3R-吲哚甲基-6R-氨基酸修饰的2,5-二酮哌嗪,其合成,活性和应用转让专利
申请号 : CN201810561803.2
文献号 : CN110551108B
文献日 : 2021-03-30
发明人 : 赵明 , 张筱宜 , 彭师奇 , 宋越
申请人 : 首都医科大学
摘要 :
本发明公开了下式的3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(式中AA为L‑Ala残基,L‑Ile残基,L‑Leu残基,L‑Met残基,L‑Pro残基,L‑Val残基),公开了它们的制备方法,公开了它们的抗肿瘤转移活性,因而本发明公开了它们在制备抗肿瘤转移药物中的应用。
权利要求 :
1.下式的3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪,式中AA为L‑Ala残基,L‑Ile残基,L‑Leu残基,L‑Met残基,L‑Pro残基或L‑Val残基。
2.权利要求1所述的3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪的制备方法，该方法包括：
(1)D‑Boc‑Lys(Cbz)与D‑Trp‑OBzl偶联得D‑Boc‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl；
(2)D‑Boc‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl在浓度为4N的氯化氢或乙酸乙酯溶液中脱除Boc保护基得D‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl；
(3)D‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl的乙酸乙酯溶液经5％碳酸氢钠水溶液洗涤3次并环合为
3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑苄氧羰基氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪；
(4)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑苄氧羰基氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪催化氢解脱苄氧羰基得3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪；
(5)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪与L‑Boc‑Lys(Cbz)偶联得
3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Cbz)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪；
(6)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Cbz)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪催化氢解脱除苄氧羰基得3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑Boc‑Lys‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪；
(7)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑Boc‑Lys‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪与Boc‑AA偶联得化合物3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪；
(8)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪在浓度为4N的氯化氢或乙酸乙酯试剂中脱除Boc保护基得3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪。
3.权利要求1所述的3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪在制备抗肿瘤转移药物中的应用。
说明书 :
3R‑吲哚甲基‑6R‑氨基酸修饰的2,5‑二酮哌嗪,其合成,活性
和应用
技术领域
[0001] 本发明涉及3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪,涉及它们的制备方法以及它们的抗肿瘤转移活性，因而本发明涉及它们在制备抗肿瘤转移药
物中的应用。本发明属于生物医药领域。
物中的应用。本发明属于生物医药领域。
背景技术
[0002] 肿瘤严重威胁人类的健康。除了自身对肿瘤患者的预后恶劣之外，肿瘤并发的转移进一步恶化患者的预后。例如，超过90％以上肿瘤患者都是死于转移。由于现有抗肿瘤药
物没有抗肿瘤转移作用，所以肿瘤化疗的临床疗效不理想。发明抗肿瘤转移的药物是临床
的迫切需求。此前，发明人曾公开S,S‑,R,R‑,R,S‑和S,R‑四种构型的的二酮哌嗪在0.5μM浓
度可抑制HCCLM3(高转移人肝癌细胞)迁移和侵袭。后来发明人又公开R,R‑构型的二酮哌嗪
在最低有效剂量为5μmol/kg/天的剂量时可抑制C57BL/6小鼠的肿瘤向肺转移。为了降低最
低有效剂量，发明人对R,R‑构型的二酮哌嗪的丁氨基展开了各种修饰。经过3年探索，发现
用L‑Ala,L‑Ile,L‑Leu,L‑Met,L‑Pro和L‑Val酰化侧链氨基的L‑Lys酰化R,R‑构型的二酮哌
嗪的4‑氨基正丁基可使抗肿瘤转移的最低有效剂量降至0.5μmol/kg/天。最低有效剂量降
低10倍表明，这种结构修饰有突出的技术效果。根据这些发现，发明人提出了本发明。
物没有抗肿瘤转移作用，所以肿瘤化疗的临床疗效不理想。发明抗肿瘤转移的药物是临床
的迫切需求。此前，发明人曾公开S,S‑,R,R‑,R,S‑和S,R‑四种构型的的二酮哌嗪在0.5μM浓
度可抑制HCCLM3(高转移人肝癌细胞)迁移和侵袭。后来发明人又公开R,R‑构型的二酮哌嗪
在最低有效剂量为5μmol/kg/天的剂量时可抑制C57BL/6小鼠的肿瘤向肺转移。为了降低最
低有效剂量，发明人对R,R‑构型的二酮哌嗪的丁氨基展开了各种修饰。经过3年探索，发现
用L‑Ala,L‑Ile,L‑Leu,L‑Met,L‑Pro和L‑Val酰化侧链氨基的L‑Lys酰化R,R‑构型的二酮哌
嗪的4‑氨基正丁基可使抗肿瘤转移的最低有效剂量降至0.5μmol/kg/天。最低有效剂量降
低10倍表明，这种结构修饰有突出的技术效果。根据这些发现，发明人提出了本发明。
发明内容
