一种促进生物质材料产醇的方法

摘要

本发明公开了一种促进生物质材料产醇的方法，所述方法包括：(1)收集生物质材料，生物质材料预处理，得到预处理后的生物质材料；(2)将预处理后的生物质材料水洗至中性，进行酶解，同时添加籽粒苋蛋白(AP)，得到添加AP的酶解液；(3)将添加AP的酶解液直接用于乙醇发酵，添加酵母，进行发酵产醇。所述方法可显著提高酶解效率和糖醇转化率，增加乙醇产量。

权利要求

1.一种促进生物质材料产醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)收集生物质材料，生物质材料预处理，得到预处理后的生物质，所述生物质材料预处理包括热水预处理、气爆预处理、CaO预处理或者碱预处理；

(2)将预处理后的生物质材料水洗至中性，加入酶进行酶解，同时添加籽粒苋蛋白，籽粒苋蛋白的添加量为8wt％，得到添加了籽粒苋蛋白的酶解后的糖液；

(3)将添加了籽粒苋蛋白的酶解后的糖液直接用于乙醇发酵，添加酵母，进行发酵产醇。

2.根据权利要求1所述的促进生物质材料产醇的方法，其特征在于，所述籽粒苋蛋白通过酶解缓冲液或者ddH2O提取法得到。

3.根据权利要求1所述的促进生物质材料产醇的方法，其特征在于，步骤(2)中酶解过程中底物生物质材料和酶解液的固液体为1:20。

4.根据权利要求1所述的促进生物质材料产醇的方法，其特征在于，步骤(2)所述酶为纤维素复合酶，每1L反应体系中添加1.6g的纤维素复合酶。

5.根据权利要求1所述的促进生物质材料产醇的方法，其特征在于，步骤(3)中发酵体系中酵母的终浓度为0.5g/L。

说明书

一种促进生物质材料产醇的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及生产纤维素乙醇的技术领域，特别是涉及一种促进生 物质材料产醇的方法。

背景技术

[0002] 木质纤维素作为生物能源利用是一项系统工程，为了提高转化效 率、降低成本，在其发酵产醇的各个技术层面上均需突破，包括充分 提高木质纤维素酶解效率、降低发酵
抑制物以增加糖醇转化效率、降 低预处理成本和减少预处理中的二次污染。酶解过程中投
加添加剂 (如表面活性剂等)是提高酶解效率和糖醇转化效率的有效途径之一， 这方面已
取得一定进展，但在投加的添加剂选择上仍存在以下问题： 1、酶解效率提高不明显；2、不
能有效降低发酵抑制物；3、成本高。

发明内容

[0003] 本发明的目的就在于克服现有技术存在的缺点和不足，提供一种 微弱预处理条件下就能够显著提高生物质材料酶解效率、降低发酵成 本的方法，具体为一种利用籽粒苋
蛋白促进生物质材料产醇的方法。

[0004] 为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

[0005] 本发明提供一种促进生物质材料产醇的方法，在生物质材料酶解 过程中添加籽粒苋蛋白。籽粒苋蛋白的添加量优选8wt％(基于生物 质材料的质量)。

[0006] 作为本发明的进一步改进，所述方法包括以下步骤：

[0007] (1)收集生物质材料，生物质材料预处理，得到预处理后的生 物质材料；

[0008] (2)将预处理后的生物质材料水洗至中性，进行酶解，同时添 加籽粒苋蛋白；

[0009] (3)将添加了籽粒苋蛋白的酶解后的糖液直接用于乙醇发酵， 添加酵母，进行发酵产醇。

[0010] 作为本发明的进一步改进，所述籽粒苋蛋白通过酶解缓冲液或者 ddH2O提取法得到。

[0011] 作为本发明的进一步改进，所述籽粒苋蛋白的提取具体过程包括： 取生长期籽粒苋新鲜叶片组织，液氮磨样，加入缓冲液，缓冲液为配 制好浓度为0.2M的NaAC后加醋酸调
pH为4.8左右的溶液，或直 接加入ddH2O研磨至匀浆，4℃40000rpm离心10min，上清为提取 
的总蛋白，Brandford法测定上清液中蛋白质浓度，‑20℃保存或烘 干成干粉后室温保存，
待用；。

