一种银杏叶提取物的制备方法及其在卷烟中的应用

摘要

本发明提供了一种银杏叶提取物的制备方法及其在卷烟中的应用，包括如下步骤：(1)将新鲜银杏叶清洗沥干切片备用，采用乙醇溶液微波萃取浸提，过滤后收集滤液，得到银杏叶提取液A。(2)收集步骤(1)中的银杏叶残渣，加水和生物制剂，水解发酵，向水解发酵液中加入乙醇恒温回流提取，过滤后得到银杏叶提取液B。(3)将银杏叶提取液A和银杏叶提取液B合并后，经减压浓缩后得到银杏叶提取物。本发明制备的烟用银杏叶提取物，具有银杏叶特有的药草香气特征，将其作为添加剂应用于卷烟中，与烟香协调，丰富卷烟香气量，有效解决了常规浸提工艺容易带来刺激性大、口腔残留较多的负面问题，具有清除卷烟主流烟气中自由基含量的作用。

权利要求

1.一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将新鲜银杏叶清洗沥干水分后，切片备用，然后将片状银杏叶与质量浓度为30-

60％的乙醇溶液按照1:5-10的质量比例混合后，放入微波萃取设备中进行浸提，微波功率设为350～700W，系统温度设为在10～30min内从室温升至50～65℃，处理0.5h～1h后，过滤后收集滤液，得到银杏叶提取液A；

(2)收集步骤(1)中的银杏叶残渣，加入2-5倍质量的水，按银杏叶残渣0.1-0.5％的质量比例添加生物制剂，搅拌均匀后，在pH4-6、温度30-50℃条件下温育水解发酵6-18h，得到水解发酵液，向水解发酵液中加入食品级95％乙醇，在60-80℃恒温水浴回流提取1-3次，过滤后合并滤液，得到银杏叶提取液B；

(3)将银杏叶提取液A和银杏叶提取液B合并后，减压浓缩为原体积的1/4，向体系中加入5-8质量倍数的水，搅拌均匀后，静置6-12h，取上清液过滤后减压浓缩至原体积的1/5-1/

3，得到银杏叶提取物。

2.根据权利要求1所述的一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中的生物制剂是β-葡萄糖苷酶和纤维素酶中的任意一种或两种组合与枯草芽孢杆菌活菌制剂组成的复配制剂。

3.根据权利要求2所述的一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)的生物制剂中β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、枯草芽孢杆菌活菌制剂的复配比例为1-2：1-2：0.2-

1。

4.根据权利要求2所述的一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中的β-葡萄糖苷酶和纤维素酶的酶活均为5-20万u/g，枯草芽孢杆菌活菌制剂中含枯草芽孢杆菌活菌数不低于1.0*108CFU/g。

5.根据权利要求1所述的一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中添加食品级95％乙醇的量使恒温水浴提取的溶液中乙醇的质量浓度为30-60％。

6.根据权利要求1-5任一项所述方法制备的银杏叶提取物的在卷烟中的应用，其特征在于：所述银杏叶提取物作为天然烟用添加剂加入到卷烟中，添加比例为烟丝质量的

0.1％-0.3％，具体步骤为：先把银杏叶提取物溶于乙醇中，把溶有提取物的乙醇溶液均匀喷洒在烟丝上，随后乙醇蒸发掉，烟丝经高速卷烟机卷制成烟支样品。

说明书

一种银杏叶提取物的制备方法及其在卷烟中的应用

技术领域

[0001] 本发明涉及卷烟香精香料领域，具体地说是一种银杏叶提取物的制备方法及其在卷烟中的应用。

背景技术

[0002] 银杏(又名公孙树、白果)系裸子植物门银杏科植物，是当今地球上最古老的树种之一。银杏有“植物界的大熊猫”之美称，是研究古代地球地质深变的“活化石”，已被国家列为二级珍稀保护树种。我国银杏资源拥有量占世界总量的75％左右，居世界首位。国内大部分地区的银杏为人工栽培，主要分布在湖北、浙江、安徽、福建、河南、四川等省市。湖北随州一带的深山之中生长着成千上万颗古老的银杏树，是世界四大密集成片的古银杏群落之一。

