一种氨基脲的电化学快速检测方法

摘要

本发明属于分析化学技术领域，公开了一种氨基脲的电化学快速检测方法。所述方法为：将待检测样品加入到盐酸溶液中加入衍生剂进行氨基脲衍生化反应，将反应液离心，取上层清液调节pH值至6～7之间后用有机溶剂进行萃取，取有机相用氮气吹干除去有机溶剂，将所得萃取物溶于底液后用滤膜过滤，得到前处理后的待测样品；分别配置不同浓度的氨基脲标准溶液，采用便携式电化学工作站测量不同浓度样品溶液中的电化学信号，绘制标准曲线；然后测试待测样品中的电化学信号，通过标准曲线计算得到待测样品中的氨基脲浓度。本发明的检测方法灵敏度高，检测成本低，可以实现现场快速检测氨基脲。

权利要求

1.一种氨基脲的电化学快速检测方法，其特征在于包括如下检测步骤：(1)待测样品前处理：

将待检测样品加入到盐酸溶液中，振荡、超声处理后加入衍生剂进行氨基脲衍生化反应，将反应液离心，取上层清液调节pH值至6～7之间，然后用有机溶剂进行液液萃取，取有机相用氮气吹干除去有机溶剂，将所得萃取物溶于底液后用滤膜过滤，得到前处理后的待测样品；

(2)标准曲线绘制：

以体积比为1:1的超纯水和甲醇混合溶剂配置浓度为0μg/L、10μg/L、20μg/L、30μg/L、

40μg/L、50μg/L、60μg/L、70μg/L、80μg/L、90μg/L和100μg/L的氨基脲样品溶液，采用便携式电化学工作站测量不同浓度样品溶液中的电化学信号：电极系统采用三电极系统，包括工作电极、参比电极、对电极三部分，测量方法为差分脉冲伏安法；然后以氨基脲浓度为横坐标，差分脉冲伏安信号值为纵坐标，绘制标准曲线；

(3)采用便携式电化学工作站测量经前处理后的待测样品中的电化学信号，然后通过步骤(2)的标准曲线计算得到待测样品中的氨基脲浓度；

步骤(1)中所述的衍生剂是指浓度为0.1mol/L的邻硝基苯甲醛溶液；

步骤(2)中所述的工作电极是指直径为3mm的玻碳电极；所述的参比电极为浸于饱和KCl中的Ag/AgCl参比电极；所述的对电极为铂丝电极。

2.根据权利要求1所述的一种氨基脲的电化学快速检测方法，其特征在于：步骤(1)中所述调节pH值是指采用0.2mol/L的盐酸溶液和0.3mol/L磷酸钾溶液调节pH值。

3.根据权利要求1所述的一种氨基脲的电化学快速检测方法，其特征在于：步骤(1)中所述有机溶剂是指乙酸乙酯溶液。

4.根据权利要求1所述的一种氨基脲的电化学快速检测方法，其特征在于：步骤(1)中所述的底液是指pH为4.5的浓度为1mol/L醋酸缓冲溶液。

5.根据权利要求1所述的一种氨基脲的电化学快速检测方法，其特征在于：步骤(1)中所述的滤膜是指过滤孔径为0.45μm的亲水滤膜。

说明书

一种氨基脲的电化学快速检测方法

技术领域

[0001] 本发明属于分析化学技术领域，具体涉及一种氨基脲的电化学快速检测方法。

背景技术

[0002] 氨基脲，是一种白色晶体，易溶于水，化学式为H2N-NH-CO-NH2。是面制品添加剂偶氮甲酰胺的代谢产物。世界上许多国家，像加拿大，欧盟和美国等，规定偶氮甲酰胺的用量应低于45mg/kg，根据《中华人民共和国食品安全法》、卫生部门《关于加强食品添加剂监督管理工作通知》(未监督发[2009]89号)和卫生部2011年第6号公告等规定，在2011年食品添加剂产品标准公告(卫生部公告2011年第8号)小麦粉中偶氮甲酰胺的最大使用量为0.045g/kg(GB2760-2007)。至于氨基脲，向幼年大鼠注射40mg/kg氨基脲，大鼠性激素分泌水平和多个生殖器官会造成巨大影响，继续加量摄入，会导致大鼠死亡。

