一种从罗汉果根中提取并分离总黄酮、总三萜皂苷和总多糖的方法

摘要

本发明提供了一种从罗汉果根中提取并分离总黄酮、总三萜皂苷和总多糖的方法，包括以下步骤：热水提取，聚酰胺吸附与洗脱，得罗汉果根总黄酮；脱色脱盐，大孔树脂吸附与洗脱：将脱色脱盐液通过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂柱流出液浓缩、干燥，得罗汉果根总多糖；大孔吸附树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得罗汉果根总三萜皂苷。本发明通过一种连续型的方法，得到了三种具有经济价值的产物，即罗汉果总黄酮、总三萜皂苷和总多糖。优选实施方案中，三种产物的含量和收率均在90％以上，经济价值高，是一种对罗汉果的综合利用方法。本发明提供的方法工艺连贯、简单，可操作性强，生产成本低，不使用有毒有害化工溶剂，安全环保，适合工业化生产。

权利要求

1.一种从罗汉果根中提取并分离总黄酮、总三萜皂苷和总多糖的方法，包括以下步骤：（1）热水提取：将罗汉果根破碎，加入热水搅拌分多次提取，提取液冷却至室温，陶瓷膜过滤，得提取滤液；

（2）聚酰胺吸附与洗脱：将提取滤液通过聚酰胺树脂柱，聚酰胺树脂柱流出液收集待用；聚酰胺树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得罗汉果根总黄酮；所述聚酰胺树脂的用量为罗汉果根重量的0.2～0.3倍，单位L/kg，所述聚酰胺树脂柱的高径比为5～8:1，上柱的流速为0.5～1.0 BV/小时；

（3）脱色脱盐：将步骤（2）聚酰胺树脂柱流出液通过两根串联的“阴‑阳”离子交换树脂柱，得脱色脱盐液；阴离子交换树脂的种类为大孔型强碱性阴离子交换树脂，阳离子交换树脂的种类为强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂；所述阴离子交换树脂的用量为罗汉果根重量的0.1～0.2倍，单位L/kg，所述阴离子交换树脂柱的高径比为5～8:1，物料通过阴离子交换树脂柱的流速为1～2 BV/小时；所述阳离子交换树脂的体积用量为罗汉果根重量的0.1～

0.2倍，单位L/kg，阳离子交换树脂柱的高径比为5～8:1，物料通过阳离子交换树脂柱的流速为1～2 BV/小时；

（4）大孔树脂吸附与洗脱：将脱色脱盐液通过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂柱流出液收集待用；大孔吸附树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得罗汉果根总三萜皂苷；所述大孔吸附树脂的用量为罗汉果根重量的0.2～0.3倍，单位L/kg，大孔吸附树脂柱的高径比为5～8:1，上柱的流速为0.5～1.0 BV/h；

（5）总多糖的分离：将步骤（4）大孔吸附树脂柱流出液浓缩、干燥，得罗汉果根总多糖。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述热水的温度为80～90℃，分多次提取是指分2‑8次进行提取。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，分多次提取是指分3‑5次进行提取。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所用热水的总量为罗汉果根重量的20‑35倍，提取的总的时间9‑15小时。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，每次提取所用热水的量和提取时间按照顺序依次递减。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，每次提取所用热水的量和提取时间比上一次递减1/6 1/3。

~

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述阴离子交换树脂为D941、D945、LX‑T5、LSD‑762、LSA‑700或LX‑22；所述阳离子交换树脂为001×7、001×8、001×12或

001×16。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（4）中，所述大孔吸附树脂的种类为非极性、中极性或极性大孔吸附树脂。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂选自LX‑11、LX‑60、LX‑28、LX‑38、LSA‑10、LSA‑7、LX‑8、LX‑17或XDA‑8。

说明书

一种从罗汉果根中提取并分离总黄酮、总三萜皂苷和总多糖

的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种从罗汉果根中提取并分离多种天然活性成分的方法，具体涉及一种从罗汉果根中提取并分离总黄酮、总三萜皂苷和总多糖的方法。

背景技术

[0002] 罗汉果是桂林名贵的土特产，主产于永福县和龙胜县，也是国家首批批准的“药食两用”材料之一。罗汉果甜苷是罗汉果中特有的天然高倍甜味剂，其甜度为蔗糖的300倍，其
热量为零，具有清热润肺镇咳、润肠通便之功效，对肥胖、便秘、糖尿病等具有防治作用。罗
汉果甜苷作为食品是安全无毒的，在国家强制标准《GB2760食品添加剂使用标准》中规定，
罗汉果甜苷可不限量用于各类食品。

