一种用于指导人焦虑症用药的试剂盒及其应用

摘要

本发明提供一种用于指导人焦虑症用药的试剂盒及其应用，所述试剂盒可同时对14个基因位点进行分型，所述试剂盒包括用于扩增14个基因片段的14对扩增引物，所述14个基因位点如表格所示，14对扩增引物的序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.28所示。本发明在对大样本进行研究的基础上，提出一种全新的位点组合，实现从基因和遗传的角度对焦虑症的治疗提供准确的指导和及时的反馈；并且基于飞行时间质谱技术进行基因分型，对精心挑选的和焦虑症用药最为相关的一些基因和变异位点进行中通量测序，因此可以大大降低检测时间与成本，而且仍然得到高度可靠的检测结果，因此具有非常重要的临床应用价值。

权利要求

1.一种用于指导人焦虑症用药的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒可同时对14个基因位点进行分型，所述试剂盒包括用于扩增14个基因片段的14对扩增引物，所述14个基因位点以及14对扩增引物的序列具体如下所示： 。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用于鉴定这14个基因片段突变的14条延伸引物，所述延伸引物的序列具体如下所示： 。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的PCR扩增的反应体系如下：由缓冲液、Mg2+溶液和dNTPs混合而成的PCR反应混合液   2 μL扩增引物混合液    0.48～0.52 μLTaq酶            1UDNA模板        2 μL水               补齐至5μL。

4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于，所述试剂盒还包括SAP反应体系，所述SAP反应体系如下：SAP缓冲液      0.17 μL

SAP酶          0.5U

纯水           补齐至2 μL。

5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于，所述扩增引物SEQ ID No.1～SEQ ID No.2在反应体系中的摩尔浓度为0.3～0.5 μM，SEQ ID No.3～SEQ ID No.24，SEQ ID No.27～SEQ ID No.28在反应体系中的摩尔浓度为0.2～0.4 μM，SEQ ID No.25～SEQ ID No.26在反应体系中的摩尔浓度为0.4～0.8 μM。

6.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于，所述试剂盒采用飞行时间质谱仪进行检测。

7.一种根据权利要求1-6中任意一项所述的用于指导人焦虑症用药的试剂盒在制备用于指导人焦虑症用药的试剂中的应用。

说明书

一种用于指导人焦虑症用药的试剂盒及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及焦虑药物基因组学诊断领域，更具体地涉及一种用于指导人焦虑症用药的试剂盒及其应用。

背景技术

[0002] 焦虑症是一种精神疾病，全球大约12％的人口患有焦虑症，女性发病率约是男性的两倍。另一些精神病症也可能产生焦虑症状，如精神分裂症、强迫症等。焦虑症主要通过认知行为疗法和药物进行治疗。目前常用的抗焦虑药物包括苯二氮䓬类药物、β受体阻断剂、丁螺环酮等。本发明提供一种指导治疗焦虑症用药的体外辅助诊断试剂盒，及其设计原理、检测方法，通过对患者进行基因检测，对国内使用的抗焦虑症药物提供代谢、应答和毒副作用层面的预警信息。

[0003] 已有的焦虑症药物基因组学产品从技术上分为两类，基于荧光定量PCR技术的产品和基于基因芯片技术的产品。荧光定量PCR技术用于检测基因变异存在通量低、无法批次检测大样本，并且单个反应只能检测单个位点，应用于多位点检测的产品中存在成本高的问题；基因芯片技术虽然一次能检测大量位点，但是灵敏度有限，无法满足临床应用的要求。本发明使用飞行时间质谱技术，能够同时对数十个样本的多个位点进行分析，而且灵敏度高，能够满足临床需求，每个样本检测费用可以控制在1000元人民币以内。

