利用菌根菌丝网连续监测菌根真菌侵染强度的方法

摘要

本发明利用菌根菌丝网连续监测菌根真菌侵染强度的方法，是首先制备培养室，在不同育苗容器间隙的育苗基质中建立丰富的菌根菌丝网络，收获宿主植物后再重新种植宿主植物，在育苗容器间隙的育苗基质中菌丝失去与原宿主植物的联系势必会寻找下一个宿主植物进行侵染，使重新种植的宿主植物达到被快速侵染的目的，克服了在收获宿主植物时毁苗后不可连续使用的缺陷，增加育苗基质的使用次数，降低菌剂的消耗量以及减少菌剂扩繁消耗的时间，得到不同时间段菌根真菌侵染强度的变化对宿主植物作用的数据，建立了一个利用菌根菌丝网连续监测菌根真菌侵染强度的体系，达到一次接种多次监测的目的。

权利要求

1.利用菌根菌丝网连续监测菌根真菌侵染强度的方法，其特征在于：a.制备培养室:在38*38*10cm的培养容器（1）底端开有两个直径22mm的排水孔（2），在3

底部填充粒径4mm玻璃珠（3），沿直径5cm，高8cm，体积157cm的育苗容器（4）的四周开四个直径22mm的菌丝孔（5），育苗容器（4）外缘及底面包裹37μm尼龙网（6），将育苗容器（4）置于培养容器（1）中形成四个3*3方阵，相邻育苗容器（4）的间隔均为1cm，在所有育苗容器（4）内外同时填充白沙和蛭石体积比1：1混合的育苗基质（7），将培养容器（1）放置于托盘（8）上；

b.在育苗容器深度的2/3处种植宿主植物并加入菌剂，每间隔10天对宿主植物浇50ml磷浓度为1/100的营养液，每间隔2天浇灌50ml蒸馏水以保持湿润，丛枝菌根真菌在接种30天后形成侵染，外生菌根真菌在接种后60天形成侵染，穿过尼龙网进入育苗容器间隙的育苗基质中，培育90天建立丰富的菌根菌丝网；

c.菌根菌丝网建立后保留方阵内的中心宿主植物并剪去地面以上2/3部分，将方阵中心四周所有的宿主植物全部去除，抖落粘在宿主植物根上的育苗基质，保持育苗容器内外育苗基质的稳定；

d.围绕方阵中心在四周再次种植宿主植物，培育三周后每间隔5天测定一次侵染强度，以3*3方阵为单位沿方阵中心四周每5天收获一次宿主植物，并保留中心宿主植物及育苗基质的稳定；

e.完成一次不同时间段侵染强度的监测后，可得到不同时间段菌根真菌侵染强度的变化对宿主植物作用的数据，建立一个利用菌根菌丝网连续监测菌根真菌侵染强度的体系，所保留育苗基质可以重复多次利用，多次监测无需重新接种菌剂，围绕方阵中心在四周直接种植宿主植物，开始下一个监测循环。

说明书

利用菌根菌丝网连续监测菌根真菌侵染强度的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种监测菌根真菌侵染强度的方法，具体是一种利用菌根菌丝网连续监测菌根真菌侵染强度的方法，属于微生物学领域。

背景技术

[0002] 菌根真菌包括从枝菌根真菌、外生菌根真菌、兰科菌根真菌等，丛枝菌根真菌能与超过80%的陆地植物形成共生体系，占土壤微生物总量的5% 36%。菌根真菌与宿主植物形成
~
共生后，能促进宿主植物生长，提高宿主植物对生物和非生物胁迫的耐性和抗性。菌根真菌
菌丝的外延能侵染同种或异种宿主植物并将其相邻根系连接起来从而形成菌丝网，以介导
不同宿主植物个体之间的养分和水分输送，潜在地影响有限的矿质养分在宿主植物间的分
布。接种后不同时间段菌根真菌对宿主植物的侵染强度不同，所表现出对宿主植物的促生
作用、协助宿主植物抵抗胁迫作用，以及对宿主植物与真菌的共生基因调控等作用均不同，
所以准确有效的监测菌根真菌对宿主植物动态的侵染强度，对科研及生产实践都具有重要
意义。

[0003] 为检验菌根真菌不同侵染强度对宿主植物的有益效果，目前常采用单盆培养法控制等量接种进行监测，这种方法为保证结果的准确性，需要在控制其它变量一致的情况下
重复接种多个相同宿主植物才能进行，所以需要消耗大量菌剂，由于重复接种单个盆栽的
宿主植物过多且不可连续性，整个监测过程耗时费力，效率不高。目前，尚未发现一种既能
准确监测菌根真菌侵染强度，又不用多次准备大量单盆种植宿主植物及接种的方法。

