乙莫克舍在治疗结直肠癌方面的应用

摘要

本发明公开了乙莫克舍在治疗结直肠癌方面的应用。具体是乙莫克舍在制备肠癌防治药物，尤其是抑制肠癌转移的药物方面的应用。本发明研究显示，乙莫克舍能够显著抑制结直肠癌细胞失巢下的克隆形成，促进结直肠癌细胞失巢凋亡，抑制结直肠癌细胞在体内的转移能力，对结直肠癌具有显著的治疗效果，尤其是抑制结直肠癌转移的效果显著，因此可用于结直肠癌转移的治疗。本发明不仅提供了乙莫克舍的一种新应用，拓展了乙莫克舍的临床应用领域，而且为结直肠癌转移的治疗提供了一种新的治疗途径，具有很好的推广应用前景。

权利要求

1.乙莫克舍在制备抑制结直肠癌转移的药物方面的应用，其特征在于，所述结直肠癌为ΙII到IV期结直肠癌。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述结直肠癌是指人结肠癌细胞HCT 15或人结肠腺癌细胞HCT116。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物是指能够促进结直肠癌细胞凋亡的药物。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物是指能够抑制结直肠癌细胞转移的药物。

说明书

乙莫克舍在治疗结直肠癌方面的应用

技术领域

[0001] 本发明属于医药技术领域。更具体地，涉及乙莫克舍在治疗结直肠癌方面的应用。

背景技术

[0002] 结直肠癌是世界范围内常见的胃肠道肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中居首位，是全球范围内致人死亡的主要病因之一，并且临床治疗存在很大的困难。

[0003] 结肠癌的发生率及死亡率较高，该领域的医生也同样为化疗中肿瘤耐药问题所困扰。据美国癌症协会估计，死于不同程度的耐药的肿瘤患者占90%以上，肿瘤的耐药问题已经成为肿瘤化疗成功与否的关键因素。指南推荐的一线化疗药物奥沙利铂，是最常用的化疗药物之一。然而其化学治疗效果仍然有待提高，很大部分原因也要归咎于因耐药而导致的复发和转移。

[0004] 乙莫克舍是一种肉毒碱棕榈酰基转移酶1A（CPT1A）的抑制剂，具有抑制脂肪酸氧化的作用，乙莫克舍最初被研究做为糖尿病治疗药物，同时也有临床试验证明乙莫克舍可以改善心衰的患者的左室射血分数、心输出量和临床症状。

发明内容

[0005] 本发明要解决的技术问题是克服现有结直肠癌治疗药物的缺陷和不足以及乙莫克舍的应用局限，提供一种新的治疗结直肠癌的药物，即乙莫克舍在结直肠癌治疗方面的新应用。

[0006] 本发明的目的是提供乙莫克舍在制备结直肠癌治疗药物方面的应用。

[0007] 本发明上述目的通过以下技术方案实现：

[0008] 本发明研究显示，乙莫克舍能够显著抑制结直肠癌细胞失巢下的克隆形成，促进结直肠癌细胞失巢凋亡，抑制结直肠癌细胞在体内的转移能力，对结直肠癌具有显著的治疗效果，尤其是抑制结直肠癌转移的效果显著，因此可用于结直肠癌转移的治疗。

[0009] 因此，乙莫克舍在制备肠癌防治药物方面的应用，以及在制备抑制肠癌转移的药物方面的应用，均应在本发明的保护范围之内。

[0010] 具体优选地，所述肠癌为结直肠癌。

[0011] 更优选地，所述结直肠癌为ΙII到IV期结直肠癌。

[0012] 更优选地，所述结直肠癌是指人结肠癌细胞HCT 15或人结肠腺癌细胞HCT116。

[0013] 另外，上述药物是指能够抑制结直肠癌细胞存活和/或生长的药物。具体是抑制结直肠癌细胞失巢下的克隆形成。

[0014] 上述药物还可是指能够促进结直肠癌细胞凋亡的药物。具体是促进结直肠癌细胞失巢凋亡。

[0015] 上述药物还可是指能够抑制结直肠癌细胞转移的药物。即抑制结直肠癌细胞在体内的转移能力的药物。

[0016] 另外，包含有乙莫克舍和药学上可接受的载体的治疗结直肠癌的药物或抑制结直肠癌转移的药物，也应在本发明的保护范围之内。

[0017] 进一步的，所述药物还可以包括其药学上可接受的载体等。

[0018] 本发明具有以下有益效果：

[0019] 本发明提供了乙莫克舍的一种新应用，即应用于治疗结直肠癌，尤其是抑制结直肠癌转移，乙莫克舍能够显著抑制结直肠癌细胞失巢下的克隆形成，促进结直肠癌细胞失巢凋亡，抑制结直肠癌细胞在体内的转移能力，对结直肠癌转移具有显著的疗效，可应用于结直肠癌转移的治疗方面。

