一种叶酸的纯化方法

摘要

本发明提供了一种叶酸的纯化方法，包括：将叶酸粗品与第一酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，与第二酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，与第三酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，与水混合，用碱调节pH值至弱酸性，加入吸附剂处理后，过滤，将滤液经调酸结晶后，得到叶酸。与现有技术相比，本发明利用酸溶液对叶酸粗品采用加热搅拌处理的方式进行酸精制，并且进行多级酸精制，可以有效避免杂质D的产生，同时可有效去除杂质A和异叶酸杂质；再者将酸精制后的产品在弱酸温和环境下进行碱精制，减少了叶酸被水解的可能，还可有效去除杂质D，使产品收率及纯度都得到了很大的提升。

权利要求

1.一种叶酸的纯化方法，其特征在于，包括：

S1)将叶酸粗品与第一酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到一级酸处理品；

S2)将所述一级酸处理品与第二酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到二级酸处理品；

S3)将所述二级酸处理品与第三酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到三级酸处理品；

S4)将所述三级酸处理品与水混合，用碱调节pH值至弱酸性，加入吸附剂处理后，过滤，得到滤液；

S5)将所述滤液用第四酸溶液调节pH值至2～4，在搅拌的条件下，升温至50℃～90℃，保温20～40min，降温至50℃～80℃，20～40min后过滤，得到叶酸；

所述第一酸溶液、第二酸溶液与第三酸溶液各自独立地选自盐酸和/或硫酸；所述盐酸的质量浓度为5％～35％；所述硫酸的质量浓度为10％～50％；

所述步骤S1)中加热搅拌的温度为40℃～60℃；加热搅拌的时间为10～60min；继续加热搅拌的温度为45℃～55℃；继续加热搅拌的时间为50～70min；

所述步骤S2)中加热搅拌的温度为45℃～50℃；加热搅拌的时间为25～35min；继续加热搅拌的温度为45℃～50℃；继续加热搅拌的时间为50～70min；

所述步骤S3)中加热搅拌的温度为45℃～50℃；加热搅拌的时间为25～35min；继续加热搅拌的温度为45℃～55℃；继续加热搅拌的时间为50～70min；

所述叶酸粗品与第一酸溶液的质量体积比为(1～4)g：8ml；所述叶酸粗品与第二酸溶液的质量体积比为(1～4)g：8ml；所述叶酸粗品与第三酸溶液的质量体积比为(1～4)g：

8ml；

所述步骤S1)叶酸粗品与加入水的质量体积比为(2～6)g：8ml；所述叶酸粗品与步骤S2)中加入水的质量体积比为(2～6)g：8ml；所述叶酸粗品与步骤S3)中加入水的质量体积比为(2～6)g：8ml；

所述步骤S4)中用碱调节pH值至6.0～6.5；

所述三级酸处理品与水的质量体积比为(0.5～2.5)g：30ml；所述吸附剂与三级酸处理品的质量比为(0.5～2.5)：10。

2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述步骤S4)中碱选自碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠与氢氧化钾中的一种或多种；所述吸附剂选自活性炭、硅藻土与硅胶中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述第四酸溶液为3～10wt％的硫酸溶液。

说明书

一种叶酸的纯化方法

技术领域

[0001] 本发明属于化合物制备技术领域，尤其涉及一种叶酸的纯化方法。

背景技术

[0002] 叶酸是一种维生素的基本品种，是机体细胞生长和繁殖所必需的物质，对细胞的分裂生长及核酸、氨基酸、蛋白质的合成起着重要的作用。人体缺少叶酸可导致红血球的异常，未成熟细胞的增加，贫血以及白血球减少；孕妇缺乏叶酸有可能导致胎儿出生时出现低体重、唇腭裂、心脏缺陷等。

[0003] 含叶酸的食物很多，但由于天然的叶酸极不稳定，易受紫外线、高温等影响而发生氧化，且叶酸生物利用度较低，所以人体真正能从食物中获得的叶酸并不多。人类对叶酸的需求主要依赖于合成法生产。合成的叶酸在数月或数年内可保持稳定，且其容易吸收，人体利用度高，约高出天然制品的一倍左右。随着医药、食品等领域的迅猛发展，叶酸的需求量也迅速增加，推动了叶酸合成技术的快速发展。

