一种具有降血糖作用的药食同源组合物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开一种具有降血糖作用的药食同源组合物及其制备方法和应用，所述组合物由杜仲、木姜叶柯与平卧菊三七的提取物混合而成，其包括以下步骤：(1)将杜仲、木姜叶柯与平卧菊三七原料，经烘干、粉碎、过筛等步骤得到杜仲、木姜叶柯与平卧菊三七粉末；(2)杜仲、木姜叶柯与平卧菊三七粉末分别经溶剂提取、醇沉、萃取以及结晶得到杜仲、木姜叶柯与平卧菊三七提取物；(3)将杜仲、木姜叶柯与平卧菊三七提取物按照1:1:1‑1:1:3的方式混合、摇匀制备组合提取物。本发明产出来的药食同源组合物能够显著降低糖尿病患者血糖指数以及餐后血糖含量，对于糖尿病引起的并发症具有良好的预防和治疗作用，具有显著的社会和经济效益。

权利要求

1.一种具有降血糖作用的药食同源组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1）：采集杜仲叶为原材料，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为80℃，液料比为1:10‑20，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入4倍量的无水乙醇，放入冰箱，过夜，离心收集上清液，浓缩至无醇味，加入等量蒸馏水超声波打散，加入等体积的溶剂萃取，萃取三次，合并萃取相，浓缩至干制备得杜仲叶提取物；

步骤2）：采集木姜叶柯叶为原材料，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为70℃，液料比为1:10‑20，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入10%的活性炭

70℃搅拌脱色，滤液经喷雾干燥后得到木姜叶柯提取物；

步骤3）：采集平卧菊三七叶为原材料，干燥粉碎后采用醇水作为提取溶剂，离心收集上清液，浓缩至无醇味，浓缩至干制备得平卧菊三七叶提取物；

步骤4）：将杜仲提取物、木姜叶柯提取物、平卧菊三七提取物按质量比1:1:1‑1:1:3的比例混合、摇匀制备药食同源组合物。

2.根据权利要求1所述的具有降血糖作用的药食同源组合物的制备方法，其特征在于，所述组合提取物中需包含绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、京尼平苷、车叶草苷、异绿原酸B、儿茶素、异槲皮苷、异绿原酸A、根皮苷、松脂醇二葡萄糖苷、异绿原酸C、三叶苷和芦丁。

3.根据权利要求1所述的具有降血糖作用的药食同源组合物的制备方法，其特征在于，步骤3）中，提取溶剂为PH=2‑7的50‑90%乙醇水溶液，液料比为1:10‑20，提取温度为常温以及超声提取2小时，滤液经减压浓缩至无醇味。

4.根据权利要求1所述的具有降血糖作用的药食同源组合物的制备方法，其特征在于，步骤1）中所用有机溶剂为石油醚、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷/甲醇和石油醚/乙酸乙酯的任意一种。

5.一种权利要求1～4中任意一项所制备的药食同源组合物在制备降血糖药物中的应用。

说明书

一种具有降血糖作用的药食同源组合物及其制备方法和应用

技术领域

[0001] 本发明属于植物有效活性成分提取与应用技术领域，尤其是涉及一种具有降血糖作用的药食同源组合物及其制备方法和应用。

背景技术

[0002] 糖尿病是指由于胰岛素分泌不足、胰岛素作用障碍、葡萄糖代谢紊乱，是由于三者或三者组合引起的葡萄糖代谢紊乱的一种疾病，其症状特征是烦渴、多食、多尿和体重减
轻。糖尿病是21世纪全球最大的突发卫生事件之一，全球患病率不断上升，目前影响8.8%的
成人。糖尿病可诱发多种急性或慢性并发症，如心脑血管和糖尿病肾病等。持续的糖脂代谢
紊乱可以导致大小血管、微血管、神经等系统出现很多疾病，导致组织结构和功能发生异
常。糖尿病在医学界被称为“所有疾病的来源”，并危及世界人民的健康。市面上降糖类药物
种类纷杂，大多数的此类药物因药物都是通过化学或者是生物合成，尽管降糖效果明显却
同时带来了很多副作用，同时昂贵的价格也让人望而却步。近几年从天然产物中提取有效
成分用来预防及治疗糖尿病的相关研究成为一大热点。因此，从资源丰富的中药中寻找高
效，低毒，廉价的天然药物和保健食品是一个很大的发展趋势。

