神经肽B23/W23和吗啡联合在制备镇痛药物中的应用

摘要

本发明公开了一种神经肽B23/W23和吗啡联合在制备镇痛药物中的应用以及神经肽B23/W23在制备抑制吗啡引起的便秘/奖赏作用药物中的应用，其中，所述神经肽B23/W23和吗啡的用量比为1：1。本发明达到相同镇痛效果的同时，所需要的吗啡或者神经肽B23/W23的剂量大大降低；且本发明达到镇痛效果的同时，有效降低了吗啡导致的便秘和奖赏作用。

权利要求

1.神经肽B23和吗啡联合在制备镇痛药物中的应用，其特征在于：所述神经肽B23和吗啡的用量比为1：1。

说明书

神经肽B23/W23和吗啡联合在制备镇痛药物中的应用

技术领域

[0001] 本发明属于医药技术领域，特别是涉及神经肽B23/W23和吗啡联合在制备镇痛药物中的应用以及神经肽B23/W23在制备抑制吗啡引起的便秘/奖赏作用药物中的应用。

背景技术

[0002] 尽管有很多新型的治疗慢性疼痛的策略被发明，但是阿片类药物依然是临床上用于治疗疼痛的主要药物。虽然阿片类药物被广泛应用，但是在应用过程中产生的一系列副作用大大限制了阿片类药物的应用范围：

[0003] 1、长时间的阿片药物治疗引起痛觉过敏和耐受，在这种情况下，临床上往往采用加大药物剂量来达到治疗疼痛的目的。

[0004] 2、大剂量的阿片类药物会增加副作用的风险，例如呼吸抑制，恶心，便秘，奖赏作用和依赖。

[0005] 因此利用药物的协同作用激活多个药物靶点可以使较低剂量的药物达到较好的治疗疼痛的效果，但是现有的一些与阿片类药物联合使用的处方药物例如醋氨酚，非甾体类消炎药等也存在很多副作用：

[0006] 1、利用非甾体类消炎药与阿片联合治疗慢性疼痛增加了药物滥用的发生几率，很多成年人将这类药物用于非医疗目的；

[0007] 2、这类药物的联合使用会造成严重的肝脏和肾脏损伤。

发明内容

[0008] 本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

[0009] 鉴于上述和/或现有制备吗啡镇痛治疗药物及制备抑制吗啡治疗副作用药物中存在的问题，提出了本发明。

[0010] 因此，本发明其中的一个目的是提供神经肽B23和吗啡联合在制备镇痛药物中的应用。

[0011] 作为本发明所述神经肽B23和吗啡联合在制备镇痛药物中的应用的一种优选方案，其中：所述神经肽B23和吗啡的用量比为1：1。

[0012] 本发明其中的另一个目的是提供神经肽W23和吗啡联合在制备镇痛药物中的应用。

[0013] 作为本发明所述神经肽W23和吗啡联合在制备镇痛药物中的应用的一种优选方案，其中：所述神经肽W23和吗啡的用量比为1：1。

[0014] 本发明其中的再一个目的是提供神经肽B23在制备降低吗啡引起的便秘药物中的应用。

[0015] 作为本发明所述神经肽B23在制备降低吗啡引起的便秘药物中的应用的一种优选方案，其中：所述神经肽B23和吗啡的用量比为1：1。

[0016] 本发明其中的第四个目的是提供神经肽W23在制备降低吗啡引起的便秘药物中的应用。

[0017] 作为本发明所述神经肽W23在制备降低吗啡引起的便秘药物中的应用的一种优选方案，其中：所述神经肽W23和吗啡的用量比为1：1。

[0018] 本发明其中的第五个目的是提供神经肽B23/W23在制备抑制吗啡引起的奖赏作用药物中的应用。

[0019] 作为本发明所述神经肽B23/W23在制备抑制吗啡引起的奖赏作用药物中的应用的一种优选方案，其中：所述神经肽B23/W23和吗啡的用量比为1：1。

[0020] 本发明的有益效果：

[0021] 1、本发明达到相同镇痛效果的同时，所需要的吗啡或者神经肽B23/W23 的剂量大大降低；

[0022] 2、本发明达到镇痛效果的同时，有效降低了吗啡导致的便秘和奖赏作用。

附图说明

[0023] 为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：

[0024] 图1为本发明吗啡-神经肽B23、吗啡-神经肽W23的相互作用的福尔马林实验示意图，图中，A表示吗啡所产生剂量依赖性镇痛作用的时效曲线；B表示 NPB23所产生剂量依赖性镇痛作用的时效曲线；C和D表示吗啡：NPB23(1:1) 产生剂量依赖性镇痛作用的时效曲线；E表示NPW23所产生剂量依赖性镇痛作用的时效曲线；F和G表示吗啡：NPB23(1:1)产生剂量依赖性镇痛作用的时效曲线；

