单孢分离装置、单孢分离显微镜以及单孢分离方法

摘要

本发明公开了一种单孢分离装置、一种单孢分离显微镜以及一种单孢分离方法。本发明的单孢分离装置包括升降调节器、连接杆、针状物体紧固件和分离针；所述升降调节器安装在显微镜镜臂上的聚光镜升降调节器的位置；利用显微镜的升降手轮控制所述升降调节器上升或者下降；所述连接杆的一端连接在所述升降调节器上，所述连接杆的另一端连接所述针状物体紧固件；所述分离针的一端锁紧在所述针状物体紧固件内部。本发明的优点在于：保证单孢分离的准确性；分离针高度可以调节；分离针不容易折断；不需要频繁对焦；操作过程简单。

权利要求

1.一种单孢分离装置，包括升降调节器、连接杆、针状物体紧固件和分离针；

所述升降调节器安装在显微镜镜臂上的聚光镜升降调节器的位置，利用显微镜的升降手轮控制所述升降调节器上升或者下降；

所述连接杆的一端连接在所述升降调节器上，所述连接杆的另一端连接所述针状物体紧固件；

所述分离针的一端锁紧在所述针状物体紧固件内部；

所述针状物体紧固件在其端部具有外螺纹螺套、内螺纹螺母；

所述外螺纹螺套的本体为中空圆柱体；

所述内螺纹螺母的本体为中空圆柱体，中空圆柱体具有内螺纹，内螺纹螺母的端部为中空锥体，中空锥体端部水平截断；

所述内螺纹螺母与所述外螺纹螺套的螺纹互相咬合；

所述针状物体紧固件还具有中空锥体，中空锥体具有Y字开槽或十字开槽，中空锥体端部水平截断；

所述中空锥体是一个独立部件，位于内螺纹螺母内侧；

所述中空锥体由弹性材料65锰钢制成；

所述针状物体锁紧在所述中空锥体内。

2.如权利要求1所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针由金属、合金、聚合物纤维或玻璃纤维制作而成。

3.如权利要求1所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部是直的或弯折的。

4.如权利要求1所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

5.如权利要求2所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部是直的或弯折的。

6.如权利要求2所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

7.如权利要求3所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

8.如权利要求5所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

9.如权利要求1至8中任一项所述的单孢分离装置，其特征在于：所述连接杆与所述针状物体紧固件通过转向接头连接。

10.如权利要求1至8中任一项所述的单孢分离装置，其特征在于：所述连接杆与所述针状物体紧固件通过球体转动接头连接。

11.一种光学显微镜，包括镜座、镜臂、镜筒、目镜、物镜、升降手轮和载物台，载物台上有纵向调节器和横向调节器，其特征在于：在所述光学显微镜的镜臂上安装有如权利要求1至10中任一项所述的单孢分离装置。

12.权利要求1至10中任一项所述的单孢分离装置在光学显微镜中的应用。

13.权利要求1至10中任一项所述的单孢分离装置的连接方法，其特征在于：所述连接杆的一端与所述针状物体紧固件连接；所述连接杆的另一端连接至显微镜镜臂上的所述升降调节器上，利用显微镜的升降手轮控制所述升降调节器上升或者下降；所述分离针的一端锁紧在所述针状物体紧固件内部。

14.如权利要求13所述的单孢分离装置的连接方法，其特征在于：所述连接杆的一端与所述针状物体紧固件通过转向接头连接或通过球体转动接头连接。

说明书

单孢分离装置、单孢分离显微镜以及单孢分离方法

技术领域

[0001] 本发明属于光学显微镜技术领域。

背景技术

[0002] 真菌单孢分离技术是真菌研究过程中一项最基本的关键技术。真菌病害鉴定、致病性分析、真菌系统进化及遗传变异分析等，都要求病原菌是由一个孢子繁衍而来的纯菌
株，都需要进行单孢分离。

[0003] 迄今为止，已经有很多关于真菌单孢分离技术的研究报道。如早期的稀释分离法、琼脂平板挖取法、玻璃毛细管分离法，以及后来的固定昆虫针挑取法、眉毛针挑取法、实体
镜挑取法等，还有后来在这些基础上进行改进的方法，如挑孢针挑取法(在显微镜下，利用
自制的挑孢针挑取单孢)、培养基挑取法(在显微镜下，寻找刚萌发尚未分枝且周围无其它
孢子的单孢，用针的侧面划开孢子所在位置的培养基，用针轻轻地挑取一小块培养基)、琼
脂块切取法(把孢子悬浮液涂布在培养基上，用解剖刀切取琼脂块转移到载玻片上，于显微
镜下切去多余的孢子，保证剩下的琼脂块只含有一个孢子)、培养基划线挖取法(在培养基
平板上画平行线，然后用移液枪把配制好的孢子悬浮液涂抹在线上，挖走培养后萌发的单
菌落)以及琼脂块挑针法(切取琼脂块放在无菌载玻片上，把孢子涂在上面，用挑针移走多
余的孢子，确保每个琼脂块上仅有一个孢子后，把琼脂块移至平板或者斜面培养基进行培
养)。

