一种含有芴环结构的化合物及其应用

摘要

本发明公开了一种含有芴环结构的化合物及其应用。本发明含有芴环结构的化合物中含有羟基、氨基、取代氨基、活性基团，可用作氨基酸或肽C端保护试剂。使用这种保护载体的肽合成反应，在合适的溶剂体系中反应速度快，试剂利用率高；后处理通过简单的液液萃取分离即能够进行有效纯化，最终可获得纯度较高的产品；合成过程中溶解度变化小，操作流程通用性强，可以发展成一种普适型的生产方法。

权利要求

1.一种含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述化合物的结构如通式(1)所示：其中：

X选自OH、卤素、磺酸酯基、NHRa；

Y选自氢、芳基；

其中，Ra选自氢、烷基或芳烷基；

Q选自O；

n1，n2独立选自0～3的整数，且n1、n2不同时为0；

R独立选自通式(5)、(6)或(7)所示的基团：

其中，*表示与Q连接；

R1选自C1～C25的烷基或通式(3)所示的基团：

其中，*表示与羰基连接；

m1表示1～3的整数；

R1a选自C6～C25的烷基，且m1个R1a的总碳数不少于8；

ka选自0～3的整数；

R2选自氢、C1～C25的烷基或通式(4)所示的基团：

通式(4)中，*表示与N连接；

m2选自0～3的整数；

R2a选自C6～C25的烷基；

kb选自1～6的整数；

其中R1为C1～C25的烷基时，R2不为氢或C1～C25的烷基；

通式(5)中，k1选自0～3的整数，并且当k1＝0时，R2≠H；

通式(6)中，R4选自氢、C1～C25的烷基或上述通式(4)所示的基团，k2选自1～4的整数，

k3选自1～4的整数；

通式(7)中，R6选自氢、C1～C25的烷基或上述通式(4)所示的基团，k4选自0～3的整数，

k5选自0～3的整数，

R5选自氢、烷基或通式(8)所示的基团：

其中，*表示连接位点；

k6选自1～4的整数；

R1＇选自C1～C25的烷基或上述通式(3)所示的基团；

R2＇选自氢、C1～C25的烷基或上述通式(4)所示的基团。

2.根据权利要求1所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述通式(3)中，环B进一步具有选自卤素原子、含有卤素原子取代的C1～C5烷基、不含卤素原子取代的C1～C5烷基、含有卤素原子取代的C1～C5烷氧基、不含卤素原子取代的C1～C5烷氧基的取代基。

3.根据权利要求1所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述通式(4)中，环C进一步具有选自卤素原子、含有卤素原子取代的C1～C5烷基、不含卤素原子取代的C1～C5烷基、含有卤素原子取代的C1～C5烷氧基、不含卤素原子取代的C1～C5烷氧基的取代基。

4.根据权利要求1所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述通式(1)中，芴环进一步具有选自卤素原子、含有卤素原子取代的C1～C5烷基、不含卤素原子取代的C1～C5烷基、含有卤素原子取代的C1～C5烷氧基、不含卤素原子取代的C1～C5烷氧基的取代基。

5.根据权利要求1～4任意一项所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述Q选自O；所述Ra选自氢、甲基、乙基、丙基、苄基或甲氧苄基；所述n1+n2等于1～3。

6.根据权利要求1～4任意一项所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述m1选自2或3，m1个R1a的总碳数为12～60；所述R1a选自C8～C22的烷基。

7.根据权利要求1～4任意一项所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述m2选自2或3，m2个R2a的总碳数为12～60；所述R2a选自C8～C22的烷基。

8.根据权利要求1～4任意一项所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述R2选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异辛基、苄基或4-甲氧苄基。

9.含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述含有芴环结构的化合物的结构式选自如下：

10.根据权利要求1所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述含有芴环结构的化合物易溶于烃类有机溶剂、酯类有机溶剂、醚类有机溶剂、水溶性非质子类极性有机溶剂中的至少一种。

11.根据权利要求10所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述烃类有机溶剂为芳香烃类有机溶剂。

12.根据权利要求10所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述烃类有机溶剂选自庚烷、己烷、石油醚、环己烷、甲基环己烷中的至少一种。

13.根据权利要求10所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述酯类有机溶剂选自乙酸异丙酯、乙酸叔丁酯、乙酸乙酯中的至少一种。

14.根据权利要求10所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述醚类有机溶剂选自乙醚、异丙醚、甲基叔丁基醚、甲基环戊基醚、四氢呋喃中的至少一种。

15.根据权利要求10所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述水溶性非质子类极性有机溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二乙基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基-吡咯烷酮、N-乙基-吡咯烷酮、二甲基亚砜、环丁砜、1,3-二甲基咪唑啉酮、1,3-二甲基-3,4,5,

6-四氢-2-嘧啶酮中的至少一种。

16.根据权利要求11所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：所述芳香烃类有机溶剂选自甲苯、乙苯、二甲苯中的至少一种。

17.根据权利要求10所述的含有芴环结构的化合物，其特征在于：25～30℃时，所述含有芴环结构的化合物在N,N-二甲基甲酰胺中的溶解度＞1％。

18.一种氨基酸或肽C端的保护试剂，其特征在于：所述保护试剂包含权利要求1～17任一项所述的含有芴环结构的化合物。

19.权利要求1～17任一项所述的含有芴环结构的化合物在均相或非均相溶剂体系中作为合成肽的试剂中的应用。

20.一种肽的合成方法，其特征在于：使用权利要求1～17任一项所述的含有芴环结构的化合物；包括如下步骤：

1)载体接入：将权利要求1～17任一项所述的含有芴环结构的化合物作为载体与N-保护氨基酸或N-保护肽化合物通过常规反应进行连接得到含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物；

2)N端去保护：将含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物溶解于溶剂中，加入N端保护的脱保护试剂溶液形成均相或非均相体系进行N端脱保护，加入高极性溶剂进行萃取，得含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物溶液；

3)肽链延长：在含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物溶液中，加入N-保护氨基酸或N-保护肽溶液，后加入缩合试剂溶液形成均相或非均相体系进行缩合反应，加入高极性溶剂进行萃取，得到含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物溶液；

4)重复步骤2)和步骤3)接入下一个氨基酸，直至得到完整的肽链；

步骤2)和步骤3)所述的高极性溶剂选自水、醇类、腈类、酰胺类、亚砜类、砜类、水溶性醇醚类中的至少一种。

21.根据权利要求20所述的合成方法，其特征在于：步骤2)中的含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物溶液与步骤2)中的N端保护的脱保护试剂溶液成非均相体系。

22.根据权利要求20所述的合成方法，其特征在于：步骤3)中的含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物溶液与步骤3)中的N-保护氨基酸或N-保护肽、缩合试剂溶液成非均相体系。

23.根据权利要求20所述的合成方法，其特征在于：步骤2)中溶解含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物的溶剂和步骤3)中含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物溶液中的溶剂独立选自烃类或烃类与酯类、醚类、卤代烃中的至少一种形成的混合溶剂。

24.根据权利要求20所述的合成方法，其特征在于：步骤2)溶解含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物的溶剂和步骤3)中含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物溶液中的溶剂独立选自己烷、环己烷、甲基环己烷、庚烷、石油醚或己烷、环己烷、甲基环己烷、庚烷、石油醚中至少一种与醋酸异丙酯、乙酸叔丁酯、乙酸乙酯、乙醚、异丙醚、甲基叔丁醚、甲基环戊基醚、二氯甲烷、氯仿中的至少一种形成的混合溶剂中的至少一种。

25.根据权利要求20所述的合成方法，其特征在于：步骤2)中溶解N端保护的脱保护试剂的溶剂、步骤3)中溶解N-保护氨基酸或N-保护肽、缩合试剂的溶剂独立选自酰胺类溶剂。

26.根据权利要求25所述的合成方法，其特征在于：所述酰胺类溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二乙基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基-吡咯烷酮、N-乙基-吡咯烷酮、1,3-二甲基咪唑啉酮、1,3-二甲基-3,4,5,6-四氢-2-嘧啶酮中的至少一种。

27.根据权利要求20所述的合成方法，其特征在于：步骤2)和步骤3)所述的高极性溶剂选自水、甲醇、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基-吡咯烷酮、1,3-二甲基咪唑啉酮、1,3-二甲基-3,4,5,6-四氢-2-嘧啶酮、二甲基亚砜、环丁砜中的至少一种。

28.根据权利要求20～27任意一项所述的合成方法，其特征在于：所述N-保护氨基酸或N-保护肽的用量为所述含有芴环结构的化合物的0.8～3.0当量，所述缩合试剂的用量为所述含有芴环结构的化合物的0.8～3.0当量。

29.根据权利要求28所述的合成方法，其特征在于：所述N-保护氨基酸或N-保护肽的用量为所述含有芴环结构的化合物的1～1.1当量，所述缩合试剂的用量为所述含有芴环结构的化合物的1～1.2当量。

30.一种如下所述的含有芴环结构的化合物，

说明书

一种含有芴环结构的化合物及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及化合物及多肽合成技术领域，尤其涉及一种含有芴环结构的化合物及其应用。

背景技术

[0002] 肽的合成制造方法，目前大体可以分成三类：固相载体合成法、常规液相合成法和液相载体合成法。

[0003] 固相载体合成法通过简单的固液分离即可完成分离纯化的工作，具有普适性强、开发周期短等优点。但固-液两相反应由于溶剂和固相载体间的亲和性较差、载体的空间结构等原因，存在较为严重的传质问题，反应速度受到限制。为了弥补低反应性，在常规反应条件下，反应试剂需要大大过量。中间体附载在固相载体上，难以进行常规分析，也无法进行纯化，最终产物一般情况下只能通过反相液相制备色谱纯化。

[0004] 常规液相合成法一般为均相反应，反应性良好，中间体可通过洗涤、结晶等手段进行纯化，最终产物纯度较高。但每个反应的产物和杂质性质差异较大，无法找到普适的方法进行分离纯化，开发周期长，制造步骤复杂。

