一种酪氨酸激酶抑制剂的苹果酸盐的结晶形式及其制备方法

摘要

本发明涉及一种酪氨酸激酶抑制剂的苹果酸盐的结晶形式及其制备方法。具体地，本发明涉及5-(2-二乙胺基-乙基)-2-(5-氟-2-氧代-1，2-二氢-吲哚-3-亚基-甲基)-3-甲基-1，5，6，7-四氢-吡咯[3，2-c]吡啶-4-酮L-苹果酸盐(式(I)化合物)的II型结晶及其制备方法。本发明所得到式(I)化合物的II型结晶具备良好的晶型稳定性和化学稳定性，并且所用结晶溶剂低毒低残留，可更好地用于临床治疗。

权利要求

1.式(I)所示化合物的II型结晶，其特征在于：使用Cu-Ka辐射，得到以2θ角度和晶面间距表示的X-射线粉末衍射图谱，所述结晶在2θ±0.2为6.62、12.55、15.27、16.55、19.26和

22.75处有特征峰，

2.根据权利要求1所述的式(I)所示化合物的II型结晶，其特征在于所述结晶在2θ±

0.2为6.62、12.55、13.34、15.27、16.55、19.26、19.99、22.07、22.75、23.80、25.70和28.27处有特征峰。

3.根据权利要求1所述的式(I)所示化合物的II型结晶，其特征在于具有如图1所示的X-射线粉末衍射图谱，其中在2θ±0.2为6.62、11.02、12.55、13.34、15.27、16.55、17.46、

19.26、19.99、20.75、22.07、22.75、23.80、25.70、27.38、28.27和30.83处有特征峰。

4.一种制备如权利要求1至3任意一项所述的式(I)所示化合物的II型结晶的方法，所述方法包括下述步骤：

1)将任意晶型或无定型的式(I)所示化合物加热溶解于适量的有机溶剂中，冷却、析晶，所述有机溶剂优选甲醇、乙醇；

2)过滤结晶并洗涤，干燥。

5.一种药物组合物，其含有权利要求1至3任意一项所述的式(I)所示化合物的II型结晶以及药学上可接受的载体。

6.权利要求1至3任意一项所述的II型结晶或权利要求5所述的药物组合物在制备治疗与酪氨酸激酶有关的疾病的药物中的用途；所述疾病优选肿瘤，更优选为非小细胞肺癌、肝癌、胃肠道基质肿瘤或肾癌。

说明书

一种酪氨酸激酶抑制剂的苹果酸盐的结晶形式及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种酪氨酸激酶抑制剂的苹果酸盐的结晶形态，特别是5-(2-二乙胺基-乙基)-2-(5-氟-2-氧代-1，2-二氢-吲哚-3-亚基-甲基)-3-甲基-1，5，6，7-四氢-吡咯[3，2-c]吡啶-4-酮L-苹果酸盐的II型结晶。

背景技术

[0002] 近年来，随着分子生物学技术的进展和从细胞受体与增殖调控的分子水平对肿瘤发病机制认识的进一步深入，针对细胞受体、关键基因和调控分子为靶点的治疗开始进入临床，人们称之为“分子靶向治疗”。这些领域包括具有靶向性的表皮生长因子受体(EGFR)阻滞剂、针对某些特定细胞标志物的单克隆抗体、针对某些癌基因和癌的细胞遗传学标志的药物、抗肿瘤血管生成的药物、抗肿瘤疫苗和基因治疗等。

[0003] 首先进入临床的酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)的抗肿瘤作用机制可能通过以下途径实现：抑制肿瘤细胞的损伤修复、使细胞分裂阻滞在G1期、诱导和维持细胞凋亡、抗新生血管形成等。EGFR过度表达常预示病人预后差、转移快、对化疗药物抗拒、激素耐药、生存期较短等。TKIs还可通过下调肿瘤细胞的血管生成因子以及抑制EGFR对肿瘤血管内皮细胞的信号传导，EGFR和血管内皮生长因子受体(VEGFR)两种信号传导通路的“交叉对话”，为临床同时抑制这两种传导通路提供了合理的依据。临床试验结果显示，多靶点抑制剂在治疗方面优于单靶点抑制剂，多靶点联合阻断信号传导是肿瘤治疗和药物开发新的发展方向。

[0004] 到目前为止，美国FDA批准3种多靶点TKIs上市，如：索拉非尼(sorafenib)、凡德他尼(vandetanib)和Sunitinib(Sutent，SU-11248)，其中Sunitinib于2006年1月份批准上市，治疗GIST和晚期肾癌。由于目前临床上除了伊马替尼外，没有治疗晚期GIST的药物，治疗肾癌的药物也很少，所以Sunitinib的结果令人鼓舞。WO2007085188公开了一种与Sunitinib类似的化合物，如下式(I)所示，其可能更好地应用于上述肿瘤的治疗。

