防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂、制备方法及其应用

摘要

本发明涉及药物制剂领域，公开了一种防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂、其制备方法及应用，该制剂包括载药丸芯，在载药丸芯的外部依次包裹时滞内层以及pH依赖外层，且载药丸芯包含具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位。本发明所公开的口服结肠定位制剂的制备方法包括制备载药丸芯、制备时滞内层和制备pH依赖外层三个步骤。本发明实施方式相对于现有技术而言，该制剂通过在载药丸芯上依次包覆时滞内层以及pH依赖外层，使得结肠定位制剂靶向性强、稳定性好，从而达到防治结肠癌转移的目的。且该制剂服用方便、药物副作用小。

权利要求

1.一种防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂，其特征在于，由载药丸芯及依次包裹于所述载药丸芯的外部的时滞内层、pH依赖外层组成，其中：所述载药丸芯中的原料药为从夏枯草中分离获得的夏枯草抗结肠癌活性组分；所述载药丸芯中的原料药的含量为所述载药丸芯重量的10% 40%；

~

所述时滞内层由时滞性包衣材料、增塑剂以及润滑剂组成；所述时滞内层中的时滞性包衣材料为乙基纤维素 20；所述时滞内层中的增塑剂为聚乙二醇6000，且所述聚乙二醇

6000的用量为所述时滞性包衣材料重量的45% 55%；所述时滞内层的重量为所述载药丸芯~重量的3% 5%；

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所述pH依赖外层由pH依赖性包衣材料、增塑剂以及润滑剂组成；所述pH依赖外层中的pH依赖性包衣材料为丙烯酸树脂S100和乙基纤维素20的复合物，且所述pH依赖性包衣材料中的丙烯酸树脂S100与乙基纤维素20的重量比为5:1 10:1；所述pH依赖外层的重量为所述~时滞内层与所述载药丸芯重量之和的19% 31%。

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2.根据权利要求1所述的防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂，其特征在于，所述载药丸芯中的原料药的含量为所述载药丸芯重量的10% 30%。

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3.根据权利要求1所述的防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂，其特征在于，所述时滞内层中的润滑剂为滑石粉，且所述时滞内层中的滑石粉的用量为时滞性包衣材料重量的

10%。

4.根据权利要求1所述的防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂，其特征在于，所述pH依赖外层中的增塑剂为柠檬酸三乙酯，且所述柠檬酸三乙酯的重量为所述pH依赖性包衣材料的20%；所述pH依赖外层中的润滑剂为滑石粉，且所述pH依赖外层中的滑石粉的重量为所述pH依赖性包衣材料的20%。

说明书

防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂、制备方法及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及药物制剂领域，特别涉及一种防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂、制备方法及其应用。

背景技术

[0002] 近年来，随着人民生活水平的提高，饮食结构的改变，结肠癌的发病率呈逐年上升趋势。结肠癌的高发病率和高死亡率严重危害人类的健康逐渐受到国内外的广泛关注，现已被世界卫生组织列为现代难治疾病之一。目前我国结肠癌的发病率以每年4.2％的速度递增，位列第三。研究发现，结肠癌造成死亡的主要原因就在于它的侵袭和转移。

[0003] 随着科学技术的飞速发展，结肠癌诊断和早期治疗的手段也相应得到提高。临床上一般采取手术和化疗两种治疗方式结合。针对其病因病机，主要采用抗炎、抗菌、抑制免疫反应等药物疗法。术后常用的5-氟尿嘧啶、卡培他滨、奥沙利铂、长春新碱、丝裂霉素等化疗药治疗结肠癌、直肠癌取得可喜成绩。但化疗药物到达肿瘤细胞同时也会攻击正常细胞，药物的致吐、骨髓抑制、神经毒性及血液系统等副反应和肿瘤耐药仍是限制其疗效的瓶颈。而中药以其治疗结肠疾病的特殊疗效、低毒性越来越受到人们的广泛关注。

[0004] 目前，常规的口服剂型的药物制剂，在胃、小肠就开始释药，药物难以达到结肠或在结肠癌症部位的浓度低，影响了药物对该病的临床治疗效果。针对结肠癌的治疗需求，疗效确切、毒性低、靶向性强的药物制剂更符合临床治疗需求。