[0004] 遗憾的是，上述单孢分离方法都存在一些缺陷。有些方法技术性强，对实验人员的要求高，需要经过长期训练的熟练人员才能完成。例如徒手在显微镜下挑取单孢，对实验人
员手部动作的稳定性要求极高，哪怕是极微小的一点抖动在显微镜放大的视野下都会造成
很大幅度的变动，导致挑取微小的孢子非常困难，而且很难保证挑取到的是单孢；有些方法
则工具制作繁琐，例如将小号昆虫针固定到固定接种针的接种棒上，需要的工艺较复杂，需
要将昆虫针的尖端敲打成略扁的楔形，将其磨成锋利的薄针；最关键的是，上述的方法都不
能精细操作，无法保证挑取的是真正的单孢。例如徒手在显微镜下挖取培养基时，挖取过程
中微小的孢子很容易陷入缝隙中，由于看不到而被忽视，孢子萌发后与其它孢子萌发的菌
丝混杂在一起，导致形成的菌落不是单孢菌落。另外在把多余的孢子从培养基移走的过程
中，由于视野较大，切取过程中视野外还有孢子容易被忽略，导致操作者误认为挖取的是单
孢，其结果，形成的菌落实际上并不是单孢菌落。

[0005] 因此，现有的单孢分离技术都难以真正做到单孢分离，满足不了真菌研究发展的要求。

[0006] 专利CN 205691850U公开的单孢分离显微镜包括现有的显微镜1，在显微镜1的底座8上固定有单孢分离丝6，所述单孢分离丝6的下端固定在固定环5上，固定环5套在光源4
的外壁上。

[0007] 专利CN 205691850U公开的单孢分离显微镜，虽然在技术上进行了很大改进，但仍然存在结构简单、操作不方便等缺点。该单孢分离显微镜单孢分离丝的角度及长度是固定
的，导致其存在如下缺陷：

[0008] 1.单孢分离丝高度不可调，无法保证分离到的是单孢。该单孢分离显微镜单孢分离丝高度不可以调节，这种构造决定了单孢分离过程中，要想同时在放大的显微镜视野下
看清楚针尖与孢子，就需要单孢分离丝的顶端始终与培养基的底部接触。在载物台移动过
程中单孢分离丝在培养基表面划动时，在单孢分离丝的顶端会粘上其它孢子或者杂物，因
此分离到的不是单孢或者分离到的单孢被污染。

[0009] 2.单孢分离丝容易折断。由于单孢分离丝的顶端始终与培养基的底部接触，然而培养基的表面并不是均一的水平面，在载物台移动过程中，略凸起的培养基形成阻力，脆弱
的单孢分离丝容易被折断。

[0010] 3.对单孢分离丝要求高，只有熟练的技术人员才能制作出达到要求的单孢分离丝。利用升降手轮在显微镜放大视野里能够清晰看到的单孢分离丝顶端是一个很狭窄的调
焦范围，甚至是升降手轮的一个固定的点。由于该单孢分离显微镜单孢分离丝长度与角度
不可以调节，因而单孢分离丝长一点或者短一点，或者单孢分离丝角度偏离一点，都会导致
在显微镜放大视野下无法清晰地看到单孢分离丝的针尖，或者针尖无法与培养基上的孢子
同时清晰可视。因而初学者或者普通的操作人员很难制作出长度与角度刚好的单孢分离
丝。

[0011] 4.单孢分离丝粗细不可调节：单孢分离丝固定在显微镜底座上，其孔径固定，这样只能放置一种规格的单孢分离丝，太粗或者太细的单孢分离丝都无法放置。而不同真菌的
孢子大小差别较大，大孢子用细小的单孢分离丝无法挑取，而小孢子用粗分离丝挑取则容
易造成污染，在实际操作中，需要根据孢子大小使用不同规格的单孢分离丝进行工作。

[0012] 5.需要频繁对焦，效率低下。现有的单孢分离显微镜中，单孢分离丝与培养基底部接触，要找到理想分布的单孢需要多次移动升降手轮及载物台，每一次移动都需要进行对
焦。频繁的对焦容易导致操作人员眼睛疲劳，从而降低工作效率。

[0013] 6.操作繁琐，需要来回拆装多余的物镜。现有的单孢分离显微镜因为单孢分离丝长度不可以调节，因而挑取单孢过程中，需要拆卸掉多余的物镜，否则培养皿无法放置上
去，强行放置的话则单孢分离丝会被折断。这样单孢分离结束后为了还原其一般显微镜的
功能，还需要把其它物镜装上去，来回拆装导致操作繁琐。

