制备极窄范围的8至35nm粒径的含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物的方法

摘要

载了制备粒径8~35nm极窄范围的含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物的方法。通过该方法所制备的紫杉烷类聚合物胶束复溶后平均粒径在12~19nm，D10在8~12nm，D90在20~28nm，多分散系数小于0.1的包含紫杉烷药物的两亲性嵌段共聚物组合物方法，此粒径大小符合人体生理结构分布要求，提高粒子穿透肿瘤组织效率；解决现有成束技术由于长时间高温导致活性成份降解，尤其按照现有最新标准方法，减小温度敏感杂质的降解，降低毒副作用，符合新药申报要求，使其成药。

权利要求

1.一种制备极窄范围的粒径8～35nm的含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物的方法，所述含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物复溶后平均粒径在12～25nm，多分散系数小于

0.1，所述制备方法包含：

(1)所述两亲嵌段共聚物是含有亲水嵌段(A)和疏水嵌段(B)的两亲嵌段共聚物A-B型嵌段共聚物，其亲水嵌段(A) 是甲氧基聚乙二醇2000，疏水嵌段B是聚乳酸或聚乳酸和乙醇酸的共聚物，疏水嵌段分子量为1600-2200，A/B质量比在1.02～1.18；

(2)将紫杉烷和所述两亲嵌段共聚物溶解在有机溶剂中，而后旋蒸除掉有机溶剂，得到物料A(3)将物料A加注射用水，并严格控制温度25～65℃条件下，旋转超声使之快速水化成束，而后降温至0～10℃，并加入冻干赋型剂溶液混合，再通过纳米级滤膜积压过滤，滤液分装、冻干；

其中，所述旋转超声使之水化，是将超声与旋转结合，加快成束速度，提高样品稳定性，并控制成束粒径在极小、极窄的方法，其旋转速度10～500r/min，超声声强0.1～150w/cm2，频率0.1KHZ～100KHz。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述紫杉烷是紫杉醇、多西紫杉醇、拉洛他赛、卡巴他赛、康莫他赛、阿齐他赛、信立他赛或者他们的混合物。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述有机溶剂选自乙醇、甲醇、叔丁醇、乙腈的一种或多种。

4.如权利要求1所述的方法，其纳米级滤膜选自孔径10～300nm的滤膜。

5.如权利要求1所述的方法，其冻干赋型剂选自甘露醇、乳糖、蔗糖、右旋糖酐、甘氨酸、果糖、山梨醇的一种或多种等。

说明书

制备极窄范围的8至35nm粒径的含紫杉烷的两亲嵌段共聚物

胶束组合物的方法

技术领域

[0001] 本发明属于药物剂型和纳米药物制备技术领域，实施方案涉及粒径范围8 35nm含~紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物及其制备方法。

背景技术

[0002] 癌症已成为国人疾病死因之首。据发表在CA：A Cancer Journal for Clinicians（IF=144.8）杂志的《2015年中国癌症统计》一文分析显示，2015年中国有新发浸润性癌病例数429.2万，相当于平均每天新发12000例癌症，有281.4万癌症死亡病例，相当于平均每天7500人死于癌症。癌症的发病率和死亡率均呈逐年上升的趋势。由于肿瘤血管的高渗透性、血流复杂性、间质内压高，导致化疗药物通常只能渗透三到五层细胞直径的血管壁，几乎没有药物能达到远端的肿瘤细胞，导致耐药性发生。尤其粒径在50nm以上的纳米载体在肿瘤组织穿透力上是有所欠缺，100nm以上的纳米载体在渗透性差的肿瘤组织，基本无疗效。
H.Cabral等2011年在nature nanotechnology发表研究显示只有粒径在30nm以下的粒子可有效穿透渗透性较差的胰腺癌取得较好抗肿瘤效果；Vikash P. Chauhan等也于2012年在nature nanotechnology上发表纳米药物粒径在12nm是最理想的大小，这个大小的粒子对肿瘤组织有较好的穿透性，才能发挥较好的抗肿瘤效果，这与人体生理结构，肾的清除阈值
8nm以下相符。脂质体属于第一代纳米制剂，其粒径范围多在50 150nm，其制备工艺复杂，成~
本高；虽然将药物包裹在脂质体中能够改善药物动力学和生物分布，但是与传统的药物制剂相比，市场上的脂质体治疗药剂仅是降低了原有普通制剂的毒副作用，提高患者生命质量，但其对总的存活率（OS）并不理想。

