一种猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌消毒方法

摘要

本发明涉及一种猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌消毒方法，其主要将猕猴桃枝条或幼苗装入不漏水的PE塑料袋中，向PE塑料袋中注入清水，在温度为45‑50℃条件下将其置于超声声场环境中超声处理30‑60min，超声频率为60‑100Hz，之后将枝条或苗木取出晾干，完成猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌的消毒，本发明能针对定植在枝条组织皮层、韧皮部以及木质部导管等组织内的Psa，有效防止猕猴桃苗木、接穗传播溃疡病病菌，特别是对两年生或一年生枝条组织中的溃疡病菌杀菌率可达97.75％，但是对苗木的正常生长没有影响。

权利要求

1.一种猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌消毒方法，其特征在于：

将猕猴桃枝条或幼苗，剪取合适长度，装入不漏水的PE塑料袋中，向PE塑料袋中注入清水，直到淹没枝条或苗木，在温度为45-50℃条件下将其置于超声声场环境中超声处理30-

60min，超声频率为60-100Hz，之后将枝条或苗木取出晾干，完成猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌的消毒。

2.根据权利要求1所述的猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌消毒方法，其特征在于：所述猕猴桃枝条选用2年生或当年生枝条，剪取5cm的长度。

3.根据权利要求1所述的猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌消毒方法，其特征在于：所述猕猴桃幼苗是1年或两年生的幼苗，剪去其地上部分从离根茎交界处上方10cm的新梢，对剪去新梢后的苗木进行消毒。

4.根据权利要求1所述的猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌消毒方法，其特征在于：所述猕猴桃枝条、苗木组织是猕猴桃枝条、苗木的皮层组织、韧皮部以及木质部导管组织。

5.根据权利要求1所述的猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌消毒方法，其特征在于：所述超声处理条件是在温度为45℃条件下将其置于超声声场环境中超声处理40～50min，超声频率为70～80Hz。

说明书

一种猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌消毒方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种热+超声处理对猕猴桃枝条、苗木组织内的溃疡病菌进行消毒，属于猕猴桃溃疡病综合防治技术，尤其适用猕猴桃新发展区的溃疡病综合防治。

背景技术

[0002] 猕猴桃细菌性溃疡病(kiwifuit bacterial canker)是一种能够引起其产业毁灭性的病害，世界猕猴桃产区新西兰、西班牙、意大利、土耳其及中国猕猴桃产区在的陕西、四川、安徽16个省份的猕猴桃种植区均已发生溃疡病危害，严重威胁世界及中国猕猴桃产业的发展。在中国、新西兰、美国和欧洲植物保护组织(EPPO)已分别将猕猴桃溃疡病作为植物检疫对象和A2类检疫性有害生物，以控制该病的迅速蔓延。猕猴桃溃疡病病原菌为丁香假单胞猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae，Psa)，Psa可通过植株的气孔、皮孔、伤口(虫伤、冻伤、刀伤)等侵入植株体内，危害树干、枝条、嫩稍、叶片及花等部位；田间感病病样中观察到Psa在枝条组织主要定殖在皮层、韧皮部以及木质部导管，在叶片组织中主要定殖在上下表皮和叶肉细胞间隙。

[0003] 目前，生产上对于猕猴桃溃疡病的防治主要采用农业防治、化学防治和生物防治相结合的手段。生物防治还处于有益微生物的筛选及田间防治的试验阶段；化学防治常使用药剂主要药剂为氢氧化铜、春雷霉素等农药，一方面由于Psa定植在枝条的韧皮部以及木质部导管，化学药剂处理枝条、苗木仅能杀死枝条表明的Psa，对枝条、苗木组织中的Psa没有杀灭效果，目前所用的化学农药，只能在一定程度上减轻猕猴桃溃疡病的发病情况，而不能根治溃疡病，发病严重的树、园子无特效药可用，只能挖树毁园；另一方面长期大量的使用化学农药会使植物产生抗药。