发明内容

[0014] 针对现有技术的缺点，本发明进行了以下改进。

[0015] 本发明公开了一种针状物体紧固件，紧固件在其端部具有外螺纹螺套、内螺纹螺母。外螺纹螺套的本体为具有外螺纹的中空圆柱体；内螺纹螺母的本体为具有内螺纹的中
空圆柱体，中空圆柱体具有内螺纹，内螺纹螺母的端部为中空锥体，中空锥体端部水平截
断；内螺纹螺母与外螺纹螺套的螺纹互相咬合。紧固件还具有中空锥体，中空锥体具有Y字
开槽或十字开槽，中空锥体端部水平截断。中空锥体由弹性材料制成。针状物体锁紧在中空
锥体内。

[0016] 在本发明的针状物体紧固件的一种结构中，紧固件在其端部具有外螺纹螺套、内螺纹螺母。外螺纹螺套的本体为具有外螺纹的中空圆柱体。内螺纹螺母的本体为具有内螺
纹的中空圆柱体。内螺纹螺母与外螺纹螺套的螺纹互相咬合。紧固件还具有中空锥体，中空
锥体具有Y字开槽或十字开槽，中空锥体端部水平截断。中空锥体与外螺纹螺套连接成为一
体。中空锥体由弹性材料制成。针状物体锁紧在中空锥体内。

[0017] 在本发明的针状物体紧固件的另一种结构中，紧固件在其端部具有外螺纹螺套、中空锥体、内螺纹螺母。外螺纹螺套的本体为具有外螺纹的中空圆柱体。内螺纹螺母的本体
为具有内螺纹的中空圆柱体。内螺纹螺母与外螺纹螺套的螺纹互相咬合。紧固件还具有中
空锥体，中空锥体具有Y字开槽或十字开槽，中空锥体端部水平截断。中空锥体是一个独立
部件，位于内螺纹螺母内侧。中空锥体由弹性材料制成。针状物体锁紧在中空锥体内。

[0018] 进一步地，在本发明的针状物体紧固件中，制成中空锥体的弹性材料可以是弹性金属，例如65锰钢。

[0019] 本发明还公开了一种单孢分离装置，包括升降调节器、连接杆、针状物体紧固件和分离针。升降调节器安装在显微镜镜臂上的聚光镜升降调节器的位置，利用显微镜的升降
手轮控制升降调节器上升或者下降。连接杆的一端连接在升降调节器上，连接杆的另一端
连接针状物体紧固件。分离针的一端锁紧在针状物体紧固件内部。

[0020] 进一步地，在本发明的一种单孢分离装置中，针状物体紧固件在其端部具有外螺纹螺套、内螺纹螺母。外螺纹螺套的本体为具有外螺纹的中空圆柱体；内螺纹螺母的本体为
具有内螺纹的中空圆柱体，中空圆柱体具有内螺纹，内螺纹螺母的端部为中空锥体，中空锥
体端部水平截断；内螺纹螺母与外螺纹螺套的螺纹互相咬合。紧固件还具有中空锥体，中空
锥体具有Y字开槽或十字开槽，中空锥体端部水平截断；中空锥体与外螺纹螺套连接成为一
体。中空锥体由弹性材料制成。针状物体锁紧在中空锥体内。

[0021] 进一步地，在本发明的另一种单孢分离装置中，针状物体紧固件在其端部具有外螺纹螺套、内螺纹螺母。外螺纹螺套的本体为具有外螺纹的中空圆柱体；内螺纹螺母的本体
为具有内螺纹的中空圆柱体，中空圆柱体具有内螺纹，内螺纹螺母的端部为中空锥体，中空
锥体端部水平截断；内螺纹螺母与外螺纹螺套的螺纹互相咬合。紧固件还具有中空锥体，中
空锥体具有Y字开槽或十字开槽，中空锥体端部水平截断；中空锥体是一个独立部件，位于
内螺纹螺母内侧。中空锥体由弹性材料制成。针状物体锁紧在中空锥体内。

[0022] 使用具有本发明的结构的针状物体紧固件，由于中空锥体由弹性材料制成，可以使用内螺纹螺母锁紧外螺纹螺套，使内螺纹螺母内侧的中空锥体锁紧分离针。对应于不同
的锁紧程度，可以锁紧不同规格、即不同粗细的分离针。针状物体紧固件中空锥体的中空孔
径可以利用内螺纹螺母跟外螺纹螺套锁紧程度的不同进行调节，锁紧程度低对应的孔径
大，锁紧程度高对应的孔径小，因而可以根据所分离真菌孢子的大小选择不同规格的分离
针进行锁紧。

