酚噻嗪衍生物及其使用方法

摘要

本发明涉及吩噻嗪衍生物，例如吩噻嗪化合物的缀合物，及其药物组合物。本发明还涉及制备这些化合物的方法以及这些化合物用于治疗癌症例如肺癌、结肠癌、乳腺癌或胰腺癌的用途。

权利要求

1.式(Ia)化合物：

或其药学上可接受的盐,其中：

1 2 3

Oligo为低聚物或共低聚物，其选自‑[CH2CH(OR )CH2O]m‑R 、‑[CH2CH2O]n‑R 、‑[CH2CH

1 2 1 2

(OR)CH2O]m‑[CH2CH2O]n‑R和‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑R；

R为H、卤素、被一个或更多个卤素取代的C1‑C4烷基、或‑S‑C1‑C4烷基；

1 2 3

R、R和R各自独立地为H或C1‑C4烷基；

X为键、C(O)、C(O)O或C(O)CH2O；

m为2至16的整数；且

3 3

n为3至16的整数，并且当Oligo为‑[CH2CH2O]n‑R ，其中n为12或13，R为甲基时，则X为C(O)、C(O)O或C(O)CH2O；

前提是排除以下化合物：

2.权利要求1的化合物，其中R为卤素或被一个或更多个F取代的C1‑C4烷基。

3.权利要求1的化合物，其中R为Cl、CF3、SCH3或H。

4.权利要求1‑3中任一项的化合物，其中X为键。

5.权利要求1‑3中任一项的化合物，其中X为C(O)O、C(O)CH2O或C(O)。

1 2

6.权利要求1‑3中任一项的化合物，其中Oligo为选自‑[CH2CH(OR )CH2O]m‑R 和‑3

[CH2CH2O]n‑R的低聚物。

7.权利要求1‑3中任一项的化合物，其中n为3、6、9、12或16。

8.权利要求1‑3中任一项的化合物，其中m为3、6或9。

9.权利要求1‑3中任一项的化合物，其中当Oligo为共低聚物时，m与n之和不大于16。

10.权利要求1‑3中任一项的化合物，其中当Oligo为共低聚物时，m与n之和不大于12。

11.权利要求1‑3中任一项的化合物，其中当Oligo为共低聚物时，m与n之和不大于9。

1

12.权利要求1‑3中任一项的化合物，其中各R独立地为H或甲基。

2

13.权利要求1‑3中任一项的化合物，其中R为H或甲基。

3

14.权利要求1‑3中任一项的化合物，其中R为H或甲基。

15.一种药物组合物，其包含权利要求1‑14中任一项的化合物和药学上可接受的载体。

16.权利要求1‑14中任一项的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途。

17.化合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途，其中所述化合物选自：及其药学上可接受的盐。

18.权利要求17的用途，其中所述化合物选自：及其药学上可接受的盐。

19.权利要求16或17的用途，其中所述癌症为肺癌、结肠癌、乳腺癌或胰腺癌。

20.权利要求16‑18中任一项的用途，其中所述药物包含另外的抗癌剂。

21.权利要求20的用途，其中所述另外的抗癌剂为顺铂或吉非替尼。

22.权利要求17‑18中任一项的用途，其中所述癌症为非小细胞肺癌(NSCLC)。

23.权利要求22的用途，其中所述非小细胞肺癌是腺癌、鳞状细胞癌或大细胞癌。

24.权利要求22的用途，其中所述非小细胞肺癌对至少一种先前疗法具有抗性或难治性。

25.权利要求24的用途，其中所述非小细胞肺癌对化学疗法具有抗性。

26.权利要求25的用途，其中所述非小细胞肺癌对表皮生长因子受体‑酪氨酸激酶抑制剂(EGFR‑TKI)具有抗性。

27.权利要求22的用途，其中所述非小细胞肺癌表达癌症干细胞样细胞(CSC)。

28.权利要求22的用途，其中所述药物包含另外的抗癌剂。

29.权利要求28的用途，其中所述另外的抗癌剂为顺铂、吉非替尼或其组合。

1

30.权利要求22的用途，其中Oligo为低聚物或共低聚物，其选自‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑

2 1 2 1 2

R、‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑[CH2CH2O]n‑R和‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑R。

1 2

31.权利要求22的用途，其中Oligo为‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑R。

1 2

32.权利要求22的用途，其中Oligo为选自‑[CH2CH(OR )CH2O]m‑[CH2CH2O]n‑R 和‑

1 2

[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑R的共低聚物。

33.权利要求22的用途，其中3

Oligo为‑[CH2CH2O]n‑R；

X为键；且

n为6、7、8、9、10、11、14、15或16。

34.权利要求22的用途，其中X为C(O)、C(O)O或C(O)CH2O。

35.权利要求22的用途，其中R为卤素或被一个或更多个F取代的C1‑C4烷基。

36.权利要求22的用途，其中R为Cl、CF3、SCH3或H。

1

37.权利要求22的用途，其中各R独立为H或甲基。

2

38.权利要求22的用途，其中R为H或甲基。

3

39.权利要求22的用途，其中R为H或甲基。

说明书

酚噻嗪衍生物及其使用方法

[0001] 相关申请

[0002] 本申请要求于2017年6月16日提交的第15/625,118号美国申请的优先权和权益，该申请是于2016年10月17日提交的第15/295,769号美国申请的继续申请，现在是第9,695,
138号美国专利，其全部内容通过引用整体并入在本申请中。

背景技术

[0003] 多数非小细胞肺癌(NSCLC)患者具有需要系统性治疗的不能手术的疾病。对化学疗法(例如，表皮生长因子受体‑酪氨酸激酶抑制剂(EGFR‑TKI))的抗性是治疗系统性NSCLC的主要问题。例如，化学疗法的抗药性可用癌症干细胞样细胞(Cancer stem‑like cell,
CSC)理论来解释。CSC已经显示具有干细胞的特征，例如，自我复制、增强转移以及抗逆性和抗药性，所有这些特征都涉及癌症复发和癌症转移(Yeh et al.,Am.J.Respir.Crit.Care 
Med.186,1180(2012))。因此，需要用于癌症治疗的新药物。

发明内容

[0004] 在一方面，本发明的特征在于一种式(Ia)的酚噻嗪化合物或其药学上可接受的盐：

[0005]

[0006] 其中：

[0007] Oligo为低聚物或共低聚物，其选自[CH2CH(OR1)CH2O]m‑R2、‑[CH2CH2O]n‑R3、‑1 2 1 2
[CH2CH(OR)CH2O]m‑[CH2CH2O]n‑R和‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑R；

[0008] R为H、卤素、被一个或更多个卤素取代的C1‑C4烷基、或‑S‑C1‑C4烷基；

[0009] R1、R2和R3各自独立地为H或C1‑C4烷基；

[0010] X为键、C(O)、C(O)O或C(O)CH2O；

[0011] m为2至16的整数；且

[0012] n为3至16的整数，并且当Oligo为‑[CH2CH2O]n‑R3，其中n为12或13，R3为甲基时，则X为C(O)、C(O)O或C(O)CH2O。

[0013] 在另一方面，本发明的特征在于一种治疗癌症(例如，肺癌，诸如非小细胞肺癌或NSCLC、结肠癌、乳腺癌或胰腺癌)的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐：

[0014]

[0015] 其中：

[0016] Oligo为低聚物或共低聚物，其选自‑[CH2CH(OR1)CH2O]m‑R2、‑[CH2CH2O]n‑R3、‑1 2 1 2
[CH2CH(OR)CH2O]m‑[CH2CH2O]n‑R和‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑R；

[0017] R为H、卤素、被一个或更多个卤素取代的C1‑C4烷基、或‑S‑C1‑C4烷基；

[0018] R1、R2和R3各自独立地为H或C1‑C4烷基；

[0019] X为键、C(O)、C(O)O或C(O)CH2O；

[0020] m为2至16的整数；且

[0021] n为3至16的整数。

[0022] 在另一方面，本发明的特征在于式(I)化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗癌症(例如，肺癌，诸如非小细胞肺癌或NSCLC、结肠癌、乳腺癌或胰腺癌)：

[0023]

[0024] 其中：

[0025] Oligo为低聚物或共低聚物，其选自‑[CH2CH(OR1)CH2O]m‑R2、‑[CH2CH2O]n‑R3、‑1 2 1 2
[CH2CH(OR)CH2O]m‑[CH2CH2O]n‑R和‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑R；

[0026] R为H、卤素、被一个或更多个卤素取代的C1‑C4烷基、或‑S‑C1‑C4烷基；

[0027] R1、R2和R3各自独立地为H或C1‑C4烷基；

[0028] X为键、C(O)、C(O)O或C(O)CH2O；

[0029] m为2至16的整数；且

[0030] n为3至16的整数。

[0031] 在另一方面，本发明的特征在于式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗癌症(例如，肺癌，诸如非小细胞肺癌或NSCLC、结肠癌、乳腺癌或胰腺癌)的药物中的用途：

[0032]

[0033] 其中：

[0034] Oligo为低聚物或共低聚物，其选自‑[CH2CH(OR1)CH2O]m‑R2、‑[CH2CH2O]n‑R3、‑1 2 1 2
[CH2CH(OR)CH2O]m‑[CH2CH2O]n‑R和‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑R；

[0035] R为H、卤素、被一个或更多个卤素取代的C1‑C4烷基、或‑S‑C1‑C4烷基；

[0036] R1、R2和R3各自独立地为H或C1‑C4烷基；

[0037] X为键、C(O)、C(O)O或C(O)CH2O；

[0038] m为2至16的整数；且

[0039] n为3至16的整数。

[0040] 在某些实施方案中，式(I)或(Ia)化合物对人NSCLC细胞，例如H441GL(TM TM TM
HTB‑174 )、A549( CCL‑185 )或H1299( CCL‑5803 )，具有细胞毒性。

[0041] 在某些实施方案中，式(I)或(Ia)化合物为NSCLC细胞的抑制剂，具有的IC50值为约15μM或更低、约10μM或更低、约5μM或更低、约1μM或更低、约500nM或更低、约300nM或更低、约200nM或更低、约100nM或更低、约50nM或更低、约25nM或更低、约10nM或更低、约5nM或更低、或者约1nM或更低。

[0042] 在某些实施方案中，式(I)或(Ia)化合物对人癌细胞，例如，HCT116、DLD1、MCF7、MDA‑MB‑231、PANC‑1或SUIT‑2，具有细胞毒性。

[0043] 在某些实施方案中，式(I)或(Ia)化合物为人癌细胞(例如，结肠癌细胞、乳腺癌细胞和胰腺癌细胞)的抑制剂，具有的IC50值为约15μM或更低、约10μM或更低、约5μM或更低、约1μM或更低、约500nM或更低、约300nM或更低、约200nM或更低、约100nM或更低、约50nM或更低、约25nM或更低、约10nM或更低、约5nM或更低、或者约1nM或更低。

[0044] 在某些实施方案中，式(I)或(Ia)化合物为癌症干细胞样细胞(CSC)的选择性抑制剂。在另一个实施方案中，式(I)或(Ia)化合物具有抗肿瘤作用，并且抑制NSCLC细胞中CSC的生长。

[0045] 在某些实施方案中，本发明的特征在于逆转CSC相关基因表达的式(I)或(Ia)化合物。

[0046] 在一个实施方案中，式(I)或(Ia)化合物克服了肺癌抗药性。在另一个实施方案中，式(I)或(Ia)的化合物克服了NSCLC抗药性。在另一个实施方案中，NSCLC细胞表达表皮生长因子受体‑酪氨酸激酶抑制剂(EGFR‑TKI)抗性。

[0047] 在某些实施方案中，本发明的特征在于一种或多种式(I)或(Ia)的化合物与其他抗癌剂(例如顺铂(cisplatin)或吉非替尼(gefitinib))组合，提供对抗性肺癌细胞(例如
H441GL、A549或H1299)协同细胞毒作用。

[0048] 本文还提供了药物组合物，其包含一种或多种药学上可接受的载体和一种或多种本文所述的式(I)或(Ia)化合物。

[0049] 在一个实施方案中，式(I)或(Ia)化合物为被同位素标记的。

[0050] 例如，可使用多种本领域所认可的技术中的任一种来制备氘标记的化合物。例如，本文所述的氘标记的式(I)或(Ia)化合物或本文所列举的化合物通常可通过实施本文所述的方法，经由用容易取得的氘标记试剂替换非氘标记的试剂来制备。

[0051] 在一个实施方案中，所述肺癌为NSCLC。在某些实施方案中，所述NSCLC为腺癌(adenocarcinoma)、鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma)或大细胞癌(large cell 
carcinoma)。

[0052] 在一个实施方案中，所述癌症为结肠癌、乳腺癌或胰腺癌。

[0053] 在一个实施方案中，所述对象为人或非人动物。

[0054] 除非另有说明，否则治疗方法的任何描述包括下述用途：使用一种或多种式(I)或(Ia)化合物或者与其他抗癌剂(例如顺铂或吉非替尼)组合使用以提供如本文所述的治疗，
以及一种或多种式(I)或(Ia)化合物或者与其他抗癌剂(例如顺铂或吉非替尼)组合在制备
或制造用于治疗或预防该病症的药物中的用途。所述治疗包括治疗人或非人动物(包括啮
齿类动物)及其他疾病类型。本文所述的方法可用于鉴别通过抑制CSC来治疗或预防癌症的
合适候选对象。例如，本发明还提供了鉴别CSC的抑制剂的方法。

[0055] 除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。在说明书中，单数形式也包含复数，除非上下文另有明确规定。虽然与本文所述的方法和材料相似或等同的方法和材料可用于实施或测试本发明，
但下文描述了合适的方法和材料。本文提及的所有出版物、专利申请、专利及其他参考文献通过引用并入本文。本文引用的参考文献不被认为是本发明的现有技术。在冲突的情况下，以本发明(包括定义)为准。此外，材料、方法和实施例仅是说明性的，而非意在限制。在本文披露的化合物的化学结构与名称相冲突的情况下，以化学结构为准。

