农药组合物及其在防治马铃薯疮痂病中的应用转让专利
申请号 : CN201910798821.7
文献号 : CN110731345B
文献日 : 2021-06-04
发明人 : 张鑫 , 刘勇 , 张德咏 , 张宇 , 陈岳 , 谭新球 , 苏品 , 李小年
申请人 : 湖南省植物保护研究所
摘要 :
权利要求 :
1.一种农药组合物,其特征在于,包括:沼泽红假单胞菌生防菌剂和杀菌剂,所述沼泽红假单胞菌生防菌剂与所述杀菌剂的体积质量比为3~7∶1,沼泽红假单胞菌生防菌剂体积单位为ml,杀菌剂质量单位为g;
所述杀菌剂采用代森锰锌;
所述沼泽红假单胞菌生防菌剂采用沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)
9 10
LY‑6培养获得,所述沼泽红假单胞菌生防菌剂的菌浓度为0.5×10 cfu/mL~1×10 cfu/mL,
所述沼泽红假单胞菌LY‑6保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC No:M
2014525;
所述农药组合物用于防治马铃薯疮痂病。
2.根据权利要求1所述的农药组合物,其特征在于,所述沼泽红假单胞菌生防菌剂采用以下方法制备:
S1、将沼泽红假单胞菌LY‑6的保存种按双层平板培养法进行培养,培养至红色单菌落出现;
S2、种子培养:将所述步骤S1培养出的红色单菌落接入至血清瓶中,以光合细菌液体培养基进行种子培养至对数生长期得到菌液;
S3、生产培养:将所述步骤S2中菌液按光合细菌生产培养基总体积3%~6%的接种量接种,培养至对数生长期获得所述沼泽红假单胞菌生防菌剂。
3.根据权利要求2所述的农药组合物,其特征在于,所述步骤S2中种子培养的温度为28℃~33℃,光照条件为6000Lx~7000Lx,光合细菌液体培养基的pH值为6.5~7.0;
所述步骤S3中生产培养的温度为28℃~33℃,光照条件为6000Lx~7000Lx,光合细菌生产培养基的pH值为6.5~7.0。
4.一种如权利要求1至3任一项所述的农药组合物在防治马铃薯疮痂病中的应用。
5.根据权利要求4所述的农药组合物在防治马铃薯疮痂病中的应用,其特征在于,所述农药组合物采用以下方法施用:
将沼泽红假单胞菌生防菌剂稀释液与杀菌剂混合均匀,喷洒于封垄期的马铃薯全株。
6.根据权利要求5所述的农药组合物在防治马铃薯疮痂病中的应用,其特征在于,所述喷洒采用连续喷洒3次~4次,每次间隔7天~10天。
说明书 :
农药组合物及其在防治马铃薯疮痂病中的应用
技术领域
背景技术
疮痂病可由来自链霉菌属(Streptomyces)的至少四种革兰氏阳性细菌导致,包括
S.scabies、S. acidiscabies、S.turgidiscabies和S.ipomoeae,其中S.scabies最为常见。
疮痂病在马铃薯薯块上呈现出的典型疮痂表型为微隆起的坏死状,此外,坏死也可以呈现
为在中心深度凹陷的爆裂状或平面状。虽然一般来说,食用受疮痂病菌侵染的马铃薯不影
响人类健康,但疮痂病菌的侵染严重影响了种薯的质量、市场上的销售及后期加工操作。
对疮痂病的马铃薯抗性品种筛选进展缓慢,因为疮痂病菌的作用靶标是植物细胞中非常保
守的组分,因此,通过鉴定抗性基因来躲避病原菌的识别具有极大的难度。此外,作物轮作
也难以有效控制疮痂病菌的发生,因为导致疮痂病的链霉菌属病原菌同样可以侵染双子叶
和单子叶植物,在与许多种作物轮作的过程中,疮痂病菌依旧可以在一段时间内保持维持
种群数量。除了抗性育种及作物轮作,防控马铃薯疮痂病的传统手段一般还包括利用土壤