[0003] 蔓三七学名为“平卧菊三七（Gynura procumbens（Lour.）Merr.）”为菊科，三七属植物，又蛇接骨、续命草、神仙草，味辛、微苦、性凉，为多年生草本药食两用植物，广泛分布
在中国、马来西亚、泰国、印度尼西亚、韩国和菲律宾等国家。平卧菊三七具有广泛的药理作
用，2009年上半年，中国疾病预防控制中心、国家食品质量监督检验中心、中国食品发酵工
业研究院等有关单位完成了平卧菊三七毒理学检验、卫生学检验和多种成分的检验，结论
是：无毒、无致畸影响；其有效成份具有通经活络，消炎止咳，散淤消肿，活血生肌，治疗跌打
损伤，支气管肺炎、肺结核等功效；能延缓衰老、激活免疫细胞、改善机体免疫功能、提高人
体免疫力，增强人体的新陈代谢并对记忆障碍有一定改善作用；具有降血压、降血脂、降血
糖、抗氧化、抗溃疡和预防慢性肾病、抑制乙型肝炎的显著效果；对预防和治疗心脑血管疾
病、糖尿病等有一定的疗效；还具有抗病毒、抗菌活性、抑制骨髓癌和志贺样毒素细胞的活
性。另一方面，平卧菊三七是一种药食兼可的独特植物，具有极好的营养价值，因此，广泛利
用于食品医药工业、日用化工工业等领域，是一种极具潜力和高经济价值的药食两用植物。

[0004] 木姜叶柯（Lithocarpus polystachyus Rehd），又名多穗石柯、甜茶、多穗柯。多以野生状态分布于长江以南各省区，而以江西、湖南、福建、广西、安徽等省资源最为集中。根
皮苷与三叶苷为其主要成分，含有量高达9.0%～14.60%。现代医学研究表明，木姜叶柯具有
清热利尿、润肺镇咳、滋润肝肾等功效，可用于防治温热痢疾、痈疽恶疮、皮肤瘙痒等症，还
有“三抗”、“三降”的作用。现代研究表明，木姜叶柯具有抗氧化、降血糖、降血脂、抗菌、抗
炎、抗过敏等药理作用。

[0005] 杜仲（Eucommia ulmoides Oliver），又名胶木，是杜仲科杜仲属植物。为我国特有的名贵滋补中药材，药用价值高，现代药理学研究表明杜仲具有抗衰老、抗氧化、降血压、降
血脂、降血糖、抗诱变抗癌、抗菌及抗病毒等作用。杜仲活性成分丰富，主要含有黄酮类、苯
丙素类、环烯醚萜类、多糖类、多酚类、苯丙素类、木脂素类等，且杜仲药理作用突出，具有多
种保健功效。杜仲全身都是宝，其籽、花、皮、叶均可食用。经毒理学鉴定，杜仲籽油和杜仲雄
花都是安全无毒的，两者已被国家卫计委批准为新食品原料，杜仲叶也于2019年被国家卫
健委批准列人药食同源试点名单中，在健康食品开发方面有很大的前景。

发明内容

[0006] 本发明的目的提供一种具有降血糖作用的药食同源组合物及其制备方法和应用，其利用不同的提取纯化方式，分别富集杜仲、木姜叶柯与平卧菊三七中的有效成分，并通过
优化组合的方式将所得粉末进行组合，并对组合物进行降血糖活性测试，与单一的提取物
相比，作用得以互补，降血糖效力得以协同提高。