[0005] 液相载体合成法是近十年来为了改善上述两种方法而开发出来的一种新的肽合成方法。其中，较为有代表性的包括JITSUBO公司的Molecular HivingTM技术和味之素的Ajiphase技术。

[0006] JITSUBO公司的Molecular HivingTM技术使用长链烷氧基苄醇，如：3，5-二(二十二烷基氧基)苄醇、2，4--二(二十二烷基氧基)苄醇、3，4，5—三(十八烷基氧基)苄醇等，作为液相载体。使用这些载体作为C端保护试剂进行肽的合成，反应在均相中进行，通过改变溶剂组成或温度变化等使产物析出，通过沉析—过滤—洗涤步骤实现分离纯化。但该方法存在以下问题：①载体在中低极性的乙酸酯和甲苯等溶剂中的溶解度不大，反应浓度较低，不利于放大生产；②要通过定量蒸馏等操作才可以完成改变溶剂组成的工序，操作复杂；③改变溶剂体系析出的一般为非晶体状固体，过滤—洗涤十分困难，杂质除去效果差，耗时长。因此，不能说该方法是一种重复性好的普适型肽合成方法。

[0007] 味之素的Ajiphase技术通过对前者进行改造，使用了多支链烷基代替直链烷基，有效改善了载体在醋酸异丙酯等溶剂中的溶解度，反应可以在较高浓度进行，通过使用水&有机极性溶剂洗涤即可实现分离纯化。但该技术还存在以下问题：①反应时间长，公开号为CN107011132A的专利中使用醋酸异丙酯或甲基环戊基醚作为溶剂缩合需要反应过夜，脱保护需要4～6小时，其它公开的文献资料中使用氯仿作为溶剂的缩合反应也需要3小时以上，反应时间长导致副产物杂质增多；②由于液液分离时两相极性相差较小，杂质难以除去，产物纯度低；③使用此类型载体合成肽的过程中，溶解度下降较快，一般的肽链氨基酸数大于4时即出现凝胶化现象，因此，该方法也很难说是一种重复性好的普适型肽合成方法。

[0008] 因此，合成一种具有普适型的液相合成保护载体化合物，进而得到一种重复性好的普适型肽合成方法具有重要的意义。

发明内容

[0009] 本发明的目的在于提供一种含有芴环结构的化合物及其应用。使用该化合物作为肽液相合成的保护载体，在均相或非均相的溶剂体系，特别在非均相溶剂体系中，能提高反应速度和试剂利用率、简化后处理操作、提高产品纯度、提高操作流程的通用性，可以发展成一种普适型的生产方法。

[0010] 本发明所采取的技术方案是：

[0011] 本发明的目的之一在于提供一种含有芴环结构的化合物，该化合物的结构如通式(1)所示：

[0012]

[0013] 其中：

[0014] X选自OH、卤素、磺酸酯、NHRa；

[0015] Y选自氢、芳基；

[0016] 其中，Ra选自氢、烷基或芳烷基；

[0017] Q独立选自O、NH、NHCO、CO、CONH、S、SO或SO2；

[0018] n1，n2独立选自0～3的整数，且n1、n2不同时为0；

[0019] R独立选自通式(2)所示的基团：

[0020]

[0021] 其中，*表示与Q连接；

[0022] R1选自C1～C25的烷基或通式(3)所示的基团：

[0023]

[0024] 其中，*表示与羰基连接；

[0025] m1表示1～3的整数；

[0026] R1a选自C6～C25的烷基，且m1个R1a的总碳数不少于8；

[0027] ka选自0～3的整数；

[0028] 环B除了具有m1个R1aO取代基外，还可以含有选自卤素原子、含有卤素原子取代的C1～C5烷基、不含卤素原子取代的C1～C5烷基、含有卤素原子取代的C1～C5烷氧基、不含卤素原子取代的C1～C5烷氧基的取代基；

[0029] 通式(2)中，R2选自氢、C1～C25的烷基或通式(4)所示的基团：

[0030]

[0031] 通式(4)中，*表示与N连接；

[0032] m2选自0～3的整数；

[0033] R2a选自C6～C25的烷基；

[0034] kb选自1～6的整数；

[0035] 环C除了具有m2个R2aO取代基外，还可以含有选自卤素原子、含有卤素原子取代的C1～C5烷基、不含卤素原子取代的C1～C5烷基、含有卤素原子取代的C1～C5烷氧基、不含卤素原子取代的C1～C5烷氧基的取代基；

[0036] L选自含有O、N或S杂原子的C2～C15有机链基或不含有O、N或S杂原子的C2～C15有机链基，当L选自不含有O、N或S杂原子的C2～C15有机链基时，R2≠H；

[0037] 芴环除了具有n1和n2个RQ取代基外，还可以含有选自卤素原子、含有卤素原子取代的C1～C5烷基、不含卤素原子取代的C1～C5烷基、含有卤素原子取代的C1～C5烷氧基或不含卤素原子取代的C1～C5烷氧基的取代基。

[0038] 优选地，上述R选自通式(5)所示的基团：

[0039]

[0040] 其中，通式(5)中，*表示与Q连接；

[0041] k1选自0～3的整数，并且当k1＝0时，R2≠H，更优选地，k1选自1～3的整数。优选地，上述R选自通式(6)所示的基团：

[0042]

[0043] 其中，通式(6)中，*表示与Q连接；

[0044] R4选自氢、C1～C25的烷基或上述通式(4)所示的基团；

[0045] k2选自1～4的整数；

[0046] k3选自1～4的整数。

[0047] 优选地，上述R选自通式(7)所示的基团：

[0048]

[0049] 其中，通式(7)中，*表示与Q连接；

[0050] R6选自氢、C1～C25的烷基或上述通式(4)所示的基团；

[0051] k4选自0～3的整数；

[0052] k5选自0～3的整数；优选地，k5选自1～3的整数；

[0053] R5选自氢、天然氨基酸的侧链基、烷基或通式(8)所示的基团：

[0054]

[0055] 其中，*表示连接位点；

[0056] k6选自1～4的整数；

[0057] R1＇选自C1～C25的烷基或通式(3)所示的基团；

[0058] R2＇选自氢、C1～C25的烷基或通式(4)所示的基团。

[0059] 优选地，上述Q选自O。

[0060] 优选地，上述Ra选自氢、甲基、乙基、丙基、苄基或甲氧苄基。

[0061] 优选地，所述n1+n2等于1～3。

[0062] 优选地，上述m1选自2或3，m1个R1a的总碳数为12～60。

[0063] 优选地，上述R1a选自C8～C22的烷基。

[0064] 优选地，上述m2选自2或3，m2个R2a的总碳数为12～60。

[0065] 优选地，上述R2a选自C8～C22的烷基。

[0066] 优选地，上述R2选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异辛基、苄基或4-甲氧苄基。

[0067] 优选地，通式(1)中的X中的卤素选自Cl、Br或I。

[0068] 优选地，通式(1)中的X中的磺酸酯选自甲磺酸酯或对甲苯磺酸酯。

[0069] 优选地，上述含有芴环结构的化合物的结构式选自如下：

[0070]

[0071]

[0072]

[0073]

[0074] 优选地，上述结构式中的C8H17烷基为异辛基，C9H19烷基为异壬基，C10H21烷基为异构十烷基，C13H27烷基为异构十三烷基，C20H41烷基为2,3-二氢植烷基。

[0075] 优选地，上述含有芴环结构的化合物易溶于烃类有机溶剂、芳香烃类有机溶剂、酯类有机溶剂、醚类有机溶剂、水溶性非质子类极性有机溶剂中的至少一种。

[0076] 优选地，上述烃类有机溶剂选自庚烷、己烷、石油醚、环己烷、甲基环己烷中的至少一种。

[0077] 优选地，上述芳香烃类有机溶剂选自甲苯、乙苯、二甲苯中的至少一种。

[0078] 优选地，上述酯类有机溶剂选自乙酸异丙酯、乙酸叔丁酯、乙酸乙酯中的至少一种。

[0079] 优选地，上述醚类有机溶剂选自乙醚、异丙醚、甲基叔丁基醚、甲基环戊基醚、四氢呋喃中的至少一种。

[0080] 优选地，上述水溶性非质子类极性有机溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二乙基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基-吡咯烷酮、N-乙基-吡咯烷酮、二甲基亚砜、环丁砜、1,3-二甲基咪唑啉酮、1,3-二甲基-3,4,5,6-四氢-2-嘧啶酮中的至少一种。

[0081] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在N,N-二甲基甲酰胺中的溶解度＞1％。

[0082] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在N,N-二甲基甲酰胺中的溶解度＞5％。

[0083] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在N,N-二甲基甲酰胺中的溶解度＞30％。

[0084] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在N,N-二甲基甲酰胺中的溶解度＞50％。

[0085] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在N,N-二甲基甲酰胺中的溶解度＞80％。

[0086] 更优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在N,N-二甲基甲酰胺中的溶解度＞100％。

[0087] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在烃类有机溶剂中的溶解度＞30％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在庚烷中的溶解度＞30％。

[0088] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在烃类有机溶剂中的溶解度＞50％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在庚烷中的溶解度＞50％。

[0089] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在烃类有机溶剂中的溶解度＞60％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在庚烷中的溶解度＞60％。

[0090] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在烃类有机溶剂中的溶解度＞80％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在庚烷中的溶解度＞80％。

[0091] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在烃类有机溶剂中的溶解度＞100％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在庚烷中的溶解度＞100％。

[0092] 优选地，上述含有芴环结构的化合物在酯类有机溶剂中的溶解度＞50％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在乙酸异丙酯中的溶解度＞50％。

[0093] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在酯类有机溶剂中的溶解度＞100％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在乙酸异丙酯中的溶解度＞100％。

[0094] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在醚类有机溶剂中的溶解度＞30％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在甲基叔丁基醚中的溶解度＞30％。

[0095] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在醚类有机溶剂中的溶解度＞50％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在甲基叔丁基醚中的溶解度＞50％。

