一种基于柔性电极的免疫传感器

摘要

本发明公开了一种基于柔性电极的免疫传感器及其应用，属于生物传感器技术领域。所述的免疫传感器，包括柔性电极，所述柔性电极包括柔性电极基底和固定在柔性电极基底表面的生物分子探针，所述柔性电极基底的组成材料包括聚乳酸和石墨烯。本发明提供的免疫传感器上生物分子探针与待测靶物质特异性结合后，发生阻抗变化，通过检测阻抗变化计算出溶液中待测靶物质溶度。本发明采用聚乳酸和石墨烯复合材料制备的电极基底为柔性材料，聚乳酸分子上含有丰富的羧基基团可用来固定生物分子探针并保持其生物活性；聚乳酸基体中掺入石墨烯改善电极材料的导电性和柔韧性，大大提升传感器的性能。

权利要求

1.一种基于柔性电极的免疫传感器，包括柔性电极，其特征在于，所述柔性电极包括柔性电极基底和固定在柔性电极基底表面的生物分子探针单增李斯特菌核酸适体，所述柔性电极的制备方法包括以下步骤：S1、将氮掺杂石墨烯粉末和L-聚乳酸颗粒按1:20质量比混合，加入双螺杆挤出机的加料箱中，调节双螺杆挤出机挤出温度为180℃，挤出造粒，再通过单螺杆挤出吹膜机吹塑成膜，吹膜温度为180℃，吹膜膜泡由挤出头处通入空气使其吹胀冷却，然后薄膜通过人字板定型，牵引辊牵引，最后由收卷装置碾平收卷，得到薄膜形状柔性电极基底，薄膜厚度为200μm；

S2、将上述制备的聚乳酸-石墨烯柔性薄膜形状电极基底裁剪为长5cm、宽3cm的条带，再取其中一个条带先浸泡在DMF中处理10min，然后分别在乙醇和纯水中超声10min并干燥，S3、将NHS和EDC溶解在磷酸盐缓冲液中，制备含0.08M的NHS和0.05M的EDC的混合液，将清洗过的条带浸没在EDC/NHS混合液中，密封保存3h；

S4、将活化后的条带浸泡到含有单增李斯特菌核酸适体的溶液中，放置15h，制得所述柔性电极。

说明书

一种基于柔性电极的免疫传感器

技术领域

[0001] 本发明涉及生物传感器技术领域，具体涉及一种基于柔性电极的免疫传感器。

背景技术

[0002] 免疫传感器具有选择性好、体积小易携带、成本低等优点，已广泛应用于食品安全检测、临床分析、环境监测、家庭医疗等领域，如用于致病菌、抗生素、尿蛋白、肿瘤标记物等的检测。对于实现痕量物质现场检测来说，进一步提高传感器灵敏度、重复性、稳定性具有重要的意义。

[0003] 免疫传感器用于连续目标物检测时，生物分子探针的再生性是制约该类型传感器实际应用时的一大问题。因此研制可大批量生产而且低成本的免疫传感器，用作可抛弃型传感器，将会克服免疫传感器多次测量时需对生物分子探针进行再生处理而造成的操作繁琐、费时耗力等弊端。

[0004] 面对越来越多的特殊检测环境，开发基于新材料、新工艺的新型传感器技术已成为发展趋势。基于柔性基质材料的柔性传感器，由于具有柔韧性、延展性、可自由弯曲甚至折叠、便于携带、可穿戴等特点，而且结构形式灵活多样，可根据测量条件的要求任意放置，适用于很多特殊应用场景和环境。

[0005] 常见的柔性材料包括聚乙烯醇(PVA)、聚酯(PET)、聚酰亚胺(PI)、聚萘二甲酯乙二醇酯(PEN)、纸片、纺织材料等。如中国科学院电子所夏善红课题组研制了纸基材料的柔性免疫传感器，通过在纸基上自组装单层膜并引入纳米金颗粒的方法，实现了糖化血红蛋白检测免疫传感器；浙江理工大学徐盼举在柔性基底(ITO/PET)上制备了基于氧化石墨烯(GO)/还原态氧化石墨烯(rGO)微阵列的传感器，用于提供细胞生长基底以及过氧化氢的灵敏检测；美国莱斯大学James Tour课题组采用激光燃烧廉价的聚酰亚胺塑料制造出基于石墨烯泡沫的柔性传感器，可用于手腕脉冲信号检测；沙特阿卜杜拉国王科技大学Pranati Nayak采用激光直写技术在PI基底上制备了基于石墨烯的柔性传感器，可用于抗坏血酸等分子检测。