改良剂或化学产品来降低土壤的pH值、使用氯化苦进行土壤熏蒸、使用氟啶胺或磺菌胺对
种薯进行播种前的预处理,但是这些方法一般防效较低,且有害环境。目前,针对疮痂病的
化学防治尚缺乏有效的特异性杀菌剂,主要通过喷施细菌性杀菌剂来进行防治。主要使用
的药剂为铜制剂(有机铜、无机铜)、农用抗生素等,其中无机铜类杀菌剂易产生药害且可混
性比较差;农用抗生素因有影响人类健康的风险,也将逐步退出历史舞台;有机铜类杀菌剂
安全性较高,但产品价格普遍较高。化学药剂处理较难从根本上控制病害的发生,且由于疮
痂病的病原菌并非为单一种链霉菌,而且这些不同种的链霉菌在田间针对不同农事操作的
反应并不相同,这也增加了化学药剂的选用难度。
治活性的微生物被证实可用于防治马铃薯疮痂病,此类生物农药一般对环境安全,对土壤
有改良作用,可保障食品、动植物和人类的健康和安全,已经成为新兴的安全环保的细菌性
杀菌剂,发展潜力较大。
固碳、产氢和脱硫作用。光合细菌对人畜无毒,在防治植物病害的同时具有促进作物生长的
优良作用,在生物防治领域具有广阔的应用前景。
发明内容
件为6000Lx~7000Lx,光合细菌生产培养基的pH值为6.5~7.0。
的优点,择优互补,协同增效,既能综合多种抑菌机制进而有效控制病害的发生,有效降低
抗药性风险和药害,又可以最大程度地降低对环境的影响。并且,沼泽红假单胞菌生防菌
剂,具有环境友好、对人畜无毒、对作物无药害、施用简单方便等特点,且不易使病虫害产生
耐药性。
具体实施方式
在降低化学杀菌剂施用量的前提下补充施用沼泽红假单胞菌生防菌剂,可以各自发挥化学
农药与生物农药的优点,择优互补,协同增效,既能综合多种抑菌机制进而有效控制病害的
发生,有效降低抗药性风险和药害,又可以最大程度地降低对环境的影响。并且,沼泽红假
单胞菌生防菌剂,具有环境友好、对人畜无毒、对作物无药害、施用简单方便等特点,且不易
使病虫害产生耐药性。
菌剂适宜的添加量比,优于单一添加杀菌剂,并节省杀菌剂使用量,达到协同增效的作用。
二硫代氨基甲酸酯类多位点杀菌剂,具有广谱的保护性,可以用于疮痂病的防治。生物农药
易受田间环境因素影响,但可从改善土壤微生物种群结构、提高作物抗性水平等方面持续
防病。
mL。优选地,沼泽红假单胞菌菌株的生防菌剂的菌浓度为2×10cfu/mL。
胞菌LY‑6(Rhodopseudomonas palustris LY‑6),分离自长沙周边农田旁水域,保藏于中国
典型培养物保藏中心,保藏编号为 CCTCC No:M 2014525,保藏单位地址位于中国武汉大
学,保藏日期为2014年10月29日。沼泽红假单胞菌LY‑6的培养工艺简单、培养时间短、成本
低。
在液体培养基中培养7d呈棕红色。沼泽红假单胞菌LY‑6菌体形态为球形或短杆形。沼泽红
假单胞菌LY‑6为革兰氏阴性菌;在光照、厌氧条件下生长良好;最适生长温度为30℃,最适
生长pH 为6.5~7.0。生理化特性为V‑P反应与甲基红反应阴性、H2S反应、明胶液化、脲酶试
验、吲哚试验均阳性。
养:将步骤S1培养出的红色单菌落接入至血清瓶中,以光合细菌液体培养基进行种子培养
至对数生长期得到菌液;S3、生产培养:将步骤S2中菌液按光合细菌生产培养基总体积3%
~6%的接种量接种,培养至对数生长期获得沼泽红假单胞菌生防菌剂。由上述沼泽红假单
胞菌LY‑6 经活化、种子培养、生产培养后制备获得沼泽红假单胞菌生防菌剂。本发明的沼
泽红假单胞菌生防菌剂,具有环境友好、对人畜无毒、对作物无药害、施用简单方便等特点,
且不易使病虫害产生耐药性。
光照条件为6000Lx~7000Lx,光合细菌生产培养基的pH值为6.5~7.0。通过试验研究,确定
