H,s),3.96(3H,s),3.95(2H,br s),6.33(1H,d,J＝8.0Hz),7.37(1H,t,J＝7.5Hz),7.48(3H,m),7.61(1H,t,J＝7.5Hz),7.81(1H,d,J＝
8.5Hz),8.14(1H,d,J＝7.5Hz),8.44(1H,s)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm 23.09,24.47,
29.52,49.23,45.43,53.28,53.91,54.26,56.99,101.54,108.24,109.16,113.44,120.32,
120.87,122.44,125.21,129.04,141.74,142.93,143.84,159.55,162.58；HRMS(ESI+)
509.2229,Calcd for C27H33N4O4S 509.2217[M+H]+.
1.84(4H,m),2.89(6H,m),3.42(3H,s),3.90(3H,s),3.96(3H,s),3.95(2H,br s),6.33(1H,d,J＝8.0Hz),7.37(1H,t,J＝7.5Hz),7.48(3H,m),7.61(1H,t,J＝7.5Hz),7.81(1H,d,J＝
8.5Hz),8.14(1H,d,J＝7.5Hz),8.44(1H,s)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm 23.09,24.47,
29.52,49.23,45.43,53.28,53.91,54.26,56.99,101.54,108.24,109.16,113.44,120.32,
120.87,122.44,125.21,129.04,141.74,142.93,143.84,159.55,162.58；HRMS(ESI+)
509.2229,Calcd for C27H33N4O4S 509.2217[M+H]+.
[0115] 实施例5：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(吗啉-4-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(7)
[0116] 合成方法同上述化合物(4)的合成。N-(2-溴乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(2)(0.5g,1.0mmol)与吗啉(0.43mL,5.0mmoL)反应,(柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝30/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(DMSO-d6,400MHz)δppm 2.25(4H,br s),2.32(2H,t,J＝8.0Hz),3.39(3H,s),3.44(4H,m),3.61(2H,br s),3.82(3H,s),3.96(3H,s),6.37(1H,d,J＝8.4Hz),7.30(1H,t,J＝7.2Hz),7.46(1H,d,J＝8.4Hz),7.57(1H,d,J＝8.4Hz),7.73(6H,m),8.33(1H,d,J＝7.6Hz),8.52(1H,d,J＝1.6Hz)；HRMS(ESI+)
511.2021,Calcd for C26H31N4O5S 511.2010[M+H]+.
511.2021,Calcd for C26H31N4O5S 511.2010[M+H]+.
[0117] 实施例6：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(硫代吗啉-4-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(8)
[0118] 合成方法同上述化合物(4)的合成。N-(2-溴乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(2)(0.5g,1.0mmol)与硫代吗啉(0.50mL,5.0mmoL)反应,柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝30/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm 2.44(3H,br s),2.54(2H,t,J＝6.4Hz),2.65(5H,br s),3.39(3H,s),3.77(2H,br s),3.90(3H,s),3.95(3H,s),6.33(1H,d,J＝8.0Hz),7.36(1H,t,J＝7.2Hz),7.45(1H,d,J＝8.4Hz),7.50(1H,d,J＝8.4Hz),7.58(1H,d,J＝8.0Hz),7.60(1H,t,J＝8.0Hz),7.83(1H,dd,J＝8.4,1.6Hz),
8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.47(1H,d,J＝1.6Hz)；HRMS(ESI+)527.1788,Calcd for C26H31N4O4S2 527.1781[M+H]+.
8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.47(1H,d,J＝1.6Hz)；HRMS(ESI+)527.1788,Calcd for C26H31N4O4S2 527.1781[M+H]+.
[0119] 实施例7：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(N-甲基哌嗪-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(9)
[0120] 合成方法同上述化合物(4)的合成。N-(2-溴乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(2)(0.5g,1.0mmol)与N-甲基哌嗪(0.55mL,5.0mmoL)反应,柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝15/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(CDCl3,500MHz)δppm 2.49(3H,s),2.54(2H,t,J＝6.4Hz),2.72(8H,br s),3.39(3H,s),3.76(2H,br s),3.90(3H,s),3.95(3H,s),6.34(1H,d,J＝7.5Hz),7.35(1H,t,J＝7.5Hz),7.44(1H,d,J＝8.4Hz),7.49(1H,d,J＝8.0Hz),7.58(2H,t,J＝8.0Hz),7.81(1H,d,J＝8.4Hz),8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.47(1H,s)；HRMS(ESI+)524.2332,Calcd for C27H34N5O4S 524.2326[M+H]+.
[0121] 实施例8：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{2-[4-(吡咯-1-基)-哌啶-1-基]-乙基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(10)
[0122] 合成方法同上述化合物(2)的合成。N-(2-溴乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(2)(0.5g,1.0mmol)与4-(吡咯-1-基)-哌啶(0.77g,5.0mmoL)反应,(柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝15/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(DMSO-d6,400MHz)δppm
1.22(2H,m),1.67(6H,m),1.84(3H,m),2.28(2H,t,J＝6.4Hz),2.46(4H,br s),2.65(2H,m),3.40(3H,s),3.58(2H,br s),3.82(3H,s),3.96(3H,s),6.36(1H,d,J＝8.4Hz),7.30(1H,t,J＝7.6Hz),7.43(1H,d,J＝8.0Hz),7.57(1H,t,J＝8.0Hz),7.73(3H,m),8.34(1H,d,J＝8.0Hz),8.53(1H,d,J＝1.2Hz)；HRMS(ESI+)578.2798,Calcd for C31H40N5O4S578.2796[M+H]+.
1.22(2H,m),1.67(6H,m),1.84(3H,m),2.28(2H,t,J＝6.4Hz),2.46(4H,br s),2.65(2H,m),3.40(3H,s),3.58(2H,br s),3.82(3H,s),3.96(3H,s),6.36(1H,d,J＝8.4Hz),7.30(1H,t,J＝7.6Hz),7.43(1H,d,J＝8.0Hz),7.57(1H,t,J＝8.0Hz),7.73(3H,m),8.34(1H,d,J＝8.0Hz),8.53(1H,d,J＝1.2Hz)；HRMS(ESI+)578.2798,Calcd for C31H40N5O4S578.2796[M+H]+.
