一种烷氧基联苯/查尔酮杂合类化合物、其制备方法及医药用途

摘要

本发明涉及一种烷氧基联苯/查尔酮杂合类化合物、其制备方法及医药用途，属于药物化学和药物治疗学领域。本发明提供的式I所示的化合物或其药学上可接受的盐在制备与抗氧化有关疾病的药物方面的应用，特别是在制备抗炎药物或抗氧化药物方面的应用。

权利要求

1.式I所示的烷氧基联苯/查尔酮杂合类化合物或其药学上可接受的盐，其中，

R1代表氢原子或氰基；

R2代表下述基团：

R6代表-(CH2)nNR3R4；

R7代表氢原子或-(CH2)nNR3R4；

R3或R4分别独立地代表C1-C6烷基，或NR3R4一起形成取代或非取代的哌嗪环、吡咯环或哌啶环；其取代基选自C1-C4烷基、苯基或苄基；

n代表1-3的整数。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3或R4分别独立地代表C1-C4烷基，或NR3R4一起形成取代或非取代的哌嗪环、吡咯环或哌啶环；其取代基选自C1-C3烷基、苯基或苄基。

3.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中述化合物选自：(E)-5'-(3-(3-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3,5-二((二甲基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3-((二乙基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3-((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3,5-二((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3-((4-甲基哌嗪基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3-(((4-苯基)哌嗪基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3-((1-哌啶基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-

4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3,5-二((二乙基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(2-氰基-3-(3-((二乙基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(2-氰基-3-(3,5-二((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-

7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(2-氰基-3-(3-((1-哌啶基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯。

4.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中述化合物选自：(E)-5'-(3-(3-((二乙基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3-(((4-苯基)哌嗪基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3,5-二((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3-((1-哌啶基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-

4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3,5-二((二甲基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3-((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

(E)-5'-(3-(3-((4-甲基哌嗪基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯。

5.一种药物组合物，它以权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐为活性成分或主要活性成分，辅以药学上可接受的载体。

6.权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备与抗氧化有关疾病的药物方面的应用。

说明书

一种烷氧基联苯/查尔酮杂合类化合物、其制备方法及医药

用途

技术领域

[0001] 本发明涉及药物化学和药物治疗学领域，具体涉及一类烷氧基联苯/查尔酮杂合类化合物。该类化合物具有抗炎、抗氧化的作用。本发明还涉及该类化合物的制备方法以及含有它们的药物组合。

背景技术

[0002] 氧化应激(Oxidative Stress)是指机体细胞遭受体内外环境刺激后，氧化和抗氧化防御系统之间的平衡被破坏，从而促进细胞内活性氧分子(ROS)、活性氮(RNS)和机体脂质过氧化物的大量产生和积累，造成机体组织细胞及蛋白和核酸等生物大分子损伤。此外，氧化应激的发生又可以增加炎性细胞因子的产生，进而刺激更多自由基的产生，进一步损伤组织细胞(Biochem Pharmacol,2015,95,156-169,Br J Pharmacol,2015,172,1087-1100,Toxicol Appl Pharmacol,2015,282,129-138,Kidney Int,2013,83,1029-1041)。而近年来文献调研显示，氧化应激是导致糖尿病肾病，肿瘤，心血管，免疫以及中枢神经性疾病的重要原因(Anal Bioanal Chem,2015,407,2569-2579,Eur J Pharmacol,2017,801,9-
18,Free Radic Biol Med,2017,106,38-52)。因而，通过研究开发应对氧化应激所引起的疾病的药物对于疾病的预防和治疗具有重要意义。

[0003] 研究显示，Keap1-Nrf2-ARE是参与调控氧化应激及炎症的重要信号通路(Med Res Rev,2016,36,924-964,Sci Rep,2015,5,12377)。Nrf2(Nuclear factor erythroid 2p45-related factor 2)属于CNC亮氨酸拉链转录激活因子家族，与抗氧化反应、抗炎反应及细胞保护作用等密切有关。Keap1是Nrf2在细胞质中的结合蛋白，并与肌动蛋白结合锚定于胞浆中，其含有的IVR区富含半胱氨酸，是整个蛋白的功能调节区。稳态时，Nrf2水平主要受Keap1的负反馈调节，Keap1通过其BTB区结合泛素连接酶Cul3，将Nrf2泛素化降解到正常水平。在应激状态如氧化应激、化学应激、高氧等情况下，氧化剂或亲电体通过改变Keap1构象，扰乱Keap1与Nrf2之间的连接，使Nrf2游离出来，进入胞核与抗氧化反应元件ARE相互作用进而上调下游相关抗氧化基因如HO-1，NQO-1，SOD等的表达，发挥抗炎抗氧化的作用(Pharmacol Res,2015,91,104-114)。此外，Nrf2的激活也能够抑制核因子NF-κB的活性，从而抑制炎症的发生、发展(Bioorg Med Chem,2015,23,5352-5359,J Biol Chem,2014,289,15244-15258)。因此，Keap1-Nrf2-ARE信号通路成为了开发抗氧化及炎症小分子的重要靶标。

