一种首荟通便胶囊质量检测方法

摘要

本发明属于中药制剂分析领域，具体公开了一种首荟通便胶囊质量检测方法，所述质量检测方法以薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中决明子、枸杞子和白术，以HPLC法测定首荟通便胶囊中的2，3，5，4'‑四羟基二苯乙烯‑2‑O‑β‑D‑葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷和芦荟苷的含量。本发明质量检测方法稳定可靠、专属性强、重现性好，能全面有效地控制首荟通便胶囊的质量，有利于稳定产品质量，确保临床用药安全、有效，从而更好地满足医疗和市场的需要。

权利要求

1.一种首荟通便胶囊质量检测方法，其特征在于，该方法以薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中的决明子、枸杞子和白术，以高效液相色谱法测定首荟通便胶囊中2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷和芦荟苷的含量；

所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中的决明子包括以下步骤：

1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，加甲醇超声，滤过，蒸干，残渣加水溶解，再加盐酸，水浴加热，冷却，乙醚提取，乙醚提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；

2)对照品溶液制备：取橙黄决明素对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；

3)点样、展开：分别吸取供试品溶液、对照品溶液，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸＝10：1：0.3为展开剂，展开，取出，晾干，显色，检视；

所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中的枸杞子包括以下步骤：

1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，超声，离心，上清液用乙酸乙酯提取；

取乙酸乙酯提取液，用氨试液提取；取氨试液提取液，用稀盐酸调pH值，再用乙酸乙酯提取，乙酸乙酯提取液蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，作为供试品溶液；

2)对照药材溶液制备：取枸杞子对照药材，加水，煮沸，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯提取，分取乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，作为对照药材溶液；

3)点样、展开：分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇＝15：1为展开剂，展开，取出，晾干，检视；

所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中的白术包括以下步骤：

1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，加水超声，离心，上清液用乙醚提取，乙醚提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；

2)对照药材溶液制备：取白术对照药材，加水，加热回流提取，滤过，滤液浓缩，放冷，乙醚提取，乙醚提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为对照药材溶液；

3)点样、展开：分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-甲酸＝5：5：0.2为展开剂，展开，取出，晾干，显色，检视；

所述高效液相色谱法测定首荟通便胶囊制剂中的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷和芦荟苷含量，包括以下步骤：

1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，研细，取约0.25g，精密称定，置100mL量瓶中，加50％甲醇至刻度，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，作为供试品溶液；

2)对照品溶液制备：精密称取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品、柚皮苷对照品、新橙皮苷对照品和芦荟苷对照品适量，置容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得；

3)HPLC色谱条件：以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，梯度洗脱程序为：

0 乙腈（%） 0.1%磷酸溶液（%）

0-40 12％→23％ 88％→77％

40-60 23％→23％ 77％→77％

检测波长283nm-355nm；

4)测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液5μL，注入液相色谱仪，按照步骤

3)所述色谱条件测定，即得。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法步骤3）波长切换程序为：时间（min） 检测波长（nm）

0-26 320

26-39 283

39-60 355

。

说明书

一种首荟通便胶囊质量检测方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种中成药首荟通便胶囊质量检测方法，属于中药制剂分析领域。

背景技术

[0002] 首荟通便胶囊为鲁南厚普制药有限公司研制开发的中药6类新药，为独家产品，于2015年5月6日获得生产批件(国药准字Z20150041)和新药证书(国药证字Z20150005)，现已成功上市。

[0003] 首荟通便胶囊处方来源于临床经验方，由何首乌、芦荟、决明子、枸杞子、阿胶、人参、白术、枳实八味中药组成。本处方以中医理论为指导，融汇临床经验，在润肠通便、泻浊排毒之品中辅以补血润燥之品，佐以补气健脾之品，使以降浊消痞之药味，组方合理，配伍精当，气阴同补，补泻兼施，补不留滞，泻不伤正，通过益气养阴，改善体质而达到治疗便秘的目的。本方尤其对毒邪内蕴、阴液亏虚所致的便秘具有良好的润肠通便治疗作用，可全面改善胃肠功能，疗效确切，起效快，无毒副反应，并具有排毒养颜、减肥降脂的功效。临床应用表明其疗效确切，对治疗功能性便秘发挥了重要作用，适合老年人和体质虚弱的患者服用，深得医患好评。

