分枝型多元甘醇环氧衍生物交联透明质酸钠凝胶及其制备和应用

摘要

本发明公开了一种分枝型多元甘醇环氧衍生物交联透明质酸钠凝胶及其制备和应用。本发明制备的交联透明质酸钠凝胶中所用的交联剂为多元甘醇环氧衍生物，由于其分子中存在多个醚键，使得凝胶体系中存在较多氢键，使得凝胶稳定性增强；同时，由于分枝型多元甘醇环氧衍生物的空间结构的特殊性，所制得的凝胶空间的缠绕结构更加复杂，所制得的凝胶更加稳定。另外，由于本发明中所涉及的分枝型多元甘醇环氧衍生物为单一分子量的化合物，其所制得的凝胶产品批次稳定性较好。

权利要求

1.一种分枝型多元甘醇环氧衍生物交联的高分子聚合物，所述分枝型多元甘醇环氧衍生物具有如下结构：其中，A为核心结构，为多元醇基，选自：季戊四醇、寡聚季戊四醇、丙三醇和寡聚丙三醇的残基及其甘油醚基，X1为连接基团，选自：-CH2CONH-、-CH2CH2CONH-、-CH2CONHCH2-、-CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2NHCOCH2-和-CH2CH2NHCOCH2CH2-中一种或两种以上的组合；

X2为连接基团，选自：-(CH2)i-、-(CH2)iO-、-(CH2)iCO-、-(CH2)iNH-、-(CH2)iNHCO(CH2)j-、-(CH2)iCONH(CH2)j-、-(CH2)iOCO(CH2)j-、-(CH2)iCOO(CH2)j-、中一种或两种以上的组合，i和j独立地选自0-10的整数，

PEG具有如下结构：-(CH2CH2O)m-，m为4-200的整数，n为3-24的整数，

所述分枝型多元甘醇环氧衍生物为单一分子量的化合物。

2.如权利要求1所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述A具有如下结构：其中，B具有如下结构：

r为1-5的整数，

a、b、c和d为整数，独立地选自0和1，

s为1-5的整数，

e、f和g为整数，独立地选自0和1。

3.如权利要求2所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述r为1、2或3。

4.如权利要求2所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述s为1、2或3。

5.如权利要求2所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述a、b、c和d均为0，或，所述a、b、c和d均为1。

6.如权利要求2所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述e、f和g均为0，或，所述e、f和g均为1。

7.如权利要求2所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述A选自如下结构：

8.如权利要求1-7任一项所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述X2选自：-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CONH-、-CH2CH2CONH-、-CH2CONHCH2-、-CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2NHCOCH2-和-CH2CH2NHCOCH2CH2-中一种或两种以上的组合；和/或，所述m为4-100的整数。

9.如权利要求8所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述X1为-CH2CH2CONH-；和/或，所述X2为-CH2-。

10.如权利要求9所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述分枝型多元甘醇环氧衍生物具有如下结构：

11.如权利要求10所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述m为4、12或24。

12.如权利要求1所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述高分子聚合物为天然高分子和/或合成高分子。

13.如权利要求12所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述的天然高分子选自：甲壳素及甲壳素衍生物、壳聚糖及壳聚糖衍生物、卡拉胶及羧甲基卡拉胶、纤维素衍生物、淀粉及淀粉衍生物、海藻酸钠、瓜尔胶及羧甲基瓜尔胶、胶原蛋白和透明质酸及透明质酸盐中的一种或多种。

14.如权利要求12所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述的合成高分子选自：聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚环氧乙烷、聚乙烯醇、聚醋酸乙烯脂、聚乳酸、聚乙醇酸、聚丙烯酸、聚丙烯酰胺、聚四氢呋喃、聚环氧丁烷、聚氧杂环丁烷、聚马来酸酐、聚羟乙基丙烯酸甲酯、聚丙二醇、聚己内酯、及其衍生物中的一种或多种。

15.如权利要求1所述的交联高分子聚合物，其特征在于，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸钠。