[0004] 研究表明，含有迈克尔受体的小分子，如查尔酮类化合物，是许多食用植物和中草药的主要成分，具有多种生物活性且安全性较高，研究发现其可通过激活Keapl-Nrf2-ARE通路，进而表现出一定的抗氧化和抗炎的活性(Org Biomol Chem,2015,13,3040-3047)。查尔酮结构中的α,β-不饱和酮结构是典型的迈克尔受体，含有该类结构的化合物通过与体内多种生物大分子亲核性基团(如Keap1中半胱氨酸残基的巯基)发生迈克尔加成反应，形成共价结合，进而调控相关信号通路，发挥疾病防治的作用(J Med Chem,2015,58,4738-4748)。并且，查尔酮结构中的迈克尔受体是一种软亲电子体，不宜被氨基、羟基类亲核体进攻，易于被巯基这类软亲核分子进攻(J Med Chem,2011,54,4147-4159)。其中研究最为深入的是齐墩果酸衍生物CDDO-Me，其通过构建两个迈克尔受体从而显示出较好的激活Nrf2活性，不过由于其三期临床出现致死案例而被迫中止(Nephrol Dial Transplant,2014,29 
119-124,J Med Chem,2016,59,2396-2409)。但其构建的迈克尔受体结构仍为设计预防DN的Nrf2激活剂提供一个新颖的思路。

[0005] 此外，研究发现含有烷氧结构的天然产物如五味子醇甲、五味子乙素、五味子丙素、联苯双脂、天然植物木蓼提取物等也具有很好的抗炎、抗氧化、抗肿瘤的生物活性(Drug Metab Dispos,2014,42,1982-1990,J Nat Prod,2016,79,3065-3071,中国药理学报,2016,37,382-389)。

[0006] 近年来对于Keap1-Nrf2-ARE发挥抗炎抗氧化作用的关注越来越多，但令人遗憾的是，真正能够进入临床用于治疗的却是很少。根据其作用机制研究，目前主要有三类药物(Journal of Medicinal Chemistry,2015,58,4738-4748)：(1)不可逆的共价药物，即通过共价键与其蛋白质靶标永久结合。此类不可逆的共价药物具有长的作用时间，高效力和高配体效率，但正是因为它们不可逆地结合于蛋白质靶标上，所以存在免疫介导的超敏反应的可能性，因此这样的药物不适用于慢性给药；(2)可逆的非共价药物，即通过非共价键(例如氢键，疏水效应和范德华力)与蛋白质靶标可逆结合。此类化合物不会形成永久性结合，因此适用于慢性给药，同时也就显示出中等的选择性和活性，以及具有较差的配体效率等缺点；(3)可逆共价药物，这类是最新的并且由于其独特性质而引起广泛的研究兴趣。目前，具有迈克尔受体的富马酸二甲酯(DMF)是Keap1/Nrf2/ARE通路的激活剂，是临床上用于治疗多发性硬化症的唯一药物。CDDO和甲基巴多索隆也属于这一类。此类化合物克服了不可逆共价和可逆非共价药物的缺点显示出较好的生物活性和化学反应性。尽管如此，由于缺乏反应性化合物与蛋白质靶标的可逆共价结合，所以可逆共价药物在很大程度上被忽视。

发明内容

[0007] 本发明的目的是在现有技术的基础上，以源自五味子丙素的烷氧基联苯类化合物联苯双酯(DDB)为先导物，在保留联苯双酯的烷氧基联苯药效团的基础上，利用新药设计的生物电子等排、骨架迁移及前药设计等原理，并通过改变迈克尔受体的电子云密度等使其更容易被Keap1的半胱氨酸残基的巯基进攻，进而设计合成了一系列具有迈克受体结构片段的烷氧基联苯/查尔酮杂合类化合物。生物活性测试结果表明，该类化合物具有显著的激活Nrf2发挥抗氧化的效应，其活性显著高于阳性对照药物。

[0008] 本发明的另一目的是提供一种上述烷氧基联苯/查尔酮杂合类化合物的制备方法。

[0009] 本发明的第三个目的是提供一种上述烷氧基联苯/查尔酮杂合类化合物在医药方面的用途。

[0010] 本发明的目的可以通过以下措施达到：

[0011] 式I所示的烷氧基联苯/查尔酮杂合类化合物或其药学上可接受的盐，

[0012]

[0013] 其中，

[0014] R1代表氢原子、氰基、硝基、羟基或卤素；

[0015] R2代表苯基、取代苯基或取代芳杂环，所述的取代苯基或取代芳杂环可任意地由下述取代基单取代或多取代：C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、羟基、卤素或-(CH2)nNR3R4；

[0016] n代表1-3的整数；

[0017] R3或R4分别独立地代表C1-C6烷基，或NR3R4一起形成取代或非取代的5至7元脂肪杂环；其取代基选自C1-C4烷基、苯基或苄基。

[0018] 在一种优选方案中，R1代表氢原子、氰基或卤素。

[0019] 在一种更优选的方案中，R1代表氢原子或氰基。

[0020] n代表1、2或3，更优选的，n代表1或2。

[0021] 在一种优选方案中，R2代表苯基、取代苯基或取代芳杂环，所述的取代苯基和取代芳杂环可任意地由下述相同或不同的取代基单取代或多取代，所述取代基为C1-C3烷氧基、羟基、卤素或-(CH2)nNR3R4，更优选的一种取代基为甲氧基、羟基或-CH2NR3R4。

[0022] 在一种优选方案中，R2代表下述基团：

[0023]