[0004] 中国专利CN106124685A公开了一种首荟通便胶囊的质量检测方法，包括采用薄层色谱法分别鉴别制剂中的人参、枳实、芦荟和阿胶药材，以HPLC测定何首乌中2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量以及枳实中柚皮苷含量。

发明内容

[0005] 本发明所要解决的技术问题是在中国专利CN106124685A“首荟通便胶囊的质量检测方法”的基础上，进一步优化首荟通便胶囊的质量检测方法，增加了决明子、枸杞子和白术三味原料药材的薄层鉴别，在生产过程中可对产品中的芦荟、决明子、枸杞子、阿胶、人参、白术、枳实7种药材同时定性鉴别，达到多成分联合控制。同时，为了简化操作，提高检测效率，发明人通过长时间的探索和反复的试验，成功地将首荟通便胶囊中的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷和/或芦荟苷4种成分的HPLC含量测定合而为一，提供一种更加全面、准确的检测首荟通便质量的新方法。

[0006] 本发明的目的是提供一种首荟通便胶囊质量检测方法，所述首荟通便胶囊是由何首乌、芦荟、决明子、枸杞子、阿胶、人参、白术、枳实八味中药组方，经提取、纯化制成。本发明首荟通便胶囊质量检测方法是以薄层色谱法鉴别制剂中决明子、枸杞子和/或白术，以HPLC测定首荟通便胶囊中的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷和芦荟苷的含量，实现对首荟通便胶囊质量的全面评价和控制，从而为首荟通便胶囊的真伪鉴别和内在质量优劣检测提供准确的依据。

[0007] 本发明上述技术方案以薄层色谱鉴别首荟通便胶囊中决明子、枸杞子和白术，具体包括下列步骤：

[0008] 1.薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中的决明子：

[0009] 1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，加甲醇超声，滤过，蒸干，残渣加水溶解，再加盐酸，水浴加热，冷却，乙醚提取，乙醚提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。

[0010] 2)对照品溶液制备：取橙黄决明素对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。

[0011] 3)点样、展开：分别吸取供试品溶液、对照品溶液，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，显色，检视。

[0012] 优选的，所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中的决明子包括以下步骤：

[0013] 1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，加甲醇超声，滤过，蒸干，残渣加水溶解，再加盐酸，水浴加热，冷却，用乙醚提取，乙醚提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。

[0014] 2)对照品溶液制备：取橙黄决明素对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。

[0015] 3)点样、展开：分别吸取供试品溶液、对照品溶液，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸＝10：1：0.3为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

[0016] 2.薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中的枸杞子：

[0017] 1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，超声，离心，上清液用乙酸乙酯提取；取乙酸乙酯提取液，用氨试液提取；取氨试液提取液，用稀盐酸调pH值，再用乙酸乙酯提取，乙酸乙酯提取液蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，作为供试品溶液。

[0018] 2)对照药材溶液制备：取枸杞子对照药材，加水，煮沸，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯提取，分取乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，作为对照药材溶液。

[0019] 3)点样、展开：分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，检视。

[0020] 优选的，所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中的枸杞子包括以下步骤：

[0021] 1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，加水超声，离心，上清液用乙酸乙酯提取，分取乙酸乙酯提取液，用氨试液提取，分取氨试液提取液，用稀盐酸调pH值至3，再用乙酸乙酯提取，乙酸乙酯提取液蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，作为供试品溶液；

[0022] 2)对照药材溶液制备：取枸杞子对照药材0.5g，加水，加热煮沸15分钟，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯提取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，作为对照药材溶液；

[0023] 3)点样、展开：分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：甲醇＝15：1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯于365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

[0024] 3.薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中的白术：

[0025] 1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，加水超声，离心，上清液用乙醚提取，乙醚提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。

[0026] 2)对照药材溶液制备：取白术对照药材，加水，加热回流提取，滤过，滤液浓缩，放冷，乙醚提取，乙醚提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为对照药材溶液。

[0027] 3)点样、展开：分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，显色，检视。

[0028] 优选的，所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中的白术包括以下步骤：

[0029] 1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，加水超声，离心，上清液用乙醚提取，乙醚提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；

[0030] 2)对照药材溶液制备：取白术对照药材0.5g，加水，加热回流提取，滤过，滤液浓缩，放冷，乙醚提取，乙醚提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为对照药材溶液；