[0123] 实施例9：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{2-(8-甲基-2,8-二氮螺[4,5]葵烷-2-基)-乙基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(11)
[0124] 合成方法同上述化合物(4)的合成。N-(2-溴乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(2)(0.5g,1.0mmol)与8-甲基-2,8-二氮螺[4,5]葵烷(0.38g,
2.5mmoL)反应,柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝10/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(CDCl3,
400MHz)δppm 1.59(2H,t,J＝6.8Hz),1.66(4H,br s),2.33-2.58(13H,m),3.40(3H,s),
3.74(2H,br s),3.89(3H,s),3.95(3H,s),6.32(1H,d,J＝8.4Hz),7.36(1H,t,J＝7.6Hz),
7.45(1H,d,J＝8.8Hz),7.51(1H,d,J＝8.0Hz),7.60(2H,m),7.83(1H,d,J＝8.4Hz),8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.48(1H,s)；HRMS(ESI+)578.2801,Calcd for C31H40N5O4S 578.2796[M+H]+.
2.5mmoL)反应,柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝10/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(CDCl3,
400MHz)δppm 1.59(2H,t,J＝6.8Hz),1.66(4H,br s),2.33-2.58(13H,m),3.40(3H,s),
3.74(2H,br s),3.89(3H,s),3.95(3H,s),6.32(1H,d,J＝8.4Hz),7.36(1H,t,J＝7.6Hz),
7.45(1H,d,J＝8.8Hz),7.51(1H,d,J＝8.0Hz),7.60(2H,m),7.83(1H,d,J＝8.4Hz),8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.48(1H,s)；HRMS(ESI+)578.2801,Calcd for C31H40N5O4S 578.2796[M+H]+.
[0125] 实施例10：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[2-(咪唑-1-基)-乙基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(12)
[0126] 合成方法同上述化合物(2)的合成。N-(2-溴乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(2)(0.5g,1.0mmol)与咪唑(0.34g,5.0mmoL)反应,柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝40/1/0.1)分离纯化得白色固物。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm 3.33(3H,s),
3.88(3H,s),3.95(5H,br s),4.25(2H,t,J＝6.4Hz)6.29(1H,d,J＝8.4Hz),7.00(1H,s),
7.09(1H,s),7.34(1H,d,J＝8.0Hz),7.37(1H,t,J＝8.0Hz),7.44(1H,d,J＝8.8Hz),7.51(1H,d,J＝8.0Hz),7.61(1H,t,J＝8.8Hz),7.63(1H,s),7.71(1H,dd,J＝8.8,1.6Hz),8.39(1H,d,J＝1.2Hz)；HRMS(ESI+)492.1709,Calcd for C25H26N5O4S 492.1700[M+H]+.[0127] 实施例11：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[(3-N,N-二甲基)丙基-1-基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(14)
3.88(3H,s),3.95(5H,br s),4.25(2H,t,J＝6.4Hz)6.29(1H,d,J＝8.4Hz),7.00(1H,s),
7.09(1H,s),7.34(1H,d,J＝8.0Hz),7.37(1H,t,J＝8.0Hz),7.44(1H,d,J＝8.8Hz),7.51(1H,d,J＝8.0Hz),7.61(1H,t,J＝8.8Hz),7.63(1H,s),7.71(1H,dd,J＝8.8,1.6Hz),8.39(1H,d,J＝1.2Hz)；HRMS(ESI+)492.1709,Calcd for C25H26N5O4S 492.1700[M+H]+.[0127] 实施例11：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[(3-N,N-二甲基)丙基-1-基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(14)
[0128] (1)N-(3-氯丙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺的制备(3)
[0129] 合成方法同上述化合物(2)的合成。将IMB105(2.0g,5.0mmol)溶于40mL无水四氢呋喃中，加入氯丙醇(0.62mL,7.5mmol)，三苯基磷(2.6g,10.0mmol)，0℃条件下，加入DIAD(偶氮二甲酸二异丙酯，1.68mL,8.5mmol)，搅拌约10min，室温搅拌至TLC检测反应完全(约8h)。乙酸乙酯(50mL)加入反应液中，水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，柱层析(PE/AcOEt＝4/1-2/1)分离纯化得固体2.1g(产率85％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm1.98(2H,m),3.46(3H,s),3.68(2H,t,J＝6.8Hz),3.76(2H,t,J＝6.4Hz),3.91(3H,s),3.96(3H,s),6.34(1H,d,J＝8.0Hz),7.49(3H,m),7.61(1H,dt,J＝1.2,8.8Hz),7.82(1H,dd,J＝8.8,
2.0Hz),8.13(1H,d,J＝7.6Hz),8.48(1H,d,J＝1.6Hz)；HRMS(ESI+)474.1253,Calcd for C23H25Cl N3O4S 474.1249[M+H]+.
2.0Hz),8.13(1H,d,J＝7.6Hz),8.48(1H,d,J＝1.6Hz)；HRMS(ESI+)474.1253,Calcd for C23H25Cl N3O4S 474.1249[M+H]+.
[0130] (2)N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[(3-N,N-二甲基)丙基-1-基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺的制备(14)
[0131] 合成方法同上述化合物(4)的合成。N-(3-氯丙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺的制备(3)(0.48g,1.0mmoL)与N,N-二甲胺(2.5mL,2.0M in THF,
5.0mmol)反应，柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝15/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(CDCl3,
400MHz)δppm 2.10(2H,br s),2.90(6H,m),3.45(2H,br s),3.53(3H,s),3.77(2H,br s),
3.92(3H,s),3.96(3H,s),6.32(1H,d,J＝8.0Hz),7.31(1H,d,J＝8.8Hz),7.37(1H,t,J＝
8.0Hz),7.51(1H,dt,J＝1.2,8.4Hz),7.82(1H,dd,J＝8.4,2.0Hz),8.17(1H,d,J＝8.0Hz),
8.47(1H,d,J＝1.2Hz)；HRMS(ESI+)483.2074,Calcd for C25H31N4O4S 483.2061[M+H]+.[0132] 实施例12：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[3-(N-甲基哌嗪-1-基)-丙基-1基]-
9-甲基-3-咔唑磺酰胺(15)
5.0mmol)反应，柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝15/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(CDCl3,
400MHz)δppm 2.10(2H,br s),2.90(6H,m),3.45(2H,br s),3.53(3H,s),3.77(2H,br s),
3.92(3H,s),3.96(3H,s),6.32(1H,d,J＝8.0Hz),7.31(1H,d,J＝8.8Hz),7.37(1H,t,J＝
8.0Hz),7.51(1H,dt,J＝1.2,8.4Hz),7.82(1H,dd,J＝8.4,2.0Hz),8.17(1H,d,J＝8.0Hz),
8.47(1H,d,J＝1.2Hz)；HRMS(ESI+)483.2074,Calcd for C25H31N4O4S 483.2061[M+H]+.[0132] 实施例12：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[3-(N-甲基哌嗪-1-基)-丙基-1基]-
9-甲基-3-咔唑磺酰胺(15)
[0133] 合成方法同上述化合物(4)的合成。N-(3-氯丙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺的制备(3)(0.48g,1.0mmoL)与N-甲基哌嗪(0.55mL,5.0mmoL)反应，柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝15/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(DMSO-d6,400MHz)δppm
1.43(2H,m),2.13(3H,s),2.25(10H,m),3.42(3H,s),3.47(2H,br s),3.81(3H,s),3.94(3H,s),6.35(1H,d,J＝8.4Hz),7.28(1H,t,J＝7.6Hz),7.41(1H,d,J＝8.4Hz),7.55(1H,t,J＝8.4Hz),7.69(2H,m),7.75(1H,d,J＝8.4Hz),8.29(1H,d,J＝7.6Hz),8.48(1H,d,J＝
7.6Hz)；HRMS(ESI+)538.2485,Calcd for C28H36N5O4S 538.2483[M+H]+.