[0004] 本发明针对定植在枝条组织皮层、韧皮部以及木质部导管等组织内的Psa难以被化学药剂杀死、疡病发病后难以防治的突出问题，采用超声+热处理对猕猴桃枝条、苗木进行处理，杀死枝条、苗木组织的Psa，有效防止猕猴桃苗木、接穗传播溃疡病病菌。

发明内容

[0005] 为了克服现有的猕猴桃枝条、苗木消毒技术所存在的不足，本发明提供了一种猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌消毒方法，能够杀死枝条、苗木组织的Psa，有效防止猕猴桃苗木、接穗传播溃疡病病菌。

[0006] 本发明所采用的技术方案是：

[0007] 一种猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌消毒方法，其具体是：

[0008] 将猕猴桃枝条或幼苗，剪取合适长度，装入PE塑料袋中，向PE塑料袋中注入清水，直到淹没枝条或苗木，在温度为45-50℃条件下将其置于超声声场环境中超声处理30-60min，超声频率为60-100Hz，之后将枝条或苗木取出晾干，完成猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌的消毒。

[0009] 进一步限定，所述猕猴桃枝条选用2年生或当年生枝条，剪取5cm左右的长度，针对枝条进行消毒处理。

[0010] 进一步限定，所述猕猴桃幼苗是1年或两年生的幼苗，剪去其地上部分从离根茎交界处上方10cm左右的新梢，对剪去新梢后的苗木进行消毒。

[0011] 进一步限定，所述猕猴桃枝条、苗木组织是猕猴桃枝条、苗木的皮层组织、韧皮部以及木质部导管组织，不仅仅是能够对枝条或者苗木表皮外部的病菌有灭菌作用，更重要的是能够对皮层组织、韧皮部以及木质部导管组织等内部组织的病菌有灭菌作用，而且不伤害组织，不影响组织的正常发育。

[0012] 进一步限定，所述超声处理条件是在温度为45℃条件下将其置于超声声场环境中超声处理40～50min，超声频率为70～80Hz，温度与超声相辅相成，协同生效。

[0013] 本发明提供的猕猴桃枝条、苗木组织中溃疡病菌消毒方法主要是针对定植在枝条组织皮层、韧皮部以及木质部导管等组织内的Psa难以被化学药剂杀死、疡病发病后难以防治的突出问题，采用超声+热处理对猕猴桃枝条、苗木进行处理，杀死枝条、苗木组织的Psa，有效防止猕猴桃苗木、接穗传播溃疡病病菌，特别是对两年生或一年生枝条组织中的溃疡病菌杀菌率可达97.75％，但是对苗木的正常生长没有影响。

附图说明

[0014] 图1为处理组1的不同超声频率条件下的杀菌率影响图。

具体实施方式

[0015] 现结合附图和实施例对本发明的技术方案进行进一步说明，但是本发明不仅限于下述的实施情形。

[0016] 实施例1

[0017] 选用猕猴桃枝条为对象进行溃疡病菌消毒，具体方法是：

[0018] (1)将猕猴桃2年生或当年生的枝条，剪成5cm左右；

[0019] (2)装入不漏水的PE塑料袋中，再向PE塑料袋中注入清水，直到淹没枝条；

[0020] (3)将装有枝条和清水的PE塑料袋放入超声处理器中，加热至温度45℃时，在超声频率为80Hz的条件下超声处理45min，对猕猴桃枝条组织进行处理；

[0021] (4)处理结束后立即将枝条取出晾干，完成对猕猴桃枝条组织中溃疡病菌的消毒，晾干后的枝条可进行常规贮藏或直接用于嫁接。

[0022] 实施例2

[0023] 选用猕猴桃幼苗为处理对象进行溃疡病菌消毒，具体方法是：

[0024] (1)将1年生或两年生的猕猴桃幼苗从猕猴桃苗圃完整挖出来，地上部分从离根茎交界处上方10cm左右的位置剪去新梢；

[0025] (2)将剪去新梢带根的苗木放入不漏水的PE塑料袋中，再向PE塑料袋中注入清水，直到淹没整个苗木；

[0026] (3)将装有苗木和清水的PE塑料袋放到超声处理器中，加热至温度50℃时，在超声频率为100Hz的条件下超声处理30min，对猕猴桃枝条组织进行处理；