沼泽红假单胞菌LY‑6最适宜的培养温度和光照条件,加快菌株生长。上述光合细菌生产培
养基采用与光合细菌液体培养基相同的培养基进行扩大培养。
理(integrated pest management,IPM)的准则,将光合细菌沼泽红假单胞菌生防菌剂和代
森锰锌协同使用防治马铃薯疮痂病,既能产生良好的防治效果,又能促进马铃薯的生长,在
降低化学农药使用量的同时提高了对环境的友好性。上述沼泽红假单胞菌菌株属于光合细
菌,具有固碳、固氮的功能,因此可以改善植物营养,增加土壤肥力,实现促进作物增产的作
用。
防菌剂稀释液与杀菌剂混合均匀,喷洒于封垄期的马铃薯全株上实现生物防治,具有环境
友好、对人畜无毒、对作物无药害、施用简单方便等特点,且不易使病虫害产生耐药性。
马铃薯封垄期利用背负式喷雾器对马铃薯全株喷雾,连续喷雾3次~4次,每次间隔7天~10
天。控制间隔时间为7天~10天,如若间隔过短,易产生药害;若时间过久,药效降低。
泽红假单胞菌生防菌剂的菌数为2×10 cfu/mL,沼泽红假单胞菌LY‑6(Rhodopseudomonas
palustris LY‑6),分离自长沙周边农田旁水域,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编
号为CCTCC No:M 2014525,保藏单位地址位于中国武汉大学,保藏日期为2014年10月29日。
脂1.3g/L (或琼脂1.8g/L)、酵母提取物0.15g/L、(NH4)2SO4 0.1g/L、MgSO4 0.02g/L、Na2CO3
0.5g/L、 K2HPO4 0.05g/L、NaCl 0.02g/L,pH值为7.0。按照双层平板培养法,先在培养皿中
加入琼脂浓度为1.3g/L的光合细菌培养基,待凝固后,将沼泽红假单胞菌LY‑6进行划线培
养,随后覆盖琼脂浓度为1.8g/L的光合细菌培养基,培养至红色单菌落出现。
到菌液,期间每天摇瓶5次。光合细菌液体培养基的配方:酵母提取物0.15g/L、(NH4)2SO4
0.1g/L、 MgSO4 0.02g/L、Na2CO3 0.5g/L、K2HPO4 0.05g/L、NaCl 0.02g/L,pH值为7.0。
接种量为生产培养基总体积的5%,在温度为30℃、光照条件为6500Lx、pH值为7.0条件下,
培养 7天至对数生长期获得沼泽红假单胞菌生防菌剂。
形成混合液,总喷施量约为50L/亩。
形成混合液,总喷施量约为50L/亩。
算防治效果。防治效果统计结果如表1所示。
为40.1%最高,对比例2单独施用代森锰锌病薯率为24.0%,实施例2病薯率14.0%为最低。
实施例1~ 2和对比例2的病情指数与对比例1的空白对照差异均显著,其中对比例2中的常
规化学施药处理的病情指数较高,为6.3%,实施例1~2中代森锰锌与沼泽红假单胞菌生防
菌剂协同处理的病情指数较低,分别为4.3%和3.5%。从表1可知,病情指数结果与病薯率
基本一致。通过对防效率进行比较可知,实施例1~2中代森锰锌与沼泽红假单胞菌生防菌
剂协同处理的防治效果相比对比例2中常规化学施药均有极显著性差别,说明在光合细菌
与化学农药协同施用的处理下,不仅可以降低化学农药的施用量,还可以实现良好的防效。
1160kg/ 亩和1111kg/亩。相比对比例2,实施例1~2增产率分别达到了2.7%和4.4%,说明
沼泽红假单胞菌LY‑6与代森锰锌协同防治马铃薯疮痂病,不仅可以使得化学农药施用量显
著降低,还可以提高马铃薯产量。
改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。