[0006] 目前，柔性生物传感器的研究还处于起步阶段，国内外相关研究还不是很多，尚无使用聚乳酸和石墨烯复合材料来制备柔性免疫传感器的报道。

发明内容

[0007] 本发明的目的在于提供一种加工简单、成本低廉的，可大批量生产的且性能优异的柔性电极免疫传感器，用作可抛弃型传感器，以解决现有的免疫传感器成本高、生物分子探针再生性处理繁琐、使用范围窄、重复使用造成准确度下降等不足。

[0008] 为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

[0009] 一种基于柔性电极的免疫传感器，包括柔性电极，所述柔性电极包括柔性电极基底和固定在柔性电极基底表面的生物分子探针，所述柔性电极基底的组成材料包括聚乳酸和石墨烯。

[0010] 本发明采用聚乳酸和石墨烯复合材料制备柔性电极基底，高分子量聚乳酸为基体，优良的可塑性能够制成各种形状，石墨烯均匀分散其中，由于石墨烯具有大的比表面积、导电性、高的杨氏弹性模量，可有效提高聚乳酸的导电性能和延展性。

[0011] 聚乳酸分子上含有丰富的羧基可用于固定生物分子探针，所述的生物分子探针为一类具有游离氨基的物质，氨基与电极基底表面的羧基缩合反应形成酰胺键，使得生物分子探针固定在电极基底表面。聚乳酸生物相容性好，可有效保持生物分子探针的生物活性。

[0012] 所述的柔性电极基底可制成线状或薄膜形状，聚乳酸和石墨烯复合材料通过挤出机或薄膜加工设备制备得到线状或薄膜形状的电极基底。

[0013] 优选的，线状电极的直径为0.01-3mm，长度不限；薄膜电极的厚度为50-500μm。

[0014] 所述的柔性电极基底中石墨烯和聚乳酸的质量比为0.5-10:100，有效掺杂量的石墨烯用以保证柔性电极的导电性和柔韧性。

[0015] 本发明所述的生物分子探针为一类与靶物质发生特异性结合的物质，作为优选，所述的生物分子探针为抗体、抗原、DNA、核酸适体等中的任意一种，其分子结构中含有游离的氨基。优选的，所述的抗原为蛋白质。

[0016] 所述柔性电极的制备方法，包括以下步骤：

[0017] (1)将石墨烯粉末和聚乳酸颗粒混合，加热熔化后加工成线状或薄膜状的柔性电极基底；

[0018] (2)将柔性电极基底放入含有N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的磷酸盐缓冲液中活化；

[0019] (3)将活化后的柔性电极基底浸泡到含有生物分子探针的溶液中；或者将含有生物分子探针的溶液滴加或喷印到活化后的柔性电极基底表面，经反应后生物分子探针固定在柔性电极基底表面，制得所述柔性电极；

[0020] 所述生物分子探针具有游离的氨基，与聚乳酸的羧基反应形成酰胺键。

[0021] 作为优选，步骤(1)中，石墨烯粉末和聚乳酸颗粒的质量比为1:20-30。

[0022] 所述的聚乳酸颗粒为L-聚乳酸、D-聚乳酸或L-聚乳酸与D-聚乳酸的混合物。

[0023] 所述的石墨烯粉末可为氧化石墨烯、还原态氧化石墨烯或元素掺杂的石墨烯，其中元素掺杂的石墨烯为氮、磷或硫等元素掺杂的石墨烯，掺杂元素包括但不限于上述几种。

[0024] 作为优选，步骤(1)中，加热的温度为170-230℃。采用挤出机或薄膜加工设备将复合材料加工成线状或薄膜形状。

[0025] 步骤(2)中，电极基底表面的大量羧基可以通过偶联剂N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)活化。

[0026] 作为优选，步骤(2)中，N-羟基琥珀酰亚胺与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的摩尔比为0.1-10:1。

