丁苯酞自微乳组合物及其制备方法和用途

摘要

本发明提供一种丁苯酞自微乳组合物，按质量百分比计，所述组合物包含：丁苯酞，乳化剂，助乳化剂；其中所述乳化剂可为选自聚氧乙烯35蓖麻油、吐温80、聚氧乙烯40氢化蓖麻油和Solutol SH-15中的一种或多种，所述助乳化剂可为选自二乙二醇单乙基醚、丙二醇和乙醇中的一种或多种。本发明的丁苯酞自微乳组合物还可包含油相和/或抗氧剂。与现有产品相比，本发明的丁苯酞自微乳组合物可以形成更小更均一的乳化微粒，大大提高了丁苯酞的溶出速率，同时显著提高了丁苯酞的吸收速率和生物利用度。

权利要求

1.一种丁苯酞自微乳组合物，所述组合物包含：丁苯酞，乳化剂，助乳化剂；其中，所述乳化剂为选自聚氧乙烯35蓖麻油、吐温80、聚氧乙烯40氢化蓖麻油和Solutol SH-15中的一种或多种，所述助乳化剂为选自二乙二醇单乙基醚、丙二醇和乙醇中的一种或多种；

并且，按质量百分比计，所述组合物包含：1％-30％的丁苯酞，38％-79％的乳化剂，

15％-49％的助乳化剂。

2.根据权利要求1所述的丁苯酞自微乳组合物，其特征在于，所述乳化剂与助乳化剂的质量比为1-4:1，优选2-3:1。

3.根据权利要求1或2所述的丁苯酞自微乳组合物，其特征在于，按质量百分比计，所述组合物包含：1-30％的丁苯酞，38％-72％的乳化剂和15％-45％的助乳化剂。

4.根据权利要求3所述的丁苯酞自微乳组合物，其特征在于按质量百分比计，所述组合物包含：10-25％的丁苯酞，42％-66％的乳化剂和18％-40％的助乳化剂。

5.根据权利要求3所述的丁苯酞自微乳组合物，其特征在于按质量百分比计，所述组合物包含：1-10％的丁苯酞，45％-72％的乳化剂和18％-45％的助乳化剂。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的丁苯酞自微乳组合物，其特征在于，按质量百分比计，所述组合物还包含：0％-10％的油相；

优选地，按质量百分比计，所述组合物还包含：1％-10％的油相；

优选地，按质量百分比计，所述组合物包含的丁苯酞与油相之和≤30％；

其中优选地，所述油相为选自植物油和中链油中的一种或多种；更优选地，所述油相为选自大豆油、玉米油和中链油中的一种或多种。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的丁苯酞自微乳组合物，其特征在于，所述组合物还包含抗氧剂，所述抗氧剂为选自BHT和VE中的一种或多种；

优选地，按质量百分比计，所述组合物中的抗氧剂为丁苯酞、乳化剂和助乳化剂总和的

0.025％-3％。

8.权利要求1至7中任一项所述的丁苯酞自微乳组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：将丁苯酞、乳化剂、助乳化剂、可选的其他成分混合均匀。

9.权利要求1至7中任一项所述的丁苯酞自微乳组合物在制备用于治疗脑血管病的药物中的用途；

优选地，所述脑血管病为轻度或重度急性缺血性脑卒中。

10.一种丁苯酞胶囊，其包含权利要求1至7中任一项所述的丁苯酞自微乳组合物。

11.根据权利要求10所述的丁苯酞胶囊，其特征在于，所述胶囊例如软胶囊的胶皮由明胶、增塑剂、水和抗氧剂制成，其中所述增塑剂为选自山梨醇和甘油中的一种或多种，所述抗氧剂为选自柠檬酸、甘氨酸和富马酸中的一种或多种；

优选地，所述胶囊的胶皮中的抗氧剂的量为明胶的1％-9％。

12.根据权利要求10或11所述的丁苯酞胶囊，其特征在于，所述丁苯酞自微乳组合物中包含抗氧剂且抗氧剂为BHT，所述胶囊的胶皮中的抗氧剂为选自柠檬酸、甘氨酸和富马酸中的一种或多种；优选地，按质量百分比计，所述丁苯酞自微乳组合物中的抗氧剂为丁苯酞、乳化剂和助乳化剂总和的0.025-0.05％，所述胶囊的胶皮中的抗氧剂为明胶的2-6％；

或者，所述组合物中包含抗氧剂且抗氧剂为选自BHT和VE中的一种或多种，所述胶囊的胶皮中的抗氧剂为富马酸；优选地，按质量百分比计，所述丁苯酞自微乳组合物中的所述抗氧剂为丁苯酞、乳化剂和助乳化剂总和的0.05-3％，所述胶囊的胶皮中的抗氧剂为明胶的

2％。

说明书

丁苯酞自微乳组合物及其制备方法和用途

技术领域

[0001] 本发明属于药物制剂领域，具体而言，本发明涉及一种丁苯酞自微乳化释药系统及其制备方法。

背景技术

[0002] 丁苯酞，化学名为消旋3-正丁基-1(3H)-异苯并呋喃酮(dl-3-n-butylphthalide)，是从天然食用植物芹菜籽中提取得到的。经化学合成的消旋丁苯酞为黄色油状液体，具有芹菜香味，是我国研制的具有自主知识产权的抗脑缺血药物。临床上用于治疗轻度或重度急性缺血性脑卒中，目前研究发现其也可用于治疗帕金森以及脑血管病。

