一种滇牡丹根皮提取物及其制备方法和应用转让专利

申请号 : CN202010476367.6

文献号 : CN111606794B

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发明人 : 施蕊王娟杨宇明

申请人 : 西南林业大学

摘要 :

本发明涉及生物医药领域,涉及一种中药提取物及其制备方法和应用,具体涉及一种滇牡丹根皮提取物及其制备方法和应用。在制备滇牡丹根皮提取物的过程中,先对丹皮进行低温匀浆处理,然后再使用超声辅助提取,然后再对粗提物进行目的成分的分离和纯化。利用本制备方法可以从滇牡丹中提取和分离出高丹皮酚纯度的滇牡丹根皮提取物,并且具有提取率高和提取过程简单的优点。本方案的制备方法和滇牡丹根皮提取物可以应用到相关化妆品和药品的制备和开发中。

权利要求 :

1.一种滇牡丹根皮提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤,

步骤(1):经预处理获得丹皮原料;

步骤(2):先在步骤(1)中的丹皮原料中加入水,再对丹皮原料进行匀浆处理,然后过滤取滤渣;

步骤(3):在步骤(2)中的所述滤渣中加入乙酸乙酯,得提取体系;对提取体系进行超声处理,然后过滤取滤液,浓缩所述滤液,得丹皮粗提物;

步骤(4):将丹皮粗提物分散于水中,再加入复合酶,得酶解体系,使酶解体系进行酶解反应;酶解反应结束后,调整pH至酸性,再加入壳聚糖,搅拌混匀后得体系A,静置后调节所述体系A的pH值至碱性或中性,静置后过滤取沉淀;将沉淀分散于乙酸乙酯中,静置后过滤取液相部分,得提取液,将提取液浓缩干燥后,得滇牡丹根皮提取物;

在步骤(2)中,在所述丹皮原料中加入丹皮原料重量1‑3倍的0‑10℃的水;

在步骤(4)中,酶解反应结束后,调整pH至5.0‑5.5,再加入壳聚糖,搅拌混匀后得体系A,静置后调节所述体系A的pH值至7.0‑8.0,静置后过滤取沉淀。

2.根据权利要求1所述的一种滇牡丹根皮提取物的制备方法,其特征在于,在步骤(4)中,壳聚糖的加入量为丹皮原料重量的10‑20%。

3.根据权利要求2所述的一种滇牡丹根皮提取物的制备方法,其特征在于,在步骤(4)中,所述复合酶包括纤维素酶、中性蛋白酶、淀粉酶、果胶酶,所述复合酶在酶解体系中的含量为2‑4重量%;酶解反应的温度为30‑45℃,时长为2‑3h,pH值为7.0‑7.5。

4.根据权利要求3所述的一种滇牡丹根皮提取物的制备方法,其特征在于,在步骤(4)中,在所述沉淀中加入丹皮原料重量6‑9倍的乙酸乙酯。

5.根据权利要求1‑4中任一项所述的一种滇牡丹根皮提取物的制备方法,其特征在于,在步骤(3)中,对提取体系进行超声处理的超声功率为100‑200W,处理时间为30‑50min;在所述滤渣中加入丹皮原料重量4‑7倍的乙酸乙酯。

6.根据权利要求1‑4中任一项权利要求所述的一种滇牡丹根皮提取物的制备方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述丹皮原料由如下方法制备:取新鲜滇牡丹根皮,洗净后将新鲜滇牡丹根皮粉碎,然后过10目筛,得所述丹皮原料。

7.根据权利要求1‑4中任一项权利要求所述的制备方法所制备的滇牡丹根皮提取物,其特征在于,所述滇牡丹根皮提取物中丹皮酚的含量大于90%。

8.根据权利要求7所述的滇牡丹根皮提取物在制备化妆品或药品中的应用。

说明书 :