[0003] 本发明的第一个内容是提供下式的3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪，AA为L‑Ala残基,L‑Ile残基,L‑Leu残基,L‑Met残基,L‑Pro残基,L‑Val
残基。
残基。
[0004]
[0005] 本发明的第二个内容是提供3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(式中AA为L‑Ala残基,L‑Ile残基,L‑Leu残基,L‑Met残基,L‑Pro残基,L‑Val残
基)的合成方法，该方法包括：
基)的合成方法，该方法包括：
[0006] (1)D‑Boc‑Lys(Cbz)与D‑Trp‑OBzl偶联得D‑Boc‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl；
[0007] (2)D‑Boc‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl在浓度为4N的氯化氢/乙酸乙酯溶液中脱除Boc保护基得D‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl；
[0008] (3)D‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl在含5％碳酸氢钠水溶液的乙酸乙酯中环合生成3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑苄氧羰基氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(1)；
[0009] (4)1催化氢解脱苄氧羰基得3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(2)；
[0010] (5)2与L‑Boc‑Lys(Cbz)偶联得3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Cbz)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(3)；
[0011] (6)3催化氢解脱除苄氧羰基得3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑Boc‑Lys‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(4)；
[0012] (7)4与Boc‑AA(AA为L‑Ala残基,L‑Ile残基,L‑Leu残基,L‑Met残基,L‑Pro残基,L‑Val残基)偶联得化合物3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二
酮哌嗪(5a‑f)；
酮哌嗪(5a‑f)；
[0013] (8)5a‑f在浓度为4N的氯化氢/乙酸乙酯试剂中脱除Boc保护基得3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(6a‑f)。
[0014] 本发明的第三个内容是评价3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(AA为L‑Ala残基,L‑Ile残基,L‑Leu残基,L‑Met残基,L‑Pro残基,L‑Val残基)抑
制C57BL/6小鼠肺癌转移的活性。
制C57BL/6小鼠肺癌转移的活性。
附图说明
[0015] 图1 3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(AA)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(式中AA为L‑Ala残基,L‑Ile残基,L‑Leu残基,L‑Met残基,L‑Pro残基,L‑Val残基)6a‑f的合成路线
.5a,6a中AA为L‑Ala残基；5b,6b中AA为L‑Ile残基；5c,6c中AA为L‑Leu残基；5d,6d中AA为L‑
Met残基；5e,6e中AA为L‑Pro残基；5f,6f中AA为L‑Val残基；i)二环己基碳二亚胺(DCC),1‑
羟基苯并三氮唑(HOBt),N‑甲基吗啉(NMM),四氢呋喃(THF)；ii)4N氯化氢‑乙酸乙酯试剂；
iii)乙酸乙酯,5％碳酸氢钠；iv)二甲基甲酰胺(DMF),Pd/C,H2。
.5a,6a中AA为L‑Ala残基；5b,6b中AA为L‑Ile残基；5c,6c中AA为L‑Leu残基；5d,6d中AA为L‑
Met残基；5e,6e中AA为L‑Pro残基；5f,6f中AA为L‑Val残基；i)二环己基碳二亚胺(DCC),1‑
羟基苯并三氮唑(HOBt),N‑甲基吗啉(NMM),四氢呋喃(THF)；ii)4N氯化氢‑乙酸乙酯试剂；
iii)乙酸乙酯,5％碳酸氢钠；iv)二甲基甲酰胺(DMF),Pd/C,H2。
具体实施方式
[0016] 为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。
[0017] 实施例1制备D‑Boc‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl
[0018] 将7.7g(20mmol)D‑Boc‑Lys(Cbz)混悬于100mL无水四氢呋喃(THF)中，在冰浴下依次往悬浮液中加2.7g(20mmol)1‑羟基苯并三氮唑(HOBt)及5.0g(25mmol)二环己基碳二亚
胺(DCC)，然后搅拌30min。之后，加8.0g(25mmol)D‑Trp‑OBzl。反应混合物逐滴加入N‑甲基
吗啉(NMM)调节pH至9。反应混合物先在冰浴下搅拌1h，再室温搅拌12h。反应混合物过滤，滤
液减压浓缩，残留物用150mL乙酸乙酯溶液溶解。得到的乙酸乙酯溶液依次用5％KHSO4水溶
液洗3次，饱和NaCl水溶液洗3次。乙酸乙酯层用无水Na2SO4干燥12h，过滤，滤液减压浓缩至
干。得到的黄色糖浆物经硅胶柱层析纯化(CH2Cl2/CH3OH,100:1)得到12.0g(88％)标题化合
+
物，为无色粉末。ESI‑MS(m/e):657[M+H]。
胺(DCC)，然后搅拌30min。之后，加8.0g(25mmol)D‑Trp‑OBzl。反应混合物逐滴加入N‑甲基
吗啉(NMM)调节pH至9。反应混合物先在冰浴下搅拌1h，再室温搅拌12h。反应混合物过滤，滤
液减压浓缩，残留物用150mL乙酸乙酯溶液溶解。得到的乙酸乙酯溶液依次用5％KHSO4水溶
液洗3次，饱和NaCl水溶液洗3次。乙酸乙酯层用无水Na2SO4干燥12h，过滤，滤液减压浓缩至
干。得到的黄色糖浆物经硅胶柱层析纯化(CH2Cl2/CH3OH,100:1)得到12.0g(88％)标题化合
+
物，为无色粉末。ESI‑MS(m/e):657[M+H]。
[0019] 实施例2制备D‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl
[0020] 在冰浴与搅拌下3.8g(5mmol)D‑Boc‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl与52mL氯化氢的乙酸乙酯溶液(4M)缓慢混合。得到的溶液在冰浴中搅拌5h。之后，反应混合物减压浓缩。残留物
用50mL无水乙酸乙酯溶解，得到的溶液减压浓缩。该操作重复三次。残留物用无水乙醚充分
+
洗，得到3.41g(93％)标题化合物，为黄色粉末。ESI‑MS(m/e):557[M+H]。
用50mL无水乙酸乙酯溶解，得到的溶液减压浓缩。该操作重复三次。残留物用无水乙醚充分
+
洗，得到3.41g(93％)标题化合物，为黄色粉末。ESI‑MS(m/e):557[M+H]。
[0021] 实施例3制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑苄氧羰基氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(1)
[0022] 将3.45g(6.2mmol)D‑Lys(Cbz)‑D‑Trp‑OBzl用150mL乙酸乙酯溶解。得到的溶液用浓度为5％的碳酸氢钠水溶液洗三次，之后乙酸乙酯溶液室温搅拌12h使无色固体充分析
+
出。滤出1.8g(51％)标题化合物。ESI‑MS(m/e):449[M+H]。
+
出。滤出1.8g(51％)标题化合物。ESI‑MS(m/e):449[M+H]。
[0023] 实施例4制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(2)
[0024] 向1.9g(4.2mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑苄氧羰基氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(1)与20mL无水N,N‑二甲基甲酰胺(DMF)的溶液中加200mg Pd/C，通入H2，室温搅拌反应
12h。滤去Pd/C，滤液减压浓缩得1.2g(92％)标题化合物，为无色粉末。ESI‑MS(m/e):315[M+
+
H]。
12h。滤去Pd/C，滤液减压浓缩得1.2g(92％)标题化合物，为无色粉末。ESI‑MS(m/e):315[M+
+
H]。
[0025] 实施例5制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Cbz)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(3)
[0026] 采用实施例1的方法从4.18g(11mmol)Boc‑Lys(Cbz)和3.14g(10.0mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(2)得到5.17g(76％)标题化合物，为无色
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):677[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.852(s,1H),8.045(d,
J＝1.8Hz,1H),7.916(d,J＝1.8Hz,1H),7.581(m,2H),7.345(m,6H),7.223(t,J＝
5.4Hz1H),7.025(m,2H),6.930(t,J＝6.9Hz,1H),6.714(d,J＝8.4Hz,1H),4.115(m,1H),
3.812(m,1H),3.499(m,1H),3.206(dd,J1＝16.5Hz,J2＝3.9Hz,1H),3.172(d,J＝3.9Hz,
1H),2.993(m,3H),2.764(m,2H),1.478(m,2H),1.381(m,11H),1.426(m,2H),0.971(m,3H),
0.600(m,3H)。
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):677[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.852(s,1H),8.045(d,
J＝1.8Hz,1H),7.916(d,J＝1.8Hz,1H),7.581(m,2H),7.345(m,6H),7.223(t,J＝
5.4Hz1H),7.025(m,2H),6.930(t,J＝6.9Hz,1H),6.714(d,J＝8.4Hz,1H),4.115(m,1H),
3.812(m,1H),3.499(m,1H),3.206(dd,J1＝16.5Hz,J2＝3.9Hz,1H),3.172(d,J＝3.9Hz,
1H),2.993(m,3H),2.764(m,2H),1.478(m,2H),1.381(m,11H),1.426(m,2H),0.971(m,3H),
0.600(m,3H)。
[0027] 实施例6制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑Boc‑Lys‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(4)
[0028] 采用实施例4的方法从1.65g(2.44mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Cbz)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(3)得到1.49g(90％)标题化合物，为无色粉末。ESI‑MS
+
(m/e):543[M+H]。
+
(m/e):543[M+H]。
[0029] 实施例7制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Ala)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(5a)
[0030] 采用实施例1的方法从680mg(3.6mmol)Boc‑Ala和1.62g(3mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑Boc‑Lys‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(4)得到1.58g(74％)标题化合物，为无色
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):714[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.855(s,1H),8.038(s,
1H),7.926(s,1H),7.593(s,1H),7.569(d,J＝4.8Hz 1H),7.302(d,J＝4.8Hz 1H),7.048
(s,1H),7.027(t,J＝8.1Hz 1H),6.930(t,J＝Hz 1H),6.791(d,J＝3.9Hz 1H),6.708(d,J