[0003]

[0004] 目前丁苯酞在临床上主要有普通软胶囊和注射液两种剂型。由于丁苯酞在常温下为一种淡黄色或者无色粘稠的油状液体，极难溶于水，作为普通软胶囊的内容物在水相中分散较差，体外溶出非常慢，不仅影响药物生产过程中的质量控制，而且很大程度上导致药物体内吸收差，从而造成患者服药个体差异比较大，生物利用度很低且分布非常不均匀，大大降低了丁苯酞的疗效。而丁苯酞注射液虽然通过包合的方式解决了丁苯酞的溶解性问题，但是工艺复杂，成本较高，药品价格昂贵，且患者对注射剂的顺应性较差。

[0005] 在中国专利ZL200410075068.2(标题为“丁苯酞自乳化释药体系及其制备方法和应用”)中公开了一种丁苯酞自乳化释药体系，其以1％-65％的丁苯酞、10％-65％的乳化剂、再加上赋形剂制成，其中乳化剂为聚氧乙烯蓖麻油和聚乙二醇-8甘油辛酸/癸酸酯，二者的比例为0.5-1.5:1。从该专利公开的粒径检测报告可以看到，该释药体系形成的粒径基本都在100nm以上，且分布非常不均匀(d0.5为0.146μm)。本发明的发明人经试验发现，用该专利配方制备的释药体系乳化速度慢(大于1min)，溶液呈乳白色，这种体系容易造成产品的热力学不稳定，从而影响体内吸收。另外，在该体系中加入油相后产生了分层现象，难以形成专利中所述的加油相的自乳化体系，而且内容物的分层增加了软胶囊生产及质量控制过程中的难度，因此该专利技术较难满足需要加入油相制成自乳化制剂时的需求。并且用该专利配方制备的样品在放置性后胶囊发生明显交联，严重影响了产品的质量。

[0006] 本领域已知，除了将难溶性、水中不稳定等性质的药物制成自乳化释药系统或药物组合物之外，还可以将这类药物制成自微乳组合物。相对于自乳化，自微乳药物更为精细。在文献《自乳化和自微乳化释药系统》(复旦学报(医学版)，2003年3月，30(2))中分别对自乳化和自微乳化进行了详细说明：由油相、非离子表面活性剂和助乳化剂形成的均一透明并包含药物的溶液，在环境温度(通常为37℃)和温和搅拌的情况下，由于表面活性剂的存在，自发乳化形成粒径在100-500nm的乳剂，称为自乳化释药系统(self-emulsifying drug delivery systems，SEDDS)。而当亲水性表面活性剂(HLB>12)含量较高(≥40％，W/W)或表面活性剂加上助乳化剂，就能在轻微搅动下制得更精细的溶液(粒径<100nm)，称为自微乳化释药系统(self-microemulsifying durg delivery systems,SMEDDS)。相对于粒径较大的自乳化溶液，自微乳溶液具有更小的微粒粒径，热力学更稳定，可更大的提高药物的溶出速度和在体内的比表面积，使药物吸收更快。

[0007] 由上可知，中国专利ZL200410075068.2实际公开的是一种自乳化释药系统，该专利报道的药代动力学研究结果显示，与普通软胶囊相比，尽管该系统给药后具有更快的吸收速率(有助于减少个体差异)，但是该系统相比普通软胶囊并未提高生物利用度。据报道，丁苯酞的人体生物利用度仅6.9％，即用药后真正吸收入血的药效成分仅占6.9％，不仅影响了临床疗效，而且增加了患者的经济负担。因此本领域仍需要一种既能减少个体差异，又能够提高生物利用度的丁苯酞释药系统。

发明内容

[0008] 为了解决上述技术问题，本发明的发明人重新对可用于丁苯酞的乳化剂的种类和用量进行了研究，以期获得一种能较快形成澄清的、粒径在100nm以下、甚至在30nm以下的丁苯酞自微乳化释药系统，该释药系统可大大提高丁苯酞的溶出速率，同时显著提高丁苯酞的吸收速率和生物利用度。此外，本发明的发明人发现，当丁苯酞自乳化组合物制成胶囊剂后，胶囊放置一段时间后往往出现软胶囊的崩解时限延长、溶出速率下降等问题，因此，还期望通过加入特定辅料解决这一问题。

[0009] 因此，本发明的一个目的是提供一种丁苯酞自微乳组合物，该组合物可选择性加入油相，能够快速形成澄清的乳化溶液，粒径小于100nm，甚至小于30nm，粒度分布均匀，实现体内加快药物的吸收速率，减少个体差异，并且能够显著提高药物的生物利用度。

[0010] 本发明的另一个目的是提供所述丁苯酞自微乳组合物的制备方法及其制药用途。

[0011] 本发明的还一个目的是提供在胶囊剂的情况下，解决胶囊剂贮存期内崩解变得不合格、胶囊内发生物质迁移和油性成分渗漏、酸值和氧化值升高等稳定性问题的相应处方。

[0012] 本发明的技术方案如下：

[0013] 一方面，本发明提供一种丁苯酞自微乳组合物，所述组合物包含：丁苯酞，乳化剂，助乳化剂。

[0014] 其中，所述乳化剂为选自聚氧乙烯35蓖麻油、吐温80、聚氧乙烯40氢化蓖麻油和Solutol SH-15中的一种或多种，所述助乳化剂为选自二乙二醇单乙基醚(TRANSCUTOL)、丙二醇和乙醇中的一种或多种；并且，按质量百分比计，所述组合物包含：1％-30％的丁苯酞，38％-79％的乳化剂，15％-49％的助乳化剂。