16.一种权利要求1-15任一项所述的交联高分子聚合物的制备方法，包括高分子聚合物与所述的分枝型多元甘醇环氧衍生物在碱性条件下交联反应的步骤。

17.如权利要求16所述的制备方法，其特征在于，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸钠。

18.如权利要求17所述的制备方法，其特征在于，所述的分枝型多元甘醇环氧衍生物与透明质酸中聚合物单元的摩尔比为0.01-1:1。

19.如权利要求17所述的制备方法，其特征在于，所述反应温度为35-45℃。

20.如权利要求17所述的制备方法，其特征在于，所述透明质酸钠的分子量为5万-300万道尔顿。

21.一种凝胶，所述凝胶包括权利要求1-15任一项所述的交联高分子聚合物。

22.一种分枝型多元甘醇衍生物在制备权利要求1-15任一项所述的交联高分子聚合物或权利要求21所述的凝胶中的应用；

其中，所述分枝型多元甘醇环氧衍生物具有如下结构：

其中，A为核心结构，为多元醇基，选自：季戊四醇、寡聚季戊四醇、丙三醇和寡聚丙三醇的残基及其甘油醚基，X1为连接基团，选自：-CH2CONH-、-CH2CH2CONH-、-CH2CONHCH2-、-CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2NHCOCH2-和-CH2CH2NHCOCH2CH2-中一种或两种以上的组合；

X2为连接基团，选自：-(CH2)i-、-(CH2)iO-、-(CH2)iCO-、-(CH2)iNH-、-(CH2)iNHCO(CH2)j-、-(CH2)iCONH(CH2)j-、-(CH2)iOCO(CH2)j-、-(CH2)iCOO(CH2)j-、中一种或两种以上的组合，i和j独立地选自0-10的整数，

PEG具有如下结构：-(CH2CH2O)m-，m为4-200的整数，n为3-24的整数，

所述分枝型多元甘醇环氧衍生物为单一分子量的化合物。

23.如权利要求22所述的应用，其特征在于，所述A选自如下结构：

24.如权利要求22或23所述的应用，其特征在于，所述X2选自：-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CONH-、-CH2CH2CONH-、-CH2CONHCH2-、-CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2NHCOCH2-和-CH2CH2NHCOCH2CH2-中一种或两种以上的组合；和/或，所述m为4-100的整数。

25.如权利要求24所述的应用，其特征在于，所述X1为-CH2CH2CONH-；和/或，所述X2为-CH2-。

26.如权利要求25所述的应用，其特征在于，所述分枝型多元甘醇环氧衍生物具有如下结构：

27.如权利要求26所述的应用，其特征在于，所述m为4、12或24。

28.一种权利要求1-15任一项所述的交联高分子聚合物或权利要求21所述的凝胶在制备用于药物、医疗美容、化妆品或保健食品用途的产品中的应用。

29.如权利要求28所述的应用，其特征在于，所述医疗美容用途的产品为软组织填充剂。

30.如权利要求28所述的应用，其特征在于，所述药物用途的产品包括术后防粘连剂、药物载体和预防和/或治疗疾病的药物。

31.一种软组织填充剂，其包括权利要求1-15任一项所述的交联高分子聚合物或权利要求21所述的凝胶。

说明书

分枝型多元甘醇环氧衍生物交联透明质酸钠凝胶及其制备和

应用

技术领域

[0001] 本发明涉及透明质酸钠凝胶技术领域，具体涉及一种分枝型多元甘醇环氧衍生物交联透明质酸钠凝胶及其制备和应用。

背景技术

[0002] 透明质酸(hyalouronic acid，HA)是由葡萄糖醛酸和乙酰氨基葡糖双糖单位重复组成的一种直链高分子粘性多糖。透明质酸是人体内本身具有的内源性物质，具有良好的
生物相容性；具有高粘弹性和非牛顿流变学特性；无毒、无免疫源性、无刺激性，具有很高的安全性，以及可通过注射透明质酸酶降解消除等特点，被广泛用作美容中的软组织填充剂。
即将透明质酸注射至皮肤内，以增加软组织体积，可达到除皱或塑形等目的。但是由于透明质酸本身以液体形式存在，在体内透明质酸酶和自由基的作用下非常容易被分解，因此难
以达到塑性效果且填充效果持续时间短。

[0003] 为了克服这一缺陷，技术人员将交联技术运用于透明质酸，即通过交联剂将透明质酸分子连接起来形成相对稳定的网状结构，使其不再容易被分解、填充维持的时间变长。
经过交联修饰后透明酸钠凝胶具有粘弹性能好、不溶于水、机械强度高、降解时间长的优
点，同时，交联程度的不同带来了不同的物理特性，使其能够更好地满足美容填充需求。