[0005] 众所周知，人体从胃到小肠经历了一个pH梯度变化，结肠pH相对较高；结肠中寄生着许多独特细菌，这些细菌可特异性产生多糖酶、糖苷酶、纤维 素酶、硝基还原酶、偶氮还原酶等酶系；尽管胃排空时间极不规则，但物质在小肠段的转运时间相对稳定，一般为3～4h；人体胃肠道蠕动产生压力，结肠内物体受到的压力相对较大。而且结肠部位具有转运时间长，肽酶浓度低和对渗透促进剂具有很高响应等优点，以结肠部位的生理特征为基础的结肠定位给药系统在疾病的治疗中发挥巨大优势，成为一个重要的发展方向。

[0006] 本发明人前期授权专利CN101317883和CN102018759A中公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)、含迷迭香酸的夏枯草有效部位和从含迷迭香酸的夏枯草有效部位中分离纯化所得的迷迭香酸(RA)的制备方法。体内外研究发现，其均有较好的抗结肠癌细胞粘附、移动和浸润能力，均能显著抑制肿瘤和抑制转移。专利CN102018759A实施例10公开了夏枯草有效组分冻干粉针制备。产生的问题是：注射剂因药材因素、辅料因素等可引起中药注射剂严重不良反应。中药注射剂药害事件的连续涌现引起社会普遍关注，对中药注射剂的制备工艺、质量标准等提出更高要求，加之注射剂病人不能自行使用，在很大程度上限制了夏枯草有效组分冻干粉针的使用。专利CN102018759A实施例11公开了夏枯草有效组分胶囊的制备。而常规口服剂型，在胃、小肠就开始释药，药物难以达到结肠或在结肠癌症部位的浓度低，将影响夏枯草有效组分对该病的临床治疗效果。本发明即以上述研究成果为基础，对现有技术进行进一步的改进，旨在解决单一释药机制的不足的问题，提供了一种靶向性强、稳定性好的防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂。

发明内容

[0007] 本发明实施方式的目的在于提供一种防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂、制备方法及其应用，该种结肠定位制剂靶向性强、稳定性好，从而达到防治结肠癌转移的目的。且该制剂服用方便、药物副作用小。

[0008] 为解决上述技术问题，本发明的实施方式提供了一种防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂，该制剂包括载药丸芯，载药丸芯的外部依次包裹时滞内层以及pH依赖外层，其中：载药丸芯中的原料药的含量为载药丸芯重量的10％～40％；时滞内层的重量为载药丸芯重量的3％～13％；pH依赖外层的重量为时滞内层与载药丸芯重量之和的10％～80％；且载药丸芯中的原料药包含具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位。

[0009] 为解决上述技术问题，本发明的实施方式还提供了一种防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂的制备方法，该方法包括如下步骤：

[0010] (1)制备载药丸芯：将具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位原料药与药用辅料混匀，采用挤出滚圆法或粉末层积法制备载药丸芯；或以空白丸芯为母核，用具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位原料药溶液进行流化床包衣制备载药丸芯；

[0011] (2)制备时滞内层：将时滞性包衣材料溶解在乙醇水溶液中；持续搅拌下，依次缓慢加入增塑剂、润滑剂，充分搅拌后得到时滞内层包衣液，用时滞内层包衣液对步骤(1)制得的载药丸芯进行包衣，即得时滞内层包衣微丸；

[0012] (3)制备pH依赖外层：在磁力搅拌下，将pH依赖性包衣材料加入到乙醇中，完全溶解后，依次加入增塑剂及润滑剂，充分搅拌得到pH依赖外层包衣液，用pH依赖外层包衣液对步骤(2)制得的时滞内层包衣微丸进行包衣、老化即得到防治结肠癌转移的结肠定位制剂。

[0013] 另外，本发明的实施方式还提供了一种防治结肠癌转移的口服结肠定位制剂在制药中的应用。

[0014] 本发明实施方式相对于现有技术而言，该制剂通过在载药丸芯上依次包覆时滞内层以及pH依赖外层，使得结肠定位制剂靶向性强、稳定性好，从而达到防治结肠癌转移的目的。且该制剂服用方便、药物副作用小。