[0096] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在醚类有机溶剂中的溶解度＞60％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在甲基叔丁基醚中的溶解度＞60％。

[0097] 优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在醚类有机溶剂中的溶解度＞80％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在甲基叔丁基醚中的溶解度＞80％。

[0098] 更优选地，在25～30℃时，上述含有芴环结构的化合物在醚类有机溶剂中的溶解度＞100％；更优选地，上述含有芴环结构的化合物在甲基叔丁基醚中的溶解度＞100％。

[0099] 本发明的上述含有芴环结构的化合物可以通过以下合成路线制备得到：

[0100]

[0101] 芴酮1-1a经过步骤1-1→步骤1-2，或经过步骤1-3→步骤1-4→步骤1-5合成X＝NHRa的化合物；

[0102] 芴酮1-1a经过步骤1-6→步骤1-7合成X＝OH的化合物；

[0103] 化合物1-7a经过步骤1-8可将OH可经过常规反应可转化为卤素、磺酸酯等化合物。

[0104] 上述卤素选自Cl、Br、I；上述磺酸酯选自甲磺酸酯或对甲苯磺酸酯。

[0105]

[0106] 按上述反应路线可合成如通式(5)、(6)和(7)中的R。

[0107] 本发明的另一目的在于提供一种氨基酸或肽C端保护试剂，该保护试剂包含上述的含有芴环结构的化合物。

[0108] 本发明还提供了上述含有芴环结构的化合物在均相或非均相溶剂体系中合成肽试剂中的应用。

[0109] 另外，本领域的技术人员可以依据常规的选择在上述试剂中添加其他物质及依据需要制备成所需的化合物或复合物。

[0110] 本发明同时还提供了一种肽的合成方法，该方法包括使用上述含有芴环结构的化合物。

[0111] 优选地，上述肽合成的方法，包括如下步骤：

[0112] 1)载体接入：将上述含有芴环结构的化合物作为载体与N-保护氨基酸或N-保护肽化合物通过常规反应进行连接得到含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物；

[0113] 2)N端去保护：将含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物溶解于溶剂中，加入N端保护的脱保护试剂溶液形成均相或非均相体系进行N端脱保护，加入高极性溶剂进行萃取，得含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物溶液；

[0114] 3)肽链延长：在含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物溶液中，加入N-保护氨基酸或N-保护肽溶液，后加入缩合试剂溶液形成均相或非均相体系进行缩合反应，加入高极性溶剂进行萃取，得到含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物溶液；

[0115] 4)重复步骤2)和步骤3)接入下一个氨基酸，直至得到完整的肽链。

[0116] 优选地，步骤2)中的含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物的溶液与步骤2)中的N端保护的脱保护试剂溶液成非均相体系。

[0117] 优选地，步骤3)中的含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物的溶液与步骤3)中的N-保护氨基酸或N-保护肽、缩合试剂溶液成非均相体系。

[0118] 优选地，步骤2)中溶解含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物的溶剂和步骤3)中含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物的溶液中的溶剂独立选自烃类或烃类与酯类、醚类、卤代烃中的至少一种形成的混合溶剂。

[0119] 需要说明的是烃类与酯类、醚类、卤代烃中的至少一种形成的混合溶剂中的烃类的含量以不影响形成非均相体系为准。

[0120] 优选地，步骤2)溶解含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物的溶剂和步骤3)中含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物的溶液中的溶剂独立选自己烷、庚烷、环己烷、甲基环己烷、石油醚或己烷、庚烷、环己烷、甲基环己烷、石油醚中至少一种与醋酸异丙酯、乙酸叔丁酯、乙酸乙酯、乙醚、异丙醚、甲基叔丁醚、甲基环戊基醚、二氯甲烷、氯仿中的至少一种形成的混合溶剂中的至少一种。

[0121] 优选地，步骤2)中溶解N端保护的脱保护试剂的溶剂、步骤3)中溶解N-保护氨基酸或N-保护肽、缩合试剂的溶剂独立选自酰胺类溶剂。

[0122] 优选地，上述酰胺类溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二乙基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基-吡咯烷酮、N-乙基-吡咯烷酮、1,3-二甲基咪唑啉酮、1,3-二甲基-3,4,5,6-四氢-2-嘧啶酮中的至少一种。

[0123] 优选地，步骤2)和步骤3)中的高极性溶剂选自水、醇类、腈类、酰胺类、亚砜类、砜类、水溶性醇醚类中的至少一种。

[0124] 优选地，步骤2)和步骤3)中的高极性溶剂选自水、甲醇、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基-吡咯烷酮、1,3-二甲基咪唑啉酮、1,3-二甲基-3,4,5,6-四氢-2-嘧啶酮、二甲基亚砜中、环丁砜中的至少一种。

[0125] 需要说明的是，步骤2)中，当将含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物溶解于溶剂中，加入N端保护的脱保护试剂溶液形成均相体系进行N端脱保护时，溶解含有芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物的溶剂不含有烃类或含有部分烃类，但该部分烃类不影响形成均相体系，溶解N端保护的脱保护试剂的溶剂与溶解芴环结构载体C端保护的N-保护氨基酸或N-保护肽化合物的溶剂可以为酯类溶剂、醚类溶剂、卤代烃类或酰胺类溶剂中的至少一种；优选地，醋酸乙酯，醋酸异丙酸、醋酸叔丁酯、异丙醚、甲基叔丁醚、甲基环戊基醚、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基-吡咯烷酮、1,3-二甲基咪唑啉酮、1,3-二甲基-3,4,5,6-四氢-2-嘧啶酮中的至少一种；同样的步骤3)中，在含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物的溶液中，加入N-保护氨基酸或N-保护肽溶液，后加入缩合试剂溶液形成均相体系进行缩合反应时，含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物的溶液的溶剂不含有烃类或含有部分烃类，但该部分烃类不影响形成均相体系，溶解N-保护氨基酸或N-保护肽和缩合试剂的溶剂与溶解含有芴环结构载体C端保护的N-去保护氨基酸或N-去保护肽化合物的溶剂相可以选自酯类溶剂、醚类溶剂或酰胺类溶剂中的至少一种，优选地，醋酸乙酯，醋酸异丙酯、醋酸叔丁酯、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基-吡咯烷酮、1,3-二甲基咪唑啉酮、1,3-二甲基-3,4,5,6-四氢-2-嘧啶酮中的至少一种。

[0126] 本发明的肽合成方法中，仅通过加入高极性溶剂就可以将目标产物和杂质进行很好的分离，特别是在非均相体系中，从而大大简化了后处理的操作步骤。

[0127] 优选地，上述N-保护氨基酸或N-保护肽的用量为上述含有芴环结构的化合物的0.8～3.0当量，上述缩合试剂的用量为上述含有芴环结构的化合物的0.8～3.0当量。

[0128] 优选地，上述N-保护氨基酸或N-保护肽的用量为上述含有芴环结构的化合物的1～1.1当量，上述缩合试剂的用量为上述含有芴环结构的化合物的1～1.2当量。

[0129] 另外，在肽合成反应中，将本发明的化合物导入氨基酸或肽，作为C端的保护基，在导入本发明的化合物过程中，可以将X＝OH的化合物先转化成等价的活性物，如卤代物、磺酸酯，再与氨基酸或肽反应，也可以直接酯化或酰胺化；导入X＝NHRa的化合物通过常规的缩合方法与氨基酸和肽反应即可完成，操作步骤可与步骤3)相同或不同。反应可在均相和非均相溶剂体系进行，其中X＝OH的载体接入反应优选在均相中进行，X＝NHRa的载体接入反应优选在非均相溶剂中进行。

[0130] 若需要，本领域的技术人员可以依据常规的方法对肽链进行后续C端修饰或N端修饰、或通过选择性侧链去保护再进行如环合或引入其他基团的反应。

[0131] 本发明的有益效果是：

[0132] 1、本发明提供了一种能应用于肽液相合成的保护载体，使用这种保护载体的肽合成反应，在合适的溶剂体系中，反应速度快，试剂利用率高；同时，通过简单的液液萃取分离即能够进行有效纯化，最终可获得纯度较高的产品，因而后处理操作简单；并且，合成过程中溶解度变化小，操作流程通用性强，可以发展成一种普适型的生产方法。

[0133] 2、本发明的含有芴环结构的化合物含有非极性和极性两部分结构，使其既能溶于非极性溶剂，又溶于极性溶剂，因此适合在非极性溶剂与极性溶剂组成的均相或非均相混合溶剂体系中，特别是烃类或烃类与醚类、酯类中的至少一种溶剂形成的混合溶剂与酰胺类极性溶剂组成的非均相体系，作为保护载体进行肽的合成反应；并且以此类载体进行的肽合成反应具有：①反应速度快，副产物少；②反应试剂利用率高，试剂用量少，成本低，三废少；③后处理萃取分层杂质和产物的分离效果好产物纯度高；④合成过程中中间体化合物的溶解度和反应速率变化小，氨基酸或肽片断接入重复性好，操作简便，普适性强，适合作为通用型生产方法的优势。

具体实施方式

[0134] 下面进一步列举实施例以详细说明本发明。同样应理解，以下实施例只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域技术人员根据本发明阐述的原理做出的一些非本质的改进和调整均属于本发明的保护范围。下述示例具体的工艺参数等也仅是合适范围中的一个示例，即本领域技术人员可以通过本文的说明做合适范围内的选择，而并非要限定于下文示例的具体数据。

[0135] 本说明书中和以下的实施例中，下述缩写所代表的物质为：

[0136] DCM：二氯甲烷

[0137] DIPEA：N，N-二异丙基乙胺

[0138] DMAP：4-二甲氨基吡啶

[0139] DMF：N，N-二甲基甲酰胺

[0140] EA：乙酸乙酯

[0141] EDCI:1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐

[0142] HBTU：O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯

[0143] HOBt：1-羟基苯并三唑

[0144] HONB：N-羟基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺

[0145] PE：石油醚

[0146] TFA：三氟乙酸

[0147] TIS：三异丙基硅烷

[0148] 实施例1

[0149] 2-(2-(2-(3，4，5-三(异辛氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-001)的合成：

