一种白细胞四分群分析用溶血剂

摘要

本发明涉及体外诊断试剂领域，具体涉及一种白细胞分析用溶血剂。该溶血剂包括助溶剂0.1‑1.0 g/L、非离子表面活性剂1.0‑2.0g/L、防腐剂0.3~0.5g/L及缓冲剂。本发明的白细胞四分群分析用溶血剂，是适用于对白细胞进行五分类分析用的血细胞分析仪，该溶血剂配方简单，检测结果准确，性能稳定，可以大大降低各级临床医疗机构使用试剂的成本，降低对国外进口试剂的依赖性。

权利要求

1.一种白细胞四分群分析用溶血剂，其特征在于，该溶血剂包括助溶剂0.1-1.0 g/L、非离子表面活性剂1.0-2.0g/L、防腐剂0.3  0.5g/L及缓冲剂；

~

所述助溶剂为乙二醇苯醚；

所述非离子表面活性剂为失水山梨糖醇脂肪酸酯类和油烯基聚氧乙烯醚类；

所述非离子表面活性剂为Span 80和Brij97；所述非离子表面活性剂的用量为Span 80 

1.0 1.5 g/L、Brij97 1.2  2.0g/L。

~ ~

2.根据权利要求1所述的白细胞四分群分析用溶血剂，其特征在于，所述缓冲剂为磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲剂；所述缓冲剂的浓度磷酸二氢钾 0.5 1.0 g/L、氢氧化钠 1.0 1.5 ~ ~g/L。

3.根据权利要求1所述的白细胞四分群分析用溶血剂，其特征在于，所述防腐剂为邻苯二甲酸氢钾；所述邻苯二甲酸氢钾的用量为0.3  0.5g/L。

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4.根据权利要求1-3任一项所述的白细胞四分群分析用溶血剂，其特征在于，所述溶血剂的pH 为6.0  8.0。

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说明书

一种白细胞四分群分析用溶血剂

技术领域

[0001] 本发明涉及体外诊断试剂领域，具体涉及一种白细胞分析用溶血剂。

背景技术

[0002] 正常的外周血白细胞(WBC)中一般分为五个亚群，即淋巴细胞（LYM）、单核细胞（MON）、中性粒细胞（NEU）、嗜酸性粒细胞（EOS）和嗜碱性粒细胞（BASO）。且这些白细胞亚群各自以一定的比例存在。但是，当受试者存在疾病时，特定的血细胞数会增加或减少。所以，在临床检验领域，通过白细胞的分类计数，可用于一些疾病的辅助诊断。

[0003] 五分类血液分析仪能够检测出上述五个亚群的白细胞。这五个亚群白细胞的检测在五分类血液分析仪中通常是在两个通道内进行检测。一个通道内检测白细胞(WBC)总数及嗜碱性粒细胞的总数；另外一个通道内检测另外四种白细胞亚群的数量，即淋巴细胞（LYM）、单核细胞（MON）、中性粒细胞（NEU）、嗜酸性粒细胞（EOS）。

[0004] 在检测白细胞（WBC）四个亚群即淋巴细胞（LYM）、单核细胞（MON）、中性粒细胞（NEU）、嗜酸性粒细胞（EOS）的过程中，需要用到一种专用的溶血素，其作用是溶解红细胞，使白细胞的细胞膜穿孔，便于染料进入细胞核进行染色，根据染色后的细胞被激光照射后的散射光及激发出的荧光强度的不同，检测分辨出上述四种白细胞亚群。

[0005] 我国目前在临床应用中五分类血液分析仪仍然是以进口品牌为主，其配套试剂包括白细胞四分群溶血素价格昂贵, 运输不便等问题便日益突出。由此给广大医疗机构带来成本上、使用不便等的困扰。因此开发一种配方简易，成本较低，能够代替进口试剂上机使用的白细胞四分群分析用溶血剂，降低对国外进口试剂的依赖性，是十分必要的。

发明内容

[0006] 为了解决上述技术问题，本发明提供了一种适用于五分类血液分析仪的白细胞四分群分析用溶血剂。

[0007] 本发明的技术方案如下：

[0008] 本发明提供了一种白细胞四分群分析用溶血剂，该溶血剂包括助溶剂0.1-1.0 g/L、非离子表面活性剂1.0-2.0g/L、防腐剂0.3  0.5g/L及缓冲剂。~

[0009] 进一步的，所述助溶剂为苯醚类；优选的助溶剂为乙二醇苯醚。

[0010] 进一步的，所述非离子表面活性剂为失水山梨糖醇脂肪酸酯类和油烯基聚氧乙烯醚类；优选的非离子表面活性剂为Span 80和Brij97；所述非离子表面活性剂的用量为Span 80 1.0 1.5 g/L、Brij97 1.2  2.0g/L。
~ ~