一种滇牡丹根皮提取物及其制备方法和应用

技术领域

[0001] 本发明涉及生物医药领域,涉及一种中药提取物及其制备方法和应用,具体涉及一种滇牡丹根皮提取物及其制备方法和应用。

背景技术

[0002] 滇牡丹(Paeonia delavayi)是芍药科芍药属牡丹组的植物,它不但观赏性强,而且全身都可以入药,具有观赏价值和药用价值。牡丹组植物的根皮称作牡丹皮(丹皮),它作为中药材在我国已沿用上千年。丹皮的其主要成分有丹皮酚、芍药苷等,具有通经凉血、散瘀止痛、消炎止痒之功效。
[0003] 在现有技术中,从滇牡丹根皮中提取丹皮酚往往是采用蒸馏法,但是提取温度过高会影响丹皮酚的稳定性(高温条件下,丹皮酚易分解)。提取获得的丹皮酚需要经过分离纯化步骤才能获得纯度高、色泽佳的提取物产品,现有技术中的分离纯化丹皮酚的方法主要包括多次过柱纯化或者重结晶,操作步骤较多、耗时长、效率低,操作步骤的增多也会导致目的成分的损失,导致丹皮酚的提取率偏低。

发明内容

[0004] 本发明主要解决的技术问题是提供一种滇牡丹根皮提取物的制备方法,利用本制备方法可以从滇牡丹中提取和分离出高丹皮酚纯度的滇牡丹根皮提取物,并且具有提取率高和提取过程简单的优点。
[0005] 为达到上述目的,本发明提出了以下技术方案:
[0006] 一种滇牡丹根皮提取物的制备方法,包括以下步骤,
[0007] 步骤(1):经预处理获得丹皮原料;
[0008] 步骤(2):先在步骤(1)中的丹皮原料中加入水,再对丹皮原料进行匀浆处理,然后过滤取滤渣;
[0009] 步骤(3):在步骤(2)中的所述滤渣中加入乙酸乙酯,得提取体系;对提取体系进行超声处理,然后过滤取滤液,浓缩所述滤液,得丹皮粗提物;
[0010] 步骤(4):将丹皮粗提物分散于水中,再加入复合酶,得酶解体系,使酶解体系进行酶解反应;酶解反应结束后,调整pH至5.0‑5.5,再加入壳聚糖,搅拌混匀后得体系A,静置后调节所述体系A的pH值至7.0‑8.0,静置后过滤取沉淀;将沉淀分散于乙酸乙酯中,静置后过滤取液相部分,得提取液,将提取液浓缩干燥后,得滇牡丹根皮提取物。
[0011] 采用上述技术方案,技术原理为:首先对丹皮原料进行匀浆处理,使得丹皮原料的细胞结构初步破坏,细胞吸水膨胀,有利于后续提取步骤的进行。接下来使用乙酸乙酯为溶剂,在超声辅助下对丹皮原料中的丹皮酚进行提取。在超声作用下,丹皮原料的细胞结构被充分破坏,乙酸乙酯将丹皮酚溶出,经过浓缩处理后获得丹皮粗提物。完成上述步骤之后,需对丹皮粗提物进行纯化除去色素等杂质成分,否则不能获得纯度高且色泽佳的丹皮酚提取物。将丹皮粗提物分散于水中,使用复合酶充分降解丹皮粗提物中的纤维、果胶、蛋白等物质,除去干扰物。接下来调节体系的pH值至酸性,在酸性条件下壳聚糖可溶,溶解后的壳聚糖可以和丹皮酚发生吸附。然后将体系的pH值调节至碱性,壳聚糖在碱性或中性条件下溶解性变差,开始析出沉淀,由于壳聚糖对丹皮酚的吸附作用,丹皮酚和壳聚糖一起发生共沉淀,使得丹皮酚和体系中其他可溶性物质分离开。将沉淀收集,并将沉淀分散于乙酸乙酯中,丹皮酚被乙酸乙酯萃取,再过滤取液相部分,经浓缩干燥之后,可获得滇牡丹根皮提取物,主要成分为丹皮酚。
[0012] 本技术方案的有益效果具体如下:
[0013] (1)通过本提取和纯化方法可以获得高纯度、色泽佳的丹皮酚,并且丹皮酚的得率较高。
[0014] (2)利用壳聚糖对丹皮酚的吸附作用,以及壳聚糖在酸性环境中可溶、碱性中性环境中溶解性较差的性质,对丹皮酚进行纯化,通过简单的纯化方法获得纯度较高的丹皮酚提取物,避免了使用过柱纯化、多次萃取和重结晶等复杂步骤。发明人首次发现壳聚糖对丹皮酚的吸附作用,并将其应用于丹皮酚的提取纯化中。