[0004] 将药物基因组学技术应用于临床主要依靠公开研究报道的循证医学证据分析个体基因变异导致的基因多态性对药物作用的影响。由于研究质量的差别，研究结果的筛选对本发明在临床的应用效果有关键作用。同类产品多是根据PharmGKB数据库提供的文献信息涉及检测位点的组合。其中大量结果是基于西方人群的研究数据得到，与亚洲人群的研究结果存在差异，因此会影响其对亚洲人群的指导效果。本发明参考了PharmGKB数据库的信息，同时结合到亚洲人群的研究文献，设计出更适合亚洲人群的抗焦虑症药物基因组学产品，能够为临床实践提供更有效的参考信息。

发明内容

[0005] 本发明的目的是提供一种用于指导人焦虑症用药的试剂盒及其应用，从而解决现有技术存在成本高，准确度不足，检测效率低下，覆盖国内焦虑症治疗药物不全面，不能提供全面用药指导的问题。

[0006] 为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

[0007] 根据本发明的第一方面，提供一种用于指导人焦虑症用药的试剂盒，所述试剂盒可同时对14个基因位点进行分型，所述试剂盒包括用于扩增14个基因片段的14对扩增引物，所述14个基因位点以及14对扩增引物的序列具体如下所示，全部按5’-3’顺序书写，引物由Life公司合成。

[0008] 1)CYP2C19位点rs4244285G→A(表示野生型为G，突变型为A，下同)