[0012] 作为本发明的进一步改进，步骤(1)中生物质材料包括C4植物 (籽粒苋、玉米、芒草)；C3植物(水稻、小麦、油菜等)；木本植 物(杨树、桉树等)。生物质材料预处理包括热水
预处理、气爆预处 理、CaO预处理或者碱预处理。

[0013] 作为本发明的进一步改进，生物质材料预处理中热水预处理的过 程为：

[0014] ①称取生物质材料粉末于聚四氟乙烯罐中，加入dH2O，然后将聚 四氟乙烯罐放入不锈钢反应釜中，最后放入油浴锅中加热，当导热油 的温度达到设置温度后处理8‑10min；

[0015] ②处理完成后将样品冷却，然后加入适量dH2O将样品转移至离 心管，将样品离心。

[0016] ③将剩余上清液去掉，加入蒸馏水洗涤，离心，倒掉上清，重复 洗涤残渣，最后检查pH，确保洗至中性；残渣最后用醋酸缓冲液洗 涤，待酶解反应。

[0017] 作为本发明的进一步改进，生物质材料预处理中CaO预处理的过 程为：

[0018] ①称取生物质粉末于离心管中，加入一定质量的CaO粉末(CaO/ 样品＝10％，w/w)和水，处理1‑3h，优选处理2h；

[0019] ②处理完成后加入HCl溶液，摇匀，在30‑70℃，100‑200r/min 的条件下进行中和反应1‑3h，优选在50℃，150r/min中和反应2h， 离心，倒掉上清；

[0020] ④加入蒸馏水洗涤，离心3‑7min，优选离心5min，倒掉上清。 重复洗涤残渣6次，最后检查pH，确保洗至中性；残渣最后用醋酸 缓冲液洗洗涤，优选用0.2mol/L pH 4.8的醋酸
缓冲液洗1次，待 酶解反应。

[0021] 作为本发明的进一步改进，生物质材料预处理中蒸气爆破预处理 (气爆预处理)过程为：

[0022] ①将烘干生物质的材料截成5～8cm的小段，喷施蒸馏水使材料 湿度达到50％(即材料的湿重等于两倍的干重)；

[0023] ②将截短喷湿后的生物质材料装到容量为5L的气爆反应器中， 225℃、2.5MPa处理3‑20min；

[0024] ③收集处理后的残渣，风干，用小型粉样机将其粉碎，40目过 筛，50℃烘干至恒重，即获得气爆后的实验材料，待酶解反应。

[0025] 作为本发明的进一步改进，生物质材料预处理中碱预处理过程为：

[0026] ①称取生物质粉末置于离心管中，加入6mL 1‑5％(w/v)的碱溶 液，50℃，150r/min，处理2h。②离心，去掉上清，沉淀加入蒸馏 水洗涤，离心5min，去上清。重复6次，确保洗
涤液至中性；上述 残渣最后用0.2mol/L pH为4.8的醋酸缓冲液洗1次；待酶解反应。

[0027] 作为本发明的进一步改进，步骤(2)中酶解过程中底物生物质 材料和酶解液的固液体为1:20，比如1g生物质材料中添加20ml酶 解反应液。

[0028] 作为本发明的进一步改进，步骤(2)中的每1L反应体系中添加 1.6g的纤维素复合酶。

[0029] 作为本发明的进一步改进，所述纤维素复合酶通过商业途径购买 得到。

[0030] 作为本发明的进一步改进，步骤(2)中籽粒苋蛋白的添加量为 6wt％‑10wt％。

[0031] 作为本发明的进一步改进，步骤(2)中籽粒苋蛋白的添加量为 8wt％。

[0032] 作为本发明的进一步改进，步骤(3)发酵体系中酵母的加入终 浓度为0.5g/L。

[0033] 本发明公开了以下技术效果：

[0034] (1)籽粒苋具有生物量大，抗逆性强，蛋白质含量高等优点， 茎秆可以直接作为生物质原材料用于生物乙醇生产；蛋白质提取步骤 简单，成本低，在酶解过程中添加籽粒苋
蛋白(AP)后，可以提高酶 解效率和糖醇转化率，含有AP的酶解液可直接用于乙醇发酵，使
乙 醇产量升高。将籽粒苋蛋白用于能源作物生物质酶解过程，酶解过程 中添加8％(mg/g)
的AP可使酶解效率最高增加105％，使发酵过程中 糖醇转化效率平均增加22％。每公顷籽
粒苋作物提取的蛋白质可投用 于13万吨干物料的酶解过程，可增加7000吨以上乙醇产量。