[0003] 卷烟燃烧时会产生高浓度的自由基，这些自由基可以直接或间接攻击、损伤细胞和酶等物质，与DNA结合使细胞转化而产生突变。因此研究烟气自由基，开发高效无毒的自由基清除剂，对于降低卷烟吸食危害，缓解吸烟与健康之间的矛盾具有十分重要的意义。目前，采用植物添加剂来降低烟气自由基的研究已不少，如已报道的罗布麻、茶多酚、甘草素、叶黄素等作为卷烟添加剂都具有降自由基的功效，其降低幅度为7％-20％左右。这些植物添加剂的添加工艺大多都是做成微胶囊的形式加入到滤嘴中，工艺复杂。这主要是因为，首先，绝大多数植物添加剂都是脂溶的，直接喷洒在烟丝中工艺上有困难；其次这些植物添加剂添加到烟丝中，会改变卷烟的吸味，甚至带来十分不好的影响。能降低自由基的天然植物有很多，可是能够同时降低卷烟自由基，又能给卷烟吸味带来良好正面作用的却很少。目前已报道的降卷烟自由基的天然植物虽然很多，但是真正将其用于工业化生产、带来直接显著经济效益的却几乎没有，其关键原因就是无法解决植物添加剂对卷烟吸味的负面作用。

[0004] 银杏叶作为一种中草药，具有多种生物活性和药用价值，例如抗氧化、清除人体自由基、改善血液流量、增加脑供血等功效。银杏叶主要药用成分为黄酮类和内酯类化合物(含量大于24.0％)，目前已发现的黄酮化合物有芦丁、黄芪、异槲皮素、山萘酚等，内酯类化合物有银杏内酯和白果内酯，能赋予独特的药草气味，具有作为烟用香精香料的前景。

[0005] 近年来，天然植物香料在提高卷烟舒适性和凸显卷烟风格特征方面的作用得到了烟草科技人员和消费者的广泛认可。目前文献资料报道的研究成果中银杏叶多被用于医药领域。本发明人在研究过程中发现:简单的通过溶剂浸提工艺所得到的银杏叶提取物，由于浸提温度较高，部分酮类、酯类易挥发性成分容易发生氧化分解，导致香气损失，产品的特征香气不明显，天然感不够理想，添加到卷烟中容易带来刺激性大、口腔残留较多等负面作用，无法满足作为烟草制品添加剂的使用要求。

发明内容

[0006] 本发明的目的是根据现有技术的不足，提供一种银杏叶提取物的制备方法及其在卷烟中的应用，本发明制备的提取物具有银杏叶特有的药草香气特征，香韵自然、协调，香味的天然感较强，将其作为添加剂应用于卷烟中，个性化香韵突出，与烟香协调，丰富卷烟香气量,提升香气质，余味舒适，口腔干净，烟气柔和细腻，有效解决了常规浸提工艺容易带来刺激性大、口腔残留较多的负面问题，同时能够清除卷烟主流烟气中自由基含量。

[0007] 为实现上述目的，本发明提供的一种银杏叶提取物的制备方法及其在卷烟中的应用，它包括如下步骤：

[0008] (1)将新鲜银杏叶清洗沥干水分后，切片备用，然后将片状银杏叶与30-60％的乙醇溶液按照1:5-10的质量比例混合后，放入微波萃取设备中进行浸提，微波功率设为350～700W，系统温度设为在10～30min内从室温升至50～65℃，处理0.5h～1h后，过滤后收集滤液，得到银杏叶提取液A。

[0009] (2)收集步骤(1)中的银杏叶残渣，加入2-5倍质量的水,添加0.1-0.5％质量比例的生物制剂，搅拌均匀后，在pH4-6、温度30-50℃条件下温育水解发酵6-18h，得到水解发酵液。向水解发酵液中加入食品级95％乙醇(体系中酒精浓度为30-60％)，在60-80℃恒温水浴回流提取1-3次，过滤后合并滤液，得到银杏叶提取液B。

[0010] (3)将银杏叶提取液A和银杏叶提取液B合并后，减压浓缩为原体积的1/4。向体系中加入5-8倍的水，搅拌均匀后，静置6-12h，取上清液过滤后减压浓缩至原体积的1/5-1/3，即为本发明所述的银杏叶提取物。

[0011] 所述新鲜银杏叶来源于湖北随州洛阳镇银杏谷。

[0012] 所述步骤(2)中的生物制剂是指β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、枯草芽孢杆菌活菌制剂中的一种或几种。