[0015] 另外，具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位为：夏枯草抗结肠癌活性 组分、迷迭香酸的夏枯草有效部位和从含迷迭香酸的夏枯草有效部位中分离纯化所得的迷迭香酸。

[0016] 值得说明的是，上述夏枯草抗结肠癌活性组分、含迷迭香酸的夏枯草有效部位和从含迷迭香酸的夏枯草有效部位中分离纯化所得的迷迭香酸的制备方法分别记录于本申请人已获授权的下述两个中国专利中：(1)夏枯草活性部位及其在制备药物组合物中的应用(公开/公告号：101317883)；(2)迷迭香酸、含迷迭香酸的夏枯草有效组分及其制备方法和其在防治癌症术后转移方面的应用(公开/公告号：102018759A)。申请人请求将上述两个授权专利文件以全文引用的方式合并入本申请中。

[0017] 另外，载药丸芯中的原料药的含量为载药丸芯重量的10％～30％。

[0018] 另外，时滞内层包括时滞性包衣材料、增塑剂以及润滑剂；pH依赖外层包括pH依赖性包衣材料、增塑剂以及润滑剂。

[0019] 另外，时滞性包衣材料为羟丙甲基纤维素、乙基纤维素、醋酸纤维素和丙烯酸树脂NE30D中的一种或几种的组合物。

[0020] 另外，当时滞性包衣材料为丙甲基纤维素15M时，时滞内层的包衣增重为0％～13％；当时滞性包衣材料为乙基纤维素20时，时滞内层的包衣增重为0％～8％。

[0021] 另外，当时滞性包衣材料为丙甲基纤维素时：增塑剂为聚乙二醇6000，增塑剂用量为时滞性包衣材料重量的2％～15％；润滑剂为滑石粉，且润滑剂的用量为时滞性包衣材料重量的0～20％；当时滞性包衣材料为乙基纤维素时：增塑剂为聚乙二醇6000，且增塑剂的用量为时滞性包衣材料重量的30％～70％；润滑剂为滑石粉，且润滑剂的用量为时滞性包衣材料重量的5～15％。

[0022] 另外，pH依赖性包衣材料为丙烯酸树脂L100、丙烯酸树脂S100、丙烯酸树脂NE30D、纤维醋酸酯、羟丙甲纤维素酞酸酯、醋酸羟丙甲酞酸酯和乙 基纤维素中的一种或几种的组合物。

[0023] 另外，当pH依赖性包衣材料为丙烯酸树脂S100时：pH依赖性包衣材料的包衣增重为40％～80％；当pH依赖性包衣材料为丙烯酸树脂S100/乙基纤维素20的复合物，且丙烯酸树脂S100与乙基纤维素20的质量比为5:1～10:1时，pH依赖性包衣材料的包衣增重为10％～40％。

[0024] 另外，pH依赖外层中的增塑剂为柠檬酸三乙酯，增塑剂的重量为pH依赖性包衣材料的5％～30％；pH依赖外层中的润滑剂为滑石粉，润滑剂的重量为pH依赖性包衣材料的10％～40％。

[0025] 另外，空白丸芯为淀粉丸、微晶纤维素丸、糊精丸的一种或几种的组合物。

附图说明

[0026] 图1是实施例1～8结肠定位微丸体外累积溶出曲线图；

[0027] 图2是实施例9～13结肠定位微丸体外累积溶出曲线图。

具体实施方式

[0028] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明的各实施方式进行详细的阐述。然而，本领域的普通技术人员可以理解，在本发明各实施方式中，为了使读者更好地理解本申请而提出了许多技术细节。但是，即使没有这些技术细节和基于以下各实施方式的种种变化和修改，也可以实现本申请所要求保护的技术方案。

[0029] 实施例1

[0030] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的20％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0031] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)20％，

