一种99m锝标记配合物及其在诊断非小细胞肺癌中的应用

摘要

本发明公开了一种99m锝标记配合物及其在诊断非小细胞肺癌中的应用，具体为奥希替尼与CS2形成配体，然后与99m锝进行配合形成式(I)配合物，此配合物为亲水性配合物，稳定性好，制备简单，在肺部具有较高的摄取和良好的滞留，具有很强的信号强度，可在肺癌类疾病尤其是非小细胞肺癌的诊断中应用。

权利要求

1.一种99m锝标记的配合物，其特征在于该配合物具有式(I)结构：

2.一种如权利要求1所述的99m锝标记的配合物的制备方法，其特征在于其由式(III)化合物与99mTc反应生成式(I)配合物；

具体步骤如下：

取一支含有丁二酰二酰肼(SDH)、1,2-丙二胺四乙酸、SnCl2·2H2O的SDH冻干药盒，将适量新鲜99mTcO4-淋洗液加入其中，充分摇匀，反应得到[99mTcN]2+中间体溶液；将式(III)配体加入到上述中间体溶液中，反应得到式(I)配合物。

3.根据如权利要求2所述的99m锝标记的配合物的制备方法，其特征在于式(III)化合物由式(II)与二硫化碳(CS2)反应制备得到；

具体步骤如下：

式(II)化合物溶于DMSO(二甲基亚砜)中，加入KOH，加热到100℃反应1小时，然后在冰浴下滴加二硫化碳(CS2)，TLC检测反应完成后，除去溶剂，乙醇/乙醚重结晶，得到式(III)化合物。

4.根据如权利要求3所述的99m锝标记的配合物的制备方法，其特征在于式(II)化合物由奥希替尼与1-溴丙醇反应制备得到；

具体步骤如下：

奥希替尼溶于乙腈中，加入无水K2CO3搅拌0.5小时，然后加入1-溴丙醇后加热回流，反应结束后加入水淬灭，有机溶剂萃取，柱层析纯化得到式(II)化合物。

说明书

一种99m锝标记配合物及其在诊断非小细胞肺癌中的应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种99m锝标记配合物及其在诊断非小细胞肺癌中的应用，具体为奥希替尼与99m锝形成的配合物。

背景技术

[0002] 肺癌是恶性肿瘤中致死率最高的肿瘤，每年全球大约有150万人死于肺癌。每年被新确诊的肺癌患者中非小细胞肺癌(NSCLC)患者比例高达85％。尽管过去十年肺癌的诊断和治疗改善，但总体5年患者生存率仍然低于16％。中国癌症中心发布的统计显示，在429万新发癌症病人群中，肺癌是73.3万；在280万的癌症死亡人数中，肺癌占据了其中的61万，是我国名副其实的“第一癌症”。其中，约75％的患者发现时已处于中晚期。因为肺癌早期症状不明显，75％的肺癌患者就诊时已有局部浸润和远处转移，失去了手术治疗的机会，而目前的治疗手段对肺癌总生存率的提高效果不大，II-IV期肺癌患者5年生存率大约在40％-5％之间，而I期患者5年生存率可高达92％。因此，加强对高危人群的筛查，提高早诊、早治率是减少肺癌死亡率的最有效方法。

[0003] 常规的医学影像技术通常只能检测到病灶的物理性状，如肿瘤的大小及肿瘤的解剖定位等，它们主要反映肿瘤疾病的中晚期状况，而分子影像技术则可能在还没有出现临床症状时，检测肿瘤早期的生物学特性，如癌前分子改变、基因变化、肿瘤细胞标志物、生长动力学等，从而得知疾病发展过程和进展阶段。在疾病的发生和形成阶段进行有效的干预，从而逆转、阻止或延缓其发生。分子影像技术使研究活体内整体微环境的疾病发展过程成为可能，并可展现活体分子的细胞行为与过程，对细胞、组织与器官功能、动物模式研究及人类疾病的展望具有极大的价值，在疾病早期诊断和治疗、研究疾病发生和发展的生物学特性中具有不可估量的重要性，对人类健康具有重大意义。