发明内容

[0004] 本发明是为了克服目前传统菌根真菌监测侵染强度方法所存在的缺陷，而公开一种利用菌根菌丝网连续监测菌根真菌侵染强度的方法。

[0005] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

[0006] a.制备培养室:在培养容器底端开有若干个排水孔，在底部填充透气性好的透气基质，沿育苗容器周边开有若干个菌丝孔，育苗容器外缘及底面包裹隔离网，将若干个育苗
容器置于培养容器中形成有中心宿主植物的方阵，相邻育苗容器的间隔距离相同，在所有
育苗容器内外同时填充保水性、透气性较好的育苗基质，将培养室放置于托盘上；

[0007] b.在育苗容器深度的2/3处种植宿主植物并加入菌剂，每间隔10天对宿主植物浇灌低磷营养液，每间隔2天浇蒸馏水以保持湿润，丛枝菌根真菌在接种30天后形成侵染，外
生菌根真菌在接种后60天形成侵染，并穿过隔离网进入育苗容器间隙的育苗基质中，根据
不同类型菌根真菌的生活史培育相应的时间建立菌根菌丝网；

[0008] c.菌根菌丝网建立后保留方阵内的中心宿主植物并剪去地面以上2/3部分，将方阵中心外四周所有的宿主植物全部去除，抖落粘在宿主植物根上的育苗基质，保持育苗容
器内外育苗基质的稳定；

[0009] d.围绕方阵中心在四周再次种植宿主植物，培育至相应的时间后进行侵染强度的测定，围绕方阵中心按照相同的间隔时间进行收获宿主植物，并保留中心宿主植物及育苗
基质的稳定；

[0010] e.完成一次不同时间段侵染强度的监测后，可得到不同时间段菌根真菌侵染强度的变化对宿主植物作用的数据，建立一个利用菌根菌丝网连续监测菌根真菌侵染强度的体
系，所保留育苗基质可以重复多次利用，多次监测无需重新接种菌剂，围绕方阵中心在四周
直接种植宿主植物，开始下一个监测循环。

[0011] 本发明首先制备培养室，在不同育苗容器间隙的育苗基质中建立丰富的菌根菌丝网络，收获宿主植物后再重新种植宿主植物，在育苗容器间隙的育苗基质中菌丝失去与原
宿主植物的联系势必会寻找下一个宿主植物进行侵染，使重新种植的宿主植物达到被快速
侵染的目的，克服了在收获宿主植物时毁苗后不可连续使用的缺陷，增加育苗基质的使用
次数，降低菌剂的消耗量以及减少菌剂扩繁消耗的时间，得到不同时间段菌根真菌侵染强
度的变化对宿主植物作用的数据，建立了一个利用菌根菌丝网连续监测菌根真菌侵染强度
的体系，达到一次接种多次监测的目的。本发明操作简单,装置可重复利用,可行性高。

附图说明

[0012] 附图1为本发明培养室构造的主视剖面示意图。

[0013] 附图2为本发明培养室构造的俯视图。

[0014] 附图标记说明如下：培养容器1，排水孔2，透气基质3，育苗容器4，菌丝孔5，隔离网6，育苗基质7，托盘8。

具体实施方式

[0015] 以下结合具体实施例及附图对本发明做进一步详细说明，本实施例只是为了解释本发明而不是限制本发明：

[0016] a.制备培养室:在38*38*10cm的培养容器（1）底端开有两个直径22mm的排水孔3
（2），在底部填充粒径4mm玻璃珠（3），沿直径5cm，高8cm，体积157cm的育苗容器（4）的四周
开四个直径22mm的菌丝孔（5），育苗容器（4）外缘及底面包裹37μm尼龙网（6），将育苗容器
（4）置于培养容器（1）中形成四个3*3方阵，相邻育苗容器（4）的间隔均为1cm，在所有育苗容
器（4）内外同时填充白沙和蛭石体积比1：1混合的育苗基质（7），将培养容器（1）放置于托盘
（8）上；

[0017] b.在育苗容器深度的2/3处种植宿主植物并加入菌剂，每间隔10天对宿主植物浇50ml磷浓度为1/100的营养液，每间隔2天浇灌50ml蒸馏水以保持湿润，丛枝菌根真菌在接
种30天后形成侵染，并穿过尼龙网进入育苗容器间隙的育苗基质中，培育90天建立丰富的
菌根菌丝网；

[0018] c.菌根菌丝网建立后保留方阵内的中心宿主植物并剪去地面以上2/3部分，将方阵中心四周所有的宿主植物全部去除，抖落粘在宿主植物根上的育苗基质，保持育苗容器
内外育苗基质的稳定；

[0019] d.围绕方阵中心在四周再次种植宿主植物，培育三周后每间隔5天测定一次侵染强度，以3*3方阵为单位沿方阵中心四周每5天收获一次宿主植物，并保留中心宿主植物及
育苗基质的稳定；

[0020] e.完成一次不同时间段侵染强度的监测后，可得到不同时间段菌根真菌侵染强度的变化对宿主植物作用的数据，建立一个利用菌根菌丝网连续监测菌根真菌侵染强度的体
系，所保留育苗基质可以重复多次利用，多次监测无需重新接种菌剂，围绕方阵中心在四周
直接种植宿主植物，开始下一个监测循环。