[0032] 辅料包含：稀释剂：糊精10％，淀粉67％，崩解剂：羧甲基淀粉钠2％，润滑剂：滑石粉1％。但是本实施方式不应以此为限，稀释剂包括但不限于糊精、淀粉，也可以是乳糖、预交化淀粉以及微晶纤维素中的一种或一种以上组合物；崩解剂包括但不限于羧甲基淀粉钠，也可以是交联聚维酮、低取代羟丙甲纤维素或交联羧甲基纤维素钠中的一种或一种以上组合物。润滑剂包括但不限于滑石粉，也可以是硬脂酸镁，聚乙二醇或微粉硅胶中的一种或几种的组合物，优选硬脂酸镁。值得注意的是，辅料中还可以加入润湿剂、粘合剂，其中，润湿剂可以是水、乙醇中的一种或两种的组合物；粘合剂可以是甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚维酮或淀粉浆中的一种或几种的组合物。

[0033] 时滞内层处方：羟丙甲基纤维素(HPMC)15M为包衣材料，聚乙二醇(PEG)6000占HPMC 15M重量百分比8％，滑石粉占HPMC 15M重量百分比10％，包衣增重9％。

[0034] pH依赖外层处方：甲基丙烯酸树脂S100(Eudragit S100)为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit S100重量百分比30％，滑石粉占Eudragit S100重量百分比20％，包衣增重74％。

[0035] 制备工艺：

[0036] 1)制备载药丸芯：将上述处方量的夏枯草抗结肠癌活性组分、糊精、淀粉、羧甲基淀粉钠、滑石粉等预先混匀，PVB溶于乙醇水溶液，湿法制软材，挤出滚圆法制20～25目微丸，50℃干燥；

[0037] 2)制备时滞内层包衣液：将羟丙甲基纤维素(HPMC)15M溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0038] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包 时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-PVB丸；

[0039] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0040] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0041] 实施例2

[0042] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的15％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0043] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)15％，

[0044] 辅料：淀粉15％，微晶纤维素64％，交联聚维酮5％，滑石粉1％。

[0045] 时滞内层处方：HPMC 100M为包衣材料，PEG 6000占HPMC 100M重量百分比8％，滑石粉占HPMC 100M重量百分比10％，包衣增重5％。

[0046] pH依赖外层处方：Eudragit S100为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit S100重量百分比15％，滑石粉占Eudragit S100重量百分比20％，包衣增重70％。

[0047] 制备工艺：

[0048] 1)制备载药丸芯：将上述处方量的夏枯草抗结肠癌活性组分、淀粉、MCC 102、交联聚维酮、滑石粉等预先混匀，PVB溶于乙醇水溶液，流化床侧喷，粉末层积法制20～25目微丸，50℃干燥；

[0049] 2)制备时滞内层包衣液：将羟丙甲基纤维素(HPMC)100M溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0050] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h；得HPMC-PVB丸；

[0051] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0052] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0053] 实施例3

[0054] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的25％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0055] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)25％，空白淀粉丸芯75％。

[0056] 时滞内层处方：HPMC 15M为包衣材料，PEG 6000占HPMC 15M重量百分比8％，滑石粉占HPMC 15M重量百分比10％，包衣增重5％。

[0057] pH依赖外层处方：Eudragit S100为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit S100重量百分比20％，滑石粉占Eudragit S100重量百分比20％，包衣增重74％。

[0058] 其中，空白淀粉丸芯也可以是微晶纤维素丸、糊精丸的一种或两种的组合物。

[0059] 制备工艺：

[0060] 1)制备载药丸芯：将上述处方量的空白丸芯在流化床中预热，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，PVB溶于乙醇水溶 液，预热至物料温度40℃左右，开始载药包衣，进液量1～5ml/min；

[0061] 2)制备时滞内层包衣液：将HPMC 15M溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0062] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-PVB丸；

[0063] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0064] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0065] 实施例4

[0066] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的30％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0067] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)30％，空白淀粉丸芯70％。

[0068] 时滞内层处方：HPMC 100M为包衣材料，PEG 6000占HPMC 100M重量百分比8％，滑石粉占HPMC 100M重量百分比10％，包衣增重7％。

[0069] pH依赖外层处方：Eudragit S100为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit S100重量百分比20％，滑石粉占Eudragit S100重量百分比20％，包衣增重70％。

[0070] 其中，空白淀粉丸芯也可以是微晶纤维素丸、糊精丸的一种或两种的组合物。

[0071] 制备工艺：

[0072] 1)制备载药丸芯：将上述处方量的空白丸芯在流化床中预热，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，PVB溶于乙醇水溶液，预热至物料温度40℃左右，开始载药包衣，进液量1～5ml/min；