[0025] 图2为本发明吗啡-神经肽B23、吗啡-神经肽W23的相互作用的等辐射分析示意图，图中A和B表示吗啡：NPB23(1:1)在福尔马林实验象限1和2中的等辐射分析；C和D表示吗啡：NPW23(1:1)在福尔马林实验象限1和2中的等辐射分析。

[0026] 图3为本发明吗啡-神经肽B23、吗啡-神经肽W23的相互作用的神经病理性疼痛实验示意图，图中，A表示吗啡所产生剂量依赖性镇痛作用的时效曲线；B 表示NPB23所产生剂量依赖性镇痛作用的时效曲线；C表示吗啡：NPB23(1:1) 产生剂量依赖性镇痛作用的时效曲线；D吗啡：NPB23(1:1)在神经病理性疼痛中的等辐射分析；E表示NPW23所产生剂量依赖性镇痛作用的时效曲线；F 表示吗啡：NPW23(1:1)产生剂量依赖性镇痛作用的时效曲线；G表示吗啡： NPW23(1:1)在神经病理性疼痛中的等辐射分析。

[0027] 图4为本发明吗啡-神经肽B23、吗啡-神经肽W23的相互作用的条件位置依赖实验示意图，图中，A表示NPB23产生条件位置依赖的剂量依赖曲线；B表示NPW23产生条件位置依赖的剂量依赖曲线；C表示NPB23降低吗啡导致的条件位置依赖；D表示NPW23降低吗啡引起的条件位置依赖。

[0028] 图5为本发明吗啡-神经肽B23、吗啡-神经肽W23的相互作用的条件位置依赖实验示意图，图中，A表示表示NPB23产生便秘的剂量依赖曲线；B表示 NPW23产生便秘的剂量依赖曲线；C表示表示NPB23降低低剂量吗啡(2μg)导致的便秘；D表示NPB23对高剂量吗啡(10μg)导致的便秘无抑制效果；E表示NPW23降低低剂量吗啡(2μg)导致的便秘；F表示NPB23对高剂量吗啡(10μg) 导致的便秘无抑制效果。

[0029] 图6为本发明吗啡-神经肽B23、吗啡-神经肽W23的相互作用的等辐射分析示意图，图中A表示吗啡：NPB23(1:3)在神经病理性疼痛中的等辐射分析；B 表示吗啡：NPW23(1:3)在神经病理性疼痛中的等辐射分析。

具体实施方式

[0030] 为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。

[0031] 在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。

[0032] 其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。

[0033] 实施例1福尔马林实验

[0034] 将大鼠放入格子中适应半小时后，鞘内注射NPB23(1,5,7,10μg)，NPW23 (1,5,7,10μg)，吗啡(1,5,10,15μg)，以及吗啡：NPB23(1：1,1.67，3.34，6.68, 13.36μg),吗啡：
NPW23(1：1,1.64，3.38，6.56,13.13μg)后，足底注射50微升 5％福尔马林后立即放入透明盒子中，观察大鼠在1小时内每间隔5分钟记录1 分钟内添，甩足的次数。

[0035] 参照图1和图2，为了研究吗啡-神经肽B23，吗啡-神经肽W23的相互作用，进行了福尔马林实验，从剂量依赖曲线中可以看出，联合使用药物比单独使用药物出现明显的左移，这就暗示，联合使用药物可能会出现协同作用。并且通过等辐射分析也可以看出，实验得到的半数有效剂量明显低于理论计算得到的半数有效剂量，这就说明吗啡-神经肽B23，吗啡-神经肽W23在急性炎性痛中存在协同作用。

[0036] 表1吗啡,NPB23,NPW23以及药物的联合使用在急性炎性痛和神经病理性疼痛中的镇痛效应。

[0037]

[0038] 实施例2神经病理性疼痛实验

[0039] 将大鼠坐骨神经结扎后饲养6天，鞘内注射NPB23(1，5，7，10μg)， NPW23(1，5，7，10μg)，吗啡(1，3，5，7μg)，以及吗啡：NPB23(1： 1,1.075，2.15，4.3,8.6μg),吗啡：NPW23(1：1,1.2，2.4，4.8，9.6μg)后，利用Von Frey记录大鼠50％的缩足阈值。

[0040] 将大鼠坐骨神经结扎后饲养6天，鞘内注吗啡：NPB23(1：3,2.3，4.63，9.25, 18.5μg),吗啡：NPW23(1：3,2.65，5.3，10.6，21.2μg)后，利用Von Frey记录大鼠50％的缩足阈值。

[0041] 运用坐骨神经结扎模型，研究神经肽B23或者神经肽W23是否会影响吗啡对机械性痛敏的抑制作用，如图3，同样的从剂量依赖曲线中可以看出联合使用药物比单独使用药物出现了明显的左移，指示了协同左右出现的可能性。等辐射分析结果显示，吗啡-神经肽B23，吗啡-神经肽W23在坐骨神经结扎引起的机械异常性疼痛中具有协同作用。