[0027] 更为优选，缓冲液中NHS的摩尔浓度为0.08mol/L，EDC的摩尔浓度比为0.05mol/L。

[0028] 作为优选，步骤(2)中，活化的时间为3-5h。

[0029] 作为优选，活化前，先将柔性电极基底浸泡在N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中处理5-120min，用来溶解掉电极表面附着的熔融的聚乳酸，有利于增加聚乳酸的粗糙度和透过性。

[0030] 更为优选，柔性电极基底浸泡在N,N-二甲基甲酰胺中处理10min。

[0031] DMF处理好后，用乙醇、清水依次清洗柔性电极表面，干燥后进行活化步骤。

[0032] 步骤(3)中，电极基底表面的羧基活化后，与生物分子探针的氨基反应生成酰胺键，使得生物分子探针固定在电极基底表面。

[0033] 作为优选，步骤(3)中，所述反应的条件为室温下放置5min-24h。更为优选，放置时间为15h。

[0034] 本发明提供的柔性电极免疫传感器的工作原理为：电极表面的生物分子探针与待测靶物质发生特异性结合后，电极阻抗发生变化，靶物质浓度越大，阻抗越大，其变化量与浓度呈线性关系，可通过直接阻抗测量法测量阻抗的变化量可间接计算出待测靶物质的浓度。

[0035] 具体地，先将柔性电极置于待测溶液中，使得靶物质结合到柔性电极表面的生物分子探针上，再将结合了靶物质的柔性电极的两端分别连接到LCR测量仪上，测量阻抗，根据校准曲线计算出待测靶物质的浓度。

[0036] 本发明提供的基于柔性电极的免疫传感器还可以采用三电极体系或者两电极体系，所述柔性电极作为工作电极，与辅助电极和参比电极组成三电极体系；也可以与辅助电极组成两电极体系，通过电化学测量方法测量。由于柔性电极结合靶物质后发生阻抗变化，电流也会发生相应变化，通过检测电流变化来测量阻抗变化，进而计算出待测靶物质的浓度。所述辅助电极采用但不限于铂电极或碳电极，所述参比电极采用但不限于Ag/AgCl电极或者饱和甘汞电极。

[0037] 具体地，先将柔性电极置于待测溶液中，使得靶物质结合到柔性电极表面的生物分子探针上，再组成三电极体系或者两电极体系，通过电化学测量方法测量。

[0038] 本发明提供了所述的免疫传感器在检测液体中或气体中的与柔性电极上的生物分子探针特异性结合的靶物质的浓度中的应用。

[0039] 本发明提供的免疫传感器可用于检测可被柔性电极表面固定的生物分子探针特异性结合的靶物质，如柔性电极上固定的是氯霉素抗体，可特异性结合氯霉素，那么该免疫传感器可应用于检测氯霉素；如柔性电极上固定的是皮质醇抗体，可特异性结合皮质醇，那么该免疫传感器可应用于检测皮质醇；如柔性电极上固定的单增李斯特菌核酸适体，可特异性结合单增李斯特菌核酸，那么该免疫传感器可应用于检测单增李斯特菌；本发明的柔性电极，所固定的生物分子探针包括但不限于上述几种。

[0040] 本发明具备的有益效果：

[0041] (1)本发明采用聚乳酸和石墨烯复合材料制备的电极基底为柔性材料，在该柔性电极基底表面固定生物分子探针制备高性能的免疫传感器，聚乳酸具有生物相容性好、可生物降解等优点，同时其分子上含有丰富的羧基基团可用来固定生物分子探针并保持其生物活性；聚乳酸基体中掺入石墨烯改善电极材料的导电性和柔韧性，大大提升传感器的性能。