[0003] 氨基脲已有检测方法比如高效液相色谱与紫外、荧光等检测器联用、液相色谱质谱联用技术等，但是这些设备检测成本高，不宜携带、并且这种高性能的技术在应用上受到一定的限制。电化学检测作为一种小型技术优点在于，有比较高的选择性和灵敏度，检测价格低且易操作，因此被广泛的用于物质分析。电化学检测器已有便携式电化学工作站出现，降低了检测成本低、实现了现场快速检测，确实有一定的发展应用空间，有潜在的实际应用价值，有益于推广使用。

发明内容

[0004] 为了解决以上现有技术的缺点和不足之处，本发明的目的在于提供一种氨基脲的电化学快速检测方法。

[0005] 本发明目的通过以下技术方案实现：

[0006] 一种氨基脲的电化学快速检测方法，包括如下检测步骤：

[0007] (1)待测样品前处理：

[0008] 将待检测样品加入到盐酸溶液中，振荡、超声处理后加入衍生剂进行氨基脲衍生化反应，将反应液离心，取上层清液调节pH值至6～7之间，然后用有机溶剂进行液液萃取，取有机相用氮气吹干除去有机溶剂，将所得萃取物溶于底液后用滤膜过滤，得到前处理后的待测样品；

[0009] (2)标准曲线绘制：

[0010] 以体积比为1:1的超纯水和甲醇混合溶剂配置浓度为0μg/L、10μg/L、20μg/L、30μg/L、40μg/L、50μg/L、60μg/L、70μg/L、80μg/L、90μg/L和100μg/L的氨基脲样品溶液，采用便携式电化学工作站测量不同浓度样品溶液中的电化学信号：电极系统采用三电极系统，包括工作电极、参比电极、对电极三部分，测量方法为差分脉冲伏安法；然后以氨基脲浓度为横坐标(X)，差分脉冲伏安信号值为纵坐标(Y)，绘制标准曲线；