1.43(2H,m),2.13(3H,s),2.25(10H,m),3.42(3H,s),3.47(2H,br s),3.81(3H,s),3.94(3H,s),6.35(1H,d,J＝8.4Hz),7.28(1H,t,J＝7.6Hz),7.41(1H,d,J＝8.4Hz),7.55(1H,t,J＝8.4Hz),7.69(2H,m),7.75(1H,d,J＝8.4Hz),8.29(1H,d,J＝7.6Hz),8.48(1H,d,J＝
7.6Hz)；HRMS(ESI+)538.2485,Calcd for C28H36N5O4S 538.2483[M+H]+.
[0134] 实施例13：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{2-[4-(吡咯-1-基)-哌啶-1-基]-丙基-1基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(16)
[0135] 合成方法同上述化合物(4)的合成。N-(3-氯丙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺的制备(3)(0.48g,1.0mmoL)与4-(吡咯-1-基)-哌啶(0.77g,
5.0mmoL)反应,柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝15/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(DMSO-d6,
400MHz)δppm 1.29(2H,m),1.71(4H,m),1.95(6H,m),2.45(3H,br s),2.90(6H,m),3.44(3H,s),3.63(2H,br s),3.90(3H,s),3.95(3H,s),6.32(1H,d,J＝8.0Hz),7.34(1H,m),
7.48(3H,m),7.59(1H,s),7.82(1H,d,J＝7.5Hz),8.12(1H,d,J＝6.5Hz),8.45(1H,s)；HRMS(ESI+)592.2958,Calcd for C32H42N5O4S 592.2952[M+H]+.
5.0mmoL)反应,柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝15/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(DMSO-d6,
400MHz)δppm 1.29(2H,m),1.71(4H,m),1.95(6H,m),2.45(3H,br s),2.90(6H,m),3.44(3H,s),3.63(2H,br s),3.90(3H,s),3.95(3H,s),6.32(1H,d,J＝8.0Hz),7.34(1H,m),
7.48(3H,m),7.59(1H,s),7.82(1H,d,J＝7.5Hz),8.12(1H,d,J＝6.5Hz),8.45(1H,s)；HRMS(ESI+)592.2958,Calcd for C32H42N5O4S 592.2952[M+H]+.
[0136] 实施例14：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-{3-(8-甲基-2,8-二氮螺[4,5]葵烷-2-基)-丙基-1基}-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(17)
[0137] 合成方法同上述化合物(4)的合成。N-(3-氯丙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺的制备(3)(0.48g,1.0mmoL)与8-甲基-2,8-二氮螺[4,5]葵烷(0.38g,2.5mmoL)反应,柱层析(CDM/MeOH/浓氨水＝10/1/0.1)分离纯化得油状物。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm 1.61-1.72(8H,m),2.34(9H,m),2.53(4H,br s),3.43(3H,s),3.66(2H,br s),3.91(3H,s),3.95(3H,s),6.34(1H,d,J＝8.4Hz),7.36(1H,t,J＝8.0Hz),7.45(1H,d,J＝8.4Hz),7.52(2H,t,J＝8.0Hz),7.60(1H,t,J＝8.0Hz),7.82(1H,d,J＝8.8Hz),
8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.48(1H,s)；HRMS(ESI+)592.2961,Calcd for C32H42N5O4S
592.2952[M+H]+.
8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.48(1H,s)；HRMS(ESI+)592.2961,Calcd for C32H42N5O4S
592.2952[M+H]+.
[0138] 实施例15：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-[3-(咪唑-1-基)-丙基-1-基]-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(18)
[0139] 合成方法同上述化合物(4)的合成。N-(3-氯丙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺的制备(3)(0.48g,1.0mmoL)与咪唑(0.34g,5.0mmoL)反应,柱层析
1
(CDM/MeOH/浓氨水＝40/1/0.1)分离纯化得固体。HNMR(DMSO-d6,400MHz)δppm 1.75(2H,m),3.40(3H,s),3.49(2H,t,J＝6.4Hz),3.83(3H,s),3.96(3H,s),4.04(2H,t,J＝7.2Hz),
6.38(1H,d,J＝8.4Hz),6.88(1H,s),7.12(1H,s),7.31(1H,dt,J＝0.8,8.0Hz),7.45(1H,d,J＝8.0Hz),7.57(1H,t,J＝8.0Hz),7.59(1H,s),7.68(2H,m),7.78(1H,d,J＝8.8Hz),8.32(1H,d,J＝8.0Hz),8.47(1H,d,J＝1.6Hz)；HRMS(ESI+)506.1862,Calcd for C26H28N5O4S
506.1857[M+H]+.
1
(CDM/MeOH/浓氨水＝40/1/0.1)分离纯化得固体。HNMR(DMSO-d6,400MHz)δppm 1.75(2H,m),3.40(3H,s),3.49(2H,t,J＝6.4Hz),3.83(3H,s),3.96(3H,s),4.04(2H,t,J＝7.2Hz),
6.38(1H,d,J＝8.4Hz),6.88(1H,s),7.12(1H,s),7.31(1H,dt,J＝0.8,8.0Hz),7.45(1H,d,J＝8.0Hz),7.57(1H,t,J＝8.0Hz),7.59(1H,s),7.68(2H,m),7.78(1H,d,J＝8.8Hz),8.32(1H,d,J＝8.0Hz),8.47(1H,d,J＝1.6Hz)；HRMS(ESI+)506.1862,Calcd for C26H28N5O4S
506.1857[M+H]+.