[0035] (2)气爆预处理条件下，添加AP可使小麦、芒草、玉米等生物 质材料的酶解效率提高65％‑89％；碱处理条件下，添加AP可使桉树 酶解效率提高105％。

[0036] (3)添加AP提高了发酵过程中的糖醇转化率，使乙醇产量升高 了50％以上，最多升高90％。

[0037] (4)平均每吨禾本科作物(如水稻、小麦、玉米等)秸秆添加 AP平均可以多产60kg乙醇。

附图说明

[0038] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面 将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描 述中的附图仅仅是本发明的一些实
施例，对于本领域普通技术人员来 讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些
附图获得其他 的附图。

[0039] 图1为籽粒苋介绍，其中A为盛花期籽粒苋植株，B为每公顷籽 粒苋生物量(鲜重，干重)和蛋白质含量，C为籽粒苋茎秆和叶片基 本组成成分；

[0040] 图2为添加籽粒苋蛋白后酶解效率分析，其中A为酶解过程中籽 粒苋蛋白的最佳投放量分析：以籽粒苋生物质材料为底物，复合酶中 添加不同浓度的AP进行酶解反应，筛
选最适AP添加量；B为不同物 种生物质材料添加籽粒苋蛋白后酶解效率分析；

[0041] 图3为添加籽粒苋蛋白后发酵产醇分析，其中A为不同生物质材 料添加籽粒苋蛋白及不同预处理方式对发酵产醇效果的分析；B为添 加籽粒苋蛋白后的糖醇转化效率分
析；C为每公顷作物生物质添加籽 粒苋蛋白后可提高的乙醇产量；D为每公顷籽粒苋中提取
的蛋白可增 加的乙醇产量；

[0042] 图4为籽粒苋蛋白提高酶解效率的机理分析，其中A为酶解液上清SDS分 析，B为酶解上清中纤维素酶CBHI western blot分析，C为酶解上清中半纤维 素酶XynATM western
分析，D为酶解上清中CBHI相对量分析，E为酶解上清中 XynATM相对量分析，F为酶解上清中
总蛋白含量分析，G为酶解后上清和残渣中 蛋白质SDS分析，H为籽粒苋蛋白与不同底物吸
附效率分析，I为Rice(LHW) 和Com(SE)随酶解时间的变化Zata电位变化图，J为表面张力随
浓度变化的 结果。

具体实施方式

[0043] 现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为 是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施 方案的更详细的描述。

[0044] 应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非 用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体 公开了该范围的上限和下限之间的
每个中间值。在任何陈述值或陈述 范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内
的中间值之间 的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可 独立
地包括或排除在范围内。

[0045] 除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明 所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了 优选的方法和材料，但是在本发明
的实施或测试中也可以使用与本文 所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到
的所有文献通过 引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与 任何
并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。

[0046] 在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具 体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见 的。由本发明的说明书得到的其他
实施方式对技术人员而言是显而易 见得的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。

[0047] 关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等， 均为开放性的用语，即意指包含但不限于。

[0048] 本发明纤维素复合酶可通过商业途径购买得到，本发明实施例所 用的为购买得到的‘和氏璧’复合酶。

[0049] 实施例1

[0050] (1)籽粒苋蛋白的提取

[0051] 取生长期籽粒苋新鲜叶片组织，液氮磨样，加入0.2M NaAC (pH＝4.8)作为缓冲液研磨至匀浆，4℃40000rpm离心10min， Brandford法测定上清液中蛋白质浓度，上清液中的
蛋白质浓度多于 10ug/ml的浓度时，‑20℃保存待用。

[0052] (2)生物质材料的预处理

[0053] 以籽粒苋作为生物质材料原料气爆预处理：①将烘干的材料截成 7cm的小段，喷施蒸馏水使材料湿度达到50％(即材料的湿重等于两 倍的干重)；②将截短喷湿后的材料
装到容量为5L的气爆反应器中， 225℃、2.5MPa处理8min；③收集处理后的残渣，风干，用小
型粉样 机将其粉碎，40目过筛，50℃烘干至恒重，即获得气爆后的生物质 材料，待酶解反
应。