[0042] 为了检测其他药物配比是否能达到较好的协同镇痛效果，我们还利用神经病理性疼痛模型检测药物配比为1：3时的镇痛效果并进行了等辐射分析，如图 6，通过等辐射分析可以看出，实验得到的半数有效剂量与理论计算得到的半数有效剂量相近，无明显差异，这就说明吗啡-神经肽B23，吗啡-神经肽W23以 1:3的比例联合使用时不具有明显的协同作用，仅是叠加作用。

[0043] 实施例3条件性位置偏爱实验(CPP)的实验模型装置、操作过程及实验结果[0044] 总共三个格子。左右两个大格子(30×30×30cm)被中间的小间(5×20×20 cm)分开。两个大格子底部开一个5×5的小门供小鼠出入，小门可以关闭，大鼠出入大格子的时候，用“Π”形的套管连接两个小门，防止小鼠在中间的格子中逗留。按照如下的方法修饰格子，造成视觉和触觉的差异：一个大格子的墙壁及顶部贴上黑白相间的条纹(黑2mm，白18mm)，底部为粗糙的铁丝网地板；另一个大格子的墙壁和顶部贴上白底黑色斑点(直径
10mm，间隔10mm)，底部为光滑的有机玻璃地板。

[0045] 第一天：测基础值。休息至少3天，挑选行为、体态以及活性正常的侧脑室埋管大鼠。CPP装置清洗干净，将小门打开使得大鼠可以在两个格子之间自由移动。将小鼠放入CPP盒，测其在两个格子中停留的时间。测定总时间为 15min。测定后删除在某个格子中逗留时间超过60％的小鼠。挑选出的大鼠编号。

[0046] 第二到四天：训练。将CPP盒的小门关闭，使得大鼠不能离开所处的格子。早上(9：00-12：00)，大鼠侧脑室注射生理盐水，然后立即置于斑点格子中训练15min。下午(15：00-
18：00)，大鼠鞘内注射NPB23(2,5,10μg),NPW23 (2,5,10μg)，吗啡(2μg)以及吗啡(2μg)+NPB23(2μg)，吗啡(2μg)+NPW23 (2μg)，然后立即置于条纹格子中训练15min。保持大鼠接受注射的时间在每一天是固定的，连续训练三天。

[0047] 第五天：评价CPP表现。同第一天一样，测定给药后大鼠在每个格子中的逗留时间。

[0048] CPP实验结果用CPP得分(CPP score)来表示。CPP得分的定义为第五天大鼠在药物关联格子(即本实验的条纹格子)中的逗留时间减去第一天大鼠在药物关联格子中的逗留时间。实验数据用平均值±标准误差表示，并用单因素方差方法(one-way ANOVA的Tukey HSD检验)进行分析和统计，*P<0.05， **P<0.01，***P<0.001表示药物处理组的CPP得分与盐水对照组相比，大鼠条件位置偏爱或厌恶有差异。生理盐水组为空白溶剂对照组，吗啡的药物浓度为2μg，NPB23的药物浓度为2，5，10μg，NPW23的药物浓度分别为2，5， 10μg。每组大鼠数为5-6只。

[0049] 吗啡在发挥镇痛作用的同时还会导致奖赏效应，为了研究神经肽B23或者神经肽W23是否会降低吗啡引起的奖赏效应，我们进行了条件性位置偏爱实验 (CPP)，如图4，实验结果表明虽然神经肽B23/W23能够剂量依赖的导致奖赏效应，但是在低剂量(2微克)的条件下不能明显引起奖赏效应，并且低剂量(2 微克)的神经肽B23/W23能明显降低吗啡引起的奖赏效应。

[0050] 实施例4胃肠道运输功能检测

[0051] 大鼠自有进食16小时后，鞘内注射NPB23(2,5,10μg),NPW23(2,5,10μg)，吗啡(2，10μg)以及吗啡(2，10μg)+NPB23(2μg)，吗啡(2，10μg)+NPW23 (2μg)，15分钟后给大鼠使用
5％碳及10％阿拉伯胶，30分钟后将大鼠处死，

[0052] 取下从幽门到盲肠段的小肠，测量碳混合物膳食的移动距离。

[0053] 吗啡的另一个经常发生的副作用是便秘，因此我们还利用胃肠通过实验 (GIT)研究了联合用药是否会降低吗啡引起的便秘，如图5，实验结果表明虽然神经肽B23/W23能够剂量依赖的导致便秘，但是在低剂量(2微克)的条件下不能明显引起便秘，并且低剂量(2微克)的神经肽B23/W23能明显降低低剂量(2微克)吗啡引起的便秘。

[0054] 但是这种降低作用在高剂量(10微克)吗啡中是不存在的，因为吗啡和神经肽B23/W23联合使用存在协同镇痛的作用，所以在疼痛治疗中会显著降低吗啡的用药剂量，因此，联合用药会明显降低吗啡引起的便秘。

[0055] 由此可见，本发明达到相同镇痛效果的同时，所需要的吗啡或者神经肽 B23/W23的剂量大大降低；且本发明达到镇痛效果的同时，有效降低了吗啡导致的便秘和奖赏作用。

[0056] 应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。