[0042] (2)本发明的基于柔性电极的免疫传感器可大批量生产，成本低廉，可用作可抛弃型免疫传感器，且可弯曲、占用空间小，大大拓宽了应用场合和应用领域。

附图说明

[0043] 图1为实施例1的柔性电极的制备流程图。

[0044] 图2为实施例1柔性电极结构组成示意图。

[0045] 图3为实施例1制备的未使用DMF处理的氯霉素免疫传感器对不同浓度氯霉素溶液的电化学阻抗响应曲线。

[0046] 图4为实施例2的柔性电极的制备流程图。

[0047] 图5为实施例2制备的使用DMF处理的氯霉素免疫传感器对不同浓度氯霉素溶液的阻抗线性拟合曲线。

[0048] 图6为实施例3的柔性电极的制备流程图。

[0049] 图7为实施例3柔性电极结构组成示意图。

[0050] 图8为实施例3制备的未使用DMF处理的皮质醇免疫传感器对不同浓度皮质醇溶液的电化学阻抗线性拟合曲线。

[0051] 图9为实施例4的柔性电极的制备流程图。

[0052] 图10为实施例4柔性电极结构组成示意图。

[0053] 图11为实施例4制备的未使用DMF处理的单增李斯特菌免疫传感器对不同浓度单增李斯特菌溶液的阻抗线性拟合曲线。

具体实施方式

[0054] 下面结合附图对本发明的实施例作详细说明：在以本发明技术方案为前提进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

[0055] 免疫传感器包括柔性电极，柔性电极由柔性电极基底和固定在柔性电极基底上的生物分子探针组成，柔性电极基底的组成材料为聚乳酸和石墨烯，形状可以为线状或薄膜形状。

[0056] 免疫传感器根据固定的生物分子探针用于相应靶物质的特异性检测，通过电化学测量方法或直接阻抗测量法测量阻抗的变化量可间接计算出待测靶物质的浓度。

[0057] 下述实施例中采用采用的石墨烯粉末、聚乳酸颗粒、氯霉素抗体、皮质醇抗体、单增李斯特菌核酸适体均为市面上购买的材料。

[0058] 实施例1

[0059] 本实施例提供的一种基于柔性电极的免疫传感器用于检测氯霉素浓度。

[0060] 在本实施例中，柔性电极的制备方法包括以下步骤(图1)：

[0061] S1、采用双螺杆挤出机制备聚乳酸和石墨烯柔性线状电极。

[0062] 将石墨烯粉末和L-聚乳酸颗粒按1:30质量比混合，加入双螺杆挤出机的加料箱中，调节双螺杆挤出机温度为180摄氏度，60min后开始挤出柔性线状电极，设置牵引速度为10cm/min。

[0063] S2、采用乙醇、纯水清洗所制备的柔性电极基底。

[0064] 将采用双螺杆挤出机挤出法制备的聚乳酸-石墨烯柔性线状电极分别在乙醇和纯水中超声20min后干燥。

[0065] S3、在柔性线状电极表面通过EDC/NHS活化来固定氯霉素抗体。

[0066] 将一定量的NHS和EDC溶解在磷酸盐缓冲液中，制备含0.08M的NHS和0.05M的EDC的混合液，将清洗过的柔性线状电极浸没在EDC/NHS混合液中进行活化3h；

[0067] 之后，将活化后的柔性线状电极浸泡到含有50mg/mL氯霉素抗体的溶液中，放置15h，制得本实施例柔性电极，如图2所示。

[0068] 在本实施例的柔性电极制作完成后，通过配置标准浓度的氯霉素溶液，对制作的传感器进行标定，具体的标定方法包括如下步骤：

[0069] F1、将Na2HPO4(0.2M)和NaH2PO4(0.2M)按一定比例混合，调节pH为7.2，加入不同质量的氯霉素，配置成7个浓度梯度的氯霉素溶液。

[0070] F2、将所制备的柔性电极浸入到最小一个浓度氯霉素溶液中，等候30分钟，使得氯霉素分子结合到柔性电极表面固定的氯霉素抗体分子上。

[0071] F3、将结合了氯霉素分子的上述柔性电极放置到含5mM铁氰化钾和0.1M氯化钾的磷酸盐缓冲液中(pH7.4)，采用三电极电化学测量方法，以本实施例的柔性电极为工作电极，以Pt片为辅助电极，以Ag/AgCl电极为参比电极，然后通过电化学阻抗法测量传感器对该浓度氯霉素溶液的响应。

[0072] F4、本实施例的电化学阻抗法具体参数如下：扫描频率范围为0.1-105Hz，设置电压为开路电压。

[0073] F5、依照上述方法，测得本实施例的柔性电极免疫传感器对其他浓度氯霉素的电化学阻抗响应数值。

[0074] 经过标定后，得到的本实施例未使用DMF处理的免疫传感器对不同浓度氯霉素的电化学阻抗响应曲线，如图3所示，结果实现了浓度范围为0.1-10ng/mL的氯霉素溶液检测。