[0054] (3)籽粒苋蛋白的添加和生物质材料的酶解

[0055] 称取0.3g气爆后的生物质材料，水洗至中性，再用10mL浓度 为0.2mol/L pH为4.8的醋酸缓冲液洗1次，接着加入3mL浓度为 3.2g/L的购买得到的‘和氏璧’复合酶，同时添加
2ml由pH为4.8 的醋酸缓冲液提取的浓度为12ug/ml的籽粒苋蛋白，最后用pH 4.8 的醋酸
缓冲液定容至6mL，使得酶的终浓度为1.6g/L。将离心管放入 摇床，150r/min，50℃酶解
48h。酶解反应结束后将样品3000g离 心5min，取酶解上清液1mL，稀释10倍，测定己糖、戊糖
含量。

[0056] (4)酶解糖液的发酵

[0057] 酶解后的糖液中加入600ul浓度为5g/L的安琪耐高温酵母，摇 匀后30℃发酵48h，重铬酸钾法测定乙醇浓度。

[0058] 实施例2

[0059] 同实施例1，不同之处仅在于生物质材料预处理过程为10％CaO 处理，具体过程为：①材料烘干后经粉样机粉碎，过40目筛；②称 取生物质粉末0.300g于15mL离心管中，加
入CaO粉末(CaO/生物质 粉末＝10％，w/w)和水，离心处理2h，每份样品3个重复；③处理完 
成后加入HCl溶液，摇匀，在50℃，150r/min中和反应2h，离心， 倒掉上清；④加入蒸馏水洗
涤，离心5min，倒掉上清。重复洗涤残 渣6次，最后检查pH，确保洗至中性；残渣最后用醋酸
缓冲液洗洗 涤，用10mL 0.2mol/L pH 4.8的醋酸缓冲液洗1次，待酶解反应。

[0060] 实施例3

[0061] 本实施例以水稻为生物质材料原材料，其余步骤同实施例1，不 同之处仅在于气爆时间为16min。

[0062] 实施例4

[0063] 本实施例以水稻为生物质材料原材料，其余步骤同实施例2。

[0064] 实施例5

[0065] 本实施例以小麦生物质材料为原料，其余步骤同实施例2，不同 之处仅在于生物质预处理过程采用热水预处理，具体过程为：①称取 生物质粉末0.300g于25mL聚四氟乙烯
罐中，加入2.4mL dH2O，然后 将聚四氟乙烯罐放入不锈钢反应釜中，最后放入油浴锅中加
热，当导 热油的温度达到设置温度200℃后处理3min；②处理完成后将样品冷 却，然后加
入10ml dH2O将3000g样品转移至15mL离心管，将样品 离心5min；③将剩余上清液去掉，加
入10mL蒸馏水洗涤，离心5min， 倒掉上清，重复洗涤残渣6次，最后检查pH，确保洗至中性；
残渣 最后用10mL浓度为0.2mol/L pH为4.8的醋酸缓冲液洗涤1次，待 酶解反应。

[0066] 实施例6

[0067] 本实施例以油菜为生物质材料原料，生物质材料预处理过程同实 施例5，其余步骤同实施例1。

[0068] 实施例7

[0069] 本实施例以芒草为生物质材料原料，生物质材料预处理过程同实 施例5，其余步骤同实施例1。

[0070] 实施例8

[0071] 本实施例以玉米为生物质材料原料，生物质材料预处理过程同实 施例5，其余步骤同实施例1。

[0072] 实施例9

[0073] 本实施例以杨树为生物质材料原料，生物质材料预处理过程为碱 处理过程，具体为：①材料烘干后经粉样机粉碎，过40目筛，称取 杨树树枝粉末0.300g置于15mL离心管中；
②加入6mL 4％(w/v)的 NaOH溶液，50℃，150r/min，处理2h。沉淀加入10mL蒸馏水洗涤， 离
心5min，去上清。重复6次，确保洗涤液至中性；上述残渣最后 用10mL 0.2mol/L pH为4.8的
醋酸缓冲液洗1次；待酶解反应，其 余步骤同实施例1。