[0003] 但是目前的生产实际中，对罗汉果的工业化生产利用，主要集中在对罗汉果果实中甜苷的提取和分离，对罗汉果根、茎、叶等自然资源并未加以利用，而是当成废弃物处理。
由于罗汉果种植和生产加工的规模日益增大，每年都有大量的罗汉果根被废弃。现代科学
研究发现，罗汉果根中存在丰富的天然活性成分，包括黄酮类化合物、三萜皂苷和多糖等。
这些天然化合物，有特殊的生理保健功效，如：增强免疫力、抗肿瘤、抗血栓、抗氧化、抗衰
老、降血糖、降血压、降血脂等。

[0004] 因此，研发出从罗汉果根中提取和分离各种天然活性成分的方法，变废为宝，对于环境保护，促进罗汉果整体产业的发展，以及促进种植地区农业经济的发展都具有重要的
现实意义。

[0005] CN200810107427.6公开了从罗汉果根中提取的皂苷类化合物、其制备方法及其用途，是以罗汉果根为原料，经甲醇或乙醇加热回流提取、回收溶剂、溶解、大孔树脂柱吸附、
洗脱等步骤，得到总皂苷提取物，再经硅胶柱层析和葡聚糖凝胶层析，得到皂苷单体。该方
法使用了大量的有机溶剂，后续分离纯化步骤设备要求高，操作复杂，处理量极小，得率低，
且只提取了罗汉果根中的一类活性成分——皂苷类化合物，未提取和分离其他活性成分，
没有实现资源的综合利用，不适宜工业化生产。

[0006] 颜小捷等公开了罗汉果根多糖的分离纯化、结构鉴定及抗肿瘤活性研究(《广西植物》，2012年1月)，是以罗汉果根为原料，经水煎煮、离心、减压浓缩、三氯甲烷/正丁醇萃取
除杂、醇沉等步骤得到罗汉果根粗多糖。该方法过多的使用了有毒有害的化工溶剂，步骤繁
琐，醇沉步骤使用的无水乙醇无法重复利用，且多糖在醇沉过程中的损耗不可避免。此外，
该方法只提取了罗汉果根中的一类活性成分——多糖，未提取和分离其他活性成分，没有
实现资源的综合利用，不适宜工业化生产。

发明内容

[0007] 本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种可同时提取多种活性成分，可将罗汉果根资源综合利用，工艺连贯、简单，可操作性强，生产成本
低，不适用有毒有害化工溶剂，安全环保，且各种活性成分的含量高、收率高，适合工业化生
产的从罗汉果根中提取并分离总黄酮、总三萜皂苷和总多糖的方法。

[0008] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种从罗汉果根中提取并分离总黄酮、总三萜皂苷和总多糖的方法，包括以下步骤：

[0009] (1)热水提取：将罗汉果根破碎，加入热水搅拌分多次提取，提取液冷却至室温，陶瓷膜过滤，得提取滤液；

[0010] (2)聚酰胺吸附与洗脱：将提取滤液通过聚酰胺树脂柱，聚酰胺树脂柱流出液收集待用；聚酰胺树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得罗汉果根总黄酮；

[0011] (3)脱色脱盐：将步骤(2)聚酰胺树脂柱流出液通过两根串联的“阴‑阳”离子交换树脂柱，得脱色脱盐液；

[0012] (4)大孔树脂吸附与洗脱：将脱色脱盐液通过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂柱流出液收集待用；大孔吸附树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得罗汉果根总三萜皂苷；

[0013] (5)总多糖的分离：将步骤(4)大孔吸附树脂柱流出液浓缩、干燥，得罗汉果根总多糖。

[0014] 优选地，步骤(1)中，所述热水的温度为80～90℃，分多次提取是指分2‑8次进行提取，优选分3‑5次进行提取。所用热水的总量为罗汉果根重量的20‑35倍，提取的总的时间9‑
15小时。每次提取所用热水的量和提取时间按照顺序依次递减。具体地，每次提取所用热水
的量和提取时间比上一次递减1/6～1/3。比如如果分为三次提取，三次热水的重量分别为
罗汉果根重量的8～15倍、6～10倍、6～8倍，三次提取的时间分别为4～5小时、3～4小时、2
～3小时；如果分为四次提取，每次热水的重量分别为罗汉果根重量的8～12倍、6～10倍、5
～8倍，4～6倍，四次提取的时间分别为3～4小时、2.5～3.5小时、2～3小时、1.5～2.5小时。

