一种果蝇翅芽自动免疫组化装置

摘要

一种果蝇翅芽自动免疫组化装置，涉及生物组织抗体或荧光染料染色设备。本发明解决现有果蝇翅芽免疫组化实验人工操作，耗时费力的技术问题。本发明包括载玻片、盖玻片、一抗储液罐、二抗储液罐、PBT缓冲溶液储液罐、甲醛固定液储液罐、进液管、出液管、若干连接管和废液罐；所述载玻片设有矩形培养腔，所述盖玻片设在矩形培养腔上方，所述矩形培养腔一侧侧壁设有若干培养腔进液口，所述矩形培养腔另一侧侧壁设有若干培养腔出液口。本发明采用特制的载玻片，适用于较薄生物组织的免疫组化染色实验，可以自动完成免疫组化流程，精准地控制每一步染色和洗涤的时间，节省时间和精力，保证了实验的质量。

权利要求

1.一种果蝇翅芽自动免疫组化装置，其特征在于：包括载玻片（1）、盖玻片（2）、一抗储液罐（10）、二抗储液罐（11）、PBT缓冲溶液储液罐（12）、甲醛固定液储液罐（13）、进液管（4）、出液管（5）、若干连接管（3）和废液罐（6）；

所述载玻片（1）设有矩形孵育腔（7），所述盖玻片（2）设在矩形孵育腔（7）上方，所述矩形孵育腔（7）一侧侧壁上设有若干孵育腔进液口（8），所述矩形孵育腔（7）另一侧侧壁上设有若干孵育腔出液口（9）；

所述一抗储液罐（10）、二抗储液罐（11）、PBT缓冲溶液储液罐（12）和甲醛固定液储液罐（13）设在载玻片（1）一侧上方，所述废液罐（6）设在载玻片（1）另一侧下方，所述一抗储液罐（10）、二抗储液罐（11）、PBT缓冲溶液储液罐（12）、甲醛固定液储液罐（13）的出口分别通过连接管（3）与进液管（4）连接，所述进液管（4）通过若干孵育腔进液口（8）与矩形孵育腔（7）连接；所述若干孵育腔出液口（9）通过出液管（5）与废液罐（6）连接；

所述一抗储液罐（10）、二抗储液罐（11）、PBT缓冲溶液储液罐（12）、甲醛固定液储液罐（13）与进液管（4）之间的连接管（3）上均设有由单片机控制模块控制的微型液体控制阀（14），所述出液管（5）上设有由单片机控制模块控制的抽液泵（15）；

所述一抗储液罐（10）、二抗储液罐（12）上设有由单片机控制模块控制的低温控制装置， 所述载玻片（1）上设有检测矩形孵育腔（7）温度的红外测温探头（16）。

2.根据权利要求1所述的一种果蝇翅芽自动免疫组化装置，其特征在于：所述孵育腔进液口（8）有2～5个；所述孵育腔出液口（9）与孵育腔进液口（8）的数量一致。

说明书

一种果蝇翅芽自动免疫组化装置

技术领域

[0001] 本发明属于生物组织培养抗体或荧光染料染色设备技术领域，特别涉及一种果蝇翅芽自动免疫组化装置。

背景技术

[0002] 免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂荧光素、酶、金属离子、同位素显色来确定组织细胞内抗原多肽和蛋白质，对其进行定位、定性及定量的研究。

[0003] 果蝇翅芽的免疫组化实验包括很多步骤，主要步骤有：将果蝇幼虫解剖，翅芽组织在甲醛固定液中固定40～60分钟，然后洗固定液1个小时；再将组织置于一定浓度的一抗中，在低温(4～6℃)下孵育8～12小时，然后洗涤一抗；加入二抗染色1小时，洗涤二抗。整个流程不仅步骤繁琐，而且每隔一定的时间，需要人工加样和换洗液体，耗费时间和精力，如果某些步骤错过加样时间或是染色时间过长，都会影响最终的免疫组化效果。

发明内容

[0004] 本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种果蝇翅芽自动免疫组化装置，解决现有果蝇翅芽免疫组化实验人工操作，耗时费力的技术问题。

[0005] 本发明是通过以下技术方案实现的：

[0006] 一种果蝇翅芽自动免疫组化装置，其中：包括载玻片、盖玻片、一抗储液罐、二抗储液罐、PBT缓冲溶液储液罐、甲醛固定液储液罐、进液管、出液管、若干连接管和废液罐；

[0007] 所述载玻片设有矩形孵育腔，所述盖玻片设在矩形孵育腔上方，所述矩形孵育腔一侧侧壁上设有若干孵育腔进液口，所述矩形孵育腔另一侧侧壁上设有若干孵育腔出液口；

[0008] 所述一抗储液罐、二抗储液罐、PBT缓冲溶液储液罐和甲醛固定液储液罐设在载玻片一侧上方，所述废液罐设在载玻片另一侧下方，所述一抗储液罐、二抗储液罐、PBT缓冲溶液储液罐、甲醛固定液储液罐的出口分别通过连接管与进液管连接，所述进液管通过若干孵育腔进液口与矩形孵育腔连接；所述若干孵育腔出液口通过出液管与废液罐连接；

[0009] 所述一抗储液罐、二抗储液罐、PBT缓冲溶液储液罐、甲醛固定液储液罐与进液管之间的连接管上均设有由单片机控制模块控制的微型液体控制阀，所述出液管上设有由单片机控制模块控制的抽液泵；