[0140] 实施例16：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-氨乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(24)
[0141] 合成步骤(1)：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-苯并丁二酰亚胺乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(13)
[0142] 将苯并丁二酰亚胺(0.88g,5.96mmol)溶于30mL无水DMF中，0℃条件下，加入氢化钠(0.28g,60％in oil,6.96mmol)反应30min。将N-(2-溴-乙基)-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(2)(1.0g,1.99mmol)加入上述的溶液中，室温反应1h，70℃反应2d，TLC检测反应完全。二氯乙烷(70mL)加入反应液中，水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，柱层析纯化(PE/AcOEt＝3:1-1:1)，得白色固体1.2g(产率99％)。1HNMR(CDCl3,500MHz)δppm 3.38(3H,s),3.51(2H,t,J＝7.5Hz),3.90(3H,s),3.96(3H,s),3.96(2H,br s),6.35(1H,d,J＝8.0Hz),7.37(1H,t,J＝7.2Hz),7.46(1H,d,J＝8.5Hz),7.52(1H,d,J＝8.0Hz),7.61(1H,t,J＝7.5Hz),7.62(1H,d,J＝8.0Hz),7.80(1H,d,J＝7.5Hz),
8.14(1H,d,J＝8.0Hz),8.46(1H,s)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm 29.46,37.23,47.32,
53.18,53.96,101.40,107.96,109.04,113.52,120.26,120.81,120.94,122.34,122.56,
123.11,125.28,126.92,130.19,132.11,133.70,141.69,142.68,145.27,158.99,162.61,
168.49；HRMS(ESI+)571.1651,Calcd for C30H27 N4O6S 571.1646[M+H]+.[0143] (2)N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-氨乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(24)[0144] 将化合物(13)(1.2g,2.1mmol)溶于干燥乙醇(10.0mL)中，加入甲胺醇溶液(30％,
20mL)，室温反应2d，TLC检测反应完全。减压除去溶剂，柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝15:1:
0.1)分离纯化得油状物(0.79g,85％)。1HNMR(CDCl3,500MHz)δppm 2.46(2H,br s),2.86(2H,s),3.56(3H,s),3.71(2H,s),3.90(3H,s),3.94(3H,s),6.31(1H,d,J＝8.0Hz),7.35(1H,t,J＝7.5Hz),7.41(1H,d,J＝8.5Hz),7.46(1H,d,J＝9.0Hz),7.51(1H,d,J＝8.5Hz),
7.60(1H,t,J＝7.5Hz),7.86(1H,d,J＝8.0Hz),8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.50(1H,s)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm 29.53,40.20,52.18,53.47,53.95,101.78,108.33,109.16,113.67,
120.37,120.95,121.07,122.54,122.60,125.36,127.05,129.54,141.82,142.98,143.26,
159.82,162.61；HRMS(ESI+)441.1593,Calcd for C22H25 N4O4S 441.1591[M+H]+.[0145] 实施例17：N-(2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基)-
3-羟基-2(s)-氨基-丙酰胺(26)
8.14(1H,d,J＝8.0Hz),8.46(1H,s)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm 29.46,37.23,47.32,
53.18,53.96,101.40,107.96,109.04,113.52,120.26,120.81,120.94,122.34,122.56,
123.11,125.28,126.92,130.19,132.11,133.70,141.69,142.68,145.27,158.99,162.61,
168.49；HRMS(ESI+)571.1651,Calcd for C30H27 N4O6S 571.1646[M+H]+.[0143] (2)N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-氨乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(24)[0144] 将化合物(13)(1.2g,2.1mmol)溶于干燥乙醇(10.0mL)中，加入甲胺醇溶液(30％,
20mL)，室温反应2d，TLC检测反应完全。减压除去溶剂，柱层析(DCM/MeOH/浓氨水＝15:1:
0.1)分离纯化得油状物(0.79g,85％)。1HNMR(CDCl3,500MHz)δppm 2.46(2H,br s),2.86(2H,s),3.56(3H,s),3.71(2H,s),3.90(3H,s),3.94(3H,s),6.31(1H,d,J＝8.0Hz),7.35(1H,t,J＝7.5Hz),7.41(1H,d,J＝8.5Hz),7.46(1H,d,J＝9.0Hz),7.51(1H,d,J＝8.5Hz),
7.60(1H,t,J＝7.5Hz),7.86(1H,d,J＝8.0Hz),8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.50(1H,s)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm 29.53,40.20,52.18,53.47,53.95,101.78,108.33,109.16,113.67,
120.37,120.95,121.07,122.54,122.60,125.36,127.05,129.54,141.82,142.98,143.26,
159.82,162.61；HRMS(ESI+)441.1593,Calcd for C22H25 N4O4S 441.1591[M+H]+.[0145] 实施例17：N-(2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基)-
3-羟基-2(s)-氨基-丙酰胺(26)
[0146] 合成步骤(1)：N-(2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基)-3-羟基-2-苄氧酰胺基-丙酰胺(25)
[0147] 将N-(苄氧羰基)-L-丝氨酸(0.071g,0.30mmol)溶于2.0mL二氯甲烷中，0℃条件下，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI，0.084g,0.44mmol),1-羟基-苯并三唑(HOBt,0.060g,0.44mmol)和二异丙基乙基胺(0.10mL,0.59mmol),反应1h后,加入化合物(24)(0.10g,0.23mmol)，室温反应过夜，TLC检测反应完全。反应液加入20mL二氯甲烷稀释，碳酸氢钠溶液、水和饱和氯化钠溶液依次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，柱层析(PE/AcOEt＝1:1)分离纯化得油状物0.13g(产率88％)。1HNMR(CDCl3,500MHz)δppm 3.36(2H,m),3.54(3H,s),3.54(1H,br s),3.75(1H,br s),3.80(1H,br s),3.86(3H,s),
3.90(3H,s),3.90(1H,s),4.22(1H,m),4.33(1H,m),5.19(2H,s),6.00(1H,br s),6.26(1H,d,J＝8.5Hz),7.18(1H,br s),7.39(8H,m),7.46(1H,d,J＝8.0Hz),7.57(1H,t,J＝8.0Hz),
7.75(1H,d,J＝8.0Hz),8.09(1H,d,J＝8.0Hz),8.41(1H,s)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm
29.36,37.90,49.24,53.36,53.87,56.32,62.82,67.18,101.80,108.25,109.11,112.87,
120.25,120.67,120.71,122.27,122.31,124.90,126.98,128.11,128.50,129.11,136.27,
141.62,142.76,156.55,159.64,162.60,171.24；HRMS(ESI+)662.2281,Calcd for C33H36N5O8S 662.2279[M+H]+.