[0009] 扩增引物对：

[0010] SEQ ID NO.1(上游引物):ACGTTGGATGTCCATCGATTCTTGGTGTTC

[0011] SEQ ID NO.2(下游引物):ACGTTGGATGGCAATAATTTTCCCACTATC

[0012] 2)CYP2C19位点rs4986893G→A

[0013] 扩增引物对：

[0014] SEQ ID NO.3:ACGTTGGATGGACTGTAAGTGGTTTCTCAG

[0015] SEQ ID NO.4:ACGTTGGATGAACATCAGGATTGTAAGCAC

[0016] 3)CYP2C19位点rs12248560C→T

[0017] 扩增引物对：

[0018] SEQ ID NO.5:ACGTTGGATGCAAATTTGTGTCTTCTGTTC

[0019] SEQ ID NO.6:ACGTTGGATGTGAGCTGAGGTCTTCTGATG

[0020] 4)CYP3A4位点rs67666821insT(突变型为野生型中该位置插入一个T碱基)[0021] 扩增引物对：

[0022] SEQ ID NO.7:ACGTTGGATGTTAGGAGGACTTCTTCAACC

[0023] SEQ ID NO.8:ACGTTGGATGAATTCAGGCTCCACTTACGG

[0024] 5)NAT2位点rs1799930G→A

[0025] 扩增引物对：

[0026] SEQ ID NO.9:ACGTTGGATGACGTCTGCAGGTATGTATTC

[0027] SEQ ID NO.10:ACGTTGGATGCCTGCCAAAGAAGAAACACC

[0028] 6)NAT2位点rs1041983C→T

[0029] 扩增引物对：

[0030] SEQ ID NO.11:ACGTTGGATGCAGACCACAATGTTAGGAGG

[0031] SEQ ID NO.12:ACGTTGGATGCCATGCCAGTGCTGTATTTG

[0032] 7)NAT2位点rs1801280T→C

[0033] 扩增引物对：

[0034] SEQ ID NO.13:ACGTTGGATGCAAATACAGCACTGGCATGG

[0035] SEQ ID NO.14:ACGTTGGATGGACCCAGCATCGACAATGTA

[0036] 8)NAT2位点rs1799929C→T

[0037] 扩增引物对：

[0038] SEQ ID NO.15:ACGTTGGATGTGCTTGACAGAAGAGAGAGG

[0039] SEQ ID NO.16:ACGTTGGATGCTTCTTTGGCAGGAGATGAG

[0040] 9)NAT2位点rs1208 G→A

[0041] 扩增引物对：

[0042] SEQ ID NO.17:ACGTTGGATGAACTCTCACTGAGGAAGAGG

[0043] SEQ ID NO.18:ACGTTGGATGTTTGGGCACGAGATTTCTCC

[0044] 10)CYP3A5位点rs776746T→C

[0045] 扩增引物对：

[0046] SEQ ID NO.19:ACGTTGGATGGTAATGTGGTCCAAACAGGG

[0047] SEQ ID NO.20:ACGTTGGATGACCCAGCTTAACGAATGCTC

[0048] 11)UGT2B15位点rs1902023A→C

[0049] 扩增引物对：

[0050] SEQ ID NO.21:ACGTTGGATGCCATATATCCATCTATCGAG

[0051] SEQ ID NO.22:ACGTTGGATGTCTACTCTTGTCAATGCCAG

[0052] 12)UGT2B7位点CYP3A5位点rs7439366T→C

[0053] 扩增引物对：

[0054] SEQ ID NO.23:ACGTTGGATGTGGAGTCCTCCAACAAAATC

[0055] SEQ ID NO.24:ACGTTGGATGGCTGACGTATGGCTTATTCG

[0056] 13)HTR1A位点rs6295 C→G

[0057] 扩增引物对：

[0058] SEQ ID NO.25:ACGTTGGATGGTCAGTCTCCCAATTATTGC

[0059] SEQ ID NO.26:ACGTTGGATGCGAGAACGGAGGTAGCTTTT

[0060] 14)GABRA1位点rs4263535A→G

[0061] 扩增引物对：

[0062] SEQ ID NO.27:ACGTTGGATGTGTAAGAAAGTAGCAGCCCC

[0063] SEQ ID NO.28:ACGTTGGATGTACTGGATTCATTCTTGTC

[0064] 根据本发明，该试剂盒还优选包括用于鉴定这14个基因片段突变的14条延伸引物，针对这14个特定基因位点设计的14条延伸引物的序列具体如下，全部按5’-3’顺序书写，引物由Life公司合成。

[0065] SEQ ID NO.29:TTGTTAAGTAATTTGTTATGGGTTCC

[0066] SEQ ID NO.30:CTTGGCCTTACCTGGAT

[0067] SEQ ID NO.31:CCCTCGTGTCTTCTGTTCTCAAAG

[0068] SEQ ID NO.32:GACTTCTTCAACCAGAAAAA

[0069] SEQ ID NO.33:AATAGACTCAAAATCTTCAATTGTT

[0070] SEQ ID NO.34:CACAATGTTAGGAGGGTATTTTTA

[0071] SEQ ID NO.35:TCTCCTGCAGGTGACCA

[0072] SEQ ID NO.36:ACATAAGAGAGAGGAATCTGGTAC

[0073] SEQ ID NO.37:GGTTGAAGAAGTGCTGA

[0074] SEQ ID NO.38:CCTTCGGTCCAAACAGGGAAGAGATA

[0075] SEQ ID NO.39:TTTCAGAAGAGAATCTTCCAAAT

[0076] SEQ ID NO.40:AACATTTGGTAAGAGTGGAT

[0077] SEQ ID NO.41:TCGACGACCGAGTGTGTCTTC

[0078] SEQ ID NO.42:CACCCCTTGCCACCAAATAAAG

[0079] 优选地，所述试剂盒的PCR扩增的反应体系如下：

[0080]

[0081] 优选地，所述试剂盒还包括SAP反应体系，所述SAP反应体系如下：

[0082] SAP缓冲液     0.17μL

[0083] SAP酶         0.5U

[0084] 纯水          补齐至2μL。

[0085] 根据本发明的一个优选方案，所述扩增引物SEQ ID No.1～SEQ ID No.2在反应体系中的摩尔浓度为0.3～0.5μM，SEQ ID No.3～SEQ ID No.24，SEQ ID No.27～SEQ ID No.28 在反应体系中的摩尔浓度为0.2～0.4μM，SEQ ID No.25～SEQ ID No.26在反应体系中的摩尔浓度为0.4～0.8μM。

[0086] 应当知晓的是，任何基于MassArray的试剂盒都一定少不了延伸引物，但是延伸引物的重要性又相对不及扩增引物，根据本发明提供的试剂盒，其最主要的发明点在于对基因位点的选择以及扩增引物的设计，次要发明点才是对延伸引物的设计，从而最终实现从基因和遗传的角度对焦虑症的治疗提供最准确的指导以及最及时的反馈。