[0024] 其中，R5代表氢原子、羟基或C1-C4烷氧基；R6或R7分别独立地代表氢原子、C1-C4烷氧基、卤素或-(CH2)nNR3R4。

[0025] 在一种更优选方案中，R5代表羟基或C1-C4烷氧基；R6代表氢原子或-(CH2)nNR3R4；R7代表氢原子、C1-C4烷氧基或-(CH2)nNR3R4。

[0026] 在一种优选方案中，R3和R4可相同或不同，R3或R4分别独立地代表C1-C4烷基，或NR3R4一起形成取代或非取代的5至7元脂肪杂环；其取代基选自C1-C3烷基、苯基或苄基。

[0027] 在一种更优选方案中，R3或R4分别独立地代表C1-C3烷基，或NR3R4一起形成取代或非取代的5至7元脂肪杂环，这些5至7元脂肪杂环包括但不限于吗啉环、哌嗪环、吡咯环或哌啶环；其取代基选自C1-C3烷基、苯基或苄基，例如甲基、苯基或苄基，特别是4-甲基或苯基。

[0028] 进一步地，在通式I所述化合物或其药学上可接受的盐中，所述化合物选自下列化合物：

[0029] (E)-5'-(3-(3-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0030] (E)-5'-(3-(3,5-二((二甲基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0031] (E)-5'-(3-(3-((二乙基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0032] (E)-5'-(3-(3-((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0033] (E)-5'-(3-(3,5-二((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0034] (E)-5'-(3-(3-(吗啉甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0035] (E)-5'-(3-(3,5-二(吗啉基甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0036] (E)-5'-(3-(3-((4-甲基哌嗪基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0037] (E)-5'-(3-(3-(((4-苯基)哌嗪基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0038] (E)-5'-(3-(3-((1-哌啶基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0039] (E)-5'-(3-(3,4-二甲氧基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0040] (E)-5'-(3-(3,5-二((二乙基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0041] (E)-5'-(2-氰基-3-(3,4-二甲氧基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0042] (E)-5'-(2-氰基-3-(4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0043] (E)-5'-(2-氰基-3-(3,5-二((吗啉基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0044] (E)-5'-(2-氰基-3-(3-(吗啉甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0045] (E)-5'-(2-氰基-3-(3-((二乙基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0046] (E)-5'-(2-氰基-3-(3,5-二((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0047] (E)-5'-(2-氰基-3-(3-((1-哌啶基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；

[0048] (E)-5'-(3-(3-甲氧基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯。

[0049] 具体地讲，通式I所述化合物进一步优选自下列化合物：

[0050] (E)-5'-(3-(3-((二乙基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；(化合物编号：1a下同)[0051] (E)-5'-(3-(3-(((4-苯基)哌嗪基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；(1b)

[0052] (E)-5'-(3-(3,5-二(吗啉基甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；(1c)

[0053] (E)-5'-(3-(3,5-二((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；(1d)

[0054] (E)-5'-(3-(3-((1-哌啶基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；(1e)

[0055] (E)-5'-(3-(3-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；(1f)

[0056] (E)-5'-(3-(3,5-二((二甲基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；(1g)

[0057] (E)-5'-(3-(3-((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；(1h)

[0058] (E)-5'-(3-(3-(吗啉甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；(1i)

[0059] (E)-5'-(3-(3-((4-甲基哌嗪基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯；(1j)

[0060] (E)-5'-(3-(3-甲氧基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯。(2a)

[0061] (E)-5'-(3-(3,4-二甲氧基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯。(2b)

[0062] 本发明公开了一种通式I所示化合物的制备方法，其直接以式VII化合物为原料进行制备，具体的方法为：当R1为-H、R2为苯基或取代苯基时，通式I所示化合物的制备方法包括步骤a)或步骤b)：

[0063] 当R1为-H、R2为苯基或取代苯基时，通式I所示化合物的制备方法包括步骤a)或步骤b)：

[0064] a)式VII化合物与取代苯乙酮进行羟醛缩合反应生成通式I化合物；合成路线如下：

[0065]

[0066] b)式VII化合物先与4-羟基苯乙酮进行羟醛缩合反应生成中间产物VIII化合物，VIII化合物再与甲醛及胺经Mannich反应生成通式I化合物；合成路线如下：

[0067]

[0068] 当R1为-CN、R2为苯基或取代苯基时，通式I所示化合物的制备方法包括步骤c)或步骤d)：

[0069] c)取代苯甲酸甲酯与乙腈反应生成产物IX，然后与中间产物VII反应生成通式I化合物，合成路线如下：

[0070]

[0071] d)中间体VII和化合物3-(4-羟基苯基)-3-氧代丙腈生成化合物X，X化合物再与甲醛及胺经Mannich反应生成通式I化合物，合成路线如下：

[0072]

[0073] 其中，R为R5、R6和R7。

[0074] 本发明进一步公开了一种更具体的通式I所示化合物的制备方法：

[0075] 当R1为-H，R2为取代苯基时，通式I所示化合物的制备方法包括如下步骤：将联苯双酯水解制得式II所示化合物7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5,5'-二甲酸，式II化合物与乙酸酐反应生成式III化合物，式III化合物与甲醇进行醇解反应生成式IV化合物7,7'-二甲氧基-5'-甲氧基羰基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-甲酸，式IV化合物与咪唑反应生成式V化合物5'-(1-羰基)咪唑-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯]-5-甲酸甲酯，式V化合物经NaBH4还原生成式VI化合物5'-(1-羟基)甲基-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-甲酸甲酯，式VI化合物经PCC氧化成中间产物VII化合物5'-甲酰基-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-甲酸甲酯，合成路线如下：