[0007] 为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

[0008] 一种具有降血糖作用的药食同源组合物，分别以杜仲、木姜叶柯与平卧菊三七为原材料，分别提取杜仲提取物、木姜叶柯提取物、平卧菊三七提取物，然后将杜仲提取物、木
姜叶柯提取物、平卧菊三七提取物按质量比1:1:1‑1:1:3的比例混合得到组合提取物。

[0009] 进一步优选，所述组合提取物中需包含绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、京尼平苷、车叶草苷、异绿原酸B、儿茶素、异槲皮苷、异绿原酸A、根皮苷、松脂醇二葡萄糖苷、异绿原酸C、三
叶苷和芦丁等成分。

[0010] 一种具有降血糖作用的药食同源组合物制备方法，包括以下步骤：

[0011] 步骤1）：采集杜仲叶为原材料，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为80℃，料液比为1:10‑20，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入4倍量的无水
乙醇，放入冰箱，过夜，离心收集上清液，浓缩至无醇味，加入等量蒸馏水超声波打散，加入
等体积的溶剂萃取，萃取三次，合并萃取相，浓缩至干制备得杜仲叶提取物；

[0012] 步骤2）：采集木姜叶柯叶为原材料，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为70℃，料液比为1:10‑20，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入10%的活性
炭70℃搅拌脱色，滤液经喷雾干燥后得到木姜叶柯提取物；

[0013] 步骤3）：采集平卧菊三七叶为原材料，干燥粉碎后采用乙醇水溶液作为提取溶剂，离心收集上清液，浓缩至无醇味，浓缩至干制备得平卧菊三七叶提取物；

[0014] 步骤4）：将杜仲提取物、木姜叶柯提取物、平卧菊三七提取物按照比例混合、摇匀制备药食同源组合物。

[0015] 进一步地，步骤4）中，将杜仲提取物、木姜叶柯提取物、平卧菊三七提取物按质量比1:1:1‑1:1:3的比例混合得到组合提取物。

[0016] 进一步地，所述组合提取物中需包含绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、京尼平苷、车叶草苷、异绿原酸B、儿茶素、异槲皮苷、异绿原酸A、根皮苷、松脂醇二葡萄糖苷、异绿原酸C、三叶
苷和芦丁等成分。

[0017] 进一步地，步骤3）中，提取溶剂为PH=2‑7的50‑90%乙醇水溶液，液料比为1:10‑20，提取温度为常温，超声提取2小时，滤液经减压浓缩至无醇味。

[0018] 进一步地，步骤1）中所用有机溶剂为石油醚、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷/甲醇和石油醚/乙酸乙酯的任意一种。

[0019] 进一步地，优选地，步骤1）中所用萃取溶剂，所选萃取溶剂用乙酸乙酯/甲醇，乙酸乙酯/甲醇体积比4:1最佳。

[0020] 本发明还提供了制备的药食同源组合物在制备降血糖药物中的应用。

[0021] 由于采用如上所述的技术方案，本发明具有如下优越性：

[0022] 本发明通过不同的提取纯化方式，对杜仲、木姜叶柯与平卧菊三七有效成分进行富集，共获得14中有效成分，分别是绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、京尼平苷、车叶草苷、异绿原
酸B、儿茶素、异槲皮苷、异绿原酸A、根皮苷、松脂醇二葡萄糖苷、异绿原酸C、三叶苷和芦丁，
其含量占组合物粉末的90%，揭示了降血糖的物质基础，与传统中药相比，更有效的富集了
有效成分，舍弃了一些无效成分。所制备的药食同源组合物对糖尿病患者具有特别好的效
果，效果明显好于单独的使用杜仲、木姜叶柯与平卧菊三七提取物。

