阿西替尼和PX-478在治疗鼻咽癌方面的应用

摘要

本发明公开了PX‑478，以及阿西替尼和PX‑478联用在治疗鼻咽癌方面的应用。本发明首次发现，PX‑478能显著抑制鼻咽癌细胞的VM形成，抑制其移植瘤的生长，对鼻咽癌具有显著的疗效。同时研究发现，阿西替尼和PX‑478联合用药实现了协同增效的作用，对鼻咽癌具有更显著的治疗效果。本发明不仅提供了阿西替尼和PX‑478的新用途，也为鼻咽癌的治疗提供了新的治疗用药方案，在鼻咽癌的防治方面具有很好的应用前景。

权利要求

1.阿西替尼和PX-478在制备治疗鼻咽癌药物方面的应用，所述PX-478的化学式为C13H20Cl4N2O3，CAS号为685898-44-6。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述治疗鼻咽癌药物是指抑制鼻咽癌生长的药物。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抑制鼻咽癌生长是指抑制鼻咽癌细胞的生长。

4.根据权利要求1～3任一所述的应用，其特征在于，所述鼻咽癌为EBV阳性鼻咽癌。

5.一种治疗鼻咽癌的药物，其特征在于，含有阿西替尼和PX-478，所述PX-478的化学式为C13H20Cl4N2O3，CAS号为685898-44-6。

6.根据权利要求5所述的药物，其特征在于，所述鼻咽癌为EBV阳性鼻咽癌。

7.根据权利要求5所述的药物，其特征在于，还包括医学上可接受的辅料或载体。

说明书

阿西替尼和PX-478在治疗鼻咽癌方面的应用

技术领域

[0001] 本发明属于医药技术领域。更具体地，涉及阿西替尼（Axitinib）和PX-478在治疗鼻咽癌方面的应用。

背景技术

[0002] 鼻咽癌是我国恶性肿瘤之一，发病率为耳鼻咽喉恶性肿瘤之首。鼻咽癌大多对放射治疗具有中度敏感性，放射治疗是鼻咽癌的首选治疗方法。

[0003] 但是，放射治疗可能会产生许多并发症：（1）全身反应：包括乏力、头晕、胃纳减退、恶心、呕吐、口中无味或变味、失眠或嗜睡等。个别患者可以发生血象改变，尤其是白细胞计数减少；（2）局部反应：包括皮肤、黏膜、唾液腺的反应；皮肤反应表现为干性皮炎甚或湿性皮炎，黏膜反应表现为鼻咽和口咽黏膜充血、水肿、渗出及分泌物积存等，少数患者腮腺照射2Gy后即可发生腮腺肿胀，当照射40Gy时，唾液分泌明显减少，同时口腔黏膜分泌增加，黏膜充血、红肿，患者口干，进干食困难；③放疗后退症：主要有颞颌关节功能障碍及软组织萎缩纤维化、放射性龋齿及放射性颌骨骨髓炎和放射性脑脊髓病，目前尚无逆转的妥善办法。

[0004] 而且，临床上患者就诊时大多已属中晚期，对于较低分化癌、病程较晚以及放疗后复发的病例，虽经手术、放疗和化疗等鼻咽癌正规手段治疗后，也会常常发生复发和转移。

发明内容

[0005] 本发明要解决的技术问题是克服现有鼻咽癌治疗技术的缺陷和不足，提供一种新的鼻咽癌治疗药物。本发明首次发现，阿西替尼和PX-478均能够显著抑制鼻咽癌细胞移植瘤的生长，对鼻咽癌具有显著的疗效，且两者联用实现了协同增效的作用，具有更显著的治疗效果，可应用于鼻咽癌的防治方面。