[0076]

[0077] a)式VII化合物与取代苯乙酮进行羟醛缩合反应生成通式I化合物；合成路线如下：

[0078]

[0079] b)式VII化合物先与4-羟基苯乙酮进行羟醛缩合反应生成中间产物VIII化合物，VIII化合物再与甲醛及胺经Mannich反应生成通式I化合物；合成路线如下：

[0080]

[0081] 当R1为-CN、R2为苯基或取代苯基时，通式I所示化合物的制备方法包括步骤c)或步骤d)：

[0082] c)取代苯甲酸甲酯与乙腈反应生成产物IX，然后与中间产物VII反应生成通式I化合物，合成路线如下：

[0083]

[0084] d)中间体VII和化合物3-(4-羟基苯基)-3-氧代丙腈生成化合物X，X化合物再与甲醛及胺经Mannich反应生成通式I化合物，合成路线如下：

[0085]

[0086] 其中，R为R5、R6和R7。

[0087] 在由化合物Bifendate制备化合物VII或由化合物VII制备通式I化合物的反应中，所采用的溶剂有机溶剂选自二氯甲烷、乙腈、四氢呋喃、吡啶、氯仿、甲苯、二甲基亚砜或二氧六环中的一种或多种，优选采用二氯甲烷、乙腈、二氧六环或四氢呋喃；采用的反应温度为0℃至回流。

[0088] 在由化合物IV制备V反应中，所采用的缩合剂为HATU、HBTU、HOBt、EDCI、DMAP、DCC，优先采用EDCI、DMAP；采用的反应温度为室温。

[0089] 在由化合物V制备化合物VI的反应中，所采用的还原剂选自硼氢化钠、氢化锂铝，优先采用硼氢化钠；采用的反应温度为0℃至室温。

[0090] 在由化合物VI制备化合物VII的反应中，所采用的氧化剂选自二氧化锰、次氯酸钠、氯铬酸吡啶盐(PCC)或二氯铬酸吡啶盐(PDC)，优先采用氯铬酸吡啶盐(PCC)；采用的反应温度为室温。

[0091] 这些中间体或目标化合物均可按照常规分离技术加以纯化，并且根据需要将其转化为与可药用酸的加成盐。

[0092] 除非另外说明，在说明书和权利要求中使用的以下术语具有下面讨论的含义：

[0093] “药学上可接受的盐”表示保留母体化合物的生物有效性和性质的那些盐。这类盐包括：

[0094] (1)与酸成盐，通过母体化合物的游离碱与无机酸或有机酸的反应而得，无机酸包括盐酸、氢溴酸、硝酸、磷酸、偏磷酸、硫酸、亚硫酸和高氯酸等，有机酸包括乙酸、三氟乙酸、丙酸、丙烯酸、己酸、环戊烷丙酸、羟乙酸、丙酮酸、草酸、(D)或(L)苹果酸、富马酸、马来酸、抗坏血酸、樟脑酸、苯甲酸、羟基苯甲酸、γ-羟基丁酸、甲氧基苯甲酸、邻苯二甲酸、甲磺酸、乙磺酸、萘-1-磺酸、萘-2-磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸、肉桂酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、天冬氨酸、硬脂酸、扁桃酸、琥珀酸、戊二酸或丙二酸等。

[0095] (2)存在于母体化合物中的酸性质子被金属离子代替或者与有机碱配位化合所生成的盐，金属例子例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子，有机碱例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺、奎宁等。

[0096] “药物组合物”指将本发明中的化合物中的一个或多个或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或前药与别的化学成分，例如药学上可接受的载体，混合。药物组合物的目的是促进给药给动物的过程。

[0097] “药用载体”或“药学上可接受的载体”指的是对有机体不引起明显的刺激性和不干扰所给予化合物的生物活性和性质的药物组合物中的非活性成分，例如但不限于：碳酸钙、磷酸钙、各种糖(例如乳糖、甘露醇等)、淀粉、环糊精、硬脂酸镁、纤维素、碳酸镁、丙烯酸聚合物或甲基丙烯酸聚合物、凝胶、水、聚乙二醇、丙二醇、乙二醇、蓖麻油或氢化蓖麻油或多乙氧基氢化蓖麻油、芝麻油、玉米油、花生油等。

[0098] “烷基”表示1-20个碳原子的饱和的脂烃基，包括直链和支链基团(本申请书中提到的数字范围，例如“1-20”，是指该基团，此时为烷基，可以含1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等，直至包括20个碳原子)。更优选的是，烷基是有1-10个碳原子的中等大小的烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基等。最好是，烷基为有1-8或1-6个碳原子的低级烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基或叔丁基等。烷基可以是取代的或未取代的。当是取代的烷基时，该取代基优选是一或多个，更优选1-3个，最优选1或2个取代基。