[0074] 实施例10

[0075] 本实施例以桉树为生物质材料原料，生物质材料预处理过程同实 施例9，其余步骤同实施例1。

[0076] 对比例1

[0077] 同实施例1，不同之处仅在于酶解过程中未添加AP。

[0078] 对比例2

[0079] 同实施例2，不同之处仅在于酶解过程中未添加AP。

[0080] 对比例3

[0081] 同实施例3，不同之处仅在于酶解过程中未添加AP。

[0082] 对比例4

[0083] 同实施例4，不同之处仅在于酶解过程中未添加AP。

[0084] 对比例5

[0085] 同实施例5，不同之处仅在于酶解过程中未添加AP。

[0086] 对比例6

[0087] 同实施例6，不同之处仅在于酶解过程中未添加AP。

[0088] 对比例7

[0089] 同实施例7，不同之处仅在于酶解过程中未添加AP。

[0090] 对比例8

[0091] 同实施例8，不同之处仅在于酶解过程中未添加AP。

[0092] 对比例9

[0093] 同实施例9，不同之处仅在于酶解过程中未添加AP。

[0094] 对比例10

[0095] 同实施例10，不同之处仅在于酶解过程中未添加AP。

[0096] 由上述内容可知，本发明选用的生物质材料包括C4植物籽粒苋 (籽粒苋介绍见图1)、玉米、芒草；C3植物水稻、小麦、油菜；木 本植物杨树、桉树。预处理方法包括热水预处
理、CaO预处理、气爆 预处理、碱预处理(NaOH)。预处理后加入纤维素复合酶和籽粒苋蛋 白
质酶解48h,再接种酵母，30℃发酵48h，重铬酸钾法测定乙醇浓 度。其中，生物质原料细胞
壁的三大成分见表1。

[0097] 表1

[0098] 样品 纤维素(％干物重) 半纤维素(％干物重) 木质素(％干物重)籽粒苋 26.99±0.70 13.79±0.12 11.29±0.37
水稻 28.30±2.79 21.34±0.36 14.99±0.13
小麦 30.44±0.70 28.42±0.37 24.48±0.37
油菜 31.86±1.78 23.99±0.78 18.37±1.13
芒草 35.18±1.17 22.89±0.37 20.48±0.36
玉米 30.81±1.35 23.72±1.88 19.54±0.57
杨树 32.30±1.34 21.08±1.03 26.81±1.32
桉树 30.21±1.09 20.20±0.88 31.03±1.32

[0099] 分析实施例添加籽粒苋蛋白后的酶解效率、添加籽粒苋蛋白后发 酵产醇量以及籽粒苋蛋白提高酶解效率的机理，具体过程如下：

[0100] a、SDS PAGE

[0101] (1)SDS PAGE胶配制，详见表2。

[0102] 表2

[0103]

[0104]

[0105] ①按表2中所列顺序从上到下加试剂配制分离胶，加完TEMED后， 轻轻摇匀液体，一块胶加7mL溶液。然后，用1mL ddH2O封住分离胶 液面，37℃凝固15min，至分离胶与水之
间出现一条清亮的分界线， 倾倒水层，用滤纸条将残余的水吸干；②浓缩胶配好后混匀，灌
胶 2mL，立即插梳子，插梳子时根据点样量和浓缩胶长短调整梳子插入 的深度，于37℃凝
固15min；

[0106] (2)胶凝固好后，将胶放入电泳槽中，加入1×Tris‑Gly电泳缓 冲液没过点样孔，取出梳子，胶外侧缓冲液界面应完全没过电极；

[0107] (3)点样后，先用50V电压电泳30min，待蛋白进入分离胶，70V 电压电泳3h；

[0108] (4)当溴酚蓝电泳至胶槽底部时，停止电泳，剥胶，切除浓缩胶， 将分离胶加入考马斯亮蓝染色液，40r/min，染色3h以上；

[0109] (5)将凝胶用蒸馏水冲洗1遍，倒入考马斯亮蓝脱色液，40r/min 脱色至背景透明，每60min更换一次脱色液。

[0110] b、Western blot

[0111] (1)SDS‑PAGE电泳结束后，取出PAGE胶，切除多余的部分(溴 酚蓝条带和空白胶)，测量并记录胶的长和宽；

[0112] (2)转模：裁出6张比蛋白胶稍大一些的滤纸片和1张硝酸纤维 素膜(或PVDF膜)；将胶、膜、滤纸和海绵放在盛有转膜缓冲液的培 养皿中浸泡5min。在胶夹板的黑色板面上
依次铺上海绵、3层滤纸、 硝酸纤维膜(或PVDF膜)、蛋白胶和3层滤纸。每次铺完3层滤纸后 
要赶气泡，尽量保证滤纸和硝酸纤维膜之间对齐；