[0031] 3)点样、展开：分别吸取供试品溶液、对照品溶液，点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷：乙酸乙酯：甲酸＝5：5：0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％氢氧化钠溶液，置紫外光灯于365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

[0032] 本发明还以高效液相色谱法测定首荟通便胶囊中何首乌的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、枳实的柚皮苷和新橙皮苷、芦荟的芦荟苷含量，具体包括以下步骤：

[0033] 1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，置量瓶中，加甲醇溶解，定容，超声，放冷，摇匀，滤过，作为供试品溶液；

[0034] 2)对照品溶液制备：精密称取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品、柚皮苷对照品、新橙皮苷对照品和芦荟苷对照品适量，置容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得；

[0035] 3)HPLC色谱条件：以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱；检测波长283nm-355nm；

[0036] 4)测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，按照步骤3)所述色谱条件测定，即得。

[0037] 优选的，所述高效液相色谱法测定首荟通便胶囊制剂中的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷和芦荟苷含量包括以下步骤：

[0038] 1)供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，研细，取约0.25g，精密称定，置100mL量瓶中，加50％甲醇至刻度，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，作为供试品溶液；

[0039] 2)对照品溶液制备：精密称取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品、柚皮苷对照品、新橙皮苷对照品和芦荟苷对照品适量，置容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得；

[0040] 3)HPLC色谱条件：以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱；检测波长283nm-355nm；4)测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液5μL，注入液相色谱仪，按照步骤3)所述色谱条件测定，即得。

[0041] 优选地，高效液相色谱法步骤3)梯度洗脱程序为：

[0042] 0 乙腈(％) 0.1％磷酸溶液(％)0-40 12％→23％ 88％→77％
40-60 23％→23％ 77％→77％。

[0043] 优选地，高效液相色谱法步骤3)波长切换程序为：

[0044]

[0045]

[0046] 波长切换：0-26min，320nm，检测2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷；26min-39min，283nm，检测柚皮苷和新橙皮苷；39min-60min，355nm，检测芦荟苷。

[0047] 本发明建立了首荟通便胶囊升级版质量检测方法，该方法采用薄层色谱法分别对首荟通便胶囊中决明子、枸杞子和白术进行定性鉴别，达到多成分联合控制；同时采用HPLC定量测定首荟通便胶囊中的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷和芦荟苷的含量，能够进一步有效控制首荟通便胶囊的质量，实现对制剂质量进行全面地评价。

[0048] 为了简化操作，提高HPLC法含量测定的检测效率，发明人通过长时间的探索和反复的试验，通过梯度洗脱程序并联合波长切换法成功地将首荟通便胶囊中的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷和芦荟苷4种成分的HPLC含量测定合而为一，提供了一种更加全面、准确、便捷的检测首荟通便质量的新方法。本发明质量检测方法稳定可靠、专属性强、重现性好，能全面有效地控制首荟通便胶囊的质量，有利于稳定产品的质量，确保临床用药安全性和有效性，更好地满足医疗和市场的需要。

附图说明

[0049] 图1为首荟通便胶囊中决明子的薄层色谱图，按从左到右的顺序，其中1是缺决明子的阴性制剂样品，2、4是橙黄决明素对照品，3是样品；

[0050] 图2为首荟通便胶囊中枸杞子的薄层色谱图，按从左到右的顺序，其中1、4是枸杞子对照药材，2是缺枸杞子的阴性制剂样品，3是样品；

[0051] 图3为首荟通便胶囊中白术的薄层色谱图，按从左到右的顺序，其中1、4是白术对照药材，2是缺白术的阴性制剂样品，3是样品；

[0052] 图4为对照品HPLC色谱图，色谱峰从左到右依次为2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷；

[0053] 图5为供试品HPLC色谱图；

[0054] 图6为缺何首乌阴性对照HPLC色谱图；

[0055] 图7为缺枳实阴性对照HPLC色谱图；

[0056] 图8为缺芦荟阴性对照HPLC色谱图。

具体实施方式

[0057] 实施例1 2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷和芦荟苷的HPLC测定方法学研究

[0058] 1)药品与试剂：2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品(110844-2000607，中国药品生物制品检定所)，柚皮苷对照品(110722-201312，中国药品生物制品检定所)，新橙皮苷对照品(111857-201703，中国药品生物制品检定所)，芦荟苷对照品(110787-201808，中国药品生物制品检定所)，乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为重蒸馏水。