[0011] 进一步的，所述缓冲剂为磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲剂；所述缓冲剂的浓度磷酸二氢钾 0.5 1.0 g/L、氢氧化钠 1.0 1.5 g/L。~ ~

[0012] 进一步的，所述防腐剂为邻苯二甲酸氢钾；所述邻苯二甲酸氢钾的用量为0.3 ~0.5g/L。

[0013] 本发明提供的溶血剂的pH 为6.0  8.0。~

[0014] 本发明中，助溶剂不仅可以增加表面活性剂的水溶性同时也有裂解细胞和溶解红细胞的作用；非离子表面活性剂参与红细胞的溶解，同时保持白细胞的形态以进行白细胞分类计数。所述缓冲剂用于调节溶血剂的pH。所述防腐剂可以增加溶血剂的稳定性及抗菌性。

[0015] 本发明的有益效果是：本发明的白细胞四分群分析用溶血剂，是适用于对白细胞进行五分类分析用的血细胞分析仪，该溶血剂配方简单，检测结果准确，性能稳定，可以大大降低各级临床医疗机构使用试剂的成本，降低对国外进口试剂的依赖性。

具体实施方式

[0016] 下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。

[0017] 本发明提供一种白细胞四分群分析用溶血剂，包括阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂、缓冲剂和防腐剂。所述溶血剂主要用于五分类血细胞分析仪，可在血液分析仪检测通道内直接检测淋巴细胞（LYM）、单核细胞（MON）、中性粒细胞（NEU）、嗜酸性粒细胞（EOS），然后结合血液分析仪另外一个检测通道对白细胞总数及嗜碱性粒细胞总数的检测一起对白细胞进行五分类分析计数。

[0018] 本发明实施例中所用试剂纯度均为分析纯。

[0019] 本发明白细胞分析用溶血剂的组成成分为：乙二醇苯醚 0.1 1.0 g/L、Span 80 ~1.0 1.5 g/L、Brij97 1.2  2.0g/L、磷酸二氢钾 0.5 1.0 g/L、氢氧化钠 1.0 1.5 g/L、邻~ ~ ~ ~
苯二甲酸氢钾 0.3  0.5g/L。
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[0020] 使用本发明的溶血剂在血液分析仪SYSMEX XN-1000上对白细胞亚群进行分类计数，并与原装试剂检测结果的相关性来评价本发明溶血剂的有效性和稳定性。

[0021] 实施例1

[0022] 一种白细胞四分群分析用溶血剂，配方如下：

[0023]

[0024] 按上述表格配置白细胞分析用溶血剂，取5例健康人新鲜血液，在SYSMEX XN-1000 血液分析仪上分别用原装进口和发明试剂进行测试, 对白细胞分类计数结果进行比较。实验结果如表1所示。

[0025] 表1 本发明制备的溶血剂在SYSMEX XN-1000血液分析仪上对白细胞分类计数结果与原装进口试剂实验结果比较；

[0026]

[0027] 为了验证发明试剂配方的稳定性，同样取5例健康人新鲜血液，对放置3个月的发明试剂进行上机检测分析，发明试剂放置3个月后与原装进口试剂对照实验结果如表2所示。

[0028] 表2

[0029]

[0030] 实施例2

[0031] 一种白细胞四分群分析用溶血剂，配方如下：

[0032]

[0033] 按上述表格配置白细胞分析用溶血剂，取5例健康人新鲜血液，在SYSMEX XN-1000 血液分析仪上分别用原装进口和发明试剂进行测试, 对白细胞分类计数结果进行比较。实验结果如表3所示。发明试剂放置3个月后与原装进口试剂对照实验结果如表4所示。

[0034] 表3 本发明试剂在SYSMEX XN-1000血液分析仪上对白细胞分类计数结果与原装进口试剂实验结果比较

[0035]

[0036] 为了验证发明试剂配方的稳定性，同样取5例健康人新鲜血液，对放置3个月的发明试剂进行上机检测分析，发明试剂放置3个月后与原装进口试剂对照实验结果如表4所示。

[0037] 表4

[0038]

[0039] 对比例1

[0040] 一种白细胞四分群分析用溶血剂，配方如下：

[0041]

[0042] 对比例2

[0043] 一种白细胞四分群分析用溶血剂，配方如下：

[0044]

[0045] 将实施例1-2及对比例1-2制备的溶血剂在SYSMEX XN-1000全自动五分类血液分析仪上进行白细胞分类计数，设置对照组，对照组使用的溶血剂为原装配套溶血剂，对白细胞分类计数效果进行比较。结果如表5所示。

[0046] 表5

[0047]

[0048] 由表可见，按照本发明所配制白细胞分析用溶血剂，完全可以代替原装试剂在SYSMEX XN-1000全自动五分类血液分析仪上进行白细胞分类计数。同时由对比例可见，两种非离子表面活性剂复配比单一的效果更好。即本发明所述的一种白细胞分析用溶血剂的效果更优。