附图说明

[0023] 图1是本发明组合物的液相色谱图。

[0024] 图2是本发明平卧菊三七提取物的液相色谱图。

[0025] 图3是本发明杜仲提取物的液相色谱图。

[0026] 图4是本发明木姜叶柯提取物的液相色谱图。

[0027] 图5是本发明对比例提取物的液相色谱图。

具体实施方式

[0028] 参照以下实施例可以对本发明作进一步详细说明；但是，以下实施例仅仅是例证，本发明并不局限于这些实施例。

[0029] 一种具有降血糖作用的药食同源组合物其制备方法，包括以下步骤：

[0030] 步骤1）：采集杜仲叶为原材料，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为80℃，料液比为1:10‑20，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入4倍量的无水
乙醇，放入冰箱，过夜，离心收集上清液，浓缩至无醇味，加入等量蒸馏水超声波打散，加入
等体积的溶剂萃取，萃取三次，合并萃取相，浓缩至干制备得杜仲叶提取物；

[0031] 步骤2）：采集木姜叶柯叶为原材料，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为70℃，料液比为1:10‑20，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入10%的活性
炭70℃搅拌脱色，滤液经喷雾干燥后得到木姜叶柯提取物；

[0032] 步骤3）：采集平卧菊三七叶为原材料，干燥粉碎后采用醇水作为提取溶剂，离心收集上清液，浓缩至无醇味，浓缩至干制备得平卧菊三七叶提取物；

[0033] 步骤4）：将杜仲提取物、木姜叶柯提取物、平卧菊三七提取物按照比例混合、摇匀制备药食同源组合物。组合提取物中经液相检测含有绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、京尼平苷、
车叶草苷、异绿原酸B、儿茶素、异槲皮苷、异绿原酸A、根皮苷、松脂醇二葡萄糖苷、异绿原酸
C、三叶苷和芦丁等成分。

[0034] 实施例1

[0035] 取杜仲叶100g，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为80℃，料液比为1:20，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入4倍量的无水乙醇，放入冰箱，过
夜，离心收集上清液，浓缩至无醇味，加入等量蒸馏水超声波打散，加入等体积的正丁醇萃
取，萃取三次，合并萃取相，浓缩至干制备得杜仲叶提取物2.35g，得率2.35%，杜仲提取物的
液相色谱图如图3所示。

[0036] 取木姜叶柯100g，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为70℃，料液比为1:20，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入10%的活性炭70℃搅拌脱色，滤
液经喷雾干燥后得到木姜叶柯提取物6.42g，得率6.42%，木姜叶柯提取物的液相色谱图如
图4所示。

[0037] 取平卧菊三七叶100g，干燥粉碎后采用PH=3的50%乙醇水溶液，料液比为1:10，提取温度为常温，超声提取2小时，滤液经减压浓缩至无醇味。浓缩至干制备得平卧菊三七叶
提取物9.24g，得率9.24%，平卧菊三七提取物的液相色谱图如图2所示。

[0038] 将杜仲提取物、木姜叶柯提取物、平卧菊三七提取物按照质量比1:1:1的比例混合、摇匀制备药食同源组合物。组合提取物中经液相检测含有1绿原酸、2隐绿原酸、3咖啡
酸、4京尼平苷、5车叶草苷、6异绿原酸B、7儿茶素、8异槲皮苷、9异绿原酸A、10根皮苷、11松
脂醇二葡萄糖苷、12异绿原酸C、13三叶苷和14芦丁等成分，如图1所示。

[0039] 实施例2

[0040] 取杜仲叶100g，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为80℃，料液比为1:10，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入4倍量的无水乙醇，放入冰箱，过
夜，离心收集上清液，浓缩至无醇味，加入等量蒸馏水超声波打散，加入等体积的二氯甲烷/
甲醇萃取，萃取三次，合并萃取相，浓缩至干制备得杜仲叶提取物4.18g，得率4.18%；

[0041] 取木姜叶柯100g，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为70℃，料液比为1:10，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入10%的活性炭70℃搅拌脱色，滤
液经喷雾干燥后得到木姜叶柯提取物4.25g，得率4.25%。

