一种肿瘤筛查组合物及其测试纸

摘要

本发明涉及尿液早期检测肿瘤代谢产物的技术领域，具体涉及一种简单快速安全的肿瘤筛查组合物，包含A溶液、B溶液、C溶液和D溶液，所述A溶液为聚乙烯吡咯烷酮‑四溴酚酞乙酯钾盐水溶液，所述B溶液为吐温80水溶液，所述C溶液包含邻苯二甲酸二乙酯和乙酸乙酯的乙醇溶液，所述D溶液为二氧化硒水溶液。本发明提供的肿瘤筛查组合物能够检测尿液中存在的肿瘤代谢产物如肽和氨基酸，克服了现有强酸强碱有毒重金属的危险性，安全、准确率高。

权利要求

1.一种肿瘤筛查组合物，其特征在于，所述组合物包含A溶液、B溶液、C溶液和D溶液，所述A溶液为聚乙烯吡咯烷酮-四溴酚酞乙酯钾盐水溶液，所述B溶液为吐温80水溶液，所述C溶液包含邻苯二甲酸二乙酯和乙酸乙酯的乙醇溶液，所述D溶液为二氧化硒水溶液。

2.根据权利要求1所述的肿瘤筛查组合物，其特征在于，所述聚乙烯吡咯烷酮-四溴酚酞乙酯钾盐水溶液的摩尔浓度为1-5mM，其中聚乙烯吡咯烷酮与四溴酚酞乙酯钾盐的摩尔浓度比为1∶1；所述吐温80水溶液的质量百分浓度为0.01-0.1％；所述C溶液的质量百分浓度为5-15％，其中邻苯二甲酸二乙酯、乙酸乙酯的质量比为1∶1；所述二氧化硒水溶液的摩尔浓度为1-5mM。

3.根据权利要求1所述的肿瘤筛查组合物，其特征在于，所述组合物中各组分的体积比为A∶B∶C∶D＝1∶2∶16∶1。

4.一种肿瘤筛查测试纸，包括支持载体和试条，其特征在于，所述试条为吸收包含如权利要求1所述的组合物干燥而得。

5.根据权利要求4述的一种肿瘤筛查测试纸，其特征在于，所述支持载体为PVC基片。

6.根据权利要求4述的一种肿瘤筛查测试纸，其特征在于，所述试条的厚度在1～2毫米之间。

7.一种肿瘤筛查测试纸的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(1)配制A溶液，摩尔浓度为1-5mM的聚乙烯吡咯烷酮-四溴酚酞乙酯钾盐水溶液，其中聚乙烯吡咯烷酮与四溴酚酞乙酯钾盐的摩尔浓度比为1∶1；配制B溶液，质量百分浓度为

0.01-0.1％的吐温80水溶液；以乙醇为溶剂，配制质量百分浓度为5-15％的C溶液，其中邻苯二甲酸二乙酯、乙酸乙酯的质量比为1∶1；配制D溶液，摩尔浓度为1-5mM的二氧化硒水溶液；

(2)按A∶B∶C∶D＝1∶2∶16∶1比例量取各组分溶液，在C溶液中逐步滴加B溶液，混合均匀，再依次加入D溶液和A溶液，混合均匀后即成组合物溶液；

(3)将滤纸浸入组合物溶液中，使滤纸完全吸收组合物溶液；

(4)取出滤纸条干燥，裁剪成试条粘贴在支持载体上，形成体外检测用肿瘤筛查测试纸。

8.根据权利要求7所述的一种肿瘤筛查测试纸的制备方法，其特征在于，所述干燥的温度不超过80℃。

说明书

一种肿瘤筛查组合物及其测试纸

技术领域

[0001] 本发明涉及尿液早期检测肿瘤代谢产物检测的技术领域，具体涉及简单快速安全的肿瘤筛查组合物及其测试纸。

背景技术

[0002] 恶性肿瘤的早期诊断对其治疗，降低死亡率，提高生存率至关重要，症状人群的筛查是早期诊断的主要手段之一，尿中肿瘤标志物的检测是目前研究的热点，当人体发生肿瘤时，机体会出现应激反应，核酸和蛋白质无节制的复制和异常合成是其特点，表现在体液(尿液)中的代谢产物会急剧增加，已有多项专利技术广泛应用于人群筛查，但这些专利技术都是基于福林酚反应，所用试剂都涉及强酸强碱重金属，本发明避免了这些缺陷，且准确率和灵敏度均好于现有技术。

发明内容

[0003] 本发明的目的是针对核酸和蛋白质的异常代谢产物在尿中的丰富度，提供一种准确率、灵敏度高、快速、便捷、安全的肿瘤筛查组合物。

[0004] 为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

[0005] 一种肿瘤筛查组合物，所述组合物包含A溶液、B溶液、C溶液和D溶液，所述A溶液为聚乙烯吡咯烷酮-四溴酚酞乙酯钾盐水溶液，所述B溶液为吐温80水溶液，所述C溶液包含邻苯二甲酸二乙酯和乙酸乙酯的乙醇溶液，所述D溶液为二氧化硒水溶液。