[0004] 目前市售的透明质酸钠凝胶产品中使用的交联剂主要有：BDDE(丁二醇二缩水甘油醚)和DVS(二乙烯基砜)。如法国高德美公司(Galderma)Restylane瑞蓝系列、美国艾尔健公司(Allergan)Juvederm乔雅登系列、法国维法西公司(Laboratoires Vivacy)Stylage系
列、中国台湾科妍生物海德密丝(Hya-Dermis)系列均采用BDDE交联制备透明质酸钠凝胶，
而美国基因酶公司(Genzyme)Hylaform系列、德国阿杜德姆公司(Adoderm)Varioderm系列、瑞士泰奥赛恩公司(Teoxane)Teosyal系列均采用DVS作为交联剂制备透明质酸钠凝胶。两
种交联剂制备的凝胶具有截然不同的物理性能：DVS交联产品质地硬，交联活性高；BDDE交联产品质地柔软，反应较为温和，膨胀率大。但值得注意的是，上述交联剂均具有毒性或潜在致癌隐患，且交联后的空间网状结构对未反应的交联剂具有包裹作用，去除难度较大。

[0005] 专利申请CN201611246123.9中公开了一种高效低毒的多元甘醇环氧衍生物交联剂 (n＝4、5、6、7、8、9、10、11、12……200)，用该交联剂制备的
透明质酸钠凝胶具有优良的性能。但为进一步提高凝胶的体内稳定性，本发明设计了一种
分枝型多元甘醇环氧衍生物，其作为交联剂制备透明质酸钠凝胶除具有凝胶柔软、黏弹性
好、毒性低、产品均一性等优点外，该凝胶具有更佳的稳定性。

发明内容

[0006] 为克服现有技术的不足，本发明提供一种结构新颖的分枝型多元甘醇环氧衍生物及交联的透明质酸凝胶及其制备和应用。

[0007] 本发明一方面提供一种分枝型多元甘醇环氧衍生物，其具有如下结构：

[0008]

[0009] 其中，A为核心结构，为多元醇基，选自：季戊四醇、寡聚季戊四醇、丙三醇和寡聚丙三醇的残基及其甘油醚基，

[0010] X1和X2为连接基团，独立地选自：-(CH2)i-、-(CH2)iO-、-(CH2)iCO-、-(CH2)iNH-、-(CH2)iNHCO(CH2)j-、-(CH2)iCONH(CH2)j-、-(CH2)iOCO(CH2)j-、-(CH2)iCOO(CH2)j-、

[0011]中一种或两种以上的组合，i和j独立地选自
0-10的整数，

[0012] PEG具有如下结构：-(CH2CH2O)m-，m为4-200的整数，

[0013] n为3-24的整数，

[0014] 所述分枝型多元甘醇环氧衍生物为单一分子量的化合物。

[0015] 在本发明的一个实施例中，所述A具有如下结构：

[0016]

[0017] 其中，B具有如下结构：

[0018] r为1-5的整数(具体可为1、2、3、4或5)，

[0019] a、b、c和d为整数，独立地选自0和1。

[0020] 在本发明的另一个实施例中，所述A具有如下结构：

[0021]

[0022] 其中，B具有如下结构：

[0023] s为1-5的整数(具体可为1、2、3、4或5)，

[0024] e、f和g为整数，独立地选自0和1。

[0025] 在本发明的一个实施例中，式Ⅱ中，所述r为1、2或3。

[0026] 在本发明的一个实施例中，式Ⅱ中，所述a、b、c和d均为0。

[0027] 在本发明的另一个实施例中，式Ⅱ中，所述a、b、c和d均为1。

[0028] 在本发明的一个实施例中，式Ⅲ中，所述s为1、2或3。

[0029] 在本发明的一个实施例中，式Ⅲ中，所述e、f和g均为0。

[0030] 在本发明的另一个实施例中，式Ⅲ中，所述e、f和g均为1。

[0031] 在本发明的一个实施例中，所述A具有如下结构：

[0032]

[0033] 在本发明的一个实施例中，所述A具有如下结构：

[0034]

[0035] 在本发明的一个实施例中，所述A具有如下结构：

[0036]

[0037] 在本发明的一个实施例中，所述A具有如下结构：

[0038]

[0039] 在本发明的一个实施例中，所述A具有如下结构：

[0040]

[0041] 在本发明的一个实施例中，所述A具有如下结构：

[0042]

[0043] 在本发明的一个实施例中，所述n为3-16的整数，具体可为3、4、5、6、7、8、10、12、14或16。

[0044] 在本发明的一个实施例中，所述X1中，所述i和j独立地选自0-10的整数，具体可为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，优选为0、1、2或3。

[0045] 在本发明的一个实施例中，所述X2中，所述i和j独立地选自0-10的整数，具体可为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，优选为0、1、2或3。

[0046] 在本发明的一个实施例中，所述X1选自：-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CONH-、-CH2CH2CONH-、-CH2CONHCH2-、-CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2NHCOCH2-和-CH2CH2NHCOCH2CH2-中一种或两种以上的组合。