[0013] 所述步骤(2)中的生物制剂为两种或两种以上复配时，β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、枯草芽孢杆菌活菌制剂的复配比例为1-2：1-2：0.2-1。

[0014] 所述β-葡萄糖苷酶和纤维素酶的酶活为5-20万u/g，枯草芽孢杆菌活菌制剂中含枯草芽孢杆菌活菌数不低于1.0*108CFU/g。

[0015] 本发明提供另一种技术方案：所述一种使用上述方法制备的银杏叶提取物的应用，其特征在于：所述银杏叶提取物作为天然烟用添加剂加入到卷烟中，添加比例为烟丝质量的0.1％-0.3％。

[0016] 所述银杏叶提取物加入卷烟烟丝的具体步骤为：将银杏叶提取物溶于质量浓度为70％的乙醇中，将溶有银杏叶提取物的乙醇溶剂在烟支生产卷制过程中喷洒在烟丝上，随后蒸发溶剂。

[0017] 本发明的优点在于：

[0018] (1)市售银杏叶一般为干燥后的中药材，银杏叶在干燥、炮制过程中往往会有香气成分挥发损失，本发明选用新鲜银杏叶作为提取原料具有一定的原料优势。

[0019] (2)微波萃取工艺具有低温提取、浸提效率高的技术优势，减少了酮类、酯类等易挥发性香味成分的氧化分解，有效避免了香气损失。

[0020] (3)本发明利用生物制剂对银杏叶残渣进行水解发酵，将大分子物质降解成可利用的小分子物质，并产生乳酸等有机酸类，提高了原料的综合利用率，避免了资源浪费。

[0021] (4)本发明制备的提取物具有银杏叶特有的药草香气特征，香韵自然、协调，香味的天然感较强，将其作为添加剂应用于卷烟中，个性化香韵突出，与烟香协调，丰富卷烟香气量,提升香气质，余味舒适，口腔干净，烟气柔和细腻，有效解决了常规浸提工艺容易带来刺激性大、口腔残留较多的负面问题，同时具有清除卷烟主流烟气中自由基含量的作用。

[0022] (5)本发明具有操作简单、易于控制、原料成本低等特点，适合于实际生产转化，适合作为一种制备烟用香料的方法进行推广应用。

具体实施方式

[0023] 以下结合具体实施例对本发明作进一步的详细描述。

[0024] 实施例一

[0025] (1)将新鲜银杏叶清洗沥干水分后，切片备用，然后将片状银杏叶与60％的乙醇溶液按照1:10的比例混合后，放入微波萃取设备中进行浸提，微波功率设为550W，系统温度设为在10～30min内从室温升至50～65℃，处理0.5h后，过滤后收集滤液，得到银杏叶提取液A。

[0026] (2)收集步骤(1)中的银杏叶残渣，加入5倍质量的水,添加0.5％质量比例的生物制剂(β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、枯草芽孢杆菌活菌制剂的复配比例为1：1：0.5)，搅拌均匀后，在pH4、温度30℃条件下温育水解发酵6h，得到水解发酵液。向水解发酵液中加入食品级95％乙醇(体系中酒精浓度为50％)，在60℃恒温水浴回流提取3次，过滤后合并滤液，得到银杏叶提取液B。

[0027] (3)将银杏叶提取液A和银杏叶提取液B合并后，减压浓缩为原体积的1/4。向体系中加入8倍的水，搅拌均匀后，静置10h，取上清液过滤后减压浓缩至原体积的1/3，即为本发明所述的银杏叶提取物。

[0028] 实施例二

[0029] (1)将新鲜银杏叶清洗沥干水分后，切片备用，然后将片状银杏叶与30％的乙醇溶液按照1:8的比例混合后，放入微波萃取设备中进行浸提，微波功率设为350W，系统温度设为在10～30min内从室温升至50～65℃，处理1h后，过滤后收集滤液，得到银杏叶提取液A。

[0030] (2)收集步骤(1)中的银杏叶残渣，加入4倍质量的水,添加0.1％质量比例的生物制剂(β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、枯草芽孢杆菌活菌制剂的复配比例为1：1：1)，搅拌均匀后，在pH6、温度50℃条件下温育水解发酵12h，得到水解发酵液。向水解发酵液中加入食品级95％乙醇(体系中酒精浓度为40％)，在65℃恒温水浴回流提取2次，过滤后合并滤液，得到银杏叶提取液B。