[0006] 进一步地，所述聚乙烯吡咯烷酮-四溴酚酞乙酯钾盐水溶液的摩尔浓度为1-5mM，其中聚乙烯吡咯烷酮与四溴酚酞乙酯钾盐摩尔浓度比为1∶1；所述吐温80水溶液的质量百分浓度为0.01-0.1％；所述C溶液的质量百分浓度为5-15％，其中邻苯二甲酸二乙酯、乙酸乙酯的质量比为1∶1；所述二氧化硒水溶液的摩尔浓度为1-5mM。

[0007] 进一步地，所述组合物中各组分的体积比为A∶B∶C∶D＝1∶2∶16∶1。

[0008] 本发明还提供了一种肿瘤筛查测试纸，包括支持载体和试条，所述试条为吸收包含如上述的肿瘤筛查组合物干燥而得。

[0009] 进一步地，所述支持载体为PVC基片；所述试条的厚度在1～2毫米之间。

[0010] 本发明还提供了一种肿瘤筛查测试纸的制备方法，步骤如下：

[0011] (1)配制A溶液，摩尔浓度为1-5mM的聚乙烯吡咯烷酮-四溴酚酞乙酯钾盐水溶液，其中聚乙烯吡咯烷酮与四溴酚酞乙酯钾盐摩尔浓度比为1∶1；配制B溶液，质量百分浓度为0.01-0.1％的吐温80水溶液；以乙醇为溶剂，配制质量百分浓度为5-15％的C溶液，其中邻苯二甲酸二乙酯、乙酸乙酯的质量比为1∶1；配制D溶液，摩尔浓度为1-5mM的二氧化硒水溶液；

[0012] (2)按A∶B∶C∶D＝1∶2∶16∶1比例量取各组分溶液，在C溶液中逐步滴加B溶液，混合均匀，再依次加入D溶液和A溶液，混合均匀后即成组合物溶液；各组分溶液的添加，需要按C+B+D，最后加A的顺序添加。

[0013] (3)将滤纸浸入组合物溶液中，使滤纸完全吸收组合物溶液；

[0014] (4)取出滤纸条干燥，裁剪成试条粘贴在支持载体上，形成体外检测用肿瘤筛查测试纸。

[0015] 进一步地，所述干燥的温度不超过80℃。

[0016] 与现有技术相比，本发明的有益效果是：

[0017] (1)本发明提供的肿瘤筛查组合物能够检测尿液中存在的肿瘤代谢产物如肽和氨基酸，克服了现有强酸强碱有毒重金属的危险性；

[0018] (2)本发明提供的肿瘤筛查测试纸克服了安瓶易碎，液体外泄灼伤等缺陷，晨尿淋过测试纸即显示结果，此显色结果即可肉眼判断阳性或阴性结果；

[0019] (3)本发明提供的肿瘤筛查测试纸临床检测准确率高达80％以上，尿液中高于正常值的多肽和氨基酸及代谢产物都极易检出。

具体实施方式

[0020] 一、实施例

[0021] 实施例1

[0022] 本发明的尿液肿瘤测试条制备方法，包括以下步骤：

[0023] (1)A溶液制备，分别配制3mM浓度的聚乙烯吡咯烷酮和四溴酚酞乙酯钾盐水溶液，以1∶1比例混合；

[0024] B溶液制备，准确称取0.05g吐温80，溶于100mL纯化水中，即得；

[0025] C溶液制备，分别称取15g邻苯二甲酸二乙酯和乙酸乙酯，溶于100mL无水乙醇中，混合即得；

[0026] D溶液制备，准确称取二氧化硒溶于纯化水中，定容，配制成1mM浓度溶液；

[0027] (2)按A∶B∶C∶D＝1∶2∶16∶1比例量取各组分溶液，在C溶液中逐步滴加B溶液，混合均匀，再依次加入D溶液和A溶液，混合均匀后即成组合物溶液；

[0028] (3)选用新华3号滤纸，在60℃烘干后，直接浸泡在上述配制的组合物溶液中，5分钟后取出晾干，再入60℃烘箱烘干2小时；

[0029] (4)烘干好的滤纸裁剪成4×8mm试条，粘贴于支持载体上，制成6×50mm的测试条，即为成品，以锡泊纸包装封口，备用。

[0030] 实施例2

[0031] (1)A溶液制备，分别配制1mM浓度的聚乙烯吡咯烷酮和四溴酚酞乙酯钾盐水溶液，以1∶1比例混合；

[0032] B溶液制备，准确称取0.01g吐温80，溶于100mL纯化水中，即得；

[0033] C溶液制备，分别称取5g邻苯二甲酸二乙酯和乙酸乙酯，溶于100mL无水乙醇中，混合即得；

[0034] D溶液制备，准确称取二氧化硒溶于纯化水中，定容，配制成1mM浓度溶液；

[0035] (2)按A∶B∶C∶D＝1∶2∶16∶1比例量取各组分溶液，在C溶液中逐步滴加B溶液，混合均匀，再依次加入D溶液和A溶液，混合均匀后即成组合物溶液；