[0150]

[0151] 3，4，5-三羟基苯甲酸甲酯(18.4g，0.1mol，1-1)、异辛基溴(2-乙基-己基溴)(63.7g，0.33mol)、碳酸钾(55.2g，0.4mol)和DMF(150mL)常温混合，加热至110-120℃反应12h。冷却至室温，搅拌下倒入石油醚(150mL)和水(150mL)混合液中。分去下层，上层石油醚溶液用水(200mL×2)洗涤，浓缩得油状中间体1-2粗品；

[0152] 将中间体1-2粗品溶于四氢呋喃(100mL)，加入甲醇(50mL)和30％NaOH溶液(67g)，搅拌反应3h，加入石油醚(100mL)和水(200mL)，搅拌10min后，分去下层；加入2N盐酸(100mL)，再搅拌10min，分去下层；上层水洗至pH 6-7，浓缩得3，4，5-三(异辛氧基)-苯甲酸48.0g(1-2)；

[0153] 3，4，5-三(异辛氧基)-苯甲酸(45.5g，0.09mol)、2-(2-氯乙氧基)-乙胺盐酸盐(16.0g，0.1mol)、和二氯甲烷(200mL)混合，磁力搅拌，冷却至5-10℃；依次加入HOBt(13.5g，0.1mol)、二异丙基乙胺(18g，0.14mol)和EDCI(19.2，0.1mol)；在5-10℃下保温10min，撤去冷浴，自然升至室温反应3h。依次用水(100mL)、饱和碳酸氢钠(100mL×2)、1N盐酸(50mL)和饱和食盐水(50mL)洗涤，浓缩得2-(2-(3，4，5-三(异辛氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙基氯55.1g(1-3)；

[0154] 2-羟基-9-芴酮(9.8g，0.05mol，1-4)、2-(2-(3，4，5-三(异辛氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙基氯(30.6g，0.06mol)、碳酸钾(16.6g，0.12mol)、碘化钾(0.05g)和DMF(150mL)常温混合，机械搅拌，加热至115-120℃反应8-10h，冷却至室温，搅拌下倒入石油醚(150ml)和水(150ml)混合液中。分去下层，石油醚层用水(200mL×2)洗，减压浓缩得2-(2-(2-(3，4，5-三(异辛氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-9-芴酮(1-5)粗品。

[0155] 将以上芴酮(1-5)粗品溶解于无水乙醇(100mL)和四氢呋喃(100mL)，加入盐酸羟胺(5.2g，0.075mol)和三乙胺(7.6g，0.075mol)，加热至75-80℃反应4-5h；冷却至室温，将反应液倒入石油醚(150mL)和水(300mL)混合液中。分去下层，石油醚层用水(200mL×2)洗，减压浓缩得中间体肟(1-6)粗品。将肟粗品溶解于四氢呋喃(120mL)，加入醋酸(50mL)，加热至55-60℃，分批加入锌粉(9.8g，0.15mol)。加毕，保温继续反应2h，过滤除去过量的锌粉，浓缩除去四氢呋喃和醋酸。加入石油醚(200mL)重新溶解，依次用10％NaOHaq(100mL×2)和饱和食盐水洗，浓缩得FL-001粗品。柱层析纯化(100％PE→100％EA→95％EA+5％MeOH)得2-(2-(2-(3，4，5-三(异辛氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-001)22.5g。

[0156] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：0.85-1.00(m，18H)，1.30-1.80(m，27H)，3.60-4.20(m，14H)，4.71(s，1H)，6.60-6.65(m，1H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(s，2H)，7.15-7.25(m，2H)，+
7.30-7.40(m，1H)，7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]：773.5461。

[0157] 实施例2

[0158] 2-(2-(2-(3，4，5-三(异壬氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-002)的合成：

[0159] 实施例2中的FL-002的合成方法与实施例1一致，不同之处在于：实施例2以异壬基溴(3，5，5-三甲基-己基溴)代替实施例1中的异辛基溴；

[0160]

[0161] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：0.85-1.00(m，36H)，1.15-1.25(m，3H)，1.20-1.30(m，3H)，1.55-1.65(m，3H)，1.70-1.90(m，6H)，3.60-4.20(m，14H)，4.71(s，1H)，6.60-6.65(m，1H)，
6.90-6.97(d，1H)，7.00(s，2H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，7.55-7.65(m，3H)；
+
HRMS TOF[M+1]：815.9930。

[0162] 实施例3

[0163] 2-(2-(2-(3，4，5-三(异构十烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-003)的合成：

[0164] 实施例3中的FL-003的合成方法与实施例1一致，不同之处在于：以异构十烷基溴(通过Exxal 10溴化制备)代替实施例1中的异辛基溴；

[0165]

[0166] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，57H)，3.60-4.20(m，14H)，4.71(s，1H)，6.60-6.65(m，1H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(m，2H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，+
7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]：857.6401。

[0167] 异构十烷基溴的制备(溴化物的制备)：

[0168] 异构十醇(Exxal 10)(100mL)和37％HBr(300mL)在三口烧瓶中混合，机械搅拌下，缓慢加入浓硫酸(30mL)，混合反应液加热到115-120℃反应。GC分析醇<0.5％后停止反应。降温至50℃以下，加入石油醚(100mL)萃取，石油醚层用水先至中性，减压除去石油醚后得到异构十烷基溴。

[0169] 实施例4

[0170] 2-(2-(2-(3，4，5-三(八/十/十二烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-004)的合成：

[0171] 实施例4中的FL-004的合成方法与实施例1一致，不同之处在于：以正辛烷基溴、正癸烷基溴和正十二烷基溴(1：1：1)代替实施例1中的异辛基溴；

[0172]

[0173] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，57H)，3.60-4.20(m，14H)，4.71(s，1H)，6.60-6.65(m，1H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(m，2H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，
7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：829.6087，857.6401，885.6716。

[0174] 实施例5

[0175] 2-(2-(2-(3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-005)的合成：

[0176] 实施例5中的FL-005的合成方法与实施例1一致，不同之处在于：以异构十三烷基溴(通过Exxal 13代替实施例3中的Exxal 10按实施例3溴化物的制备方法制备)代替实施例1中的异辛基溴；

[0177]

[0178] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，75H)，3.60-4.20(m，14H)，4.71(s，1H)，6.60-6.65(m，1H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(m，2H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，
7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：983.7810。

[0179] 实施例6

[0180] 2-(2-(2-(3，4，5-三(2，3-二氢植烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-006)的合成：

[0181] 实施例6中的FL-006的合成方法与实施例1一致，不同之处在于：以2，3-二氢植烷基溴(3，7，11，15-四甲基－十六烷基溴)代替实施例1中的异辛基溴；

[0182]

[0183] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，117H)，3.60-4.20(m，14H)，4.71(s，1H)，6.60-6.65(m，1H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(m，2H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，
7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：1278.1096。

[0184] 实施例7

[0185] 2-(2-(2-(N'-苄基-3，4，5-三(异壬氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-007)的合成

[0186]

[0187] 实施例7的FL-007合成方法同实施例1，不同之处在于：以异壬基溴代替异辛基溴，N-苄基-2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐代替实施例1中的2-(2-氯乙基)氧基)-乙胺盐酸盐；

[0188] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-1.40(m，42H)，1.50-2.00(m，9H)，3.40-4.20(m，14)，4.71(s，1H)，4.80-4.90(m，2H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(m，2H)，7.15-7.40(m，8H)，
7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：905.6402。

[0189] N-苄基-2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐的制备

[0190] 二甘醇胺(21.0g，0.2mol)溶解于无水乙醇(100mL)，加入苯甲醛(21.2g，0.2mol)，常温反应半小时；降温至5-10℃，加入硼氢化钠(11.4g，0.3mol)，升至室温反应2h；降温至5-10℃，用浓盐酸调pH至1，减压除去乙醇；余下物加水(200mL)溶解，用二氯甲烷(50mL)萃取，丢弃二氯甲烷层，水层用10％NaOH溶液调pH值至>14；用二氯甲烷(100mL×2)萃取，合并二氯甲烷萃取液，用水(50mL)和饱和食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得N-苄基-二乙醇胺粗品(23.4g)；

[0191] 将N-苄基-二乙醇胺粗品(23.4g，0.12mol)溶解于二氯甲烷(150mL)，冷却至0-5℃，滴加氯化亚砜(42.8g，0.36mol)；滴加完毕后，加热回流反应3h，减压除去二氯甲烷和未反应的氯化亚砜；余下物加入甲苯(200mL)打浆，过滤干燥得N-苄基-2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐(25.0g)。

[0192] 实施例8

[0193] 2-(2-(2-(N'-苄基-3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-008)的合成

[0194]

[0195] 实施例8的FL-008合成方法同实施例1，不同之处在于：以异构十三烷基溴代替异辛基溴，N-苄基-2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐代替实施例1中的2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐；

[0196] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，57H)，3.40-4.20(m，14)，4.71(s，1H)，4.80-4.90(m，2H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(m，2H)，7.15-7.40(m，8H)，7.55-7.65(m，3H)；
HRMS TOF[M+1]+：1073.8278。

[0197] 实施例9

[0198] 2，7-二(2-(2-(3，4，5-三(异壬氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-009)的合成：

[0199]

[0200] 实施例9的FL-009合成方法同实施例2，不同之处在于：以2，7-二羟基-9-芴酮代替2-羟基-9-芴酮；

[0201] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：0.85-1.00(m，72H)，1.15-1.25(m，6H)，1.20-1.30(m，6H)，1.55-1.65(m，6H)，1.70-1.90(m，12H)，3.60-4.20(m，28H)，4.71(s，1H)，6.60-6.65(m，2H)，
6.90-6.97(d，2H)，7.00(s，4H)，7.15-7.20(m，2H)，7.40-7.50(d，2H)；HRMS TOF[M+1]+：
1449.0900。

[0202] 实施例10

[0203] 2，7-二(2-(2-(3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-009)的合成：