[0015] 使用热水搅拌、分次提取的目的，是将罗汉果根中的三种水溶性有效成分——总黄酮、总三萜皂苷和总多糖——完全浸出。若热水的温度过低、用量过少或提取的时间过
短，都无法充分的达到上述目的；若热水的温度过高、用量过多或提取的时间过长，都将造
成能源或物料的浪费。

[0016] 优选地，步骤(2)中，所述聚酰胺树脂的用量为罗汉果根重量的0.2～0.3倍(L/kg)，所述聚酰胺树脂柱的高径比为5～8:1，上柱的流速为0.5～1.0BV/小时。

[0017] 优选地，步骤(3)中，所述阴离子交换树脂的种类为大孔型强碱性阴离子交换树脂，型号为D941、D945、LX‑T5、LSD‑762、LSA‑700、LX‑22；所述阳离子交换树脂的种类为强酸
性苯乙烯系阳离子交换树脂，型号为001×7、001×8、001×12、001×16。

[0018] 优选地，步骤(3)中，所述阴离子交换树脂的用量为罗汉果根重量的0.1～0.2倍(L/kg)，所述阴离子交换树脂柱的高径比为5～8:1，物料通过阴离子交换树脂柱的流速为1
～2BV/小时；所述阳离子交换树脂的体积用量为罗汉果根重量的0.1～0.2倍(L/kg)，阳离
子交换树脂柱的高径比为5～8:1，物料通过阳离子交换树脂柱的流速为1～2BV/小时。

[0019] 优选地，步骤(4)中，所述大孔吸附树脂的种类为非极性、中极性或极性大孔吸附树脂，具体型号为LX‑11、LX‑60、LX‑28、LX‑38、LSA‑10、LSA‑7、LX‑8、LX‑17、XDA‑8。优选地，
步骤(4)中，所述大孔吸附树脂的用量为罗汉果根重量的0.2～0.3倍(L/kg)，大孔吸附树脂
柱的高径比为5～8:1，上柱的流速为0.5～1.0BV/h。

[0020] 本发明方法中，1BV＝1个柱体积。

[0021] 本发明采用热水多次提取将罗汉果根中总黄酮、总三萜皂苷和总多糖三种有效成分完全浸出。本发明预料不到地发现，在分别利用聚酰胺树脂，阴离子交换树脂，阳离子交
换树脂和大孔吸附树脂对三种有效成分进行了分离和纯化，严格按照本申请中树脂柱的组
合使用顺序，能够同时得到纯度和收率均超过了90％的总黄酮、总三萜皂苷和总多糖，本申
请步骤(2)、(4)、(5)中所述的总黄酮、总三萜皂苷和总多糖也指的是质量纯度大于90％的
相应产品。

[0022] 本发明方法的有益效果如下：

[0023] (1)本发明通过一种连续型的方法，得到了三种具有经济价值的产物，即罗汉果总黄酮、总三萜皂苷和总多糖。三种产物的含量和收率均令人满意，优选实施例中三种产品的
纯度和收率均超过了90％，经济价值高，是一种对罗汉果的综合利用方法。

[0024] (2)本发明方法提供了一种全新的可同时提取多种活性成分，可将罗汉果根资源综合利用，工艺连贯、简单，可操作性强，生产成本低，不使用有毒有害化工溶剂，安全环保，
适合工业化生产。

具体实施方式

[0025] 下面结合实施例对本发明作进一步说明。

[0026] 本发明实施例所使用的罗汉果根(干燥)购于湖南华诚生物资源股份有限公司罗汉果种植基地，其中总黄酮的含量为2.27wt％，总三萜皂苷的含量为1.39wt％，总多糖的含
量为5.65wt％。本发明实施例所使用的阴、阳离子交换树脂和大孔吸附树脂均购于西安蓝
晓科技新材料股份有限公司；本发明实施例所使用的辅料或化学试剂，如无特殊说明，均通
过常规商业途径获得。