[0047] 在本发明的一个优选实施例中，所述X1为-CH2CH2CONH-。

[0048] 在本发明的一个实施例中，所述X2选自：-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CONH-、-CH2CH2CONH-、-CH2CONHCH2-、-CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2CONHCH2CH2-、-CH2CH2NHCOCH2-和-CH2CH2NHCOCH2CH2-中一种或两种以上的组合。

[0049] 在本发明的一个优选实施例中，所述X2为-CH2-。

[0050] 本发明所述的分枝型多元甘醇环氧衍生物中，m为4-200的整数，如4-100的整数(具体可为4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、35、
40、45、50、60、70、80、90或100)、100-200的整数(具体可为100、110、120、130、140、150、160、
170、180、190或200)，优选为4-100的整数。

[0051] 在本发明的一个优选实施例中，所述m为4、12或24。

[0052] 在本发明的一个实施例中，所述分枝型多元甘醇环氧衍生物具有如下结构：

[0053]

[0054] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-1中，m为4。

[0055] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-1中，m为12。

[0056] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-1中，m为24。

[0057] 在本发明的一个实施例中，所述分枝型多元甘醇环氧衍生物具有如下结构：

[0058]

[0059] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-2中，m为4。

[0060] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-2中，m为12。

[0061] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-2中，m为24。

[0062] 在本发明的一个实施例中，所述分枝型多元甘醇环氧衍生物具有如下结构：

[0063]

[0064] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-3中，m为4。

[0065] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-3中，m为12。

[0066] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-3中，m为24。

[0067] 在本发明的一个实施例中，所述分枝型多元甘醇环氧衍生物具有如下结构：

[0068]

[0069] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-4中，m为4。

[0070] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-4中，m为12。

[0071] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-4中，m为24。

[0072] 在本发明的一个实施例中，所述分枝型多元甘醇环氧衍生物具有如下结构：

[0073]

[0074] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-5中，m为4。

[0075] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-5中，m为12。

[0076] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-5中，m为24。

[0077] 在本发明的一个实施例中，所述分枝型多元甘醇环氧衍生物具有如下结构：

[0078]

[0079] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-6中，m为4。

[0080] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-6中，m为12。

[0081] 在本发明的一个实施例中，式Ⅰ-6中，m为24。

[0082] 本发明另一方面提供一种上述分枝型多元甘醇环氧衍生物的制备方法，所述方法包括在溶剂中，使用催化剂催化 与分枝型多元甘醇
反应的步骤，

[0083] 其中，所述A、X1、X2、PEG和n具有本发明上述定义，

[0084] -X为离去基团，

[0085] 所述的催化剂为碱催化剂，包括有机碱或无机碱。

[0086] 在本发的一个实施例中，所述的溶剂包括但不限于：1，4-二氧六环、四氢呋喃、甲苯、丙酮、乙酸乙酯、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或水。

[0087] 在本发的一个实施例中，所述碱催化剂选自但不限于：吡啶、三乙胺、碳酸铯、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、醇钠和醇钾中的一种或多种。

[0088] 在本发的一个实施例中，所述离去基团选自：-F、-I、-Br和-Cl中的一种。

[0089] 在本发的一个实施例中，所述分枝型多元甘醇中单羟基与的摩尔比为1：2-4。

[0090] 在本发的一个实施例中，所述制备方法还包括纯化步骤；具体地，所述的纯化步骤选自：旋蒸、洗涤、萃取、分子蒸馏和柱分离中的一种或多种的组合。

[0091] 在本发明的一个优选实施例中，所述制备方法包括如下具体步骤：向反应容器中加入上述分枝型多元甘醇、溶剂和催化剂，搅拌，向上述混合物中滴加卤化或磺酸酯化的环氧丙烷，控制反应温度不超过35℃，反应完成后过滤，洗涤滤渣，并收集滤液并纯化，得到所述多元甘醇环氧衍生物。

[0092] 上述反应通式如下：

[0093]

[0094] 采用上述制备方法合成的分枝型多元甘醇环氧衍生物纯度较高，其纯度HPLC检测大于99％。该低毒性、高反应活性、超亲水性多元甘醇环氧衍生物交联剂可用于天然高分子如天然多糖和蛋白质、合成高分子如聚乙二醇和聚乙烯醇等高分子聚合物的交联。