[0056] 本发明的其他特征和优点从以下具体描述和权利要求书来看将会是明显的。

具体实施方式

[0057] 除了抗组胺、止吐、镇静与抗胆碱作用之外，某些酚噻嗪(phenothiazine)化合物诸如丙氯拉嗪(prochlorperazine)(PCP)与三氟拉嗪(trifluoperazine)(TFP)已经显示通
过抑制人NSCLC细胞系中CSC生长而具有抗肿瘤作用(参见例如US2014/0294994、WO2013/
060305和WO2015/184794)。PCP已经显示对NSCLC细胞的细胞毒性(参见例如WO2015/
184794)。类似地，TFP和N‑去甲基丙氯拉嗪(10‑[3‑(1‑哌嗪基)丙基]‑2‑氯‑10H‑吩噻嗪(NDP))也显示对NSCLC细胞具有细胞毒性(参见例如Yeh et al.,Am.J.Respir.Crit.Care 
Med.186,1180(2012)、WO2013/060305和WO2015/184794)。PCP、TFP、NDP和N‑去甲基三氟拉嗪(NDT)的结构提供在下表中。

[0058]

[0059]

[0060] 异丙嗪(Promethazine)的缀合物通过N‑去甲基异丙嗪与聚乙二醇单甲醚(methoxypolyethyleneglycol)(mPEG)的N‑烷基化来合成(参见例如US 2012/0046279)，并且显示出与H1受体结合的高亲和力。然而，聚乙二醇(PEG)缀合导致异丙嗪的结合亲和力降低。此外，随着mPEG的大小增加，结合亲和力降低。N‑去甲基吩噻嗪经由酰胺键的mPEG缀合物也已被报道(参见例如Roberts et al.,Adv.Drug Delivery Rev.2002,54,459和US 
2005/0080075)。

[0061] 本发明提供了新颖的低聚物‑酚噻嗪缀合物，其避免了遇到化学疗法抗药性时所产生的问题。本文所披露的低聚物‑酚噻嗪缀合物的优点包括对抗药癌细胞具有增加的细
胞毒性，由此得到用于癌症治疗的改善方法。

[0062] 本发明还提供了用于制备本文所披露的化合物的合成方法、包含这些化合物的药物组合物，以及所述化合物的多种用途。

[0063] 在一方面，本发明提供了式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐：

[0064]

[0065] 其中：

[0066] Oligo为低聚物或共低聚物，其选自‑[CH2CH(OR1)CH2O]m‑R2、‑[CH2CH2O]n‑R3、‑1 2 1 2
[CH2CH(OR)CH2O]m‑[CH2CH2O]n‑R和‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑R；

[0067] R为H、卤素、被一个或更多个卤素取代的C1‑C4烷基、或‑S‑C1‑C4烷基；

[0068] R1、R2和R3各自独立地为H或C1‑C4烷基；

[0069] X为键、C(O)、C(O)O或C(O)CH2O；

[0070] m为2至16的整数；且

[0071] n为3至16的整数，并且当Oligo为‑[CH2CH2O]n‑R3，其中n为12或13，R3为甲基时，则X为C(O)、C(O)O或C(O)CH2O。

[0072] 适用时，式(I)或(Ia)化合物可具有一个或多个以下特征：

[0073] 例如，R为卤基或被一个或更多个F取代的C1‑C4烷基。

[0074] 例如，R为Cl、CF3、SCH3或H。

[0075] 例如，R为Cl。

[0076] 例如，R为CF3。

[0077] 例如，R为SCH3。

[0078] 例如，X为键。

[0079] 例如，X为C(O)O。

[0080] 例如，X为C(O)CH2O。

[0081] 例如，X为C(O)。

[0082] 例如，Oligo为选自‑[CH2CH(OR1)CH2O]m‑R2和‑[CH2CH2O]n‑R3的低聚物。

[0083] 例如，Oligo为选自‑[CH2CH(OR1)CH2O]m‑[CH2CH2O]n‑R2和‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OR1)2
CH2O]m‑R的共低聚物。

[0084] 例如，n为3、6、9、12或16。

[0085] 例如，n为3至11，例如，n为3、4、5、6、7、8、9、10或11。

[0086] 例如，n为3至9，例如，n为3、4、5、6、7、8或9。

[0087] 例如，n为14至16，例如，n为14、15或16。

[0088] 例如，n为3、6或9。

[0089] 例如，m为2至9，例如，m为2、3、4、5、6、7、8或9。

[0090] 例如，m为2至6，例如，m为2、3、4、5或6。

[0091] 例如，m为6至12，例如，m为6、7、8、9、10、11或12。

[0092] 例如，m为12至16，例如，m为12、13、14、15或16。

[0093] 例如，m为3、6或9。

[0094] 例如，m为3。

[0095] 例如，m为3并且n为3至9(例如，n为3、6或9)。

[0096] 例如，当Oligo为共低聚物时，m与n之和不大于16、不大于12或不大于9。例如，m与n之和为5至16(例如，该和为5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16)。

[0097] 例如，各R1独立为H或甲基。

[0098] 例如，各R1为H。

[0099] 例如，各R1为甲基。

[0100] 例如，R2为H或甲基。

[0101] 例如，R2为H。

[0102] 例如，R2为甲基。

[0103] 例如，R3为H。

[0104] 例如，R3为甲基。

[0105] 在另一方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含式(I)或(Ia)化合物和药学上可接受的载体。

[0106] 在又一方面，本发明提供了一种治疗癌症的方法，其包括向有此需要的对象施用治疗有效量的式(Ia)化合物。在又一方面，本发明提供了式(Ia)化合物在治疗癌症中的用
途。

[0107] 在又一方面，本发明提供了式(Ia)化合物，用于制备用于治疗癌症的药物。

[0108] 此外，本发明还提供了一种治疗癌症的方法，其包括向有此需要的对象施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐：

[0109]

[0110] 其中：

[0111] Oligo为低聚物或共低聚物，其选自‑[CH2CH(OR1)CH2O]m‑R2、‑[CH2CH2O]n‑R3、‑1 2 1 2
[CH2CH(OR)CH2O]m‑[CH2CH2O]n‑R和‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OR)CH2O]m‑R；

[0112] R为H、卤素、被一个或更多个卤素取代的C1‑C4烷基、或‑S‑C1‑C4烷基；

[0113] R1、R2和R3各自独立地为H或C1‑C4烷基；

[0114] X为键、C(O)、C(O)O或C(O)CH2O；

[0115] m为2至16的整数；且

[0116] n为3至16的整数。

[0117] 在另一方面，本发明提供了式(I)化合物在治疗癌症中的用途。

[0118] 在另一方面，本发明提供了式(I)化合物，用于制备用于治疗癌症的药物。

[0119] 适用时，本文所披露的方法、用途或用于所述用途的化合物可具有一个或多个以下特征。

[0120] 例如，所述癌症为肺癌。

[0121] 例如，所述癌症为非小细胞肺癌。

[0122] 例如，所述非小细胞肺癌为腺癌、鳞状细胞癌或大细胞癌。

[0123] 例如，所述癌症为结肠癌。

[0124] 例如，所述癌症为乳腺癌。

[0125] 例如，所述癌症为胰腺癌。

[0126] 例如，所述对象为人。

[0127] 例如，本发明的方法进一步包括向对象施用抗癌剂。例如，本发明的用于所述用途的化合物适于与另外的抗癌剂组合施用。例如，本发明的药物适于与另外的抗癌剂组合施用。

[0128] 例如，所述另外的抗癌剂为顺铂或吉非替尼。

[0129] 例如，式(I)或(Ia)化合物对NSCLC细胞具有细胞毒性。例如，式(I)或(Ia)化合物TM
为NSCLC细胞的抑制剂，NSCLC细胞例如为H441GL( HTB‑174 )、A549( CCL‑
TM TM
185 )或H1299( CCL‑5803 )，其细胞抑制IC50值为约15μM或更低、约10μM或更低、
约5μM或更低、约1μM或更低、约500nM或更低、约300nM或更低、约200nM或更低、约100nM或更低、约50nM或更低、约25nM或更低、约10nM或更低、约5nM或更低、或约1nM或更低。

[0130] 在另一方面，本发明的特征在于一种治疗癌症(例如肺癌(诸如NSCLC))的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用治疗有效量的式(I)或(Ia)化合物。在另一方面，本发明的特征在于一种式(I)或(Ia)化合物，用于治疗癌症，例如肺癌(诸如NSCLC)。在另一方面，本发明的特征在于式(I)或(Ia)化合物在制备用于治疗癌症(例如肺癌(诸如NSCLC))的药
物中的用途。

[0131] 例如，式(I)或(Ia)化合物抑制NSCLC细胞，例如，H441GL细胞、A549细胞或H1299细胞。例如，NSCLC细胞表达EGFR‑TKI抗性。例如，非小细胞肺癌(NSCLC)细胞表达与癌症干细胞样细胞(CSC)相关的基因表达。

[0132] 在一个实施方案中，式(I)或(Ia)化合物与其他抗癌剂(例如顺铂或吉非替尼)组合使用。

[0133] 例如，式(I)或(Ia)化合物对癌细胞具有细胞毒性。例如，式(I)或(Ia)化合物为结TM TM肠癌细胞的抑制剂，诸如HCT116( CCL‑247 )或DLD1( CCL‑221 )；乳腺癌
TM TM
细胞的抑制剂，诸如MCF7( HTB‑22 )或MDA‑MB‑231( HTB‑26 )；以及胰腺
TM
癌细胞的抑制剂，诸如PANC‑1( CRL‑1469 )或SUIT‑2，其细胞抑制IC50值为约15μM
或更低、约10μM或更低、约5μM或更低、约1μM或更低、约500nM或更低、约300nM或更低、约
200nM或更低、约100nM或更低、约50nM或更低、约25nM或更低、约10nM或更低、约5nM或更低、或约1nM或更低。

[0134] 不希望被任何理论所束缚，相信被本文披露的式(I)或(Ia)化合物可通过选择性地抑制CSC来治疗癌症(例如，NSCLC、结肠癌、乳腺癌或胰腺癌)。

[0135] 在另一个方面，本发明的特征在于一种制备式(I)或(Ia)化合物的方法。

[0136] 本发明的特征还在于一种药物组合物，其包含式(I)或(Ia)化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。

[0137] 本发明的代表性化合物包括列于表1中的化合物或其盐。

[0138] 表1

[0139]

[0140]

[0141]

[0142]

[0143]

[0144]

[0145]

[0146]

[0147] 除非在本文中另有说明或与上下文明显矛盾，否则在以下说明书和权利要求中使用的定冠词和不定冠词应被解释为涵盖单数和复数。除非另有说明，否则术语“包含”、“具有”、“包括”和“含有”应被解释为开放术语(即，意指“包括但不限于”)。此外，当在实施方案中使用“包含”或另一开放式术语时，应当理解，使用中间术语“基本上由...组成”或封闭术语“由...组成”可更狭义地要求保护相同的实施方案。

[0148] 除非另有说明，否则术语“和/或”在本发明中用于表示“和”或“或”。

[0149] 本文中所使用的“烷基”、“C1、C2、C3、C4、C5或C6烷基”或“C1‑C6烷基”旨在包括C1、C2、C3、C4、C5或C6直链(线性)饱和脂肪族烃基和C3、C4、C5或C6支链饱和脂肪族烃基。例如，C1‑C6烷基旨在包括C1、C2、C3、C4、C5或C6烷基。烷基的实例包括具有1至6个碳原子的部分，诸如但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基或正己基。

[0150] 在某些实施方案中，直链或支链烷基具有六个或更少的碳原子(例如，对于直链为C1‑C6，对于支链为C3‑C6)，并且在另一个实施方案中，直链或支链烷基具有四个或更少的碳原子。

[0151] 本文中使用的“卤代(halo)”或“卤素(halogen)”是指氟、氯、溴和碘。术语“全卤代”通常是指其中所有氢原子被卤素原子替代的部分。术语“卤代烷基”或“卤代烷氧基”是指被一个或更多个卤素原子取代的烷基或烷氧基。

[0152] 本文中使用的术语“取代的”是指指定原子上的任意一个或多个氢原子被选择的指定基团所替代，条件是不能超过指定原子的正常化合价，并且由此取代得到稳定的化合
物。当取代基为氧代(oxo)或酮基(keto)(即，＝O)时，该原子上的2个氢原子被替代。“稳定化合物”和“稳定结构”是指足够稳定从反应混合物中分离至可用纯度并配制成有效治疗剂的化合物。

[0153] 当任何变量(例如：R、R1、R2或R3)在任何成分或化合物式中出现多于一次时，其在1
每次出现时的定义独立于任何其他出现时的定义。因此，例如，如果基团显示被0‑2个R 部
1 1 1
分取代，则该基团可选择性地被至多两个R部分取代，并且R 在每次出现时独立地选自R的
定义。此外，取代基和/或变量的组合是可允许的，但只有当这种组合导致稳定的化合物时。

[0154] “异构(Isomerism)”是指具有相同分子式，但其原子的键合顺序或其原子空间排列不同的化合物。原子的空间排列不同的异构体被称为“立体异构体”。彼此不为镜像的立体异构体称为“非对映异构体”，彼此为不重叠的镜像的立体异构体称为“对映异构体”，或有时称为光学异构体。含有等量的具有相反手性的各对映异构形式的混合物称为“外消旋
混合物”。

[0155] 与四个不相同的取代基键合的碳原子被称为“手性中心”。

[0156] “手性异构体”是指具有至少一个手性中心的化合物。具有多于一个手性中心的化合物可以作为单独的非对映异构体或作为非对映异构体的混合物存在，称之为“非对映异构体混合物”。当存在一个手性中心时，立体异构体可以由该手性中心的绝对构型(R或S)来表征。绝对构型是指连接到手性中心的取代基的空间排列。连接到所考虑的手性中心的取
代基根据Cahn‑Ingold‑Prelog顺序规则排列。(Cahn  et  al .,
Angew.Chem.Inter.Edit.1966,5,385；errata 511；Cahn et al.,Angew.Chem.1966,78,
413；Cahn and Ingold,J.Chem.Soc.1951(London),612；Cahn et al.,Experientia 1956,
12,81；Cahn,J.Chem.Educ.1964,41,116)。