[0204]

[0205] 实施例10的FL-010合成方法同实施例5，不同之处在于：以2，7-二羟基-9-芴酮代替2-羟基-9-芴酮；

[0206] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：0.85-2.00(m，150H)，3.60-4.20(m，28H)，4.71(s，1H)，6.60-6.65(m，2H)，6.90-6.97(d，2H)，7.00(m，4H)，7.15-7.20(m，2H)，7.40-7.50(d，2H)；
HRMS TOF[M+1]+：1784.4582。

[0207] 实施例11

[0208] 2-(2-(2-(N'-(3，4-二(异构十三烷氧基)-苄基)-乙酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-011)的合成：

[0209]

[0210] 3，4-二羟基-苯甲醛(13.8g，0.1mol，11-1)、异构十三烷基溴(63.1g，0.24mol)、碳酸钾(41.4g，0.3mol)和DMF(200mL)混合，加热至90-100℃反应10h；搅拌下倒入预先放入石油醚(200mL)和水(200mL)的反应瓶中，分去下层，上层用水(100mL)和饱和食盐水(100mL)洗涤，浓缩得中间体11-2粗品；

[0211] 以上粗品溶解于四氢呋喃(100mL)和乙醇(200mL)，加入2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐(16.0g，0.1mol)和三乙胺(10.0g，0.1mol)，常温下反应3h；降温至0-5℃，加入硼氢化钠(3.8g，0.1mol)；自然升至室温反应2h，加入1N盐酸至无气泡产生，pH 7-8；加入石油醚(300mL)和水(300mL)，搅拌10min后静置分层，分去下层，上层用水(100mL×2)和饱和食盐水洗，浓缩得中间体11-3粗品；

[0212] 将中间体11-3粗品溶解于乙酸乙酯(300mL)；加入三乙胺(15.0g，0.15mol)和醋酐(10.3g，0.1mol)，常温下反应半小时；加入水搅拌10min，分去水层；上层乙酸乙酯溶液水(100mL×2)洗，浓缩得中间体11-4粗品，柱层析纯化(石油醚→石油醚：乙酸乙酯＝10:1)得中间体11-4 38.0g；

[0213] 以中间体11-4和2-羟基-9-芴酮为原料，按实施例1的中间体1-3至FL-001的方法步骤合成(2-(2-(N’-(3，4-二(异构十三烷氧基)-苄基)-乙酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-011)。

[0214] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，50H)，2.10-2.20(s，3H)，3.60-4.20(m，12H)，4.68(s，2H)，4.71(s，1H)，6.60-6.65(m，2H)，6.70-6.75(m，1H)，6.90-6.97(m，2H)，+
7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，7.55-7.65(m，3H)；HRMSTOF[M+1]：813.6140。

[0215] 实施例12

[0216] 2-(2-(2-(N'-(3，4-二(异构十三烷氧基)-苄基)-异壬酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺的合成

[0217]

[0218] 实施例12的FL-012合成方法同实施例11，不同之处是以异壬酰氯代替实施例11的中的醋酐。

[0219] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，65H)，2.10-2.40(m，2H)，3.60-4.20(m，12H)，4.68(s，2H)，4.71(s，1H)，6.60-6.65(m，2H)，6.70-6.75(m，1H)，6.90-6.97(m，2H)，
7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，7.55-7.65(m，3H)；HRMSTOF[M+1]+：911.7234。

[0220] 实施例13

[0221] 2-(2-(2-(N'-(3，4-二(异构十三烷氧基)-苄基)-(3，4，5-三(异壬氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-013)的合成：

[0222]

[0223] 以3，4，5-三异壬氧基苯甲酸(实施例2的中间体)代替中间体1-2和中间体11-3代替2-(2-氯乙氧基)-乙胺盐酸盐，按照实施例1的方法合成3-(2-(2-(N'-(3，4-二(异构十三烷氧基)-苄基)-(3，4，5-三(异壬氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-013)；

[0224] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，101H)，3.40-4.20(m，18H)，4.60-4.75(m，3H)，6.60-6.65(m，2H)，6.70-6.75(m，1H)，6.90-6.97(m，4H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：1302.0366。

[0225] 实施例14

[0226] 2-(2-(2-(3，5-二(2，3-二氢植烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-014)的合成：

[0227]

[0228] 实施例14的FL-014合成方法同实施例6，不同之处在于：以3，5-二羟基苯甲酸甲酯代替实施例6中的3，4，5-三羟基苯甲酸甲酯；

[0229] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，78H)，3.60-4.20(m，12H)，4.70(s，1H)，6.50-6.60(m，1H)，6.60-6.65(m，1H)，6.85-6.97(d，3H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，
1H)，7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：981.8018。

[0230] 实施例15

[0231] 2-(2-(2-(3，4-二(异构十三烷氧基)-苯乙酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-015)的合成：

[0232]

[0233] 实施例15的FL-015合成方法同实施例5，不同之处在于：以3，4-二羟基苯乙酸甲酯代替实施例5中的3，4，5-三羟基苯甲酸甲酯；

[0234] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.70-1.90(m，50H)，3.40-4.10(m，14H)，4.70(s，1H)，6.60-6.65(m，1H)，6.70-6.75(m，2H)，6.90-7.00(m，2H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，
1H)，7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：799.5982。

[0235] 实施例16

[0236] 2-(2-(N'-甲基-3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-016)的合成：

[0237]

[0238] 实施例16的FL-016合成方法同实施例5，不同之处在于：以N-甲基-2-氯乙胺盐酸盐代替实施例5中的2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐；

[0239] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，75H)，2.90-3.05(m，3H)，3.60-4.20(m，10H)，4.71(s，1H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(m，2H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，
7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：953.7703。

[0240] 实施例17

[0241] 2，7-二(2-(N'-苄基-2-异壬酰胺基-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-017)的合成：

[0242]

[0243] 实施例17的FL-017合成方法同实施例1，不同之处在于：异壬酸代替实施例1中的3，4，5-二异辛基苯甲酸(中间体1-2)，以N-苄基-2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐代替实施例1中的2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐，以2，7-二羟基-9-芴酮代替2-羟基-9-芴酮；

[0244] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.8-1.90(m，30H)，2.10-2.35(m，4H)3.40-3.80(m，12H)，4.10-4.20(m，4H)，4.60-4.80(m，5H)，6.90-6.97(d，2H)，7.00(m，4H)，7.15-7.40(m，12H)，
7.40-7.50(d，2H)；HRMS TOF[M+1]+：848.5572。

[0245] 实施例18

[0246] 2-(2-(N'-苄基-2-异硬脂酰胺基-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-018)的合成：

[0247]

[0248] 实施例18的FL-018合成方法同实施例1，不同之处在于：异硬脂酸代替实施例1中的3，4，5-二异辛基苯甲酸(中间体1-2)，以N-苄基-2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐代替实施例1中的2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐；

[0249] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.8-1.90(m，33H)，2.30-2.50(m，1H)3.40-4.10(m，8H)，+4.60-4.80(m，3H)，6.90-6.97(d，1H)，7.15-7.40(m，8H)，7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]：
641.4675。

[0250] 实施例19

[0251] 2-((5-(3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-2-酮-3-氮代-己基)氧基)-芴-9-胺(FL-019)的合成：

[0252]

[0253] 酸(19-1)(35.8g，0.05mol)、HONB(10.8g，0.06mol)溶解于DCM(150mL)；加入EDCI(11.5g，0.06mol)常温反应1h；反应液依次用水(100mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)、1N盐酸(100mL)和饱和食盐水洗涤得中间体19-2的二氯甲烷溶液，此溶液直接用于下一步反应；

[0254] 1，3-丙二胺(11.1g，0.15mol)溶解于二氯甲烷(20mL)，常温下滴入上一步所得二氯甲烷溶液；加毕，常温反应半小时，用水(100mL×2)洗涤得中间体19-3的二氯甲烷溶液，直接用于下一步反应；

[0255] 上一步所得二氯甲烷溶液冷却至0-5℃，加入三乙胺(10g，0.1mol)；保温0-5℃，滴加2-氯乙酰氯(5.6g，0.05mol)；滴毕保温0-5℃反应0.5h，依次用1N盐酸(100mL)，水(100mL)，饱和食盐水(50mL)洗涤，浓缩得中间体19-4粗品。

[0256] 以中间体19-4代替实施例1的中间体1-3，按实施例1方法步骤合成FL-019；

[0257] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.0(m，78H)，3.40-3.50(m，4H)，4.00-4.10(m，6H)，4.45-4.50(m，2H)，4.71(s，1H)，6.60-6.65(m，2H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(m，2H)，7.15-+
7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]：1010.7920。

[0258] 实施例20

[0259] 2-(2-(N′-苄基-(3-(N″-苄基-3，4，5-三异构十三烷氧基-苯甲酰胺基)-丙胺基)-2-酮-乙氧基)-芴-9-胺(FL-020)的合成：

[0260]

[0261] 实施例20的FL-020合成方法同实施例19，不同之处在于：以N,N'-二苄基-1，3-丙二胺代替实施例19中的1，3-丙二胺；

[0262] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.0(m，78H)，3.40-3.50(m，4H)，4.00-4.10(m，6H)，4.45-4.50(m，2H)，4.7-4.9(m，5H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(m，2H)，7.15-7.40(m，13H)，
7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：1190.8858。

[0263] 实施例21

[0264] 2-((2-(2-(3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-丙酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-021)的合成：

[0265]

[0266] Boc-Ala-OH(18.9g，0.1mol，21-1)、2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐(16.0g，0.1mol)、HOBt(14.9，0.11mol)和三乙胺(15.1g，0.15mol)混合于DMF(150mL)，冷却至5-10℃；加入EDCI(21.1g，0.11mol)，保温5-10℃反应0.5h，自然升至室温反应1h；依次用水(100mL)、饱和碳酸氢钠(100mL)、1N盐酸(100mL)和饱和食盐水(50mL)洗涤；浓缩得中间体
21-2粗品；