[0010] 所述一抗储液罐、二抗储液罐以及孵育腔上设有由单片机控制模块控制的温度控制装置，所述载玻片上设有检测矩形孵育腔温度的红外测温探头。

[0011] 进一步，所述孵育腔进液口有2～5个；所述孵育腔出液口与孵育腔进液口的数量一致。

[0012] 本发明中的盖玻片可实现矩形孵育腔的密封，避免外界微生物侵染孵育液；所述一抗储液罐、二抗储液罐、PBT缓冲溶液储液罐、甲醛固定液储液罐、连接管、微型液体控制阀、进液管、出液管和废液罐的设置，可根据需要对矩形孵育腔内的孵育液进行更换，特别是在甲醛固定液、一抗、二抗、PBT缓冲溶液、储液罐与进液管之间设置了微型液体控制阀，并在出液管上置了抽液泵，可实现自动操作；一抗、二抗储液罐上低温控制装置的设置，载玻片上设有红外测温探头，确保翅芽组织一抗染色时在低温下孵育。

[0013] 本发明采用特制的载玻片，适用于较薄生物组织的免疫组化染色实验，可以自动完成免疫组化流程，精准地控制每一步染色和洗涤的时间，节省时间和精力，保证了实验的质量。

附图说明

[0014] 图1是一种果蝇翅芽自动免疫组化装置的结构示意图；

[0015] 图2是载玻片、盖玻片的结构示意图；

[0016] 图3是图2的俯视图；

[0017] 图4是单片机控制电路原理框图。

具体实施方式

[0018] 下面结合附图和实施例对本发明作进一步的详细描述。

[0019] 如图1至图3所示，本实施例中的一种果蝇翅芽自动免疫组化装置，包括载玻片1、盖玻片2、一抗储液罐10、二抗储液罐11、PBT缓冲溶液储液罐12、甲醛固定液储液罐13、进液管4、出液管5、若干连接管3和废液罐6；

[0020] 所述载玻片1设有矩形孵育腔7，所述盖玻片2设在矩形孵育腔7上方，所述矩形孵育腔7一侧侧壁上设有若干孵育腔进液口8，所述矩形孵育腔7另一侧侧壁上设有若干孵育腔出液口9；

[0021] 所述一抗储液罐10、二抗储液罐11、PBT缓冲溶液储液罐12和甲醛固定液储液罐13设在载玻片1一侧上方，所述废液罐6设在载玻片1另一侧下方，所述一抗储液罐10、二抗储液罐11、PBT缓冲溶液储液罐12、甲醛固定液储液罐13的出口分别通过连接管3与进液管4连接，所述进液管4通过若干孵育腔进液口8与矩形孵育腔7连接；所述若干孵育腔出液口9通过出液管5与废液罐6连接；

[0022] 所述一抗储液罐10、二抗储液罐11、PBT缓冲溶液储液罐12、甲醛固定液储液罐13与进液管4之间的连接管3上均设有由单片机控制模块控制的微型液体控制阀14，所述出液管5上设有由单片机控制模块控制的抽液泵15。

[0023] 所述一抗储液罐、二抗储液罐上设有由单片机控制模块控制的低温控制装置，所述载玻片1上设有红外测温探头16，检测矩形孵育腔7的温度。

[0024] 所述孵育腔进液口有2～5个(本实施例为2个)；所述孵育腔出液口与孵育腔进液口的数量一致。

[0025] 如图4所示，所述一抗储液罐10、二抗储液罐11、PBT缓冲溶液储液罐12、甲醛固定液储液罐13与进液管4之间的连接管3上设置的微型液体控制阀14和抽液泵15，均与单片机控制模块连接，从而实现操作自动化。

[0026] 如图4所示，所述红外测温探头16与单片机控制模块连接，实时测量载玻片孵育腔内的温度，所述一抗储液罐10、二抗储液罐11的低温控制装置与单片机控制模块连接，红外测温探头所测数据反馈给单片机，单片机再控制一抗储液罐10、二抗储液罐11的低温控制装置，从而确保在一抗溶液孵育时，孵育腔的温度为4～6℃，其他染色步骤，孵育腔的温度均控制在室温。

[0027] 本发明的使用过程：

[0028] 使用时，将在磷酸缓冲液中解剖下来的翅芽转移到矩形孵育腔7内，盖上盖玻片2，并用中性树脂或凡士林将盖玻片2四周密封；

[0029] 通过单片机控制电路：

[0030] 首先打开甲醛固定液储液罐13下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，确保载玻片储液槽充满固定液后，关闭甲醛固定液储液罐13下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，固定40～60min；

[0031] 然后，开启PBT缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，缓冲液持续清洗甲醛固定液1～1.5h后，关闭PBT缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15；

[0032] 同时开启一抗储液罐10下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，确保一抗低温溶液充满载玻片储液槽并充分浸泡翅芽组织后，关闭一抗储液罐10下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，低温孵育8～12h。

[0033] 再次开启PBT缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，缓冲液持续清洗一抗溶液1～1.5h后，关闭PBT缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15；

[0034] 同时开启二抗储液罐11下方连接管上的微型液体控制阀14和出液管5上的抽液泵15，确保二抗低温溶液充满载玻片储液槽并充分浸泡翅芽组织后，关闭二抗储液罐10下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，低温孵育1～1.2h。

[0035] 最后开启PBT缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和出液管5上的抽液泵15，缓冲液持续清洗二抗溶液1～1.5h后，关闭PBT缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，完成实验。

[0036] 实验完成后，将载玻片直接放置荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下拍照。

[0037] 所述盖玻片在盖住孵育腔，并用中性树脂等粘合剂密封四周之后，孵育腔，孵育腔进液口，孵育腔出液口以及相连的进液管，出液管形成密闭的空间，以便抽液泵可以将孵育腔内的液体抽走。

[0038] 本发明能够以多种形式具体实施而不脱离发明的精神或实质，所以应当理解，上述实施例不限于前述的细节，而应在权利要求所限定的范围内广泛地解释，因此落入权利要求或其等效范围内的变化和改型都应为权利要求所涵盖。