[0073] 2)制备时滞内层包衣液：将羟丙甲基纤维素(HPMC)15M溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0074] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-PVB丸；

[0075] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0076] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0077] 实施例5

[0078] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的28％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0079] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)28％，空白微晶纤维素丸芯72％。

[0080] 时滞内层处方：HPMC 15M为包衣材料，PEG 6000占HPMC 15M重量百分比8％，滑石粉占HPMC 15M重量百分比10％，包衣增重9％。

[0081] pH依赖外层处方：Eudragit S100为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit  S100重量百分比20％，滑石粉占Eudragit S100重量百分比20％，包衣增重66％。

[0082] 其中，空白微晶纤维素丸芯也可以是淀粉丸、糊精丸的一种或两种的组合物。

[0083] 制备工艺：

[0084] 1)将上述处方量的空白丸芯与流化床中预热，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120Kpa，PVB溶于乙醇水溶液，预热至物料温度40℃左右，开始载药包衣，进液量1～5ml/min；

[0085] 2)制备时滞内层包衣液：将HPMC15M溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0086] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-PVB丸；

[0087] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0088] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0089] 实施例6

[0090] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的35％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0091] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)35％，空白糊精丸芯65％。

[0092] 时滞内层处方：HPMC 15M为包衣材料，PEG 6000占HPMC 15M重量百分比8％，滑石粉占HPMC 15M重量百分比10％，包衣增重9％。

[0093] pH依赖外层处方：Eudragit S100为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit S100重量百分比20％，滑石粉占Eudragit S100重量百分比20％，包衣增重74％。

[0094] 其中，空白糊精丸也可以是淀粉丸、微晶纤维素丸的一种或几种的组合物。

[0095] 制备工艺：

[0096] 1)制备载药丸芯：将上述处方量的空白丸芯与流化床中预热，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始载药包衣，进液量1～5ml/min；

[0097] 2)制备时滞内层包衣液：将羟丙甲基纤维素(HPMC)15M溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0098] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-PVB丸；

[0099] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0100] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0101] 实施例7

[0102] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的30％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专  利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0103] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)30％，空白淀粉丸芯70％。

[0104] 时滞内层处方：HPMC 15M为包衣材料，PEG 6000占HPMC 15M重量百分比8％，滑石粉占HPMC 15M重量百分比10％，包衣增重5％。

[0105] pH依赖外层处方：Eudragit S100为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit S100重量百分比20％，滑石粉占Eudragit S100重量百分比20％，包衣增重70％。

[0106] 其中，空白淀粉丸芯可以是微晶纤维素丸、糊精丸的一种或几种的组合物。

[0107] 制备工艺：

[0108] 1)制备载药丸芯：将上述处方量的空白丸芯与流化床中预热，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始载药包衣，进液量1～5ml/min；

[0109] 2)制备时滞内层包衣液：将羟丙甲基纤维素(HPMC)15M溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0110] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-PVB丸；

[0111] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0112] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖 外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0113] 实施例8

[0114] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的10％；原料药是具有防治结肠癌转移的迷迭香酸；其中，专利公告号为CN102018759B中已经公开了从夏枯草中分离获得迷迭香酸(RA)的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0115] 迷迭香酸(RA)10％，空白淀粉丸芯90％。

[0116] 时滞内层处方：HPMC 15M为包衣材料，PEG 6000占HPMC 15M重量百分比8％，滑石粉占HPMC 15M重量百分比10％，包衣增重5％。

[0117] pH依赖外层处方：Eudragit S100为包衣材料，柠檬酸三乙酯占EudragitS100重量百分比20％，滑石粉占Eudragit S100重量百分比20％，包衣增重70％。

[0118] 其中，空白淀粉丸芯可以是微晶纤维素丸、糊精丸的一种或几种的组合物。

[0119] 制备工艺：

[0120] 1)制备载药丸芯：将上述处方量的空白丸芯与流化床中预热，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，RA溶于乙醇水溶液，预热至物料温度40℃左右，开始载药包衣，进液量1～5ml/min；