[0015] 优选地，所述丁苯酞自微乳组合物中，乳化剂和助乳化剂的质量比为1-4:1，优选2-3:1。

[0016] 更优选地，按质量百分比计，所述组合物包含：1-30％的丁苯酞，38％-72％的乳化剂和15％-45％的助乳化剂；或者，包含：10-25％的丁苯酞，42％-66％的乳化剂和18％-40％的助乳化剂；或者，包含：1-10％的丁苯酞，45％-72％的乳化剂和18％-45％的助乳化剂。

[0017] 优选地，该丁苯酞自微乳组合物为下述配方中的任一种：

[0018] I.丁苯酞；乳化剂为聚氧乙烯35蓖麻油；助乳化剂为选自二乙二醇单乙基醚、丙二醇和乙醇中的一种或多种。

[0019] II.丁苯酞；乳化剂为聚氧乙烯40氢化蓖麻油；助乳化剂为选自二乙二醇单乙基醚和乙醇中的一种或多种。

[0020] III.丁苯酞；乳化剂为吐温80；助乳化剂为选自二乙二醇单乙基醚和乙醇中的一种或多种。

[0021] IV.丁苯酞；乳化剂为Solutol SH-15；助乳化剂为选自二乙二醇单乙基醚和乙醇中的一种或多种。

[0022] 当配方为I时，按质量百分比计，所述组合物中，丁苯酞的量为10％-30％，乳化剂的量为38％-72％，助乳化剂的量为15％-40％；优选地，丁苯酞的量为12％-25％，乳化剂的量为42％-66％，助乳化剂的量为18％-38％；特别优选地，丁苯酞的含量甚至能够以22-25％的含量实现优异的乳化效果；更优选地，以质量比计，所述组合物中，丁苯酞：乳化剂：
助乳化剂＝22:56:22。

[0023] 当配方为II时，按质量百分比计，所述组合物中，丁苯酞的量为1％-20％，乳化剂的量为45％-79％，助乳化剂的量为16％-49％；优选地，丁苯酞的量为10％-20％，乳化剂的量为45％-72％，助乳化剂的量为16％-45％。

[0024] 当配方为III时，按质量百分比计，所述组合物中，丁苯酞的量为1％-10％，乳化剂的量为45％-79％，助乳化剂的量为18％-49％；优选地，丁苯酞的量为10％，乳化剂的量为45％-72％，助乳化剂的量为18％-45％。

[0025] 当配方为IV时，按质量百分比计，所述组合物中，丁苯酞的量为1％-20％，乳化剂的量为45％-79％，助乳化剂的量为18％-49％；优选地，丁苯酞的量为10％-20％，乳化剂的量为45％-72％，助乳化剂的量为18％-45％；更优选地，丁苯酞的量为10％-15％，乳化剂的量为60％-65％，助乳化剂的量为20％-30％。

[0026] 本发明提供的丁苯酞自微乳组合物中还可包含油相。其中，按质量百分比计，所述组合物还包含：0％-10％的油相；优选地，按质量百分比计，所述组合物还包含：1％-10％的油相；优选地，按质量百分比计，所述组合物包含的丁苯酞与油相之和≤30％。

[0027] 其中优选地，所述油相为选自植物油和中链油(6-12个碳原子的脂肪酸甘油酯)中的一种或多种；优选地，所述油相为选自大豆油、玉米油和中链油中的一种或多种。

[0028] 本发明提供的丁苯酞自微乳组合物优选是胶囊的内含物或口服液。

[0029] 优选地，本发明提供的丁苯酞自微乳组合物还包含抗氧剂，所述抗氧剂为选自BHT(丁基羟基甲苯)和VE(维生素E)中的一种或多种；优选地，按质量百分比计，所述组合物中的抗氧剂的量为丁苯酞、乳化剂和助乳化剂总和的0.025％-3％。

[0030] 另一方面，本发明提供所述丁苯酞自微乳组合物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：将丁苯酞、乳化剂、助乳化剂、可选的其他成分混合均匀。制备得到的所述丁苯酞自微乳组合物是澄清的，并且粒径在100nm以下、甚至在30nm以下。

[0031] 还一方面，本发明提供所述丁苯酞自微乳组合物在制备用于治疗脑血管病的药物中的用途；优选地，所述脑血管病为轻度或重度急性缺血性脑卒中。

[0032] 特别地，本发明提供的丁苯酞自微乳组合物是胶囊的内含物，因此本发明还提供一种丁苯酞胶囊如软胶囊，其包含本发明的丁苯酞自微乳组合物。

[0033] 优选地，所述胶囊例如软胶囊的胶皮由明胶、增塑剂、水和抗氧剂制成，其中所述增塑剂为选自山梨醇和甘油中的一种或多种，所述抗氧剂为选自柠檬酸、甘氨酸和富马酸中的一种或多种；更优选地，按质量百分比计，明胶：增塑剂：水＝1:0.6:0.9；优选地，所述胶囊的胶皮中的抗氧剂的量为明胶的1％-9％。

[0034] 根据本发明的具体实施方式，本发明胶囊的胶皮通过包括以下步骤的方法制备：取水、增塑剂和抗氧剂搅拌溶解，加热至70℃，加入明胶搅拌溶解后抽真空除气泡，至明胶澄清透明无气泡，55℃保温备用。