[0267] 将以上粗品用乙醚(200mL)溶解，滴加4N HCl/乙醚溶液(200mL)，常温搅拌5h，过滤收集固体为中间体21-3；

[0268] 以中间体21-3代替2-(2-氯乙基)氧基-乙胺盐酸盐，按实施例5的方法合成FL-021；

[0269] 1H-NMR(400MHz，CDCl3):δ0.80-2.0(m，78H)，3.45-4.15(m，14)，4.60-4.75(m，2H)，6.60-6.65(m，1H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(m，2H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，
7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：1054.8180。

[0270] 实施例22

[0271] 2-(2-(2-(N″-甲基-3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-022)的合成：

[0272]

[0273] 实施例22的FL-021合成方法同实施例21，不同之处在于：Boc-(Me)Gly-OH代替Boc-Ala-OH；

[0274] 1H-NMR(400MHz，CDCl3):δ0.80-2.00(m，75H)，2.90-3.00(m，3H)，3.45-4.15(m，14)，4.55-4.60(s，2H)，6.90-6.97(d，1H)，7.00(m，2H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，
1H)，7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：1054.8180。

[0275] 实施例23

[0276] 2-(2-(2-((2，6-二(3，4，5-三(异壬烷氧基)-苯甲酰胺基)-己酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-023)的合成：

[0277]

[0278] 赖氨酸(7.3g，0.05mol，23-1)溶解于四氢呋喃(100mL)和水(50mL)，加入LiOH(1.2g，0.05mol)；混合物加热至70℃，滴加活性酯19-2(96.6，0.11mol)的四氢呋喃(200mL)溶液；滴毕，保温反应半小时；冷至室温，加入1N盐酸(50mL)，用石油醚(200mL)萃取；上层石油醚溶液依次用水(100mL)和饱和食盐水(100mL)洗涤，浓缩得中间体23-2粗品；

[0279] 以中间体23-2代替实施例1的中间体1-2，按实施例1的方法步骤合成FL-023；

[0280] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，154H)，3.65-4.15(m，22)，4.55-4.60(m，1H)，6.30-6.35(m，1H)，6.90-6.97(m，2H)，7.00(m，4H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，
1H)，7.55-7.65(m，4H)；HRMS TOF[M+1]+：1810.4973。

[0281] 实施例24

[0282] 2-(2-(2-(4-(3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-丁酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-024)的合成：

[0283]

[0284] 实施例24的FL-024合成方法同实施例23，不同之处在于：以4-氨基-丁酸代替实施例23中的赖氨酸；

[0285] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，77H)，2.25-2.35(m，2H)，3.40-3.50(m，4H)，3.55-4.10(m，12H)，4.71(s，1H)，6.15-6.25(m，1H)，6.60-6.65(m，1H)，6.90-6.97(d，
1H)，7.00(m，2H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：
1068.8337。

[0286] 实施例25

[0287] 2-(2-(2-(2，6-二异硬脂酰胺基-己酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-芴-9-胺(FL-025)的合成：

[0288]

[0289] 赖氨酸(14.6.3g，0.1mol)溶解于四氢呋喃(150mL)和水(100mL)，加入NaOH(4.0g，0.1mol)；将反应液冷却至0-5℃；剧烈搅拌下同时滴加异硬脂酰氯(2，2，4，8，10，10-六甲基十一烷-5-酰氯)(66.6g，0.22mol)和20％NaOH(44g)，控制滴加速度使反应温度维持在0-5℃；滴毕，保温0-5℃反应半小时，用1N盐酸调pH值至1；用石油醚(300mL)萃取；石油醚溶液依次用水(100mL)和饱和食盐水(100mL)洗涤；浓缩，柱层析纯化得中间体二异硬脂酰赖氨酸50.5g；

[0290] 以二异硬脂酰赖氨酸代替实施例23的23-2按实施例23的步骤合成FL-025；

[0291] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，74H)，2.30-2.50(m，2H)，3.55-4.20(m，10H)，4.30-4.40(m，1H)，4.71(s，1H)，6.15-6.25(m，1H)，6.90-6.97(m，2H)，7.15-7.25(m，
2H)，7.30-7.40(m，1H)，7.55-7.65(m，4H)；HRMS TOF[M+1]+：945.7766。

[0292] 实施例26

[0293] 2-(2-(2-(3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-9-苯基-芴-9-醇(FL-026)的合成：

[0294]

[0295] 格氏试剂制备：

[0296] 镁粉(10.6g，0.44mol)浸泡于干燥四氢呋喃(50mL)，氮气保护；加入少量碘后，搅拌下缓慢滴加溴苯(62.8g，0.4mol，26-1)的干燥四氢呋喃(150mL)溶液；控制滴加速度使反应温度保持在40℃以下；加毕，保温40℃反应4h，得26-2。在反应液中加入2-羟基-9-芴酮(9.8g，0.05mol，26-3)的无水四氢呋喃(50mL)溶液，回流反应20h；将反应液冷却至室温，用1N氯化铵水溶液终止反应；用二氯甲烷(200mL×2)萃取；合并的萃取液用饱和食盐水(200mL×2)洗涤；减压浓缩得粗品；柱层析纯化得中间体26-4 7.8g。

[0297] 取中间体26-4(2.7g，0.01mol)溶解于DMF(50mL)，加入碳酸钾(5.5g，0.04mol)、碘化钾(0.1g)和中间体26-5(9.9g，0.012mol)，加热至80-85℃反应过夜；加入石油醚(200mL)和水(100mL)，搅拌10min后静置分层；分去水层，石油醚层用水(100mL)洗，浓缩得粗品。柱层析纯化(100％PE→100％EA)得FL-026 8.2g。

[0298] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，75H)，2.80-2.90(m，1H)，3.60-4.20(m，14H)，6.60-6.65(m，1H)，6.80-6.91(m，3H)，7.00(m，2H)，7.15-7.40(m，7H)，7.55-7.65(m，
2H)；HRMS TOF[M+1]+：1060.7965，[M-17]+：1042.7855。

[0299] 实施例27

[0300] 2-(2-(2-(N′-苄基-3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-9-苯基-芴-9-醇(FL-027)的合成：

[0301]

[0302] 实施例27的FL-027合成方法同实施例26，不同之处在于：中间体27-1代替实施例26中的中间体26-5；

[0303] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，75H)，2.80-2.90(m，1H)，3.60-4.20(m，14H)，4.70-4.75(m，2H)，6.80-6.91(m，3H)，7.00(m，2H)，7.15-7.40(m，12H)，7.55-7.65(m，
2H)；HRMS TOF[M+1]+：1150.8430。

[0304] 实施例28

[0305] 2-(2-(2-(3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-9-(3-氟苯基)-芴-9-醇(FL-028)的合成：

[0306]

[0307] 实施例28的FL-028合成方法同实施例26，不同之处在于：3-氟-1-溴苯代替溴苯；

[0308] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，75H)，2.80-2.90(m，1H)，3.60-4.20(m，14H)，4.70-4.75(m，2H)，6.80-6.91(m，3H)，7.00(m，2H)，7.05-7.35(m，6H)，7.55-7.60(m，
2H)；HRMS TOF[M+1]+：1078.7865。

[0309] 实施例29

[0310] 2-(2-(2-(3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-9-(4-氯苯基)-芴-9-醇(FL-029)的合成：

[0311]

[0312] 实施例29的FL-029合成方法同实施例26，不同之处在于：4-氯-1-溴苯代替溴苯；

[0313] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，75H)，2.80-2.90(m，1H)，3.60-4.20(m，14H)，6.60-6.65(m，1H)，6.80-6.91(m，2H)，7.00(m，2H)，7.15-7.45(m，7H)，7.55-7.60(m，
2H)；HRMS TOF[M+1]+：1094.7572。

[0314] 实施例30

[0315] 2,7-二(2-(2-(3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-9-(3-氟苯基)-芴-9-醇(FL-030)的合成：

[0316]

[0317] 实施例30的FL-030合成方法同实施例26，不同之处在于：2,7-二羟基-芴酮代替2-羟基-芴酮；

[0318] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，150H)，3.00-3.05(m，1H)，3.60-4.10(m，28H)，6.60-6.65(m，2H)，6.85-6.91(m，2H)，7.00(m，4H)，7.10-7.20(s，2H)，7.20-7.35(m，
5H),7.45-7.50(m，2H)；HRMS TOF[M+1]+：1862.4806。

[0319] 实施例31

[0320] 2,7-二(2-(2-(3，4，5-三(异构十三烷氧基)-苯甲酰胺基)-乙氧基)-乙氧基)-9-(3-氟苯基)-芴-9-醇(FL-031)的合成：

[0321]

[0322] 实施例31的FL-031合成方法同实施例27，不同之处在于：2,7-二羟基-芴酮代替2-羟基-芴酮；

[0323] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，150H)，3.10-3.15(m，1H)，3.60-4.20(m，28H)，6.60-6.65(m，2H)，6.80-6.90(m，4H)，6.90-7.00(m，4H)，7.00-7.05(m，2H)，7.10-
7.20(m，2H),7.40-7.45(m，2H)；HRMS TOF[M+1]+：1880.4717。

[0324] 实施例32

[0325] 利用载体FL-002非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2，包括如下步骤：

[0326] 1)将FL-002溶解于庚烷配成溶液，搅拌降温至15-20℃；Fmoc-Arg(Pbf)-OH(FL-002的1～1.5当量)、二异丙基乙胺(FL-002的1～2当量)和HOBt(FL-002的1～1.5当量)的DMF溶液加入与载体溶液混合；保持15-20℃，加入HBTU(FL-002的1～1.5当量)DMF溶液进行反应。

[0327] 反应完全后加入水(庚烷和水的体积比为(1～15)：1)，继续搅拌10min，静置分层；分去下层，加入DMF和水混合溶液(DMF与水的体积比为(1～8)：1)，搅拌5min，静置分层；分去下层，上层直接用于脱Fmoc步骤。