[0023] 进一步地，在本发明的单孢分离装置中，分离针可以由金属、合金、聚合物纤维或玻璃纤维等材料制作而成。

[0024] 进一步地，在本发明的单孢分离装置中，分离针的端部可以是直的或弯折的。

[0025] 进一步地，在本发明的单孢分离装置中，分离针的端部可以具有尖锐的形状。

[0026] 进一步地，在具有上述结构的单孢分离装置中，连接杆与针状物体紧固件的连接结构可以是可转向的连接结构。

[0027] 进一步地，在具有上述结构的单孢分离装置中，连接杆与针状物体紧固件的连接结构可以通过转向接头连接或者通过球体转动接头连接。

[0028] 本发明还公开了如上所述的单孢分离装置在光学显微镜中的应用。本发明的单孢分离显微镜是光学显微镜，可以是正置显微镜或倒置显微镜。

[0029] 本发明还公开了如上所述的单孢分离装置的连接方法，连接杆的一端与针状物体紧固件连接；连接杆的另一端连接至显微镜镜臂上的升降调节器上，利用显微镜的升降手
轮控制升降调节器上升或者下降；分离针的一端锁紧在针状物体紧固件内部。

[0030] 进一步地，在上述连接方法中，连接杆的一端通过转向接头或球体转动接头与针状物体紧固件进行连接。连接杆与针状物体紧固件形成夹角且角度可变，根据需要针状物
体紧固件可以相对于连接杆进行转动。

[0031] 本发明还公开了一种光学显微镜，包括镜座、镜臂、镜筒、目镜、物镜、升降手轮和载物台，载物台上有纵向调节器和横向调节器，在单孢分离显微镜的镜臂上安装有如上所
述的单孢分离装置。在显微镜镜臂上安装单孢分离装置的升降调节器，通过显微镜的升降
手轮控制升降调节器上升或下降。此处，镜臂上的升降调节器安装在聚光镜支架升降调节
器的位置，升降调节器与聚光镜支架升降调节器以相同方式与镜臂连接。需要卸下连接在
聚光镜支架升降调节器上的聚光镜支架以及连接在聚光镜支架上的聚光镜和虹彩光圈，在
聚光镜支架升降调节器的位置安装升降调节器。

[0032] 本发明还公开了一种单孢分离方法，包括以下步骤：

[0033] (1)将分生孢子涂抹在培养皿底部铺设的透明培养基的表面；

[0034] (2)将培养皿固定在显微镜载物台上，使培养基表面面对分离针；

[0035] (3)转动显微镜载物台的纵向调节器和/或横向调节器，在显微镜视野下找到目标单孢；

[0036] (4)利用升降手轮控制升降调节器，使分离针接近目标单孢；

[0037] (5)利用升降手轮控制升降调节器，使分离针接触培养基；

[0038] (6)调节显微镜载物台的纵向调节器和/或横向调节器控制载物台，将孢子挑取到分离针上；

[0039] (7)利用升降手轮控制升降调节器，移动分离针，使分离针完全不与培养基接触，

[0040] (8)将孢子放置至干净培养基上。

[0041] 本发明的优点在于：

[0042] 1.保证单孢分离的准确性。本发明通过控制纵向调节器和/或横向调节器来挑取单孢，有效规避了因为手抖动而造成的误操作；此外，本发明的单孢分离过程中，从培养基
表面挑取孢子以及将孢子放到新的培养基表面都清楚可视，从而保证分离到的是真正的单
孢。

[0043] 2.分离针高度可以调节。本发明中，分离针固定在针状物体紧固件上，单孢分离过程中，选取目标单孢(即周围没有其它孢子，或者其它孢子离得较远不干扰操作)后，才移动
针状物体紧固件使分离针与培养基表面接触，挑取单孢后移动分离针使分离针不与培养基
接触，避免了分离针与其它孢子接触的机会，从而保证分离到的是单孢。

[0044] 3.分离针不容易折断。本发明中，利用升降调节器控制分离针上下移动，可以有效避免载物台移动的过程中分离针与培养基表面的接触，因而不会出现分离针受到来自于凸
凹不平培养基表面的阻力而折断的情况。

[0045] 4.对分离针规格没有特别要求。本发明中，分离针固定在针状物体紧固件上，不仅可以上下移动，而且，在连接杆通过转向接头或者球体转动接头连接针状物体紧固件的情
况下，针状物体紧固件还可以转动，因而对分离针的长度与角度没有特别高的要求。

[0046] 5.可以根据孢子大小选择不同规格的分离针。本发明中，针状物体紧固件中空椎体的中空孔径是可以调节的，可以根据所挑取真菌孢子的大小选择不同规格的分离针进行
固定，从而保证对不同大小的真菌孢子都能够进行单孢分离。

[0047] 6.不需要频繁对焦，大大提高工作效率。本发明中，找到单孢对好焦后，接下来的过程不需要再进行对焦，操作人员不会因为频繁对焦而导致视力疲劳，从而提高工作效率。

[0048] 7.不需要拆装多余的物镜。本发明中，分离针的位置可以进行调节，需要放置培养皿时，移动分离针及载物台远离物镜，因而物镜不会阻碍放置培养皿，不需要对多余的物镜
进行拆装。