[0095] 本发明另一方面还提供一种交联剂，所述交联剂包括本发明上述分枝型多元甘醇环氧衍生物。

[0096] 本发明另一方面还提供一种本发明上述分枝型多元甘醇环氧衍生物交联的高分子聚合物。所述高分子聚合物可为天然高分子和/或合成高分子。

[0097] 具体地，所述的天然高分子选自：甲壳素及甲壳素衍生物(如羧甲基甲壳素和羧乙基甲壳素)、壳聚糖及壳聚糖衍生物(如羧甲基壳聚糖和羧乙基壳聚糖等)、卡拉胶及羧甲基卡拉胶、纤维素衍生物(如羧甲基纤维素、羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素等)、淀粉及淀粉衍生物(如羧甲基淀粉等)、海藻酸钠、瓜尔胶及羧甲基瓜尔胶、胶原蛋白和透明质酸及透明质酸盐(如透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸钙、透明质酸镁、透明质酸锌、透明质酸钴和透明质酸四丁铵等)中的一种或多种。

[0098] 具体地，所述的合成高分子选自：聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚环氧乙烷、聚乙烯醇、聚醋酸乙烯脂、聚乳酸、聚乙醇酸、聚丙烯酸、聚丙烯酰胺、聚四氢呋喃、聚环氧丁烷、聚氧杂环丁烷、聚马来酸酐、聚羟乙基丙烯酸甲酯、聚丙二醇、聚己内酯、及其衍生物中的一种或多种。

[0099] 在本发明的一个优选实施例中，所述天然高分子为透明质酸或透明质酸盐；具体地，所述的透明质酸盐选自：透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸钙、透明质酸镁、透明质酸锌、透明质酸钴和透明质酸四丁铵中的一种或两种以上的混合物。

[0100] 在本发明的一个更优选实施例中，所述透明质酸盐为透明质酸钠。

[0101] 在本发明的一个优选实施例中，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸钠。

[0102] 在本发明的一个实施例中，所述透明质酸钠的分子量为5万-300万道尔顿，具体可为5-100万道尔顿(如5、10、20、30、40、50、60、70、80、90或100万道尔顿)或100-300万道尔顿(如100、150、200、250或300万道尔顿)。

[0103] 本发明另一方面还提供一种凝胶，所述凝胶包含本发明上述交联高分子聚合物。

[0104] 在本发明的一个优选实施例中，所述凝胶中，所述高分子聚合物为透明质酸或透明质酸盐；具体地，所述的透明质酸盐选自：透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸钙、透明质酸镁、透明质酸锌、透明质酸钴和透明质酸四丁铵中的一种或多种的混合物。

[0105] 在本发明的一个优选实施例中，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸钠。

[0106] 在本发明的一个实施例中，所述凝胶中，所述透明质酸钠的分子量为5万-300万道尔顿。

[0107] 本发明另一方面提供一种上述分枝型多元甘醇环氧衍生物交联的高分子聚合物的制备方法，包括高分子聚合物与上述分枝型多元甘醇环氧衍生物在碱性条件下交联反应
的步骤。

[0108] 在本发明的一个实施例中，所述交联反应在碱性溶液中进行。

[0109] 在本发明的一个实施例中，所述的碱性溶液选自：氢氧化钠、氢氧化钾和碳酸钠溶液中的一种或多种。

[0110] 在本发明的一个优选实施例中，所述碱性溶液为质量浓度为0.1-10％的氢氧化钠水溶液。

[0111] 在本发明的一个实施例中，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸钠，所述制备方法包括将所述分枝型多元甘醇环氧衍生物溶于碱性溶液中，加入透明质酸钠粉末中，搅
拌反应的步骤。

[0112] 在本发明的一个实施例中，所述分枝型多元甘醇环氧衍生物与透明质酸中聚合物单元的摩尔比为0.01-1:1，具体可为0.01:1、0.05:1、0.1:1、0.15:1、0.2:1、0.25:1、0.3:1、
0.4:1、0.5:1、0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1或1.0:1，优选为0.1-0.5:1。

[0113] 在本发明的一个实施例中，所述透明质酸钠与碱性溶液的质量比为1:5-30，具体可为1:5、1:10、1:15、1:20、1:25或1:30。

[0114] 在本发明的一个实施例中，所述反应温度为35-45℃，具体可为35、36、38、40、42、44或45℃，优选为40℃。

[0115] 在本发明的一个实施例中，所述透明质酸钠的分子量为5万-300万道尔顿，具体可为5-100万道尔顿(如5、10、20、30、40、50、60、70、80、90或100万道尔顿)或100-300万道尔顿(如100、150、200、250或300万道尔顿)。