[0006] 本发明的目的是提供PX-478在制备治疗鼻咽癌药物方面的应用。

[0007] 本发明另一目的是提供阿西替尼和PX-478在制备治疗鼻咽癌药物方面的应用。

[0008] 本发明上述目的通过以下技术方案实现：

[0009] 本发明提供了PX-478在制备治疗鼻咽癌药物方面的应用。

[0010] 本发明还提供了阿西替尼和PX-478在制备治疗鼻咽癌药物方面的应用。

[0011] 具体优选地，所述治疗鼻咽癌药物是指抑制鼻咽癌生长的药物。

[0012] 更具体地，所述抑制鼻咽癌生长是指抑制鼻咽癌细胞的生长。

[0013] 另外，优选地，所述鼻咽癌为EBV阳性鼻咽癌。因为临床上98%以上的鼻咽癌患者均为EBV阳性，因此，本发明实验以EBV阳性鼻咽癌为例进行。

[0014] 本发明还提供了一种治疗鼻咽癌的药物，该药物含有PX-478。

[0015] 进一步有效地，该药物还含有阿西替尼。

[0016] 优选地，所述药物是指治疗EBV阳性鼻咽癌的药物。

[0017] 另外，该药物还可以包括医学上可接受的辅料或载体，制备成不同的剂型，或与其他药物选择进行复配。

[0018] 在本发明的联合用药方案中，阿西替尼是一种酪氨酸激酶靶向抑制剂，可以通过抑制血管内皮细胞生长因子受体(Vascular Endothelial Growth Factor Receptor，VEGFR) VEGFR1, VEGFR2, VEGFR3，抵制肿瘤传统新生血管生成。PX-478是一种具有口服活性的选择性HIF-1α抑制剂。两者联合使用是VM抵制剂与传统新生血管靶向药物联合应用，可以实现协同增效的作用，对鼻咽癌具有更加显著的治疗效果。

[0019] 本发明具有以下有益效果：

[0020] 本发明首次提供了阿西替尼和PX-478在治疗鼻咽癌方面的应用。本发明首次研究发现，阿西替尼和PX-478均能够显著抑制鼻咽癌细胞移植瘤的生长，对鼻咽癌具有显著的疗效，可应用于鼻咽癌的防治方面。

[0021] 同时，本发明还首次研究证明了，阿西替尼和PX-478联合用药实现了协同增效的作用，对鼻咽癌具有更显著的治疗效果。

[0022] 本发明不仅提供了阿西替尼和PX-478的新用途，也为鼻咽癌的治疗提供了新的治疗用药方案，在鼻咽癌的防治方面具有很好的应用前景。

附图说明

[0023] 图1为阿西替尼对血管内皮细胞成管的影响。

[0024] 图2为PX-478对EBV阳性鼻咽癌细胞VM的影响。

[0025] 图3为阿西替尼和PX-478对EBV阳性鼻咽癌细胞移植瘤大小的影响。

[0026] 图4为阿西替尼和PX-478对EBV阳性鼻咽癌细胞移植瘤影响的免疫组化结果。

具体实施方式

[0027] 以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

[0028] 除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。

[0029] 经过发明人团队多年的实践工作发现，临床上98%以上的鼻咽癌患者均为EBV阳性，因此，以下实施例实验以EBV阳性鼻咽癌为例进行呈现。

[0030] 实施例1 阿西替尼对血管内皮细胞成管的影响

[0031] 1、实验材料

[0032] （1）药物：阿西替尼（Axitinib），其化学式为：C22H18N4OS，CAS号为：319460-85-0[0033] （2）血管内皮细胞：人脐静脉内皮细胞（HUVEC）

[0034] （3）市购的matrigel基质胶。

[0035] 2、实验分组

[0036] （1）对照组：空白对照，即HUVEC不经过任何药物处理。

[0037] （2）实验组：使用阿西替尼处理HUVEC。

[0038] 3、血管形成实验检测阿西替尼对HUVEC成管的影响

[0039] （1）将Matrigel基质胶-20℃解冻后，取30μL平铺于96孔板中，放于37℃培养箱30min；

[0040] （2）将对数生长期的HUVEC细胞用胰酶消化后完全培养基重悬，取200μL（含5×104细胞）均匀铺到96孔板中的Matrigel基质胶上；

[0041] （3）加入1000nM浓度的阿西替尼，37℃培养箱孵育12h。

[0042] （4）倒置显微镜情况细胞成管情况。

[0043] 4、实验结果

[0044] 结果如图1所示，图1中显示用阿西替尼处理后，HUVEC的官腔明显缩小，表明阿西替尼能够抵制血管内皮细胞成管。

[0045] 实施例2 PX-478对EBV阳性鼻咽癌细胞VM的影响

[0046] 1、实验材料

[0047] （1）药物：PX-478，其化学式为：C13H20Cl4N2O3，CAS号为：685898-44-6[0048] （2）癌细胞：EBV阳性鼻咽癌细胞（HNE1-EBV、CNE2-EBV和TWO3-EBV）[0049] （3）市购的matrigel基质胶。