[0157] 应当理解，本发明的化合物可被描述为不同的手性异构体或几何异构体。还应当理解，当化合物具有手性异构形式或几何异构形式时，所有的异构形式旨在被包括于本发
明的范围内，并且化合物的命名不排除任何异构形式。

[0158] 适用时，本发明的化合物包含化合物本身，及其盐及其溶剂化物。例如，可在阴离子与位于芳基或杂芳基取代的苯化合物上带正电荷基团(例如，氨基)之间形成盐。合适的阴离子包括氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、硫酸氢根、氨磺酸根、硝酸根、磷酸根、柠檬酸根、甲磺酸根、三氟乙酸根、谷氨酸根、葡萄醣醛酸根、戊二酸根、苹果酸根、马来酸根、琥珀酸根、富马酸根、酒石酸根、甲苯磺酸根、水杨酸根、乳酸根、萘磺酸根和乙酸根(例如，三氟乙酸根)的阴离子。术语“药学上可接受的阴离子”是指适合于形成药学上可接受的盐的阴离子。同样地，也可在阳离子与位于芳基或杂芳基取代的苯化合物上带负电荷基团(例如，羧酸根)之间形成盐。合适的阳离子包括钠离子、钾离子、镁离子、钙离子和铵离子(诸如四甲基铵离子)。芳基或杂芳基取代的苯化合物还包括含有季氮原子的那些盐。应当理解，在此种盐形式中，化合物与盐的阳离子或阴离子的比例可为1:1，或者除了1:1之外的任何比
例，例如3:1、2:1、1:2或1:3。

[0159] 此外，本发明的化合物，例如化合物的盐，可以水合或未水合(无水)形式存在，或作为与其他溶剂分子的溶剂化物存在。水合物的非限制性实例包括一水合物、二水合物等。溶剂化物的非限制性实例包括乙醇溶剂化物、丙酮溶剂化物等。

[0160] “溶剂化物”是指含有化学计量或非化学计量的溶剂的溶剂加合形式。一些化合物具有在结晶固态中捕获固定摩尔比溶剂分子的倾向，由此形成溶剂化物。如果溶剂是水，则形成的溶剂化物为水合物；如果溶剂是醇，则形成的溶剂化物为醇化物。水合物通过一个或多个水分子与一分子物质的组合所形成，其中水保持其H2O分子状态。

[0161] 本发明旨在包括存在于本发明化合物中的原子的所有同位素。同位素包括那些具有相同原子序数但具有不同质量数的原子。通过非限制的一般实例，氢的同位素包括氚和
氘，碳的同位素包括C‑13和C‑14。

[0162] 在某些实施方案中，“组合疗法(combination therapy)”旨在包含以依序方式施用两种或更多种治疗剂，其中每种治疗剂在不同时间施用，以及这些治疗剂或至少两种治
疗剂在同时施用或以实质上同时的方式施用。同时施用可例如通过向对象施用具有固定比
例的每种治疗剂的单个胶囊，或者向对象多次施用每种治疗剂的单个胶囊而实现。依序或
实质上同时施用每种治疗剂可通过任何适当途径实现，其包括但不限于口服途径、静脉内
途径、肌内途径和粘膜组织的直接吸收。治疗剂可通过相同的途径或不同的途径施用。例
如，所选择的组合的第一治疗剂可经由静脉内注射施用，而组合的其他治疗剂可口服施用。
或者，例如，所有治疗剂可口服施用或所有治疗剂可通过静脉内注射施用。治疗剂也可交替给药。

[0163] 在本发明的某些方面，“组合疗法”还包括施用如上所述的治疗剂，并进一步与其他生物活性成分与非药物疗法(例如，手术或放射治疗)组合。

[0164] 在本发明的某些方面，本发明的特征组合疗法可导致在治疗疾病或癌症中产生协同效应。“协同效应”被定义为，治疗剂组合的疗效大于任何单独给予的药剂的疗效的总和。
协同效应也可以是通过作为单一药剂施用任何化合物或其他治疗剂所无法达到的效果。协
同效应可包括但不限于通过减小肿瘤大小、抑制肿瘤生长或增加对象的存活来治疗癌症的
效果。协同效应还可包括降低癌细胞活力、诱导癌细胞死亡以及抑制或延迟癌细胞生长。

[0165] 组合疗法可通过施用两种或更多种药剂来实现，例如一种或更多种式(I)或(Ia)化合物和一种或更多种其他治疗剂，每种都被分开配制和施用，或者通过施用单一制剂中
的两种或更多种药剂。其他组合也包括在组合疗法中。例如，两种药剂可一起配制并与含有第三药剂的单独制剂联合施用。尽管组合疗法中的两种或更多种药剂可被同时施用，但是
不必如此。例如，第一药剂(或药剂组合)的施用可在第二药剂(或药剂组合)施用之前的数
分钟、数小时、数天或数周。因此，两种或更多种药剂可在彼此相距数分钟内施用，或在彼此相距1、2、3、6、9、12、15、18或24小时内施用，或在彼此相距1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14天内施用，或在彼此相距2、3、4、5、6、7、8、9或10周内施用。在一些情况下，甚至更长的间隔也是可能的。尽管在许多情况下，期望在组合疗法中使用的两种或更多种药剂同时存在于患
者体内，但是不必如此。

[0166] 本发明还提供了药物组合物，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐，以及本文所披露的一种或多种其他治疗剂，与药学上合适的一种或多种载体或赋形剂以一定
的剂量混合，以治疗或预防本文所述的癌症(例如，肺癌、结肠癌、乳腺癌或胰腺癌)。在一个方面，本发明还提供了药物组合物，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种其他治疗剂，与药学上合适的载体或赋形剂以一定的剂量混合，以治疗或预防本
文所述的肺癌。本发明的药物组合物还可与其他治疗剂或治疗形式同时、依序或交替组合
施用。在一些实施方案中，式(I)或(Ia)化合物的药物组合物与另一种抗癌剂(例如顺铂或
吉非替尼)组合施用。

[0167] “药物组合物”是含有适于向对象施用的形式的本发明化合物的制剂。本发明的化合物以及本文所述的一种或多种其他治疗剂可单独配制，或以活性成分的任何组合形式配制成多种药物组合物。因此，可基于每种药物组合物的剂型来适当地选择一种或多种施药
途径。或者，可将本发明的化合物与本文所述的一种或多种其他治疗剂配制为一种药物组
合物。

[0168] 在一些实施方案中，药物组合物是散装的或以单位剂型存在。单位剂型是多种形式中的任一种，包括例如胶囊、IV袋、片剂、气溶胶吸入器上的单泵或小瓶。单位剂量组合物中活性成分的量(例如，所披露化合物或其盐、水合物、溶剂化物或异构体的制剂)为一种有效量，并且根据所涉及的具体治疗而有所不同。本领域技术人员应当理解，有时需要根据患者的年龄及状况对剂量进行常规改变。剂量还将取决于施药的途径。涵盖各种途径，包括口服、经肺、经直肠、胃肠外、经皮、皮下、静脉内、肌内、腹膜内、吸入、经颊、舌下、胸膜内、鞘内、鼻内等途径。用于局部或经皮施用的本发明化合物的剂型包括粉剂、喷雾剂、软膏剂、糊剂、乳膏剂、洗剂、凝胶剂、溶液剂、贴剂和吸入剂。在一些实施方案中，活性化合物在无菌条件下与药学上可接受的载体以及与任何所需的防腐剂、缓冲剂或抛射剂混合。

[0169] 本文中所使用的短语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范围内，适合用于与人和动物组织接触的那些化合物、阴离子、阳离子、材料、组合物、载体和/或剂型，而没有过度的毒性、刺激性、过敏反应或其他问题或并发症，并具有合理的收益/风险比。

[0170] “药学上可接受的载体”是指于可用于制备药物组合物的赋形剂，其通常是安全的、无毒性的并且既不是生物学上不良的也不是其他方面不良的，并且包括兽医用途以及
人药用途的可接受的赋形剂。

[0171] 本发明的药物组合物被配制成与其预期的施用途径相容。施用途径的实例包括肠胃外，例如静脉内、皮内、皮下、口腔(例如，吸入)、经皮(局部)和经粘膜施用。用于胃肠外、皮内或皮下应用的溶液或混悬液可包括以下组分：无菌稀释剂，诸如注射用水、盐水、不挥发油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他合成溶剂；抗菌剂，诸如苄醇或羟苯甲酯；抗氧化剂，诸如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂，诸如乙二胺四乙酸；缓冲剂，诸如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐，以及用于调节张力的试剂，诸如氯化钠或葡萄糖。pH可用酸或碱调节，诸如盐酸或氢氧化钠。肠胃外制剂可封装在由玻璃或塑料制成的安瓿、一次性注射器或多剂量小瓶中。

[0172] 本发明的组合物可以目前用于化学疗法治疗的许多公知方法施用至对象。例如，对于癌症的治疗，本发明的化合物可被直接注射到肿瘤中，注射到血流或体腔中，或口服或用贴剂通过皮肤施用。所选择的剂量应足以构成有效治疗，但不应高到引起不可接受的副
作用。优选地，在治疗期间和在治疗后的合理期间内，应密切监测疾病的状态(例如，癌症、癌前期等)和患者的健康状况。

[0173] 本文使用的术语“治疗有效量”是指治疗、改善或预防被鉴定的疾病或病症，或显示可检测的治疗或抑制效果的药剂的量。可通过本领域已知的任何测定方法检测该效果。对象的精确有效量将取决于对象的体重、大小和健康状况；疾病的性质与程度；以及选择用于施用的治疗剂或治疗剂的组合。给定情况的治疗有效量可通过常规实验确定，其在临床
医师的技术和判断内。

[0174] 在某些实施方案中，当与单独使用每种药剂的单一疗法相比较时，组合使用的每种药剂的治疗有效量将更低。这种较低的治疗有效量可提供较低毒性的治疗方案。

[0175] 对于任何式(I)或(Ia)化合物，治疗有效量最初可在细胞培养测定(例如CSC)或动物模型(通常是大鼠、小鼠、兔、犬、猪或猴)中估计。动物模型也可用于确定适当浓度范围和施用途径。然后所述信息可用于确定施用于人类的有用剂量和途径。治疗/预防效能和毒性可通过细胞培养或实验动物中的标准药学操作确定，例如ED50(半数有效量)和LD50(半数致死量)。毒性与治疗效果之间的剂量比为治疗指数，并且其可被表示为比率LD50/ED50。优选表现出大的治疗指数的药物组合物。剂量可在该范围内变化，这取决于所使用的剂型、患者的敏感性和施用途径。

[0176] 调节剂量和施用以提供足够水平的(一种或多种)活性剂或维持所需的效果。可纳入考虑的因素包括疾病状态的严重性、对象的一般健康状况、对象的年龄、体重和性别、饮食、施用的时间与频率、药物组合、反应敏感性和对疗法的耐受性/响应。长效药物组合物可每3至4天、每周或每两周施用，这取决于具体制剂的半衰期和清除率。

[0177] 含有本发明活性化合物的药物组合物可以公知的方式制备，例如通过常规的混合、溶解、制粒、糖衣制造、研磨、乳化、包囊、包埋或冻干工艺来制备。药物组合物可以常规方式使用一种或多种药学上可接受的载体配制，所述药学上可接受的载体包括促进活性化
合物加工成可药用制剂的赋形剂和/或助剂。当然，适合的制剂取决于所选择的施用途径。

[0178] 活性化合物可与药学上可接受的载体制备，所述药学上可接受的载体将保护化合物免于从体内快速消除，诸如控释制剂，包括植入物和微囊化递送系统。可使用生物可降解的、生物相容性聚合物，诸如乙烯乙酸乙酯、聚酸酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。这些制剂的制备方法对本领域技术人员是显而易见的。

[0179] 在治疗应用中，本文所述的式(I)或(Ia)化合物、本文所述的其他治疗剂、包含本发明化合物和一种或多种其他治疗剂的组合物或依据本发明使用的药物组合物的剂量，除
了影响所选剂量的其他因素之外，取决于药剂、接受体患者的年龄、体重和临床状况，以及施用该疗法的临床医师或医师的经验和判断。一般而言，剂量应足以导致肿瘤生长减缓，并且优选导致消退，并且还优选引起癌症的完全消退。剂量可为约0.017mg/kg/天至约10mg/
kg/天。在优选的方面，剂量可为约0.067mg/kg/天至约5mg/kg/天，并以单次、分开或连续剂
2
量(该剂量可针对患者的体重(kg)、体表面积(m)、年龄(年)而调整)施用。药剂的有效量是提供如临床医师或其他合格的观察者所指出的客观可识别的改善的量。例如，可参照肿瘤
的直径测量患者肿瘤的消退。肿瘤直径的减小表示消退。消退也通过治疗停止后肿瘤不再
复发来表明。本文使用的术语“剂量有效方式(Dosage effective manner)”是指在对象或细胞中产生所需生物效应的活性化合物的量。

[0180] 药物组合物可与施用说明书一起包含在容器、包装或分配器中。

[0181] 本发明的化合物能够进一步形成盐。所有这些形式也包括在所要求保护的发明的范围内。

[0182] 本文使用的“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的衍生物，其中母体化合物系通过制备其酸盐或碱盐进行修饰。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基(诸如胺)的无机酸盐或有机酸盐，酸性残基(诸如羧酸)的碱盐或有机盐等。药学上可接受的盐包括例如从无毒的无机酸或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐或季铵盐。例如，此类常
规无毒盐包括但不限于从无机酸和有机酸衍生的那些，所述无机酸和有机酸选自2‑乙酰氧基苯甲酸、2‑羟基乙烷磺酸、乙酸、抗坏血酸、苯磺酸、苯甲酸、重碳酸、碳酸、柠檬酸、依地酸、乙二磺酸、1,2‑乙磺酸、富马酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、谷氨酸、乙醇酸、对氨基苯胂酸(glycollyarsanilic acid)、己基间苯二酚酸、海巴胺酸、氢溴酸、盐酸、氢碘酸、羟基马来酸、羟基萘甲酸、羟基乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂基磺酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、萘磺酸(napsylic acid)、硝酸、草酸、双羟萘酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、聚半乳醣醛酸、丙酸、水杨酸、硬脂酸、亚乙酸、琥珀酸、氨基磺酸、对氨基苯磺酸、硫酸、鞣酸、酒石酸、甲苯磺酸以及常见氨基酸，例如甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、精氨酸等。

