3,4,5-三甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物及制备方法与应用转让专利
申请号 : CN201911068625.0
文献号 : CN110734442B
文献日 : 2021-03-09
发明人 : 杜奎 , 罗蒙强 , 邓莉平 , 李琰 , 任小荣 , 席眉扬 , 吴春雷 , 沈润溥
申请人 : 绍兴文理学院
摘要 :
权利要求 :
1.一种3,4,5-三甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物,其特征在于,所述3,4,5-三甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物化学结构式如下:其中: Ar=3, 4, 5-(CH3O)3 C6H2-。
2.一种如权利要求1所述的3,4,5-三甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三唑基-1-基) -4-吡唑甲醛的合成:将21mmol的1,2,4-三氮唑溶解于50mL的乙醇溶剂中,再将25mmol氢氧化钾加入,常温25℃下超声半小时,减压旋蒸乙醇后加入40mL DMSO,将15mmol 5-氯-1-苯基-3-甲基-4-甲酰基吡唑分批加入,50℃超声2h, TLC检测待原料反应完后,将混合物倒入200mL冰水中,析出淡黄色固体,抽滤;固体物质烘干后,乙醇-水重结晶得化合物1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三唑基-1-基) -4-吡唑甲醛;
(2)1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三氮唑-1-基)-4-吡唑甲醛腙的合成:取22 mmol的苯肼加入盛有10 mL四氢呋喃的烧瓶中,沸水浴回流搅拌至溶解,然后缓慢滴加入20 mL溶有20 mmol1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三唑基-1-基) -4-吡唑甲醛的无水乙醇溶液,继续沸水浴回流搅拌1 h,滴加10滴浓盐酸,直至淡黄色沉淀出现;连续沸水浴回流搅拌5h,停止水浴,加人20 mL蒸馏水搅拌,淡黄色沉淀颜色变深,抽滤得黄红色针状产物;用无水乙醚冲洗多次,真空干燥得产物1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三氮唑-1-基)-4-吡唑甲醛腙;
(3) 1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三氮唑-1-基)-α-氯-4-吡唑甲醛腙的合成: 50 mL1,
2-二氯乙烷和30 mL异丙醇中加入1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三氮唑-1-基)-4-吡唑甲醛腙,磁力搅拌使其完全溶解,然后冰盐浴至 -12℃,分三次加入次氯酸叔丁酯,剧烈搅拌2h,在此期间,注意控制温度在-5℃以下,得到淡兰色透明液体;将产物转入圆底烧瓶,减压50℃温度下蒸干溶剂,得到淡黄色油状物;再加入少量石油醚,加热混溶,有大量黄色固体析出,减压抽滤,得到1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三氮唑-1-基)-α-氯-4-吡唑甲醛腙;
(4)5-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1-苯基-6,7-二氢-1H-吲唑-4(5H)-酮的合成:将10 mmol 1-苯基-6,7-二氢-1H-吲唑-4(5H)-酮与10 mmol3,4,5-三甲氧基苯甲醛溶于10mL乙醇中,加入2 mL40% NaOH 水溶液,80 ℃搅拌3小时,然后用布氏漏斗过滤分离,滤饼水洗后用乙醇重结晶纯化,过滤烘干得到产物5-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1-苯基-6,7-二氢-1H-吲唑-4(5H)-酮;