[0005]

[0006] 本领域技术人员知道，药用的活性成分的晶型结构往往影响到该药物的化学稳定性，结晶条件及储存条件的不同有可能导致化合物的晶型结构的变化，有时还会伴随着产生其他形态的晶型。一般来说，无定型的药物产品没有规则的晶型结构，往往具有其它缺陷，比如产物稳定性较差，析晶较细，过滤较难，易结块，流动性差等。因此，改善上述产物的各方面性质是很有必要的，我们需要深入研究找到晶型纯度较高并且具备良好化学稳定性的新晶型。

[0007] WO2016110243A1公开了式(I)所示化合物的I晶型。然而研究发现，I晶型在光照条件下不稳定，因此需要找到更为稳定的晶型。

发明内容

[0008] 本发明提供了5-(2-二乙胺基-乙基)-2-(5-氟-2-氧代-1，2-二氢-吲哚-3-亚基-甲基)-3-甲基-1，5，6，7-四氢-吡咯【3，2-c】吡啶-4-酮L-苹果酸盐(如式(I)所示)的II型结晶及制备方法。

[0009]

[0010] 式(I)所示化合物在不同结晶条件下得到的一系列结晶产物，对所得结晶产物进行了X-射线粉末衍射及DSC检测，发现式(I)所示化合物在本发明的结晶条件下，可以得到一种稳定性良好的晶型，我们称其为II型结晶。本申请中的II型结晶的DSC图谱显示在230.65℃附近有熔融吸热峰，X-射线粉末衍射图谱如图1所示，使用Cu-Ka辐射，以2θ角度和晶面间距(d值)表示的X-射线粉末衍射图谱，其中在2θ±0.2为6.62、12.55、15.27、16.55、
19.26和22.75处有特征峰。

[0011] 进一步地，所述结晶在2θ±0.2为6.62、12.55、13.34、15.27、16.55、19.26、19.99、22.07、22.75、23.80、25.70和28.27处有特征峰。

[0012] 进一步地，所述结晶的X-射线粉末衍射图谱如图1所示，其中在2θ±0.2为约6.62(13.33)，11.02(8.02)，12.55(7.05)，13.34(6.63)，15.27(5.80)，16.55(5.35)，17.46(5.08)，19.26(4.60)，19.99(4.44)，20.75(4.28)，22.07(4.02)，22.75(3.91)，23.80(3.74)，25.70(3.46)，27.38(3.26)，28.27(3.16)和30.83(2.90)有特征峰。

[0013] 本发明还提供了制备5-(2-二乙胺基-乙基)-2-(5-氟-2-氧代-1，2-二氢-吲哚-3-亚基-甲基)-3-甲基-1，5，6，7-四氢-吡咯【3，2-c】吡啶-4-酮L-苹果酸盐的II型结晶的方法。该方法包括如下步骤：

[0014] (1)将式(I)所示化合物固体加热溶解于适量的有机溶剂中，冷却析晶；所述有机溶剂为甲醇、乙醇。

[0015] (2)过滤、洗涤、干燥。

[0016] 重结晶的方法没有特别限定，可以用通常的重结晶操作方法进行。例如，可以用原料式(I)所示化合物在溶剂中加热溶解后慢慢冷却析晶，结晶完成后，经过滤干燥，即可得到所需要的结晶。需特别说明的是，所滤取的结晶体通常在减压下，在30～100℃左右，优选40～60℃的加热条件下进行真空干燥，就能达到去除重结晶溶剂的效果。

[0017] 通过差示扫描热分析(DSC)、X-射线粉末衍射图谱测定，对得到的式(I)所示化合物结晶体进行了晶型研究，同时对所得结晶的溶剂残留进行了检测。

[0018] 按照本发明的方法制备的式(I)所示化合物II型结晶不含有或仅含有较低含量的残留溶剂，符合国家药典规定的有关医药产品残留溶剂的限量要求，因而本发明的结晶可以较好地作为医药活性成分使用。

[0019] 经研究表明，本发明制备的式(I)所示化合物II型结晶在高温、高湿的条件下稳定性良好，且在研磨、压力和受热等条件下，晶型稳定性良好，能够满足生产运输储存的药用要求，生产工艺稳定可重复可控，能够适应于工业化生产。