[0087] 本方法采用Agena Bioscience MassARRAY DNA质谱基因分析系统，该系统有若干特点：

[0088] 1)准确性高，直接检测待测物分子量，准确度超过99.9％；还可以检测PCR实验失败或三等位基因的存在；

[0089] 2)灵敏度高，检测窗口内，任何pmol级别的物质都能被检测出来；

[0090] 3)通量高，一张芯片上可同时完成384个样品的多重检测，每个反应孔可实现多达 30重反应，每次最多能进行数万个基因型分析；

[0091] 4)灵活，一张芯片上，样本的数量和位置可以自由选择，同时样本和SNP位点的配对可以自由选择；

[0092] 5)质控严格，质谱技术是“一管式操作”，即反应体系在生化学实验过程中始终在一个试管内反应，避免了多次转移造成的人为误差；

[0093] 6)操作简单，完全改变传统测序等技术在基因检测中价格昂贵，耗时长，操作繁琐等劣势。

[0094] 本发明流程包括特异性引物扩增、SAP反应、单碱基延伸、质谱检测等环节，原理如图1所示。

[0095] 根据本发明的第二方面，还提供一种上述试剂盒在制备用于指导人焦虑症用药的试剂中的应用。

[0096] 根据本发明提供的试剂盒，可检测影响抗焦虑症药物作用的8个基因(CYP2C19、 CYP3A4、CYP3A5、NAT2、UGT2B7、UGT2B15、HTR1A、GABRA1)上的14个位点的变异情况。CYP2C19参与氯巴占、地西泮、依替唑仑的体内代谢，rs4244285(G>A)、 rs4986893(G>A)变异会降低CYP2C19的代谢活性，rs12248560(C>T)变异会提高CYP2C19 的代谢活性，进而影响以上药物在个体内的药物浓度。CYP3A4参与氯硝西泮、坦度螺酮、丁螺环酮、艾司唑仑和唑吡坦的代谢。rs67666821变异导致CYP3A4(insT)代谢活性降低，导致体内药物浓度升高。CYP3A5参与阿普唑仑和咪达唑仑在人体内的代谢，rs776746 (T>C)变异导致CYP3A5代谢活性降低，减慢阿普唑仑和咪达唑仑在体内的代谢速率，影响其在体内的药物浓度。NAT2参与氯硝西泮的代谢，rs1801280(T>C)、rs1799929(C>T)、 rs1208(G>A)构成NAT2*5B，其相比正常NAT2，代谢活力降低；rs1799930(G>A)、 rs1041983(C>T)构成NAT2*6B，其相比正常NAT2，代谢活性降低。NAT2*5B和NAT2*6B 的出现都会降低药物代谢速度，升高血液药物浓度。UGT2B15参与劳拉西泮和奥沙西泮在体内的清除。rs1902023(A>C)变异增加药物清除能力，可能导致疗效降低。UGT2B7与劳拉西泮的应答效果有关，rs7439366(T>C)变异对劳拉西泮的药物应答效果较差。HTR1A 影响坦度螺酮和丁螺环酮的应答效果。rs6295(C>G)变异会提高坦度螺酮和丁螺环酮的应答效果。GABRA1与艾司唑仑和唑吡坦的治疗效果有关。
rs4263535(A>G)变异增加个体对艾司唑仑和唑吡坦的应答和疗效。

[0097] 根据本发明提供的试剂盒，可检测影响抗焦虑症药物作用的8个相关基因的14个SNP 位点，涵盖12种常用的抗焦虑药物：氯巴占、地西泮、依替唑仑、坦度螺酮、丁螺环酮、艾司唑仑、唑吡坦、阿普唑仑、氯硝西泮、劳拉西泮、咪达唑仑、奥沙西泮。根据检测结果将上述药物按照代谢速率、应答效果和毒副作用的高低分成三类，为临床治疗中的药物选择提供参考依据。