3.90(3H,s),3.90(1H,s),4.22(1H,m),4.33(1H,m),5.19(2H,s),6.00(1H,br s),6.26(1H,d,J＝8.5Hz),7.18(1H,br s),7.39(8H,m),7.46(1H,d,J＝8.0Hz),7.57(1H,t,J＝8.0Hz),
7.75(1H,d,J＝8.0Hz),8.09(1H,d,J＝8.0Hz),8.41(1H,s)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm
29.36,37.90,49.24,53.36,53.87,56.32,62.82,67.18,101.80,108.25,109.11,112.87,
120.25,120.67,120.71,122.27,122.31,124.90,126.98,128.11,128.50,129.11,136.27,
141.62,142.76,156.55,159.64,162.60,171.24；HRMS(ESI+)662.2281,Calcd for C33H36N5O8S 662.2279[M+H]+.
[0148] (2)N-(2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基)-3-羟基-2(s)-氨基-丙酰胺(26)
[0149] 将化合物(25)(0.12g,0.18mmol)溶于20mL甲醇/四氢呋喃(4:1)，氮气保护下，加入钯碳(5％,0.1g)，40psi氢气压力下，反应1.5h，TLC检测反应完全。硅藻土过滤，甲醇冲洗，滤液浓缩，柱层析(DCM/MeOH＝10:1)分离纯化得油状物0.85g(90％)。1HNMR(CDCl3,500MHz)δppm 3.36(2H,m),3.54(3H,s),3.54(1H,br s),3.75(1H,br s),3.80(1H,br s),
3.86(3H,s),3.90(3H,s),3.90(1H,s),4.22(1H,m),4.33(1H,m),5.19(2H,s),6.00(1H,br s),6.26(1H,d,J＝8.5Hz),7.18(1H,br s),7.39(8H,m),7.46(1H,d,J＝8.0Hz),7.57(1H,t,J＝8.0Hz),7.75(1H,d,J＝8.0Hz),8.09(1H,d,J＝8.0Hz),8.41(1H,s)；13CNMR(CDCl3,
125MHz)δppm 29.41,37.79,49.33,53.33,53.90,56.19,64.92,101.68,108.27,109.11,
113.14,120.24,120.76,122.32,122.38,125.07,126.95,129.39,141.66,142.80,143.71,
159.59,162.60,173.98；HRMS(ESI+)528.1914,Calcd for C25H30N5O6S 528.1911[M+H]+.[0150] 实施例18：N-(2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基)-
2-氨基乙酰胺(28)
3.86(3H,s),3.90(3H,s),3.90(1H,s),4.22(1H,m),4.33(1H,m),5.19(2H,s),6.00(1H,br s),6.26(1H,d,J＝8.5Hz),7.18(1H,br s),7.39(8H,m),7.46(1H,d,J＝8.0Hz),7.57(1H,t,J＝8.0Hz),7.75(1H,d,J＝8.0Hz),8.09(1H,d,J＝8.0Hz),8.41(1H,s)；13CNMR(CDCl3,
125MHz)δppm 29.41,37.79,49.33,53.33,53.90,56.19,64.92,101.68,108.27,109.11,
113.14,120.24,120.76,122.32,122.38,125.07,126.95,129.39,141.66,142.80,143.71,
159.59,162.60,173.98；HRMS(ESI+)528.1914,Calcd for C25H30N5O6S 528.1911[M+H]+.[0150] 实施例18：N-(2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基)-
2-氨基乙酰胺(28)
[0151] 合成步骤：(1)N-(2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基)-2-叔丁氧甲酰胺基-乙酰胺(27)
[0152] 合成方法与化合物(25)相同，与N-叔丁氧羰基甘氨酸反应得到油状物(产率78％)。1HNMR(CDCl3,500MHz)δppm 1.54(9H,s),3.61(5H,br s),3.91(9H,m),6.34(1H,m),
6.94(1H,br s),7.37(3H,m),7.51(2H,m),7.61(1H,d,J＝7.5Hz),7.81(1H,t,J＝7.5Hz),
8.15(1H,t,J＝7.5Hz),8.48(1H,s)；HRMS(ESI+)598.2336,Calcd for C29H36N5O7S
598.2330[M+H]+.
6.94(1H,br s),7.37(3H,m),7.51(2H,m),7.61(1H,d,J＝7.5Hz),7.81(1H,t,J＝7.5Hz),
8.15(1H,t,J＝7.5Hz),8.48(1H,s)；HRMS(ESI+)598.2336,Calcd for C29H36N5O7S
598.2330[M+H]+.