[0004] 然而，化学合成的叶酸粗品纯度往往不太高，需要进一步纯化。目前叶酸的纯化方法一般采用酸精制和碱精制相结合的方法。首先行进酸溶工艺，用酸溶液溶解粗品，将溶解后的粗品经水析、压滤得到酸提物；再进行碱溶、精制工艺，在碱溶反应罐内将酸提物加水搅拌，在90～100℃用碱液调节pH值至9.0～9.5，压滤得到碱溶滤液，碱溶滤液经调酸结晶、干燥等精制工艺，即得成品。如中国专利CN102432610A公开的叶酸纯化方法为：利用25％～35％的稀硫酸溶解叶酸粗品，将溶解后的叶酸粗品经水析，压滤得到酸提物；再利用碱液对酸提物进行碱溶，加热至90～102℃，并碱液调节pH值至9.0～9.5，保温1小时，加入活性炭脱色后压滤得到碱溶滤液；再利用稀酸对碱液进行成盐精制得到叶酸成品；中国专利(CN103102351B)公开的叶酸纯化方法为：利用15％～25％的盐酸将叶酸粗品溶解，向所得溶解后的叶酸粗品溶液中加水，放料，离心，直接甩干得到酸提取物；在碱溶反应容器内，酸提取物与溶剂混合，加有机碱溶液使pH调节至9.0～10.0，加热升温至65℃～90℃，再加入吸附剂，65～90℃下保温0.5～2小时，压滤得碱溶滤液，所得澄清的所述碱溶滤液加入到结晶反应容器中，加热升温到80～90℃，用稀盐酸调pH值为3.0～3.5，温度降至55～60℃，离心得叶酸成品。

[0005] 叶酸纯化过程中的主要杂质和难除杂质是杂质D(蝶酸)、异叶酸和杂质A(N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸)，欧洲药典EP8.0标准中要求叶酸成品中杂质D的含量≤0.6％，异叶酸的含量≤0.5％，EP9.5标准中要求杂质D的含量≤0.4％，异叶酸的含量≤0.3％，杂质A小于0.5％。传统的叶酸纯化方法中的碱精制步骤在强碱条件下进行，叶酸在酸性溶液中易水解为杂质D，在碱性条件下更易水解为杂质A(N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸)，进一步增加这两类杂质的含量；而异叶酸用常规方法很难除去，不利于叶酸纯度的进一步提高；并且酸精制中需将叶酸粗品溶解，再加水结晶，废水量大，收率较低，操作复杂。因此，为了进一步提高叶酸的纯度，需要提供一种温和的叶酸纯化方法。

发明内容

[0006] 有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种温和高效的叶酸纯化方法。

[0007] 本发明提供了一种叶酸的纯化方法，包括：

[0008] S1)将叶酸粗品与第一酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到一级酸处理品；

[0009] S2)将所述一级酸处理品与第二酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到二级酸处理品；

[0010] S3)将所述二级酸处理品与第三酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到三级酸处理品；

[0011] S4)将所述三级酸处理品与水混合，用碱调节pH值至弱酸性，加入吸附剂处理后，过滤，得到滤液；

[0012] S5)将所述滤液经调酸结晶后，得到叶酸。

[0013] 优选的，所述第一酸溶液、第二酸溶液与第三酸溶液各自独立地选自盐酸和/或硫酸；所述盐酸的质量浓度为5％～35％；所述硫酸的质量浓度为10％～50％。

[0014] 优选的，所述步骤S1)中加热搅拌的温度为40℃～60℃；加热搅拌的时间为10～60min；继续加热搅拌的温度为45℃～55℃；继续加热搅拌的时间为50～70min；

[0015] 所述步骤S2)中加热搅拌的温度为45℃～50℃；加热搅拌的时间为25～35min；继续加热搅拌的温度为45℃～50℃；继续加热搅拌的时间为50～70min；

[0016] 所述步骤S3)中加热搅拌的温度为45℃～50℃；加热搅拌的时间为25～35min；继续加热搅拌的温度为45℃～55℃；继续加热搅拌的时间为50～70min。

[0017] 优选的，所述叶酸粗品与第一酸溶液的质量体积比为(1～4)g：8ml；所述叶酸粗品与第二酸溶液的质量体积比为(1～4)g：8ml；所述叶酸粗品与第三酸溶液的质量体积比为(1～4)g：8ml。