[0059] 2)仪器：AgiLent 1100高效液相色谱仪，DAD检测器。

[0060] 3)色谱条件：色谱柱：KromasiL C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(B)梯度洗脱，梯度洗脱程序见表1；检测波长：283nm-355nm，波长切换程序见表2；流速：1mL/min。

[0061] 表1梯度洗脱程序

[0062]时间(min) 流动相A(％) 流动相B(％)
0-40 12％→23％ 88％→77％
40-60 23％→23％ 77％→77％

[0063] 表2波长切换程序

[0064] 时间(min) 检测波长(nm)0-26 320
26-39 283
39-60 355。

[0065] 4)溶液制备

[0066] 4.1)供试品溶液的制备

[0067] 取首荟通便胶囊内容物适量，研细，取约0.25g，精密称定，置100mL量瓶中，加50％甲醇至刻度，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

[0068] 4.2)对照品溶液的制备

[0069] 精密称取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.4988mg、0.5006mg、0.71225mg、0.72072mg的混合溶液，即得。

[0070] 4.3)阴性对照溶液的制备

[0071] 分别取不含何首乌药材的阴性对照、不含枳实药材的阴性对照、不含芦荟的阴性对照，照供试品溶液的制备项下同法操作，制成阴性对照溶液，从色谱图可以看出，在2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷和芦荟苷位置处无干扰，见图
4、图5、图6、图7、图8。

[0072] 5)线性关系考察

[0073] 精密称取各对照品适量，加甲醇配成下列浓度，在上述色谱条件下进行测定，分别进样5μL，测定峰面积。结果见表3、4、5、6。

[0074] 表3 2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷线性关系考察结果[0075]

[0076] 表4柚皮苷线性关系考察结果

[0077]

[0078] 表5新橙皮苷线性关系考察结果

[0079]

[0080] 表6芦荟苷线性关系考察结果

[0081]

[0082] 2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷测定，以测得峰面积为纵坐标，对照品浓度(mg/mL)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y＝36684131.91660X-23900.5，r＝0.99986，即2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷浓度在0.009976～0.04988mg/mL范围内线性良好。

[0083] 柚皮苷测定，以测得峰面积为纵坐标，对照品浓度(mg/mL)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y＝19359268.87735X-13015.0，r＝0.99979，即柚皮苷浓度在0.020024～0.10012mg/mL范围内线性良好。

[0084] 新橙皮苷测定，以测得峰面积为纵坐标，对照品浓度(mg/mL)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y＝20767730.61313X-14830.12，r＝0.99992，即新橙皮苷浓度在0.014245～0.071225mg/mL范围内线性良好。

[0085] 芦荟苷测定，以测得峰面积为纵坐标，对照品浓度(mg/mL)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y＝14884500.22200X+26595.10，r＝0.99971，即芦荟苷浓度在0.072072～0.360360mg/mL范围内线性良好。

[0086] 6)精密度试验

[0087] 精密吸取4.2)项下对照品溶液，重复进样6次，每次5μL，峰面积RSD<2％，表明仪器精密度良好。结果见表7。

[0088] 表7精密度试验结果

[0089]

[0090] 7)稳定性试验

[0091] 取4.1)项下同一供试品溶液，分别于配制后0，2，4，6，8h测定，结果表明供试品溶液在8h内稳定。结果见表8。

[0092] 表8稳定性试验结果

[0093]

[0094] 8)重复性试验

[0095] 分别取同一批号(07015001)的样品6份，照4.1)项下的供试品溶液制备方法操作，分别测定，计算含量。结果见表9、10、11、12。

[0096] 表9 2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷重复性试验结果[0097]

[0098] 表10柚皮苷重复性试验结果

[0099]

[0100] 表11新橙皮苷重复性试验结果

[0101]

[0102] 表12芦荟苷重复性试验结果

[0103]

[0104] 9)回收率试验

[0105] 精密称取已知含量的样品6份，分别精密加入0.4988mg/ml的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液2mL、0.5006mg/ml的柚皮苷对照品溶液5ml、0.71225mg/ml的新陈皮苷对照品溶液2ml、1.7mg/ml的芦荟苷对照品溶液5ml，同4.1)项下的供试品溶液制备方法制备，测定。结果见表13、14、15、16。