[0121] 2)制备时滞内层包衣液：将羟丙甲基纤维素(HPMC)15M溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0122] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-RA丸；

[0123] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0124] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-RA丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0125] 与现有技术相比，本发明实施例制备的结肠定位制剂质量稳定可控，工艺简单，成本低，释药重现性好，可操作性强，适于工业化生产。与普通口服制剂相比，提高了结肠部位药物浓度，提高了疗效，减少不良反应。与注射剂、灌肠给药或直肠栓剂相比，病人使用方便，顺应性好。因此，该结肠定位制剂用于结肠癌具有明显的优势。

[0126] 实施例9

[0127] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的25％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0128] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)25％，空白淀粉丸芯75％。

[0129] 时滞内层处方：乙基纤维素(EC)20为包衣材料，PEG 6000占EC20重量百分比45％，滑石粉占EC20重量百分比10％，包衣增重3％。

[0130] pH依赖外层处方：Eudragit S100-EC20(5：1)为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit S100-EC20(5：1)重量百分比20％，滑石粉占Eudragit S100-EC20(5：1)重量百分比20％，包衣增重19％。

[0131] 其中，空白淀粉丸芯可以是微晶纤维素丸、糊精丸的一种或几种的组合物。

[0132] 制备工艺：

[0133] 1)将上述处方量的空白丸芯与流化床中预热，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，PVB溶于乙醇水溶液，预热至物料温 度40℃左右，开始载药包衣，进液量1～5ml/min；

[0134] 2)制备时滞内层包衣液：将EC溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0135] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-PVB丸；

[0136] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100-EC20(5：1)加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0137] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0138] 实施例10

[0139] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的40％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0140] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)40％，空白淀粉丸芯60％。

[0141] 时滞内层处方：EC20为包衣材料，PEG 6000占EC20重量百分比50％，滑石粉占EC20重量百分比10％，包衣增重3％。

[0142] pH依赖外层处方：Eudragit S100-EC20(10：1)为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit S100-EC20(10：1)重量百分比20％，滑石粉占Eudragit S100-EC20(10：1)重量百分比20％，包衣增重25％。

[0143] 其中，空白淀粉丸芯可以是微晶纤维素丸、糊精丸的一种或几种的组合物。

[0144] 制备工艺：

[0145] 1)制备载药丸芯：将上述处方量的空白丸芯与流化床中预热，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，PVB溶于乙醇水溶液，预热至物料温度40℃左右，开始载药包衣，进液量1～5ml/min；

[0146] 2)制备时滞内层包衣液：将EC20溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0147] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-PVB丸；

[0148] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100-EC20(10：1)加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0149] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0150] 实施例11

[0151] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的20％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0152] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)20％，空白淀粉丸芯80％。

[0153] 时滞内层处方：EC20为包衣材料，PEG 6000占EC20重量百分比55％，滑石粉占EC20重量百分比10％，包衣增重3％。

[0154] pH依赖外层处方：Eudragit S100-EC20(20：3)为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit S100-EC20(20：3)重量百分比20％，滑石粉占Eudragit S100-EC20(20：3)重量百分比20％，包衣增重31％。

[0155] 其中，空白淀粉丸芯可以是微晶纤维素丸、糊精丸的一种或几种的组合物。

[0156] 制备工艺：

[0157] 1)制备载药丸芯：将上述处方量的空白丸芯与流化床中预热，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，PVB溶于乙醇水溶液，预热至物料温度40℃左右，开始载药包衣，进液量1～5ml/min；

[0158] 2)制备时滞内层包衣液：将EC20溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0159] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-PVB丸；

[0160] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100-EC20(20：3)加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0161] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0162] 实施例12

[0163] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的20％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠癌活性组分的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0164] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)20％，空白淀粉丸芯80％。

[0165] 时滞内层处方：EC20为包衣材料，PEG 6000占EC20重量百分比55％，滑石粉占EC20重量百分比10％，包衣增重5％。

[0166] pH依赖外层处方：Eudragit S100-EC20(10：1)为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit S100-EC20(10：1)重量百分比20％，滑石粉占Eudragit S100-EC20(10：1)重量百分比20％，包衣增重19％。

