一种用于防治牙龈炎的药物及其制备方法

摘要

本发明提供一种3‑硝基‑8‑取代‑2H‑苯并吡喃类化合物、其制备方法及其在制备防治牙龈炎和由脆弱拟杆菌ATCC 25285或躯体普氏菌ATCC 33547引起的疾病药物中的用途，属于药物化学领域。本发明通过化学合成方法制备了一系列化合物，通过质谱和核磁共振氢谱确定了结构看，并对牙龈炎的常见致病菌脆弱拟杆菌ATCC 25285或躯体普氏菌ATCC 33547的进行了抑菌活性试验研究，发现本发明提供的新型化合物与阳性对照环丙沙星活性相当甚至优于环丙沙星，有望进一步开发成为牙龈炎治疗药物。

权利要求

1.一种防治牙龈炎的药物组合物在制备治疗或预防抑制脆弱拟杆菌 ATCC 25285或躯体普氏菌ATCC 33547引起的疾病药物中的应用，所述的药物组合物包含3‑硝基‑8‑取代‑

2H‑苯并吡喃类化合物以及一种或多种药学上可接受载体或赋形剂；所述的药物组合物选自漱口制剂以及凝胶类牙周袋给药缓控释制剂；所述控释制剂的包材选自：聚乳酸羟基乙酸、聚乙二醇、聚酸酐、聚酰胺、聚酯、聚烯、聚醚、聚磷腈或聚糖中的一种或多种的天然或合成的高聚物，或是天然或合成的磷脂、类脂或其组合；

所述化合物选自下列化合物：

说明书

一种用于防治牙龈炎的药物及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明属于医药技术领域，特别是涉及一种3‑硝基‑8‑取代‑2H‑苯并吡喃类化合物及其在制备防治牙龈炎的药物中的用途。

背景技术

[0002] 牙龈炎是指牙齿组织在致病因素的作用下而发生的急、慢性炎症。医学上将围绕并覆盖在牙齿周围及槽突表面的口腔粘膜称之牙龈。由于几乎每人在一生的某个时期均会发生程度和范围不等的慢性牙龈炎，完全有理由说：牙龈炎是人类最常见的疾病。

[0003] 患有牙龈炎，齿龈会红肿，或有出血现象。若刷牙时发觉牙齿容易出血，或牙齿有触痛情况，便需要看牙科医生。牙龈炎有各种类型，但最常见的、发病率最高的是慢性单纯性龈炎，这种牙龈炎又称为不洁性龈炎、边缘性龈炎，通常所说的牙龈炎就是慢性单纯性龈炎。慢性单纯性龈炎只侵犯牙龈组织，不侵犯其他牙周组织。这种龈炎是由于龈缘附近牙面上的菌斑引起的一种慢性炎症，病因明确，在儿童和青少年中较普遍，患病率在70％‑90％左右，4‑5岁以前通常不发生龈炎，大多数从5岁开始，随着年龄的增长，其患病率和严重性也逐渐增加，到青春期达高峰，青春期过后，牙龈炎的患病率随年龄的才长而缓慢下降，成年人牙龈炎患病率较低。

[0004] 轻度的慢性单纯性牙龈炎所侵犯的是游高龈和龈乳头，严重者可侵犯附着龈、前牙区，尤以下颌前牙炎症明显。咬水果或刷牙时，牙龈出血。健康的牙龈即使用力刷牙，不会发生出血。正常的游离龈是很薄且紧贴牙面，牙龈有炎症时，龈缘充血发红、肿胀、松软，龈缘变厚，牙间乳头变为钝圆，与牙面不紧贴，而且龈沟加深，严重者附着龈可因组织水肿，点彩消失，表面光亮，龈缘可有糜烂或肉芽增生，龈袋溢脓。龈炎进一步发展，牙龈大量毛细血管增生扩张、高度充血，大量炎症细胞和组织液渗出，导致牙龈肥大，可覆盖部分牙冠，此时牙龈呈深红或暗红，探诊极易出血。病程较长者，可导致牙龈纤维增殖，牙龈增生突起，此时牙龈颜色轻度发红或接近正常，质地较硬，出血较少。本病由于只侵犯牙龈，不侵犯其他牙周组织，所以牙齿不发生松动，X光片检查牙槽骨、牙周膜、牙骨质无异常。