[0003] 近年，聚合物纳米抗癌药物在缓控释靶向给药制剂研究中崭露头角，其作为抗肿瘤药物载体具有显著的优势和广泛的应用前景。其中可以自组装成纳米级微粒的聚合物胶束（Polymeric micelles），以其对疏水性药物较大的亲合性，较小的粒径范围（10nm~100nm），较高的载药量、包封率，低毒高效，药物缓慢释放，制成粉末（冷冻干燥或喷雾干燥）可长期保存；易于实现工业化大生产等优点，成为国内外新药技术研究的热点。然而目前所发表的文献及上市、不同临床阶段的聚合物胶束，其粒径范围均很宽、较大，如韩国紫杉醇胶束Cynviloq，其申请的专利“96197134.7”、“200880123622.6”在组成、制备工艺上并不能有效控制粒径范围及粒径大小，其粒径范围在10 100nm，平均粒径在20 50nm范围，50%的粒~ ~
子超过30nm；而胶束粒子在超过30nm以上，其对肿瘤组织的渗透性就会变差，其疗效就会降低。日本nanocarrier公司的NK105粒径范围20 430nm，平均粒径在85nm，这也是其III期临~
床结果不理想的原因。而经典的紫杉醇白蛋白制剂Abraxane，其体外粒径检测平均粒径在
130nm，但在体内经血浆稀释后，粒径在10nm左右，这也是其临床抗肿瘤效果显著的原因；但是其制备工艺复杂、成本高导致临床患者负担重，推广受限。

发明内容

[0004] 发明目的：解决现有技术无法有效控制成束粒子粒径大小、粒径范围问题，通过本发明开发出制备粒径范围极窄8 35nm，复溶后平均粒径在12 19nm，D10在8 12nm，D90在20~ ~ ~ ~28nm，多分散系数小于0.1 的包含紫杉烷药物的两亲性嵌段共聚物组合物方法，此粒径大小符合人体生理结构分布要求，提高粒子穿透肿瘤组织效率；解决现有成束技术由于长时间高温导致活性成份降解，尤其按照USP40版药典方法中，对温度敏感的杂质4增多，毒副作用增多问题。

[0005] 为实现上述技术目的，本发明采取如下技术方案：

[0006] 制备极窄范围的粒径8 35nm的含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物的方法。所~述含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物复溶后平均粒径在12 25nm，多分散系数小于0.1 ~
的包含紫杉烷、两亲性嵌段共聚物以及冻干赋型剂。所述制备方法包含：

[0007] (1)严格的两亲嵌段共聚物嵌段比、分子量，其所述的两亲性嵌段共聚物其亲水嵌段（A）是甲氧基聚乙二醇2000，并且所述疏水嵌段B是聚乳酸（PLA）或聚乳酸和乙醇酸的共聚物（PLGA），疏水嵌段分子量为1600 2200， A/B质量比在1.02 1.18~ ~

[0008] (2)将紫杉烷和所述两亲嵌段共聚物溶解在有机溶剂中，而后快速除掉有机溶剂，得到物料A

[0009] (3)将物料A加注射用水，并严格控制温度25 65℃条件下，旋转超声使之快速水化~成束，而后降温至0 10℃，并加入冻干赋型剂溶液混合，再通过纳米级滤膜积压过滤，滤液~
分装、冻干。

[0010] 其中所述紫杉烷是紫杉醇、多西紫杉醇、拉洛他赛、卡巴他赛、康莫他赛、阿齐他赛、信立他赛或者他们的混合物；所述有机溶剂选自乙醇、甲醇、叔丁醇、乙腈的一种或多种；所述冻干赋型剂选自甘露醇、乳糖、蔗糖、右旋糖酐、甘氨酸、果糖、山梨醇的一种或多种等。所述快速除掉有机溶剂方法选择喷雾、冻干、旋蒸方法中的任意一种方法；其中所述旋转超声使之水化，是将超声与旋转结合，严格控制温度、旋转速度、超声强度、频率使其快速成束，提高样品稳定性，并控制成束粒径在极小、极窄的范围，其温度在25 65℃，优选28 35~ ~℃，其旋转速度10 500r/min，优选150 250r/min，其超声声强在0.1 150w/cm2，频率0.1KHZ~ ~ ~
100KHz；其纳米级滤膜选自孔径10 300nm的滤膜。
~ ~

[0011] 应用本发明的紫杉烷类药物的胶束或冻干制剂可用于治疗患有癌症、肿瘤、卡波西肉瘤、恶性肿瘤、继发于组织损伤的失调的组织或细胞增生以及任何其他对紫杉烷类药物反应的疾病的患者，在治疗特别有效的癌症类型中有肝细胞癌和肝转移瘤、卵巢癌、乳腺癌等。

附图说明

[0012] 图1为实施例1制备的多西他赛胶束冻干制剂、冻干制剂复溶后的性状照片。

[0013] 图2为多西他赛胶束（实施例1）粒径。

[0014] 图3为多西他赛胶束（实施例1）透射电镜照片。

[0015] 图4为多西他赛胶束（实施例1）有关物质图谱。

[0016] 图5为多西他赛胶束（实施例15）非专利技术制备的样品的粒径图。

[0017] 图6为多西他赛胶束（实施例15）非专利技术制备样品的有关物质图谱。

[0018] 图7 为多西他赛胶束实施例1与市售品泰素帝、实施例15样品抗胰腺癌效果图[0019] 表1：为图2多西他赛胶束（实施例1）粒径分布数据

[0020]