[0183] 应当理解，所有提及的药学上可接受的盐包括本文所定义的相同盐的溶剂加合形式(溶剂化物)或晶体形式(多晶型物)。

[0184] 本发明的化合物还可制备为酯，例如，药学上可接受的酯。例如，化合物中的醇基团可被转化为其相应的酯，例如，乙酸酯、丙酸酯或其他酯。

[0185] 化合物或其药学上可接受的盐口服、经鼻、经皮、经肺，吸入、经颊、舌下、腹膜内、皮下、肌内、静脉内、经直肠、胸膜内、鞘内和胃肠外施用。在一个实施方案中，化合物口服施用。本领域技术人员应当理解某些施用途径的优点。

[0186] 配制和施用本发明所披露的化合物的技术可参见Remington:the Science and th
Practice of Pharmacy,19  edition,Mack Publishing Co.,Easton,PA(1995)。在一个实
施方案中，本文所述的化合物及其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体或稀释剂组合
用于药物制剂中。合适的药学上可接受的载体包括惰性固体填充剂或稀释剂以及无菌水溶
液或有机溶液。化合物将以足够提供本文所述范围内的所需剂量的量存在于药物组合物
中。

[0187] 除非另有说明，否则本文使用的所有百分比和比例均为重量比。本发明的其他特征和优点在不同的实施例中是显而易见的。所提供的实施例示出了可用于实施本发明的不
同组成和方法。所述实施例不限制所要求保护的公开内容。基于本发明的公开内容，本领域技术人员可鉴定和运用可用于实施本发明的其他组成和方法。

[0188] 本文使用的“有此需要的对象”是具有肺癌的对象，或相对于大众而言具有增加发展此类病症的风险的对象。有此需要的对象可具有癌前病状。“对象”包括哺乳动物。所述哺乳动物可为例如任何哺乳动物，例如人、灵长类动物、鸟、小鼠、大鼠、家禽、犬、猫、牛、马、山羊、骆驼、绵羊或猪。优选地，所述哺乳动物为人。

[0189] 本发明的对象包括已经被诊断具有肺癌、具有肺癌的症状或处于发展肺癌风险中的任何人类对象。本发明的对象包括表达化学疗法抗性(例如表皮生长因子受体‑酪氨酸激酶抑制剂(EGFR‑TKI)抗性)的任何人类对象。

[0190] 有此需要的对象可具有难治性或抗性癌症(即，对治疗没有响应或尚未响应的癌症)。癌症在治疗开始时可能是抗性的，或者在治疗期间可能变得有抗性。在一些实施方案中，有此需要的对象在最近的疗法缓解后癌症复发。在一些实施方案中，有此需要的对象接受用于癌症治疗的所有已知有效疗法并且均失败。在一些实施方案中，有此需要的对象接
受至少一种先前疗法。在某些实施方案中，所述先前疗法为单一疗法。在某些实施方案中，所述先前疗法为组合疗法。

[0191] 本文中所使用的“治疗”或“处置”描述为了对抗疾病、病状或病症而管理和护理患者，并且包括施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以减轻疾病的症状或并发症、病状或病症，或消除疾病、病状或病症。术语“治疗”还可包括体外或动物模型中的细胞治疗。

[0192] 癌症为一组可能引起几乎任何体征或症状的疾病。体征和症状将取决于癌症的位置、癌症的大小以及它对附近器官或结构影响的多寡。如果癌症扩散(转移)，则症状可能会出现在身体的不同部分，例如，肺癌扩散到附近的器官或结构。

[0193] 本发明的癌症可以是难治性或抗性癌症(即，对治疗无响应或尚未响应的癌症)。本发明的癌症可能对至少一种先前疗法具有抗性或难治性。例如，本发明的癌症可能对化
学疗法具有抗性。

[0194] 治疗癌症可导致肿瘤尺寸减小。肿瘤尺寸减小也可称为“肿瘤消退”。优选地，在治疗后，肿瘤尺寸相对于治疗前的尺寸减小5％或更多；更优选地，肿瘤尺寸减小10％或更多；更优选地，减小20％或更多；更优选地，减小30％或更多；更优选地，减小40％或更多；甚至更优选地，减小50％或更多；并且最优选地，减小75％或更多。可通过任何可再现的测量手段测量肿瘤的尺寸。肿瘤的尺寸可被测量为肿瘤的直径。

[0195] 治疗癌症可导致肿瘤体积减小。优选地，在治疗后，肿瘤体积相对于治疗前的尺寸减小5％或更多；更优选地，肿瘤体积减小10％或更多；更优选地，减小20％或更多；更优选地，减小30％或更多；更优选地，减小40％或更多；甚至更优选地，减小50％或更多；并且最优选地，减小75％或更多。可通过任何可再现的测量手段测量肿瘤的体积。

[0196] 治疗癌症导致肿瘤数量减少。优选地，在治疗后，肿瘤数量相对于治疗前的数量减少5％或更多；更优选地，肿瘤数量减少10％或更多；更优选地，减少20％或更多；更优选地，减少30％或更多；更优选地，减少40％或更多；甚至更优选地，减少50％或更多；并且最优选地，减少超过75％。可通过任何可再现的测量手段测量肿瘤的数量。可通过计数肉眼可见的肿瘤或以指定的放大倍数测量肿瘤的数量。优选地，指定的放大倍数为2x、3x、4x、5x、10x或50x。

[0197] 治疗癌症可导致在远离原发肿瘤位置的其他组织或器官中的转移病灶数量减少。优选地，在治疗后，相对于治疗前的数量，转移病灶的数量减少5％或更多；更优选地，转移病灶的数量减少10％或更多；更优选地，减少20％或更多；更优选地，减少30％或更多；更优选地，减少40％或更多；甚至更优选地，减少50％或更多；并且最优选地，减少超过75％。可通过任何可再现的测量手段测量转移病灶的数量。可通过计数肉眼可见的转移病灶或以指
定的放大倍数测量转移病灶的数量。优选地，指定的放大倍数为2x、3x、4x、5x、10x或50x。

[0198] 与未经治疗的对象群体相比，治疗癌症可导致经治疗的对象群体的平均存活时间增加。优选地，平均存活时间增加超过30天；更优选地，超过60天；更优选地，超过90天；并且最优选地，超过120天。可通过任何可再现的手段测量群体的平均存活时间的增加。群体的平均存活时间的增加，可通过例如计算群体在用活性化合物开始治疗后的平均存活长度来
测量。群体的平均存活时间的增加，还可通过例如计算群体在用活性化合物完成第一轮治
疗后的平均存活长度来测量。

[0199] 与接受非本发明化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、类似物或衍生物的药物的单一疗法的群体相比，治疗癌症可导致经治疗的对象群体的平均存活时间增加。优选
地，平均存活时间增加超过30天；更优选地，超过60天；更优选地，超过90天；并且最优选地，超过120天。可通过任何可再现的手段测量群体的平均存活时间的增加。群体的平均存活时间的增加，可通过例如计算群体在用活性化合物开始治疗后的平均存活长度来测量。群体
的平均存活时间的增加还可通过例如计算群体在用活性化合物完成第一轮治疗后的平均
生存长度来测量。

[0200] 治疗癌症可导致肿瘤生长速率降低。优选地，在治疗后，肿瘤生长速率相对于治疗前的数值降低至少5％；更优选地，肿瘤生长速率降低至少10％；更优选地，降低至少20％；更优选地，降低至少30％；更优选地，降低至少40％；更优选地，降低至少50％；甚至更优选地，降低至少50％；并且最优选地，降低至少75％。可通过任何可再现的测量手段测量肿瘤生长速率，肿瘤生长速率可依据每单位时间肿瘤直径的变化来测量。

[0201] 治疗癌症可导致肿瘤再生长(tumor regrowth)降低。优选地，在治疗后，肿瘤再生长小于5％；更优选地，肿瘤再生长小于10％；更优选地，小于20％；更优选地，小于30％；更优选地，小于40％；更优选地，至少50％；甚至更优选地，小于50％；并且最优选地，小于75％。可通过任何可再现的测量手段测量肿瘤再生长。肿瘤再生长通过例如测量在经治疗
的先前肿瘤缩小后的肿瘤直径的增加来测量。肿瘤再生长的降低可通过治疗停止后肿瘤不
再复发来表明。

[0202] 治疗癌症或细胞增殖性病症可导致细胞死亡，并且优选地，细胞死亡导致群体中细胞数量减少至少10％。更优选地，细胞死亡意指减少至少20％；更优选地，减少至少30％；
更优选地，减少至少40％；更优选地，减少至少50％；最优选地，减少至少75％。群体中细胞数量可通过本领域技术人员所知的任何可再现手段来测量。

[0203] 本发明还提供了合成本文所述的式(I)或(Ia)化合物的方法。本发明还提供了依据以下方案以及实施例中所示的那些合成本发明所披露的各种化合物的详细方法。

[0204] 在整个说明书中，当组合物被描述为具有、包括或包含特定组分时，也涵盖组合物基本上由所述组分组成或由所述组分组成。类似地，当方法或工艺被描述为具有、包括或包含特定工艺步骤时，也涵盖工艺也基本上由所述加工步骤组成或由所述加工步骤组成的意思。此外，应当理解，只要本发明保持可实施，步骤的顺序或用于实施某些反应(action)的顺序是无关紧要的。除此之外，可同时进行两个或更多个步骤或反应。

[0205] 本发明的合成工艺可耐受多种官能团，因此可使用各种经取代的起始原料。所述工艺通常在整个工艺结束或接近结束时提供所需的最终化合物，虽然某些情况下可能需要
将化合物进一步转化成其药学上可接受的盐。

[0206] 本发明的化合物可使用市售的起始原料、文献中已知的化合物或容易制备的中间物，通过采用本领域技术人员已知的标准合成方法和程序，或对于本领域技术人员而言依
据本文的教导显而易见的合成方法和程序，以各种方式制备。用于制备有机分子及官能团
转换和操作的标准合成方法和程序可从本领域的相关科学文献或标准教科书中获得。虽然
不限于任何一个或多个来源，经典教材诸如Smith,M.B.,March,J.,March’s Advanced 
th
Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure,5  edition,John Wiley&
Sons:New York,2001；Greene,T.W.,Wuts,P.G.M.,Protective Groups in Organic 
rd
Synthesis,3  edition,John Wiley&Sons:New York,1999；R.Larock,Comprehensive 
Organic Transformations,VCH Publishers(1989)；L.Fieser and M.Fieser,Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis,John Wiley and Sons(1994)；和
L.Paquette,ed.,Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis,John Wiley and 
Sons(1995)，通过引用并入本文，是本领域技术人员已知有用并且认可的有机合成参考教
科书。以下合成方法的描述出于说明目的，而非用于限制制备本发明化合物的一般方法。

[0207] 本发明化合物可使用本领域技术人员所熟知的各种方法方便地制备。本文所述的式(I)或(Ia)化合物可依据以下方案1‑7中所示的方法，由市售起始原料或可使用文献方法制备的起始原料制备。除非另有说明，否则方案1‑7中的变量(例如，R和n等)如本文所述的任何式中所定义。

[0208] 本领域的技术人员应当注意，在本文所述的反应顺序和合成方案中，某些步骤的顺序可被改变，诸如保护基的引入和脱除。

[0209] 本领域的技术人员应当理解，某些基团可能需要通过使用保护基以免受反应条件影响。保护基也可用于区分分子中相似的官能团。保护基的清单及如何引入和脱除这些基
rd
团可参见Greene,T.W.,Wuts,P.G.M.,Protective Groups in Organic Synthesis,3  
edition,John Wiley&Sons:New York,1999。

[0210] 优选的保护基包括但不限于：

[0211] 对于羟基部分：TBDPS、苄基、THP。

[0212] 在本文所述的反应方案中，可产生多种立体异构体。当没有指明具体立体异构体时，应当理解为是指可由反应产生的所有可能的立体异构体。本领域普通技术人员应当理
解，可优化反应以优先得到一种异构体，或者可设计新方案以产生单一异构体。如果产生混合物，则可使用诸如制备型薄层色谱、制备型HPLC、制备型手性HPLC或制备型SFC技术来分离异构体。

[0213] 以下的方案1说明了化合物1‑1、1‑2、1‑3、1‑4、1‑5、2‑1、2‑2、2‑3、2‑4、3‑1、3‑2、3‑3和3‑4的制备。

[0214] 方案1

[0215]

[0216] 如上述方案1所示，在例如0℃向CH3O‑[CH2CH2O]n‑H(n＝3、6、9、12或16)于有机溶剂中的溶液中添加不同的反应物，例如，(1)当有机溶剂为二氯甲烷(DCM)或四氢呋喃(THF)/水时，添加甲苯磺酰氯(TsCl)与氢氧化钾，(2)当有机溶剂为吡啶(Py)/无水DCM时，添加氯甲酸4‑硝基苯酯，(3)当有机溶剂为溴乙酸/THF时，添加氢化钠(NaH)。将反应混合物在例如室温搅拌。经分离和纯化后，获得化合物1‑1、1‑2、1‑3、1‑4、1‑5、2‑1、2‑2、2‑3、2‑4、
3‑1、3‑2、3‑3或3‑4。

[0217] 以下的方案2说明了数种NDT或NDP缀合物的制备。

[0218] 方案2

[0219]

[0220] 如上述方案2所示，(1)向NDP或NDT和Ts‑O‑[CH2CH2O]n‑CH3(即，化合物1‑1(n＝3)、1‑2(n＝6)、1‑3(n＝12)或1‑4(n＝16))于无水丙酮或乙腈(CH3CN)中的经搅拌溶液中，在例如室温在氩气下，添加碳酸钾(K2CO3)，(2)向NDP或NDT和[CH2CH2O]n‑CH3碳酸4‑硝基苯酯(即，化合物2‑1(n＝3)、2‑2(n＝6)、2‑3(n＝12)或2‑4(n＝16))于例如THF的经搅拌溶液中，在例如室温在氩气下，添加二异丙基乙胺(DIPEA)，或(3)向NDP或NDT和化合物3‑1(n＝3)、
3‑2(n＝6)、3‑3(n＝12)或3‑4(n＝16)于例如DCM的溶液中，在例如0℃，添加1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)与4‑二甲氨基吡啶(DMAP)。经从反应混合物分离和纯化
后，获得化合物4‑1a、4‑2a、4‑3a、4‑4a、4‑1b、4‑2b、4‑3b、4‑4b、5‑1a、5‑2a、5‑3a、5‑4a、5‑
1b、5‑2b、5‑3b、5‑4b、6‑1a、6‑2a、6‑3a、6‑4a、6‑1b、6‑2b、6‑3b或6‑4b。