[0005] 自我诊断牙龈炎的简单方法是观察牙龈的色泽、质地以及有无出血表现；正常牙龈呈粉红色，质地柔韧致密，表面存在点状色彩。如果牙龈呈暗红色，质地柔软肿胀，表面色彩消失，进食、刷牙、触碰时容易出血，此时即可作出牙龈炎的诊断。除上述体征外，部份患者存在牙龈发痒、发胀及口臭的自觉症状。

[0006] 牙龈炎的主要病因是口腔卫生不良，导致牙菌斑、牙结石及软垢在龈缘附近牙面沉积，从而诱发牙龈炎。若不及时治疗，牙龈炎可逐渐发展为牙龈炎，最终导致全口开牙松动及丧失。

[0007] 对于牙龈炎的药物治疗，主要包括抗生素类药物和免疫调节类药物。抗生素类药物又分为局部用药和全身用药。局部用药是指在对牙龈炎进行治疗时，对口腔局部治疗时可使用局部冲洗、含漱口水、涂布或是缓释等方法。在现在我们常使用的洁牙机可以将药品进行直接的放置，在进行超声龈下治疗的同时间药直接送达到患处进行冲洗，并可以持续给药，在一定的程度上使超声治疗的效果提升了，并达到患者所需的治疗效果。全身用药是指在对牙龈炎进治疗时，使用全身用药的主要的原因是对全身系统疾病进行治疗，比如说，免疫系统疾病、糖尿病、风湿性心脏病和人工瓣膜植入的病人，或者是在进行基础治疗时效果不明显的患者，还有就是在治疗中极易引起感染的病人。在临床治疗中主要使用的是含有硝基咪唑类的药物，具体的药品有：替硝锉、甲硝唑和奥硝唑；还可以使用四环素类药物，具体的药品有：多西环素、四环素和米诺环素；在治疗中青霉素类药物也是常使用的，具体的药品有：阿莫西林；大环内酯类药物在治疗中也较常使用，具体的药品有：罗红霉素、螺旋霉素和阿奇霉素。在进行临床治疗的过程中，经常使用的是联合用药的方式来巩固治疗的效果，可以防止细菌产生耐药性。

[0008] 免疫调节类药物主要有以下几类：(1)多西环素和化学修饰性四环素。通过研究我们可以发现，在使用SPR治疗时，可以使用多西环素和化学修饰性四环素进行辅助性的治疗，使用的方法是每日两次，每次使用二十毫克，这种方法可以减轻患者的病痛。(2)非甾体类抗炎药物。非甾体类抗炎药物的抗炎作用主要是通过阻断花生四烯酸转变为代谢的途径。在临床中常使用的药物有布洛芬、吲哚美辛等。牙龈炎的病理变化主要体现在牙槽骨吸收，在牙龈炎发生病变和牙槽骨的吸收时可以起到重要作用的是前列腺素。要想在一定程度上控制前列腺素的分泌，可以使用NSAID，在一定程度上可以对牙周病进行治疗；但是这类药物也有一定的缺点，在临床上较少使用，需要在临床上对不良反应和治疗效果进行评估。(3)阿齐霉素。阿奇霉素中的主要成分是十五元环内脂类抗生素，可以有效的治疗中重度牙龈炎。(1)其主要的优点是使用的疗程短并可以有效的对抗革兰阴性菌；(2)阿奇霉素可以更好的长期的起到抗炎的作用。巨噬细胞的变态反应是导致牙龈炎患病的主要原因，炎性细胞因子的产生主要是因为细菌产物和脂多糖对巨噬细胞的刺激，阿奇霉素在治疗牙龈炎的过程中可以发挥出有效的作用；(3)阿奇霉素对牙周组织进行治疗时可以达到较好的效果，帮助牙周组织的重建。阿奇霉素可以很好的控制免疫系统功能，但是如果服用小剂量多西环素，长期服用会给病人带来不良的反应，效果没有阿奇霉素明显。上述药物或是治疗效果不明显，或是存在一定的副作用，因此开发新型的用于防治牙龈炎的药物具有十分重要的意义。