＝3.9Hz 1H),4.110(m,1H),3.909(m,1H),3.815(m,1H),3.499(m,1H),3.275(m,1H),3.043
(m,3H),2.760(m,2H),1.480(m,2H),1.375(m,20H),1.239(m,2H),1.157(d,J＝6.9Hz 1H),
0.969(m,3H),0.586(m,3H)。
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):714[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.855(s,1H),8.038(s,
1H),7.926(s,1H),7.593(s,1H),7.569(d,J＝4.8Hz 1H),7.302(d,J＝4.8Hz 1H),7.048
(s,1H),7.027(t,J＝8.1Hz 1H),6.930(t,J＝Hz 1H),6.791(d,J＝3.9Hz 1H),6.708(d,J
＝3.9Hz 1H),4.110(m,1H),3.909(m,1H),3.815(m,1H),3.499(m,1H),3.275(m,1H),3.043
(m,3H),2.760(m,2H),1.480(m,2H),1.375(m,20H),1.239(m,2H),1.157(d,J＝6.9Hz 1H),
0.969(m,3H),0.586(m,3H)。
[0031] 实施例8制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Ile)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(5b)
[0032] 采用实施例1的方法从832mg(3.6mmol)Boc‑Ile和1.62g(3mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑Boc‑Lys‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(4)得到1.81g(80％)标题化合物，为无色
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):756[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.851(s,1H),8.025(d,
J＝2.1Hz 1H),7.922(d,J＝2.1Hz 1H),7.830(m,1H),7.581(m,2H),7.300(d,J＝
7.8Hz1H),7.048(s,1H),7.023(t,J＝9.0Hz 1H),6.928(t,J＝9.0Hz 1H),6.694(d,J＝
7.8Hz 1H),6.580(d,J＝7.8Hz 1H),4.115(m,1H),3.773(m,1H),3.746(m,1H),3.495(m,
1H),3.255(dd,J1＝14.4Hz,J2＝3.9Hz,1H),3.031(m,3H),2.754(m,2H),1.637(m,2H),
1.376(m,20H),1.245(m,2H),0.989(m,3H),0.803(m,6H),0.591(m,3H)。
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):756[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.851(s,1H),8.025(d,
J＝2.1Hz 1H),7.922(d,J＝2.1Hz 1H),7.830(m,1H),7.581(m,2H),7.300(d,J＝
7.8Hz1H),7.048(s,1H),7.023(t,J＝9.0Hz 1H),6.928(t,J＝9.0Hz 1H),6.694(d,J＝
7.8Hz 1H),6.580(d,J＝7.8Hz 1H),4.115(m,1H),3.773(m,1H),3.746(m,1H),3.495(m,
1H),3.255(dd,J1＝14.4Hz,J2＝3.9Hz,1H),3.031(m,3H),2.754(m,2H),1.637(m,2H),
1.376(m,20H),1.245(m,2H),0.989(m,3H),0.803(m,6H),0.591(m,3H)。
[0033] 实施例9制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Leu)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(5c)
[0034] 采用实施例1的方法从832mg(3.6mmol)Boc‑Leu和1.62g(3mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑Boc‑Lys‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(4)得到1.81g(81％)标题化合物，为无色
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):756[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.855(s,1H),8.036(d,
J＝1.8Hz 1H),7.925(d,J＝1.8Hz 1H),7.769(m,1H),7.589(m,2H),7.300(d,J＝
8.1Hz1H),7.047(s,1H),7.022(t,J＝8.1Hz 1H),6.928(t,J＝8.1Hz 1H),6.730(m,2H),
4.116(m,1H),4.116(m,1H),3.927(m,1H),3.495(m,1H),3.255(dd,J1＝14.1Hz,J2＝3.9Hz,
1H),3.029(m,3H),2.735(m,2H),1.433(m,2H),1.378(m,21H),1.247(m,2H),0.949(m,3H),
0.858(m,6H),0.582(m,3H)。
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):756[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.855(s,1H),8.036(d,
J＝1.8Hz 1H),7.925(d,J＝1.8Hz 1H),7.769(m,1H),7.589(m,2H),7.300(d,J＝
8.1Hz1H),7.047(s,1H),7.022(t,J＝8.1Hz 1H),6.928(t,J＝8.1Hz 1H),6.730(m,2H),
4.116(m,1H),4.116(m,1H),3.927(m,1H),3.495(m,1H),3.255(dd,J1＝14.1Hz,J2＝3.9Hz,