[0099] “亚烷基”表示与两个基团相连接的1-20个碳原子的饱和的脂烃基，包括直链和支链基团(本申请书中提到的数字范围，例如“1-20”，是指该基团，此时为亚烷基，可以含1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等，直至包括20个碳原子)。更优选的是，亚烷基是有1-10个碳原子的中等大小的亚烷基，例如亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚2-丙基、亚正丁基、亚叔丁基、戊基等。最好是，烷基为有1-8或1-6个碳原子的低级亚烷基。亚烷基可以是取代的或未取代的。当是取代的亚烷基时，该取代基优选是一或多个，更优选1-3个，最优选1或2个取代基。

[0100] “芳香杂环”或“杂芳基”表示5至12个环原子的单环或稠合环基团，含有一个、两个、三个或四个选自N、O或S的环杂原子，其余环原子是C，另外具有完全共轭的π电子系统。未取代的杂芳基地非限制性实例有吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、噁唑、噻唑、吡唑、吡啶、嘧啶、喹啉、异喹啉、嘌呤、四唑、三嗪和咔唑。杂芳基可以是取代的或未取代的。当被取代时，取代基优选为一个或多个，更为优选为一个、两个或三个，进而更为优选一个或两个，独立地选自以下基团，包括：低级烷基、三卤烷基、卤素、羟基、低级烷氧基、巯基、(低级烷基)硫基、氰基、酰基、硫代酰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、硝基、N-磺酰氨基、S-磺酰氨基。优选的杂芳基可选地被一个或两个取代基取代，取代基独立地选自卤素、低级烷基、三卤烷基、羟基、巯基、氰基、N-酰氨基、单或二烷基胺基、羧基或N-磺酰氨基。

[0101] “杂脂环基”表示单环或稠合环基团，在环中具有5到9个环原子，其中一个或两个环原子是选自N、O或S(O)m(其中m是0至2的整数)的杂原子，其余环原子是C。这些环可以具有一条或多条双键，但这些环不具有完全共轭的π电子系统。未取代的杂脂环基的非限制性实例有吡咯烷基、哌啶子基、哌嗪子基、吗啉代基等。

[0102] “羟基”表示-OH基团。

[0103] “硝基”表示-NO2基团。

[0104] “氰基”表示-CN基团。

[0105] “烷氧基”表示-O-(未取代的烷基)和-O-(未取代的环烷基)。代表性实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。

[0106] “卤素”表示氟、氯、溴或碘，优选为氟或氯。

[0107] “卤代烷基”表示卤素取代的烷基，优选如上所定义的卤素取代的低级烷基，它被一个或多个相同或不同的卤原子取代，例如-CH2Cl、-CF3、-CH2CF3、-CH2CCl3等。

[0108] “可选”或“可选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生和不发生的场合。例如，“杂芳基可选地被一个或两个取代基取代”意味着杂芳基的取代基可以但不必是一个，该说明包括杂芳基被一个取代基取代的情形和杂芳基被两个取代基取代的情形。

[0109] 本发明提供了一种药物组合物，它以本发明的化合物或其药学上可接受的盐为活性成分或主要活性成分，辅以药学上可接受的载体。

[0110] 本发明的化合物或其药学上可接受的盐可应用于制备与抗氧化有关疾病的药物方面，特别是用于制备抗炎药物或抗氧化药物方面。

附图说明

[0111] 图1是本发明代表化合物提高抗氧化基因HO-1(A)，NQO1(B)，SOD(C)的mRNA水平的实验；

[0112] 图2是不同剂量的本发明代表化合物能剂量依赖性的提高抗氧化基因HO-1(A)，NQO1(B)的蛋白水平。

具体实施方式

[0113] 为了进一步阐明本发明，下面给出一系列实施例，这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明具体描述，不应当理解为对本发明的限制。

[0114] 实施例1

[0115] 5'-(1-羰基)咪唑-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯]-5-甲酸甲酯(VI)

[0116] 联苯双酯，NaOH置于化合物IV(2g,5.0mmol)、咪唑(404mg,5.9mmol)置于50mL无水CH2Cl2中，加入EDCI(1.1g,5.9mmol)、DMAP(61mg,0.5mmol)室温搅拌反应2h后，加水分层，CH2Cl2萃取。有机层分别用1N的HCl，饱和NaHCO3及饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压去除溶剂后得化合物V(2.14g,95％)。该化合物为已知化合物。(Bioorganic&Medicinal Chemistry 20(2012)2540–2548)m.p.68-70℃；ESI-MS:m/z:477[M+Na]+.化合物V无需纯化直接投下一步反应。

[0117] 将化合物V(2g,4.4mmol)用30mL的THF溶解，冰浴冷却。称取NaBH4(332mg,8.8mmol)置于恒压滴液漏斗中，用水溶解后缓慢的滴加到化合物V的THF冷却溶液中(注：此过程有大量气体生成)。TLC跟踪反应，反应结束后缓慢滴加2N的HCl调PH值为弱酸性后，减压回收大部分THF后，用乙酸乙酯萃取反应液，有机层分别用饱和NaHCO3、饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。回收溶剂得粗品，快速硅胶柱层析分离(PE/EtOAc＝5:3,V/V)得白色中间体VI(1.6g,92％)。该化合物为已知化合物。(Bioorganic&Medicinal Chemistry 20(2012)
2540–2548)。m.p.126-128℃；ESI-MS m/z:413[M+Na]+；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):3.71(s,3H,COOCH3),3.95(s,3H,ArOCH3),3.97(s,3H,ArOCH3),4.35(d,1H,CH2OH,J＝12Hz),
4.40(d,1H,CH2OH,J＝12Hz),5.91-6.04(m,4H,2×OCH2O),6.78(s,1H,Ar-H),7.33(s,1H,Ar-H).