发明内容

[0009] 本发明提供一种用于防治牙龈炎的药用化合物，其特征在于所述化合物具有式I的结构：

[0010]

[0011] 其中，R1选自H、F、Cl、Br、硝基、甲基，R2选自甲氧基、乙氧基或三氟甲氧基。

[0012] 优选地，R1选自H、Cl或Br，R2选自甲氧基、乙氧基或三氟甲氧基。

[0013] 优选地，所述化合物选自下列化合物：

[0014]

[0015] 此外，本发明还提供一种防治牙龈炎的药物组合物，包含上述3‑硝基‑8‑取代‑2H‑苯并吡喃类化合物以及一种或多种药学上可接受载体或赋形剂。

[0016] 优选地，所述的药物组合物剂型选自片剂、胶囊、丸剂、注射剂、漱口制剂以及凝胶类牙周袋给药缓控释制剂。

[0017] 优选地，所述控释制剂的包材选自：聚乳酸羟基乙酸、聚乙二醇、聚酸酐、聚酰胺、聚酯、聚烯、聚醚、聚磷腈或聚糖中的一种或多种的天然或合成的高聚物，或是天然或合成的磷脂、类脂或其组合。

[0018] 优选地，所述药物组合物选自漱口类制剂。

[0019] 此外，本发明还提供上述化合物或药用组合物在制备治疗或预防牙龈炎药物中应用。

[0020] 以及所述的化合物或药用组合物在制备治疗或预防抑制脆弱拟杆菌ATCC 25285或躯体普氏菌ATCC 33547引起的疾病药物中的应用。

[0021] 本发明涉及以本发明化合物作为活性成份的药物组合物。该药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过将本发明化合物与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅剂结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。本发明化合物在其药物组合物中的含量通常为0.1‑95重量％。

[0022] 本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为口服或含漱或注射等本领域常见形式。

[0023] 给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。

[0024] 本发明的化合物可以制成普通制剂、也制成是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。

[0025] 为了将本发明化合物制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等；粘合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。

[0026] 还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。

[0027] 为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分本发明化合物与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备本发明化合物片剂的各稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备本发明化合物的胶囊剂。

[0028] 将本发明化合物制成注射剂，可以用水、乙醇、异丙醇、丙二醇或它们的混合物作溶剂并加入适量本领域常用的增溶剂、助溶剂、pH调剂剂、渗透压调节剂。增溶剂或助溶剂可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羟丙基‑β‑环糊精等；pH调剂剂可以是磷酸盐、醋酸盐、盐酸、氢氧化钠等；渗透压调节剂可以是氯化钠、甘露醇、葡萄糖、磷酸盐、醋酸盐等。如制备冻干粉针剂，还可加入甘露醇、葡萄糖等作为支撑剂。

[0029] 此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。

[0030] 为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。

[0031] 本发明化合物的药物组合物的给药剂量依照所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的个体情况，给药途径和剂型等可以有大范围的变化。一般来讲，本发明药物组合物的每天的合适剂量范围为0.001‑150mg/Kg体重，优选为0.01‑100mg/Kg体重。上述剂量可以一个剂量单位或分成几个剂量单位给药，这取决于医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。

[0032] 本发明的化合物或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用。

[0033] 当本发明的药物组合物与其它治疗药物存在协同作用时，应根据实际情况调整它的剂量。

具体实施方式

[0034] 实施例1：3‑硝基‑8‑甲氧基‑2H‑苯并吡喃的制备

[0035] 将3‑甲氧基水杨醛(100毫摩尔)溶于800毫升甲苯中，加入二丁基胺(12.9克，100毫摩尔)，邻苯二甲酸酐(29.6克，200毫摩尔)，加热回流，12小时内15次加入硝基乙醇(11.8克，130毫摩尔)，继续反应24小时，TLC监测反应结束；蒸除溶剂，柱层析纯化得化合物1。