1H),3.029(m,3H),2.735(m,2H),1.433(m,2H),1.378(m,21H),1.247(m,2H),0.949(m,3H),
0.858(m,6H),0.582(m,3H)。
[0035] 实施例10制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Met)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(5d)
[0036] 采用实施例1的方法从896mg(3.6mmol)Boc‑Met和1.62g(3mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑Boc‑Lys‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(4)得到1.81g(65％)标题化合物，为无色
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):774[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.861(s,1H),8.052(m,
1H),7.931(m,1H),7.801(m,1H),7.587(m,2H),7.296(m,1H),7.019(m,2H),6.923(m,2H),
6.728(m,1H),4.111(m,1H),3.947(m,1H),3.806(m,1H),3.489(m,1H),3.252(dd,J1＝
14.1Hz,J2＝3.9Hz,1H),3.034(m,3H),2.742(m,2H),2.047(m,2H),1.765(m,2H),1.456(m,
2H),1.374(m,20H),1.235(m,2H),0.957(m,3H),0.568(m,3H)。
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):774[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.861(s,1H),8.052(m,
1H),7.931(m,1H),7.801(m,1H),7.587(m,2H),7.296(m,1H),7.019(m,2H),6.923(m,2H),
6.728(m,1H),4.111(m,1H),3.947(m,1H),3.806(m,1H),3.489(m,1H),3.252(dd,J1＝
14.1Hz,J2＝3.9Hz,1H),3.034(m,3H),2.742(m,2H),2.047(m,2H),1.765(m,2H),1.456(m,
2H),1.374(m,20H),1.235(m,2H),0.957(m,3H),0.568(m,3H)。
[0037] 实施例11制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Pro)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(5e)
[0038] 采用实施例1的方法从774mg(3.6mmol)Boc‑Pro和1.62g(3mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑Boc‑Lys‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(4)得到950.4mg(45％)标题化合物，为无
+ 1
色粉末。ESI‑MS(m/e):740[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.899(s,1H),8.056
(m,1H),7.936(m,1H),7.778(m,1H),7.587(m,2H),7.281(m,2H),7.039(s,1H),7.020(t,J
＝7.2Hz 1H),6.923(t,J＝7.2Hz 1H),6.767(m,2H),4.120(m,1H),3.812(m,1H),3.491(m,
1H),3.458(m,1H),3.249(dd,J1＝14.1Hz,J2＝3.6Hz,1H),3.002(m,3H),2.732(m,2H),
1.978(m,2H),1.799(m,3H),1.476(m,4H),1.373(m,20H),1.235(m,2H),0.955(m,3H),
0.562(m,3H)。
+ 1
色粉末。ESI‑MS(m/e):740[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.899(s,1H),8.056
(m,1H),7.936(m,1H),7.778(m,1H),7.587(m,2H),7.281(m,2H),7.039(s,1H),7.020(t,J
＝7.2Hz 1H),6.923(t,J＝7.2Hz 1H),6.767(m,2H),4.120(m,1H),3.812(m,1H),3.491(m,
1H),3.458(m,1H),3.249(dd,J1＝14.1Hz,J2＝3.6Hz,1H),3.002(m,3H),2.732(m,2H),
1.978(m,2H),1.799(m,3H),1.476(m,4H),1.373(m,20H),1.235(m,2H),0.955(m,3H),
0.562(m,3H)。
[0039] 实施例12制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Val)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(5f)
[0040] 采用实施例1的方法从781mg(3.6mmol)Boc‑Val和1.62g(3mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑(4‑Boc‑Lys‑氨基正丁基)‑2,5‑二酮哌嗪(4)得到1.49g(67％)标题化合物，为无色
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):742[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.852(s,1H),8.029(d,
J＝2.1Hz 1H),7.922(d,J＝2.1Hz 1H),7.825(m,1H),7.581(d,J＝4.8Hz 1H),7.302(d,J
＝4.8Hz 1H),7.047(s,1H),7.022(t,J＝8.1Hz 1H),6.928(t,J＝8.1Hz 1H),6.698(d,J＝
8.4Hz 1H),6.548(d,J＝8.4Hz 1H),4.112(m,1H),3.801(m,1H),3.721(m,1H),3.495(m,