[0021] 表2：为图4多西他赛胶束（实施例1）有关物质图谱数据

[0022]

[0023]  表3：为图5多西他赛胶束（实施例15）非专利技术制备的样品的粒径分布数据[0024]

[0025] 表4：为图6多西他赛胶束（实施例15）有关物质图谱数据

[0026]

具体实施方式

[0027] 以下是本发明中所用材料的中文名及对应简称的说明：

[0028] 1、二嵌段聚合物：甲氧基聚乙二醇-聚（D,L-乳酸），简称MePEG－PDLLA，或MPEG－PLA。

[0029] 2、甲氧基聚乙二醇，简称MePEG，或MPEG。

[0030] 3、聚（D,L-乳酸），简称PDLLA。

[0031] 实施例1

[0032] （1）将95.014g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和5.007g多西他赛溶于0.2L无水乙醇中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0033] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0034] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在60℃，200r/min搅拌，声强10 30w/~cm2，频率20KHZ 30KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm的~ ~
胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的甘露醇水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0035] 实施例2

[0036] （1）将80.172g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和20.039g紫杉醇溶于0.2L无水乙醇中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0037] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0038] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在25℃，500r/min搅拌，声强10 30w/~cm2，频率20KHZ 30KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm的~ ~
胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的甘露醇水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0039] 实施例3

[0040] （1）将95.008g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和5.101g多西他赛溶于0.2L无水乙醇中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0041] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0042] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在60℃，180r/min搅拌，声强20 35w/~cm2，频率30KHZ 60KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm的~ ~
胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的甘露醇水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0043] 实施例4

[0044] （1）将94.992g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和5.003g拉洛他赛溶于0.2L无水乙醇中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0045] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0046] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在60℃，180r/min搅拌，声强10 30w/~cm2，频率50KHZ 100KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm~ ~
的胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的甘露醇水溶液溶液混合，再通过2个0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0047] 实施例5

[0048] （1）将95.009g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和5.001g卡巴他赛溶于0.2L无水乙醇中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0049] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0050] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在60℃，500r/min搅拌，声强10 30w/~cm2，频率50KHZ 100KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm~ ~
的胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的乳糖水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0051] 实施例6

[0052] （1）将95.033g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和5.129g阿齐他赛溶于0.2L无水乙醇中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0053] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0054] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在25℃，150r/min搅拌，声强50 60w/~cm2，频率10KHZ 20KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm的~ ~
胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的甘露醇水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0055] 实施例7

[0056] （1）将95.001g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和5.003g信立他赛溶于0.2L无水乙醇中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0057] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0058] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在55℃，200r/min搅拌，声强10 30w/~cm2，频率20KHZ 30KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm的~ ~
胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的甘露醇水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0059] 实施例8

[0060] （1）将95.003g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和5.041g多西他赛溶于0.2L无水乙腈中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0061] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0062] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在65℃，200r/min搅拌，声强10 30w/~cm2，频率20KHZ 30KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm的~ ~
胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的甘露醇水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0063] 实施例9

[0064] （1）将85.018g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和15.091g紫杉醇溶于0.2L无水乙腈中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0065] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0066] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在25℃，500r/min搅拌，声强10 30w/~cm2，频率20KHZ 30KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm的~ ~
胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的甘露醇水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0067] 实施例10

[0068] （1）将92.010g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA2000)和7.998g多西他赛溶于0.2L无水乙腈中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0069] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0070] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在60℃，180r/min搅拌，声强20 35w/~cm2，频率30KHZ 60KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm的~ ~
胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的乳糖水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0071] 实施例11

[0072] （1）将90.001g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1750)和10.017g拉洛他赛溶于0.2L无水乙腈中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0073] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0074] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在60℃，180r/min搅拌，声强10 30w/~cm2，频率50KHZ 100KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm~ ~
的胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的乳糖水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0075] 实施例12

[0076] （1）将85.037g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA2000)和15.023g卡巴他赛溶于0.2L无水乙腈中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0077] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0078] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在60℃，500r/min搅拌，声强10 30w/~cm2，频率50KHZ 100KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm~ ~
的胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的乳糖水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0079] 实施例13

[0080] （1）将90.009g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和10.123g阿齐他赛溶于0.2L无水乙腈中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0081] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0082] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在25℃，150r/min搅拌，声强50 60w/~cm2，频率10KHZ 20KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm的~ ~
胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的蔗糖醇水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0083] 实施例14