[0036] 实施例2：3‑硝基‑8‑乙氧基‑2H‑苯并吡喃的制备

[0037] 将3‑乙氧基水杨醛(100毫摩尔)溶于800毫升甲苯中，加入二丁基胺(12.9克，100毫摩尔)，邻苯二甲酸酐(29.6克，200毫摩尔)，加热回流，12小时内分15次加入硝基乙醇(11.8克，130毫摩尔)，继续反应24小时，蒸除溶剂，柱层析得化合物2。

[0038] 实施例3：3‑硝基‑8‑三氟甲氧基‑2H‑苯并吡喃的制备

[0039] 将3‑三氟甲氧基水杨醛(100毫摩尔)溶于800毫升甲苯中，加入二丁基胺(12.9克，100毫摩尔)，邻苯二甲酸酐(29.6克，200毫摩尔)，加热回流，12小时内分15次加入硝基乙醇(11.8克，130毫摩尔)，继续反应24小时，蒸除溶剂，柱层析得化合物3。

[0040] 实施例4：3‑硝基‑6‑氯‑8‑甲氧基‑2H‑苯并吡喃的制备

[0041] 将5‑氯‑3‑甲氧基水杨醛(100毫摩尔)溶于800毫升甲苯中，加入二丁基胺(12.9克，100毫摩尔)，邻苯二甲酸酐(29.6克，200毫摩尔)，加热回流，12小时内分15次加入硝基乙醇(11.8克，130毫摩尔)，继续反应24小时，蒸除溶剂，柱层析得化合物4。

[0042] 实施例5：3‑硝基‑6‑氯‑8‑三氟甲氧基‑2H‑苯并吡喃的制备

[0043] 将5‑氯‑3‑甲氧基水杨醛(100毫摩尔)溶于800毫升甲苯中，加入二丁基胺(12.9克，100毫摩尔)，邻苯二甲酸酐(29.6克，200毫摩尔)，加热回流，12小时内分15次加入硝基乙醇(11.8克，130毫摩尔)，继续反应24小时，蒸除溶剂，柱层析得化合物5。

[0044] 实施例6：3‑硝基‑6‑溴‑8‑乙氧基‑2H‑苯并吡喃的制备

[0045] 将5‑溴‑3‑乙氧基水杨醛(100毫摩尔)溶于800毫升甲苯中，加入二丁基胺(12.9克，100毫摩尔)，邻苯二甲酸酐(29.6克，200毫摩尔)，加热回流，12小时内分15次加入硝基乙醇(11.8克，130毫摩尔)，继续反应24小时，蒸除溶剂，柱层析得化合物6。

[0046] 上述实施例1‑6制备的化合物1‑6，其质谱和核磁数据见表1：

[0047]

[0048] 实施例7

[0049] 本实施例提供一种用于治疗牙龈炎的含漱剂，其制备方法包括：

[0050] a.备料：实施例1所合成的化合物1称取1g、聚山梨酯15g、双脱乙醇8g、单氟磷酸钠0.03、葡萄糖酸氯己定0.3g、丙三醇3g、及聚氧乙烯氯化蓖麻油0.5g。

[0051] b.乳化反应：将上述原料中的各组分混合并分散在100g的纯化水中，并在80℃下搅拌30min，用碱调节pH至6.5之间，过滤后即得漱口水。

[0052] 实施例8

[0053] 本实施例提供一种用于治疗牙龈炎的膜片剂，其制备方法包括：

[0054] a.称取15g实施例2制备的化合物2和10g的甘油，溶解于800g的水中，接着加入3g的交联剂得到混合液。将混合液加热至52℃后，将12mL的混合液转移至直径为3.5cm的培养皿中，在带有强空气对流的干燥箱中30℃干燥48h，接着置于烘箱中30℃干燥24h，得到薄膜。

[0055] b.采用传统的打孔技术对薄膜进行裁剪，得到直径为3.5cm的牙龈炎治疗膜片。将得到的牙龈炎治疗膜片边缘干燥后封装保存在湿度为11％～21％的环境中。