[0004] 近年来，受体显像技术作为分子影像技术的一项重要的研究工具受到越来越多的关注。受体显像是利用放射性标记的配体与靶组织特异的高亲和力结合原理，显示受体空间分布、密度和亲和力大小，是集配体-受体高特异性和示踪技术高灵敏度于一身的、无创的体内功能性显像方法，可用于肿瘤早期诊断研究。但是该技术的核心问题在于如何找到可与肿瘤细胞表达的某种分子相结合的显像剂，选择高亲和力、高特异性的配体，并用适当的同位素进行标记，来测定受体数量及浓度的变化，判断这种变化与疾病的关系，达到诊断的目的。由于99mTc 具有适宜的半衰期和γ光子能量，它是显像的最佳核素。此外，99mTc以99mTcO4-的化学形态很容易得到，价格低廉。锝可以和各种配体形成种类繁多、具有多种化学
99m
价态和不同生物分布性质的放射性药物。本发明首次将具有肺部靶向的奥希替尼和 Tc结合制备成具有肺部靶的诊断剂.

发明内容

[0005] 本发明的目的在于提供一种制备简单、稳定性好、靶向性优异的基于奥希替尼的99mTcN标记配合物及其制备方法。该配合物具有式(I)结构：

[0006]

[0007] 式(I)的制备方法包含如下步骤：

[0008] (1)奥希替尼与1-溴丙醇反应生成式(II)化合物

[0009]

[0010] 奥希替尼溶于乙腈中，加入无水K2CO3搅拌0.5小时，然后加入1-溴丙醇后加热回流，反应结束后加入水淬灭，有机溶剂萃取，柱层析纯化得到式(II)化合物。

[0011] (2)式(II)与二硫化碳(CS2)反应生成式(III)化合物

[0012]

[0013] 式(II)化合物溶于DMSO(二甲基亚砜)中，加入KOH，加热到100℃反应 1小时，然后在冰浴下滴加二硫化碳(CS2)，TLC检测反应完成后，除去溶剂，乙醇/乙醚重结晶，得到式(III)化合物。

[0014] (3)式(III)化合物与99mTc反应生成式(I)配合物

[0015] 取一支含有丁二酰二酰肼(SDH)、1,2-丙二胺四乙酸、SnCl2·2H2O的SDH冻干药盒，将适量新鲜99mTcO4-淋洗液加入其中，充分摇匀，反应得到[99mTcN]2+中间体溶液；将式(III)配体加入到上述中间体溶液中，反应得到式(I)配合物。

[0016] 本发明还提供一种式(I)的配合物在非小细胞肺癌疾病诊断中的应用。

[0017] 本发明利用具有肺部靶向作用的奥希替尼与具有放射诊断作用的99mTc结合，从而形成新型的非小细胞肺癌靶向诊断剂，该诊断剂具有稳定性好、制备简单，在肺部具有较高的摄取和良好的滞留，可作为新型的非小细胞肺癌的诊断剂使用。

具体实施方式

[0018] 下面通过实施例详细描述本发明。

[0019] 实施例1：式(II)化合物的制备

[0020]

[0021] 在500mL圆底烧瓶中，将50g奥希替尼溶于250mL乙腈中，加入27g无水K2CO3搅拌0.5小时，然后加入15.2g1-溴丙醇后加热回流12小时，反应结束后加入去离子水淬灭，二氯甲烷萃取，柱层析纯化得到式(II)化合物44.1g，产率78.9％， ESI/MS：558.31[M+H+]。

[0022] 步骤(2)：式(III)化合物的制备

[0023]