[0027] (4)处理结束立即将苗木从PE带中取出晾干，可假植或直接栽植及苗木销售。

[0028] 实施例3

[0029] 选用猕猴桃幼苗为处理对象进行溃疡病菌消毒，具体方法是：

[0030] (1)将1年生或两年生的猕猴桃幼苗从猕猴桃苗圃完整挖出来，地上部分从离根茎交界处上方10cm的位置剪去新梢；

[0031] (2)将剪去新梢带根的苗木放入不漏水的PE塑料袋中，再向PE塑料袋中注入清水，直到淹没整个苗木；

[0032] (3)将装有苗木和清水的PE塑料袋放到超声处理器中，加热至温度45℃时，在超声频率为70Hz的条件下超声处理50min，对猕猴桃枝条组织进行处理；

[0033] (4)处理结束立即将苗木从PE带中取出晾干，可假植或直接栽植及苗木销售。

[0034] 上述实施例中的猕猴桃枝条或幼苗都是需要先加热至45-50℃，结合60-100Hz的超声处理30-60min，能够有效杀死枝条、苗木组织的Psa，防止猕猴桃苗木、接穗传播溃疡病病菌，保证枝条或苗木能够健康生长。

[0035] 为了验证本发明对猕猴桃枝条或幼苗的溃疡病病菌消毒效果，现结合下述的实验进行说明。

[0036] 猕猴桃溃疡病感病枝条：在陕西省周至县佰瑞猕猴桃创新园进行大田调查，剪取呈现红色菌脓具有溃疡病典型症状的枝条，装在消毒的自封袋中，4℃保存备用。

[0037] 1年生猕猴桃实生苗：购买于陕西省周至县佰瑞猕猴桃创新园。

[0038] 选用0.6％NaClO对枝条表面消毒10min，再用灭菌蒸馏水清洗2～3次，确保枝条表面的NaClO消毒剂充分洗掉。

[0039] 处理组1：选取频率为0、20、40、60、80、100Hz，将枝条在处理温度为45℃，超声时间为30min，对照组1不做任何处理，采用菌落计数法统计对照组1与处理组Psa的生长情况，用下式计算杀菌率：(选取菌落数量在30-300之间)。

[0040]

[0041] 采用菌落计数法统计对照组1与处理组Psa的生长情况，结果如图1所示。

[0042] 由图1可知，枝条在单独的加热至45℃处理时，其抑菌率只能达到48％；联合超声处理后，随着超声频率的不断增大，杀菌率不断增大，当频率达到80Hz时，杀菌率达到97.11％；当超声频率达到100Hz时，杀菌率与80Hz时基本保持一致。

[0043] 处理组2：幼苗在温度为45℃、超声频率80Hz，时间为45min，每次处理30棵，重复三次；对照组2为正常的健康幼苗，不作任何处理。处理组与对照组2苗木栽植于陕西省周至县佰瑞猕猴桃创新园，2018年4月1日调查苗木成活率，2018.7.25调查苗木的生长情况，计数每株苗木叶片总数，用游标卡尺测量苗木地基直径、株高、叶片的长与宽，相关指标测定结果如下表1所示：

[0044] 表1为处理组2和对照组2的苗木质量指标测定结果

[0045]试验分组 成活率 叶片直径 苗高 叶片数 地际直径
处理组2 100％ 8.13±0.98 52.13±2.53 23.33±1.53 1.32±0.05
对照组2 100％ 7.85±1.76 49.74±1.69 21.67±1.99 1.27±0.11

[0046] 由表1可知，用本发明的方法将苗木进行消毒处理，研究发现，处理组的苗木并未表现出发病的情况，而且处理组全部成活，从苗木的生长情况来看，苗木的叶片直径、苗高、叶片数以及地际直径均与对照组2相比，无显著性差异，同时，证明了本发明的消毒方法适合苗木杀菌，能够有效杀死苗木组织的Psa，且不影响苗木的正常生长。

[0047] 以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明书内容所做的等效结构或等效流程的变换，或直接或间接运用到其它相关技术领域，均同理包括在本发明专利范围内。