[0011] (3)采用便携式电化学工作站测量经前处理后的待测样品中的电化学信号，然后通过步骤(2)的标准曲线计算得到待测样品中的氨基脲浓度。

[0012] 优选地，步骤(1)中所述的衍生剂是指浓度为0.1mol/L的邻硝基苯甲醛溶液。

[0013] 优选地，步骤(1)中所述调节pH值是指采用0.2mol/L的盐酸溶液和0.3mol/L磷酸钾溶液调节pH值。

[0014] 优选地，步骤(1)中所述有机溶剂是指乙酸乙酯溶液。

[0015] 优选地，步骤(1)中所述的底液是指pH为4.5的浓度为1mol/L醋酸缓冲溶液。

[0016] 优选地，步骤(1)中所述的滤膜是指过滤孔径为0.45μm的亲水滤膜。

[0017] 优选地，步骤(2)中所述的工作电极是指直径为3mm的玻碳电极；所述的参比电极为浸于饱和KCl中的Ag/AgCl参比电极；所述的对电极为铂丝电极。

[0018] 相对于现有技术，本发明的检测方法具有如下优点及有益效果：

[0019] 本发明采用便携式电化学工作站检测样品中氨基脲含量，检测工具小巧，方便携带，方法灵敏度高，检测成本低，可以实现现场快速检测氨基脲，可以标准化使用。

附图说明

[0020] 图1为实施例中不同浓度的氨基脲样品的差分脉冲伏安特性谱图(横坐标是电压值(V)，纵坐标是电流值(A))；

[0021] 图2为实施例中根据差分脉冲伏安特性谱图结果绘制的标准曲线(横坐标是氨基脲浓度，纵坐标是氨基脲在差分脉冲伏安法中的信号值)。

具体实施方式

[0022] 下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

[0023] 实施例

[0024] 本实施例对市场上6中不同类型面制品产品进行氨基脲含量的检测：

[0025] (1)待测样品前处理：

[0026] 称取1.0000g(精确至0.0001g)面制品溶于10mL 0.2mol/L盐酸溶液中，用涡旋混合器混匀后超声处理，再加入0.1mol/L邻硝基苯甲醛1mL(邻硝基苯甲醛溶液用甲醇配制并在4℃以下储存于暗处，其保质期是一周)，然后在涡旋混合器上混匀后在37℃下反应16小时。反应结束后，冷却到室温，离心，取上层清液，用0.2mol/L盐酸和0.3mol/L磷酸钾溶液调节其pH在6～7之间，然后用5mL乙酸乙酯萃取，取有机相在常温下氮气吹干除去乙酸乙酯，将所得萃取物溶于5mL pH为4.5的1mol/L的醋酸缓冲液中并过0.45μm的亲水滤膜，得到前处理后的待测样品。

[0027] (2)标准曲线绘制：

[0028] 用超纯水和甲醇体积比为1:1混合的溶液配制100μg/L的氨基脲盐酸盐储备液，并将其保存在暗处在4℃以下储存，用于配置氨基脲标准溶液。然后分别配置浓度为0μg/L、10μg/L、20μg/L、30μg/L、40μg/L、50μg/L、60μg/L、70μg/L、80μg/L、90μg/L、100μg/L的氨基脲样品溶液。采用便携式电化学工作站测量不同浓度样品溶液中的电化学信号：电极系统采用三电极系统，包括工作电极(直径为3mm的玻碳电极)、参比电极(浸于饱和KCl中的Ag/AgCl参比电极)、对电极(铂丝电极)三部分，测量方法为差分脉冲伏安法；所得差分脉冲伏安特性谱图如图1所示。然后以氨基脲浓度为横坐标(X)，差分脉冲伏安信号值为纵坐标(Y)，绘制标准曲线，所得标准曲线如图2所示。检测接近空白样品标准浓度，取信噪比为3计算最低检出限。得到标准曲线的函数关系为：Y＝0.388+0.0158X(R2＝0.999)，最低检测限为0.003mg/kg。

[0029] (3)采用便携式电化学工作站测量经步骤(1)前处理后的待测样品中的差分脉冲伏安信号值，每种类型面制品取5个样品进行测试，然后通过步骤(2)的标准曲线计算得到待测样品中的氨基脲浓度。

[0030] 通过以上方法测定市场上6中不同类型面制品中氨基脲含量的结果如表1所示：

[0031] 表1市售面制品氨基脲含量测定结果

[0032]

[0033]

[0034] (NF：未检出)。

[0035] 对本发明检测方法的标准偏差及回收率进行验证：

[0036] (1)准确称取3份空白面粉1.0000g(精确至0.0001g)作为基质。加入不同的标准物氨基脲含量，按照上述实施例的前处理过程及检测方法处理样品及测试。每个浓度下作5组平行实验。结果如表2所示。

[0037] 表2加标面粉氨基脲回收率与精密度检测结果

[0038]

[0039] 由表2结果可知，当分别加入5μg/L，20μg/L和50μg/L浓度的氨基脲标准，回收率为92％到99％之间，相对标准偏差均低于4.3％，说明本发明的检测方法可靠性高。

[0040] (2)将含有氨基脲的水产虾生活的水质进行过滤，取3mL样品溶液分别加入氨基脲标准溶液，加入氨基脲标准溶液的含量为5μg/L,10μg/L和20μg/L，先用双层滤纸过滤，加酸酸化，混匀、离心后，再用水膜过滤，再按照上述实施例的前处理过程及检测方法处理样品及测试，结果如表3所示。

[0041] 表3水产样品中氨基脲回收率和精密度加标测定结果

[0042]

[0043] 由表3结果可知，回收率为93％到102％之间，相对标准偏差均低于2.3％，数据结果表明本发明的检测方法可靠。

[0044] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其它的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。