1H),3.277(dd,J1＝14.1Hz,J2＝3.9Hz,1H),3.176(m,3H),2.750(m,2H),1.889(m,1H),
1.481(m,2H),1.379(m,18H),1.243(m,2H),1.015(m,3H),0.817(m,3H),0.587(m,3H)。
+ 1
粉末。ESI‑MS(m/e):742[M+H]；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.852(s,1H),8.029(d,
J＝2.1Hz 1H),7.922(d,J＝2.1Hz 1H),7.825(m,1H),7.581(d,J＝4.8Hz 1H),7.302(d,J
＝4.8Hz 1H),7.047(s,1H),7.022(t,J＝8.1Hz 1H),6.928(t,J＝8.1Hz 1H),6.698(d,J＝
8.4Hz 1H),6.548(d,J＝8.4Hz 1H),4.112(m,1H),3.801(m,1H),3.721(m,1H),3.495(m,
1H),3.277(dd,J1＝14.1Hz,J2＝3.9Hz,1H),3.176(m,3H),2.750(m,2H),1.889(m,1H),
1.481(m,2H),1.379(m,18H),1.243(m,2H),1.015(m,3H),0.817(m,3H),0.587(m,3H)。
[0041] 实施例13制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(Ala)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(6a)
[0042] 采用实施例2的方法从100mg(0.14mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Ala)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪得到58.5mg(80％)标题化合物，为无色粉末。ESI‑MS(m/
+ 1
e):514[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.918(s,1H),8.058(m,1H),7.945(m,
1H),7.767(m,1H),7.643(m,1H),7.576(d,J＝4.8Hz,1H),7.301(d,J＝4.8Hz,1H),7.041
(s,1H),7.035(t,J＝7.5Hz 1H),6.927(t,J＝7.5Hz 1H),4.113(m,1H),3.505(m,1H),
3.021(m,3H),2.980(m,4H),2.772(m,2H),1.999(m,3H),1.538(m,1H),1.379(m,5H),1.108
(m,3H),0.955(m,3H),0.595(m,3H)。
+ 1
e):514[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.918(s,1H),8.058(m,1H),7.945(m,
1H),7.767(m,1H),7.643(m,1H),7.576(d,J＝4.8Hz,1H),7.301(d,J＝4.8Hz,1H),7.041
(s,1H),7.035(t,J＝7.5Hz 1H),6.927(t,J＝7.5Hz 1H),4.113(m,1H),3.505(m,1H),
3.021(m,3H),2.980(m,4H),2.772(m,2H),1.999(m,3H),1.538(m,1H),1.379(m,5H),1.108
(m,3H),0.955(m,3H),0.595(m,3H)。
[0043] 实施例14制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(Ile)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(6b)
[0044] 采用实施例2的方法从789mg(1mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Ile)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(5b)得到455mg(82％)标题化合物，为无色粉末。ESI‑MS
+ 1
(m/e):556[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.931(s,1H),8.061(m,1H),7.947
(m,1H),7.915(m,1H),7.783(m,1H),7.582(d,J＝7.8Hz 1H),7.308(d,J＝7.8Hz 1H),
7.048(s,1H),7.028(t,J＝7.5Hz 1H),6.932(t,J＝7.5Hz 1H),4.118(m,1H),3.508(m,
1H),3.255(dd,J1＝14.4Hz,J2＝3.3Hz,1H),3.101(m,3H),2.793(m,2H),1.676(m,1H),
1.540(m,1H),1.371(m,4H),1.279(m,2H),1.062(m,3H),0.987(m,3H),0.863(m,6H),0.584
(m,3H)。
+ 1
(m/e):556[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.931(s,1H),8.061(m,1H),7.947
(m,1H),7.915(m,1H),7.783(m,1H),7.582(d,J＝7.8Hz 1H),7.308(d,J＝7.8Hz 1H),
7.048(s,1H),7.028(t,J＝7.5Hz 1H),6.932(t,J＝7.5Hz 1H),4.118(m,1H),3.508(m,
1H),3.255(dd,J1＝14.4Hz,J2＝3.3Hz,1H),3.101(m,3H),2.793(m,2H),1.676(m,1H),
1.540(m,1H),1.371(m,4H),1.279(m,2H),1.062(m,3H),0.987(m,3H),0.863(m,6H),0.584
(m,3H)。
[0045] 实施例15制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(Leu)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(6c)
[0046] 采用实施例2的方法从789mg(1mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Leu)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(5c)得到421.8mg(76％)标题化合物，为无色粉末。ESI‑
+ 1 1
MS(m/e):556[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.922