[0018] 优选的，所述步骤S1)叶酸粗品与加入水的质量体积比为(2～6)g：8ml；所述叶酸粗品与步骤S2)中加入水的质量体积比为(2～6)g：8ml；所述叶酸粗品与步骤S3)中加入水的质量体积比为(2～6)g：8ml。

[0019] 优选的，所述步骤S4)中碱选自碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠与氢氧化钾中的一种或多种；所述吸附剂选自活性炭、硅藻土与硅胶中的一种或多种。

[0020] 优选的，所述步骤S4)中用碱调节pH值至6.0～6.5。

[0021] 优选的，所述三级酸处理品与水的质量体积比为(0.5～2.5)g：30ml；所述吸附剂与三级酸处理品的质量比为(0.5～2.5)：10。

[0022] 优选的，所述步骤S5)具体为：

[0023] 将所述滤液用第四酸溶液调节pH值至2～4，在搅拌的条件下，升温至50℃～90℃，保温20～40min，降温至50℃～80℃，20～40min后过滤，得到叶酸。

[0024] 优选的，所述第四酸溶液为3～10wt％的硫酸溶液。

[0025] 本发明提供了一种叶酸的纯化方法，包括：S1)将叶酸粗品与第一酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到一级酸处理品；S2)将所述一级酸处理品与第二酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到二级酸处理品；S3)将所述二级酸处理品与第三酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到三级酸处理品；S4)将所述三级酸处理品与水混合，用碱调节pH值至弱酸性，加入吸附剂处理后，过滤，得到滤液；S5)将所述滤液经调酸结晶后，得到叶酸。与现有技术相比，本发明利用酸溶液对叶酸粗品采用加热搅拌处理的方式进行酸精制，并且进行多级酸精制，可以有效避免杂质D的产生，同时可有效去除杂质A和异叶酸杂质；再者将酸精制后的产品在弱酸温和环境下进行碱精制，减少了叶酸被水解的可能，还可有效去除杂质D，使产品收率及纯度都得到了很大的提升。

具体实施方式

[0026] 下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

[0027] 本发明提供了一种叶酸的纯化方法，包括：S1)将叶酸粗品与第一酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到一级酸处理品；S2)将所述一级酸处理品与第二酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到二级酸处理品；S3)将所述二级酸处理品与第三酸溶液混合，加热搅拌后，加入水，继续加热搅拌，过滤，得到三级酸处理品；S4)将所述三级酸处理品与水混合，用碱调节pH值至弱酸性，加入吸附剂处理后，过滤，得到滤液；S5)将所述滤液经调酸结晶后，得到叶酸。

[0028] 本发明对所有原料的来源并没有特殊的限制，为市售即可。

[0029] 将叶酸粗品与第一酸溶液混合；所述叶酸粗品为本领域技术人员熟知的叶酸粗品即可，并无特殊的限制，本发明中优选叶酸粗品的纯度为80％～90％，更优选为82％～88％，再优选为84％～86％，最优选为85％～85.5％；所述叶酸粗品中杂质A的含量优选为
1％～5％，更优选为2％～4％，再优选为3％～4％，最优选为3.6％；所述叶酸粗品中杂质D的含量优选为1％～8％，更优选为3％～7％，再优选为5％～7％，再优选为6％～7％，最优选为6.4％；所述叶酸粗品中异叶酸的含量优选为1％～8％，更优选为2％～6％，再优选为
2％～5.8％；一般来说粗品中异叶酸的含量通常为2％～3％，异叶酸含量越小越容易除去；
所述第一酸溶液为本领域技术人员熟知的酸溶液即可，并无特殊的限制，本发明中优选为硫酸和/或盐酸；所述硫酸的质量浓度优选为10％～50％，更优选为15％～50％；在本发明提供的一些实施例中，所述硫酸的质量浓度优选为15％；在本发明提供的一些实施例中，所述硫酸的质量浓度优选为30％；在本发明提供的另一些实施例中，所述硫酸的质量浓度优选为50％；所述盐酸的浓度优选为5％～35％，更优选为10％～30％；所述叶酸粗品与第一酸溶液的质量体积比优选为(1～4)g：8ml，更优选为(2～4)g：8ml，再优选为(3～4)g：8ml。