[0153] (2)N-(2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基)-2-氨基乙酰胺盐酸盐(28)
[0154] 将化合物(27)(0.13g,0.22mmol)溶于甲醇/HCl溶液(5M,2.5mL)中，室温反应2h，TLC检测反应完全。减压出去溶剂，剩余物在DCM/AcOEt中析晶，得灰白色固体0.075g(产率68％)。1HNMR(DMSO-d6,500MHz)δppm 3.15(3H,s),3.46(2H,m),3.62(4H,br s),3.84(3H,s),3.98(3H,s),6.37(1H,d,J＝8.0Hz),7.31(1H,t,J＝7.5Hz),7.44(1H,d,J＝8.0Hz),
7.59(1H,t,J＝8.0Hz),7.74(3H,m),8.37(1H,d,J＝8.0Hz),8.53(1H,s)；13CNMR(CDCl3,
125MHz)δppm 29.68,31.02,38.96,48.82,53.61,54.27,104.27,109.12,109.35,113.05,
119.87,120.40,120.62,121.67,122.21,125.31,126.66,129.01,141.31,142.50,144.74,
158.95,162.21,167.46；HRMS(ESI+)534.1576,Calcd for C24H29ClN5O5S 534.1572[M+H]+.[0155] 实施例19：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-羟基乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(31)
7.59(1H,t,J＝8.0Hz),7.74(3H,m),8.37(1H,d,J＝8.0Hz),8.53(1H,s)；13CNMR(CDCl3,
125MHz)δppm 29.68,31.02,38.96,48.82,53.61,54.27,104.27,109.12,109.35,113.05,
119.87,120.40,120.62,121.67,122.21,125.31,126.66,129.01,141.31,142.50,144.74,
158.95,162.21,167.46；HRMS(ESI+)534.1576,Calcd for C24H29ClN5O5S 534.1572[M+H]+.[0155] 实施例19：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-羟基乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(31)
[0156] 合成步骤(1)N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(29)
[0157] 将N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(0.40g,1.0mmol)溶于10mL无水DMF中，加入叔丁基-(碘乙氧基)-二甲基硅烷(0.43g,1.50mmol)和氢化钠(60mg,
60％in oil,1.5mmol)，70℃条件下反应4h，TLC检测反应完全。减压除去DMF，二氯甲烷提取剩余物，10％HCl、水和饱和食盐水依次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液柱层析(PE/AcOEt＝6/1)分离纯化得油状物0.47g(产率84％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm-0.005(6H,s),0.81(9H,s),3.35(3H,s),3.66(2H,m),3.73(2H,br s),3.85(3H,s),3.91(3H,s),6.28(1H,d,J＝8.4Hz),7.31(1H,t,J＝8.0Hz),7.40(1H,d,J＝8.4Hz),7.45(1H,d,J＝8.4Hz),7.53(1H,d,J＝8.0Hz),7.55(1H,t,J＝8.0Hz),7.78(1H,dd,J＝8.4,1.6Hz),8.08(1H,d,J＝8.0Hz),
8.43(1H,d,J＝2.0Hz)；HRMS(ESI+)556.2298,Calcd for C28H38N3O5SSi 556.2296[M+H]+.[0158] (2)N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-羟基乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(31)[0159] 将N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-(N-叔丁基-二甲基-硅氧乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(17,0.42g,0.75mmol)溶于2.5mL无水THF中，0℃条件下，滴加入四叔丁基氟化胺(0.90mL,1.0M in THF,0.90mmol)反应至TLC检测反应完全。乙酸乙酯提取，10％硫代硫酸钠、水和饱和食盐水依次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，柱层析(PE/AcOEt＝2/1)
1
分离纯化得油状物0.31g(产率94％)。HNMR(CDCl3,400MHz)δppm 3.65(2H,br s),3.66(3H,s),3.72(2H,br s),3.93(3H,s),3.96(3H,s),6.33(1H,d,J＝8.4Hz),7.37(1H,t,J＝
7.2Hz),7.37(1H,d,J＝8.4Hz),7.49(1H,d,J＝8.4Hz),7.52(1H,d,J＝8.0Hz),7.61(1H,dt,J＝1.2,8.4Hz),7.88(1H,dd,J＝8.8,1.6Hz),8.14(1H,d,J＝8.0Hz),8.53(1H,d,J＝
1.2Hz)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm 29.59,53.21,53.67,54.02,60.42,102.08,108.37,
109.23,114.04,120.42,120.89,121.15,122.54,125.31,127.12,129.45,141.82,143.03,
159.84,162.62；HRMS(ESI+)442.1430,Calcd for C22H24N3O5S 442.1431[M+H]+.[0160] 实施例20：2-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺乙基磷酸二钠盐(37)
60％in oil,1.5mmol)，70℃条件下反应4h，TLC检测反应完全。减压除去DMF，二氯甲烷提取剩余物，10％HCl、水和饱和食盐水依次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液柱层析(PE/AcOEt＝6/1)分离纯化得油状物0.47g(产率84％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm-0.005(6H,s),0.81(9H,s),3.35(3H,s),3.66(2H,m),3.73(2H,br s),3.85(3H,s),3.91(3H,s),6.28(1H,d,J＝8.4Hz),7.31(1H,t,J＝8.0Hz),7.40(1H,d,J＝8.4Hz),7.45(1H,d,J＝8.4Hz),7.53(1H,d,J＝8.0Hz),7.55(1H,t,J＝8.0Hz),7.78(1H,dd,J＝8.4,1.6Hz),8.08(1H,d,J＝8.0Hz),
8.43(1H,d,J＝2.0Hz)；HRMS(ESI+)556.2298,Calcd for C28H38N3O5SSi 556.2296[M+H]+.[0158] (2)N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-羟基乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(31)[0159] 将N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-(N-叔丁基-二甲基-硅氧乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(17,0.42g,0.75mmol)溶于2.5mL无水THF中，0℃条件下，滴加入四叔丁基氟化胺(0.90mL,1.0M in THF,0.90mmol)反应至TLC检测反应完全。乙酸乙酯提取，10％硫代硫酸钠、水和饱和食盐水依次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，柱层析(PE/AcOEt＝2/1)
1
分离纯化得油状物0.31g(产率94％)。HNMR(CDCl3,400MHz)δppm 3.65(2H,br s),3.66(3H,s),3.72(2H,br s),3.93(3H,s),3.96(3H,s),6.33(1H,d,J＝8.4Hz),7.37(1H,t,J＝
7.2Hz),7.37(1H,d,J＝8.4Hz),7.49(1H,d,J＝8.4Hz),7.52(1H,d,J＝8.0Hz),7.61(1H,dt,J＝1.2,8.4Hz),7.88(1H,dd,J＝8.8,1.6Hz),8.14(1H,d,J＝8.0Hz),8.53(1H,d,J＝
1.2Hz)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm 29.59,53.21,53.67,54.02,60.42,102.08,108.37,
109.23,114.04,120.42,120.89,121.15,122.54,125.31,127.12,129.45,141.82,143.03,
