一种用于UV-B光下植物细胞FRAP实验的装置

摘要

一种用于UV‑B光下植物细胞FRAP实验的装置，设UV‑B LED灯支架、UV‑B LED灯、UV‑B LED灯稳压器、可透过UV‑B光的制片装置、倒置激光显微镜照明系统、倒置激光显微镜光路和倒置激光显微镜载物台，UV‑B LED灯稳压器与UV‑B LED灯支架连接，可透过UV‑B光的制片装置设有盖玻片、中间有孔的薄铁片、低熔点琼脂糖和拟南芥幼苗；可透过UV‑B光的制片装置固定在倒置激光显微镜载物台上；中间有孔的薄铁片设在盖玻片的中间，中间有孔的薄铁片的中间孔设置低熔点琼脂糖和拟南芥幼苗；倒置激光显微镜照明系统设在UV‑B LED灯支架上方，倒置激光显微镜光路设在倒置激光显微镜载物台的底部。

权利要求

1.一种用于UV-B光下植物细胞FRAP实验的装置，其特征在于设有UV-B LED灯支架、UV-B LED灯、UV-B LED灯稳压器、可透过UV-B光的制片装置、倒置激光显微镜照明系统、倒置激光显微镜光路和倒置激光显微镜载物台，所述UV-B LED灯稳压器与UV-B LED灯支架连接，所述可透过UV-B光的制片装置设有盖玻片、中间有孔的薄铁片、低熔点琼脂糖和拟南芥幼苗；所述可透过UV-B光的制片装置固定在倒置激光显微镜载物台上，所述中间有孔的薄铁片设在盖玻片的中间，中间有孔的薄铁片的中间孔设置低熔点琼脂糖和拟南芥幼苗；所述倒置激光显微镜照明系统设在UV-B LED灯支架上方，倒置激光显微镜光路设在倒置激光显微镜载物台的底部；

所述UV-B LED灯稳压器上设有开关。

2.如权利要求1所述一种用于UV-B光下植物细胞FRAP实验的装置，其特征在于所述倒置激光显微镜照明系统采用商业化倒置激光显微镜照明系统，所述倒置激光显微镜光路采用商业化倒置激光显微镜光路，所述倒置激光显微镜载物台采用商业化倒置激光显微镜载物台。

说明书

一种用于UV-B光下植物细胞FRAP实验的装置

技术领域

[0001] 本发明涉及荧光恢复技术，尤其是涉及一种用于UV-B光下植物细胞FRAP实验的装置。

背景技术

[0002] 光漂白后的荧光恢复技术(fluorescence recovery after photobleaching，FRAP)是使用荧光分子，如荧光素、绿色荧光蛋白等与蛋白或脂质耦联，用于检测所标记分子在活体细胞表面或细胞内部运动及其迁移速率。FRAP技术的原理是：利用高能激光照射细胞的某一特定区域，使该区域内标记的荧光分子不可逆的淬灭。随后，由于细胞质中的脂质分子或蛋白质分子的运动，周围非漂白区荧光分子不断向光漂白区迁移，结果使荧光漂白区的荧光强度逐渐地回复到原有水平(翟中和王喜忠丁明孝.细胞生物学：高等教育出版社，1995年1月第一版，2011年6月第一次印刷：45页(第四版))。

[0003] 光是自然界中影响动植物生命活动最重要的环境因子之一。对于植物而言，光不仅为光合作用提供能量，也作为一种信号因子调控植物生长发育的诸多过程。然而20世纪70年代以来，环境污染引发臭氧层变薄，紫外辐射增强已严重影响到人类健康与生态环境。
波长为280～315nm的紫外光称为UV-B区，这一波段的紫外辐射是可能到达地表并对人类和生态系统造成最大危害的部分。

[0004] FRAP实验中UV-B光照射植物细胞，研究特定蛋白在细胞内的运动与迁移速率，传统的UV-B灯管体积较大，无法靠近植物细胞来提供足够的UV-B光照强度；并且UV-B光穿透能力较差，实验中用到的盖玻片就可以阻挡大部分的UV-B光，植物细胞接收到的UV-B光大大减少，不能达到FRAP实验所需UV-B强度。因此，目前还没有一种能够有效的用于UV-B光下植物细胞FRAP实验的装置。