(5)在20mL乙醇中加入5-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1-苯基-6,7-二氢-1H-吲唑-4(5H)-酮和1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三氮唑-1-基)-α-氯-4-吡唑甲醛腙,用恒压滴液漏斗滴加吡啶0.5mL和乙醇10mL的混合液至上述溶液中,滴毕后继续常温搅拌2小时,TLC跟踪反应,待反应完全后过滤,滤液减压浓缩,硅胶柱层析,洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚,得到最终产物。
3.如权利要求2所述的3,4,5-三甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三氮唑-1-基)-4-吡唑甲醛腙与次氯酸叔丁酯物质的量之比为5:8。
4.如权利要求2所述的3,4,5-三甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三氮唑-1-基)-α-氯-4-吡唑甲醛肟与5-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1-苯基-6,7-二氢-1H-吲唑-4(5H)-酮物质的量之比为3:2。
5.如权利要求2所述的3,4,5-三甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物的制备方法,其特征在于:所述步骤(5)中洗脱剂中 =1:8。
说明书 :
3,4,5-三甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺[吲唑-吡唑啉]衍
生物及制备方法与应用
技术领域
背景技术
香性和丰富的电子,可通过形成氢键与生物体内酶和受体相互作用,具有多种生物活性。异
噁唑骨架在药物得应用中是一个重要的药效基团,有着显著的生理和药理活性。此外,腈氧
化物与环外双键的1,3-偶极环加成反应合成的螺异噁唑类化合物因展现出一些重要的生
理特性而引起了药物学家们注意。所以,无论是从药理学还是从合成角度考虑,这类杂环化
合物都有很高的合成价值。
影响,我们通过1,3-偶极环加成反应合成了一种3,4,5-三甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺
[吲唑-吡唑啉]衍生物。
发明内容
啉]衍生物。
小时,减压旋蒸乙醇后加入40mL DMSO,将15mmol 5-氯-1-苯基-3-甲基-4-甲酰基吡唑分批
加入,50℃超声2h,TLC检测待原料反应完后,将混合物倒入200mL冰水中,析出淡黄色固体,
抽滤;固体物质烘干后,乙醇-水重结晶得化合物1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三唑基)-4-吡
唑甲醛(化合物1);
20mL溶有20mmol1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三唑基)-4-吡唑甲醛(化合物1)的无水乙醇溶
液,继续沸水浴回流搅拌1h,滴加10滴浓盐酸,直至淡黄色沉淀出现;连续沸水浴回流搅拌
5h,停止水浴,加人20mL蒸馏水搅拌,淡黄色沉淀颜色变深,抽滤得黄红色针状产物;用无水
乙醚冲洗多次,真空干燥得产物1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三氮唑-1-基)-4-吡唑甲醛腙
(化合物2);
吡唑甲醛腙(化合物2),磁力搅拌使其完全溶解,然后冰盐浴至-12℃,分三次加入次氯酸叔
丁酯,剧烈搅拌2h,在此期间,注意控制温度在-5℃以下,得到淡兰色透明液体;将产物转入
圆底烧瓶,减压50℃温度下蒸干溶剂,得到淡黄色油状物;再加入少量石油醚,加热混溶,有
大量黄色固体析出,减压抽滤,得到1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三氮唑-1-基)-α-氯-4-吡唑
甲醛腙(化合物3);
于10mL乙醇中,加入2ml40%NaOH水溶液,80℃搅拌3小时,然后用布氏漏斗过滤分离,滤饼
水洗后用乙醇重结晶纯化,过滤烘干得到产物5-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1-苯基-6,7-二
氢-1H-吲唑-4(5H)-酮(化合物4);
物3),用恒压滴液漏斗滴加吡啶0.5mL和乙醇10mL的混合液至上述溶液中,滴毕后继续常温
搅拌2小时,TLC跟踪反应,待反应完全后过滤,滤液减压浓缩,硅胶柱层析,洗脱剂为乙酸乙
酯和石油醚,得到最终产物。
为3:2。