[0221] 方案3显示了Ts‑O‑[CH2CH(OCH3)CH2O]m‑CH3的制备。

[0222] 方案3

[0223]

[0224] 如上述方案3所示，将化合物7在碱性条件下甲基化，得到化合物8，在酸性条件下完成全面脱保护(Global deprotection)，得到化合物9。对末端醇进行甲硅烷基保护，接着在标准实验方案下将化合物10甲基化，得到化合物11。使用TBAF进行全面脱保护，得到化合物12，接着进行单THP保护，得到化合物13。将化合物13甲基化，随后在酸性条件下脱保护，得到化合物15。将化合物15甲苯磺酰化，得到Ts‑O‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物16)。

[0225] 以下的方案4说明了Ts‑O‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物19‑1(n＝3)和化合物19‑2(n＝9))的制备。

[0226] 方案4

[0227]

[0228] 如上述方案4所示，将化合物15在碱性条件下偶联，得到化合物17。在酸性条件下完成脱保护，得到化合物18‑1。将化合物18‑1甲苯磺酰化，得到化合物19‑1。在碱性条件下偶联，得到化合物20。使用H2与Pd/C进行脱保护，得到化合物18‑2。将化合物18‑2甲苯磺酰化，得到化合物19‑2。

[0229] 以下的方案5显示了CH3‑O‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑Ts(化合物23‑1(n＝3)和23‑2(n＝9))的一般制备。

[0230] 方案5

[0231]

[0232] 如上述方案5所示，将化合物13在碱性条件偶联，得到化合物21‑1(n＝3)或21‑2(n＝9)。在酸性条件下完成脱保护，得到化合物22‑1(n＝3)或22‑2(n＝9)。将化合物22‑1(n＝3)或22‑2(n＝9)分别甲苯磺酰化，得到化合物23‑1(n＝3)或23‑2(n＝9)。

[0233] 以下的方案6说明了NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDP‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDT‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3或NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3的制备。

[0234] 方案6

[0235]

[0236] 如上述方案6所示，在碱性条件下偶联NDP或NDT，得到NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDP‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDT‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3或NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3。

[0237] 以下的方案7说明了NDP‑[CH2CH(OH)CH2O]3‑H和NDT‑[CH2CH(OH)CH2O]3‑H的制备。

[0238] 方案7

[0239]

[0240] 如上述方案7所示，苄基保护的三甘油被用THP单保护，得到化合物28。化合物28可进一步被保护，得到化合物29。THP可在标准实验方案下除去，得到化合物30，其随后可被甲苯磺酰化，得到化合物31。使用H2和Pd/C可完成全面脱保护，得到化合物32。在碱性条件下将化合物32与NDP或NDT偶联，得到NDP‑[CH2CH(OH)CH2O]3‑H或NDT‑[CH2CH(OH)CH2O]3‑H。

[0241] 现在正借助于书面说明描述本发明，本领域技术人员将认识到，本发明可按各种实施方案实施，并且以上描述和以下实施例是出于说明的目的而非限制以下权利要求。

[0242] 实施例

[0243] 通过以下实施例进一步说明本发明，这些实施例不应被解释为将本发明的范围或精神限于本文所述的具体方法。应当理解，提供实施例是为了说明某些实施方案，并且不意图限制本发明的范围。还应当理解，在不脱离本发明的精神和/或所附权利要求书的范围的情况下，可使用本领域技术人员可借助的各种其他实施方案、修改及其等同方案。

[0244] 实施例1：制备化合物1‑1、1‑2、1‑3、1‑4、1‑5、2‑1、2‑2、2‑3、2‑4、3‑1、3‑2、3‑3和3‑4

[0245] 依据WO2002098949A1制备mPEG，例如H‑[CH2CH2O]n‑CH3(n＝3、6、9或12)，H‑[CH2CH2O]16‑CH3购自Alfa Aesar。TFP、PCP、NDP和NDT依据公开的方法(美国专利号2,902,
484)制备。上面的方案1显示了化合物1‑1、1‑2、1‑3、1‑4、1‑5、2‑1、2‑2、2‑3、2‑4、3‑1、3‑2、
3‑3和3‑4的制备。

[0246] 实施例2：制备Ts‑O‑[CH2CH2O]n‑CH3(n＝3、6、12、16或9；化合物1‑1、1‑2、1‑3、1‑4或1‑5)的一般方法

[0247] 在0℃，向H‑[CH2CH2O]n‑CH3(n＝3、6、12、16或9，2.00mmol)于二氯甲烷(DCM，6mL)或四氢呋喃(THF)/水(4.6mL/1.4mL)中的溶液中添加甲苯磺酰氯(TsCl，2.10mmol)和氢氧化钾(KOH，8.02mmol)。将反应混合物在室温搅拌22小时，然后用DCM(30mL)和H2O(20mL)稀释。将水层分离并用DCM(30mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并减压蒸发。在硅胶柱上纯化残余物，得到Ts‑O‑[CH2CH2O]n‑CH3(n＝3、6、12、16或9，化合物1‑
1、1‑2、1‑3、1‑4或1‑5)。

[0248] Ts‑O‑[CH2CH2O]3‑CH3(化合物1‑1)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.43(s,3H)，3.35(s,3H)，3.50‑3.53(m,2H)，3.57‑3.61(m,8H)，3.67(t,J＝4.8Hz,2H)，4.14(t,J＝4.8Hz,2H)，
7.31(d,J＝8.0Hz,2H)，7.78(d,J＝8.0Hz,2H)。

[0249] Ts‑O‑[CH2CH2O]6‑CH3(化合物1‑2)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.42(s,3H)，3.35(s,3H)，3.51‑3.70(m,22H)，4.13(d,J＝4.8Hz,2H)，7.31(d,J＝8.0Hz,2H)，7.77(d,J＝8.0Hz,
2H)。

[0250] Ts‑O‑[CH2CH2O]12‑CH3(化合物1‑3)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.41(s,3H)，3.34(s,3H)，3.50‑3.80(m,46H)，4.12(t,J＝4.8Hz,2H)，7.31(d,J＝8.0Hz,2H)，7.76(d,J＝8.0Hz,
2H)。

[0251] Ts‑O‑[CH2CH2O]16‑CH3(化合物1‑4)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.42(s,3H)，3.35(s,3H)，3.50‑3.80(m,62H)，4.13(t,J＝4.8Hz,2H)，7.32(d,J＝8.0Hz,2H)，7.77(d,J＝8.0Hz,
2H)。

[0252] Ts‑O‑[CH2CH2O]9‑CH3(化合物1‑5)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.42(s,3H)，3.35(s,3H)，3.51‑3.67(m,34H)，4.13(t,J＝4.8Hz,2H)，7.31(d,J＝8.0Hz,2H)，7.77(d,J＝8.0Hz,
2H)。

[0253] 实施例3：制备[CH2CH2O]n‑CH3碳酸4‑硝基苯酯(n＝3、6、12或16；化合物2‑1、2‑2、2‑3或2‑4)的一般操作

[0254] 在0℃和氩气氛下，向CH3O‑[CH2CH2O]n‑H(n＝3、6、12或16，2.00mmol)和吡啶(Py，4.0mmol)于无水DCM(5mL)中的经搅拌溶液中一次性添加氯甲酸4‑硝基苯酯(2.80mmol)。将反应混合物在室温搅拌5小时，将混合物用DCM(40mL)稀释，用1N HCl(20mL)和盐水洗涤，用MgSO4干燥并过滤，将溶剂减压蒸发。在硅胶柱上纯化残余物，得到[CH2CH2O]n‑CH3碳酸4‑硝基苯酯(n＝3、6、12或16；化合物2‑1、2‑2、2‑3或2‑4)。

[0255] [CH2CH2O]3‑CH3碳酸4‑硝基苯酯(化合物2‑1)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.35(s,3H)，3.53‑3.55(m,2H)，3.63‑3.70(m,6H)，3.78‑3.81(m,2H)，4.41‑4.43(m,2H)，7.37(d,J＝9.2Hz,2H)，8.26(d,J＝9.2Hz,2H)。

[0256] [CH2CH2O]6‑CH3碳酸4‑硝基苯酯(化合物2‑2)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.35(s,3H)，3.51‑3.53(m,2H)，3.60‑3.69(m,18H)，3.78‑3.80(m,2H)，4.41‑4.43(m,2H)，7.37(d,J＝9.2Hz,2H)，8.26(d,J＝9.2Hz,2H)。

[0257] [CH2CH2O]12‑CH3碳酸4‑硝基苯酯(化合物2‑3)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.35(s,3H)，3.52‑3.80(m,46H)，4.41‑4.43(m,2H)，7.38(d,J＝7.2Hz,2H)，8.27(d,J＝7.2Hz,2H)。

[0258] [CH2CH2O]16‑CH3碳酸4‑硝基苯酯(化合物2‑4)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.35(s,3H)，3.52‑3.80(m,62H)，4.41‑4.43(m,2H)，7.37(d,J＝8.8Hz,2H)，8.27(d,J＝8.8Hz,2H)。

[0259] 实施例4：制备乙酸‑CH2O‑[CH2CH2O]n‑CH3(n＝3、6、12或16；化合物3‑1、3‑2、3‑3或3‑4)的一般方法

[0260] 向CH3O‑[CH2CH2O]n‑H(n＝3、6、12或16；12.18mmol)和溴乙酸(13.4mmol)于THF(24mL)中的溶液中添加氢化钠(NaH，57‑63％于油中，48.72mmol)。将反应混合物在室温搅拌5小时。通过添加1N HCl(50mL)淬灭过量的氢化钠。将有机溶剂减压蒸发。将水溶液用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥并减压浓缩，得到乙酸‑CH2O‑[CH2CH2O]n‑CH3(n＝3、6、12或16；化合物3‑1、3‑2、3‑3或3‑4)。

[0261] 乙酸‑CH2O‑[CH2CH2O]3‑CH3(化合物3‑1)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.37(s,3H)，3.55‑3.73(m,12H)，4.12(s,2H)。

[0262] 乙酸‑CH2O‑[CH2CH2O]6‑CH3(化合物3‑2)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.36(s,3H)，3.52‑3.77(m,24H)，4.12(s,2H)。

[0263] 乙酸‑CH2O‑[CH2CH2O]12‑CH3(化合物3‑3)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.26(s,3H)，3.43‑3.62(m,48H)，4.03(s,2H)。

[0264] 乙酸‑CH2O‑[CH2CH2O]16‑CH3(化合物3‑4)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.35(s,3H)，3.45‑3.79(m,64H)，4.11(s,2H)。

[0265] 实施例5：制备NDP或NDT缀合物

[0266] 以上的方案2显示NDP或NDT缀合物的制备。

[0267] 实施例6:

[0268] 在室温和氩气下，向NDP或NDT(3.99mmol)与Ts‑O‑[CH2CH2O]n‑CH3(4.30mmol，化合物1‑1(n＝3)、1‑2(n＝6)、1‑3(n＝12)或1‑4(n＝16))于无水丙酮或乙腈(CH3CN)(50mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(K2CO3，20mmol)。回流20小时后，将混合物用丙酮稀释，并且通过过滤除去沉淀。将溶剂减压蒸发。在硅胶柱上纯化残余物，得到化合物4‑1a、4‑2a、4‑3a、4‑4a、4‑1b、4‑2b、4‑3b或4‑4b。

[0269] 化合物4‑1a：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.45(t,J＝6.8Hz,8H)，2.57(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.51‑3.68(m,12H)，3.92(t,J＝6.8Hz,2H)，6.82‑
7.14(m,7H)。

[0270] 化合物4‑2a：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.45(t,J＝6.8Hz,8H)，2.57(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.51‑3.68(m,24H)，3.92(t,J＝6.8Hz,2H)，6.82‑
7.14(m,7H)。

[0271] 化合物4‑3a：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.45(t,J＝6.8Hz,8H)，2.57(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.51‑3.68(m,48H)，3.92(t,J＝6.8Hz,2H)，6.82‑
7.14(m,7H)。

[0272] 化合物4‑4a：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.44(t,J＝6.8Hz,8H)，2.55(t,J＝6.8Hz,2H),3.35(s,3H)，3.51‑3.70(m,64H)，3.86(t,J＝6.8Hz,2H)，6.82‑
7.12(m,7H)。

[0273] 化合物4‑1b：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.45(t,J＝6.8Hz,8H)，2.57(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.51‑3.68(m,12H)，3.92(t,J＝6.8Hz,2H)，6.88‑
7.18(m,7H)。

[0274] 化合物4‑2b：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.45(t,J＝6.8Hz,8H)，2.57(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.51‑3.68(m,24H)，3.92(t,J＝6.8Hz,2H)，6.88‑
7.18(m,7H)。

[0275] 化合物4‑3b：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.45(t,J＝6.8Hz,8H)，2.57(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.51‑3.68(m,48H)，3.92(t,J＝6.8Hz,2H)，6.88‑
7.18(m,7H)。

[0276] 化合物4‑4b：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.45(t,J＝6.8Hz,8H)，2.54(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.44‑3.80(m,64H)，3.92(t,J＝6.8Hz,2H)，6.88‑
7.17(m,7H)。

[0277] 实施例7:

[0278] 在室温和氩气下，向NDP或NDT(3.0mmol)和[CH2CH2O]n‑CH3碳酸4‑硝基苯酯(2.5mmol，化合物2‑1(n＝3)、2‑2(n＝6)、2‑3(n＝12)或2‑4(n＝16))于THF(10mL)中的经搅拌溶液中添加二异丙基乙胺(DIEPA)(4.6mmol)，并且将反应混合物回流20小时。将溶剂减
压蒸发，在硅胶柱上纯化残余物，得到化合物5‑1a、5‑2a、5‑3a、5‑4a、5‑1b、5‑2b、5‑3b或5‑
4b。