[0116] 在本发明的一个实施例中，所述的制备方法还包括交联剂去除步骤；具体地，所述交联剂去除的步骤包括依次将上述交联反应产物pH值调中性、溶胀的步骤。

[0117] 在本发明的一个实施例中，所述将交联反应产物pH值调中性为加酸调pH值至中性，优选的，所述酸为盐酸，更优选为浓度为0.1N-2N盐酸。

[0118] 在本发明的一个实施例中，所述溶胀包括加入适量PBS缓冲液使交联反应产物溶胀。

[0119] 在本发明的一个实施例中，所述的交联剂去除步骤还包括透析步骤。

[0120] 本发明还提供一种上述凝胶的制备方法，其包括上述交联高分子聚合物的制备方法的步骤。

[0121] 在本发明的一个实施例中，所述制备方法还包括筛分、灌装和灭菌的步骤。

[0122] 在本发明的一个实施例中，所述的灭菌条件为121℃-125℃蒸汽中灭菌8-25分钟。

[0123] 在本发明的一个优选实施例中，上述凝胶的制备方法包括如下具体步骤：

[0124] 步骤一：将分枝型多元甘醇环氧衍生物溶于碱性溶液中，加入透明质酸钠粉末中，35-45℃，优选为40℃搅拌反应形成交联透明质酸钠凝胶；

[0125] 步骤二：加酸将凝胶调节为中性；

[0126] 步骤三：加入适量PBS缓冲液使凝胶溶胀；

[0127] 步骤四：反复透析多次，去除凝胶中残留的小分子交联剂；

[0128] 步骤五：用标准筛筛分；

[0129] 步骤六：将步骤六中收集的凝胶颗粒灌装于事先灭菌的一次性注射器中，在121℃-125℃蒸汽中灭菌8-25分钟，即可得到注射用修饰透明质酸钠凝胶。

[0130] 本发明另一方面提供一种上述分枝型多元甘醇衍生物在制备上述交联剂、交联高分子聚合物和凝胶中的应用。

[0131] 在本发明的一个实施例中，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸或交联透明质酸盐。

[0132] 在本发明的一个优选实施例中，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸钠。

[0133] 在本发明的一个实施例中，所述凝胶为包含交联透明质酸钠的凝胶。

[0134] 本发明另一方面提供一种上述交联剂在制备交联高分子聚合物或凝胶中的应用。

[0135] 在本发明的一个实施例中，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸或交联透明质酸盐。

[0136] 在本发明的一个优选实施例中，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸钠。

[0137] 在本发明的一个实施例中，所述凝胶为包含交联透明质酸钠的凝胶。

[0138] 本发明另一方面提供一种上述交联高分子聚合物或上述凝胶在制备用于药物、医疗美容、化妆品或保健食品用途的产品中的应用。

[0139] 在本发明的一个实施例中，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸或交联透明质酸盐。

[0140] 在本发明的一个优选实施例中，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸钠。

[0141] 在本发明的一个实施例中，所述凝胶为包含交联透明质酸钠的凝胶。

[0142] 在本发明的一个实施例中，所述的医疗美容用途的产品为软组织填充剂。

[0143] 在本发明的一个实施例中，所述的药物用途的产品包括术后防粘连剂、药物载体和预防和/或治疗疾病的药物。

[0144] 本发明另一方面提供一种软组织填充剂，其包括上述交联高分子聚合物或凝胶。

[0145] 在本发明的一个实施例中，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸或交联透明质酸盐。

[0146] 在本发明的一个优选实施例中，所述交联高分子聚合物为交联透明质酸钠。

[0147] 在本发明的一个实施例中，所述凝胶为包含交联透明质酸钠的凝胶。

[0148] 本发明采用新型交联剂制备交联透明质酸钠的有益效果包括：本发明制备的交联透明质酸钠凝胶中所用的交联剂为多元甘醇环氧衍生物，由于其分子中存在多个醚键，使
得凝胶体系中存在较多氢键，使得凝胶稳定性增强；同时，由于分枝型多元甘醇环氧衍生物的空间结构的特殊性，所制得的凝胶空间的缠绕结构更加复杂，所制得的凝胶更加稳定。另外，由于本发明中所涉及的分枝型多元甘醇环氧衍生物为单一分子量的化合物，其所制得
的凝胶产品批次稳定性较好。

[0149] 本发明整合了交联透明质酸钠成胶除杂工艺，可制备出低毒、少残留、挤推力小、塑形性好、耐酶性好、体内保留时间长的注射用修饰透明质酸钠凝胶；本发明分枝型多元甘醇环氧衍生物交联的透明质酸钠结构更为紧密，所制备的交联透明质酸钠凝胶稳定性能更加优越。