[0027] 本发明实施例中，采用紫外分光光度法测定罗汉果根总黄酮的含量，采用香草醛‑高氯酸比色法测定罗汉果根总三萜皂苷的含量，采用苯酚‑硫酸比色法测定罗汉果根总多
糖的含量。

[0028] 实施例1

[0029] (1)热水提取：取干燥罗汉果根20kg，破碎，依次加入温度为85℃的热水240kg、200kg、160kg，分别搅拌提取4小时、3小时、2小时，合并提取液，冷却至室温，陶瓷膜过滤，得
提取滤液；

[0030] (2)聚酰胺吸附与洗脱：将提取滤液以0.8BV/小时的流速通过聚酰胺树脂柱，聚酰胺树脂的用量为6L，聚酰胺树脂柱的高径比为6:1，聚酰胺树脂柱流出液收集待用；聚酰胺
树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得罗汉果根总黄酮0.47kg；

[0031] (3)脱色脱盐：将步骤(2)聚酰胺树脂柱流出液以1.5BV/小时的流速通过两根串联的“阴‑阳”离子交换树脂柱，阴离子交换树脂的型号为D941，阴离子交换树脂的用量为3L，
阴离子交换树脂柱的高径比为8:1；阳离子交换树脂的型号为001×7，阳离子交换树脂的用
量为3L，阳离子交换树脂柱的高径比为8:1，得脱色脱盐液；

[0032] (4)大孔树脂吸附与洗脱：将脱色脱盐液以0.5BV/小时的流速通过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂的型号为LX‑11，大孔吸附树脂的用量为6L，大孔吸附树脂柱的高径比为
6:1，大孔吸附树脂柱流出液收集待用；大孔吸附树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得
罗汉果根总三萜皂苷0.28kg；

[0033] (5)总多糖的分离：将步骤(4)大孔吸附树脂柱流出液浓缩、干燥，得罗汉果根总多糖1.17kg。

[0034] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为92.53％，罗汉果根总黄酮的收率为95.79％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为93.78％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为94.45％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为92.53％，罗汉果根总多糖的收率为95.81％。

[0035] 实施例2

[0036] (1)热水提取：取干燥罗汉果根50kg，破碎，依次加入温度为80℃的热水750kg、500kg、400kg，分别搅拌提取4小时、3小时、3小时，合并提取液，冷却至室温，陶瓷膜过滤，得
提取滤液；

[0037] (2)聚酰胺吸附与洗脱：将提取滤液以1.0BV/小时的流速通过聚酰胺树脂柱(聚酰胺树脂的用量为15L，聚酰胺树脂柱的高径比为8:1)，聚酰胺树脂柱流出液收集待用；聚酰
胺树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得罗汉果根总黄酮1.12kg；

[0038] (3)脱色脱盐：将步骤(2)聚酰胺树脂柱流出液以1BV/小时的流速通过两根串联的“阴‑阳”离子交换树脂柱，阴离子交换树脂的型号为D945，阴离子交换树脂的用量为10L，阴
离子交换树脂柱的高径比为6:1；阳离子交换树脂的型号为001×8，阳离子交换树脂的用量
为10L，阳离子交换树脂柱的高径比为6:1，得脱色脱盐液；

[0039] (4)大孔树脂吸附与洗脱：将脱色脱盐液以0.8BV/小时的流速通过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂的型号为LX‑38，大孔吸附树脂的用量为15L，大孔吸附树脂柱的高径比为
5:1，大孔吸附树脂柱流出液收集待用；大孔吸附树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得
罗汉果根总三萜皂苷0.67kg；

[0040] (5)总多糖的分离：将步骤(4)大孔吸附树脂柱流出液浓缩、干燥，得罗汉果根总多糖2.9kg。

[0041] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为93.83％，罗汉果根总黄酮的收率为92.59％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为95.12％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为91.70％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为94.34％，罗汉果根总多糖的收率为96.85％。

[0042] 实施例3

[0043] (1)热水提取：取干燥罗汉果根30kg，破碎，依次加入温度为90℃的热水300kg、240kg、240kg，分别搅拌提取3小时、2小时、2小时，合并提取液，冷却至室温，陶瓷膜过滤，得
提取滤液；

[0044] (2)聚酰胺吸附与洗脱：将提取滤液以0.6BV/小时的流速通过聚酰胺树脂柱(聚酰胺树脂的用量为6L，聚酰胺树脂柱的高径比为7:1)，聚酰胺树脂柱流出液收集待用；聚酰胺
树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得罗汉果根总黄酮0.66kg；