[0042] 取平卧菊三七叶100g，干燥粉碎后采用PH=2的80%乙醇水溶液，料液比为1:20，提取温度为常温，超声提取2小时，滤液经减压浓缩至无醇味。浓缩至干制备得平卧菊三七叶
提取物8.77g，得率8.77%。

[0043] 将杜仲提取物、木姜叶柯提取物、平卧菊三七提取物按照质量比1:1:2的比例混合、摇匀制备药食同源组合物。组合提取物中经液相检测含有绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、京
尼平苷、车叶草苷、异绿原酸B、儿茶素、异槲皮苷、异绿原酸A、根皮苷、松脂醇二葡萄糖苷、
异绿原酸C、三叶苷和芦丁等成分。

[0044] 实施例3

[0045] 取杜仲叶100g，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为80℃，料液比为1:15，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入4倍量的无水乙醇，放入冰箱，过
夜，离心收集上清液，浓缩至无醇味，加入等量蒸馏水超声波打散，加入等体积的石油醚/乙
酸乙酯萃取，萃取三次，合并萃取相，浓缩至干制备得杜仲叶提取物2.04g，得率2.04%。

[0046] 取木姜叶柯100g，干燥粉碎后采用水作为提取溶剂，提取温度为70℃，料液比为1:15，搅拌提取，过滤，合并滤液减压浓缩至原液的1/10，加入10%的活性炭70℃搅拌脱色，滤
液经喷雾干燥后得到木姜叶柯提取物7.44g，得率7.44%。

[0047] 取平卧菊三七叶100g，干燥粉碎后采用PH=7的60%乙醇水溶液，料液比为1:15，提取温度为常温以及超声提取2小时，滤液经减压浓缩至无醇味。浓缩至干制备得平卧菊三七
叶提取物10.45g，得率10.45%。

[0048] 将杜仲提取物、木姜叶柯提取物、平卧菊三七提取物按照质量比1:1:3的比例混合、摇匀制备药食同源组合物。组合提取物中经液相检测含有绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、京
尼平苷、车叶草苷、异绿原酸B、儿茶素、异槲皮苷、异绿原酸A、根皮苷、松脂醇二葡萄糖苷、
异绿原酸C、三叶苷和芦丁等成分。

[0049] 对比例

[0050] 取杜仲叶、木姜叶柯与平卧菊三七各100g，使用粉碎机一起粉碎后加入锥形瓶中，提取溶剂为PH=5的90%乙醇水溶液，料液比为1:15，提取温度为常温以及超声提取2小时，过
滤，滤液经减压浓缩至无醇味。向所得溶液中加入4倍体积的100%的乙醇溶液，放入4℃冰箱
过夜进行醇沉，离心收集上清液，减压浓缩至无醇味，得到混合提取液，混合提取液经溶剂
萃取，所用萃取溶剂为正丁醇，合并萃取液、减压浓缩、以及干燥得到混合提取物4.52 g，混
合提取物中含有绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、根皮苷、异绿原酸C和芦丁等成分。化合物
隐绿原酸、咖啡酸、京尼平苷、车叶草苷、儿茶素、异槲皮苷、松脂醇二葡萄糖苷与三叶苷未
检出。