[0098] 根据本发明所提供的试剂盒，选择飞行时间质谱技术针对变异基因位点设计常规引物，多位点引物组合能同时工作，准确检测位点变异的情况，采用384孔板进行实验，就能实现同时对384个样本的数十个变异位点进行检测，从样品制备到生成结果只需要2天的周期，成本不超过1000元人民币，兼顾准确度、低成本和高通量。

[0099] 截至目前，上海康黎医学检验所已经对国内超过80,000例样本进行了检测，在精神类疾病，包括抑郁症、精神分裂症、焦虑症、癫痫、多动症、镇痛、镇静催眠等领域展开了研究。本发明正是通过对大样本的研究的基础上，建立了基于中国多民族、多地域和多病程的数据库，并在数据多态性的基础上开发出了这样一种效果良好的可用于临床用药指导的试剂盒，在基因和遗传的角度对焦虑症的治疗提供准确的指导和及时的反馈。

[0100] 综上所述，本发明在对大样本进行研究的基础上，提出了一种全新的位点组合，实现从基因和遗传的角度对焦虑症的治疗提供准确的指导和及时的反馈；本发明基于飞行时间质谱技术进行基因分型，是对精心挑选的和焦虑症用药最为相关的一些基因和变异位点进行中通量测序，因此可以大大降低时间周期和检测成本，而且仍然得到高度可靠的检测结果，从而使得该技术在临床上具有实际使用的价值。

附图说明

[0101] 图1是本发明的工作流程示意图。

具体实施方式

[0102] 以下结合具体实施例，对本发明做进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限制本发明的范围。

[0103] 有关试剂盒的详情说明

[0104] 1.1组成成分

[0105] PCR混合反应液，Taq酶，扩增引物混合液，SAP缓冲液，SAP酶，延伸引物混合液， iPlex酶，单碱基延伸反应混合液，去离子水，阳性对照品，脱盐树脂，质谱芯片。

[0106] 1.2储存条件及有效期

[0107] 反应试剂及酶贮存在-20℃，保质期9个月。

[0108] 1.3配套仪器

[0109] 通用PCR仪，DR MassArray分析仪。

[0110] 1.4样本要求

[0111] 本品适用于从口腔黏膜细胞、口腔脱落细胞、血液、组织和干血片中提取的基因组 DNA，要求DNA A260/A280比值应介于1.8到2.0之间。冷冻DNA样本应在-20℃以下，并且避免反复冻融。

[0112] 1.5实验步骤

[0113] PCR扩增

[0114] 在PCRⅠ区，从-20℃冰箱中将试剂取出，置于冰上。从4℃取出扩增引物，涡旋振荡 10s，简短离心备用。

[0115] 按下表的组分一次加入相关试剂，配置PCR反应液，分装至96孔板，3μL/孔。完成后通过传递窗口传递至PCRⅡ区。

[0116]

[0117]

[0118] 在PCRⅡ区，从-20℃冰箱取出DNA模板，冰上(4℃)熔解，涡旋震荡10s后简短离心，吸出一定量DNA稀释至5ng/μL，备用。

[0119] 向96孔板中每孔加入2μL 5ng/μL DNA模板，盖上管盖，涡旋震荡10s后简短离心，从PCRⅡ区通过传递窗传至Ⅲ区，再从PCRⅢ区通过传递窗传至Ⅳ区，每次实验时必须设定空白对照(2μL ddH2O)、阴性对照(2μL DNA提取洗脱液)和阳性对照。

[0120] 将96孔板放入扩增仪，运行程序：pcr，具体程序如下：

[0121]

