一种基于乌贼海螵蛸的催产激素包埋方法

摘要

本发明公开了一种基于乌贼海螵蛸的催产激素包埋方法，首先将乌贼置于麻醉剂中麻醉，再将激素缓释剂植入海螵蛸中。有益效果为：本发明植入的催产激素位于乌贼的石灰质海螵蛸中，对乌贼的刺激作用小，且由于海螵蛸具有疏松多孔的结构，也容易让激素释放到体内发挥作用；向右旋美托咪啶中加入一定的左旋美托咪啶，使制备的麻醉剂麻醉维持时间长，且还有一定的镇痛效果，极大地降低乌贼对包埋过程的应激反应，避免了喷墨的发生；以壳聚糖季铵盐为载体，制备的GnRH缓释剂生物相容性好，释放时间长且释放速度均匀。

权利要求

1.一种基于乌贼海螵蛸的催产激素包埋方法，其特征在于：所述方法为将乌贼麻醉，在海螵蛸上钻孔，将激素缓释剂放入孔内；

所述麻醉过程中，将乌贼置于麻醉剂中8-10min。

所述麻醉剂的制备方法为：取2-4份美托咪啶，1-2份羟考酮，加入9-11份去离子水，搅拌10-14min，再加入60-65份海水，搅拌15-20min，得麻醉剂；

所述麻醉剂成分美托咪啶中右旋美托咪啶与左旋美托咪啶的质量比为97/3-94/6。

2.根据权利要求1所述的一种基于乌贼海螵蛸的催产激素包埋方法，其特征在于：所述激素缓释剂的制备方法为：取10-15份壳聚糖季铵盐，加入900-1000份蒸馏水中，搅拌均匀，再加入0.1-0.2份的GnRH粉末，搅拌10-15min，再加入2-3份三聚磷酸钠，搅拌30-35min，将液体超速离心，将所得固态混合物冷冻干燥，得激素缓释剂。

3.根据权利要求2所述的一种基于乌贼海螵蛸的催产激素包埋方法，其特征在于：所述激素缓释剂的制备方法为：取10-15份壳聚糖季铵盐，加入900-1000份蒸馏水中，搅拌均匀，再加入0.1-0.2份的GnRH粉末，搅拌10-15min，接着加入5-7份偶氮二甲酰胺，搅拌4-6min，再加入2-3份三聚磷酸钠，搅拌30-35min，将液体超速离心，将所得固态混合物冷冻干燥，得激素缓释剂。

说明书

一种基于乌贼海螵蛸的催产激素包埋方法

技术领域

[0001] 本发明涉及水产养殖技术领域，尤其是涉及一种基于乌贼海螵蛸的催产激素包埋方法。

背景技术

[0002] 乌贼曾是我国渔场的四大渔业之一，对温度的适应性较强，在我国沿海分布很广，是一种经济价值很高的传统渔业种类。由于过度捕捞和生态恶化，自20世纪70年代以来，先后出现了衰退现象。为了缓解这种困境，对乌贼进行人工繁育是解决上述问题的有效途径。近年来，乌贼的繁育和增养殖在国内发展势头良好，但乌贼的人工繁育仍依靠其自然繁殖和产卵，亟需通过人工催产来提高乌贼的数量。

[0003] 现有技术如申请公布号为CN 106719178 A的中国发明专利，公开了一种头足类的人工促熟方法，该法将催产激素植入到头足类眼窝窦中，使激素缓慢释放，促进头足类繁育，但该法中激素缓释剂的制备工艺复杂，且麻醉过程中头足类应激反应大。

发明内容

[0004] 本发明的目的在于提供一种基于乌贼海螵蛸的催产激素包埋方法，该方法可以使乌贼提前成熟幷提高其繁育能力。

[0005] 本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：一种基于乌贼海螵蛸的催产激素包埋方法，包括麻醉，包埋。方法合理，操作简单，乌贼对包埋不产生应激，包埋成功率高，提高了发明的经济效益。

[0006] 作为优选，麻醉剂的制备方法为：取2-4份美托咪啶，1-2份羟考酮，加入9-11份去离子水，搅拌10-14min，再加入60-65份海水，搅拌15-20min，得麻醉剂。将乌贼置于所制备的麻醉剂中8-10min。制备的麻醉剂诱导迅速平稳，麻醉维持时间长。乌贼的喷墨行为对包埋过程有很大的影响，有可能导致激素包埋的失败，对乌贼进行麻醉处理，极大地降低乌贼对包埋过程的应激反应，避免了喷墨的发生。

[0007] 作为优选，麻醉剂成分美托咪啶中右旋美托咪啶与左旋美托咪啶的质量比为97/3-94/6。纯右旋美托咪啶可快速加深全身麻醉，使乌贼迅速地进入麻醉诱导期，但麻醉维持时间短，镇痛效果差，若加大用药量，会对机体产生一定的副作用。将右旋美托咪啶与左旋美托咪啶复配而成的麻醉剂，麻醉维持时间长，且还有一定的镇痛效果，为激素的包埋提供了良好的条件。

[0008] 作为优选，包埋过程中，将乌贼的肌肉性套膜划开，在露出的海螵蛸上钻孔，将激素缓释剂放入，1min后将乌贼转入新鲜海水中。乌贼海螵蛸是石灰质的内骨骼，植入的缓释剂对乌贼的刺激作用小；同时由于海螵蛸具有疏松多孔的结构，也容易让激素释放到体内发挥作用。