[0035] 根据本发明的具体实施方式，作为所述胶囊的内含物，所述丁苯酞自微乳组合物中包含抗氧剂且抗氧剂为BHT，所述胶囊的胶皮中的抗氧剂为选自柠檬酸、甘氨酸和富马酸中的一种或多种；优选地，按质量百分比计，所述丁苯酞自微乳组合物中的抗氧剂的量为丁苯酞、乳化剂和助乳化剂总和的0.025-0.05％，所述胶囊的胶皮中的抗氧剂的量为明胶的2％-6％；

[0036] 或者，作为所述胶囊的内含物，所述丁苯酞自微乳组合物中包含抗氧剂且抗氧剂为选自BHT和VE中的一种或多种，所述胶囊中的抗氧剂为富马酸；优选地，按质量百分比计，所述丁苯酞自微乳组合物中的所述抗氧剂的量为丁苯酞、乳化剂和助乳化剂总和的0.05-3％，所述胶囊中的抗氧剂的量为明胶的2％。

[0037] 首先，与现有技术相比，本发明提供了一种新型的丁苯酞自微乳组合物。该组合物主要包含丁苯酞、乳化剂和助乳化剂。对于乳化剂和助乳化剂，本发明的发明人对大量乳化剂及助乳化剂的种类和用量进行了研究，发现在特定乳化剂和助乳化剂的存在下，可以在1min内快速形成丁苯酞的澄清乳化溶液，且粒径小于100nm、甚至在20-40nm。并且，对丁苯酞、乳化剂和助乳化剂的含量进行研究，确定了在不同组合的丁苯酞、乳化剂、助乳化剂质量百分比范围内的较优配合使用范围。此外，在乳化剂和助乳化剂的基础上，本发明的发明人还发现，可以选择性使用油相以尽量减少乳化剂的使用量；并且，发现采用大豆油和中链油可以替代一部分乳化剂，同样快速形成丁苯酞的澄清乳化溶液，且粒径小于100nm、甚至在20-40nm。

[0038] 相比于现有技术，本发明具有以下优点和技术效果：

[0039] 实验证明，本发明的丁苯酞自微乳组合物透光率高，粒径小于100nm，基本分布在20-40nm左右，粒径小且分布均匀；体外溶出度高，在30min内溶出度可以达到95％以上，溶液保持澄清透明；可选择性加入油相后不分层；明显改善了普通丁苯酞制剂个体吸收差异大的问题，同时大大提高了丁苯酞的溶出速率，并且显著提高了丁苯酞的吸收速率和生物利用度。

[0040] 另外，根据药物剂型，本发明的丁苯酞自微乳组合物中还可包含抗氧剂或其他赋形剂。在胶囊剂的情况下，通过分别在胶皮和作为内容物的丁苯酞自微乳组合物中添加特定种类和含量的抗氧剂，可以最大程度降低胶皮交联程度，提高内容物稳定性，延长该自微乳化产品的保存期限。

附图说明

[0041] 以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

[0042] 图1显示了本发明实施例3制备的丁苯酞自微乳组合物在不同pH介质中的溶出曲线。

[0043] 图2显示了本发明实施例3至24制备的丁苯酞自微乳组合物的粒径情况。

[0044] 图3显示了本发明的丁苯酞自微乳组合物与原研普通软胶囊在大鼠内的药时曲线对比，其中(◆)为原研普通软胶囊120mg/kg单次给药后的血药浓度-时间曲线；(▲)为实施例3制备的自微乳化软胶囊120mg/kg单次给药后的血药浓度-时间曲线；(■)为实施例4制备的自微乳化软胶囊120mg/kg单次给药后的血药浓度-时间曲线。

[0045] 图4显示了本发明的丁苯酞自微乳组合物与原研普通软胶囊在大鼠内的药时曲线面积对比，其中**P<0.01，与普通软胶囊相比。

具体实施方式

[0046] 以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。

[0047] 下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的药材原料、试剂材料等，如无特殊说明，均为市售购买产品。其中，丁苯酞软胶囊以商品名“恩必普”购自石药集团恩必普药业有限公司，批号118160704，有效期至2019年6月。

[0048] 实施例1乳化剂和助乳化剂的研究

[0049] 不同的油相乳化所需的最佳HLB值不同，不同的乳化剂的乳化效果也不一致。结合丁苯酞原料药的特性，针对已有乳化剂及助乳化剂，本实施例对用于制备丁苯酞自微乳组合物的乳化剂和助乳化剂进行了研究。候选乳化剂和助乳化剂见下表1。

[0050] 表1

[0051]

[0052] 以上乳化剂和助乳化剂分别两两组合后再与不同比例的丁苯酞组合进行研究，考察乳化效果。乳化效果分为五个级别：(A)溶液呈澄清或微泛蓝色；(B)略白，呈蓝白色乳光；(C)呈亮白色不透明液体；(D)色译暗，呈灰白色，略带油状；(E)难乳化，一直有油滴存在。

[0053] 研究结果显示，只有四种乳化剂与三种助乳化剂组合在一定比例下与丁苯酞混合乳化效果较好，可快速形成澄清或带蓝色乳光的溶液，分别为(1)聚氧乙烯35蓖麻油+二乙二醇单乙基醚/丙二醇/乙醇、(2)聚氧乙烯40氢化蓖麻油+二乙二醇单乙基醚/乙醇、(3)吐温80+二乙二醇单乙基醚/乙醇和(4)Solutol SH-15+二乙二醇单乙基醚/乙醇。