[0113] (3)将胶板夹放入转移电泳槽(注意：膜朝正极放置，即黑色一 面朝正极)。倒入转膜缓冲液，一定要没过胶。75V，60mA，4℃冰箱 里电泳10h；

[0114] (4)关闭电源，用小镊子夹着膜的一角取出膜，放入用单蒸水洗 净的平皿中；加入15mL封闭液，膜刚好被没过即可，室温平缓摇动 1h；回收封闭液，用TTBS洗膜3次，每次
3min；

[0115] (5)加入一抗溶液，室温平缓摇动1h；回收一抗溶液，用TTBS 洗膜3次，每次5min；加入二抗溶液，室温平缓摇动1h；回收二抗 溶液，用TTBS洗膜3次，每次5min，最后再用TBS
洗膜5min；

[0116] (6)加入ECL显色液，室温平缓摇动3min，将膜用镊子取出，放 在一次性手套上晾干；扫描图片，写好标记，将膜放入自封袋中保存。

[0117] c、Zeta电位检测

[0118] Zeta电位的重要意义在于它的数值与胶态分散的稳定性相关。 Zeta电位是对颗粒之间相互排斥或吸引力的强度的度量，分子或分 散粒子越小，Zeta电位(正或负)越高，
体系越稳定，即溶解或分 散可以抵抗聚集。反之，Zeta电位(正或负)越低，越倾向于凝结 
或聚集，即吸引力超过排斥力，分散被破坏而发生凝结或凝聚。通过 测定Zeta电位可以检
测AP与底物结合情况。检测步骤：①称取预处 理后的水稻和玉米材料，加入AP后按酶解时
间梯度取样，用Zeta电 位分析仪测定Zeta电位。

[0119] d、AP吸附实验

[0120] ①平行配制5份一定AP浓度的溶液，计溶液中总蛋白质量w1； ②向溶液中分别加入预处理后的生物质材料、商业购买的木质素、半 纤维素和微晶纤维素，对照组为蛋白质
溶液；③室温悬浮24h，3000 rpm离心后测定上清中蛋白质浓度，计算上清中蛋白质量w2；④
底物 对蛋白质吸附效率(w1‑w2)/w1，由此可计算不同底物对蛋白质的吸 附能力。

[0121] 添加籽粒苋蛋白质后酶解效率分析结果见图2。添加籽粒苋蛋白 质后发酵产醇分析结果见图3。添加AP后的酶解上清中检测到更高 的蛋白质浓度，SDS PAGE结果显示出添
加AP后的酶解上清中有更清 晰的蛋白质条带。Western blot结果显示了添加AP后的酶解
上清中 含有更多的纤维素酶CBHI和半纤维素酶XynATM。AP与木质纤维底物 互作结果显
示，底物对AP有较强的非特异性吸附作用，主要体现在 木质素的非特异性吸附；底物Zate
电位进一步证明了AP与底物的非 特异性结合过程。表面张力测定结果显示AP具有表面活
性剂性质， 结果见图4。

[0122] 添加AP前后酶解效率分析结果如表3，由表3可知本发明用的 不同底物材料和不同预处理方法下，添加籽粒苋蛋白质都可以显著提 高木质纤维素的酶解产糖效率，最多可
以提高105％。

[0123] 表3

[0124]

[0125]

[0126] 不同预处理后，添加籽粒苋蛋白显著提高了发酵过程中的糖醇转 化效率，进一步提高了乙醇产量，如表4。

[0127] 表4

[0128]

[0129]

[0130] 以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本 发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普 通技术人员对本发明的技术方案做
出的各种变形和改进，均应落入本 发明权利要求书确定的保护范围内。