[0279] NDP‑CO‑O‑[CH2CH2O]3‑CH3(化合物5‑1a)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.92(t,J＝6.8Hz,2H)，2.30‑2.36(m,4H)，2.45(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.39‑3.42(m,4H)，
3.51‑3.68(m,10H)，3.91(t,J＝6.8Hz,2H)，4.19‑4.21(m,2H)，6.83‑7.15(m,7H)。

[0280] NDP‑CO‑O‑[CH2CH2O]6‑CH3(化合物5‑2a)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.92(t,J＝6.8Hz,2H)，2.30‑2.36(m,4H)，2.45(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.39‑3.42(m,4H)，
3.51‑3.68(m,22H)，3.91(t,J＝6.8Hz,2H)，4.19‑4.21(m,2H)，6.83‑7.15(m,7H)。

[0281] NDP‑CO‑O‑[CH2CH2O]12‑CH3(化合物5‑3a)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.92(t,J＝6.8Hz,2H)，2.30‑2.36(m,4H)，2.45(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.39‑3.42(m,4H)，
3.51‑3.68(m,46H)，3.91(t,J＝6.8Hz,2H)，4.19‑4.21(m,2H)，6.83‑7.15(m,7H)。

[0282] NDP‑CO‑O‑[CH2CH2O]16‑CH3(化合物5‑4a)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.92(t,J＝6.8Hz,2H)，2.30‑2.36(m,4H)，2.45(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.39‑3.42(m,4H)，
3.51‑3.68(m,62H)，3.91(t,J＝6.8Hz,2H)，4.19‑4.21(m,2H)，6.83‑7.15(m,7H)。

[0283] NDT‑CO‑O‑[CH2CH2O]3‑CH3(化合物5‑1b)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.30‑2.36(m,4H)，2.46(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.39‑3.42(m,4H)，
3.51‑3.68(m,10H)，3.95(t,J＝6.8Hz,2H)，4.19‑4.21(m,2H)，6.88‑7.18(m,7H)。

[0284] NDT‑CO‑O‑[CH2CH2O]6‑CH3(化合物5‑2b)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.90(t,J＝6.8Hz,2H)，2.30‑2.36(m,4H)，2.45(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.39‑3.42(m,4H)，
3.51‑3.68(m,22H)，3.95(t,J＝6.8Hz,2H)，4.19‑4.21(m,2H)，6.88‑7.18(m,7H)。

[0285] NDT‑CO‑O‑[CH2CH2O]12‑CH3(化合物5‑3b)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.90(t,J＝6.8Hz,2H)，2.30‑2.36(m,4H)，2.45(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.39‑3.42(m,4H)，
3.51‑3.68(m,46H)，3.95(t,J＝6.8Hz,2H)，4.19‑4.21(m,2H)，6.88‑7.18(m,7H)。

[0286] NDT‑CO‑O‑[CH2CH2O]16‑CH3(化合物5‑4b)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.90(t,J＝6.8Hz,2H)，2.30‑2.36(m,4H)，2.45(t,J＝6.8Hz,2H)，3.35(s,3H)，3.37‑3.40(m,4H)，
3.51‑3.68(m,62H)，3.96(t,J＝6.8Hz,2H)，4.17‑4.20(m,2H)，6.88‑7.18(m,7H)。

[0287] 实施例8:

[0288] 在0℃，向NDP或NDT(2.77mmol)与乙酸‑CH2O‑[CH2CH2O]n‑CH3(3.66mmol，化合物3‑1(n＝3)、3‑2(n＝6)、3‑3(n＝12)或3‑4(n＝16))于DCM(14mL)中的溶液中添加1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC，4.1mmol)和4‑二甲氨基吡啶(DMAP，0.262mmol)。将所得溶液在室温搅拌21小时，倒入水中并用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤，将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，得到化合物6‑1a、6‑2a、6‑3a、6‑4a、6‑1b、6‑2b、6‑3b或6‑4b。

[0289] NDP‑CO‑[CH2CH2O]3‑CH3(化合物6‑1a)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.35‑2.47(m,6H)，3.35‑3.39(m,5H)，3.51‑3.63(m,14H)，3.91(t,J＝6.8Hz,2H)，4.15(s,2H)，6.88‑7.19(m,7H)。

[0290] NDP‑CO‑[CH2CH2O]6‑CH3(化合物6‑2a)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.90(t,J＝6.8Hz,2H)，2.36‑2.46(m,6H)，3.35‑3.41(m,5H)，3.52‑3.64(m,26H)，3.91(t,J＝6.8Hz,2H)，4.15(s,2H)，6.83‑7.14(m,7H)。

[0291] NDP‑CO‑[CH2CH2O]12‑CH3(化合物6‑3a)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.90(t,J＝6.8Hz,2H)，2.34‑2.46(m,6H)，3.35‑3.41(m,5H)，3.51‑3.63(m,50H)，3.91(t,J＝6.8Hz,
2H)，4.15(s,2H)，6.83‑7.13(m,7H)。

[0292] NDP‑CO‑[CH2CH2O]16‑CH3(化合物6‑4a)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.90(t,J＝6.8Hz,2H)，2.34‑2.47(m,6H)，3.35‑3.38(m,5H)，3.50‑3.62(m,66H)，3.91(t,J＝6.8Hz,
2H)，4.15(s,2H)，6.83‑7.13(m,7H)。

[0293] NDT‑CO‑[CH2CH2O]3‑CH3(化合物6‑1b)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.35‑2.47(m,6H)，3.35‑3.39(m,5H)，3.51‑3.63(m,14H)，3.91(t,J＝6.8Hz,2H)，4.15(s,2H)，6.88‑7.19(m,7H)。

[0294] NDT‑CO‑[CH2CH2O]6‑CH3(化合物6‑2b)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.35‑2.47(m,6H)，3.35‑3.39(m,5H)，3.50‑3.64(m,26H)，3.91(t,J＝6.8Hz,2H)，4.15(s,2H)，6.88‑7.18(m,7H)。

[0295] NDT‑CO‑[CH2CH2O]12‑CH3(化合物6‑3b)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.90(t,J＝6.8Hz,2H)，2.34‑2.47(m,6H)，3.35‑3.39(m,5H)，3.51‑3.63(m,50H)，3.91(t,J＝6.8Hz,
2H)，4.15(s,2H)，6.88‑7.19(m,7H)。

[0296] NDT‑CO‑[CH2CH2O]16‑CH3(化合物6‑4b)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.90(t,J＝6.8Hz,2H)，2.34‑2.47(m,6H)，3.35‑3.38(m,5H)，3.50‑3.62(m,66H)，3.91(t,J＝6.8Hz,
2H)，4.15(s,2H)，6.88‑7.18(m,7H)。

[0297] 实施例9：制备Ts‑O‑[CH2CH(OCH3)CH2O]m‑CH3的方法

[0298] 以上的方案3显示Ts‑O‑[CH2CH(OCH3)CH2O]m‑CH3的制备。将化合物7在碱性条件下甲基化，得到化合物8。在酸性条件下完成全面脱保护，得到化合物9。对末端醇进行甲硅烷基保护，接着在标准实验方案下将化合物10甲基化，得到化合物11。使用TBAF进行全面脱保护，得到化合物12，接着进行单THP保护，得到化合物13。将化合物13甲基化，随后在酸性条件下脱保护，得到化合物15。将化合物15甲苯磺酰化，得到Ts‑O‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物16)。

[0299] 实施例10：制备化合物7(1,2,10,11‑双(亚异丙基二氧基)‑4,8‑二氧杂十一‑6‑醇)

[0300] 依据公开的方法(Nemoto et al.,Chem.Lett.,2010,39,856‑857)，由三甘油(HO‑1
[CH2CH(OH)CH2O]3‑H)制备化合物7。H NMR(400MHz,[D6]丙酮)：δ1.28(s,6H,CH3)，1.33(s,
6H,CH3)，2.83(s,1H,OH)，3.50(ddd,J＝31.8,10.1,5.5Hz,ddd,J＝17.4,11.9,6.3Hz,8H)，
3.75(td,J＝4.9,1.5Hz,1H)，3.69(dd,J＝8.2,6.3Hz,2H)，4.00(dd,J＝8.2,6.4Hz,2H)，
3.84(m,1H)，4.19(q,J＝11.9,6.3Hz,2H)。

[0301] 实施例11：制备化合物8

[0302] 在0℃，向化合物7(10g，31.21mmol)于THF(104mL)中的溶液中添加NaH(2.25mg，56.25mmol)。将混合物在室温搅拌30分钟后，在0℃缓慢添加碘甲烷(CH3I，2.6mL，
41.76mmol)。将所得溶液在室温搅拌18小时，倒入水中并用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用EtOAc/己烷
1
(v/v＝1:2和1:1)洗脱，得到化合物8(10.2g，产率98％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.33(s,
6H)，1.39(s,6H)，3.73‑3.33(m,14H)，4.04‑4.01(m,2H)，4.26‑4.22(m,2H)。

[0303] 实施例12：制备化合物9

[0304] 在室温，向化合物8(10.2g，30.5mmol)于MeOH(60mL)中的溶液中添加DOWEX H+树脂(4.8g)。将所得溶液回流搅拌17小时并过滤。将滤液减压浓缩得到化合物9(7.66g，产率
1
99％)。H NMR(400MHz,CD3OD)：δ3.31‑3.75(m,18H)。

[0305] 实施例13：制备化合物10

[0306] 在室温，向化合物9(7.66g，30.12mmol)于DCM(280mL)中的溶液中添加三乙胺(Et3N，17.6mL，126.27mmol)与4‑二甲氨基吡啶(DMAP，1.84g，15.06mmol)，然后在0℃添加叔丁基二苯基氯硅烷(TBDPSCl，16.66mL，64.07mmol)。将所得溶液在室温搅拌18小时，倒入水中并用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩。
在硅胶柱上纯化残余物，用EtOAc/己烷(v/v＝1:1、1:2和1:3)洗脱，得到化合物10(16.9g，
1
产率77％)。H NMR(400MHz,CDCl3)的化学位移：δ1.01(s,18H)，2.72(s,1H)，3.88‑3.30(m,
19H)，7.42‑7.34(m,12H)，7.64‑7.62(m,8H)。

[0307] 实施例14：制备化合物11

[0308] 在0℃，向化合物10(16.9g，23.11mmol)于THF(80mL)中的溶液中添加NaH(3g，75mmol)。在将混合物在室温搅拌30分钟后，在0℃缓慢添加碘甲烷(3.6mL，57.83mmol)。将所得溶液在室温搅拌20小时，倒入水中并用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用EtOAc/己烷(v/v＝2:7)洗脱，
1
得到化合物11(15.3g，产率87％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.01(s,18H)，3.27‑3.75(m,
24H)，7.34‑7.40(m,12H)，7.64‑7.66(m,8H)。

[0309] 实施例15：制备化合物12

[0310] 在0℃，向化合物11(15.3g，20.15mmol)于THF(100mL)中的溶液中缓慢添加1.0M于THF中的四丁基氟化铵(TBAF)溶液(60mL，60.0mmol)。将溶液在室温搅拌7小时。将所得溶液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用EtOAc/己烷(v/v＝1:1)、EtOAc/丙酮(v/v＝1:4)和
1
DCM/MeOH(v/v＝9:1)洗脱，得到化合物12(5.5g，产率97％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ3.28‑
3.73(m,26H)。

[0311] 实施例16：制备化合物13

[0312] 在0℃和在氩气氛下，向化合物12(5.03g，17.82mmol)于DCM(37mL)中的经搅拌溶液中缓慢添加二氢吡喃(DHP,1.3mL,16.88mmol)与对甲苯磺酸(pTSA,598mg,3.14mmol)，将
溶液在室温搅拌22小时，倒入水中并用NaHCO3水溶液和DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩。在洗脱硅胶柱上纯化残余物，用丙酮/己烷(v/
1
v＝1:1.5和1:1)及MeOH:DCM(v/v＝1:9)洗脱，得到化合物13(2.98g，产率57％)。H NMR
(400MHz,CDCl3)：δ1.59‑1.80(m,6H)，2.35‑2.36(m,1H)，3.33‑3.82(m,26H)，4.58(m,1H)。

[0313] 实施例17：制备化合物14

[0314] 在0℃，向化合物13(3.2g，8.73mmol)于THF(44mL)中的溶液中添加NaH(700mg，17.5mmol)。在将混合物在室温搅拌30分钟后，在0℃缓慢添加碘甲烷(0.82mL，13.17mmol)。
将溶液在室温搅拌18小时，倒入水中并用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用EtOAc/己烷(v/v＝1:1)与丙酮/
1
己烷(v/v＝1:2)洗脱，得到化合物14(3.27g，产率98％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.51‑
1.81(m,6H)，3.33‑3.82(m,29H)，4.58(m,1H)。

[0315] 实施例18：制备化合物15

[0316] 在0℃，向化合物14(3.27g，8.59mmol)于MeOH(40mL)中的溶液中添加pTSA(165mg，0.87mmol)。将所得溶液在室温搅拌20小时，倒入水中并用NaHCO3水溶液和DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩，得到化合物15，其为无色油
1
状物(2.39g，产率94％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.31‑2.32(m,1H)，3.33‑3.82(m,27H)。

[0317] 实施例19：制备化合物16

[0318] 在0℃，向化合物15(529mg，1.78mmol)于THF(6mL)与水(2mL)中的溶液中添加KOH(410mg,6.21mmol)和TsCl(510mg,2.68mmol)。将溶液在室温搅拌17小时，倒入水中并用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩，在用EtOAc/己烷(v/v＝1.5:1与4:1)洗脱的硅胶柱上纯化残余物，得到化合物16(Ts‑O‑[CH2CH(OCH3)
1
CH2O]3‑CH3，780mg，产率97％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.43(s,3H)，3.30‑3.61(m,25H)，
4.00‑4.04(m,1H)，4.12‑4.15(m,1H)，7.32(d,2H)，7.77(d,2H)。