[0015] (3)低温匀浆过程保护了容易随水蒸气挥发的丹皮酚(热稳定性较差)。匀浆过程也带走了部分水溶性物质,避免了大量水溶性物质对丹皮酚提取的干扰,增加了产品的纯度。
[0016] (4)整个提取过程不需要高温处理,保证了丹皮酚不会降解和挥发,从而提高了提取物的品质。
[0017] (5)在使用壳聚糖纯化丹皮酚之前,使用了复合酶酶解的方法,充分除去会和壳聚糖形成共沉淀的大分子干扰物,进一步提高了最终获得的提取物中丹皮酚的含量。
[0018] 进一步,在步骤(4)中,壳聚糖的加入量为丹皮原料重量的10‑20%。
[0019] 采用上述技术方案,上述用量的壳聚糖可以对丹皮酚进行充分吸附,有效的将丹皮酚从杂质中纯化出来。
[0020] 进一步,在步骤(4)中,所述复合酶包括纤维素酶、中性蛋白酶、淀粉酶、果胶酶,所述复合酶在酶解体系中的含量为2‑4重量%;酶解反应的温度为30‑45℃,时长为2‑3h,pH值为7.0‑7.5。
[0021] 采用上述技术方案,采用上述组合和用量的复合酶以及酶解反应的条件,可以将体系中的蛋白质、淀粉等大分子杂质充分除去,减少这些大分子物质对壳聚糖吸附丹皮酚的影响。
[0022] 进一步,在步骤(4)中,酶解反应结束后,调整pH至5.0‑5.5,再加入壳聚糖,搅拌混匀后得体系A,静置后调节所述体系A的pH值至7.0‑8.0,静置后过滤取沉淀。
[0023] 采用上述技术方案,酶解反应结束后,调整pH至5.0‑5.5保证了壳聚糖不会因为酸性过强而发生大量降解,也不会因为酸性过弱而溶解性不好,不能有效吸附丹皮酚。静置后调节所述体系A的pH值至7.0‑8.0,使得壳聚糖发生沉淀,如果pH值过低,会导致沉淀不能充分析出,不能将丹皮酚从体系中充分分离,pH值过高,沉淀析出的速度过快,获得的沉淀过于致密,在后续的乙酸乙酯萃取过程中,不能有效的将沉淀分散,不能使乙酸乙酯充分接触丹皮酚,不能将丹皮酚充分萃取,丹皮酚大量残留在沉淀中,导致丹皮酚的得率过低。
[0024] 进一步,在步骤(4)中,在所述沉淀中加入丹皮原料重量6‑9倍的乙酸乙酯。
[0025] 采用上述技术方案,上述用量的乙酸乙酯可以将沉淀中的丹皮酚充分萃取。
[0026] 进一步,在步骤(3)中,对提取体系进行超声处理的超声功率为100‑200W,处理时间为30min;在所述滤渣中加入丹皮原料重量4‑7倍的乙酸乙酯。
[0027] 采用上述技术方案,上述参数的超声处理可以破坏细胞结构,使得功效成分充分溶出。
[0028] 进一步,在步骤(2)中,在所述丹皮原料中加入丹皮原料重量1‑3倍的0‑10℃的水。
[0029] 采用上述技术方案,保证匀浆过程在低温状态下进行,避免了丹皮被降解或挥发,提高丹皮酚提取率。
[0030] 进一步,在步骤(1)中,所述丹皮原料由如下方法制备:取新鲜滇牡丹根皮,洗净后将新鲜滇牡丹根皮粉碎,然后过10目筛,得所述丹皮原料。
[0031] 采用上述技术方案,新鲜滇牡丹根皮的细胞饱满,且细胞结构易于破坏,其活性成分可高效溶出。
[0032] 进一步,滇牡丹根皮提取物中丹皮酚的含量大于90%。
[0033] 采用上述技术方案,有本法获得的滇牡丹根皮提取物,具有杂质含量少和丹皮酚纯度高的特点。
[0034] 进一步,滇牡丹根皮提取物在化妆品或药品中的应用。
[0035] 采用上述技术方案,本方案制备的滇牡丹根皮提取物主要成分为丹皮酚,具有消炎止痒的功效,可以应用到化妆品和药品的制备中。