[0049] 8.操作过程简单。本发明的单孢分离过程简单，即便是初学者也能很快掌握该技术。

[0050] 9.单孢分离过程可以进行演示、录像和摄影：安装有单孢分离装置的生物显微镜可以选择安装摄像头，这样整个单孢分离过程可以在电脑或者大屏幕上进行演示，方便进
行单孢分离技术的示范，也可以将分离过程留下影像资料保存。

附图说明

[0051] 图1是本发明的一种实施方式的针状物体紧固件的分解示意图。

[0052] 图2是本发明的一种实施方式的安装有单孢分离装置的单孢分离显微镜的正视示意图。

[0053] 图3是本发明的一种实施方式的安装有单孢分离装置的单孢分离显微镜的侧视示意图。

[0054] 图4是本发明的一种实施方式的单孢分离装置针状物体紧固件的角度调节示意图。

具体实施方式

[0055] 具体而言，本发明如下：

[0056] 1.一种针状物体紧固件，其特征在于：所述针状物体紧固件在其端部具有外螺纹螺套、内螺纹螺母；所述外螺纹螺套的本体为中空圆柱体；所述内螺纹螺母的本体为中空圆
柱体，中空圆柱体具有内螺纹，内螺纹螺母的端部为中空锥体，中空锥体端部水平截断；所
述内螺纹螺母与所述外螺纹螺套的螺纹互相咬合；所述针状物体紧固件还具有中空锥体，
中空锥体具有Y字开槽或十字开槽，中空锥体端部水平截断；所述中空锥体与外螺纹螺套连
接成为一体；所述中空锥体由弹性材料制成；所述针状物体锁紧在所述中空锥体内。

[0057] 2.一种针状物体紧固件，其特征在于：所述针状物体紧固件在其端部具有外螺纹螺套、内螺纹螺母；所述外螺纹螺套的本体为中空圆柱体；所述内螺纹螺母的本体为中空圆
柱体，中空圆柱体具有内螺纹，内螺纹螺母的端部为中空锥体，中空锥体端部水平截断；所
述内螺纹螺母与所述外螺纹螺套的螺纹互相咬合；所述针状物体紧固件还具有中空锥体，
中空锥体具有Y字开槽或十字开槽，中空锥体端部水平截断；所述中空锥体是一个独立部
件，位于内螺纹螺母内侧；所述中空锥体由弹性材料制成；所述针状物体锁紧在所述中空锥
体内。

[0058] 3.如项1或2所述的针状物体紧固件，其特征在于：所述弹性材料为弹性金属。

[0059] 4.如项1或2所述的针状物体紧固件，其特征在于：所述弹性材料为65锰钢。

[0060] 5.一种单孢分离装置，包括升降调节器、连接杆、针状物体紧固件和分离针；所述升降调节器安装在显微镜镜臂上的聚光镜升降调节器的位置，利用显微镜的升降手轮控制
所述升降调节器上升或者下降；所述连接杆的一端连接在所述升降调节器上，所述连接杆
的另一端连接所述针状物体紧固件；所述分离针的一端锁紧在所述针状物体紧固件内部。

[0061] 6.一种单孢分离装置，包括升降调节器、连接杆、针状物体紧固件和分离针；所述升降调节器安装在显微镜镜臂上的聚光镜升降调节器的位置，利用显微镜的升降手轮控制
所述升降调节器上升或者下降；所述连接杆的一端连接在所述升降调节器上，所述连接杆
的另一端连接所述针状物体紧固件；所述分离针的一端锁紧在所述针状物体紧固件内部；
所述针状物体紧固件在其端部具有外螺纹螺套、内螺纹螺母；所述外螺纹螺套的本体为中
空圆柱体；所述内螺纹螺母的本体为中空圆柱体，中空圆柱体具有内螺纹，内螺纹螺母的端
部为中空锥体，中空锥体端部水平截断；所述内螺纹螺母与所述外螺纹螺套的螺纹互相咬
合；所述针状物体紧固件还具有中空锥体，中空锥体具有Y字开槽或十字开槽，中空锥体端
部水平截断；所述中空锥体与外螺纹螺套连接成为一体；所述中空锥体由弹性材料制成。

[0062] 7.一种单孢分离装置，包括升降调节器、连接杆、针状物体紧固件和分离针；所述升降调节器安装在显微镜镜臂上的聚光镜升降调节器的位置，利用显微镜的升降手轮控制
所述升降调节器上升或者下降；所述连接杆的一端连接在所述升降调节器上，所述连接杆
的另一端连接所述针状物体紧固件；所述分离针的一端锁紧在所述针状物体紧固件内部；
所述针状物体紧固件在其端部具有外螺纹螺套、内螺纹螺母；所述外螺纹螺套的本体为中
空圆柱体；所述内螺纹螺母的本体为中空圆柱体，中空圆柱体具有内螺纹，内螺纹螺母的端
部为中空锥体，中空锥体端部水平截断；所述内螺纹螺母与所述外螺纹螺套的螺纹互相咬
合；所述针状物体紧固件还具有中空锥体，中空锥体具有Y字开槽或十字开槽，中空锥体端
部水平截断；所述中空锥体是一个独立部件，位于内螺纹螺母内侧；所述中空锥体由弹性材
料制成。