[0084] （1）将95.071g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和4.989g信立他赛溶于0.2L无水乙腈中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；

[0085] （2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0086] （3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在55℃，200r/min搅拌，声强10 30w/~cm2，频率20KHZ 30KHz；的条件下，快速使之澄清透明，过0.22μm滤膜，制得粒径在8 35nm的~ ~
胶束C，而后降温至5℃，并加入250ml（50mg/ml）浓度的蔗糖水溶液溶液混合，再通过2个
0.2um滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

[0087] 实施例15

[0088] 采用CN104761710B报道方法制备多西他赛聚合物胶束

[0089] （1）将95.009g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)、4.989g多西他赛，0.1L无水乙腈备用

[0090] （2）向备用的多西他赛加入250ml乙腈，超声溶解，而后加入甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）继续溶解，0.22um无菌过滤，然后在50℃，80r/min转速下旋蒸2h，蒸去乙腈得到多西他赛聚合物凝胶膜，快速加入1000g的50℃的水进行涡旋水化，待完全水化后，迅速将胶束溶液降温至5℃，得胶束溶液，然后无菌过滤，分装，冻干。

[0091] 将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；

[0092] 对上述实施例样品分别采用马尔文粒度测定仪、USP40版药典有关物质、含量测定方法，对粒径（范围、D10，D50，D90，PDI）、载药量、温度敏感杂质D4进行检测，结果见表5[0093] 表5实施例 粒径范围nm D10 D50 D90 PDI 载药量% 杂质D4＜≤0.50%
1 8.7 32.7 11.5 16.5 23.8 0.05 4.96% 0.15%
~
2 8.2 32.7 11.9 17.1 24.8 0.05 19.78% 0.11%
~
3 8.1 34.6 12.0 17.3 25.0 0.06 5.02% 0.18%
~
4 9.3 32.2 12.1 17.6 26.1 0.07 4.98% 0.16%
~
5 8.8 34.6 12.4 17.6 24.9 0.04 4.99% 0.19%
~
6 8.5 32.9 12.2 17.2 24.1 0.04 5.03% 0.10%
~
7 8.5 35.6 12.3 17.4 24.6 0.04 4.95% 0.09%
~
8 8.6 36.1 12.1 17.3 24.9 0.05 5.01% 0.16%
~
9 8.7 33.9 12.1 17.2 24.2 0.05 15.05% 0.18%
~
10 8.5 34.5 12.6 17.8 25.2 0.04 7.95% 0.20%
~
11 9.5 35.0 12.2 17.8 26.4 0.07 10.02% 0.21%
~
12 10.5 32.5 11.6 16.6 24.1 0.05 15.08% 0.15%
~
13 9.3 30.1 12.0 17.6 26.2 0.07 10.01% 0.14%
~
14 9.6 31.3 12.1 17.8 26.7 0.09 4.97% 0.17%
~
15 18.2 78.8 25.3 38.9 55.3 0.13 5.02% 0.85%
~

[0094] 由结果可见，本发明采用的方法，可以有效控制粒径范围及杂质大小，提高样品的稳定性。

[0095] 图2及表1可以看出，实施例1制备的多西他赛聚合物胶束粒径范围非常窄（8.7~32.67nm）、99.7%的胶束粒子的粒径在30nm以下，平均粒径仅16.01nm，D10为11.5，D50为
16.5nm，D90为23.8nm，PDI仅为0.051。同时通过透射电镜图3可以看到其聚合物胶束所形成的粒子非常均一，形态圆整。并且采用我们专利技术制备的注射用多西他赛聚合物胶束有关物质非常小，见图4及表2，说明极大提高样品的稳定性。

[0096] 图5及表3为实施例15制备样品测定的粒径图谱及数据，其粒径范围在18.17~78.82nm，其中仅31.2%的胶束粒子的粒径在30nm以下，这无疑不利于穿透渗透性差的肿瘤组织，从而影响其疗效，并且从图6及表4可以看出，通过该工艺制备的多西他赛聚合物胶束，杂质较多并非常大，最大杂质都超过了0.8%，显示工艺对样品的稳定性不利，按照最严申报新药要求，其杂质是不符合要求的。也体现了我们专利技术的优势，可以极大提高样品的稳定性。

[0097] 药效考察：

[0098] 图7为等剂量下以多西他赛（10mg/kg）剂量计，本发明多西他赛聚合物胶束（按照实例1制备得到的多西他赛纳米胶束，简称Doc-PM）与市售泰素帝（Sanofi）、实例15制备的多西他赛聚合物胶束ZL-Doc-PM的对荷瘤鼠（人胰腺癌细胞株BxPC3）抑瘤效果图。从图7可以看出，本发明的注射用多西他赛聚合物胶束由于具有小的粒径范围（8.5 33.5nm）对各肿~瘤组织有较好的穿透性，体现较好的抑瘤效果。