具体实施方式

[0036] 实施例1:采用本技术方案进行滇牡丹根皮提取物的制备
[0037] 1、提取物制备过程
[0038] 步骤(1):取新鲜滇牡丹根皮(药材丹皮),洗净后将新鲜滇牡丹根皮粉碎,过10目筛,得丹皮原料。
[0039] 步骤(2):取100g丹皮原料放入匀浆机,在丹皮原料中加入4℃的纯净水,纯净水的加入量为丹皮原料重量的3倍(即300g纯净水),在匀浆机中匀浆30min(转速为20000rpm,温度为4℃)得到匀浆产物,将匀浆产物过滤后取滤渣部分。
[0040] 步骤(3):在滤渣中加入乙酸乙酯,搅拌混匀,乙酸乙酯的加入量为丹皮原料重量的6倍(即600g乙酸乙酯)。对含有匀浆产物滤渣的乙酸乙酯进行冰浴超声处理,超声功率为150W。超声处理的次数为3次,每次10min。超声处理后过滤取滤液,使用旋转蒸发仪对滤液进行减压浓缩(压强0.05MPa、温度50℃),得丹皮粗提物(浸膏状态,密度为0.5g/ml)。
[0041] 步骤(4):将丹皮粗提物分散于水中,水的加入量为丹皮原料重量的6倍。再加入复合酶,得酶解体系。复合酶包括果胶酶(CAS:9032‑75‑1)、纤维素酶(CAS:9012‑54‑8)、中性蛋白酶(CAS:9068‑59‑1)和淀粉酶(CAS:9000‑90‑2)。其中复合酶在酶解体系中的含量为3重量%,果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶和淀粉酶的质量比为1:1:1:1。酶解反应一共进行3h,温度为35℃,pH值为7.0。在酶解反应结束之后,使用1质量%的盐酸溶液调整pH值至
5.0,再加入壳聚糖(CAS:9012‑76‑4,脱乙酰度≥80%,粘度<200mPa.s),壳聚糖的加入量为丹皮原料重量的15%(即加入壳聚糖7.5g),获得体系A。充分搅拌体系A 30min,搅拌的速度为200rpm,搅拌结束后,静置30min,然后用1质量%的氢氧化钠溶液调节体系A的pH值至
7.5,待沉淀析出,静置30min后过滤取沉淀。再将沉淀分散于乙酸乙酯中,乙酸乙酯的加入量为丹皮原料重量的8倍,充分搅拌60min,使得沉淀和乙酸乙酯混合完全,搅拌的转速为
200rpm。然后静置30min后过滤取液相部分,获得提取液,将提取液浓缩蒸干,使用旋转蒸发仪对上述提取液进行减压浓缩(压强0.05MPa、温度50℃),直至浸膏浓度为0.5g/ml,然后对减压浓缩的产物进行冷冻干燥,得滇牡丹根皮提取物,称重(1.137g)并保存待用。
[0042] 2、丹皮酚得率以及纯度检测
[0043] 按照《中国药典(一部)》(2015版)的牡丹皮药材含量测定方法,对本实施例使用到的新鲜滇牡丹根皮(药材丹皮)进行丹皮酚含量检测,经检测,滇牡丹根皮(药材丹皮)中丹皮酚的含量为1.25%。
[0044] 按照《高效液相色谱法检验标准操作程序》测定提取产物中丹皮酚的含量,取根皮提取物0.01g制备待测样本。取丹皮酚对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含20μg的溶液,即得对照品溶液。检测过程的具体参数为:以甲醇‑水(45:55)为流动相;检测波长为274nm,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂进行HPLC检测。测定时,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定后即得样品中丹皮酚的含量。根据HPLC检测结果计算得出:本次滇牡丹根皮提取物制备的丹皮酚提取率为88.32%,丹皮酚的纯度为
97.11%。
[0045] 实施例2:
[0046] 本实施例基本同实施例1,不同点在于步骤(4),具体如下:
[0047] 步骤(4):将丹皮粗提物分散于水中,水的加入量为丹皮原料重量的6倍。再加入复合酶,得酶解体系。复合酶包括果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶和淀粉酶。其中复合酶在酶解体系中的含量为4重量%,果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶和淀粉酶的质量比为1:1:1:1。酶解反应一共进行2h,温度为30℃,pH值为7.0。在酶解反应结束之后,使用1质量%的盐酸溶液调整pH值至5.0,再加入壳聚糖,壳聚糖的加入量为丹皮原料重量的20%,获得体系A。充分搅拌体系A 30min,搅拌的速度为200rpm,搅拌结束后,静置30min,然后用1质量%的氢氧化钠溶液调节体系A的pH值至7.0,待沉淀析出,静置30min后过滤取沉淀。再将沉淀分散于乙酸乙酯中,乙酸乙酯的加入量为丹皮原料重量的6倍,充分搅拌60min,使得沉淀和乙酸乙酯混合完全,搅拌的转速为200rpm。然后静置30min后过滤取液相部分,获得提取液,将提取液浓缩蒸干,使用旋转蒸发仪对上述提取液进行减压浓缩(压强0.05MPa、温度50℃),直至浸膏浓度为0.5g/ml,然后对减压浓缩的产物进行冷冻干燥,得滇牡丹根皮提取物,称重并保存待用。
[0048] 实施例3:
[0049] 本实施例基本同实施例1,不同点在于步骤(4),具体如下:
[0050] 步骤(4):将丹皮粗提物分散于水中,水的加入量为丹皮原料重量的6倍。再加入复合酶,得酶解体系。复合酶包括果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶和淀粉酶(CAS:9000‑90‑2)。其中复合酶在酶解体系中的含量为2重量%,果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶和淀粉酶的质量比为1:1:1:1。酶解反应一共进行3h,温度为45℃,pH值为7.5。在酶解反应结束之后,使用
1质量%的盐酸溶液调整pH值至5.5,再加入壳聚糖,壳聚糖的加入量为丹皮原料重量的
10%(即加入壳聚糖7.5g),获得体系A。充分搅拌体系A 30min,搅拌的速度为200rpm,搅拌结束后,静置30min,然后用1质量%的氢氧化钠溶液调节体系A的pH值至8.0,待沉淀析出,静置30min后过滤取沉淀。再将沉淀分散于乙酸乙酯中,乙酸乙酯的加入量为丹皮原料重量的9倍,充分搅拌60min,使得沉淀和乙酸乙酯混合完全,搅拌的转速为200rpm。然后静置
30min后过滤取液相部分,获得提取液,将提取液浓缩蒸干,使用旋转蒸发仪对上述提取液进行减压浓缩(压强0.05MPa、温度50℃),直至浸膏浓度为0.5g/ml,然后对减压浓缩的产物进行冷冻干燥,得滇牡丹根皮提取物,称重并保存待用。
[0051] 实施例4:
[0052] 本实施例基本同实施例1,不同点在于步骤(2)和步骤(3):
[0053] 步骤(2):取100g丹皮原料放入匀浆机,在丹皮原料中加入10℃的纯净水,纯净水的加入量为丹皮原料重量的1倍,在匀浆机中匀浆30min(转速为20000rpm,温度为4℃)得到匀浆产物,将匀浆产物过滤后取滤渣部分。
[0054] 步骤(3):在滤渣中加入乙酸乙酯,搅拌混匀,乙酸乙酯的加入量为丹皮原料重量的4倍。对含有匀浆产物滤渣的乙酸乙酯进行冰浴超声处理,超声功率为200W。超声处理的次数为3次,每次15min。超声处理后过滤取滤液,使用旋转蒸发仪对滤液进行减压浓缩(压强0.05MPa、温度50℃),得丹皮粗提物(浸膏状态,密度为0.5g/ml)。
[0055] 实施例5:
[0056] 本实施例基本同实施例1,不同点在于步骤(2)和步骤(3):
[0057] 步骤(2):取100g丹皮原料放入匀浆机,在丹皮原料中加入0℃的纯净水,纯净水的加入量为丹皮原料重量的2倍,在匀浆机中匀浆30min(转速为20000rpm,温度为4℃)得到匀浆产物,将匀浆产物过滤后取滤渣部分。