[0009] 作为优选，包埋过程中所用的激素缓释剂的制备方法为：取10-15份壳聚糖季铵盐，加入900-1000份蒸馏水中，搅拌均匀，再加入0.1-0.2份的GnRH粉末，搅拌10-15min，接着加入5-7份偶氮二甲酰胺，搅拌4-6min，再加入2-3份三聚磷酸钠，搅拌30-35min，将液体超速离心，将所得固态混合物冷冻干燥，得激素缓释剂。GnRH是负责卵泡刺激激素和促黄体激素分泌的十肽激素，可以促进乌贼的繁育。以壳聚糖季铵盐为载体，制备的GnRH缓释剂生物相容性好，偶氮二甲酰胺的加入，延长了激素的缓释时间，使其释放速度均匀，能够实现更完全的释放，且制备方法简单有效。

[0010] 与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明植入的催产激素位于乌贼的石灰质海螵蛸中，对乌贼的刺激作用小，且由于海螵蛸具有疏松多孔的结构，也容易让激素释放到体内发挥作用；向右旋美托咪啶中加入一定的左旋美托咪啶，使制备的麻醉剂麻醉维持时间长，且还有一定的镇痛效果，极大地降低乌贼对包埋过程的应激反应，避免了喷墨的发生；以壳聚糖季铵盐为载体，制备的GnRH缓释剂生物相容性好，释放时间长且释放速度均匀。

附图说明

[0011] 图1是本发明麻醉剂中右旋美托咪啶与左旋美托咪啶的比例对麻醉时间的影响。

具体实施方式

[0012] 下面通过实施例对本发明做进一步说明：

[0013] 实施例1：

[0014] 一种基于乌贼海螵蛸的催产激素包埋方法，包括以下步骤：首先是麻醉：用抄网将乌贼舀出，置于麻醉剂容器中，持续10min，时刻观察乌贼的麻醉情况；接着是包埋：用消毒过的刀将乌贼的肌肉性套膜划开，开口长度为25mm左右，用麻花钻在露出的海螵蛸上钻孔，将激素缓释剂放入，1min后将乌贼转入新鲜海水中。激素缓释剂的制备方法为：取10份壳聚糖季铵盐置于容器中，加入900份蒸馏水中，搅拌10min，再加入0.1份的GnRH粉末，搅拌10min，接着加入5份偶氮二甲酰胺，搅拌4min，再加入2份三聚磷酸钠，搅拌30min，设置离心机相对离心力为2000g，将液体在4℃下离心35min，将所得固态混合物冷冻干燥，得激素缓释剂。乌贼海螵蛸是石灰质的内骨骼，植入的缓释剂对乌贼的刺激作用小；同时由于海螵蛸具有疏松多孔的结构，也容易让激素释放到体内发挥作用。

[0015] 实施例2：

[0016] 一种基于乌贼海螵蛸的催产激素包埋方法，包括以下步骤：

[0017] 1)麻醉：将乌贼置于麻醉剂中9min。制备的麻醉剂诱导迅速平稳，麻醉维持时间长。；

[0018] 2)包埋：将乌贼的肌肉性套膜划开，在露出的海螵蛸上钻孔，将激素缓释剂放入，1min后将乌贼转入新鲜海水中。激素缓释剂的制备方法为：取15份壳聚糖季铵盐，加入1000份蒸馏水中，搅拌均匀，再加入0.2份的GnRH粉末，搅拌15min，接着加入7份偶氮二甲酰胺，搅拌6min，再加入3份三聚磷酸钠，搅拌35min，将液体超速离心，将所得固态混合物冷冻干燥，得激素缓释剂。乌贼海螵蛸是石灰质的内骨骼，植入的缓释剂对乌贼的刺激作用小；同时由于海螵蛸具有疏松多孔的结构，也容易让激素释放到体内发挥作用。

[0019] 乌贼的喷墨行为对包埋过程有很大的影响，有可能导致激素包埋的失败，对乌贼进行麻醉处理，极大地降低乌贼对包埋过程的应激反应，可以避免喷墨的发生。纯右旋美托咪啶可快速加深全身麻醉，使乌贼迅速地进入麻醉诱导期，但麻醉维持时间短，镇痛效果差，若加大用药量，会对机体产生一定的副作用。将右旋美托咪啶与左旋美托咪啶复配而成的麻醉剂，麻醉维持时间长，且还有一定的镇痛效果，为激素的包埋提供良好的条件。

[0020] 麻醉剂的制备方法为：取3份美托咪啶，1份羟考酮，加入10份去离子水，搅拌12min，再加入62份海水，搅拌15min，得麻醉剂。成分美托咪啶中右旋美托咪啶与左旋美托咪啶的比例为100/0,99/1,98/2,97/3,96/4,95/5,94/6,93/7,92/8,91/9,90/10。将所制备的麻醉剂用于乌贼的麻醉，以麻醉维持时间作为评价指标，结果如图1所示，由图可以看出，所得实验数据呈非线性运动，当右旋美托咪啶与左旋美托咪啶的比例为97/3-94/6时，麻醉维持时间较长。

[0021] 本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。

[0022] 以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。