[0036] (3)选用新华3号滤纸，在60℃烘干后，直接浸泡在上述配制的组合物溶液中，5分钟后取出晾干，再入60℃烘箱烘干2小时；

[0037] (4)烘干好的滤纸裁剪成4×8mm试条，粘贴于支持载体上，制成6×50mm的测试条，即为成品，以锡泊纸包装封口，备用。

[0038] 实施例3

[0039] (1)A溶液制备，以乙醇为溶剂，分别配制5mM浓度的聚乙烯吡咯烷酮和四溴酚酞乙酯钾盐溶液，以1∶1比例混合；

[0040] B溶液制备，准确称取0.1g吐温80，溶于100mL纯化水中，即得；

[0041] C溶液制备，分别称取15g邻苯二甲酸二乙酯和乙酸乙酯，溶于100mL无水乙醇中，混合即得；

[0042] D溶液制备，准确称取二氧化硒溶于纯化水中，定容，配制成5mM浓度溶液；

[0043] (2)按A∶B∶C∶D＝1∶2∶16∶1比例量取各组分溶液，在C溶液中逐步滴加B溶液，混合均匀，再依次加入D溶液和A溶液，混合均匀后即成组合物溶液；

[0044] (3)选用新华3号滤纸，在60℃烘干后，直接浸泡在上述配制的组合物溶液中，5分钟后取出晾干，再入70℃烘箱烘干2小时；

[0045] (4)烘干好的滤纸裁剪成4×8mm试条，粘贴于支持载体上，制成6×50mm的测试条，即为成品，以锡泊纸包装封口，备用。

[0046] 实施例4

[0047] (1)A溶液制备，以乙醇为溶剂，分别配制2mM浓度的聚乙烯吡咯烷酮和四溴酚酞乙酯钾盐溶液，以1∶1比例混合；

[0048] B溶液制备，准确称取0.5g吐温80，溶于100mL纯化水中，即得；

[0049] C溶液制备，分别称取10g邻苯二甲酸二乙酯和乙酸乙酯，溶于100mL无水乙醇中，混合即得；

[0050] D溶液制备，准确称取二氧化硒溶于纯化水中，定容，配制成2mM浓度溶液；

[0051] (2)按A∶B∶C∶D＝1∶2∶16∶1比例量取各组分溶液，在C溶液中逐步滴加B溶液，混合均匀，再依次加入D溶液和A溶液，混合均匀后即成组合物溶液；

[0052] (3)选用厚度为2mm的定量滤纸，在60℃烘干后，直接浸泡在上述配制的组合物溶液中，5分钟后取出晾干，再入60℃烘箱烘干2小时；

[0053] (4)烘干好的滤纸裁剪成4×8mm试条，粘贴于支持载体上，制成6×50mm的测试条，即为成品，以锡泊纸包装封口，备用。

[0054] 二、临床试验

[0055] 按照实施例1制备体外检测用肿瘤筛查测试纸，应用该测试纸对600例普通人群和临床门诊病人进行了测试，其中恶性肿瘤189例，非恶性肿瘤和正常人群411例。

[0056] 测试方法：取晨尿少量(一般2～3mL)将测试纸中试条浸湿，1～2秒后取出晾干，置洁净白纸上观察试条颜色反应，紫色为阳性反应，粉红色为弱阳性反应，原色为阴性反应，肉眼即可判断，测试结果如表1所示。

[0057] 表1肿瘤筛查测试纸测试结果

[0058]种类 阳性反应人数 弱阳性反应人数 阴性反应人数 合计
恶性肿瘤病人 189 0 0 189
非恶性肿瘤病人 21 22 5 48
正常人 1 7 355 363
合计 211 29 360 600

[0059] 结果为：阳性反应者211例，弱阳性反应者29例，阴性反应者360例。与临床病理诊断结果对照后，假阳性22例，弱阳性反应者多为良性肿瘤、肾功能障碍、不正常饮食或蛋白质氨基酸输液者。

[0060] 各项检测指标为：准确率89.6％，灵敏度99％，特异性95％，假阳性率10％，阳性结果预测值高达98％。非常重要的一点就是，凡是惟患肿瘤(无论恶性良性)的人都呈阳性或弱阳性反应，无一漏网，这对早期筛查肿瘤风险有着重要的临床意义。良性肿瘤，急性炎症，或肾功能障碍的患者亦有阳性反应，需要临床进一步甄别，但並不影响本试剂作为肿瘤初筛的效果和灵敏度。

[0061] 尽管已经对本发明的技术方案做了较为详细的阐述和列举，应当理解，对于本领域技术人员来说，对上述实施例做出修改或者采用等同的替代方案，这对本领域的技术人员而言是显而易见，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。