[0122] SAP反应

[0123] 按下表在1.5ml EP管中配置SAP混合液：

[0124] SAP缓冲液 0.17μL CutSmart buffer(生产商NEB)SAP酶 0.5U(生产商NEB)
水 补齐至2μL

[0125] 加入2μL SAP混合液到96孔板的小孔中，用密封膜封住96孔板，涡旋振荡，4000 转/分钟离心5s。

[0126] 将96孔板转移至PCR仪进行如下反应：

[0127] 37℃40min→85℃5min→4℃

[0128] 延伸反应

[0129] 取出上一步反应结束的96孔板，2000转/每分钟离心1min。按照下表在1.5ml EP管中配置iPLEX延伸反应液：

[0130]

[0131] 在上一步反应结束的96孔板中加入iPLEX延伸反应液，2μL/孔，重新密封96孔板，涡旋振荡并离心(同上)。

[0132] 将96孔板转移到PCR仪，运行一下程序：

[0133]

[0134] 样本脱盐

[0135] 将洁净树脂(Resin)平铺在96/15mg凹坑版，风干至少10min，树脂由深黄色变成浅黄色。

[0136] 在样本板的每一个有样本的孔里加入41μL水，封膜，然后离心。

[0137] 加入15 mg洁净树脂(Resin)：轻轻将样本板凌空反转，孔对孔放在已放树脂的凹坑板上。然后将凹坑板连样本板一起反转(过程中两块板不可水平移动)，让树脂掉落至孔中。密封96孔板，在旋转器上颠倒摇匀15分钟。

[0138] 以3200g(标准板离心机的4000 rpm)将板离心5分钟。

[0139] 质谱检测

[0140] 打开“板管理系统”软件，编辑实验计划文件，包括样本的位置，样本名称和所用的引物，连接质谱仪与所建立的实验计划文件。

[0141] 点Start All图标，启动软件，并检查各项指示灯是否正常。

[0142] 点击“芯片托盘进入/退出”按钮，把芯片放在托盘上，再放到芯片甲板上，记录芯片的位置(左边记为1，右边记为2)。手不要触及芯片表面；将96板放到标有MTP1/2的位置，按A1在左下角的方向放，固定好；芯片第一次使用时，在校准品加样槽内加入75μL的校正标准品，芯片非第一次使用时不需添加校正标准品。然后再点击“芯片托盘进入/退出”按钮，关闭夹板。

[0143] 点击“添加/维持树脂”按钮，打开树脂槽，添加树脂或者补充高压灭菌纯化水(A.仪器第一次开机时需加28g树脂进入树脂槽内并加16mL灭菌纯化水混匀。B.第一次使用时把 9g树脂全部倒入树脂槽内，并加入5.2ml高压灭菌纯化水，用枪头混匀。C.非第一次使用时，需观察液面，若水的液面低于树脂面，则应补充适量的高压灭菌纯化水，使得水的液面高于树脂面。C.树脂溶液加入树脂槽后，需尽快使用，且不能放置超过30天。)[0144] 程序设置参数如下：

[0145]

[0146] 打完质谱后，点击“从分析仪上移走旧芯片”按钮，把芯片退回芯片甲板上，然后点击“芯片托盘进入/退出”按钮，取出96孔板，封膜后于-20±5℃保存；将芯片装回包装盒内并置于除湿器内保存(芯片开启后需尽快使用，保存时间不要超过30天)，回收校正标准样品于-20±5℃保存，然后点击“芯片托盘进入/退出”按钮，关闭夹板。

[0147] 1.6结果说明

[0148] 有效性判定：标准品可以检测到对应基因型，空白对照无信号检出，弱阳性对照可以检测出对应阳性信号时，此次检测结果有效，否则无效。

[0149] 1.7产品性能指标

[0150] 本产品最低可检出A260/A280纯度1.70-1.90范围内的1ng人基因组DNA。

[0151] 本方法受样本DNA质量影响，低质量DNA可能出现假阴性结果。

[0152] 实验例子：

[0153] 案例一：河北保定市某患者郭某某，女，55岁，于2019年6月18日来医院就诊，主诉：心烦，情绪差，躯体不适5年，反复3个月；主要表现包括：心烦，焦虑，阵发性心慌，出虚汗，尿频，心情不好，高兴不起来，夜眠差等；9年前行子宫肌瘤切除术，个人史、家庭史均无特殊；
精神检查存在“无趣感，自卑自责，情感低落，焦虑，活动减少”。经鉴别诊断为“器质性精神障碍，成瘾物质所致精神障碍”。曾服用劳拉西泮、奥氮平，但仍存在“焦虑、夜眠差”等问题。