[0328] 2)上一步骤所得上层溶液加热至40-50℃，加入巯基丙酸、二乙烯三胺和DMF混合液(巯基丙酸和二乙烯三胺的用量为FL-002的3～5当量)，保温40-50℃反应。反应完全后加入DMF和水混合溶液(DMF和水的体积比为(1～5)：(5～1))，搅拌5min，静置分层；分去下层，上层加入DMF和水混合溶液(DMF与水的体积比为(1～8)：1)，搅拌5min，静置分层；分去下层，上层重复以上洗涤步骤至洗出液中性，上层直接用于下一个氨基酸缩合；

[0329] 3)按以上方法连续接入Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Glu(OtBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Glu(OtBu)-OH，并脱除Fmoc后得H-Glu(OtBu)-Met-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-(FL-002)庚烷溶液，浓缩得固体；

[0330] 4)将以上固体溶解于TFA：TIS：水(94：3：3，裂解液，是固体重量的5-10倍)，常温搅拌2h。缓慢滴加进0-10℃甲基叔丁基醚(甲基叔丁基醚的重量为裂解液的2-20倍)，保温0-10℃搅拌半小时；过滤，滤饼用甲基叔丁基醚洗至洗出液中性，干燥得H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2粗品，HPLC纯度87.3％，HRMS TOF[M+1]+:889.2309。

[0331] 实施例33

[0332] 利用载体FL-004非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0333] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成FL-004，HPLC纯度87.5％。

[0334] 实施例34

[0335] 利用载体FL-005非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0336] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成FL-005，HPLC纯度90.0％。

[0337] 实施例35

[0338] 利用载体FL-006非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0339] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成FL-006，HPLC纯度85.0％。

[0340] 实施例36

[0341] 利用载体FL-008非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0342] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成FL-008，HPLC纯度91.6％。

[0343] 实施例37

[0344] 利用载体FL-009非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0345] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成FL-009，HPLC纯度86.5％。

[0346] 实施例38

[0347] 利用载体FL-012非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0348] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成FL-012，HPLC纯度87.0％。

[0349] 实施例39

[0350] 利用载体FL-014非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0351] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成FL-014，HPLC纯度88.0％。

[0352] 实施例40

[0353] 利用载体FL-018非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0354] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成FL-018，HPLC纯度85.1％。

[0355] 实施例41

[0356] 利用载体FL-020非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0357] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成FL-020，HPLC纯度87.5％。

[0358] 实施例42

[0359] 利用载体FL-022非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0360] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成FL-022，HPLC纯度85.5％。

[0361] 实施例43

[0362] 利用载体FL-023非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0363] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成FL-023，HPLC纯度85.3％。

[0364] 实施例44

[0365] 利用载体FL-027非均相法合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH，包括如下步骤：

[0366] 1)载体活化：FL-027溶解于二氯甲烷；加入乙酰溴(FL-027的2-3当量)，常温反应1-3小时；反应结束后减压除去二氯甲烷和过量的乙酰溴；用二氯甲烷重新溶解，再次浓缩除去余下的乙酰溴得到FL-027溴化中间体。

[0367] 2)接入第一个氨基酸：FL-027溴化中间体溶解于醋酸异丙酯(2-4体积)，加入Fmoc-Ser(t-Bu)-OH(FL-027的1.5-2当量)、二异丙基乙胺(FL-027的1.5-3当量)；混合反应液加热至50-60℃反应6-8h；冷却至室温，加入庚烷(醋酸异丙酯5-10倍体积)；加入DMF和水混合溶液(DMF与水的体积比为(1～8)：1)，搅拌5min，静置分层；分去下层，上层直接用于脱Fmoc反应；

[0368] 3)脱Fmoc反应：上一步骤所得上层溶液加热至40-50℃，加入巯基丙酸、二乙烯三胺和DMF混合液(巯基丙酸和二乙烯三胺的用量为FL-027的3～5当量)，保温40-50℃反应。反应完全后加入DMF和水混合溶液(DMF和水的体积比为(1～5)：(5～1))，搅拌5min，静置分层；分去下层，上层加入DMF和水混合溶液(DMF与水的体积比为(1～8)：1)，搅拌5min，静置分层；分去下层，上层重复以上洗涤步骤至洗出液中性，上层直接用于下一个氨基酸缩合；

[0369] 4)接入第二个氨基酸：上一步骤所得上层溶液，加入Fmoc-Lys(Boc)-OH(FL-027的1～1.5当量)和DIPEA(DIPEA的用量为FL-027的2～3当量)的DMF溶液，搅拌降温至15-20℃；
加入HBTU/DMF溶液(其中HBTU的用量为FL-027的1～1.5当量)，保温15-20℃反应。反应完全后，加入水，搅拌5min，静置分层；分去下层，上层加入DMF和水混合溶液(DMF和水的体积比为(1～8)：1)，搅拌5min，静置分层；分去下层，上层直接用于脱Fmoc反应；

[0370] 5)重复以上步骤3)和4)依次接入Fmoc-Thr(t-Bu)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，并脱除Fmoc后得H-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Gly-Thr(t-Bu)-Lys(Boc)-Ser(t-Bu)-(FL-027)庚烷溶液，浓缩得固体；

[0371] 6)将以上固体溶解于TFA：TIS：水(94:3:3，裂解液，是固体重量的5-10倍)，常温搅拌2h。缓慢滴加进0-10℃甲基叔丁基醚(甲基叔丁基醚的重量为裂解液的2-20倍)，保温0-10℃搅拌半小时；过滤，滤饼用甲基叔丁基醚洗至洗出液中性，干燥得

[0372] H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH粗品，HPLC纯度94.5％，HRMS TOF[M+1]+：676.4102。

[0373] 实施例45

[0374] 利用载体FL-028非均相法合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH：

[0375] 本实施例的合成方法同实施例44，不同之处在于：将实施例44的载体换成FL-028，HPLC纯度95.5％。

[0376] 实施例46

[0377] 利用载体FL-029非均相法合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH：

[0378] 本实施例的合成方法同实施例44，不同之处在于：将实施例44的载体换成FL-029，HPLC纯度93.5％。

[0379] 实施例47

[0380] 利用载体FL-031非均相法合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH：

[0381] 本实施例的合成方法同实施例44，不同之处在于：将实施例44的载体换成FL-031，HPLC纯度92.0％。

[0382] 实施例48

[0383] 利用载体FL-002均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0384] A)将FL-002(8.2g，10.0mmol)溶解于醋酸异丙酯(100mL)，加入Fmoc-Arg(Pbf)-OH(9.7g，15.0mmol)、HOBt(2.0g，15mmol)、和DIPEA(3.24g，25.0mmol)，搅拌降温至5-10℃，加入HBTU(5.62g，15mmol)进行反应；反应完全后加入乙腈/水(9：1)洗涤(根据需要补加醋酸异丙酯)，醋酸异丙酯溶液用于下一步脱Fmoc反应。

[0385] B)步骤1)所得醋酸异丙酯溶液，加入二乙烯三胺(6.2g，60mmol)和巯基丙酸(4.3g，40mmol)，加热至40-50℃反应，TLC分析反应完全后，用乙腈/水(9：1)洗涤(根据需要补加醋酸异丙酯)除去副产物，醋酸异丙酯溶液用于下一个氨基酸缩合。

[0386] C)按以上方法连续接入Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Glu(OtBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Glu(OtBu)-OH，并脱除Fmoc后得H-Glu(OtBu)-Met-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-(FL-002)醋酸异丙酯，浓缩得固体；

[0387] D)按实施32的方法裂解得H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2粗品，HPLC纯度70.2％。

[0388] 实施例49

[0389] 利用载体FL-020均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0390] 本实施例的合成方法同实施例48，不同之处在于：将实施例48的载体换成FL-020，HPLC纯度68.5％。

[0391] 实施例50

[0392] 利用载体FL-023均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0393] 本实施例的合成方法同实施例48，不同之处在于：将实施例48的载体换成FL-023，HPLC纯度71.5％。

[0394] 实施例51

[0395] 利用载体FL-027均相法合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH：

[0396] A)载体FL-027(11.5g，10mmol)的活化和第一个氨基酸接入反应同实施例44，反应完全后，用乙腈/水(9：1)洗涤(根据需要补加醋酸异丙酯)，醋酸异丙酯溶液用于下一步脱Fmoc反应。

[0397] B)所得醋酸异丙酯溶液，加入二乙烯三胺(6.2g，60mmol)和巯基丙酸(4.3g，40mmol)，加热至40-50℃反应，TLC分析反应完全后，用乙腈/水(9：1)洗涤(根据需要补加醋酸异丙酯)除去副产物，醋酸异丙酯溶液用于下一个氨基酸缩合。

[0398] C)将上一步所得Fmoc反应所得醋酸异丙酯溶液，加入Fmoc-Lys(Boc)-OH(7.0g，15.0mmol)、HOBt(2.0g，15mmol)、和DIPEA(3.24g，25.0mmol)，搅拌降温至5-10℃，加入HBTU(5.62g，15mmol)进行反应；反应完全后加入乙腈/水(9：1)洗涤(根据需要补加醋酸异丙酯)，醋酸异丙酯溶液用于下一步脱Fmoc反应。

[0399] D)重复以上步骤2)和步骤3)依次接入Fmoc-Thr(t-Bu)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，并脱除Fmoc后得H-Arg(Pbf)-Lys(Boc)-Gly-Thr(t-Bu)-Lys(Boc)-Ser(t-Bu)-(FL-0027)醋酸异丙酯溶液，浓缩得固体；

[0400] E)按实施例48的方法裂解得H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH，HPLC纯度82.0％。

[0401] 实施例52

[0402] 利用载体FL-031均相法合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH：

[0403] 实施例的合成方法同实施例51，不同之处在于：将实施例51的载体换成FL-031，HPLC纯度80.0％。

[0404] 对比例1

[0405] 2-(2，3-二氢植烷氧基)-芴-9-胺(REF-001)的合成：

[0406]