[0030] 混合后加热搅拌；所述加热搅拌的温度优选为40℃～60℃，更优选为45℃～55℃，再优选为50℃；所述加热搅拌的时间优选为10～60min，更优选为20～50min，再优选为30～40min。

[0031] 然后加入水，继续加热搅拌，过滤，得到一级酸处理品；为了减少水中离子的影响，优选加入纯化水；所述叶酸粗品与加入水的质量体积比优选为(2～6)g：8ml，更优选为(3～6)g：8ml，再优选为(4～5)g：8ml；所述继续加热搅拌的温度优选为45℃～55℃，更优选为50℃；所述继续加热搅拌的时间优选为50～70min，更优选为55～65min，再优选为60min。

[0032] 将所述一级酸处理品与第二酸溶液混合；所述第二酸溶液为本领域技术人员熟知的酸溶液即可，并无特殊的限制，本发明中优选为硫酸和/或盐酸；所述硫酸的质量浓度优选为10％～50％，更优选为15％～50％；在本发明提供的一些实施例中，所述硫酸的质量浓度优选为15％；在本发明提供的一些实施例中，所述硫酸的质量浓度优选为30％；在本发明提供的另一些实施例中，所述硫酸的质量浓度优选为50％；所述盐酸的浓度优选为5％～35％，更优选为10％～30％；所述叶酸粗品与第二酸溶液的质量体积比优选为(1～4)g：
8ml，更优选为(2～4)g：8ml，再优选为(3～4)g：8ml。

[0033] 混合后加热搅拌；所述加热搅拌的温度优选为40℃～60℃，更优选为45℃～55℃，再优选为50℃；所述加热搅拌的时间优选为10～60min，更优选为20～50min，再优选为30～40min。

[0034] 然后加入水，继续加热搅拌，过滤，得到二级酸处理品；为了减少水中离子的影响，优选加入纯化水；所述叶酸粗品与加入水的质量体积比优选为(2～6)g：8ml，更优选为(3～6)g：8ml，再优选为(4～5)g：8ml；所述继续加热搅拌的温度优选为45℃～55℃，更优选为50℃；所述继续加热搅拌的时间优选为50～70min，更优选为55～65min，再优选为60min。

[0035] 将所述二级酸处理品与第三酸溶液混合；所述第三酸溶液为本领域技术人员熟知的酸溶液即可，并无特殊的限制，本发明中优选为硫酸和/或盐酸；所述硫酸的质量浓度优选为10％～50％，更优选为15％～50％；在本发明提供的一些实施例中，所述硫酸的质量浓度优选为15％；在本发明提供的一些实施例中，所述硫酸的质量浓度优选为30％；在本发明提供的另一些实施例中，所述硫酸的质量浓度优选为50％；所述盐酸的浓度优选为5％～35％，更优选为10％～30％；所述叶酸粗品与第三酸溶液的质量体积比优选为(1～4)g：
8ml，更优选为(2～4)g：8ml，再优选为(3～4)g：8ml。

[0036] 混合后加热搅拌；所述加热搅拌的温度优选为40℃～60℃，更优选为45℃～55℃，再优选为50℃；所述加热搅拌的时间优选为10～60min，更优选为20～50min，再优选为30～40min。

[0037] 然后加入水，继续加热搅拌，过滤，得到三级酸处理品；为了减少水中离子的影响，优选加入纯化水；所述叶酸粗品与加入水的质量体积比优选为(2～6)g：8ml，更优选为(3～6)g：8ml，再优选为(4～5)g：8ml；所述继续加热搅拌的温度优选为45℃～55℃，更优选为50℃；所述继续加热搅拌的时间优选为50～70min，更优选为55～65min，再优选为60min。

[0038] 将所述三级酸处理品与水混合；所述水优选为纯化水；所述三级酸处理品与水的质量体积比优选为(0.5～2.5)g：30ml，更优选为(1～2.5)g：30ml，再优选为(1～2)g：30ml，再优选为(1.5～2)g：30ml，最优选为(1.6～1.8)g：30ml；所述混合优选在室温条件下进行。

[0039] 混合后，用碱调节pH值至弱酸；所述碱为本领域技术人员熟知的碱即可，并无特殊的限制，本发明中优选为碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠与氢氧化钾中的一种或多种；所述碱优选以碱溶液的形式加入；所述碱溶液的质量浓度优选为5％～15％，更优选为8％～12％，再优选为10％；用碱优选调节pH值至6～6.5。