[0118] 实施例2

[0119] 5'-甲酰基-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-甲酸甲酯(VII)

[0120] 化合物VI(1.5g,3.8mmol)置于恒压滴液漏斗中，用30mL的CH2Cl2溶解，然后缓慢滴入PCC(900mg,4.2mmol)的CH2Cl2混悬液(冰浴冷却)内，滴加完毕恢复至室温搅拌反应。TLC跟踪反应进程，反应结束后，反应液用硅藻土(或硅胶)过滤，滤液浓缩至干得粗品。快速硅胶柱层析分离纯化(PE/EtOAc＝3:1,V/V)得白色中间体VII(1.46g,98％)。该化合物为已知化合物。(Bioorganic&Medicinal Chemistry 20(2012)2540–2548)。αm.p.179-181℃；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):3.68(s,3H,COOCH3),3.98(s,3H,ArOCH3),3.99(s,3H,ArOCH3),6.01-6.10(m,4H,2×OCH2O),7.32(s,1H,Ar-H),7.42(s,1H,Ar-H)；

[0121] 实施例3

[0122] (E)-5'-(3-(3-甲氧基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(2a)

[0123] 中间体VII(100mg,0.26mmol)和3-甲氧基苯乙酮(0.31mmol)用无水1,4-二氧六环分散后，氩气保护抽空气，缓慢滴加入BF3.Et2O溶液(105μL,0.39mmol)，反应液变为黄色。氮气保护下开始升温至70℃下反应4-5h，TLC跟踪反应，反应结束后(此时反应液为深红色)将反应液冷却至室温，加水分层，乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤数次，无水Na2SO4干燥。过滤，减压除去溶剂得粗品。快速硅胶柱层析(PE/EtOAc＝5:1-1:1，V/V)纯化得到黄色目标化合物2a，收率85％。ESI-MS:m/z 520.9([M+H]+)；1H-NMR(CDCl3,400MHz,δppm):3.66(s,3H,Ar-OCH3)3.84(s,3H,Ar-OCH3),3.98(s,3H),3.99(s,3H,Ar-OCH3),6.04–5.95(m,4H,2×-OCH2O-),7.06(s,1H,Ar-H),7.09(d,1H,Ar-H,J＝2.7Hz,),7.21(s,1H,Ar-H),7.34(t,
1H,Ar-H,J＝7.9Hz,),7.40(s,1H,Ar-H),7.42–7.40(m,1H,Ar-H),7.45(d,1H,Ar-H,J＝
7.7Hz,),7.55(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.6Hz).

[0124] 实施例4

[0125] (E)-5'-(3-(3,4-二甲氧基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(2b)

[0126] 按实施例3的类似方法，中间体VII，3,4-二甲氧基苯乙酮，BF3.Et2O反应得到黄色目标化合物。ESI-MS:m/z 550.9[M+H]+；1H-NMR(CDCl3,400MHz,δppm):3.66(s,3H,Ar-OCH3),3.92(s,3H,Ar-OCH3),3.94(s,3H),3.97(s,3H,Ar-OCH3),4.00(s,3H,Ar-OCH3),6.02–5.95(m,4H,2×-OCH2O-),6.87(d,1H,Ar-H,J＝8.3Hz,),7.06(s,1H,Ar-H),7.27(d,
1H,CH＝CHCO,J＝15.6Hz),7.40(s,1H,Ar-H),7.51(d,1H,Ar-H,J＝1.9Hz,),7.52(d,1H,Ar-H,J＝1.9Hz,),7.57–7.53(m,1H,Ar-H).

[0127] 实施例5

[0128] (E)-5'-(3-(3-((二乙基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(1a)

[0129] 由中间体VII和4-羟基苯乙酮按照实施例3的类似方法制备产物(E)-5'-(3-(4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯VIII，收率72％，为黄色固体粉末，该化合物为已知化合物。(Bioorganic&Medicinal Chemistry 20(2012)2540–2548)。m.p.248-250℃；ESI-MS:m/z 507.0[M+H]+。化合物VIII(100mg,0.2mmol)用DMSO溶解，加入30％的甲醛水溶液(55μL,0.6mmol)，然后加入二乙胺盐酸盐(0.3mmol)，以及Et3N(0.3mmol)(注：如果仲胺类化合物为盐酸盐的话，需要加入等摩尔量的Et3N调节PH)，90℃下反应5h，TLC跟踪反应，反应结束后冷却至室温，加水后用乙酸乙酯萃取，有机层饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。过滤，减压除去溶剂得粗品。快速硅胶柱层析分离纯化(先CH2Cl2/EtOAc＝4:1-1:1,后CH2Cl2/MeOH＝10:1-1:1)，得到黄色目标产+物，收率58％。m.p.74-76℃；ESI-MS:m/z 592.3[M+H] ；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):1.13(t,6H,2×CH3,J＝6.9Hz),2.62-2.70(m,4H,2×NCH2),3.66(s,3H,COOCH3),3.83(s,2H,ArCH2),3.99(s,3H,ArOCH3),4.00(s,3H,ArOCH3),5.98-6.03(m,4H,2×OCH2O),6.80(d,1H,Ar-H,J＝8.2Hz),7.06(s,1H,Ar-H),7.25(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.4Hz),7.41(s,1H,Ar-H),
7.53(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.4Hz),7.65(s,1H,Ar-H),7.76(d,1H,Ar-H,J＝8.2Hz).[0130] 实施例6