[0063] 8.如项5所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针由金属、合金、聚合物纤维或玻璃纤维制作而成。

[0064] 9.如项5所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部是直的或弯折的。

[0065] 10.如项5所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

[0066] 11.如项6所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针由金属、合金、聚合物纤维或玻璃纤维制作而成。

[0067] 12.如项6所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部是直的或弯折的。

[0068] 13.如项6所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

[0069] 14.如项7所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针由金属、合金、聚合物纤维或玻璃纤维制作而成。

[0070] 15.如项7所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部是直的或弯折的。

[0071] 16.如项7所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

[0072] 17.如项8所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部是直的或弯折的。

[0073] 18.如项8所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

[0074] 19.如项9所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

[0075] 20.如项11所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部是直的或弯折的。

[0076] 21.如项11所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

[0077] 22.如项12所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

[0078] 23.如项14所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部是直的或弯折的。

[0079] 24.如项14所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

[0080] 25.如项15所述的单孢分离装置，其特征在于：所述分离针的端部具有尖锐的形状。

[0081] 26.如项5至25中任一项所述的单孢分离装置，其特征在于：所述连接杆与所述针状物体紧固件通过转向接头连接。

[0082] 27.如项5至25中任一项所述的单孢分离装置，其特征在于：所述连接杆与所述针状物体紧固件通过球体转动接头连接。

[0083] 28.一种光学显微镜，包括镜座、镜臂、镜筒、目镜、物镜、升降手轮、载物台，载物台上有纵向调节器和横向调节器，其特征在于：所述光学显微镜安装有如项5至27中任一项所
述的单孢分离装置。

[0084] 29.如项5至27中任一项所述的单孢分离装置在光学显微镜中的应用。

[0085] 30.如项5至27中任一项所述的单孢分离装置的连接方法，其特征在于：所述连接杆的一端与所述针状物体紧固件连接；所述连接杆的另一端连接至显微镜镜臂上的所述升
降调节器上，利用显微镜的升降手轮控制所述升降调节器上升或者下降；所述分离针的一
端锁紧在所述针状物体紧固件内部。

[0086] 31.如项30所述的单孢分离装置的连接方法，其特征在于：所述连接杆的一端与所述针状物体紧固件通过转向接头连接或通过球体转动接头连接。

[0087] 32.一种单孢分离方法，包括以下步骤：

[0088] (1)将分生孢子涂抹在培养皿底部铺设的透明培养基的表面；

[0089] (2)将培养皿固定在显微镜载物台上，使培养基表面面对分离针；

[0090] (3)转动显微镜载物台的纵向调节器和/或横向调节器，在显微镜视野下找到目标单孢；

[0091] (4)利用升降手轮控制升降调节器，使分离针接近目标单孢；

[0092] (5)利用升降手轮控制升降调节器，使分离针接触培养基；

[0093] (6)调节显微镜载物台的纵向调节器和/或横向调节器控制载物台，将孢子挑取到分离针上；

[0094] (7)利用升降手轮控制升降调节器，移动分离针，使分离针完全不与培养基接触，

[0095] (8)将孢子放置至干净培养基上。

[0096] 下面结合附图，对本发明进行说明。

[0097] 为了深入理解本发明，结合具体实施方式对本发明进行具体说明。然而，文中所列举的具体实施方式只是为了说明本发明，而不能被认为是对本发明进行限定。本发明的保
护范围仅受到本发明的权利要求书限定，而不受到具体实施方式的限定。在不违背本发明
宗旨的情况下，对本发明进行的任何修饰和变形、任何等同替代，都涵盖在本发明的保护范
围之中。

[0098] 图1是本发明的一种实施方式的针状物体紧固件的分解示意图。本发明的一种实施方式的针状物体紧固件5具有如下结构：针状物体紧固件5在其端部具有外螺纹螺套12、
内螺纹螺母7；外螺纹螺套12的本体为具有外螺纹的中空圆柱体；内螺纹螺母7的本体为具
有内螺纹的中空圆柱体，中空圆柱体具有内螺纹，内螺纹螺母的端部为中空锥体，中空锥体
端部水平截断；内螺纹螺母7与外螺纹螺套12的螺纹互相咬合；紧固件5还具有中空锥体6，
中空锥体是一个独立部件，位于内螺纹螺母内侧；中空锥体6具有Y字开槽，中空锥体6的端
部水平截断；中空锥体6由弹性材料制成；针状物体锁紧在中空锥体内。