[0054] 将聚氧乙烯35蓖麻油作为乳化剂，二乙二醇单乙基醚作为助乳化剂，研究发现丁苯酞的范围为1％-30％，聚氧乙烯35蓖麻油为38％-79％，二乙二醇单乙基醚为15％-49％乳化效果较好。基于尽量减少乳化剂和助乳化剂含量、同时保持活性药物丁苯酞在含量提高的情况下仍然保持良好的自微乳化效果这一原则，在上述范围内对三者含量进一步进行大量的筛选对比，确认优选的含量范围为：丁苯酞为10％-30％，聚氧乙烯35蓖麻油为38％-72％，二乙二醇单乙基醚为15％-40％，更为优选的含量范围为：丁苯酞为12％-25％，聚氧乙烯35蓖麻油为42％-66％，二乙二醇单乙基醚为18％-38％；并且进一步优选地，所述组合物中，以质量比计，丁苯酞：乳化剂：助乳化剂＝22:56:22。

[0055] 聚氧乙烯35蓖麻油为乳化剂、丙二醇或乙醇为助乳化剂与丁苯酞组合时，各组成的比例与上述二乙二醇单乙基醚为助乳化剂时相同。

[0056] 此外，当聚氧乙烯40氢化蓖麻油做乳化剂时，组合物可包含1％-20％的丁苯酞，45％-79％的聚氧乙烯40氢化蓖麻油，16％-49％的二乙二醇单乙基醚或乙醇，如上确认优选的含量范围为：丁苯酞为10％-20％，聚氧乙烯40氢化蓖麻油为45％-72％，二乙二醇单乙基醚或乙醇的量为16％-45％。

[0057] 当吐温80做乳化剂时，组合物可包含1％-10％的丁苯酞，45％-79％的吐温80，18％-49％的二乙二醇单乙基醚或乙醇，如上确认优选的含量范围为：丁苯酞为10％，吐温
80为45％-72％，二乙二醇单乙基醚或乙醇为18％-45％。

[0058] 当Solutol SH-15做乳化剂时，组合物可包含1％-20％的丁苯酞，45％-79％的Solutol SH-15，18％-49％的二乙二醇单乙基醚或乙醇，如上确认优选的含量范围为：丁苯酞为10％-20％，Solutol SH-15为45％-72％，二乙二醇单乙基醚或乙醇为18％-45％，更为优选的含量范围为：丁苯酞为10％-15％，Solutol SH-15为60％-65％，二乙二醇单乙基醚或乙醇为20％-30％。

[0059] 实施例2油相的筛选

[0060] 在实施例1的实验结果基础上，本发明人尝试适量加入其他油相，试验其乳化效果。油相选择大豆油、玉米油等植物油或中链油等中长链油或其混合油。

[0061] 以实施例1筛选得到的丁苯酞最大载药量30％为上限，所选油相和丁苯酞的总量同样不超过30％。

[0062] 研究发现，组合物包含：12％-25％丁苯酞，42％-66％的乳化剂，18％-38％的助乳化剂，1％-10％的油相，其中丁苯酞和油相的总量不超过30％时，体系未出现分层现象，乳化效果较好。

[0063] 实施例3丁苯酞自微乳组合物的制备

[0064] 胶液制备：胶皮处方为明胶：甘油：山梨醇：水：柠檬酸＝1:0.4:0.2:1:0.06。取水、甘油、山梨醇、柠檬酸搅拌溶解，加热至70℃，加入明胶搅拌溶解后抽真空除气泡，至明胶澄清透明无气泡，55℃保温备用。