[0051] 药食同源组合物对链脲佐菌素致小鼠血糖的影响

[0052] 选择130只健康雄性昆明小鼠(约20 g)作为实验动物，随机分为13组:(空白对照组，模型对照组，阳性对照组（阿卡波糖），混合提取物=1：1：1高剂量组，混合提取物=1：1：1
低剂量组，混合提取物=1：1：2高剂量组，混合提取物=1：1：2低剂量组，混合提取物=1：1：3高
剂量组，混合提取物=1：1：3低剂量组，木姜叶柯提取物组，平卧菊三七提取物组，杜仲叶提
取物组，对比例组)各组10只。第一周选用普通饲料提供充足食物与水分，以避免环境变化
带来异常。一周后，所有小鼠开始快速喂水，12h后，在空白对照组外腹腔注射0.1mol/L STZ
溶液。每只小鼠的注射剂量选择以60 mg/kg以建立2型糖尿病的模型，并且空白对照组注射
等体积的蒸馏水。注射后，给空白对照组小鼠喂食正常饲料，给剩下的小鼠喂食高糖和高脂
肪饮食5天。建模5天后，测试小鼠的血糖，血糖范围为11‑25 mmol/L被认为是成功的。如果
存在血糖值小于11 mmol/L的小鼠，则需要继续补充注射STZ，将STZ溶解在pH4.2和4.5之间
的柠檬酸盐缓冲液中。并将其储存在用箔纸包裹的试管中。并在30min中快速注射到小鼠的
腹腔内。数据结果采用平均数±标准差(x±s)表示，各组之间的差异性采用单向方差分析
通过统计软件包SPSS 19.0版，P<0.05认为有显著性差异，P>0.05则无显著性差异。

[0053] 将造模后血糖浓度在11‑25mmol/L内的小鼠分别按照体重及血糖浓度均匀分配成13组，按照表1进行灌胃。

[0054] 表1动物实验分组

[0055]

[0056] 如表2所示，从表中可以看出，成功建模后糖尿病小鼠的空腹血糖水平显著增加。并保持高血糖水平，与空白对照组相比，存在非常显著的差异(p<0.01)，STZ成功诱导并模
拟了小鼠糖尿病的高血糖模型。在整个给药期间，空白对照组的平均血糖水平稳定在5 
mmol/L，而模型对照组的小鼠随给药周期逐渐增加。说明糖尿病病情逐渐严重，直到第四、
五周保持在25 mmol/L左右，并且与组合物低、高剂量组之间存在显著或极显著差异(P<
0.01或P<0.05)。

[0057] 在阳性对照组和混合提取物=1：1：1高剂量组，混合提取物=1：1：1低剂量组，混合提取物=1：1：2高剂量组，混合提取物=1：1：2低剂量组，混合提取物=1：1：3高剂量组，混合提
取物=1：1：3低剂量组中，前三周小鼠的血糖水平随着治疗期的增加而增加。但是，它比模型
对照组慢。自第4周起，阳性对照组显著降低糖尿病小鼠的空腹血糖水平；灌胃五周后，阳性
对照组小鼠血糖较模型对照组小鼠血糖下降了45.54%，存在显著性差异。

[0058] 混合提取物=1：1：1高剂量组、混合提取物=1：1：2高剂量组、混合提取物=1：1：3高剂量组小鼠空腹血糖值自灌胃第四周开始均有不同程度的下降，并且与模型对照组相比表
现出显著或极显著差异((P<0.01或P<0.05)，灌胃5周后，混合提取物=1：1：1高剂量组、混合
提取物=1：1：2高剂量组、混合提取物=1：1：3高剂量组小鼠血糖相对于模型组小鼠血糖平均
下降了80%，可证明组合物对糖尿病可能有一定的控制作用。

[0059] 木姜叶柯提取物组，平卧菊三七提取物组，杜仲叶提取物组，对比例组小鼠空腹血糖值与混合提取物高低剂量组呈现出相同的趋势，所不同的是，木姜叶柯提取物组，平卧菊
三七提取物组，杜仲叶提取物组，在第四周与第五周所呈现的效果比混合提取物组要差，但
是木姜叶柯提取物组，平卧菊三七提取物组，杜仲叶提取物组在第四周与第五周小鼠空腹
血糖值比对比例组相比要小，表明同等剂量下，混合提取物效果优于单独的三个药食同源
植物的提取物，对比例的效果最差。

[0060] 表2混合提取物对糖尿病小鼠血糖值的影响

[0061]

[0062] 与正常对照组相比，##𝑃 <0.01；与模型组相比，*𝑃 <0.05, **𝑃 <0.01 和***𝑃 <0.001。

[0063] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。