[0031] (3)将银杏叶提取液A和银杏叶提取液B合并后，减压浓缩为原体积的1/4。向体系中加入5倍的水，搅拌均匀后，静置8h，取上清液过滤后减压浓缩至原体积的1/4，即为本发明所述的银杏叶提取物。

[0032] 实施例三

[0033] (1)将新鲜银杏叶清洗沥干水分后，切片备用，然后将片状银杏叶与45％的乙醇溶液按照1:6的比例混合后，放入微波萃取设备中进行浸提，微波功率设为450W，系统温度设为在10～30min内从室温升至50～65℃，处理0.7h后，过滤后收集滤液，得到银杏叶提取液A。

[0034] (2)收集步骤(1)中的银杏叶残渣，加入3倍质量的水,添加0.3％质量比例的生物制剂(β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、枯草芽孢杆菌活菌制剂的复配比例为1：2：0.5)，搅拌均匀后，在pH5.5、温度35℃条件下温育水解发酵9h，得到水解发酵液。向水解发酵液中加入食品级95％乙醇(体系中酒精浓度为35％)，在70℃恒温水浴回流提取3次，过滤后合并滤液，得到银杏叶提取液B。

[0035] (3)将银杏叶提取液A和银杏叶提取液B合并后，减压浓缩为原体积的1/4。向体系中加入7倍的水，搅拌均匀后，静置7h，取上清液过滤后减压浓缩至原体积的1/3，即为本发明所述的银杏叶提取物。

[0036] 实施例四

[0037] (1)将新鲜银杏叶清洗沥干水分后，切片备用，然后将片状银杏叶与55％的乙醇溶液按照1:8的比例混合后，放入微波萃取设备中进行浸提，微波功率设为650W，系统温度设为在10～30min内从室温升至50～65℃，处理0.8h后，过滤后收集滤液，得到银杏叶提取液A。

[0038] (2)收集步骤(1)中的银杏叶残渣，加入4倍质量的水,添加0.4％质量比例的生物制剂(β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、枯草芽孢杆菌活菌制剂的复配比例为1：1：0.4)，搅拌均匀后，在pH4.5、温度40℃条件下温育水解发酵16h，得到水解发酵液。向水解发酵液中加入食品级95％乙醇(体系中酒精浓度为50％)，在75℃恒温水浴回流提取2次，过滤后合并滤液，得到银杏叶提取液B。

[0039] (3)将银杏叶提取液A和银杏叶提取液B合并后，减压浓缩为原体积的1/4。向体系中加入8倍的水，搅拌均匀后，静置10h，取上清液过滤后减压浓缩至原体积的1/5，即为本发明所述的银杏叶提取物。

[0040] 应用试验

[0041] 在卷烟生产的烟丝卷制过程中，将银杏叶提取物添加到烟丝中，银杏叶提取物占烟丝重量的0.2％。具体方法是先把银杏叶提取物溶于乙醇中，把溶有提取物的乙醇溶液均匀喷洒在烟丝上，随后乙醇蒸发掉，烟丝经高速卷烟机卷制成烟支样品。与未添加提取物的空白烟作为对照，参照国家局评吸标准进行评价。评吸小组由13名卷烟感官评价专家组成，采用暗评方式进行感官评价并打分，感官评价结果如表1所示。

[0042] 表1卷烟感官效果评价结果

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[0044]

[0045] 采用烟气收集器和电子自旋共振波谱法，分析检测添加银杏叶提取物后对卷烟主流烟气自由基含量的清除效果，结果如表2所示。

[0046] 表2银杏叶提取物对卷烟主流烟气自由基含量的清除效果

[0047]

[0048] 注：+，自由基含量升高；-，自由基含量降低

[0049] 添加银杏叶提取物后，卷烟的感官效果评价得分明显提高，应用效果较为显著，个性化香韵突出，香味浓郁饱满、纯正舒适，留香持久,余味干净舒适，烟气柔和细腻,且加香效果稳定；同时在卷烟燃吸过程中具有清除卷烟主流烟气中自由基含量的功效。

[0050] 以上所述仅为本发明的具体实施方案的详细描述，并不以此限制本发明，凡在本发明的设计思路上所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。