一种显微注射操作的方法

摘要

本发明公开了一种显微注射操作的方法，至少包括拉针仪器、固定针、注射针、固定针操作臂、注射针操作臂以及显微镜，所述的固定针与固定针操作臂转动连接，所述的注射针与注射针操作臂转动连接，所述的显微镜包括载物台，载物台上设有细胞载具，所述的固定针操作臂上设有第一旋钮，所述的注射针操作臂上设有第二旋钮，所述的固定针有30°的弯曲角度。提供了一种通过调整注射针的位置和固定针的角度，在注射针断针时能方便快捷的得到合适大小的针口的一种方便快捷的一种一种显微注射操作的方法。

权利要求

1.一种显微注射操作的方法，适用于一种显微注射装置，其特征在于，所述显微注射装置至少包括拉针仪器、固定针、注射针、固定针操作臂、注射针操作臂以及显微镜，所述的固定针与固定针操作臂转动连接，所述的注射针与注射针操作臂转动连接，所述的显微镜包括载物台，载物台上设有细胞载具，所述的固定针操作臂上设有第一旋钮，所述的注射针操作臂上设有第二旋钮，所述的固定针有30°的弯曲角度；

所述显微注射操作的方法包括以下步骤：

步骤一：将细胞置于显微镜载物台上的细胞载具中；

步骤二：通过第二旋钮调节注射针操作臂，使注射针的针尖整个平铺在细胞载具的底部；

步骤三：转动固定针，使固定针弯曲的背部向上；

步骤四：通过第一旋钮调节固定针操作臂，使固定针针头慢慢与器皿底部接触；

步骤五：通过第二旋钮调节注射针操作臂的同时通过第一旋钮调节固定针操作臂，使注射针针尖和固定针针头在同一个水平面上；

步骤六：选择注射针针尖的位置，通过第一旋钮微调固定针操作臂；

步骤七：用固定针针头压断注射针针尖，断针完成；该方法用于非疾病诊断治疗目的。

2.根据权利要求1所述的一种显微注射操作的方法，其特征在于，所述的注射针断针后针口的内径为3-5μm。

说明书

一种显微注射操作的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及显微注射操作，具体涉及一种显微注射操作的方法。

背景技术

[0002] 显微注射技术是在显微镜视野内将被注射细胞调整固定后，利用微注射针将外源基因或其他物质注入细胞内的一种技术，是现代生物工程的重要技术手段之一，尤其是转基因、克隆和试管婴儿等细胞工程领域。与其他转基因技术相比，显微注射的优点是转基因效率稳定、注射基因大小不受限制、无需载体以及操作对象无特殊要求等，在濒危动物保护、生殖与健康、物种改良和细胞内核质研究中得到广泛应用。

[0003] 显微注射操作时，最关键的一步就是注射针的断针。注射针的针尖断口过粗，注射时细胞的死亡率增加；而断口过细，注射的量会过少而且容易堵针。注射针一般的断针方法是注射针撞向固定针管壁来撞断注射针针尖，但是断针后针口的大小是随机的，而断针后针口内径需要有合适的大小，所以这个操作需要一定的技术含量而且操作时间一般较长还具有偶然性。这种方法对注射针的要求也很高，注射针针尖要很尖很短又要一定的硬度。拉针仪器拉注射针时因参数和机器差异，拉出来的规格不一，而拉出的注射针针尖大部分都会有一定的长度而且有韧性，上述的方法就不适合断这种注射针。

[0004] 中国专利号CN105420099A，公开日期为2016年3月23日，发明名称为高效显微注射装置，包括石英基片和注射本体，注射本体固定在石英基片上，所述注射本体上设有输入微流道、输出微流道以及细胞输送微流道，注射本体上输入微流道和输出微流道之间还设置有显微注射流道和控制细胞运动流道，显微注射流道为竖直方向并与细胞输送微流道垂直连通，显微注射流道上固定有显微注射针，显微注射流道与显微注射针之间有间隙，且间隙尺寸小于细胞直径，显微注射流道内具有限位凸起，控制细胞运动流道与显微注射流道垂直连通，且控制细胞运动流道位于限位凸起上方，提供了一种通过控制微流体的运动来间接控制