[0045] (3)脱色脱盐：将步骤(2)聚酰胺树脂柱流出液以1.2BV/小时的流速通过两根串联的“阴‑阳”离子交换树脂柱(阴离子交换树脂的型号为LX‑T5，阴离子交换树脂的用量为6L，
阴离子交换树脂柱的高径比为7:1；阳离子交换树脂的型号为001×16，阳离子交换树脂的
用量为6L，阳离子交换树脂柱的高径比为7:1)，得脱色脱盐液；

[0046] (4)大孔树脂吸附与洗脱：将脱色脱盐液以1.0BV/小时的流速通过大孔吸附树脂柱(大孔吸附树脂的型号为LSA‑10，大孔吸附树脂的用量为6L，大孔吸附树脂柱的高径比为
7:1)，大孔吸附树脂柱流出液收集待用；大孔吸附树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得
罗汉果根总三萜皂苷0.41kg；

[0047] (5)总多糖的分离：将步骤(4)大孔吸附树脂柱流出液浓缩、干燥，得罗汉果根总多糖1.68kg。

[0048] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为94.16％，罗汉果根总黄酮的收率为91.26％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为92.97％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为91.41％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为93.71％，罗汉果根总多糖的收率为92.88％。

[0049] 实施例4

[0050] 其他条件和操作和实施例1相同，区别在于步骤(1)中分为四次热水提取，依次加入温度为85℃的热水200kg、160kg、120kg，80kg分别搅拌提取3.5小时、3小时、2.5小时、2小
时，合并四次热水提取的提取液。

[0051] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为94.43％，罗汉果根总黄酮的收率为91.82％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为93.26％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为91.75％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为94.20％，罗汉果根总多糖的收率为93.17％。

[0052] 实施例5

[0053] 其他条件和操作和实施例1相同，区别在于步骤(2)中聚酰胺树脂柱用量为2L。

[0054] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为93.75％，罗汉果根总黄酮的收率为78.30％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为93.57％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为94.32％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为92.57％，罗汉果根总多糖的收率为95.93％。

[0055] 实施例6

[0056] 其他条件和操作和实施例1相同，区别在于步骤(2)中聚酰胺树脂柱的高径比为4:1，流速1.3BV/小时。

[0057] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为91.36％，罗汉果根总黄酮的收率为85.78％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为93.62％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为94.37％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为92.51％，罗汉果根总多糖的收率为95.85％。

[0058] 实施例7

[0059] 其他条件和操作和实施例1相同，区别在于步骤(3)的脱色脱盐步骤中，聚酰胺树脂柱流出液以2.5BV/小时的流速通过两根串联的“阴‑阳”离子交换树脂柱。

[0060] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为92.57％，罗汉果根总黄酮的收率为95.67％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为93.26％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为90.18％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为92.27％，罗汉果根总多糖的收率为92.54％。

[0061] 实施例8

[0062] 其他条件和操作和实施例1相同，区别在于步骤(4)的大孔树脂吸附与洗脱中，大孔吸附树脂的用量为2L。

[0063] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为92.55％，罗汉果根总黄酮的收率为95.81％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为90.37％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为88.62％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为90.78％，罗汉果根总多糖的收率为91.86％。

[0064] 实施例9

[0065] 其他条件和操作和实施例1相同，区别在于步骤(4)的大孔树脂吸附与洗脱中，将脱色脱盐液以1.0BV/小时的流速通过大孔吸附树脂柱。

[0066] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为92.46％，罗汉果根总黄酮的收率为95.68％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为92.85％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为93.80％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为91.92％，罗汉果根总多糖的收率为93.64％。

[0067] 实施例10

[0068] 其他条件和操作和实施例1相同，区别在于步骤(4)的大孔树脂吸附与洗脱中，将脱色脱盐液以1.5BV/小时的流速通过大孔吸附树脂柱。

[0069] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为92.52％，罗汉果根总黄酮的收率为95.73％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为92.36％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为88.76％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为89.92％，罗汉果根总多糖的收率为95.63％。

[0070] 实施例11

[0071] 其他条件和操作和实施例1相同，区别在于步骤(4)的大孔树脂吸附与洗脱中，大孔吸附树脂柱的高径比为4:1。

[0072] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为92.56％，罗汉果根总黄酮的收率为95.65％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为91.41％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为90.27％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为91.86％，罗汉果根总多糖的收率为95.37％。