[0319] 实施例20：制备Ts‑O‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物19‑1(n＝3)和化合物19‑2(n＝9))的方法

[0320] 以上的方案4显示Ts‑O‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物19‑1(n＝3)和化合物19‑2(n＝9))的制备。将化合物15在碱性条件下偶联，得到化合物17。在酸性条件下完成脱保护，得到化合物18‑1。将化合物18‑1甲苯磺酰化，得到化合物19‑1。在碱性条件下偶联得到化合物20。使用H2和Pd/C进行脱保护，得到化合物18‑2。将化合物18‑2甲苯磺酰化，得到化合物19‑2。

[0321] 实施例21：制备化合物17

[0322] 在0℃，向化合物15(1.8g，6.07mmol)于THF(20mL)中的溶液中添加NaH(465mg,11.63mmol)。在将混合物在室温搅拌30分钟后，在0℃缓慢添加4‑甲苯磺酸2‑(2‑(2‑(四氢‑
2H‑吡喃‑2‑基氧基)乙氧基)乙氧基)乙基酯(Ts‑O‑[CH2CH2O]3‑THP，3.58mL，9.22mmol)于THF(10mL)中的溶液。将溶液在室温搅拌20小时，倒入水中并用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化粗产物，用EtOAc/己烷
1
(v/v＝3:1)和丙酮/己烷(v/v＝1:2和1:1)洗脱，得到化合物17(2.78g，产率89％)。H NMR
(400MHz,CDCl3)：δ1.55‑1.82(m,6H)，3.33‑3.87(m,41H)，4.60‑4.61(m,1H)。

[0323] 实施例22：制备化合物18‑1

[0324] 在0℃，向化合物17(2.78g，5.42mmol)于MeOH(30mL)中的溶液中添加pTSA(110mg，0.578mmol)。将所得溶液在室温搅拌20小时，倒入水中并用NaHCO3水溶液和DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩，得到化合物18‑1(2.24g，
1
产率97％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ3.33‑3.71(m,37H)，2.00(m,1H)。

[0325] 实施例23：制备化合物19‑1

[0326] 在0℃向化合物18‑1(2.24g，5.23mmol)于THF(22mL)和水(7mL)中的溶液中，添加KOH(1.38g,20.9mmol)和TsCl(1.5g,7.87mmol)。将溶液在室温搅拌18小时，倒入水中并用
DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩，在硅胶柱上纯化所得残余物，用EtOAc/己烷(v/v＝3:1和4:1)及丙酮/DCM(v/v＝1:2)洗脱，得到化合
1
物19‑1(2.95g，产率97％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.42(s,3H)，3.33‑3.67(m,10H)，3.33‑
3.67(m,37H)，4.13(t,J＝4.8Hz,2H),7.31(d,2H)，7.77(d,2H)。

[0327] 实施例24：制备化合物20

[0328] 在0℃，向1‑苯基‑2,5,8,11,14,17‑六氧杂十九烷‑19‑醇(Bn‑O‑[CH2CH2O]6‑H，913mg，2.45mmol)于THF(8mL)中的溶液中添加NaH(202mg,5.05mmol)。将混合物在室温搅拌
30分钟。在0℃，向混合物中缓慢添加化合物19‑1(1.74g，2.99mmol)THF(5mL)中的溶液。将溶液在35℃搅拌20小时，倒入水中并用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩，在硅胶柱上纯化残余物，用丙酮/DCM(v/v＝1:2)和MeOH/DCM
1
(v/v＝1:15、1:10和1:8)洗脱，得到化合物20(1.88g，产率98％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ
3.33‑3.65(m,63H)，4.54(s,2H)，7.26‑7.32(m,5H)。

[0329] 实施例25：制备化合物18‑2

[0330] 在大气压和室温以及氢气下，用10％钯炭(10重量％，200mg)处理化合物20(1.88g，0.085mmol)于MeOH(1.8mL)中的溶液18小时。通过硅藻土(Celite)过滤除去催化
1
剂。将滤液减压浓缩，得到化合物18‑2(1.64g，产率99％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ3.33‑
3.71(m,63H)。

[0331] 实施例26：制备化合物19‑2

[0332] 在0℃，向化合物18‑2(1.64g，2.37mmol)于THF(9mL)和水(3mL)中的溶液中添加KOH(619g,9.38mmol)和TsCl(727mg,3.81mmol)。将所得溶液在室温搅拌19小时，倒入水中
并用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩，在硅胶柱上纯化残余物，用EtOAc/丙酮(v/v＝3:1)和MeOH/DCM(v/v＝1:15、1:10和1:8)洗脱，得
1
到化合物19‑2(1.85g，产率93％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.42(s,3H)，3.33‑3.67(m,
61H)，4.13(t,J＝4.4Hz,2H)，7.31(d,2H)，7.77(d,2H)。

[0333] 实施例27：制备CH3‑O‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑Ts(化合物23‑1(n＝3)和23‑2(n＝9))的一般方法

[0334] 上述方案5显示CH3‑O‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑Ts(化合物23‑1(n＝3)和23‑2(n＝9))的一般制备。将化合物13在碱性条件下偶联，得到化合物21‑1(n＝3)或21‑2(n＝9)。在酸性条件下完成脱保护，得到化合物22‑1(n＝3)或22‑2(n＝9)。将化合物22‑1(n＝
3)或22‑2(n＝9)分别甲苯磺酰化，得到化合物23‑1(n＝3)或23‑2(n＝9)。

[0335] 实施例28：制备化合物21‑1和21‑2的一般方法

[0336] 在0℃，向化合物13(1.45g，3.96mmol)于THF(15mL)中的溶液中添加NaH(320mg,8.0mmol)。将混合物在室温搅拌30分钟后，在0℃缓慢添加化合物1‑1(n＝3)或1‑5(n＝9)(5.97mmol)于THF(5mL)中的溶液。将溶液在室温搅拌20小时，倒入水中并用DMF萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，得到化合物21‑1或21‑2。

[0337] 化合物21‑1：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.55‑1.68(m,6H)，3.33‑3.81(m,41H)，4.58(m,1H)。

[0338] 化合物21‑2：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.54‑1.68(m,6H)，3.33‑3.80(m,65H)，4.58(m,1H)。

[0339] 实施例29：制备化合物22‑1和22‑2的一般方法

[0340] 在0℃，向化合物21‑1或21‑2(3.76mmol)于MeOH(19mL)中的溶液中添加pTSA(90mg，0.47mmol)。将所得溶液在室温搅拌20小时，倒入水中并用NaHCO3水溶液和DCM萃取。
将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩，得到化合物22‑1或
22‑2。

[0341] 化合物22‑1：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.45(m,1H)，3.29‑3.72(m,39H)。

[0342] 化合物22‑2：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.46(m,1H)，3.33‑3.70(m,63H)。

[0343] 实施例30：制备化合物23‑1和23‑2的一般操作

[0344] 在0℃，向化合物22‑1或22‑2(3.73mmol)于THF(15mL)和水(5mL)中的溶液中添加KOH(1.0g,15.22mmol)和TsCl(1.09g,5.72mmol)。将所得溶液在室温搅拌18小时，倒入水中并用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并且过滤。将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，得到化合物23‑1或23‑2。

[0345] 化合物23‑1：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.43(s,3H)，3.30‑3.63(m,37H)，4.00‑4.14(m,2H)，7.32(d,J＝8.0Hz,2H)，7.77(d,J＝8.0Hz,2H)。

[0346] 化合物23‑2：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.42(s,3H)，3.29‑3.79(m,61H)，3.99‑4.14(m,2H)，7.32(d,J＝7.6Hz,2H)，7.77(d,J＝7.6Hz,2H)。

[0347] 实施例31：制备NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物24a)、NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物24b)、NDP‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物25‑1a(n＝3)和25‑2a(n＝9))、NDT‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物25‑1b(n＝3)和25‑2b(n＝
9))、NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3(化合物26‑1a(n＝3)和26‑2a(n＝9))、NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3(化合物26‑1b(n＝3)和26‑2b(n＝9))的方法

[0348] 上述方案6显示NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDP‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDT‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3或NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3的制备。在碱性条件下偶联NDP或NDT，得到NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDP‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDT‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3、NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3或NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3。依据方案6制备化合物24a、24b、25‑1a、25‑2a、25‑1b、25‑2b、26‑1a、26‑2a、26‑1b和26‑2b。

[0349] 实施例32：制备化合物24a

[0350] 在室温，向化合物16(447mg，0.99mmol)和NDP(486mg，1.35mmol)于乙腈(5mL)中的溶液中添加碳酸钾(685mg，4.96mmol)。将溶液回流搅拌22小时并且过滤，将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用丙酮/DCM(v/v＝1:2)和MeOH/DCM(v/v＝1:12和1:9)洗脱，得到
1
化合物24a(375mg，产率59％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.92(t,J＝6.8Hz,2H)，2.42‑2.45(m,10H)，3.33‑3.65(m,27H)，3.87(t,J＝6.8Hz,2H)，6.82‑7.13(m,7H)。

[0351] 实施例33：制备化合物24b

[0352] 在室温，向化合物16(327mg，0.726mmol)和NDT(430mg，1.09mmol)于乙腈(5mL)中的溶液中添加碳酸钾(505mg，3.65mmol)。将溶液回流搅拌22小时并且过滤，将滤液减压浓缩。在正相柱上纯化残余物，用EtOAc/己烷(v/v＝3：1)和MeOH/DCM(v/v＝1:12和1:9)洗脱，
1
得到化合物24b(168mg，产率34％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.41‑
2.46(m,10H)，3.33‑3.65(m,27H)，3.92(t,J＝6.8Hz,2H)，6.88‑7.18(m,7H)。

[0353] 实施例34：制备化合物25‑1a

[0354] 在室温，向化合物19‑1(607mg，1.04mmol)和NDP(492mg，1.37mmol)于乙腈(5mL)中的溶液中添加K2CO3(752mg，5.44mmol)。将溶液回流搅拌20小时并且过滤，将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用丙酮/DCM(v/v＝2:3)和MeOH/DCM(v/v＝1:15、1:12和1:8)洗脱，
1
得到化合物25‑1a(550mg，产率68％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，
2.42‑2.57(m,10H)，3.33‑3.61(m,39H)，3.86(t,J＝6.8Hz,2H)，6.82‑7.14(m,7H)。

[0355] 实施例35：制备化合物25‑1b

[0356] 在室温，向化合物19‑1(606mg，1.04mmol)和NDT(541mg，1.37mmol)于乙腈(5mL)中的溶液中添加K2CO3(735mg，4.96mmol)。将溶液回流搅拌20小时并且过滤，将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用丙酮/DCM(v/v＝1:2和2:3)和MeOH/DCM(v/v＝1:12和1:8)洗脱，
1
得到化合物25‑1b(702mg，产率84％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，
2.43‑2.56(m,10H)，3.33‑3.65(m,39H)，3.92(t,J＝6.8Hz,2H)，6.88‑7.17(m,7H)。

[0357] 实施例36：制备化合物25‑2a

[0358] 在室温，向化合物19‑2(898mg，1.027mmol)和NDP(524mg，1.456mmol)于乙腈(5mL)中的溶液中添加K2CO3(751mg，5.433mmol)。将所得溶液回流搅拌20小时并且过滤，将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用丙酮/DCM(v/v＝1:1)和MeOH/DCM(v/v＝v/v＝1:20、1:1
12和1:8)洗脱，得到化合物25‑2a，其为无色油状物(738mg，产率69％)。H NMR(400MHz,
CDCl3)：δ1.91(t,J＝6.8Hz,2H)，2.42‑2.56(m,10H)，3.33‑3.61(m,63H)，3.86(t,J＝
6.8Hz,2H)，6.82‑7.14(m,7H)。

[0359] 实施例37：制备化合物25‑2b

[0360] 在室温，向化合物19‑2(905mg，1.035mmol)和NDT(558mg，1.418mmol)于乙腈(5mL)中的溶液中添加K2CO3(760mg，5.5mmol)。将所得溶液回流搅拌20小时并且过滤，将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化所得残余物，用丙酮/DCM(v/v＝1:2)和MeOH/DCM(v/v＝1:15、1:10和1
1:8)洗脱，得到化合物25‑2b，其为无色油状物(1.01g，产率91％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ
1.91(t,J＝6.4Hz,2H)，2.43‑2.56(m,10H)，3.34‑3.62(m,63H)，3.92(t,J＝6.8Hz,2H)，
6.88‑7.17(m,7H)。

[0361] 实施例38：制备化合物26‑1a

[0362] 在室温，向化合物23‑1(1.1g，1.89mmol)和NDP(980mg，2.72mmol)于乙腈(10mL)中的溶液中添加K2CO3(1.31g，9.48mmol)。将溶液回流搅拌1天并且过滤，将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用丙酮/DCM(v/v＝1:2和1:1)和MeOH/DCM(v/v＝1:22、1:15和1:8)洗1
脱，得到化合物26‑1a(711mg，产率49％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.91(t,J＝6.4Hz,2H)，
2.41‑2.45(m,10H)，3.33‑3.63(m,39H)，3.86(t,J＝6.4Hz,2H)，6.82‑7.12(m,7H)。

[0363] 实施例39：制备化合物26‑1b

[0364] 在室温，向化合物23‑1(1.3g，2.23mmol)和NDT(1.14g，2.90mmol)于乙腈(12mL)中的溶液中添加碳酸钾(1.55g，11.21mmol)。将所得溶液回流搅拌20小时并且过滤，将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用EtOAc/己烷(v/v＝3:1)、丙酮/DCM(v/v＝1:2)和MeOH/1
DCM(v/v＝1:15和1:8)洗脱，得到化合物26‑1b(649mg，产率36％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ
1.91(t,J＝6.4Hz,2H)，2.42‑2.44(m,10H)，3.33‑3.63(m,39H)，3.92(t,J＝6.4Hz,2H)，
6.88‑7.18(m,7H)。