具体实施方式

[0150] 下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

[0151] 实施例1：合成四臂十二甘醇四缩水甘油醚(Ia)

[0152] 合成如下结构的四臂十二甘醇四缩水甘油醚：

[0153]

[0154] 向三口瓶中加入四臂十二甘醇( 0.1mol)、四氢呋喃(THF，100mL)和氢氧化钾(0.8mol)，水浴搅拌，然后向反应体系中滴加环氧氯丙烷
(ECH，1.2mol)，控制反应温度不超过35℃，室温反应过夜。反应完后过滤反应液，并用二氯甲烷洗涤滤渣，然后收集滤液，旋蒸除去二氯甲烷得到粗品。粗品经硅胶柱分后得到纯品四甘醇二缩水甘油醚。

[0155] 1H-NMR(DMSO-d6)：2.26-2.30(m，8H)，2.54-2.55(m，4H)，2.72-2.73(m，4H)，3.09-3.10(m，4H)，3.17-3.28(m，20H)，3.35-3.64(m，192H)，3.70-3.71(m，4H)，7.88-7.92(t，
4H)；

[0156] MALDI-TOF(2780.3，M+Na)。

[0157] 实施例2：合成四臂二十四甘醇四缩水甘油醚(Ib)

[0158] 合成如下结构的四臂二十四甘醇四缩水甘油醚：

[0159]

[0160] 向三口瓶中加入四臂二十四甘醇( 0.1mol)、四氢呋喃(THF，100mL)和氢氧化钾(0.8mol)，水浴搅拌，然后向反应体系中滴加环氧氯丙烷(ECH，1.2mol)，控制反应温度不超过35℃，室温反应过夜。反应完后过滤反应液，并用二氯甲烷洗涤滤渣，然后收集滤液，旋蒸除去二氯甲烷得到粗品。粗品经硅胶柱分后得到纯品二十四甘醇四缩水甘油醚。

[0161] 1H-NMR(DMSO-d6)：2.26-2.30(m，8H)，2.54-2.55(m，4H)，2.72-2.73(m，4H)，3.09-3.10(m，4H)，3.17-3.28(m，20H)，3.35-3.64(m，384H)，3.70-3.71(m，4H)，7.88-7.92(t，
4H)；

[0162] MALDI-TOF(4665.9，M+Na)。

[0163] 实施例3：合成八臂四甘醇八缩水甘油醚(Ic)

[0164] 合成如下结构的八臂四甘醇八缩水甘油醚：

[0165]

[0166] 向三口瓶中加入八臂四甘醇(0.1mol)、四氢呋喃(THF，100mL)和氢氧化钾(1.6mol)，水浴搅拌，然后向反应体系中滴加环氧氯丙烷(ECH，2.4mol)，控制反应温度不超过35℃，室温反应过夜。反应完后过滤反应液，并用二氯甲烷洗涤滤渣，然后收集滤液，旋蒸除去二氯甲烷得到粗品。粗品经硅胶柱分后得到纯品八臂四甘醇八缩水甘油醚。

[0167] 1H-NMR(DMSO-d6)：2.27-2.33(m，16H)，2.54-2.55(m，8H)，2.72-2.73(m，8H)，3.09-3.10(m，8H)，3.16-3.26(m，24H)，3.28-3.44(m，24H)，3.48-3.50(m，116H)，3.55-3.60(m，
8H)，3.66-3.71(m，16H)，7.87-7.90(t，8H)；

[0168] MALDI-TOF(2880.8，M+Na)。

[0169] 实施例4：合成八臂十二甘醇八缩水甘油醚(Id)

[0170] 合成如下结构的八臂十二甘醇八缩水甘油醚：

[0171]

[0172] 向三口瓶中加入八臂十二甘醇(0.1mol)、四氢呋喃(THF，100mL)和氢氧化钾(1.6mol)，水浴搅拌，然后向反应体系中滴加环氧氯丙烷(ECH，2.4mol)，控制反应温度不超过35℃，室温反应过夜。反应完后过滤反应液，并用二氯甲烷洗涤滤渣，然后收集滤液，旋蒸除去二氯甲烷得到粗品。粗品经硅胶柱分后得到纯品八臂十二甘醇八缩水甘油醚。

[0173] 1H-NMR(DMSO-d6)：2.28-2.33(m，16H)，2.54-2.55(m，8H)，2.72-2.73(m，8H)，3.09-3.10(m，8H)，3.16-3.27(m，24H)，3.29-3.44(m，24H)，3.47-3.50(m，372H)，3.55-3.60(m，
8H)，3.66-3.71(m，16H)，7.87-7.90(t，8H)；