[0065] 内容物的配制：称取丁苯酞22g，聚氧乙烯35蓖麻油56g，二乙二醇单乙基醚22g，搅拌混合均匀，备用。

[0066] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为454mg。

[0067] 测定所制得的丁苯酞自微乳组合物在不同pH介质中的溶出曲线(浆法50rpm，900ml)，结果见图2。

[0068] 实施例4丁苯酞自微乳组合物的制备

[0069] 胶液制备：同实施例3。

[0070] 内容物的配制：称取丁苯酞22g，大豆油8g，聚氧乙烯35蓖麻油50g，二乙二醇单乙基醚20g，搅拌混合均匀，备用。

[0071] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为454mg。

[0072] 实施例5丁苯酞自微乳组合物的制备

[0073] 胶液制备：同实施例3。

[0074] 内容物的配制：称取丁苯酞22g，聚氧乙烯35蓖麻油42g，二乙二醇单乙基醚36g，搅拌混合均匀后，备用。

[0075] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为454mg。

[0076] 实施例6丁苯酞自微乳组合物的制备

[0077] 胶液制备：同实施例3。

[0078] 内容物的配制：称取丁苯酞22g，聚氧乙烯35蓖麻油38g，二乙二醇单乙基醚40g，搅拌混合均匀后，备用。

[0079] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为454mg。

[0080] 实施例7丁苯酞自微乳组合物的制备

[0081] 胶液制备：同实施例3。

[0082] 内容物的配制：称取丁苯酞22g，聚氧乙烯35蓖麻油60g，二乙二醇单乙基醚18g，搅拌混合均匀后，备用。

[0083] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为454mg。

[0084] 实施例8丁苯酞自微乳组合物的制备

[0085] 胶液制备：同实施例3。

[0086] 内容物的配制：称取丁苯酞19g，聚氧乙烯35蓖麻油66g，二乙二醇单乙基醚15g，搅拌混合均匀后，备用。

[0087] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为526mg。

[0088] 实施例9丁苯酞自微乳组合物的制备

[0089] 胶液制备：同实施例3。

[0090] 内容物的配制：称取丁苯酞19g，聚氧乙烯35蓖麻油43g，二乙二醇单乙基醚38g，搅拌混合均匀后，备用。

[0091] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为526mg。

[0092] 实施例10丁苯酞自微乳组合物的制备

[0093] 胶液制备：同实施例3。

[0094] 内容物的配制：称取丁苯酞25g，聚氧乙烯35蓖麻油54g，二乙二醇单乙基醚21g，搅拌混合均匀后，备用。

[0095] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为400mg。

[0096] 实施例11丁苯酞自微乳组合物的制备

[0097] 胶液制备：同实施例3。

[0098] 内容物的配制：称取丁苯酞30，聚氧乙烯35蓖麻油50g，二乙二醇单乙基醚20g，搅拌混合均匀后，备用。

[0099] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为333mg。

[0100] 实施例12丁苯酞自微乳组合物的制备

[0101] 胶液制备：同实施例3。

[0102] 内容物的配制：称取丁苯酞22g，中链油8g，聚氧乙烯35蓖麻油50g，二乙二醇单乙基醚20g，搅拌混合均匀后，备用。

[0103] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为454mg。

[0104] 实施例13丁苯酞自微乳组合物的制备

[0105] 胶液制备：同实施例3。

[0106] 内容物的配制：称取丁苯酞12g，大豆油10g，聚氧乙烯35蓖麻油56g，二乙二醇单乙基醚22g，搅拌混合均匀后，备用。

[0107] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为416mg。

[0108] 实施例14丁苯酞自微乳组合物的制备

[0109] 胶液制备：同实施例3。

[0110] 内容物的配制：称取丁苯酞12g，大豆油10g，聚氧乙烯35蓖麻油38g，二乙二醇单乙基醚40g，搅拌混合均匀后，备用。

[0111] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为416mg。

[0112] 实施例15丁苯酞自微乳组合物的制备

[0113] 胶液制备：同实施例3。

[0114] 内容物的配制：称取丁苯酞15g，大豆油4g，聚氧乙烯35蓖麻油66g，二乙二醇单乙基醚15g，搅拌混合均匀后，备用。

[0115] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为333mg。

[0116] 实施例16丁苯酞自微乳组合物的制备

[0117] 胶液制备：同实施例3。

[0118] 内容物的配制：称取丁苯酞15g，大豆油4g，聚氧乙烯35蓖麻油43g，二乙二醇单乙基醚38g，搅拌混合均匀后，备用。

[0119] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为333mg。

[0120] 实施例17丁苯酞自微乳组合物的制备

[0121] 胶液制备：同实施例3。

[0122] 内容物的配制：称取丁苯酞22g，聚氧乙烯35蓖麻油56g，丙二醇22g，搅拌混合均匀后，备用。

[0123] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为454mg。

[0124] 实施例18丁苯酞自微乳组合物的制备

[0125] 胶液制备：同实施例3。

[0126] 内容物的配制：称取丁苯酞22g，聚氧乙烯35蓖麻油56g，乙醇22g，搅拌混合均匀后，备用。

[0127] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为454mg。

[0128] 实施例19丁苯酞自微乳组合物的制备

[0129] 胶液制备：同实施例3。

[0130] 内容物的配制：称取丁苯酞20g，聚氧乙烯40氢化蓖麻油64g，乙醇16g，搅拌混合均匀后，备用。

[0131] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为500mg。

[0132] 实施例20丁苯酞自微乳组合物的制备

[0133] 胶液制备：同实施例3。

[0134] 内容物的配制：称取丁苯酞20g，聚氧乙烯40氢化蓖麻油53g，二乙二醇单乙基醚27g，搅拌混合均匀后，备用。

[0135] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为500mg。

[0136] 实施例21丁苯酞自微乳组合物的制备

[0137] 胶液制备：同实施例3。

[0138] 内容物的配制：称取丁苯酞20g，Solutol SH-15 57g，二乙二醇单乙基醚23g，搅拌混合均匀后，备用。

[0139] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为500mg。

[0140] 实施例22丁苯酞自微乳组合物的制备

[0141] 胶液制备：同实施例3。

[0142] 内容物的配制：称取丁苯酞20g，Solutol SH-15 57g，乙醇23g，搅拌混合均匀后，备用。

[0143] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为500mg。

[0144] 实施例23丁苯酞自微乳组合物的制备

[0145] 胶液制备：同实施例3。

[0146] 内容物的配制：称取丁苯酞10g，吐温80 64g，二乙二醇单乙基醚26g，搅拌混合均匀后，备用。

[0147] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为500mg。

[0148] 实施例24丁苯酞自微乳组合物的制备

[0149] 胶液制备：同实施例3。

[0150] 内容物的配制：称取丁苯酞10g，吐温80 64g，乙醇26g，搅拌混合均匀后，备用。

[0151] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为500mg。

[0152] 实施例25丁苯酞自微乳组合物的表征

[0153] (一)粒径检测

[0154] 将实施例3至实施例24的组合物各取1ml，用100倍纯化水稀释，在溶出仪中在37℃，50rmp搅拌下，发现各组合物均在1min之内形成澄清的乳液。

[0155] 使用马尔文粒度和ZETA电位分析仪对以上几种形成的乳液进行粒径检测。各实施例的粒径及其分布指数见下表2。

[0156] 表2

[0157]编号 粒径(nm) 分布指数(PDI)
实施例3 23.66 0.047
实施例4 36.26 0.121
实施例5 29.47 0.106
实施例6 35.33 0.135
实施例7 23.22 0.06
实施例8 32.37 0.087
实施例9 27.95 0.089
实施例10 26.35 0.052
实施例11 37.65 0.114
实施例12 38.12 0.156
实施例13 25.53 0.057
实施例14 35.84 0.106
实施例15 33.94 0.09
实施例16 28.29 0.099
实施例17 25.96 0.19
实施例18 23.72 0.277
实施例19 30.62 0.193
实施例20 32.92 0.167
实施例21 43.74 0.474
实施例22 36.17 0.408
实施例23 67.5 0.267
实施例24 57.91 0.374