[0073] 对比例1

[0074] 其他条件和操作和实施例1相同，区别在于罗汉果根热水提取后，先进行两根串联的“阴‑阳”(阴离子交换树脂和阳离子交换树脂的型号，用量，流速和实施例1一致)脱色脱
盐，再进行聚酰胺树脂的吸附和洗脱，和大孔吸附树脂的吸附和洗脱。

[0075] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为93.47％，罗汉果根总黄酮的收率为83.79％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为92.85％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为91.24％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为94.17％，罗汉果根总多糖的收率为92.86％。

[0076] 对比例2

[0077] 其他条件和操作和实施例1相同，区别在于步骤(1)中分为仅进行一次热水提取，热水温度为85℃。热水用量为600kg，搅拌提取10小时。

[0078] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为92.37％，罗汉果根总黄酮的收率为79.74％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为90.21％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为82.57％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为91.74％，罗汉果根总多糖的收率为84.64％。

[0079] 对比例3

[0080] 其他条件和操作和实施例1相同，区别在于步骤(3)中聚酰胺树脂柱流出液以1BV/小时的流速，先通过型号为001×7的阳离子交换树脂，再通过型号为D941的阴离子交换树
脂柱。即调换了“阴‑阳”离子交换树脂的顺序为“阳‑阴”。

[0081] 经紫外分光光度法测定，本实施例所得罗汉果根总黄酮的含量为92.47％，罗汉果根总黄酮的收率为95.72％；经香草醛‑高氯酸比色法测定，所得罗汉果根总三萜皂苷的含
量为87.63％，罗汉果根总三萜皂苷的收率为86.87％；经苯酚‑硫酸比色法测定，所得罗汉
果根总多糖的含量为92.36％，罗汉果根总多糖的收率为91.48％。

[0082] 对比例4

[0083] (1)热水提取：取干燥罗汉果根20kg，破碎，依次加入温度为85℃的热水240kg、200kg、160kg，分别搅拌提取4小时、3小时、2小时，合并提取液，冷却至室温，陶瓷膜过滤，得
提取滤液；

[0084] (2)大孔树脂吸附与洗脱：将提取液以0.5BV/小时的流速通过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂的型号为LX‑11，大孔吸附树脂的用量为6L，大孔吸附树脂柱的高径比为6:1，大
孔吸附树脂柱流出液收集待用；大孔吸附树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得提取物
A0.95kg；

[0085] 经检测，提取物A为罗汉果根总黄酮和罗汉果根总三萜皂苷的混合物，其中，罗汉果根总黄酮的含量为45.89％，罗汉果根总三萜皂苷的含量为28.26％。

[0086] (3)脱色脱盐：将步骤(2)大孔吸附树脂柱流出液以1.5BV/小时的流速通过两根串联的“阴‑阳”离子交换树脂柱，阴离子交换树脂的型号为D941，阴离子交换树脂的用量为
3L，阴离子交换树脂柱的高径比为8:1；阳离子交换树脂的型号为001×7，阳离子交换树脂
的用量为3L，阳离子交换树脂柱的高径比为8:1，得脱色脱盐液；

[0087] (4)聚酰胺吸附与洗脱：将步骤(3)脱色脱盐液以0.8BV/小时的流速通过聚酰胺树脂柱，聚酰胺树脂的用量为6L，聚酰胺树脂柱的高径比为6:1，聚酰胺树脂柱流出液收集待
用；聚酰胺树脂柱用乙醇洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得提取物B 0.01kg；

[0088] 经检测，提取物B中罗汉果根总黄酮、罗汉果根总三萜皂苷和罗汉果根总多糖均未检出。

[0089] (5)总多糖的分离：将步骤(4)聚酰胺树脂柱流出液浓缩、干燥，得提取物C1.15kg。

[0090] 经检测，提取物C为罗汉果根总多糖，其中，罗汉果根总多糖的含量为91.25％。

[0091] 本对比例调换了聚酰胺和大孔树脂的位置，结果是大孔树脂将黄酮和三萜皂苷全部吸附、无法分离；聚酰胺没有吸附任何目标成分。可见，本发明中，各树脂柱吸附和分离的
顺序不可调换，否则无法达到本发明要达到的技术效果。

[0092] 申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细制备方法，但本发明并不局限于上述详细制备方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细制备方法才能实施。所
属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换
及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。