[0075] 实施例2

[0076] 本实施例的一种基于柔性电极的免疫传感器用于氯霉素浓度检测。

[0077] 在本实施例中，柔性电极免疫传感器的制备方法包括以下步骤(图4)：

[0078] 采用氧化石墨烯与D-聚乳酸制作柔性电极基底，氧化石墨烯与D-聚乳酸的质量比为1：25，加工制备和实施例1的S1步骤一样。

[0079] 进一步优选的，接下来的步骤，如实施例1的S2步骤，所制备的柔性电极基底先浸泡在DMF中处理10min，然后分别在乙醇和纯水中超声10min并干燥，再继续进行实施例1的步骤S3，制得本实施例的柔性电极免疫传感器。

[0080] 通过配置标准浓度的氯霉素溶液，对制作的传感器进行标定，具体的标定方法包括如下步骤：

[0081] F1、将Na2HPO4(0.2M)和NaH2PO4(0.2M)按一定比例混合，调节pH为7.2，加入不同质量的氯霉素，配置成6个浓度梯度的氯霉素溶液。

[0082] F2、将所制备的柔性电极免疫传感器浸入到最小一个浓度氯霉素溶液中，等候30分钟，使得氯霉素分子结合到柔性电极表面固定的氯霉素抗体分子上。

[0083] F3、将得到的结合了氯霉素分子的柔性电极免疫传感器的两端分别连接到手持式LCR仪器(如Keysight U1733C)，选到阻抗测量一档，设置扫描频率为100kHz，直至显示的阻抗数值为一稳定的数字时，记下该数值作为传感器对相应氯霉素浓度的阻抗响应。

[0084] 依照步骤F2、F3方法，测量传感器对其他浓度氯霉素溶液的阻抗响应。

[0085] F4、经过标定后，得到的本实施例使用DMF处理的免疫传感器对不同浓度氯霉素的阻抗响应线性拟合曲线，如图5所示，横坐标为氯霉素的Ln浓度，纵坐标为柔性电极结合氯霉素后的阻抗值，实现了氯霉素浓度范围0.05-10ng/mL的检测。

[0086] 实施例3

[0087] 本实施例的一种基于柔性电极的免疫传感器用于检测皮质醇浓度。

[0088] 在本实施例中，柔性电极的制备方法包括以下步骤(图6)：

[0089] S1、采用双螺杆挤出机制备聚乳酸和石墨烯柔性线状电极。

[0090] 将石墨烯粉末和L-聚乳酸颗粒按1:40质量比混合，加入双螺杆挤出机的加料箱中，调节双螺杆挤出机温度为180摄氏度，60min后开始挤出柔性线状电极，设置牵引速度为10cm/min。

[0091] S2、采用乙醇、纯水清洗所制备的柔性电极基底。

[0092] 将采用双螺杆挤出机挤出法制备的聚乳酸-石墨烯柔性线状电极分别在乙醇和纯水中超声20min后干燥。

[0093] S3、在柔性线状电极表面通过EDC/NHS活化来固定皮质醇抗体。

[0094] 将一定量的NHS和EDC溶解在磷酸盐缓冲液中，制备含0.08M的NHS和0.05M的EDC的混合液，将清洗过的柔性线状电极浸没在EDC/NHS混合液中活化3h；

[0095] 之后，将活化后的柔性线状电极浸泡到含有50mg/mL的皮质醇抗体溶液中，放置15h，制得本实施例柔性电极，如图7所示。

[0096] 通过配置标准浓度的皮质醇溶液，对制作的传感器进行标定，具体的标定方法包括如下步骤：

[0097] F1、将Na2HPO4(0.2M)和NaH2PO4(0.2M)按一定比例混合，调节pH为7.2，加入不同质量的皮质醇，配置成5个浓度梯度的皮质醇溶液。

[0098] F2、将所制备的免疫传感器浸入到最小一个浓度皮质醇溶液中，等候40分钟，使得皮质醇分子结合到柔性电极表面固定的皮质醇抗体分子上。

[0099] F3、将结合了皮质醇分子的上述柔性电极放置到含5mM铁氰化钾和0.1M氯化钾的磷酸盐缓冲液中(pH7.4)，然后采用三电极电化学测量方法，其中以本实施例的柔性电极为工作电极，以Pt片为辅助电极，以Ag/AgCl电极为参比电极，然后通过电化学阻抗法测量传感器对该浓度皮质醇溶液的响应。