附图说明

[0020] 图1式(I)所示化合物II型结晶的X-射线粉末衍射图谱。

[0021] 图2式(I)所示化合物II型结晶的DSC谱图。

[0022] 图3式(I)所示化合物I型结晶的X-射线粉末衍射图谱。

[0023] 图4式(I)所示化合物I型结晶的DSC谱图。

具体实施方式

[0024] 以下将结合实施例更详细地解释本发明，本发明的实施例仅用于说明本发明的技术方案，并非限定本发明的实质和范围。

[0025] 实验所用的测试仪器

[0026] 1、DSC谱

[0027] 仪器型号：Mettler Toledo DSC 1 Staree System

[0028] 吹扫气：氮气

[0029] 升温速率：10.0℃/min

[0030] 温度范围：40-300℃

[0031] 2、X-射线衍射谱

[0032] 仪器型号：Bruker D8 Focus X-射线粉末衍射仪

[0033] 射线：单色Cu-Kα射线(λ＝1.5406)

[0034] 扫描方式：θ/2θ，扫描范围：2-40°

[0035] 电压：40KV，电流：40mA

[0036] 实施例1

[0037] 取(1.0g，1.84mmol)式(I)所示化合物(按WO2007085188中公开的方法制备)加入到250ml单口瓶中，加入208ml乙醇，加热溶解，再冷却至室温，静置析晶，抽滤，真空干燥，得到固体0.57g，收率57.0％。该结晶样品的X-射线衍射谱图见图1。该结晶在约6.62(13.33)，11.02(8.02)，12.55(7.05)，13.34(6.63)，15.27(5.80)，16.55(5.35)，17.46(5.08)，19.26(4.60)，19.99(4.44)，20.75(4.28)，22.07(4.02)，22.75(3.91)，23.80(3.74)，25.70(3.46)，27.38(3.26)，28.27(3.16)和30.83(2.90)处有特征峰。DSC谱图见图2，有熔融吸热峰230.65℃，将此晶型定义为II晶型。

[0038] 实施例2

[0039] 取(1.0g，1.84mmol)式(I)所示化合物(按WO2007085188中公开的方法制备)加入到250ml单口瓶中，加入50ml乙醇，50ml水，加热溶解，再冷却至室温，静置析晶，抽滤，真空干燥，得到固体0.64g，收率64.0％。该结晶样品的X-射线衍射谱图见图3，该X-射线衍射谱图的峰值列表如表1。该结晶在约7.34(12.02)，10.09(8.76)，11.06(7.99)，12.25(7.22)，13.03(6.79)，14.69(6.02)，15.11(5.86)，15.42(5.74)，16.00(5.54)，17.17(5.16)，17.72(5.00)，19.86(4.47)，20.35(4.36)，21.96(4.04)，22.77(3.90)，23.37(3.80)，25.33(3.51)，25.96(3.43)，26.52(3.36)，28.77(3.10)，30.17(2.96)和31.65(2.83)处有特征峰。DSC谱图见图4，有尖锐熔融吸热峰240.64℃，此晶型为WO2016110243A1公开的I晶型。

[0040] 表1、X-射线衍射谱图的峰值列表

[0041]

[0042] 实施例3

[0043] 取(1.0g，1.84mmol)式(I)所示化合物(按WO2007085188中公开的方法制备)加入到250ml单口瓶中，加入90ml甲醇，加热溶解，再冷却至室温，静置析晶，抽滤，真空干燥，得到式(I)所示化合物橙黄色固体0.45g，收率45.0％。其X-射线粉末衍射和DSC图谱经研究比对，确定产物为II晶型。

[0044] 实施例4

[0045] 将实施例1所得的II型结晶产物和实施例2制得的I型结晶的样品分别敞口平摊放置，考察在光照(4500Lux)，加热(40℃，60℃)，高湿(RH75％，RH90％)条件下样品的稳定性。考察取样时间为5天和10天，HPLC检测纯度见表2。

[0046] 表2、式(I)所示化合物I型结晶和II型结晶样品的稳定性比较

[0047]

[0048] 稳定性考察结果表明，式(I)所示化合物II型结晶和I型结晶样品在敞口放置的条件下，经光照、高温和高湿条件下的稳定性比较发现，高湿、高温对两者的影响不大，但是在光照的条件下，II型结晶的稳定性显著好于I型结晶样品。

[0049] 实施例5

[0050] 将按实施例1方法制得的式(I)所示化合物II型结晶进行研磨、加热及压片处理，研究结果表明晶型稳定，详细的实验数据参见下表3。

[0051] 表3、式(I)所示化合物II晶型特殊稳定性研究

[0052]

[0053]

[0054] 实施例6

[0055] 考察按实施例1方法制得的式(I)所示化合物II型结晶样品在加速(40℃±2℃、RH75％±5％)条件下和长期(25℃±2℃、RH60％±10％)条件下样品的稳定性。考察取样时间为加速6个月，长期36个月，HPLC检测纯度见表4。

[0056] 表4、式(I)所示化合物II型结晶样品的稳定性

[0057]

[0058] 稳定性考察结果表明，(I)所示化合物II型结晶样品，经过加速试验6个月、长期试验36个月具有较好的稳定性。