发明内容

[0005] 本发明的目的在于提供结构简单、操作方便的一种用于UV-B光下植物细胞FRAP实验的装置。

[0006] 本发明设有UV-B LED灯支架、UV-B LED灯、UV-B LED灯稳压器、可透过UV-B光的制片装置、倒置激光显微镜照明系统、倒置激光显微镜光路和倒置激光显微镜载物台，所述UV-B LED灯稳压器与UV-B LED灯支架连接，所述可透过UV-B光的制片装置设有盖玻片、中间有孔的薄铁片、低熔点琼脂糖和拟南芥幼苗；所述可透过UV-B光的制片装置体积较小，可固定在倒置激光显微镜载物台上，所述UV-B LED灯可以达到FRAP实验的强度；所述中间有孔的薄铁片设在盖玻片的中间，中间有孔的薄铁片的中间孔设置低熔点琼脂糖和拟南芥幼苗；所述倒置激光显微镜照明系统设在UV-B LED灯支架上方，倒置激光显微镜光路设在倒置激光显微镜载物台的底部；所述可透过UV-B光的制片装置可使短波长的UV-B LED灯的光透过率达到80％以上，实现光漂白后有足够强度的UV-B光处理样品，完成UV-B光照射条件下的FRAP实验。

[0007] 所述倒置激光显微镜照明系统可采用商业化倒置激光显微镜照明系统，所述倒置激光显微镜光路可采用商业化倒置激光显微镜光路，所述倒置激光显微镜载物台可采用商业化倒置激光显微镜载物台。

[0008] 所述UV-B LED灯稳压器上可设有开关。

[0009] 本发明可发出特定波长的UV-B光；所述可透过UV-B光的制片装置，可使短波长的UV-B光透过率达到80％以上，实现光漂白后有足够强度的UV-B光照射植物细胞，完成UV-B光照射条件下的FRAP实验；所述商业化倒置激光共聚焦显微镜用于植物细胞特定部位的荧光漂白和图像采集。

附图说明

[0010] 图1为本发明实施例的结构组成示意图。

[0011] 图2为本发明所述可透过UV-B光的制片装置实施例的结构组成示意图。

具体实施方式

[0012] 以下实施例将结合附图对本发明作进一步的说明。

[0013] 参见图1和2，本发明实施例设有UV-B LED灯支架1、UV-B LED灯2、UV-B LED灯稳压器3、可透过UV-B光的制片装置4、倒置激光显微镜照明系统8、倒置激光显微镜光路9和倒置激光显微镜载物台10，所述UV-B LED灯稳压器3与UV-B LED灯支架1连接，所述可透过UV-B光的制片装置4设有盖玻片5、中间有孔的薄铁片6、低熔点琼脂糖和拟南芥幼苗7；所述可透过UV-B光的制片装置4体积较小，可固定在倒置激光显微镜载物台10上，所述UV-B LED灯2可以达到FRAP实验的强度；所述中间有孔的薄铁片6设在盖玻片5的中间，中间有孔的薄铁片6的中间孔设置低熔点琼脂糖和拟南芥幼苗7；所述倒置激光显微镜照明系统8设在UV-B LED灯支架1上方，倒置激光显微镜光路9设在倒置激光显微镜载物台10的底部；所述可透过UV-B光的制片装置4可使短波长的UV-B LED灯2的光透过率达到80％以上，实现光漂白后有足够强度的UV-B光处理样品，完成UV-B光照射条件下的FRAP实验。

[0014] 所述倒置激光显微镜照明系统8采用商业化倒置激光显微镜照明系统，所述倒置激光显微镜光路9采用商业化倒置激光显微镜光路，所述倒置激光显微镜载物台采用商业化倒置激光显微镜载物台。

[0015] 所述UV-B LED灯稳压器3上设有开关。

[0016] 在本实施例中，UV-BLED灯2可发出280nm或310nm的UV-B光和FRAP实验用的强度。可透过UV-B光的制片装置4体积较小，可固定在显微镜载物台10上，与植物材料距离较近，UV-B光能达到一定的强度，满足在UV-B光下进行植物细胞FRAP实验的UV-B光强度。本发明中的可透过UV-B光的制片装置4取代了体积较大的UV-B灯管，设备简单，操作方便，减少污染。另外，可透过UV-B光的制片装置设置开关，可调节UV-B LED灯2的打开数量，做到随用随开，提高UV-B光下植物细胞FRAP实验装置的使用便利性。

[0017] 在本实施例中，可透过UV-B光的制片装置的制片方法是，将中间有孔的薄铁片6与盖玻片5粘起来，在中间孔中加入1％低熔点琼脂糖，涂均匀，在凝固前将拟南芥幼苗放置其中，用透明胶带压平，此方法可使短波长的UV-B光透过率达到80％以上，实现光漂白后有足够强度的UV-B光处理样品，完成UV-B光照射条件下的FRAP实验。