[0131] (E)-5'-(3-(3-(((4-苯基)哌嗪基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(1b)

[0132] 按照实施例5的类似方法，由化合物VIII和甲醛及N-苄基哌嗪制备的黄色固体粉末，收率57％。m.p.91-93℃；ESI-MS:m/z 695.4[M+H]+；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):2.30-2.64(m,8H,4×NCH2),3.77(s,2H,ArCH2),3.66(s,3H,COOCH3),3.77(s,2H,ArCH2),3.98(s,
3H,ArOCH3),4.00(s,3H,ArOCH3),5.97-6.04(m,4H,2×OCH2O),6.82(d,1H,Ar-H,J＝
8.3Hz),7.05(s,1H,Ar-H),7.20-7.40(m,6H,CH＝CHCO,5×ArH),7.41(s,1H,Ar-H),7.53(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.5Hz),7.63(s,1H,Ar-H),7.77(d,1H,Ar-H,J＝8.3Hz).

[0133] 实施例7

[0134] (E)-5'-(3-(3,5-二(吗啉基甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(1c)

[0135] 按照实施例5的类似方法，由化合物VIII和甲醛及吗啉制备的黄色固体粉末，收率87％。m.p.90-92℃；ESI-MS:m/z 705.3[M+H]+；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):2.56(s,8H,4×NCH2),3.67(s,7H,2×ArCH2COOCH3),3.75(s,8H,4×OCH2),3.99(s,3H,ArOCH3),4.02(s,
3H,ArOCH3),5.98-6.06(m,4H,2×OCH2O),7.07(s,1H,Ar-H),7.28(d,1H,CH＝CHCO,J＝
15.0Hz),7.41(s,1H,Ar-H),7.54(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.0Hz),7.71(s,1H,Ar-H).[0136] 实施例8

[0137] (E)-5'-(3-(3,5-二((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(1d)

[0138] 按照实施例5的类似方法，由化合物VIII和甲醛及吡咯烷制备的黄色固体粉末，收率72％。m.p.90-92℃；ESI-MS:m/z 673.3[M+H]+；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):1.81-1.94(m,8H,4×CH2),2.65-2.78(m,8H,4×NCH2),3.65(s,3H,COOCH3),3.87(s,4H,2×ArCH2),3.98(s,3H,ArOCH3),4.05(s,3H,ArOCH3),5.98-6.06(m,4H,2×OCH2O),7.09(s,1H,Ar-H),
7.34-7.45(m,2H,Ar-H,CH＝CHCO),7.56(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.4Hz),7.78(s,2H,Ar-H).[0139] 实施例9

[0140] (E)-5'-(3-(3-((1-哌啶基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(1e)

[0141] 按照实施例5的类似方法，由化合物VIII和甲醛及哌啶制备的黄色固体粉末，收率66％。m.p.100-102℃；ESI-MS:m/z 604.3[M+H]+；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):1.42-1.79(m,6H,3×CH2),2.33-2.73(m,4H,2×NCH2),3.66(s,3H,COOCH3),3.74(s,2H,ArCH2),3.99(s,3H,ArOCH3),4.01(s,3H,ArOCH3),5.97-6.01(m,4H,2×OCH2O),6.82(d,1H,Ar-H,J＝
8.1Hz),7.06(s,1H,Ar-H),7.25(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.5Hz),7.41(s,1H,Ar-H),7.53(d,
1H,CH＝CHCO,J＝15.5Hz),7.65(s,1H,Ar-H),7.76(d,1H,Ar-H,J＝8.1Hz).

[0142] 实施例10

[0143] (E)-5'-(3-(3-((二甲基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(1f)

[0144] 按照实施例5的类似方法，由化合物VIII和甲醛及二甲胺盐酸盐，三乙胺制备的黄+色固体粉末，收率56％。m.p.83-85℃；ESI-MS:m/z 564.3[M+H] ；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):2.37(s,6H,2×NCH3),3.66(s,3H,COOCH3),3.72(s,2H,ArCH2),3.99(s,3H,ArOCH3),
4.01(s,3H,ArOCH3),5.97-6.01(m,4H,2×OCH2O),6.83(d,1H,Ar-H,J＝8.1Hz),7.06(s,1H,Ar-H),7.26(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.5Hz),7.41(s,1H,Ar-H),7.53(d,1H,CH＝CHCO,J＝
15.5Hz),7.65(s,1H,Ar-H),7.84(d,1H,Ar-H,J＝8.1Hz)ESI-MS:m/z 564.3[M+H]+.[0145] 实施例11

[0146] (E)-5'-(3-(3,5-二((二甲基氨基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(1g)

[0147] 按照实施例5的类似方法，由化合物VIII和甲醛及二甲胺盐酸盐，三乙胺制备的黄色固体粉末，收率88％。m.p.82-84℃；ESI-MS:m/z 621.4[M+H]+；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):2.34(s,12H,4×NCH3),3.64(s,3H,COOCH3),3.66(s,4H,2×ArCH2),3.98(s,3H,ArOCH3),4.03(s,3H,ArOCH3),5.98-6.01(m,4H,2×OCH2O),7.12(s,1H,Ar-H),7.34-7.42(m,2H,Ar-H,CH＝CHCO),7.56(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.4Hz),7.72(s,2H,Ar-H).