6,7-二氢-1H-吲唑-4(5H)-酮结构中引入异噁唑环,从而合成一个同时含5-(1-苯基-3-甲
基-4-1,2,4-三唑基)结构吡唑取代的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物。本发明制备的含5-(1-苯
基-3-甲基-4-1,2,4-三唑基)结构吡唑取代的螺[吲唑-吡唑啉]衍生物,具有较强的肿瘤细
胞抑制效果,为其进一步的医药领域应用提供了基础。
附图说明
具体实施方式
影响,我们通过1,3-偶极环加成反应合成了一种3,4,5-三甲氧基苯基取代含吡唑结构的螺
[吲唑-吡唑啉]衍生物。
小时,减压旋蒸乙醇后加入40mL DMSO,将15mmol 5-氯-1-苯基-3-甲基-4-甲酰基吡唑分批
加入,50℃超声2h,TLC检测待原料反应完后,将混合物倒入200mL冰水中,析出淡黄色固体,
抽滤。固体物质烘干后,乙醇-水重结晶得化合物1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三唑基)-4-吡
唑甲醛。
20mL溶有1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三唑基)-4-吡唑甲醛(20mmol)的无水乙醇溶液,继续
沸水浴回流搅拌1h,滴加10滴浓盐酸,有淡黄色沉淀出现。连续沸水浴回流搅拌5h,停止水
浴,加人20mL蒸馏水搅拌,淡黄色沉淀颜色变深,抽滤得黄红色针状产物。用无水乙醚冲洗
多次,真空干燥得产物1-苯基-3-甲基-5-(1,2,4-三氮唑-1-基)-4-吡唑甲醛腙(化合物2)。
然后冰盐浴至-12℃,分三次加入18ml(16g,16mmol)次氯酸叔丁酯,剧烈搅拌2h,在此期间,
注意控制温度在-5℃以下,得到淡兰色透明液体。将产物转入圆底烧瓶,减压蒸干溶剂(50
℃),得到淡黄色油状物。再加入少量(m.p.=60-90℃)石油醚,加热混溶,有大量黄色固体
析出,减压抽滤,得到化合物3。
于10mL乙醇中,加入2ml 40%NaOH水溶液,80℃搅拌3小时,然后用布氏漏斗过滤分离,滤饼
水洗后用乙醇重结晶纯化,过滤烘干得到产物酮。
甲醛腙)1.5mmol,用恒压滴液漏斗滴加吡啶0.5mL和乙醇10mL的混合液至上述溶液中,滴毕
后继续常温搅拌2小时,TLC跟踪反应,待反应完全后过滤,滤液减压浓缩,硅胶柱层析,洗脱
剂为乙酸乙酯/石油醚(60-90℃)=1/8(V/V),得到化合物5。
据如下:
6.5Hz,2H),3.02(t,J=6.5Hz,2H),2.55(s,3H,CH3).
细胞)在96孔板上种入4000个/200μL/孔,每孔加入化合物2μL,终浓度为12.0μM,6.0μM,3.0
μM,1.5μM,共同于37℃、5%CO2细胞培养箱中孵育72小时,以DMSO(1%)为空白对照。72小时
后,加入终浓度为0.25mg/mL的MTT,置于37℃、5%CO2细胞培养箱中4小时,之后吸干溶剂,
每孔加入100μl DMSO,用酶联免疫仪于570nm处测定吸光度(OD值),所得数据用于计算IC50
值。挑选抑制活性高的化合物,测定不同浓度下的化合物作用时间不同对人肿瘤细胞周期
和凋亡的影响。
肠腺癌细胞)、A549(肺腺癌细胞)、NCL-H460(非小细胞肺癌)、有较强的肿瘤细胞抑制效果,
为其进一步的医药领域应用提供了基础。
表2:
1H-吲唑-4(5H)-酮(化合物4)物质的量之比不同,为方便对比,制得表3:
实施例10 1 57%
实施例11 2 85%
实施例12 4 87%
实施例13 5 84%
实施例1 -12 92%
实施例14 0 0%
实施例15 -5 37%
实施例16 -8 66%
胞)、A375(黑素瘤细胞)、SW620(人结直肠腺癌细胞)、A549(肺腺癌细胞)、NCL-H460(非小细
胞肺癌)、SKOV3(卵巢癌细胞)在96孔板上种入4000个/200μL/孔,每孔加入化合物2μL,终浓
度为12.0μM,6.0μM,3.0μM,1.5μM,共同于37℃、5%CO2细胞培养箱中孵育72小时,以DMSO
(1%)为空白对照。72小时后,加入终浓度为0.25mg/mL的MTT,置于37℃、5%CO2细胞培养箱
中4小时,之后吸干溶剂,每孔加入100μl DMSO,用酶联免疫仪于570nm处测定吸光度(OD
值),所得数据用于计算IC50值。挑选抑制活性高的化合物,测定不同浓度下的化合物作用时
间不同对人肿瘤细胞周期和凋亡的影响。
形,但这些相应的改变和变形都应属于本发明所附的权利要求的保护范围。