[0106] 表13 2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷回收率试验结果[0107]

[0108] 表14柚皮苷回收率试验结果

[0109]

[0110] 表15新橙皮苷回收率试验结果

[0111]

[0112] 表16芦荟苷回收率试验结果

[0113]

[0114] 实施例2-4

[0115] 1)药品与试剂：同实施例1；

[0116] 2)仪器：同实施例1；

[0117] 3)色谱条件：同实施例1；

[0118] 4)溶液制备

[0119] 4.1)供试品溶液的制备

[0120] 分别取07015001、07015002、07015003批次首荟通便胶囊内容物适量，研细，取约0.25g，精密称定，置100mL量瓶中，加50％甲醇至刻度，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

[0121] 4.2)对照品溶液的制备

[0122] 同实施例1

[0123] 5)测定：

[0124] 取上述各批次首荟通便胶囊供试品溶液、对照品溶液，分别注入高效液相色谱仪，按照3)项下的色谱条件进行测定，记录色谱图。

[0125] 6)结果：各成分之间分离度高，相互之间无干扰，各成分含量如表17所示。

[0126] 表17不同批次首荟通便胶囊中2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、[0127] 柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷的含量

[0128]

[0129] 实施例5首荟通便胶囊中决明子薄层色谱鉴别

[0130] 1)供试品溶液的制备：取07015001批次首荟通便胶囊内容物6g，研细，加甲醇30ml，超声提取30分钟，滤过，蒸干，残渣加水20ml使溶解，再加盐酸2ml，置水浴加热30分钟，立即冷却，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

[0131] 2)对照品溶液的制备：取橙黄决明素对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。

[0132] 3)点样、展开：吸取上述两种溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸＝10：1：0.3为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰。

[0133] 4)结果：图1为首荟通便胶囊中决明子的薄层色谱图，结果表明：含有决明子的样品在与橙黄决明素对照品色谱对应的位置上，显相同颜色的斑点。色谱分离良好，决明子的特征斑点突出，建立的TLC方法可以作为首荟通便胶囊中决明子的质量检测方法。

[0134] 实施例6首荟通便胶囊中枸杞子薄层色谱鉴别

[0135] 1)供试品溶液的制备：取07015002批次首荟通便胶囊内容物4g，研细，加水30mL，超声30分钟，离心，上清液用乙酸乙酯30ml提取1次，分取乙酸乙酯层，用氨试液10ml提取，分取氨水层，用稀盐酸调pH值至3，用乙酸乙酯20ml提取，乙酸乙酯液蒸干，残渣加乙酸乙酯1mL使溶解，作为供试品溶液。

[0136] 2)对照药材溶液的制备：取枸杞子对照药材0.5g，加水35ml，加热煮沸15分钟，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯15ml提取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液。

[0137] 3)点样、展开：吸取供试品溶液、对照药材溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：甲醇＝15：1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯于365nm下检视。

[0138] 4)结果：图2为首荟通便胶囊中枸杞子的薄层色谱图，结果表明：含有枸杞子的样品在与枸杞子对照药材色谱对应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。色谱分离良好，枸杞子的特征斑点突出，建立的TLC方法可以作为首荟通便胶囊中枸杞子的质量检测方法。

[0139] 实施例7首荟通便胶囊中白术薄层色谱鉴别

[0140] 1)供试品溶液的制备：取07015003批次首荟通便胶囊内容物4g，研细，加水30mL，超声处理30分钟，离心，上清液用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

[0141] 2)对照药材溶液的制备：取白术对照药材0.5g，加水50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液浓缩至约30ml，放冷，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。

[0142] 3)点样、展开：吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷：乙酸乙酯：甲酸＝5：5：0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％氢氧化钠溶液，置紫外光灯于365nm下检视。

[0143] 4)结果：图3为首荟通便胶囊中白术的薄层色谱图，结果表明：含有白术的样品在与白术对照药材色谱对应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。色谱分离良好，白术的特征斑点突出，建立的TLC方法可以作为首荟通便胶囊中白术的质量检测方法。

[0144] 以上实施例仅是本发明的优选实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理及构思的前提下，还可以做出若干修饰和改进，这些都属于本发明的保护范围。