[0024] 在500mL圆底烧瓶中，将55.7g式(II)化合物溶于200mLDMSO(二甲基亚砜)中，加入25gKOH，加热到100℃反应1小时，然后在冰浴下滴加10mL二硫化碳(CS2)，TLC检测反应完成后，除去溶剂，乙醇/乙醚重结晶，得到式(III) 化合物37.8g，产率56.3％，ESI/MS：672.21[M+H+]。

[0025] 1H-NMR(400MHz,D2O:CD3OD＝1:2)δ9.81(s,1H),9.05(s,1H),8.69(s,1H), 8.40-8.38(d,1H),8.19–8.03(m,1H),7.70(s,1H),7.40–7.38(m,1H),7.30– 7.26(m,1H),7.20-
7.19(d,1H),6.78(s,1H),6.47–6.34(m,2H),5.75(m,1H), 3.98(s,3H),3.89(s,3H),3.53(d,2H),3.45(d,2H),3.06(d,2H),2.27(s,6H), 2.59(d,2H),1.71(m,2H)；13C-NMR(100MHz,D2O:CD3OD＝1:2)δ172.0，162.50, 162.14,159.57,157.77,144.38,138.27,136.15,
135.03,132.58，127.09, 126.83,125.99,125.95,121.79,120.92,120.31,113.68,
110.08,110.03,107.90, 102.86,65.0，57.6,57.3,56.0，54.7，41.2,41.1,40.3,39.2,
28.7。

[0026] 步骤(3)式(I)配合物的制备

[0027] 取一支含有丁二酰二酰肼(SDH)、1,2-丙二胺四乙酸、SnCl2·2H2O的SDH冻干药盒，将37-370MBq的新鲜99mTcO4-淋洗液1mL加入其中，充分摇匀，室温下反应1小时得到[99mTcN]2+中间体溶液；将7.1mg式(III)配体加入到上述中间体溶液中，室温下反应半小时得到式(I)配合物。

[0028] 实施例2：采用HPLC法鉴定式(I)配合物

[0029] Kromasil C18分析柱(4.6×250mm)，流动相为含0.1％TFA(三氟乙酸)水(A相) 和含0.1％TFA甲醇(B相)，流速1mL/min；t＝0，A/B＝5/5；t＝15min，A/B＝1/9； t＝20min，A/B＝1/9；t＝25min，A/B＝5/5。式(I)配合物的保留时间(Rt)为 11.5min。

[0030] HPLC分析结果表明按照上述方法制备的式(I)配合物的放化纯大于90％。

[0031] 实施例3：式(I)配合物稳定性分析

[0032] 将标记好的式(I)配合物分别在室温下和在37℃小鼠血清中放置不同时间(1、 2、3、4、5、6、8、10小时)后测定其放射化学纯度，实验结果表明该配合物在室温下和在37℃小鼠血清中放置10小时后放射化学纯度均大于90％，说明其体外稳定性良好。

[0033] 实施例4：式(I)配合物肿瘤小鼠体内分布

[0034] A549非小细胞肺部肿瘤小鼠模型：于雌性ICR小鼠(体重约18-20g)左前肢皮下植入2×106个A549非小细胞肿瘤细胞，饲养约10天后，肿瘤直径生长至 8-10mm，质量约为0.5-0.9g。通过A549非小细胞肿瘤小鼠尾静脉注射式(I)配合物(0.1mL，185KBq)，注射后
30、60、120、240min将小鼠断头处死，取其肿瘤、血、心、肝、脾、肺、肾、脑、骨、肌肉等器官与组织，分别称重后测量其放射性计数，结果以每克组织或器官的百分摄取剂量表示(％ID/g)。

[0035] 式(I)配合物肿瘤小鼠体内分布结果(ID％/g,x±s,n＝5)示于表1。

[0036]

[0037]

[0038] 通过上述数据可以看出，式(I)配合物具有良好的肺部肿瘤摄取和滞留，注射后在肺部可以达到38以上，明显比其他部位摄取和滞留更有靶向性，可以作为肺部肿瘤的诊断试剂使用。