[0407] 对比例1中REF-001的合成方法同实施例1，以2，3-二氢植烷基溴代替中间体1-3与2-羟基9-芴酮反应得到中间体R1-2，然后按同样的方法步骤合成REF-001；

[0408] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ0.80-2.00(m，39H)，4.00-4.10(m，2H)，4.76(s，1H)，6.90-6.97(d，1H)，7.15-7.25(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，7.55-7.65(m，3H)；HRMS TOF[M+1]+：
478.4040。

[0409] 对比例2

[0410] 2，7-二(2，3-二氢植烷氧基)-芴-9-胺(REF-002)的合成：

[0411]

[0412] 对比例2中REF-002的合成方法同对比例1，不同之处是：以2,7-二羟基-9-芴酮代替2-羟基-9-芴酮；

[0413] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：0.8-1.85(m，78H)，3.90-4.00(m，4H)，4.71(s，1H)，6.60-6.70(m，2H)，6.85-6.90(d，2H)，7.10-7.15(s，2H)，7.40-7.50(d，2H)；HRMS TOF[M+1]+：
774.7122。

[0414] 对比例3

[0415] 2-(2，3-二氢植烷氧基)-9-(3-氟苯基)-芴-9-醇(REF-003)的合成：

[0416]

[0417] 中间体R1-2(9.5g，0.02mol)溶解于无水四氢呋喃(100mL)，常温下滴加格氏试剂(R3-1)(0.1mol)；滴毕，加热回流反应5h；冷却至室温，滴加饱和氯化铵水溶液中止反应；用石油醚(200mL)萃取，石油醚层用水(100mL×2)和饱和食盐水(100mL)洗涤；减压浓缩得粗品，柱层析纯化得REF-003 8.3g；

[0418] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：0.8-1.85(m，39H)，2.80-2.90(m，1H)，3.90-4.00(m，2H)，6.84-6.95(m，3H)，7.00-7.10(m，1H)，7.13-7.29(m，4H)，7.30-7.40(m，1H)，7.55-7.60(m，
2H)；HRMS TOF[M-17]+：555.3994，HRMS TOF[M+1]+：573.4100。

[0419] 对比例4

[0420] 2，7-二(2,3-二氢植烷氧基)-芴-(3-氟苯基)-芴-9-醇(REF-003)的合成：

[0421]

[0422] 对比例4中REF-004的合成方法同对比例3，不同之处是：以2,7-二(2,3-二氢植烷氧基)-9-芴酮代替2-二氢植烷氧基-9-芴酮；

[0423] 1H-NMR(400MHz，CDCl3)：0.8-1.85(m，78H)，2.80-2.90(m，1H)，3.90-4.00(m，4H)，6.80-6.90(m，4H)，6.90-7.00(m，1H)，7.10-7.15(m，1H)，7.20-7.30(m，2H)，7.45-7.50(d，
2H)；HRMS TOF[M-17]+：852.3582，HRMS TOF[M+1]+：869.7180。

[0424] 对比例5

[0425] 利用载体REF-001非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0426] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成REF-001，HPLC纯度73.5％。

[0427] 对比例6

[0428] 利用载体REF-002非均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2：

[0429] 本实施例的合成方法同实施例32，不同之处在于：将实施例32的载体换成REF-002，HPLC纯度67.8％。

[0430] 对比例7

[0431] 利用载体REF-003非均相法合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH：

[0432] 本实施例的合成方法同实施例44，不同之处在于：将实施例44的载体换成REF-003，HPLC纯度83.0％。

[0433] 对比例8

[0434] 利用载体REF-004非均相法合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH：

[0435] 本实施例的合成方法同实施例44，不同之处在于：将实施例44的载体换成REF-004，HPLC纯度80.5％。

[0436] 对比例9

[0437] 利用载体REF-001均相法合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2

[0438] A)缩合反应：将REF-001(4.8g，10mmol)溶解于醋酸异丙酯(100mL)，搅拌降温至5-10℃；依次加入Fmoc-Arg(Pbf)-OH(9.8g，15mmol)、二异丙基乙胺(3.25g，25mmol)、HOBt(2.0g，15mmol)、和HBTU(5.62g，15mmol)进行反应；保持5-10℃，反应半小时，自然升到室温反应至反应完全。

[0439] B)反应完全后加入乙腈/水(9：1)洗涤(根据需要补加醋酸异丙酯)，TLC分析Fmoc-Arg(Pbf)-OH完全除去后，醋酸异丙酯溶液用于下一步反应。

[0440] C)脱Fmoc反应：缩合反应所得醋酸异丙酯溶液，加入二乙烯三烯(6.2g，60mmol)和巯基丙酸(4.3g，40mmol)，加热至40-50℃反应，TLC分析反应完全后，用乙腈/水(9：1)洗涤(根据需要补加醋酸异丙酯)洗除去副产物，醋酸异丙酯溶液用于下一个氨基酸缩合。

[0441] D)按以上方法连续接入Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Glu(OtBu)-OH，Fmoc-Met-OH，Fmoc-Glu(OtBu)-OH，并脱除Fmoc后得H-Glu(OtBu)-Met-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-(FL-002)醋酸异丙酯溶液，浓缩得固体；

[0442] E)固体按实施例32的方法裂解得H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2，HPLC纯度45.0％。

[0443] 对比例10

[0444] 利用载体REF-003均相法合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH：

[0445] 本实施例的载体活化的方法同实施例44的步骤1)、接第一个氨基酸的方法同实施例44的步骤2)，脱Fmoc和其它氨基酸的接入方法同对比例9，不用之处在于：使用的载体为REF-003，HPLC纯度50.5％。

[0446] 测试例1：

[0447] 将本发明实施例1～31合成的化合物及对比例1～4合成的化合物在室温下(25～30℃)对常用溶剂中的溶解度进行考察，结果如表1所示：

[0448] 表1

[0449]

[0450]

[0451] 由表1可知：本发明化合物在庚烷、乙酸异丙酯(i-PrOAc)、甲基叔丁基醚(MTBE)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中均具有较好的溶解度，尤其在DMF中的溶解度远远高于对比例。

[0452] 测试例2：

[0453] 对使用本发明化合物作为载体利用非均相反应合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2六肽(实施例32-43)和合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH六肽(实施例44-47)、对比例1-2的化合物作为载体利用非均相反应合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2六肽(对比例5-6)和对比例3-4的化合物作为载体利用非均相反应合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH六肽(对比例7-8)，及使用本发明化合物作为载体利用均相反应合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2六肽(实施例48-50)和合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH六肽(实施例51-52)、对比例1的化合物作为载体利用均相反应合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2六肽(对比例9)、对比例3的化合物作为载体利用均相反应合成H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH六肽的反应时间、纯度进行统计，结果如表2所示，其中，AA1为第一个氨基酸，AA2为第二个氨基酸，AA3为第三个氨基酸，AA4为第四个氨基酸，AA5为第五个氨基酸，AA6为第六个氨基酸，tR为缩合反应时间，tW为缩合反应后处理时间，tD为去保护反应时间，tDw为去保护反应后处理时间，单位：小时；

[0454] 表2

[0455]

[0456]

[0457]

[0458] *表示均相法反应，其余为非均相反应。

[0459] 由表2可知，在非均相体系中，本发明化合物作为载体进行H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2六肽合成时，相对于对比例REF-001～002，其缩合反应时间，缩合反应后处理时间、去保护反应时间、去保护反应后处理时间明显缩短；其中，对比例REF-001～002的缩合反应时间大于2小时，缩合反应后处理时间大于1小时，去保护反应时间大于2.5小时，去保护反应后处理时间大于2小时；而本发明化合物的缩合反应时间为0.5～1.0小时，缩合反应后处理时间为0.5～1.0小时，去保护反应时间为0.5～1.0小时，去保护反应后处理时间为0.5～1.0小时，每个氨基酸片断接入步骤所需时间相差很小，重复性好；而对比例REF-001～002每个氨基酸片断接入步骤所需时间相差很大。

[0460] 本发明化合物作为载体进行H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH六肽合成时，在非均相体系相对于对比例REF-003～004也取得一样的结果：缩合反应时间，缩合反应后处理时间、去保护反应时间、去保护反应后处理时间明显缩短，其中在肽链延长阶段(AA2-AA5)每个氨基酸的接入时间变化非常小，缩合、去保护和两个后处理时间都是0.5～1.0h，重复性好。

[0461] 此外，对比例REF-001～004的化合物在合成肽的过程中，溶解度下降较快，后处理过程中需要不断补加溶剂才可保持溶液状态，从AA4开始出现凝胶化现象，而本发明化合物在多肽合成中，溶解度基本没有变化，具有较好的溶解度；本发明化合物作为载体在非均相体系中合成肽的产物，其中碳端为酰胺的肽纯度大于85％，部分大于90％，碳端为羧基的肽纯度大于90％，部分大于95％，而对比例碳端为酰胺REF-001～REF-002的产品纯度不高于75％，碳端为羧基的REF-003～REF-004纯度不高于85％。

[0462] 并且，当本发明含有芴环结构的化合物为FL-005、FL-008、FL-014、FL-028和FL-029时，作为载体合成肽的缩合反应时间、缩合反应后处理时间、去保护反应时间、去保护反应后处理时间更短，其产品纯度更高。

[0463] 使用均相体系合成H-Glu-Met-Glu-Gln-Arg-Arg-NH2和H-Arg-Lys-Gly-Thr-Lys-Ser-OH时，使用本发明化合物作为载体的缩合反应时间也明显缩短，一般小于5h，而对比载体一般都大于5h，部分氨基酸10h，并且使用本发明化合物作为载体产品纯度也明显较高。

[0464] 综上，使用本发明化合物作为载体，在均相或非均相体系中均适用，且相对于对比例中的化合物均具有更优的效果，同时本发明的化合物在非均相体系中比在均相体系中具有更好的效果，特别是在中低极性溶剂和酰胺溶剂形成的两相体系中(非均相体系)，进行肽的合成，能显著缩短缩合反应时间、缩合反应后处理时间、去保护反应时间、去保护反应后处理时间，最终得到纯度较高的产品。