[0020] 本发明不仅为结直肠癌转移的治疗提供了一种新的治疗药物和治疗途径，还为乙莫克舍的应用提供了新的领域。

附图说明

[0021] 图1为乙莫克舍对结直肠癌细胞软琼脂克隆形成的影响。

[0022] 图2为乙莫克舍对结直肠癌细胞失巢凋亡的影响。

[0023] 图3为乙莫克舍对结直肠癌细胞裸鼠体内肺转移的影响。

[0024] 图4为乙莫克舍对裸鼠体重的影响。

具体实施方式

[0025] 以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

[0026] 除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。

[0027] 实施例1 乙莫克舍对结直肠癌细胞软琼脂克隆形成的影响

[0028] 1、实验材料

[0029] （1）药物：乙莫克舍。

[0030] （2）结直肠癌细胞：人结肠癌细胞HCT 15和人结肠腺癌细胞HCT116。

[0031] （3）市购的软琼脂。

[0032] 2、实验分组

[0033] （1）对照组：空白对照，即癌细胞不经过任何药物处理。

[0034] （2）实验组：使用乙莫克舍处理癌细胞。

[0035] 3、软琼脂克隆形成实验检测乙莫克舍对结直肠癌细胞克隆形成的影响[0036] （1）在六孔板中铺好软琼脂，再加入结直肠癌细胞，待其凝固后，加入DMSO（即对照）及50μM、100μM的乙莫克舍处理细胞3周，然后通过显微镜观察细胞克隆形成情况。

[0037] 具体方法如下：

[0038] 1）将1.4%的琼脂糖高温高压灭菌后，与2×1640培养基混合，加入6孔板中，每孔2mL。

[0039] 2）将0.7%的琼脂糖高温高压灭菌后，与2×1640培养基混合，将对数生长期的HCT 4
15和HCT116细胞用胰酶消化后，取4×10 细胞用混合后的培养基重悬，均匀铺在凝固后的琼脂糖培养基上。

[0040] 3）在最上方加入1mL1640培养基，培养基中分别加入DMSO（即对照）及50μM、100μM的乙莫克舍，每隔3天换液1次。

[0041] 4）3周后，显微镜下观察克隆形成情况，并拍照统计克隆个数。

[0042] （2）实验结果

[0043] 结果如图1所示，使用乙莫克舍处理后，结直肠癌细胞在软琼脂中形成的克隆明显减少，表明乙莫克舍能够抑制结直肠癌细胞失巢下的存活和生长。

[0044] 实施例2 乙莫克舍对结直肠癌细胞失巢凋亡的影响

[0045] 1、实验材料

[0046] （1）药物：同实施例1。

[0047] （2）癌细胞：同实施例1。

[0048] （3）市购的细胞凋亡试剂盒。

[0049] 2、通过流式细胞术检测乙莫克舍处理后HCT15和HCT116细胞的失巢凋亡情况[0050] （1）在低黏附6孔板中铺好结直肠癌细胞，加入含有DMSO（即对照）及50μM、100μM的乙莫克舍的培养基处理细胞，然后在72h后通过细胞凋亡试剂盒检测失巢凋亡的情况。

[0051] 具体方法如下：

[0052] 1）将对数生长期的HCT15和HCT116细胞用胰酶消化后，取1×106细胞铺到低黏附6孔板中。

[0053] 2）加入含有DMSO（即对照）及50μM、100μM的乙莫克舍的培养基处理细胞。

[0054] 3）72h后收集细胞，胰酶消化后根据凋亡检测试剂盒的方法处理细胞，Annexin V和PI染色完成之后通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况。

[0055] （2）实验结果

[0056] 结果如图2所示，图2中显示的百分比为Annexin V阳性（即发生凋亡的细胞）比例。结直肠癌细胞经过乙莫克舍处理后，失巢凋亡明显增加，表明乙莫克舍可以显著促进结直肠癌细胞失巢凋亡。

[0057] 实施例3 乙莫克舍对结直肠癌细胞转移及裸鼠体重的影响

[0058] 1、实验材料

[0059] （1）药物：同实施例1。

[0060] （2）结直肠细胞：同实施例1。

[0061] （3）市购的裸鼠。

[0062] 2、通过尾静脉注射的转移裸鼠模型检测乙莫克舍处理后，对HCT15和HCT116细胞体内转移的影响

[0063] （1）尾静脉注射HCT15和HCT116细胞构建结直肠癌的裸鼠转移模型，用40mg/kg的乙莫克舍处理细胞，检测乙莫克舍对结直肠癌细胞体内转移的影响。

[0064] 具体方法如下：

[0065] 1）将对数生长期的HCT15和HCT 116细胞用胰酶消化后，取2×106细胞用100微升PBS重悬。

[0066] 2）将2×106的HCT15和HCT116细胞注射至裸鼠的尾静脉。

[0067] 3）第2天开始，将40mg/kg的乙莫克舍注射至裸鼠腹腔，隔天注射一次。

[0068] 4）每隔一周对裸鼠进行称重。

[0069] 5）8周后，对裸鼠实施安乐死，取出裸鼠肺脏，多聚甲醛溶液固定，切片后HE染色，显微镜下拍照并统计肺转移结节个数。

[0070] （2）实验结果

[0071] 结果如图3和图4所示，结直肠癌细胞裸鼠转移模型中，经过乙莫克舍处理后，肺转移结节个数明显下降，而裸鼠体重无明显变化，表明乙莫克舍可以显著地抑制结直肠癌细胞在体内的转移能力并对裸鼠体重无明显影响。

[0072] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。