[0050] 2、实验分组

[0051] （1）对照组：空白对照，即癌细胞不经过任何药物处理。

[0052] （2）实验组：使用PX-478处理癌细胞。

[0053] 3、血管形成实验检测PX-478对EBV阳性鼻咽癌细胞VM的影响

[0054] （1）将Matrigel基质胶-20℃解冻后，取30μL平铺于96孔板中，放于37℃培养箱30min；

[0055] （2）将对数生长期的HNE1-EBV、CNE2-EBV和TWO3-EBV细胞用胰酶消化后完全培养基重悬，分别取200μL（含1×105以上三种细胞）均匀铺到96孔板中的Matrigel基质胶上；

[0056] （3）分别加入不同浓度的PX-478，37℃培养箱孵育12h。

[0057] （4）倒置显微镜情况细胞成管情况。

[0058] 4、实验结果

[0059] 结果如图2所示，用PX-478处理后，EBV阳性鼻咽癌细胞的管腔明显减少，表明PX-478能够抵制EBV阳性鼻咽癌细胞VM的形成。

[0060] 实施例3 阿西替尼联合PX-478对EBV阳性鼻咽癌细胞移植瘤的影响

[0061] 1、实验材料

[0062] （1）药物：阿西替尼（Axitinib）和PX-478

[0063] （2）癌细胞：EBV阳性鼻咽癌细胞（CNE2-EBV）

[0064] （3）市购的裸鼠。

[0065] 2、实验分组

[0066] （1）对照组：空白对照，即癌细胞不经过任何药物处理。

[0067] （2）阿西替尼组：使用阿西替尼处理EBV阳性鼻咽癌细胞。

[0068] （3）PX-478组：使用PX-478处理EBV阳性鼻咽癌细胞。

[0069] （4）阿西替尼+PX-478组：同时使用阿西替尼和PX-478PX-478处理EBV阳性鼻咽癌细胞。

[0070] 3、裸鼠皮下成瘤实验检测阿西替尼或/和PX-478对EBV阳性鼻咽癌细胞移植瘤的影响

[0071] （1）分别以5×106数值的EBV阳性鼻咽癌细胞（CNE2-EBV）植入40只3～4周龄NOD/SCID鼠腋窝皮下。随机分为4组： 空白对照组，阿西替尼组，PX-478组，阿西替尼+PX-478组。

[0072] （2）当皮下肿瘤大小达到100～200mm3时：阿西替尼组每只老鼠每天给予30mg/kg阿西替尼2次；PX-478组每只老鼠隔天给予5mg/kg PX-478 1次；阿西替尼+PX-478组每只老鼠每天给予30mg/kg阿西替尼2次，隔天给予5mg/kg PX-478 1次。

[0073] （3）每2天检测一次肿瘤大小，比较各组间肿瘤形成差异。

[0074] （4）2周后，短颈处死小鼠，切除肿瘤组织，中性福尔马林固定，石蜡包埋切片，行HE染色进行组织学检测，免疫组化实验检测标志物CD31、PAS的表达情况。

[0075] 4、实验结果

[0076] 结果如图3所示，阿西替尼和PX-478分别都能够抵制EBV阳性鼻咽癌细胞移植瘤的生长，阿西替尼和PX-478联用对EBV阳性鼻咽癌移植瘤具有更显著的治疗效果，实现了协同增效的作用。

[0077] 另外，如图4，免疫组化结果显示，阿西替尼主要抵制肿瘤组织中的CD31阳性血管内皮细胞形成血管，PX-478主要减少PAS阳性的肿瘤细胞形成血管拟态。阿西替尼和PX-478联用同时减少以上两种血管的形成，两者联用不会产生相互抑制等负面影响，实现了协同增效的作用。