[0040] 调节pH值后，加入吸附剂；所述吸附剂为本领域技术人员熟知的吸附剂即可，并无特殊的限制，本发明中优选为活性炭、硅藻土与硅胶中的一种或多种；所述吸附剂与三级酸处理品的质量比优选为(0.5～2.5)：10，更优选为(0.5～2)：10，再优选为(0.5～1.5)：10，再优选为(0.5～1)：10，最优选为(0.7～0.8)：10。

[0041] 加入吸附剂后，优选搅拌20～40min，更优选搅拌30min，过滤，得到滤液。

[0042] 将所述滤液进行调酸结晶，得到叶酸；所述调酸结晶的方法为本领域技术人员熟知的方法即可，并无特殊的限制，本发明中优选按照以下步骤进行：将所述滤液用第四酸溶液调节pH值至2～4，优选调节至3～3.5，在搅拌的条件下，升温至50℃～90℃，优选升温至60℃～90℃，更优选升温至70℃～90℃，再优选升温至75℃～85℃，优选升温至80℃，保温
20～40min，优选保温25～35min，更优选保温30min，降温至50℃～80℃，优选降温至65℃～
70℃，20～40min后，优选30min后过滤；过滤后优选烘干，得到叶酸；所述烘干的温度优选为
40℃～60℃，更优选为45℃～55℃，再优选为50℃；所述第四酸溶液为本领域技术人员熟知的酸溶液即可，并无特殊的限制，本发明中优选为3～10wt％的硫酸溶液，更优选为5～
8wt％的硫酸溶液。

[0043] 本发明利用酸溶液对叶酸粗品采用加热搅拌处理的方式进行酸精制，并且进行多级酸精制，可以有效避免杂质D的产生，同时可有效去除杂质A和异叶酸杂质；再者将酸精制后的产品在弱酸温和环境下进行碱精制，减少了叶酸被水解的可能，还可有效去除杂质D，使产品收率及纯度都得到了很大的提升，纯化完毕后杂质A、杂质D与异叶酸都符合EP标准。

[0044] 为了进一步说明本发明，以下结合实施例对本发明提供的一种叶酸的纯化方法进行详细描述。

[0045] 以下实施例中所用的试剂均为市售。

[0046] 实施例1

[0047] 酸精制：

[0048] (1)360g叶酸粗品(药典HPLC方法检测，叶酸纯度85.17％，杂质A含量3.6％，杂质D含量6.4％，异叶酸含量5.8％)加入960mL的30％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得一级酸处理湿品451g。

[0049] (2)一级酸处理品再加入到960mL的30％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得二级酸处理湿品439g。

[0050] (3)二级酸处理品加入到960mL的30％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得三级酸处理湿品427g。

[0051] 碱精制：

[0052] 三级酸处理品中加入7200mL纯化水，室温搅拌30min，用10％碳酸钠溶液调节pH 6.0～6.5，加入活性炭30g，搅拌30min，过滤，得碱精制滤液。

[0053] 调酸结晶：

[0054] 将碱精制滤液用5％稀硫酸溶液调节pH 3.0～3.5，然后升温至80℃，搅拌30min，降温至65～70℃，静置30min后过滤，得叶酸成品，50℃烘干得到产品。收率58.5％，HPLC检测叶酸纯度99.6％，杂质A含量为0.18％，杂质D含量为0.07％，异叶酸未检出。

[0055] 实施例2

[0056] 酸精制：

[0057] (1)360g叶酸粗品(药典HPLC方法检测，叶酸纯度85.17％，杂质A含量3.6％，杂质D含量6.4％，异叶酸含量5.8％)加入960mL的15％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得一级酸处理湿品437g。

[0058] (2)一级酸处理品再加入到960mL的15％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得二级酸处理湿品411g。

[0059] (3)二级酸处理品加入到960mL的15％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得三级酸处理湿品398g。

[0060] 碱精制：

[0061] 三级酸处理品中加入7200mL纯化水，室温搅拌30min，用10％碳酸钠溶液调节pH 6.0～6.5，加入活性炭30g，搅拌30min，过滤，得碱精制滤液。