[0167] 其中，空白淀粉丸芯可以是微晶纤维素丸、糊精丸的一种或几种的组合物。

[0168] 制备工艺：

[0169] 1)制备载药丸芯：将上述处方量的空白丸芯与流化床中预热，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，PVB溶于乙醇水溶液，预热至物料温度40℃左右，开始载药包衣，进液量1～5ml/min；

[0170] 2)制备时滞内层包衣液：将EC20溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0171] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始包衣，进液量1～5ml/min。喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-PVB丸；

[0172] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100-EC20(10：1)加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0173] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0174] 实施例13

[0175] 载药丸芯处方：包含原料药和辅料，载药丸芯中原料药的含量为载药丸芯重量的20％；原料药是具有防治结肠癌转移的夏枯草有效部位；其中，专利公告号为CN101317883B中已经公开了从夏枯草中分离获得夏枯草抗结肠 癌活性组分的制备方法。本实施例对原料药的制备步骤不一一赘述。

[0176] 夏枯草抗结肠癌活性组分(PVB)20％，空白淀粉丸芯80％。

[0177] 时滞内层处方：EC20为包衣材料，PEG 6000占EC20重量百分比55％，滑石粉占EC20重量百分比10％，包衣增重3％。

[0178] pH依赖外层处方：Eudragit S100-EC20(10：1)为包衣材料，柠檬酸三乙酯占Eudragit S100-EC20(10：1)重量百分比20％，滑石粉占Eudragit S100-EC20(10：1)重量百分比20％，包衣增重25％。

[0179] 其中，空白淀粉丸芯也可以是微晶纤维素丸、糊精丸的一种或几种的组合物。

[0180] 制备工艺：

[0181] 1)制备载药丸芯：将上述处方量的空白丸芯与流化床中预热，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，PVB溶于乙醇水溶液，预热至物料温度40℃左右，开始载药包衣，进液量1～5ml/min；

[0182] 2)制备时滞内层包衣液：将EC20溶解在乙醇水溶液中，持续搅拌，依次加入PEG6000、滑石粉，充分搅拌后得到时滞内层包衣液；

[0183] 3)时滞内层包衣：流化床中，投丸200g，进风量80～110m3/h，进风温度45～60℃，雾化压力80～120KPa，预热至物料温度40℃左右，开始喷雾包时滞内层，包衣完毕后，40℃活化12h，得HPMC-PVB丸；

[0184] 4)制备pH依赖外层包衣液：在磁力搅拌下，将Eudragit S100-EC20(10：1)加入至乙醇中，完全溶解后，依次加入柠檬酸三乙酯和滑石粉，充分搅拌即得pH依赖外层包衣液；

[0185] 5)pH依赖外层包衣：将HPMC-PVB丸预热至38℃左右继续包pH依赖外层，制得包衣微丸40℃老化8h。

[0186] 值得注意的是，实施例1～13中：包衣增重的计算公式如下：

[0187] 包衣增重(％)＝(包衣后重量-包衣前重量)/包衣前重量*100％。

[0188] 值得注意的是，实施例1～13中涉及到的处方材料不仅局限于上述各个实施例中出现的。另外，实施例1～13制得结肠定位微丸也可以灌装到胶囊中制成胶囊剂型。灌装胶囊后的结肠定位微丸增强了结肠定位微丸的稳定性，且患者服用也更方便。

[0189] 另外，实施例1～13中制备得到的结肠定位微丸具有多方面的优势：粒径分布窄，一般为0.5～1.5mm；其释药行为是组成一个剂量的多个微丸释药行为的总和，个别微丸制备上的缺陷不致于对整个制剂的释药行为产生严重影响，药物释放重现性好；微丸受胃排空及消化道输送食物节律的影响小，体内吸收重现性好等。实施例1～13制备的结肠定位制剂可以用于防治结肠癌的转移。

[0190] 为确定实施例9～13中的最优制备方案，先进行单因素影响试验，根据单因素影响试验结果，选择对释药行为影响较大的时滞内层增重(A)，时滞内层PEG6000用量(B)及pH依赖外层增重(C)三个因素，取三个水平进行正交设计L9(34)试验，测定并计算体外累积释放率。以Q5h表示微丸在pH6.8PBS中转运3h后的累积释放率，Q12h表示微丸在pH7.6PBS中转运7h后的累积释放率，以︱Q12h-Q5h︳值为评价指标，确定最佳包衣处方。正交试验因素水平表见表1，正交试验的结果见表2，方差分析结果见表3。