[0099] 在本发明的另一种实施方式的针状物体紧固件的结构中，针状物体紧固件5在其端部具有外螺纹螺套12、内螺纹螺母7；外螺纹螺套12的本体为具有外螺纹的中空圆柱体；
内螺纹螺母7的本体为具有内螺纹的中空圆柱体，中空圆柱体具有内螺纹，内螺纹螺母的端
部为中空锥体，中空锥体端部水平截断；内螺纹螺母7与外螺纹螺套12的螺纹互相咬合；紧
固件5还具有中空锥体6，中空锥体与外螺纹螺套连接成为一体；中空锥体6具有Y字开槽，中
空锥体6的端部水平截断；中空锥体6由弹性材料制成；针状物体锁紧在中空锥体内。

[0100] 图2是本发明的一种实施方式的安装有单孢分离装置的单孢分离显微镜的正视示意图。图3是本发明的一种实施方式的安装有单孢分离装置的单孢分离显微镜的侧视示意
图。

[0101] 本发明的单孢分离装置，包括升降调节器4、连接杆3、针状物体紧固件5和分离针8。升降调节器4为方形，升降调节器4安装在显微镜镜臂2上的聚光镜升降调节器的位置。升
降调节器4与显微镜臂上的聚光镜升降调节器以相同方式连接，利用显微镜的升降手轮10
控制升降调节器4上升或者下降。连接杆3的一端连接在升降调节器4上，连接杆3的另一端
连接针状物体紧固件5。连接杆3连接在升降调节器4上。分离针8的一端锁紧在针状物体紧
固件5内部。

[0102] 在本发明的一种实施方式的单孢分离装置的结构中，如图1所示，针状物体紧固件5在其端部具有外螺纹螺套12、中空锥体6和内螺纹螺母7。外螺纹螺套12的本体为具有外螺
纹的中空圆柱体。内螺纹螺母7的本体为具有内螺纹的中空圆柱体，中空圆柱体具有内螺
纹，内螺纹螺母的端部为中空锥体，中空锥体端部水平截断。内螺纹螺母7与外螺纹螺套12
的螺纹互相咬合。中空锥体是一个独立部件，位于内螺纹螺母内侧，中空锥体具有Y字开槽，
中空锥体端部水平截断。使用内螺纹螺母7锁紧外螺纹螺套12，使分离针8锁紧在中空锥体6
内。中空锥体6由弹性材料制成，弹性材料例如可以是弹性金属，例如65锰钢。

[0103] 在本发明的另一种实施方式的单孢分离装置的结构中，针状物体紧固件5在其端部具有外螺纹螺套12和内螺纹螺母7。外螺纹螺套12的本体为具有外螺纹的中空圆柱体。内
螺纹螺母7的本体为具有内螺纹的中空圆柱体。内螺纹螺母7与外螺纹螺套12的螺纹互相咬
合。针状物体紧固件5还具有中空锥体6，中空锥体6与外螺纹螺套12连接成为一体，中空锥
体6具有Y字开槽，中空锥体端部水平截断。使用内螺纹螺母7锁紧外螺纹螺套12，使分离针8
锁紧在中空锥体6内。中空锥体6由弹性材料制成，弹性材料例如可以是弹性金属，例如65锰
钢。

[0104] 在本发明的单孢分离装置的结构中，针状物体紧固件5在其端部具有外螺纹螺套12、中空锥体6和内螺纹螺母7。由于针状物体紧固件5端部的中空锥体6为开槽结构，内螺纹
螺母7可以锁紧外螺纹螺套12，使中空锥体6卡紧内螺纹螺母7的开槽锥形端部，固定不同粗
细的分离针8。

[0105] 在本发明的单孢分离装置的结构中，针状物体紧固件5中空锥体的中空孔径可以利用内螺纹螺母跟外螺纹螺套12锁紧程度的不同进行调节，锁紧程度低对应的孔径大，锁
紧程度高对应的孔径小，因而可以根据所分离真菌孢子的大小选择不同规格的分离针进行
锁紧。

[0106] 图4是本发明的一种实施方式的单孢分离装置针状物体紧固件的角度调节示意图。

[0107] 在本发明的一种实施方式的单孢分离装置的结构中，如图4所示，针状物体紧固件5与连接杆3之间具有转向接头11，可以进行转动。

[0108] 在本发明的一种实施方式的单孢分离装置的结构中，针状物体紧固件5与连接杆3之间具有球体转动接头，可以在三维空间进行转动。

[0109] 本发明的单孢分离装置的分离针8可以由金属、合金、聚合物纤维或玻璃纤维等材料制作而成。

[0110] 本发明的单孢分离装置的分离针8的端部可以是直的，也可以弯折，使针尖与分离针基部之间的夹角为钝角，例如是135°角，以利于挑取单孢。

[0111] 本发明的单孢分离装置的分离针8的端部可以是尖锐的形状，以保证针尖足够细，可以挑取小的单孢。

[0112] 本发明的单孢分离装置可以安装于普通的光学显微镜，可以是正置显微镜，也可以是倒置显微镜。

[0113] 在本发明的连接方法的一种实施方式中，通过连接杆3将针状物体紧固件5连接到升降调节器4上；连接杆3的一端连接在显微镜镜臂上的升降调节器4上，升降手轮10控制升
降调节器4上升或者下降；连接杆3的另一端通过转向接头11与针状物体紧固件5进行连接，
连接杆3与针状物体紧固件5形成夹角且角度可变，根据需要，针状物体紧固件5可以相对于
连接杆3进行转动。