[0058] 步骤(3):在滤渣中加入乙酸乙酯,搅拌混匀,乙酸乙酯的加入量为丹皮原料重量的7倍。对含有匀浆产物滤渣的乙酸乙酯进行冰浴超声处理,超声功率为100W。超声处理的次数为2次,每次25min。超声处理后过滤取滤液,使用旋转蒸发仪对滤液进行减压浓缩(压强0.05MPa、温度50℃),得丹皮粗提物(浸膏状态,密度为0.5g/ml)。
[0059] 对比例1:采用直接水蒸气蒸馏法进行滇牡丹根皮提取物的制备
[0060] 取新鲜滇牡丹根皮(药材丹皮),洗净后将新鲜滇牡丹根皮切成2cm小段,得丹皮原料。取100g丹皮原料,加6倍量蒸馏水,40℃浸泡2h,加入20ml无水乙醇,进行水蒸气蒸馏,连续收集二次馏出液,每次馏出液250ml,馏出液冷藏过夜,过滤,收集滤液,40℃浓缩干燥,得滇牡丹根皮提取物,称重并保存待用。按照实施例1中的方法进行丹皮酚得率以及纯度检测,本次滇牡丹根皮提取物制备的丹皮酚提取率为78.35%,丹皮酚的纯度为72.14%,并且本对比例制备的滇牡丹根皮提取物色泽浅黄。
[0061] 对比例2:
[0062] 本对比例基本同实施例1,不同点在于,本实施例只有步骤(1)‑(3),用获得的丹皮粗提物进行各项检测。
[0063] 对比例3:
[0064] 本对比例基本同实施例1,不同点在于,在步骤(4)中,不使用酶解处理,具体如下:
[0065] 步骤(4):将丹皮粗提物分散于水中,水的加入量为丹皮原料重量的6倍。使用1质量%的盐酸溶液调整pH值至5.0,再加入壳聚糖,壳聚糖的加入量为丹皮原料重量的15%,获得体系A。充分搅拌体系A30min,搅拌的速度为200rpm,搅拌结束后,静置30min,然后用1质量%的氢氧化钠溶液调节体系A的pH值至7.5,待沉淀析出,静置30min后过滤取沉淀。再将沉淀分散于乙酸乙酯中,乙酸乙酯的加入量为丹皮原料重量的8倍,充分搅拌60min,使得沉淀和乙酸乙酯混合完全,搅拌的转速为200rpm。然后静置30min后过滤取液相部分,获得提取液,将提取液浓缩蒸干,使用旋转蒸发仪对上述提取液进行减压浓缩(压强0.05MPa、温度50℃),直至浸膏浓度为0.5g/ml,然后对减压浓缩的产物进行冷冻干燥,得滇牡丹根皮提取物,称重并保存待用。
[0066] 对比例4:
[0067] 本对比例基本同实施例1,不同点在于,在步骤(4)中,在酶解反应结束之后,在加入壳聚糖之前,将pH值的调整为6.5。
[0068] 对比例5:
[0069] 本对比例基本同实施例1,不同点在于,在步骤(4)中,在酶解反应结束之后,在加入壳聚糖之前的使用盐酸对pH值的调整,pH值为4.0。
[0070] 对比例6:
[0071] 本对比例基本同实施例1,不同点在于,在步骤(4)中,在加入壳聚糖之后的使用氢氧化钠对pH值的调整,pH值为10.0。
[0072] 对比例7:
[0073] 本对比例基本同实施例1,不同点在于,在步骤(4)中,在加入壳聚糖之后对pH值的调整,用稀酸将pH值调整为6.5。
[0074] 对比例8:
[0075] 本对比例基本同实施例1,不同点在于,在步骤(2)中,匀浆的温度为室温。
[0076] 对比例9:
[0077] 本对比例基本同实施例1,不同点在于,不包括步骤(2),直接将丹皮原料用于步骤(3)中的超声提取。
[0078] 对实施例1‑实施例5,对比例1‑对比例9获得的滇牡丹根皮提取物进行检测,检测方法见实施例1中的描述,检测结果见表1。所有实施例和对比例使用的是同一批新鲜滇牡丹根皮,所以原材料中的丹皮酚的含量不用重复测量,丹皮酚在新鲜滇牡丹根皮中的含量为1.25%。
[0079] 表1:实施例1‑实施例5,对比例1‑对比例9的丹皮酚含量检测结果。
[0080]   A(g) B(g) C(g) 提取率(%) 纯度(%)实施例1 1.104 1.250 1.137 88.32 97.11