[0154] 采用本发明提供的试剂盒检测得到如下结果：

[0155]

[0156] 注释：

[0157] 1.(广泛代谢型)药物代谢属正常，血药浓度在治疗窗口内。

[0158] 2.(超快代谢型)药物代谢加快，血药浓度可能低于有效治疗浓度，导致治疗效果不佳。

[0159] 3.(中间代谢型)药物代谢减慢，血药浓度可能高于安全治疗浓度(或缺少明确数据支持)。

[0160] 4.(慢代谢型)药物代谢显著减慢，血药浓度可能高于安全治疗浓度，导致不良反应风险增加。

[0161] 5.药物应答是最佳。

[0162] 6.药物应答不是最佳。

[0163] 7.不良反应风险较低。

[0164] 8.不良反应风险较高。

[0165] 其中关于劳拉西泮的解释说明如下：

[0166] 1.检测结果解释：

[0167] (1)该患者UGT2B15基因型为：突变型(CC)，药物清除率增加，可能导致疗效降低，可以根据实际临床反应适当增加剂量。

[0168] (2)该患者UGT2B7基因型为：突变型(CC)，对劳拉西泮的药物应答和效果较差。

[0169] 2.综合用药建议：

[0170] (1)该患者服用劳拉西泮，在监测下使用或忌用：药物清除率增高，可以适当增加剂量治疗。密切观察临床治疗效果和不良反应的发生，必要时可进行血药浓度监测；或更换其它药物并检测相关药物基因，合理选择用药。

[0171] (2)服用劳拉西泮期间，要避免同时联用阿片类药物。

[0172] 总的基因检测结果为：

[0173] 1.阿普唑仑

[0174]序号 检测基因 检测位点 检测结果
1 CYP3A5 C>T CT

[0175] 2.氯巴占

[0176] 序号 检测基因 检测位点 检测结果1 CYP2C19 *1,*2,*3,*17 广泛代谢型

[0177] 3.氯硝西泮

[0178]序号 检测基因 检测位点 检测结果
1 CYP3A4 *1,*20 广泛代谢型
2 NAT2 *4,*5B,*6A 中间代谢型

[0179] 4.地西泮

[0180] 序号 检测基因 检测位点 检测结果1 CYP2C19 *1,*2,*3,*17 广泛代谢型

[0181] 5.依替唑仑

[0182]序号 检测基因 检测位点 检测结果
1 CYP2C19 *1,*2,*3,*17 广泛代谢型

[0183] 6.劳拉西泮

[0184] 序号 检测基因 检测位点 检测结果1 UGT2B15 A>C CC
2 UGT2B7 T>C CC

[0185] 7.咪达唑仑

[0186]序号 检测基因 检测位点 检测结果
1 CYP3A5 C>T CT

[0187] 8.奥沙西泮

[0188]

[0189] 9.坦度螺酮

[0190] 序号 检测基因 检测位点 检测结果1 HTR1A C>G CG
2 CYP3A4 *1,*20 广泛代谢型

[0191] 10.丁螺环酮

[0192]序号 检测基因 检测位点 检测结果
1 HTR1A C>G CG
2 CYP3A4 *1,*20 广泛代谢型

[0193] 11.艾司唑仑

[0194]序号 检测基因 检测位点 检测结果
1 GABRA1 A>G GG
2 CYP3A4 *1,*20 广泛代谢型

[0195] 12.唑吡坦

[0196] 序号 检测基因 检测位点 检测结果1 GABRA1 A>G GG
2 CYP3A4 *1,*20 广泛代谢型

[0197] 根据上述检测结果，医生决定停劳拉西泮，将奥氮平改为地西泮。此后患者焦虑情绪改善，夜眠改善。