[0191] 其中，累积溶出率的计算公式如下：

[0192]

[0193] (n为取样点个数；C∞表示药物完全溶出时测得浓度；m为药物完全溶出时的前一取样点数。)

[0194] 表1正交试验因素水平表

[0195]

[0196] 表2包衣处方优化正交试验设计及结果表

[0197]

[0198] (评价指标︱Q12h-Q5h︳值越大，表明药物在结肠部位累积释放越多。)[0199] 表3包衣处方优化方差分析结果表

[0200]

[0201]

[0202] 由方差分析结果知，在本实验设定的因素水平范围内，时滞内层增重(A)及时滞内层PEG6000用量(B)对结肠靶向微丸的释药行为有显著影响，而pH依赖外层增重(C)对结肠靶向微丸的释药行为无显著影响。由正交试验结果可知，三个因素影响释药行为的顺序为：时滞内层增重(A)>时滞内层PEG6000用量(B)>pH依赖外层增重(C)。由表2数据直观分析，得出最佳包衣处方为A1B3C3。本实验设定的因素水平范围内，pH依赖外层包衣材料用量越大，包衣耗时越长，成本越高，且其用量对释药行为无显著影响，故确定最佳包衣处方为A1B3C2，即时滞内层包衣增重3％，时滞内层PEG6000用量55％，pH依赖外层增重25％。

[0203] 口服结肠定位制剂体外释放度的测定实验：

[0204] 实验步骤：取实施例1～13中的结肠定位制剂，按照释放度测定法中国药典2015版转篮法，温度37.0℃，转速100rpm，溶出液体积900ml。样品置于转篮中，依次按规定条件进行胃模拟溶出介质中转运2h，小肠模拟溶出介质中转运3h，结肠模拟溶出介质中转运7h的溶出试验。胃中第2h，小肠中第1h，3h，结肠中第1h，2h，3h，5h，7h分别取样5ml，同时回补同温同体积溶出介质。样品经0.45um水性微孔滤膜过滤。以迷迭香酸对照品为对照，HPLC高效液相色谱仪测定续滤液中迷迭香酸的含量，计算药物的累积溶出率，并绘制药物的累积溶出曲线。

[0205] 将各实施例按照上述释放度测定方法进行累积释放度评价。实施例1～8释放度结果见表4，累积溶出曲线见图1；实施例9～13释放度结果见表5，累积溶出曲线见图2。(注：各实施例的溶出度结果为三份样品的平均值。)

[0206] 表4 1-8实施例释放度数据(％)

[0207]

[0208]

[0209] 表5 9-13实施例释放度数据(％)

[0210]

[0211] 由图表结果可以看出，实施例8、13分别为两种方案的最优实施例，在胃、小肠基本不释放，而在结肠部位5h内累计释放达95％以上。结肠定位效果最好。

[0212] 另外，实施例1～13制备的夏枯草有效组分或迷迭香酸结肠定位微丸在胃、小肠模拟溶出介质中基本不释放药物，在结肠模拟溶出介质中5h内累计溶出80％以上，不同批次间样品溶出曲线f2相似因子均大于70。表明本发明处方工艺稳定，制得结肠靶向微丸释药行为稳定，达到结肠靶向目的。

[0213] 其中，f2是用来评价制剂体外释放曲线相似性的相似因子，且已被FDA，EMEA及SFDA等收载并推荐使用。f2相似因子的计算公式如下：

[0214]

[0215] 公式中的Rt为参比制剂第t时间点的平均累积释放度，Tt为受试制剂第t 时间点的平均累积释放度，n为测试点数。当f2值在50～100时，认为两制剂释药行为无显著性差异，f2值越接近100，两释药曲线越相似；f2值小于50时，认为两制剂释药行为有显著性差异。

[0216] 本领域的普通技术人员可以理解，上述各实施方式是实现本发明的具体实施例，而在实际应用中，可以在形式上和细节上对其作各种改变，而不偏离本发明的精神和范围。