[0158] 因此证明本发明制备的丁苯酞组合物为自微乳组合物。结果见图3。

[0159] (二)与现有产品的体外比较

[0160] 分3批制备实施例3的丁苯酞自微乳组合物(0101批、0102批、0103批)并制备1批实施例4(0104批)和实施例11的丁苯酞自微乳组合物(0301批)，然后与丁苯酞普通软胶囊(丁苯酞软胶囊，商品名恩必普，批号118160704)、中国专利ZL200410075068.2实施例1的丁苯酞自乳化释药体系(丁苯酞50％；聚氧乙烯35蓖麻油25％；辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯25％)进行比较，各样品的透光率(用紫外分光光度仪在430nm下检测)、粒径及溶出数据结果见下表3。

[0161] 表3

[0162]

[0163] 表4为普通市售软胶囊与本发明实施例3(0101批)、实施例10(0205批)、实施例11(0301批)、实施例17(0401批)、实施例18(0402批)、实施例20(0403批)、实施例21(0404批)和实施例23(0405批)制备的自微乳软胶囊在pH1.0条件下的溶出曲线数据对比。

[0164]

[0165] (三)与现有产品的体内吸收比较

[0166] 药代研究：取实施例3和实施例4中制备的自微乳化软胶囊样品，并以普通软胶囊为对照，采用SD大鼠进行了药代动力学研究。

[0167] 方法：选用SD雌性大鼠，200-220g(购自河北医科大学实验动物中心)，分为原研普通软胶囊组、无油自微乳化软胶囊组(实施例3样品)、以及加油自微乳化软胶囊组(实施例4样品)。每组15只大鼠，以0.553ml/kg给药，给药剂量(以丁苯酞的量计)均为120mg/kg，即给药浓度为217mg/ml，分别于给药前即刻及给药后5min、10min、30min、45min、1h、2h、3h、5h、7h、9h眼眶取血0.3ml置于肝素抗凝的EP管中，3500r/min离心10min，取上清血浆，按照1：2的体积加入乙腈内标溶液(内标为非洛地平，2.5μg/ml)，12000r/min离心20min，取上清以HPLC法检测丁苯酞的浓度。

[0168] 关于大鼠口服后药代动力学结果，实施例3和实施例4所制备的丁苯酞自微乳化软胶囊与普通软胶囊的比较结果见表5和表6以及图3和图4。

[0169] 表5

[0170]

[0171] 表6

[0172]

[0173] 注：**P<0.01，与普通软胶囊相比。

[0174] 比较可知，与普通软胶囊相比，用本发明的自微乳化释药体系可提高药物的吸收速率(达峰时间明显加快)和生物利用度(AUC明显提高)，并且可以减少个体差异(变异系数明显降低)，上述特征有利于保证临床有效率。

[0175] 专利“丁苯酞自乳化释药体系及其制备方法和应用”(ZL200410075068.2)公开了一种丁苯酞自乳化释药体系，其中实施例15提供了该自乳化软胶囊与普通软胶囊的大鼠口服后药代动力学比较结果，引用如下：

[0176] 表7(引自ZL200410075068.2说明书中的表2)

[0177]

[0178]

[0179] 根据上表数据计算的达峰时间(Tmax)和血药浓度-时间曲线下面积(AUC0-t，μg/ml*h)见表8：

[0180] 表8

[0181]

[0182] 由此可知，ZL200410075068.2专利提供的自乳化释药系统中，丁苯酞自乳化释药体系给药后达峰时间明显加快，达峰浓度亦显著高于普通软胶囊，但是该释药体系并未提高生物利用度，与普通软胶囊相比，AUC无显著差异。

[0183] 与普通软胶囊相比，本发明的丁苯酞自微乳化释药体系在提高吸收速率，减少个体差异的同时，显著提高了生物利用度。据报道，丁苯酞的人体生物利用度仅6.9％，用药后真正吸收入血的药效成分仅占6.9％，影响了临床疗效，并且增加了患者的经济负担。本发明技术可以将生物利用度提高2倍以上，显著增加了社会效益和经济效益。

[0184] 实施例25抗氧剂的选择

[0185] 为了提高丁苯酞自微乳组合物的稳定性，发明人研究了在将其制成胶囊剂时，分别用于胶囊的胶皮和组合物的最适合的抗氧剂及其用量。

[0186] 分别对以下几种抗氧剂进行了筛选，见下表9。

[0187] 表9

[0188]

[0189]