(s,1H),8.566(m,1H),8.341(m,1H),8.165(m,4H),8.079(m,1H),7.955(m,1H),7.583(d,J
＝7.8Hz,1H),7.305(d,J＝7.8Hz,1H),7.051(s,1H),7.026(t,J＝7.8Hz,1H),6.093(t,J＝
7.8Hz,1H),4.126(m,1H),3.681(m,2H),3.511(m,1H),3.259(dd,J1＝12.0Hz,J2＝3.6Hz,
1H),3.137(m,1H),3.043(m,2H),2.835(m,2H),1.617(m,2H),1.554(m,3H),1.467(m,2H),
1.437(m,2H),0.997(m,3H),0.891(m,6H),0.615(m,3H)。
+ 1 1
MS(m/e):556[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.922
(s,1H),8.566(m,1H),8.341(m,1H),8.165(m,4H),8.079(m,1H),7.955(m,1H),7.583(d,J
＝7.8Hz,1H),7.305(d,J＝7.8Hz,1H),7.051(s,1H),7.026(t,J＝7.8Hz,1H),6.093(t,J＝
7.8Hz,1H),4.126(m,1H),3.681(m,2H),3.511(m,1H),3.259(dd,J1＝12.0Hz,J2＝3.6Hz,
1H),3.137(m,1H),3.043(m,2H),2.835(m,2H),1.617(m,2H),1.554(m,3H),1.467(m,2H),
1.437(m,2H),0.997(m,3H),0.891(m,6H),0.615(m,3H)。
[0047] 实施例16制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(Met)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(6d)
[0048] 采用实施例2的方法从616mg(0.8mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Met)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(5d)得到293mg(64％)标题化合物，为无色粉末。ESI‑MS
+ 1
(m/e):574[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.995(s,1H),8.747(m,1H),8.508
(m,1H),8.097(m,1H),8.038(m,1H),7.961(m,1H),7.578(d,J＝7.8Hz,1H),7.314(d,J＝
7.8Hz,1H),7.045(s,1H),7.023(t,J＝7.5Hz 1H),6.926(t,J＝7.5Hz 1H),4.121(m,1H),
3.841(m,1H),3.707(m,1H),3.505(m,1H),3.256(dd,J1＝14.4Hz,J2＝3.6Hz,1H),3.110(m,
2H),3.038(dd,J1＝14.4Hz,J2＝3.6Hz,1H),2.828(m,2H),2.085(m,2H),1.770(m,2H),
1.440(m,2H),1.330(m,2H),1.021(m,3H),0.595(m,3H)。
+ 1
(m/e):574[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.995(s,1H),8.747(m,1H),8.508
(m,1H),8.097(m,1H),8.038(m,1H),7.961(m,1H),7.578(d,J＝7.8Hz,1H),7.314(d,J＝
7.8Hz,1H),7.045(s,1H),7.023(t,J＝7.5Hz 1H),6.926(t,J＝7.5Hz 1H),4.121(m,1H),
3.841(m,1H),3.707(m,1H),3.505(m,1H),3.256(dd,J1＝14.4Hz,J2＝3.6Hz,1H),3.110(m,
2H),3.038(dd,J1＝14.4Hz,J2＝3.6Hz,1H),2.828(m,2H),2.085(m,2H),1.770(m,2H),
1.440(m,2H),1.330(m,2H),1.021(m,3H),0.595(m,3H)。
[0049] 实施例17制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(Pro)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(6e)
[0050] 采用实施例2的方法从520mg(0.7mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Pro)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(5e)得到242.0mg(64％)标题化合物，为无色粉末。ESI‑
+ 1
MS(m/e):540[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.930(s,1H),8.039(s,1H),7.977
(m,1H),7.937(s,1H),7.838(m,1H),7.778(d,J＝8.1Hz,1H),7.305(d,J＝8.1Hz,1H),
7.047(s,1H),7.026(t,J＝7.8Hz,1H),6.928(t,J＝7.8Hz,1H),4.115(m,1H),3.549(m,
1H),3.507(m,1H),3.257(dd,J1＝15.0Hz,J2＝3.6Hz,1H),3.062(m,3H),2.830(m,4H),
1.621(m,4H),1.412(m,3H),1.249(m,2H),0.983(m,3H),0.609(m,3H)。
+ 1
MS(m/e):540[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.930(s,1H),8.039(s,1H),7.977
(m,1H),7.937(s,1H),7.838(m,1H),7.778(d,J＝8.1Hz,1H),7.305(d,J＝8.1Hz,1H),
7.047(s,1H),7.026(t,J＝7.8Hz,1H),6.928(t,J＝7.8Hz,1H),4.115(m,1H),3.549(m,
1H),3.507(m,1H),3.257(dd,J1＝15.0Hz,J2＝3.6Hz,1H),3.062(m,3H),2.830(m,4H),
1.621(m,4H),1.412(m,3H),1.249(m,2H),0.983(m,3H),0.609(m,3H)。