[0062] 调酸结晶：

[0063] 将碱精制滤液用5％稀硫酸溶液调节pH 3.0～3.5，然后升温至80℃，搅拌30min，降温至65～70℃，静置30min后过滤，得叶酸成品，50℃烘干得到产品。收率58.1％，HPLC检测叶酸纯度99.5％，杂质A含量为0.22％，杂质D含量为0.11％，异叶酸未检出。

[0064] 实施例3

[0065] 酸精制：

[0066] (1)360g叶酸粗品(药典HPLC方法检测，叶酸纯度85.17％，杂质A含量3.6％，杂质D含量6.4％，异叶酸含量5.8％)加入960mL的50％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得一级酸处理湿品435g。

[0067] (2)一级酸处理品再加入到960mL的50％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得二级酸处理湿品407g。

[0068] (3)二级酸处理品加入到960mL的50％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得三级酸处理湿品393g。

[0069] 碱精制：

[0070] 三级酸处理品中加入7200mL纯化水，室温搅拌30min，用10％氢氧化钠溶液调节pH6.0～6.5，加入活性炭30g，搅拌30min，过滤，得碱精制滤液。

[0071] 调酸结晶：

[0072] 将碱精制滤液用5％稀盐酸溶液调节pH 3.0～3.5，然后升温至80℃，搅拌30min，降温至65～70℃，静置30min后过滤，得叶酸成品，50℃烘干得到产品。收率57.9％，HPLC检测叶酸纯度99.5％，杂质A含量为0.15，杂质D含量为0.14％，异叶酸含量0.03％。

[0073] 实施例4

[0074] 酸精制：

[0075] (1)360g叶酸粗品(药典HPLC方法检测，叶酸纯度85.17％，杂质A含量3.6％，杂质D含量6.4％，异叶酸含量5.8％)加入960mL的30％盐酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得一级酸处理湿品442g。

[0076] (2)一级酸处理品再加入到960mL的30％盐酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得二级酸处理湿品421g。

[0077] (3)二级酸处理品加入到960mL的30％盐酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得三级酸处理湿品403g。

[0078] 碱精制：

[0079] 三级酸处理品中加入7200mL纯化水，室温搅拌30min，用10％氢氧化钾溶液调节pH 6.0～6.5，加入硅藻土30g，搅拌30min，过滤，得碱精制滤液。

[0080] 调酸结晶：

[0081] 将碱精制滤液用5％稀硫酸溶液调节pH 3.0～3.5，然后升温至80℃，搅拌30min，降温至65～70℃，静置30min后过滤，得叶酸成品，50℃烘干得到产品。收率58.3％，HPLC检测叶酸纯度99.4％，杂质A含量为0.34％，杂质D含量为0.14％，异叶酸含量0.04％。

[0082] 实施例5

[0083] 酸精制：

[0084] (1)360g叶酸粗品(药典HPLC方法检测，叶酸纯度85.17％，杂质A含量3.6％，杂质D含量6.4％，异叶酸含量5.8％)加入960mL的10％盐酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得一级酸处理湿品431g。

[0085] (2)一级酸处理品再加入到960mL的10％盐酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得二级酸处理湿品411g。

[0086] (3)二级酸处理品加入到960mL的10％盐酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得三级酸处理湿品386g。

[0087] 碱精制：

[0088] 三级酸处理品中加入7200mL纯化水，室温搅拌30min，用10％碳酸氢钠溶液调节pH 6.0～6.5，加入硅胶30g，搅拌30min，过滤，得碱精制滤液。

[0089] 调酸结晶：

[0090] 将碱精制滤液用5％稀硫酸溶液调节pH 3.0～3.5，然后升温至80℃，搅拌30min，降温至65～70℃，静置30min后过滤，得叶酸成品，50℃烘干得到产品。收率58.1％，HPLC检测叶酸纯度99.4％，杂质A含量为0.31％，杂质D含量为0.18％，异叶酸含量0.05％。

[0091] 对比例1

[0092] 酸精制：

[0093] 360g叶酸粗品(药典HPLC方法检测，叶酸纯度85.17％，杂质A含量3.6％，杂质D含量6.4％，异叶酸含量5.8％)加入960mL的30％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得酸处理湿品451g.