[0056] 实施例9

[0057] 本实施例提供了本发明化合物在制备体外抑制脆弱拟杆菌ATCC 25285的药物中的用途的研究

[0058] 抑菌试验

[0059] 使用实施例1‑6制备的化合物，采用本领域中经典的滤纸片法来进行抑菌试验，其中：供试菌种脆弱拟杆菌ATCC 25285购自上海桑戈生物科技有限公司。

[0060] 培养液

[0061] 营养琼脂和营养肉汤，购自北京中科晨宇实验设备有限公司。

[0062] 试验方法

[0063] 将脆弱拟杆菌ATCC 25285接种于琼脂平板营养液平面上，接种时均匀密布。

[0064] 分别称取目标化合物0.01克，加入15000毫升无菌水，超声30分钟，然后0.22μm的微孔滤膜过滤，得到溶液。镊取直径3mm的无菌圆形滤纸片，喷洒上述溶液至完全润湿，贴在已接种细菌的琼脂平板营养液平面上。将琼脂平板置于37℃的培养箱内，温育18小时。测量抑菌环的直径。测定3次取平均值。测量结果见下表2，单位mm。

[0065] 表2化合物1‑6体外抑制脆弱拟杆菌ATCC 25285的研究

[0066]

[0067] 由抑菌实验可以看出化合物5对脆弱拟杆菌ATCC 25285的抑菌环的平均直径为17.46mm，远远优于阳性对照药环丙沙星，表明目标化合物具有极强的体外抑制脆弱拟杆菌ATCC 25285的效果。

[0068] 实施例10

[0069] 本实施例使用的躯体普氏菌ATCC 33547购自北京中原公司。本发明通过抑菌圈法来考察本发明制备的化合物的抑菌性。

[0070] 含药物滤纸片的制备

[0071] 选择吸水力强而质地均匀的滤纸，用打孔机打成6mm的圆片，分装于洁净干燥的试管内，121℃灭菌2h后烘干备用。按照实施例中所述的方法制备提取物3.5克，加入10升水，充分溶解，在无菌操作下，将做好的纸片浸于预先配置好的药物溶液中，密封置于冰箱内浸泡1h，然后于37℃烘箱内干燥，密封于4℃保存备用。

[0072] 肉汤培养基的制备

[0073] 原料：牛肉膏(3g)、蛋白胨(10g)、氯化钠(5g)、琼脂(10g)及蒸馏水(1000ml)。制法：1000ml水煮开，按比例准确加入上述成分，加热煮沸促其溶解，并补足由于蒸发失去的水分；调pH至7.4，以滤纸过滤并分装于三角瓶之中，高压锅内121℃、20min灭菌，冷却后密封置4℃冰箱中备用。

[0074] 取躯体普氏菌ATCC 33547画线于含有1重量％琼脂的肉汤培养基平板上，37℃过夜培养后，挑取单菌落，在肉汤液体培养基中37℃下活化24小时作为活化菌液。在9cm平皿中倒入15ml含1重量％琼脂的固体肉汤培养基，待凝固后，另取含有0.7重量％琼脂的肉汤培养基，熔化待温度降至约42℃时，每8ml培养基加入10μL的活化菌液，混匀后倒在固体肉汤培养基之上，待凝。取出浸有药物的滤纸片，贴于含菌培养基表面，正置40min后，于37℃倒置培养24小时后观察结果。在纸片周围出现的清晰圆环，这表示药物具有抗菌活性。分别重复三次上述操作并测定抑菌圈直径，取三次平均值

[0075] 表3化合物1‑6体外抑制躯体普氏菌ATCC33547的研究

[0076]

[0077] 由上表可知，本发明制备的化合物对于躯体普氏菌ATCC33547均具有强烈的抑制效果，有望进一步开发成药物使用。

[0078] 综上，本发明制备了一类具有3‑硝基‑8‑取代‑2H‑苯并吡喃母体结构的全新化合物，通过对牙龈炎的常见致病菌脆弱拟杆菌ATCC 25285或躯体普氏菌ATCC 33547的抑菌活性试验，发现本发明的新型化合物与阳性对照环丙沙星活性相当甚至优于环丙沙星，有望进一步开发成为牙龈炎治疗药物。

[0079] 上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。