[0051] 实施例18制备3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Lys(Val)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(6f)
[0052] 采用实施例2的方法从1.48g(2mmol)3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑Boc‑Lys(Boc‑Val)‑氨基正丁基]‑2,5‑二酮哌嗪(5f)得到973mg(90％)标题化合物，为无色粉末。ESI‑MS
+ 1
(m/e):542[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.953(s,1H),8.058(m,2H),7.984
(m,1H),7.944(m,1H),7.578(d,J＝7.8Hz,1H),7.307(d,J＝7.8Hz,1H),7.047(s,1H),
7.042(t,J＝7.2Hz,1H),6.927(t,J＝7.2Hz,1H),4.116(m,1H),3.505(m,1H),3.321(m,
1H),3.257(dd,J1＝14.4Hz,J2＝4.8Hz,1H),3.070(m,4H),2.791(m,2H),1.589(m,1H),
1.490(m,1H),1.408(m,2H),1.280(m,2H),0.997(m,2H),0.850(d,J＝6.9Hz,1H),0.825(d,
J＝6.9Hz,3H),0.607(m,3H)。
+ 1
(m/e):542[M+H] ；H NMR(300MHz,DMSO‑d6):δ/ppm＝10.953(s,1H),8.058(m,2H),7.984
(m,1H),7.944(m,1H),7.578(d,J＝7.8Hz,1H),7.307(d,J＝7.8Hz,1H),7.047(s,1H),
7.042(t,J＝7.2Hz,1H),6.927(t,J＝7.2Hz,1H),4.116(m,1H),3.505(m,1H),3.321(m,
1H),3.257(dd,J1＝14.4Hz,J2＝4.8Hz,1H),3.070(m,4H),2.791(m,2H),1.589(m,1H),
1.490(m,1H),1.408(m,2H),1.280(m,2H),0.997(m,2H),0.850(d,J＝6.9Hz,1H),0.825(d,
J＝6.9Hz,3H),0.607(m,3H)。
[0053] 实施例19测定化合物6a‑f的抗肿瘤转移活性
[0054] 本测定模型用Lewis小鼠肺癌细胞(LLC,购自ATCC)接种，选用DMEM培养基(含10％5
经灭活的胎牛血清,1×10U/L青霉素和100mg/L链霉素),按照贴壁细胞培养方法每两天传
代一次，富集细胞。待细胞生长状态良好并处于对数生长期时消化细胞，用生理盐水调整细
7
胞密度至1×10 个/mL。胎盘蓝染色，使活细胞计数>95％。取近交系C57BL/6雄性小鼠(SPF
级,体重20±2g)，左手固定小鼠。用75％乙醇对小鼠右前肢腋窝皮肤消毒。右手持1mL无菌
注射器往小鼠腋部皮下注射LLC肿瘤细胞悬液，每只小鼠注射0.2mL。小鼠接种10天后，长出
直径约4‑5mm的肿瘤即为瘤源。接种10天的Lewis肺癌荷瘤小鼠乙醚麻醉，脱颈椎处死。用
75％乙醇浸泡10min，消毒，在超净工作台上剥离瘤体。选择生长良好的肿瘤组织在无菌平
皿中剪碎，置于玻璃制造的组织匀浆器内。按瘤块重比生理盐水体积为1比3(g比mL)的比例
加温度为4℃的生理盐水，轻轻研磨制成细胞悬液。细胞悬液过200目细胞筛制单细胞悬液。
7
用生理盐水调单细胞悬液的细胞密度至1.5×10个/mL。胎盘蓝染色，使活细胞计数>95％。
左手固定近交系C57BL/6雄性小鼠，用75％的乙醇对小鼠右前肢腋窝皮肤消毒。右手持1mL
无菌注射器于小鼠腋部皮下注射瘤细胞悬液，每只注射0.2mL。接种10天后小鼠长出直径4‑
5mm的肿瘤，按测得的肿瘤体积将接种小鼠随机分组。每组12只小鼠。接种肿瘤的第11天小
鼠或口服公认的抗肿瘤转移肽RGDS的生理盐水溶液(剂量为20μmol/kg/天)或口服化合物
6a‑f的生理盐水溶液(剂量为0.5μmol/kg/天)或口服生理盐水(剂量为10mL/kg/天)，每天
给1次药，连续给药12天，每隔两天测量并记录肿瘤体积。最后一次给药的次日测量瘤体积，
乙醚麻醉脱颈椎处死，取小鼠的肿瘤称重，取小鼠的肺并计算肿瘤肺部转移的瘤节数。用t
检验对数据进行统计分析。结果见表1。在0.5μmol/kg/天剂量(最低有效剂量降低10倍)下
6a‑f不仅有效地抑制肿瘤肺转移，而且活性与20μmol/kg/天剂量的RGDS没有显著性差异。
这些数据表明，这种结构修饰有突出的技术效果。
经灭活的胎牛血清,1×10U/L青霉素和100mg/L链霉素),按照贴壁细胞培养方法每两天传
代一次，富集细胞。待细胞生长状态良好并处于对数生长期时消化细胞，用生理盐水调整细
7
胞密度至1×10 个/mL。胎盘蓝染色，使活细胞计数>95％。取近交系C57BL/6雄性小鼠(SPF
级,体重20±2g)，左手固定小鼠。用75％乙醇对小鼠右前肢腋窝皮肤消毒。右手持1mL无菌
注射器往小鼠腋部皮下注射LLC肿瘤细胞悬液，每只小鼠注射0.2mL。小鼠接种10天后，长出
直径约4‑5mm的肿瘤即为瘤源。接种10天的Lewis肺癌荷瘤小鼠乙醚麻醉，脱颈椎处死。用
75％乙醇浸泡10min，消毒，在超净工作台上剥离瘤体。选择生长良好的肿瘤组织在无菌平
皿中剪碎，置于玻璃制造的组织匀浆器内。按瘤块重比生理盐水体积为1比3(g比mL)的比例
加温度为4℃的生理盐水，轻轻研磨制成细胞悬液。细胞悬液过200目细胞筛制单细胞悬液。
7
用生理盐水调单细胞悬液的细胞密度至1.5×10个/mL。胎盘蓝染色，使活细胞计数>95％。
左手固定近交系C57BL/6雄性小鼠，用75％的乙醇对小鼠右前肢腋窝皮肤消毒。右手持1mL
无菌注射器于小鼠腋部皮下注射瘤细胞悬液，每只注射0.2mL。接种10天后小鼠长出直径4‑
5mm的肿瘤，按测得的肿瘤体积将接种小鼠随机分组。每组12只小鼠。接种肿瘤的第11天小
鼠或口服公认的抗肿瘤转移肽RGDS的生理盐水溶液(剂量为20μmol/kg/天)或口服化合物
6a‑f的生理盐水溶液(剂量为0.5μmol/kg/天)或口服生理盐水(剂量为10mL/kg/天)，每天
给1次药，连续给药12天，每隔两天测量并记录肿瘤体积。最后一次给药的次日测量瘤体积，
乙醚麻醉脱颈椎处死，取小鼠的肿瘤称重，取小鼠的肺并计算肿瘤肺部转移的瘤节数。用t
检验对数据进行统计分析。结果见表1。在0.5μmol/kg/天剂量(最低有效剂量降低10倍)下
6a‑f不仅有效地抑制肿瘤肺转移，而且活性与20μmol/kg/天剂量的RGDS没有显著性差异。
这些数据表明，这种结构修饰有突出的技术效果。
[0055] 表1化合物6a‑f的抗肿瘤转移活性
[0056]
[0057] a)与生理盐水比p<0.01,与RGDS比p>0.05；b)与生理盐水比p<0.05；n＝10。