[0100] F4、本实施例的电化学阻抗法具体参数如下：扫描频率范围为0.1-105Hz，设置电压为开路电压。

[0101] F5、依照上述方法，测得本实施例的柔性电极免疫传感器对其他浓度皮质醇的电化学阻抗响应数值。

[0102] 经过标定后，得到的本实施例未使用DMF处理的免疫传感器对不同浓度皮质醇的电化学阻抗线性拟合曲线，如图8所示，结果实现了浓度范围为10-100ng mL-1的皮质醇溶液检测。

[0103] 实施例4

[0104] 本实施例的一种基于柔性电极的免疫传感器用于检测单增李斯特菌浓度。

[0105] 在本实施例中，柔性电极的制备方法包括以下步骤(图9)：

[0106] S1、采用双螺杆挤出机制备聚乳酸和石墨烯柔性线状电极

[0107] 将氮掺杂石墨烯粉末和L-聚乳酸颗粒按1:20质量比混合，加入双螺杆挤出机的加料箱中，调节双螺杆挤出机挤出温度为180摄氏度，挤出造粒，再通过单螺杆挤出吹膜机吹塑成膜，吹膜温度为180℃，吹膜膜泡由挤出头处通入空气使其吹胀冷却，然后薄膜通过人字板定型，牵引辊牵引，最后由收卷装置碾平收卷，得到本发明薄膜形状柔性电极基底，薄膜厚度为200μm。

[0108] S2、采用DMF处理柔性电极基底，并用乙醇、纯水分别清洗所制备的柔性电极基底。

[0109] 将上述制备的聚乳酸-石墨烯柔性薄膜形状电极裁剪为长5cm、宽3cm的条带，再取其中一个条带柔性电极先浸泡在DMF中处理10min，然后分别在乙醇和纯水中超声10min并干燥，

[0110] S3、在柔性线状电极表面通过EDC/NHS活化来固定带有氨基的单增李斯特菌核酸适体。

[0111] 将一定量的NHS和EDC溶解在磷酸盐缓冲液中，制备含0.08M的NHS和0.05M的EDC的混合液，将清洗过的柔性薄膜形状电极浸没在EDC/NHS混合液中，密封保存3h；

[0112] 之后，将活化后的柔性线状电极浸泡到含有单增李斯特菌核酸适体的溶液中，放置15h，制得本实施例柔性电极，如图10所示。

[0113] 通过配置标准浓度的单增李斯特菌溶液，对制作的传感器进行标定，具体的标定方法包括如下步骤：

[0114] F1、将Na2HPO4(0.2M)和NaH2PO4(0.2M)按一定比例混合，调节pH为7.4，加入不同数量的单增李斯特菌，配置成6个浓度梯度的单增李斯特菌溶液。

[0115] F2、将所制备的柔性电极浸入到最小一个浓度单增李斯特菌溶液中，等候40分钟，使得单增李斯特菌结合到免疫传感器表面固定的单增李斯特菌核酸适体分子上。

[0116] F3、将结合了单增李斯特菌的上述柔性电极放置到2.5mM铁氰化钾的磷酸盐缓冲液中(pH7.4)，然后采用三电极电化学测量方法，其中以本实施例的柔性电极为工作电极，以Pt丝为辅助电极，以Ag/AgCl电极为参比电极，然后通过电化学阻抗法测量传感器对该浓度单增李斯特菌溶液的响应。

[0117] F4、本实施例的电化学阻抗法具体参数如下：扫描频率范围为0.1-105Hz，设置电压为0.24V。

[0118] F5、依照上述方法，测得本实施例的柔性电极免疫传感器对其他浓度单增李斯特菌的电化学阻抗响应数值。

[0119] 经过标定后，得到的本实施例未使用DMF处理的免疫传感器对不同浓度单增李斯特菌的电化学阻抗线性拟合曲线，如图11所示，结果实现了浓度范围为1-1×105CFU/mL的单增李斯特菌溶液检测，横坐标为单增李斯特菌的Lg浓度，纵坐标为柔性电极结合了不同浓度单增李斯特菌后的阻抗值。