[0114] 在本发明的连接方法的另一种实施方式中，通过连接杆3将针状物体紧固件5连接到升降调节器4上；连接杆3的一端连接在显微镜镜臂上的升降调节器4上，升降手轮10控制
升降调节器4上升或者下降；连接杆3的另一端通过球体转动接头与针状物体紧固件5进行
连接，连接杆3与针状物体紧固件5形成夹角且角度可变，根据需要，针状物体紧固件5可以
相对于连接杆3进行转动。

[0115] 在本发明的连接方法的一种实施方式中，利用螺丝将单孢分离装置的连接杆3固定在升降调节器4的中下部。

[0116] 在本发明的连接方法的另一种实施方式中，利用焊接将单孢分离装置的连接杆3固定在显微镜升降调节器4的中下部。

[0117] 本发明的单孢分离显微镜是安装有本发明的单孢分离装置的显微镜。本发明的单孢分离装置可以安装于普通的光学显微镜，可以是正置显微镜，也可以是倒置显微镜。

[0118] 图2是本发明的一种实施方式的单孢分离显微镜的正视示意图。图3是本发明的一种实施方式的单孢分离显微镜的侧视示意图。

[0119] 本发明的单孢分离显微镜包括镜座1、镜臂2、镜筒、目镜、物镜、升降手轮10、载物台9，载物台9上有纵向调节器和横向调节器，在本发明的单孢分离显微镜上安装有如上所
述的单孢分离装置。

[0120] 为了在显微镜上安装本发明的单孢分离装置，需要卸下聚光镜支架升降调节器、连接在聚光镜支架升降调节器上的聚光镜支架以及连接在聚光镜支架上的聚光镜和虹彩
光圈，在聚光镜支架升降调节器的位置安装升降调节器4。

[0121] 在本发明的单孢分离显微镜的一种实施方式中，单孢分离装置固定在显微镜的镜臂上的聚光镜支架升降调节器的位置上，升降调节器4与聚光镜支架升降调节器使用相同
的方式调节上升或下降。

[0122] 在本发明的单孢分离显微镜的一种实施方式中，通过升降手轮10调节升降调节器4的上升和下降。

[0123] 在本发明的单孢分离显微镜的一种实施方式中，单孢分离装置的连接杆3的一端连接在升降调节器4上，连接杆3的另一端连接针状物体紧固件5，连接杆3位于水平方向或
者近似于水平的方向上。

[0124] 在本发明的单孢分离显微镜的一种实施方式中，连接杆3与针状物体紧固件5的连接通过转向接头11连接，针状物体紧固件8可以相对于连接杆3，进行转动，挑起单孢的可操
作面积大，易于进行单孢分离操作。

[0125] 在本发明的单孢分离显微镜的另一种实施方式中，连接杆3与针状物体紧固件5的连接通过球体转动接头连接，针状物体紧固件8可以相对于连接杆3在三维空间进行转动，
挑起单孢的可操作面积进一步增大，更易于进行单孢分离操作。

[0126] 本发明的单孢分离方法的一种实施方式包括以下步骤：

[0127] (1)准备一个底部铺设透明培养基的培养皿，把待分离菌株的分生孢子涂抹在培养基表面；

[0128] (2)将培养皿固定在显微镜载物台9上，使培养基表面面对分离针8；

[0129] (3)转动显微镜载物台9的纵向调节器和/或横向调节器，在显微镜视野下找到目标单孢；

[0130] (4)利用升降手轮10控制升降调节器4，和/或调节针状物体紧固件5，使分离针8接近目标单孢；

[0131] (5)利用升降手轮10控制升降调节器4使分离针8接触培养基；

[0132] (6)调节显微镜载物台9的纵向调节器和/或横向调节器控制载物台9，将孢子挑取到分离针8上；

[0133] (7)利用升降手轮10控制升降调节器4移动分离针8，使分离针8完全不与培养基接触。

[0134] (8)转动载物台9的纵向调节器和/或横向调节器，把孢子移动至干净培养基附近；

[0135] (9)控制升降调节器4使分离针8移动，将孢子放置至干净培养基上。

[0136] 附图标记：

[0137] 1.镜座；

[0138] 2.镜臂；

[0139] 3.连接杆；

[0140] 4.升降调节器；

[0141] 5.针状物体紧固件；

[0142] 6.中空锥体；

[0143] 7.内螺纹螺母；

[0144] 8.分离针；

[0145] 9.载物台；

[0146] 10.升降手轮；

[0147] 11.转向接头；

[0148] 12.外螺纹螺套。