实施例2 1.056 1.250 1.104 84.32 95.65
实施例3 1.069 1.250 1.110 85.52 96.31
实施例4 1.007 1.250 1.057 80.56 95.27
实施例5 1.011 1.250 1.073 80.88 94.22
对比例1 0.979 1.250 3.357 78.32 29.16
对比例2 1.167 1.250 3.161 93.36 36.92
对比例3 0.849 1.250 2.361 67.92 35.96
对比例4 N/A 1.250 N/A N/A N/A
对比例5 N/A 1.250 N/A N/A N/A
对比例6 N/A 1.250 N/A N/A N/A
对比例7 N/A 1.250 N/A N/A N/A
对比例8 0.758 1.250 1.423 60.64 53.27
对比例9 0.614 1.250 1.010 49.12 60.79
[0081] 表1中A表示每100g丹皮原料提取获得的滇牡丹根皮提取物中丹皮酚质量;B表示每100g丹皮原料(即新鲜滇牡丹根皮)中丹皮酚质量;C表示每100g丹皮原料提取获得的滇牡丹根皮提取物质量。其中,计算方式为:提取率(%)=(A/B)×100%;纯度(%)=(A/C)×100%。
[0082] 实施例1‑实施例5中丹皮酚的提取率较高且纯度在90%以上,颜色为白色,已经将色素充分去除,滇牡丹根皮提取物(主要成分为丹皮酚)质量佳。对比例1使用的是传统的水蒸气蒸馏法,丹皮酚性质不稳定,容易挥发和分解,而水蒸气蒸馏法会使用到较高的温度,且未经过纯化,导致丹皮酚的提取率和纯度较低。对比例2没有经过壳聚糖纯化的步骤,所以滇牡丹根皮提取物的丹皮酚的纯度较低,由于没有附加纯化步骤,丹皮酚没有损失,所以丹皮酚的提取率较高,但是杂质含量也较高。对比文件3在使用壳聚糖纯化之前没有使用酶解的方法,体系中大量大分子的物质没有被降解,蛋白质、纤维素等物质与壳聚糖相互作用,壳聚糖对这些分子形成了包合,导致壳聚糖对丹皮酚的吸附效率变低,所以纯度非常低。由于经过了纯化步骤,丹皮酚有一定损失,所以提取率也相对降低。在对比例4中,在加入壳聚糖之前,将pH值调整为6.5,在上述酸碱度环境下,壳聚糖无法充分溶解,无法对丹皮酚形成有效吸附,无法完成对丹皮酚的纯化,后续调整pH为碱性后,沉淀中含有的丹皮酚非常少,检测过程无法正常进行。在对比例5中,在加入壳聚糖之前,将pH值调整为4.0,pH值过低,壳聚糖发生降解,导致其无法对丹皮酚形成有效吸附,后续调整pH为碱性后,沉淀中含有的丹皮酚非常少,检测过程无法正常进行。在对比例6中,在加入壳聚糖之后使用氢氧化钠将pH值调整为10.0,碱性过强,形成沉淀过于迅速且致密,后续使用乙酸乙酯无法有效对沉淀中的壳聚糖进行萃取,丹皮酚被包合在壳聚糖沉淀中,不能提取出来,检测过程无法正常进行。在对比例6中,在加入壳聚糖之后使用稀酸将pH值调整为6.5,沉淀析出量过小,也不能有效的将丹皮酚提取,检测过程无法正常进行。对比例8在室温下进行匀浆,导致丹皮酚容易被破坏。对比例9不包含匀浆步骤,使得丹皮酚的提取率变低。
[0083] 以上所述的仅是本发明的实施例,方案中公知的具体结构及特性等常识在此未作过多描述。应当指出,对于本领域的技术人员来说,在不脱离本发明结构的前提下,还可以作出若干变形和改进,这些也应该视为本发明的保护范围,这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本申请要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准,说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。