[0094] 碱精制：

[0095] 酸处理湿品中加入7200mL纯化水，室温搅拌30min，用10％碳酸钠溶液调节pH 6.0～6.5，加入活性炭30g，搅拌30min，过滤，得碱精制滤液。

[0096] 调酸结晶：

[0097] 将碱精制滤液用5％稀硫酸溶液调节pH 3.0～3.5，然后升温至80℃，搅拌30min，降温至65～70℃，静置30min后过滤，得叶酸成品，50℃烘干得到产品。收率53.5％，HPLC检测叶酸纯度98.7％，杂质A含量为0.23％，杂质D含量为0.15％，异叶酸含量为0.61％。

[0098] 对比例2

[0099] 酸精制：

[0100] (1)150g叶酸粗品(药典HPLC方法检测，叶酸纯度85.17％，杂质A含量3.6％，杂质D含量6.4％，异叶酸含量5.8％)加入1000mL的30％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水1200mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得一级酸处理湿品。

[0101] (2)一级酸处理品再加入到1000mL的30％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水1200mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得二级酸处理湿品。

[0102] (3)二级酸处理品加入到1000mL的30％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水1200mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得三级酸处理湿品。

[0103] 碱精制：

[0104] 三级酸处理湿品中加入4000mL纯化水，室温搅拌30min，用10％氨水调节pH为8.0，加入活性炭10g，搅拌30min，过滤，得碱精制滤液。

[0105] 调酸结晶：

[0106] 将碱精制滤液用5％乙酸溶液调节pH 3.0～3.5，然后升温至80℃，搅拌30min，降温至65～70℃，静置30min后过滤，得叶酸成品，80℃烘干得到产品。收率51.5％，HPLC检测叶酸纯度98.3％，杂质A含量为0.14％，杂质D含量为0.47％，异叶酸含量为0.23％。

[0107] 对比例3

[0108] 酸精制：

[0109] (1)300g叶酸粗品(药典HPLC方法检测，叶酸纯度85.17％，杂质A含量3.6％，杂质D含量6.4％，异叶酸含量5.8％)加入960mL的55％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得一级酸处理湿品。

[0110] (2)一级酸处理品再加入到960mL的55％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得二级酸处理湿品。

[0111] (3)二级酸处理品加入到960mL的55％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水720mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得三级酸处理湿品。

[0112] 碱精制：

[0113] 三级酸处理品中加入2000mL纯化水，室温搅拌30min，用10％碳酸钠溶液调节pH 6.0～6.5，加入活性炭5g，搅拌30min，过滤，得碱精制滤液。

[0114] 调酸结晶：

[0115] 将碱精制滤液用5％稀硫酸溶液调节pH 3.0～3.5，然后升温至80℃，搅拌30min，降温至65～70℃，静置30min后过滤，得叶酸成品，50℃烘干得到产品。收率31.7％，HPLC检测叶酸纯度98.1％，杂质A含量为0.48％，杂质D含量为0.35％，异叶酸含量为0.08％。

[0116] 对比例4

[0117] 酸精制：

[0118] (1)150g叶酸粗品(药典HPLC方法检测，叶酸纯度85.17％，杂质A含量3.6％，杂质D含量6.4％，异叶酸含量5.8％)加入1000mL的30％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水500mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得一级酸处理湿品。

[0119] (2)一级酸处理品再加入到1000mL的30％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水500mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得二级酸处理湿品。

[0120] (3)二级酸处理品加入到1000mL的30％硫酸中，搅拌升温至50℃后搅拌30min，加入纯化水500mL，保温50℃，打浆搅拌1小时，过滤，得三级酸处理湿品。

[0121] 碱精制：

[0122] 三级酸处理品中加入2000mL纯化水，室温搅拌30min，用20％碳酸钠溶液调节pH为9.0，加入沸石分子筛50g，搅拌30min，过滤，得碱精制滤液。

[0123] 调酸结晶：

[0124] 将碱精制滤液用10％稀硫酸溶液调节pH为4.0，然后升温至80℃，搅拌30min，降温至65～70℃，静置30min后过滤，得叶酸成品，50℃烘干得到产品。收率50.7％，HPLC检测叶酸纯度97.9％，杂质A含量为0.44％，杂质D含量为1.11％，异叶酸含量为0.05％。

[0125] 综上所述，与传统的叶酸纯化方法(对比例1～4)相比，采用本发明所述叶酸的纯化方法(实施例1～5)有效降低了杂质A、杂质D以及异叶酸的含量，提高了叶酸成品的收率和纯度。