[0148] 实施例12

[0149] (E)-5'-(3-(3-((1-吡咯烷基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(1h)

[0150] 按照实施例5的类似方法，由化合物VIII和甲醛及吡咯烷制备的黄色固体粉末，收率62％。m.p.103-105℃；ESI-MS:m/z 590.2[M+H]+；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):1.81-1.92(m,4H,2×CH2),2.58-2.73(m,4H,2×NCH2),3.66(s,3H,COOCH3),3.89(s,2H,ArCH2),
3.99(s,3H,ArOCH3),4.00(s,3H,ArOCH3),5.97-6.02(m,4H,2×OCH2O),6.82(d,1H,Ar-H,J＝8.2Hz),7.07(s,1H,Ar-H),7.26(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.5Hz),7.41(s,1H,Ar-H),7.53(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.5Hz),7.66(s,1H,Ar-H),7.84(d,1H,Ar-H,J＝8.0Hz).

[0151] 实施例13

[0152] (E)-5'-(3-(3-(吗啉甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(1i)

[0153] 按照实施例5的类似方法，由化合物VIII和甲醛及吗啉制备的黄色固体粉末，收率为67％。m.p.93-95℃；ESI-MS:m/z 606.2[M+H]+；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):2.60(s,4H,2×NCH2),3.67(s,5H,ArCH2,COOCH3),3.77(s,4H,2×OCH2),3.98(s,3H,ArOCH3),4.00(s,
3H,ArOCH3),5.90-6.01(m,4H,2×OCH2O),6.84(d,1H,Ar-H,J＝8.4Hz),7.07(s,1H,Ar-H),
7.24(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.0Hz),7.40(s,1H,Ar-H),7.54(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.0Hz),
7.67(s,1H,Ar-H),7.76-7.87(m,1H,Ar-H).

[0154] 实施例14

[0155] (E)-5'-(3-(3-((4-甲基哌嗪基)甲基)-4-羟基)苯基-3-氧代-1-丙烯基)-7,7'-二甲氧基-4,4'-二苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基-5-甲酸甲酯(1j)

[0156] 按照实施例5的类似方法，由化合物VIII和甲醛及N-甲基哌嗪制备的黄色固体粉+末，收率70％。m.p.88-90℃；ESI-MS:m/z 641.3[M+Na] ；1H-NMR(CDCl3,300MHz,δppm):2.34(s,3H,CH3),2.45-2.75(m,8H,4×NCH2),3.66(s,3H,COOCH3),3.72(s,2H,ArCH2),3.99(s,
3H,ArOCH3),4.04(s,3H,ArOCH3),5.98-6.05(m,4H,2×OCH2O),7.12(s,1H,Ar-H),7.37-
7.41(m,1H,CH＝CHCO),7.41(s,1H,Ar-H),7.56(d,1H,CH＝CHCO,J＝15.4Hz),7.69-7.75(m,2H,Ar-H).

[0157] 实施例15

[0158] 下面是本发明的代表化合物的部分药理试验及结果：

[0159] 1、化合物对抗氧化基因HO-1，NQO1，SOD的mRNA水平的影响

[0160] 采用PCR方法检测化合物作用24小时对Nrf2下游基因NQO-1(醌氧化还原酶-1)、HO-1(血红素氧合酶-1)、SOD(超氧化物歧化酶)表达的影响，n＝4，NC为正常组，Res(白藜芦醇)为阳性对照组，浓度为10uM，H2O2为模型组，浓度为400uM，化合物浓度为10uM。Mean±SD，*P≤0.05,**P≤0.01，与NC组比较。

[0161] 如图1所示，化合物1a、1b、1c、1d和1e相比于正常组能明显提高抗氧化基因HO-1，NQO1，SOD的mRNA水平的表达，其他化合物如1f、1g、1h、1i、1j、2a、2b具有类似的实验效果，其中化合物1c效果显著。

[0162] 2、不同剂量的化合物对抗氧化基因HO-1，NQO1蛋白水平的影响

[0163] 采用Western blot方法在蛋白水平检测不同剂量化合物对抗氧化基因HO-1，NQO1表达的影响。DMSO为正常组，Res(白藜芦醇)为阳性对照组，浓度为10uM，H2O2为氧化损伤模型组，H2O2浓度为400uM，化合物浓度分别为5uM(M)、10uM(H)，Mean±SD，n＝4，*P≤0.05,**P≤0.01，与DMSO和Res组比较。

[0164] 如图2所示，化合物1c和1d相比于正常组和阳性对照组，能明显提高抗氧化基因HO-1，NQO1蛋白水平的表达，其他化合物如1a、1b、1e、1f、1g、1h、1i、1j、2a、2b具有类似的实验效果，其中化合物1c效果显著，且呈现出剂量依赖性。