[0190] 将上表中所有用于胶皮的抗氧剂选择不同比例单独或混合使用，制备相应胶皮，然后分别浸泡在含有不同种类和比例抗氧剂的内容物溶液中，进行加速实验(45℃，相对湿度为75％)，通过考察浸泡后内容物的浑浊情况、胶皮的粘连情况、胶皮的崩解时限和全溶时间等，来选择适合的抗氧剂组合。通过进行加速2个月的实验，综合筛选结果，最终确定在胶皮中单独加入3～6％的柠檬酸或3～6％的柠檬酸联合3％甘氨酸或单独加入1～3％富马酸(加入量均以明胶计)，同时在内容物中含有占其余成分总和的0.025％-3％的BHT和VE作为抗氧剂，可以最大程度减少内容物浑浊、胶皮粘连和交联，并且在长期储存后仍无交联且快速崩解。

[0191] 示例性的较优处方如下：

[0192] 处方1

[0193]胶皮 比例(质量比) 内容物 比例(质量比)
明胶 1 丁苯酞 22
甘油 0.4 聚氧乙烯35蓖麻油 56
山梨醇 0.2 二乙二醇单乙基醚 22
水 0.9 BHT 0.025
柠檬酸 0.06    

[0194] 制备方法：

[0195] 胶液的制备：以质量计，明胶：甘油：山梨醇：水：柠檬酸＝1：0.4：0.2：0.9：0.06。取水、甘油、山梨醇、柠檬酸搅拌溶解，加热至70℃，加入明胶搅拌溶解后抽真空除气泡，至明胶澄清透明无气泡，55℃保温备用。

[0196] 内容物的制备：称取丁苯酞22g，聚氧乙烯35蓖麻油56g，二乙二醇单乙基醚22g，0.025g BHT，搅拌混合均匀，备用。

[0197] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为454.66mg。

[0198] 处方2

[0199]胶皮 比例(质量比) 内容物 比例(质量比)
明胶 1 丁苯酞 22
甘油 0.4 聚氧乙烯35蓖麻油 56
山梨醇 0.2 二乙二醇单乙基醚 22
水 0.9 BHT 0.05
柠檬酸 0.03    
甘氨酸 0.03    

[0200] 制备方法：

[0201] 胶液的制备：以质量计，明胶：甘油：山梨醇：水、柠檬酸、甘氨酸＝1：0.4：0.2：0.9：0.03：0.03。取水、甘油、山梨醇、柠檬酸、甘氨酸搅拌溶解，加热至70℃，加入明胶搅拌溶解后抽真空除气泡，至明胶澄清透明无气泡，55℃保温备用。

[0202] 内容物的制备：称取丁苯酞22g，聚氧乙烯35蓖麻油56g，二乙二醇单乙基醚22g，0.05g BHT，搅拌混合均匀，备用。

[0203] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为456.82mg。

[0204] 处方3

[0205]胶皮 比例(质量比) 内容物 比例(质量比)
明胶 1 丁苯酞 22
甘油 0.4 聚氧乙烯35蓖麻油 56
山梨醇 0.2 二乙二醇单乙基醚 22
水 0.9 BHT 0.05
富马酸 0.02    

[0206] 制备方法：

[0207] 胶液的制备：以质量计，明胶：甘油：山梨醇：水、富马酸＝1：0.4：0.2：0.9：0.02。取水、甘油、山梨醇、富马酸搅拌溶解，加热至70℃，加入明胶搅拌溶解后抽真空除气泡，至明胶澄清透明无气泡，55℃保温备用。

[0208] 内容物的制备：称取丁苯酞22g，聚氧乙烯35蓖麻油56g，二乙二醇单乙基醚22g，0.05g BHT，搅拌混合均匀，备用。

[0209] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为456.82mg。

[0210] 处方4

[0211]胶皮 比例(质量比) 内容物 比例(质量比)
明胶 1 丁苯酞 22
甘油 0.4 聚氧乙烯35蓖麻油 53.8
山梨醇 0.2 二乙二醇单乙基醚 21.2
水 0.9 VE 3
富马酸 0.02    

[0212] 制备方法：

[0213] 胶液的制备：以质量计，明胶：甘油：山梨醇：水、富马酸＝1：0.4：0.2：0.9：0.02。取水、甘油、山梨醇、富马酸搅拌溶解，加热至70℃，加入明胶搅拌溶解后抽真空除气泡，至明胶澄清透明无气泡，55℃保温备用。

[0214] 内容物的制备：称取丁苯酞22g，聚氧乙烯35蓖麻油56g，二乙二醇单乙基醚22g，3g VE，搅拌混合均匀，备用。

[0215] 制备软胶囊：将制备好的胶液和内容物在软胶囊机下制备胶囊，每粒装量为468.18mg。

[0216] 实施例26含抗氧剂情况下的表征

[0217] 将实施例25中的处方1-4分别按照实施例3方法制备自微乳软胶囊，考察在加速(40℃，75％RH)和长期(25℃，60％RH)条件下放置6个月的稳定性数据以及其他乳化效果，结果如下表10至表13所示。

[0218] 表10

[0219]

[0220]

[0221] 表11

[0222]

[0223] 表12

[0224]

[0225] 表13

[0226]

[0227]

[0228] 表中“自微乳化时间”指药液在溶出仪中37℃、50rpm，用100倍水搅拌完全溶解的时间。

[0229] 比较可知，本发明的丁苯酞自微乳化释药组合物可形成更小乳化微粒，与上市产品相比，本发明可大大提高溶出速率，并减小胶囊间的溶出差异；减少个体差异，提高生物利用度；而且可以最大程度降低胶皮交联程度，提高内容物稳定性，延长该自微乳化产品的保存期限。

[0230] 以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。