159.84,162.62；HRMS(ESI+)442.1430,Calcd for C22H24N3O5S 442.1431[M+H]+.[0160] 实施例20：2-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺乙基磷酸二钠盐(37)
[0161] 合成步骤(1)：二苄基-2-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺乙基磷酸酯(33)
[0162] 将二苄基亚磷酸酯(0.52g,2.0mmol)溶于5.0mL无水甲苯中，0℃条件下，加入氯代苯并丁二酰亚胺(0.32g,2.4mmol)，室温搅拌2h后备用。
[0163] 将N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(2-羟基乙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(31，0.22g,0.45mmol)溶于5.0mL无水吡啶中。0℃条件下，将上述新制备的二苄基磷酸基氯溶液过滤入吡啶反应液中，逐渐升温至室温反应5h，TLC检测反应完全。二氯甲烷提取，水和饱和食盐水依次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，柱层析(PE/AcOEt＝2/1)分离纯化得油状物0.18g(产率57％)。1HNMR(CDCl3,500MHz)δppm 3.34(3H,s),3.87(2H,br s),3.87(3H,s),3.92(3H,s),4.15(2H,q,J＝6.0Hz),5.03(4H,d,J＝8.0Hz),6.26(1H,d,J＝8.0Hz),
7.36(11H,m),7.41(1H,d,J＝8.5Hz),7.50(1H,d,J＝8.5Hz),7.55(1H,d,J＝8.0Hz),7.60(1H,t,J＝7.5Hz),7.78(1H,d,J＝8.5Hz),8.11(1H,d,J＝7.5Hz),8.44(1H,s)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm 29.53,49.45,49.53,53.14,53.93(3Jc-p＝9.2Hz),65.76,65.82(2Jc-p＝5.7Hz),69.44,69.49(2Jc-p＝5.5Hz),101.48.108.12,109.17,113.70,120.35,120.88,
120.91,122.43,122.58,125.28,127.02,128.05,128.61,128.64,128.68,129.83,135.87,
135.94(3Jc-p＝7.0Hz),141.78,142.90,144.62,159.03,162.57；31PNMR(DMSO-d6,162MHz)δpp-1.23；HRMS(ESI+)702.2041,Calcd for C36H37N3O8PS 702.2033[M+H]+.[0164] (2)2-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺乙基二羟基磷酸酯(35)
7.36(11H,m),7.41(1H,d,J＝8.5Hz),7.50(1H,d,J＝8.5Hz),7.55(1H,d,J＝8.0Hz),7.60(1H,t,J＝7.5Hz),7.78(1H,d,J＝8.5Hz),8.11(1H,d,J＝7.5Hz),8.44(1H,s)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm 29.53,49.45,49.53,53.14,53.93(3Jc-p＝9.2Hz),65.76,65.82(2Jc-p＝5.7Hz),69.44,69.49(2Jc-p＝5.5Hz),101.48.108.12,109.17,113.70,120.35,120.88,
120.91,122.43,122.58,125.28,127.02,128.05,128.61,128.64,128.68,129.83,135.87,
135.94(3Jc-p＝7.0Hz),141.78,142.90,144.62,159.03,162.57；31PNMR(DMSO-d6,162MHz)δpp-1.23；HRMS(ESI+)702.2041,Calcd for C36H37N3O8PS 702.2033[M+H]+.[0164] (2)2-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺乙基二羟基磷酸酯(35)
[0165] 将化合物(33,0.20g,0.28mmol)溶于20.0mL甲醇/水(8:1)中，加入钯碳50mg，40psi氢气压力下反应1.5h，TLC检测反应完全。反应液通过硅藻土过滤，甲醇冲洗，滤液浓缩得白色固体102mg(产率70％)。1HNMR(DMSO-d6,500MHz)δppm 3.32(3H,s),3.75(2H,br s),3.83(3H,s),3.85(2H,br s),3.98(3H,s),6.40(1H,d,J＝8.0Hz),7.32(1H,t,J＝
7.0Hz),7.50(1H,d,J＝8.0Hz),7.59(1H,t,J＝8.0Hz),7.72(2H,m),7.78(1H,d,J＝
7.5Hz),8.36(1H,d,J＝7.5Hz),8.54(1H,s),11.12(0.5H,br s)；13CNMR(DMSO-d6,125MHz)δppm29.38,49.23,49.29,52.99,53.62,63.24,101.14,109.22,109.85,113.68,119.97,
120.38,121.00,121.54,121.77,124.74,126.88,129.16,141.44,142.50,144.47,158.77,
161.77；31PNMR(DMSO-d6,162MHz)δppm-1.34；HRMS(ESI+)522.1096,Calcd for C22H25N3O8PS
522.1094[M+H]+.
7.0Hz),7.50(1H,d,J＝8.0Hz),7.59(1H,t,J＝8.0Hz),7.72(2H,m),7.78(1H,d,J＝
7.5Hz),8.36(1H,d,J＝7.5Hz),8.54(1H,s),11.12(0.5H,br s)；13CNMR(DMSO-d6,125MHz)δppm29.38,49.23,49.29,52.99,53.62,63.24,101.14,109.22,109.85,113.68,119.97,
120.38,121.00,121.54,121.77,124.74,126.88,129.16,141.44,142.50,144.47,158.77,
161.77；31PNMR(DMSO-d6,162MHz)δppm-1.34；HRMS(ESI+)522.1096,Calcd for C22H25N3O8PS
522.1094[M+H]+.
[0166] (3)2-N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺乙基磷酸二钠盐(37)[0167] 将化合物35(52mg，0.10mmol)溶于约10mL甲醇中，加入4倍当量的甲醇钠，室温下搅拌约10h。将反应液浓缩后，加入适量无水乙醇搅拌约30min，过滤得灰白色固体48mg，产率约85％。HRMS(ESI+)566.0738,Calcd for C20H19O8N3Na2PS 566.0733[M+H]+.[0168] 实施例21：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(3-羟基丙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(32)
[0169] 合成步骤(1)：N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(3-叔丁基二甲基硅氧基丙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(30)
[0170] 将N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(0.80g,2.0mmol)溶于15mL无水DMF中，加入叔丁基-(碘代丙氧基)-二甲基硅烷(0.90g,3.0mmol)和氢化钠(120mg,60％in oil,3.0mmol)，70℃条件下反应4h，TLC检测反应完全。减压旋去DMF，二氯甲烷提取剩余物，10％HCl中和、水和饱和食盐水依次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液柱层析(PE/AcOEt＝6/1)分离纯化得油状物1.1g(产率97％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm
0.032(6H,s),0.87(9H,s),1.70(2H,m),3.43(3H,s),3.68(4H,m),3.90(3H,s),3.94(3H,s),6.33(1H,d,J＝8.4Hz),7.351(1H,dt,J＝0.8,8.0Hz),7.45(1H,d,J＝8.4Hz),7.51(1H,t,J＝8.0Hz),7.52(1H,d,J＝8.4Hz),7.60(1H,dt,J＝1.6,8.0Hz),7.82(1H,dd,J＝8.4,
1.6Hz),8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.48(1H,d,J＝2.0Hz)；HRMS(ESI+)570.2458,Calcd for C29H40N3O5SSi 570.2452[M+H]+.
0.032(6H,s),0.87(9H,s),1.70(2H,m),3.43(3H,s),3.68(4H,m),3.90(3H,s),3.94(3H,s),6.33(1H,d,J＝8.4Hz),7.351(1H,dt,J＝0.8,8.0Hz),7.45(1H,d,J＝8.4Hz),7.51(1H,t,J＝8.0Hz),7.52(1H,d,J＝8.4Hz),7.60(1H,dt,J＝1.6,8.0Hz),7.82(1H,dd,J＝8.4,
1.6Hz),8.13(1H,d,J＝8.0Hz),8.48(1H,d,J＝2.0Hz)；HRMS(ESI+)570.2458,Calcd for C29H40N3O5SSi 570.2452[M+H]+.