[0005] 细胞运动，使细胞“自己”撞上显微注射针，从而完成细胞的显微注射操作的一种高效显微注射装置。其不足之处在于，不能对应拉针仪器拉出的注射针针尖控制断针针口的内径。

发明内容

[0006] 本发明为解决上述不能对应拉针仪器拉出的注射针针尖控制断针针口的内径的问题，提供了一种通过调整注射针的位置和固定针的角度，在注射针断针时能方便快捷的得到合适大小的针口的一种方便快捷的一种一种显微注射操作的方法。

[0007] 本发明为解决其技术问题所采用的技术方案是：一种显微注射操作的方法，至少包括拉针仪器、固定针、注射针、固定针操作臂、注射针操作臂以及显微镜，所述的固定针与固定针操作臂转动连接，所述的注射针与注射针操作臂转动连接，所述的显微镜包括载物台，载物台上设有细胞载具，所述的固定针操作臂上设有第一旋钮，所述的注射针操作臂上设有第二旋钮，所述的固定针有30°的弯曲角度。

[0008] 作为优选，本发明包括以下步骤：

[0009] 步骤一：将细胞置于显微镜载物台上的细胞载具中；

[0010] 步骤二：通过第一旋钮调节注射针操作臂，使注射针的针尖整个平铺在细胞载具的底部；

[0011] 步骤三：转动固定针，使转动针弯曲的背部向上；

[0012] 步骤四：通过第二旋钮调节固定针操作臂，使固定针针头慢慢与器皿底部接触；

[0013] 步骤五：通过第一旋钮调节注射针操作臂的同时通过第二旋钮调节固定针操作臂，使注射针针尖和固定针针头在同一个水平面上；

[0014] 步骤六：选择注射针针尖的位置，通过第二旋钮微调固定针操作臂；

[0015] 步骤七：用固定针针头压断注射针针尖，断针完成。

[0016] 作为优选，所述的断针后针口的内径为3-5μm。断针后针口内径为 3－5 μm大小是最合适的，注射针的针尖断口过粗，注射时细胞的死亡率增加；而断口过细，注射的量会过少而且容易堵针。

[0017] 作为优选，所述的注射针针尖长度为5-8mm。本发明注射针的针尖有较强的硬度，针尖具有高锋利度。

[0018] 作为优选，所述的拉针仪器拉出的注射针针尖的长度为10-20mm。

[0019] 本发明的实际意义是：

[0020] （1）方便快捷并且易操作；

[0021] （2）通过调整注射针的位置和固定针的角度，在注射针断针时能方便、快捷的得到合适大小的针口。

[0022] （3）可适应拉针仪器拉注射针时因参数和机器差异，所拉出来的规格不一的注射针。

具体实施方式

[0023] 显微注射操作时，最关键的一步就是注射针的断针。注射针的针尖断口过粗，注射时细胞的死亡率增加；而断口过细，注射的量会过少而且容易堵针。注射针一般的断针方法是注射针撞向固定针管壁来撞断注射针针尖，但是断针后针口的大小是随机的，而断针后针口内径为 3－5 μm大小才最合适，所以这个操作需要一定的技术含量而且操作时间一般较长还具有偶然性。这种方法对注射针的要求也很高，注射针针尖要很尖很短（5-8mm）又要一定的硬度。拉针仪器拉注射针时因参数和机器差异，拉出来的规格不一，而拉出的注射针针尖大部分都会有一定的长度（10-20mm）而且有韧性，本实施例通过调整注射针的位置和固定针的角度，在注射针断针时能方便、快捷的得到合适大小的针口。

[0024] 本实施例包括固定针、注射针、固定针和注射针的操作臂和显微镜载物台上装载细胞的器皿。注射针针尖有一定的长度和韧性，通过注射针的操作臂慢慢调节使注射针针尖整个平铺在装载细胞的器皿底部。固定针在装到操作臂上的时候调整其角度（固定针有30  °左右的弯曲角度）使其弯曲的背部向上，调节固定针操作臂使固定针针头慢慢与器皿底部接触。接着调节两个操作臂使注射针针尖和固定针针头在一个水平面上，选择在注射针针尖合适大小的位置，微调固定针操作臂，用固定针针头压断注射针针尖，断针完成。

[0025] 以上所述实施实例只是本发明的一种较佳方案，并非对发明作任何形式上的限制，在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其他的变体及改型。