[0365] 实施例40：制备化合物26‑2a

[0366] 在室温下向化合物23‑2(1.1g，1.3mmol)和NDP(688mg，2.90mmol)于乙腈(7mL)中的溶液中添加K2CO3(898mg，6.5mmol)。将所得溶液回流搅拌1天并且过滤，将滤液减压浓缩。
在硅胶柱上纯化残余物，用丙酮/DCM(v/v＝1:1)和MeOH/DCM(v/v＝1:20、1:12和1:8)洗脱，
1
得到化合物26‑2a(564mg，产率42％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.91(t,J＝6.4Hz,2H)，
2.43‑2.56(m,10H)，3.33‑3.62(m,63H)，3.86(t,J＝6.4Hz,2H)，6.82‑7.13(m,7H)。

[0367] 实施例41：制备化合物26‑2b

[0368] 在室温下向化合物23‑2(1.14g，1.346mmol)和NDT(737mg，2.0mmol)于乙腈(7mL)中的溶液中添加K2CO3(930mg，6.7mmol)。将所得溶液回流搅拌1天并且过滤，将滤液减压浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用丙酮/DCM(v/v＝1:1)和MeOH/DCM(v/v＝1:20、1:12和1:8)洗
1
脱，得到化合物26‑2b(623mg，产率43％)。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.92(t,J＝6.4Hz,2H)，
2.43‑2.56(m,10H)，3.33‑3.62(m,63H)，3.93(t,J＝6.4Hz,2H)，6.88‑7.16(m,7H)。

[0369] 实施例42：制备NDP‑[CH2CH(OH)CH2O]3‑H(化合物33a)、NDT‑[CH2CH(OH)CH2O]3‑H(化合物33b)的方法

[0370] 上述方案7显示化合物33a和33b的制备。将苄基保护的三甘油用THP进行单保护，得到化合物28。化合物28进一步被保护，得到化合物29。在标准实验方案下除去THP，得到化合物30，其随后被甲苯磺酰化得到化合物31。使用H2和Pd/C完成全面脱保护，得到化合物
32。在碱性条件下将化合物32与NDP或NDT偶联，得到化合物33a或化合物33b。

[0371] 实施例43：制备化合物27[2,6,10‑三(苄基氧基)‑4,8‑二氧杂十一烷‑1,11‑二醇][0372] 依据公开的方法(Hamada,M.et al.,Synthesis.2008,22,3663‑3669)由化合物71
制备化合物27。H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.25(br,2H)，3.56‑3.72(m,15H)，4.54‑4.70(m,
6H)，7.25‑7.38(m,15H)。

[0373] 实施例44：制备化合物28

[0374] 在0℃，向化合物27(9.50g，18.6mmol)和pTSA(0.586g，3.08mmol)于DCM(120mL)中的溶液中缓慢添加3,4‑二氢‑2H‑吡喃(1.40mL，15.4mmol)于DCM(30mL)中的溶液，并且将反应混合物在室温搅拌18小时。将反应混合物用水和DCM稀释。将水层用DCM(150mL×3)萃取，并且将合并的有机层用盐水洗涤并用MgSO4干燥。经由过滤除去干燥剂，并减压蒸发溶剂。在硅胶柱上纯化残余物，用己烷/EtOAc(v/v＝2:1、1:1和1:4)、EtOAc/丙酮(v/v＝4:1)和
1
DCM/MeOH(v/v＝9:1)洗脱，得到化合物28(5.18g，产率57％)。H NMR(CDCl3,400MHz)：δ
1.47‑1.58(m,4H)，1.65‑1.69(m,4H)，1.79(d,J＝9.6Hz,4H)，3.44‑3.59(m,11H)，3.72‑
3.84(m,8H)，4.45(s,2H)，4.66(s,6H)，7.23‑7.34(m,15H)。

[0375] 实施例45：制备化合物29

[0376] 在0℃，向化合物28(5.18g，8.71mmol)于THF(60mL)中的溶液中添加氢化钠(0.871g，21.8mmol)，并且将反应混合物在室温搅拌30分钟。向悬浮液中缓慢添加溴苄
(1.35mL，11.3mmol)。将反应混合物在室温搅拌20小时，将反应混合物用水淬灭并且用DCM稀释。将水层用DCM(100mL×3)萃取，并且将合并的有机层用盐水洗涤及用MgSO4干燥。经由过滤除去干燥剂，并减压蒸发溶剂。在硅胶柱上纯化残余物，用己烷/EtOAc(v/v＝5:1、3:1
1
和1:1)洗脱，得到化合物29(5.59g，产率94％)：H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.41‑1.82(m,6H)，
3.40‑3.90(m,17H)，4.50‑4.52(m,2H)，4.57‑4.60(m,1H)，4.65‑4.70(m,6H)，7.20‑7.38(m,
20H)。

[0377] 实施例46：制备化合物30

[0378] 在室温，向化合物29(5.58g，8.15mmol)于MeOH(55mL)中的溶液中添加pTSA(0.155g，0.815mmol)，并且将反应混合物在室温搅拌18小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭并且用DCM(60mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤及用MgSO4干燥。经由过
1
滤除去干燥剂，并减压蒸发溶剂，得到化合物30(4.87g，产率99％)：H NMR(400MHz,CDCl3)δ
2.12‑2.20(m,1H)，3.40‑3.80(m,15H)，4.50‑4.80(m,8H)，7.20‑7.38(m,20H)。

[0379] 实施例47：制备化合物31

[0380] 在0℃，向化合物30(4.86g，8.09mmol)于DCM(25mL)中的溶液中添加甲苯磺酰氯(2.31g，12.1mmol)和氢氧化钾(1.82g，32.4mmol)，并且将反应混合物在室温搅拌18小时。
将反应混合物用DCM(100mL)和水(80mL)稀释，将水层分离并用DCM(100mL×2)萃取。将合并
的有机层用盐水洗涤及用MgSO4干燥。经由过滤除去干燥剂，并减压蒸发溶剂。在硅胶柱上纯化残余物，用己烷/EtOAc(v/v＝4:1、3:1和2:1)洗脱，得到化合物31，其为无色油状物
1
(5.31g，产率87％)：H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.38(s,3H)，3.40‑3.80(m,13H)，4.00‑4.10(m,
1H)，4.10‑4.20(m,1H)，4.40‑4.80(m,8H)，7.20‑7.38(m,22H)，7.73(d,J＝8.0Hz,2H)。

[0381] 实施例48：制备化合物32

[0382] 在室温，向化合物31(0.573g，0.759mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加Pd/C(0.081g，0.076mmol)，并且将反应混合物在室温在H2(1atm)下搅拌22小时。将反应混合物
1
用MeOH稀释并且过滤。减压蒸发溶剂，得到化合物32(299mg，定量)：H NMR(400MHz,CDCl3)δ
2.20(brs,3H)，2.42(s,3H)，3.40‑4.10(m,15H)，4.55(brs,1H)，7.33(d,J＝8.0Hz,2H)，
7.76(d,J＝8.0Hz,2H)。

[0383] 实施例49：制备化合物33a

[0384] 在室温和氩气下，向NDP(0.355g，0.987mmol)和化合物32(0.284g，0.720mmol)于乙腈(4mL)中的经搅拌溶液中添加K2CO3(0.525g，3.80mmol)。将反应混合物回流18小时，用DCM稀释并且过滤。减压蒸发溶剂。在硅胶柱上纯化残余物，用EtOAc/MeOH(v/v＝2:1和1:1)
1
洗脱，得到化合物33a(243mg，产率58％)：H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.89(t,J＝6.4Hz,2H)，
2.20‑2.50(m,14H)，3.30‑4.00(m,17H)，6.82‑7.14(m,7H)。

[0385] 实施例50：制备化合物33b

[0386] 在室温和氩气下，向NDT(0.550g，1.40mmol)和化合物32(0.424g，1.07mmol)于乙腈(8mL)中的经搅拌溶液中添加K2CO3(0.739g，5.35mmol)。将反应混合物回流20小时，用丙酮稀释，过滤并且用DCM洗涤。减压蒸发溶剂。在硅胶柱上纯化残余物，用EtOAc/MeOH(v/v＝
1
2:1和1:1)洗脱，得到化合物33b(310mg，产率47％)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.90(t,J＝
6.8Hz,2H)，2.20‑2.50(m,14H)，3.36‑3.90(m,15H)，3.93(t,J＝6.8Hz,2H)，6.87‑7.17(m,
7H)。

[0387] 实施例51：细胞培养和化学药品

[0388] 人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系(例如，A549、H441GL和H1299)、结肠癌细胞系(例如，HCT116和DLD1)、乳腺癌细胞系(例如，MCF7和MDA‑MB‑231)和胰腺癌细胞系(例如，PANC‑
1和SUIT‑2)用于细胞毒性研究。这些NSCLC细胞系对表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂(例
如，吉非替尼)具有内在抗性。A549和H441GL是EGFR野生型腺癌细胞系。H1299是EGFR野生型大细胞癌细胞系。HCT116和DLD1是转移性结肠癌细胞系。MCF7是激素反应性乳腺癌细胞系。
MDA‑MB‑231是三阴性乳腺癌细胞系。PANC‑1是转移性腺癌细胞系。SUIT‑2是胰腺导管腺癌细胞系。

[0389] 在补充有10％胎牛血清(FBS，Invitrogen)、2mM L‑谷氨酰胺、100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的RPMI培养基中生长并维持所有细胞系。对于细胞培养实验，将每种测试化合物的储备溶液(10mM)溶解在二甲基亚砜(DMSO，Sigma)中。

[0390] 实施例52：细胞毒性和磺酰罗丹明B测定

[0391] 将细胞以每孔2000个细胞的密度植入在96孔板中，一式三份。每孔中的细胞在第三天(以确保适当的植入效率和活力)用不同浓度(0‑50μM)的每种测试化合物处理48小时。

[0392] 使用磺酰罗丹明B(SRB)测定法评估细胞活力。弃去培养基，并且将贴附性细胞在4℃，通过100μL冷的10％三氯乙酸(w/v)固定在每孔中1小时。在固定后，在室温将细胞用100μL/孔的0.4％(w/v，于1％乙酸中)SRB溶液染色30分钟，然后用1％乙酸洗涤5次。在晾干后，向每孔中添加100μL的10mM Tris碱，并在530nm读取吸光度。细胞毒性被表示为，药物处理孔中的细胞数相对于仅有溶剂的对照中的细胞数(设定为100％)的百分比。每个实验独立
地以一式三份进行，并且由不同浓度获得的细胞毒性数据计算每种测试化合物的细胞毒性
IC50值。

[0393] NDP和NDT低聚物缀合物的细胞毒性值(IC50)显示在表2和表3中。

[0394] 表2

[0395]

[0396]

[0397]

[0398] 表3

[0399]

[0400] 表2显示PCP、TFP、NDP、NDT、以及NDP和NDT的‑[CH2CH2O]n‑CH3氨基甲酸酯缀合物(化合物5‑1a、5‑2a、5‑3a、5‑4a、5‑1b、5‑2b、5‑3b和5‑4b)、NDP和NDT的‑[CH2CH2O]n‑CH3经PEG化的缀合物(化合物4‑1a、4‑2a、4‑3a、4‑4a、4‑1b、4‑2b和4‑3b)、NDP和NDT的‑COCH2[CH2CH2O]n‑CH3酰胺缀合物(化合物6‑1a、6‑2a、6‑3a、6‑1b和6‑2b)、NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物24a)、NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物24b)、NDP‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物25‑1a(n＝3)和25‑2a(n＝9))、NDT‑[CH2CH2O]n‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑CH3(化合物25‑1b(n＝3)和25‑2b(n＝9))、NDP‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3(化合物26‑1a(n＝3)和26‑2a(n＝9))、NDT‑[CH2CH(OCH3)CH2O]3‑[CH2CH2O]n‑CH3(化合物26‑1b(n＝3)和
26‑2b(n＝9))、NDP‑[CH2CH(OH)CH2O]3‑H(化合物33a)和NDT‑[CH2CH(OH)CH2O]3‑H(化合物
33b)抑制肺癌细胞的细胞增殖。NA表示无活性。

[0401] 表3中的数据表明，几乎所有被测试的NDP和NDT缀合物均抑制多种癌细胞的细胞增殖。

[0402] 实施例53：体内检查由测试化合物介导的抗肺癌效果

[0403] 如研究1和研究2所示，测试化合物处理抑制了小鼠肺癌模型中吉非替尼抗性H441的肿瘤形成。

[0404] 研究1

[0405] 将H441GL细胞(1×106个细胞在每100μL磷酸盐缓冲盐水/注射液中)皮下注射到NOD/SCID小鼠(雌性，4‑6周龄)的右胁腹中。给予小鼠2周的时间生长肿瘤。在注射后第3周的第1天，将荷瘤小鼠随机分成对照组(DMSO载剂，腹膜内(i.p.)注射)和测试化合物处理组(5mg/kg/天，5天/周，i.p.注射)。在10周的时间内，以每周一次的方式，使用测径器测量两组中的肿瘤生长情况。肿瘤大小的变化被表示为从第3周起的倍数变化。在此研究中，还在每个研究周结束时记录每只小鼠的体重。

[0406] 在小鼠研究中化合物对肿瘤大小的影响的结果总结在表4中。如表4所示，与载剂对照组相比，所有测试化合物均抑制并且延迟肿瘤的生长。在这些化合物中，化合物5‑2b具有最大的抑制肿瘤生长效果。此外，经测试化合物处理的小鼠的体重与对照组相比没有显
著差异(数据未显示)。

[0407] 表4

[0408]

[0409] 研究2

[0410] 进行类似于研究1的小鼠研究以评价表5中列出的化合物。在此研究中，日剂量为0.0127mmol/kg而不是5mg/kg。在小鼠研究中化合物对肿瘤大小的影响的结果总结在表5
中。如表5所示，与载剂对照组相比，所有测试化合物在第13周时均抑制并且延迟肿瘤的生长。在这些化合物中，化合物4‑2b具有最大的抑制肿瘤生长效果。此外，经测试化合物处理的小鼠的体重与对照组相比没有显著差异(数据未显示)。

[0411] 表5

[0412]

[0413]

[0414] 在不脱离其精神或基本特征的情况下，本发明可以其他具体形式实施。因此，上述实施方案在所有方面都被视为说明性的，而非限制本文所述的公开内容。因此，本发明的范围由所附权利要求而不是前面的描述来表明，并且所有在权利要求等同方案的含义和范围内的改变均旨在包含于其中。