[0174] MALDI-TOF(5698.4，M+Na)。

[0175] 实施例5：四臂十二甘醇四缩水甘油醚交联透明质酸钠凝胶(IIa)

[0176] 将交联剂四臂十二甘醇四缩水甘油醚(0.2mol，实施例1制备)溶于NaOH溶液中加入透明质酸钠粉末(聚合物单元1mol)，40℃搅拌反应形成交联透明质酸钠凝胶；其次向凝
胶中加入适量盐酸调节pH为7.0，再加入适量PBS缓冲液凝胶溶胀；然后用标准药典筛将凝
胶过筛，收集凝胶颗粒，最后，凝胶经反复透析后，用标准药典筛筛分、灌装、蒸汽灭菌后即得注射用修饰透明质酸钠凝胶。

[0177] 实施例6：四臂二十四甘醇四缩水甘油醚交联透明质酸钠凝胶(IIb)

[0178] 将交联剂四臂二十四甘醇四缩水甘油醚(0.2mol，实施例2制备)溶于NaOH溶液中加入透明质酸钠粉末(聚合物单元1mol)，40℃搅拌反应形成交联透明质酸钠凝胶；其次向
凝胶中加入适量盐酸调节pH为7.0，再加入适量PBS缓冲液凝胶溶胀；然后用标准药典筛将
凝胶过筛，收集凝胶颗粒，最后，凝胶经反复透析后，用标准药典筛筛分、灌装、蒸汽灭菌后即得注射用修饰透明质酸钠凝胶。

[0179] 实施例7：八臂四甘醇八缩水甘油醚交联透明质酸钠凝胶(IIc)

[0180] 将交联剂八臂四甘醇八缩水甘油醚(0.2mol，实施例3制备)溶于NaOH溶液中加入透明质酸钠粉末(聚合物单元1mol)，40℃搅拌反应形成交联透明质酸钠凝胶；其次向凝胶
中加入适量盐酸调节pH为7.0，再加入适量PBS缓冲液凝胶溶胀；然后用标准药典筛将凝胶
过筛，收集凝胶颗粒，最后，凝胶经反复透析后，用标准药典筛筛分、灌装、蒸汽灭菌后即得注射用修饰透明质酸钠凝胶。

[0181] 实施例8：八臂十二甘醇八缩水甘油醚交联透明质酸钠凝胶(IId)

[0182] 将交联剂八臂十二甘醇八缩水甘油醚(0.2mol，实施例4制备)溶于NaOH溶液中加入透明质酸钠粉末(聚合物单元1mol)，40℃搅拌反应形成交联透明质酸钠凝胶；其次向凝
胶中加入适量盐酸调节pH为7.0，再加入适量PBS缓冲液凝胶溶胀；然后用标准药典筛将凝
胶过筛，收集凝胶颗粒，最后，凝胶经反复透析后，用标准药典筛筛分、灌装、蒸汽灭菌后即得注射用修饰透明质酸钠凝胶。

[0183] 实施例9：体外稳定性实验

[0184] 采用透明质酸酶溶液降解交联的透明质酸钠凝胶，来考察凝胶的体外稳定性。

[0185] 实验方法：

[0186] 取交联的透明质酸钠凝胶0.5g，加入300U/ml的透明质酸酶溶液2mL，37℃保温降解40小时，加PBS至5mL，取1ml加无水乙醇4mL，10000r/min离心15min，取上清液2mL用PBS定容至5mL，作为甲液；另取交联的透明质酸钠凝胶0.5g，加0.5mol/L硫酸溶液10mL，沸水浴水解15min，加水稀释至100mL，作为乙液。分别取甲液和乙液各1mL，用改良咔唑显色法测葡萄糖醛酸含量。凝胶的体外抗酶降解性用系数R表示，R＝1-0.625A/B，其中A为甲液的葡萄糖醛酸含量，B为乙液的葡萄糖醛酸含量。R值越高，说明其体外抗酶降解性能越好，交联的凝胶越稳定。检测结果如表1所示。

[0187] 表1交联透明质酸钠凝胶的体外酶解稳定性检测结果

[0188] 供试组 IIa IIb IIc IId BDDE-HA抗酶降解系数 91％ 88％ 81％ 89％ 71％

[0189] 实验结果表明，本发明的分枝型多元甘醇环氧衍生物交联的透明质酸钠凝胶体外稳定性较传统交联剂BDDE交联的透明质酸钠凝胶好。

[0190] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换等，均应包含在本发明的保护范围之内。