[0171] (2)N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(3-羟基丙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(32)[0172] 将N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-N-(3-叔丁基-二甲基-硅氧丙基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺(30,1.33g,2.33mmol)溶于8.0mL无水THF中，0℃条件下，滴加入四叔丁基氟化胺(2.8mL,1.0M in THF,2.80mmol)反应至TLC检测反应完全。乙酸乙酯提取，10％硫代硫酸钠、水和饱和食盐水依次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，柱层析(PE/AcOEt＝2/1)分离纯化得油状物1.02g(产率96％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δppm 1.65(2H,m),3.47(3H,s),3.75(2H,br s),3.90(2H,t,J＝8.4Hz),3.92(3H,s),3.96(3H,s),6.34(1H,d,J＝8.4Hz),
7.37(1H,dt,J＝0.8,8.0Hz),7.50(3H,m),7.61(1H,dt,J＝1.2,8.4Hz),7.85(1H,dd,J＝
8.8,2.0Hz),8.14(1H,d,J＝8.0Hz),8.49(1H,d,J＝1.6Hz)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm
29.57,31.01,45.95,53.24,53.97,58.97,101.49,108.19,109.20,113.51,120.37,
120.90,122.49,122.60,125.24,127.04,129.83,141.81,142.91,144.05,159.51,162.53；
HRMS(ESI+)456.1587,Calcd for C23H26N3O5S 456.1588[M+H]+.
7.37(1H,dt,J＝0.8,8.0Hz),7.50(3H,m),7.61(1H,dt,J＝1.2,8.4Hz),7.85(1H,dd,J＝
8.8,2.0Hz),8.14(1H,d,J＝8.0Hz),8.49(1H,d,J＝1.6Hz)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm
29.57,31.01,45.95,53.24,53.97,58.97,101.49,108.19,109.20,113.51,120.37,
120.90,122.49,122.60,125.24,127.04,129.83,141.81,142.91,144.05,159.51,162.53；
HRMS(ESI+)456.1587,Calcd for C23H26N3O5S 456.1588[M+H]+.
[0173] 实施例22：2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙基-2-(N-甲基哌嗪-4-基)乙酸酯(39)
[0174] 将2-(N-甲基哌嗪-4-基)-乙酸盐酸盐(0.1g,0.45mmol)溶于5.0mL二氯甲烷中，0℃条件下，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI，0.10g,0.54mmol),[0175] 1-羟基-苯并三唑(HOBt,73mg,0.54mmol)和二异丙基乙基胺(0.26mL,1.57mmol),反应1h后,加入化合物(31)(0.20g,0.45mmol)，室温反应过夜，TLC检测反应完全。反应液加入20mL二氯甲烷稀释，碳酸氢钠溶液、水和饱和氯化钠溶液依次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，柱层析(DCM/MeOH＝20:1)分离纯化得油状物0.18g(产率70％)。1HNMR(CDCl3,500MHz)δppm 2.39(3H,s),2.64(8H,br s),3.18(2H,s),3.36(3H,s),3.88(3H,s),3.93(3H,s),3.90(2H,br s),4.23(2H,s),6.35(1H,d,J＝8.5Hz),7.35(1H,t,J＝7.5Hz),7.43(1H,d,J＝8.5Hz),7.59(2H,m),7.78(1H,d,J＝8.5Hz),8.11(1H,d,J＝7.5Hz),8.44(1H,s)；13CNMR(CDCl3,125MHz)δppm 29.50,45.68,48.15,52.45,53.13,53.92,54.69,59.01,
62.56,101.49,108.07,109.16,113.42,120.29,120.76,122.36,122.47,125.15,126.98,
129.86,141.71,142.81,144.42,159.04,162.56,160.11；HRMS(ESI+)582.2380,Calcd for C29H36N5O6S 582.2381[M+H]+.
62.56,101.49,108.07,109.16,113.42,120.29,120.76,122.36,122.47,125.15,126.98,
129.86,141.71,142.81,144.42,159.04,162.56,160.11；HRMS(ESI+)582.2380,Calcd for C29H36N5O6S 582.2381[M+H]+.
[0176] 实施例23：2-[N-(2,6-二甲氧基吡啶-3-基)-9-甲基-3-咔唑磺酰胺]-乙氧基甲酸铵(40)
[0177] 将氯磺酸异氰酸酯47μL(0.54mmol,1.2eq)溶于干燥的二氯甲烷中，0℃温度下滴加醇31(0.20g,0.45mmol,1.0eq)的二氯甲烷溶液(0.5mL)，滴加完毕后，室温反应1h，反应液冷却至-5℃，加入1：5的水/THF溶液4mL，加热回流20min，冷至室温，加入二氯甲烷20mL，水洗，氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，溶液柱层析分离纯化(PE/EtOAc 2:1)，得白色固体0.12g(55％)。1HNMR(DMSO-d6,500MHz)δppm 3.29(3H,s),3.71(2H,br s),3.80(3H,s),3.92(2H,s),3.95(3H,s),6.36(1H,d,J＝7.5Hz),6.44(2H,br s),7.29(1H,t,J＝7.5Hz),7.46(1H,d,J＝8.0Hz),7.56(1H,t,J＝7.5Hz),7.67(2H,m),7.74(1H,d,J＝8.5Hz),8.31(1H,d,
13
J＝8.0Hz),8.49(1H,s)；CNMR(DMSO-d6,125MHz)δppm 29.33,48.35,52.91,53.56,61.40,
101.12,109.16,109.80,113.53,119.93,120.30,120.92,121.50,121.74,124.69,126.84,
129.15,141.42,142.46,144.27,156.32,158.81,161.73；HRMS(ESI+)485.1490,Calcd for C23H25N4O8S 485.1489[M+H]+.
13
J＝8.0Hz),8.49(1H,s)；CNMR(DMSO-d6,125MHz)δppm 29.33,48.35,52.91,53.56,61.40,
101.12,109.16,109.80,113.53,119.93,120.30,120.92,121.50,121.74,124.69,126.84,
129.15,141.42,142.46,144.27,156.32,158.81,161.73；HRMS(ESI+)485.1490,Calcd for C23H25N4O8S 485.1489[M+H]+.
[0178] 最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。