一种碳氮同位素检测用桑叶及桑枝的抗菌真空贮存方法转让专利
申请号 : CN202010672456.8
文献号 : CN111838140B
文献日 : 2021-08-17
发明人 : 周旸 , 杨海亮 , 郑海玲
申请人 : 中国丝绸博物馆
摘要 :
权利要求 :
1.一种碳氮同位素检测用桑叶及桑枝的抗菌真空贮存方法,以g和mL计,其特征在于包括以下步骤:
1)称取0.1‑0.2 g壳聚糖粉末,加入98‑196 mL去离子水及2‑4 mL浓度为0.5‑1.5wt%的乙酸溶液,搅拌后得澄清溶液,用微孔滤膜过滤,得到壳聚糖‑乙酸溶液;
2)将壳聚糖‑乙酸溶液的pH值调至4‑5后,于室温下超声处理,加入0.8‑1.2wt%的吐温‑
80,吐温‑80与壳聚糖‑乙酸溶液的体积比为1:8‑12,在55‑65 ℃恒温加热搅拌30‑40 min,得到均一稳定的溶液;
3)向上述溶液中逐滴加入2.5‑5wt%的茶树精油溶液,步骤2)所得溶液与茶树精油溶液的体积比为8‑12:1,室温搅拌后,以2‑3滴/s的速率逐滴添加1‑2 mg/mL TPP溶液,搅拌,得到白色乳状液,即茶树精油壳聚糖微胶囊悬液;
4)将所得茶树精油壳聚糖微胶囊悬液低温超速离心后,下层沉淀用0.8‑1.0wt%的生理盐水悬浮,以2‑4wt%的甘露醇为冻干保护剂冷冻干燥后保存,获得茶树精油壳聚糖微胶囊;
5)将步骤4)所得茶树精油壳聚糖微胶囊与生石灰在机械力作用下进行物理混合,质量比为茶树精油壳聚糖微胶囊:生石灰=1:(2‑2.5),获得生石灰包裹的茶树精油壳聚糖微胶囊;
6)将步骤5)所得产物置于聚丙烯无纺布袋中,热封封口;
7)选取自产地采集的新鲜、色泽饱满、无虫蛀、无病斑的桑叶和桑枝,分别对其表面进行洁净处理;
8)将洁净处理后的桑叶和桑枝装入贮存袋中,加入步骤6)所得聚丙烯无纺布袋,然后利用真空封口机对贮存袋进行真空封口处理。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)中,搅拌时间为4‑6h,所述微孔过滤膜的孔径为0.4‑0.5 μm。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中,调节pH的试剂为0.8‑1.2 mol/L的NaOH溶液,超声时间为10‑20 min。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)中,加入茶树精油溶液后搅拌10‑15 min,加入TPP溶液后搅拌15‑25 min。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤4)中,所述低温超速离心的参数设置为
3‑5 ℃,14000‑16000 r/min,25‑35 min;冷冻干燥温度为‑20 ‑10 ℃。
~
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤7)中,洁净处理所用的材料为无尘纸,洁净处理所用溶剂为75%的乙醇。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤8)中,贮存袋抽真空后的真空度为‑
0.15‑0 MPa。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤8)中,所述真空封口机包括底座(1)和与底座可翻转连接的上翻盖(2);
所述底座的顶面设有凸起的中控台(3)、储水槽(4)、下密封圈(5)和加热条(6);所述中控台集成有集成芯片(7)以及与集成芯片联接的抽真空机构、温度控制板(8)、温度显示屏(9)、电量显示屏(10)、真空度检测感应器(11)和操作按钮(12);所述集成芯片上集成有电池;所述储水槽可拆卸式安装于底座上位于中控台的外侧,储水槽的周侧设有下密封圈;所述抽真空机构的抽气口(13)设于下密封圈的内测边沿;所述加热条设于底座上位于储水槽的外侧,加热条与集成芯片联接;所述抽真空机构包括微型真空泵(18)以及与微型真空泵连接的抽气管(19)和排气管(20);所述排气管通向底座外部;所述抽气管与抽气口连通;
底座的边侧设有与集成芯片联接的充电口(14)和与温度控制板联接的调温旋钮(15);
所述上翻盖的内侧对应中控台的位置为镂空结构、对应下密封圈的位置设有与下密封圈配合的上密封圈(16)、对应加热条的位置设有耐热压条(17)。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,所述上翻盖的内侧和底座的顶面上分别设有相配合的卡扣(21)和卡槽(22);底座的两个边侧设有锁扣(23);底座的底部四角设有防滑橡胶垫(24);底座的底面设有散热口(25)。
10.如权利要求8所述的方法,其特征在于,所述调温旋钮设有四挡温度调节。
说明书 :
一种碳氮同位素检测用桑叶及桑枝的抗菌真空贮存方法
技术领域
背景技术
传说却不能令人信服。在这种情况下,我们需要建立一种稳定、有效的、科学的丝绸溯源的
方法,而同位素溯源技术目前被证实是非常有效的溯源技术。
子数不同的一系列原子。碳氮稳定同位素作为最常用的轻稳定同位素,可以通过同位素质
谱分析法测得。要进行同位素质谱分析法测试的样品需要进行一系列的前处理,从而制备
成符合测试条件的样品。而样品的保存好坏与否则会严重的影响轻稳定同位素含量及比例
测试的结果。在野外采集新鲜的桑叶桑枝样品后,考虑到自然界中各类微生物(需氧菌、厌
氧菌等)会以含碳氮元素的桑叶桑枝作为其生长繁殖所需的碳源氮源,而通常情况下,在采
集到新鲜桑枝桑叶样品后又很难马上进行测试,甚至需要放置很多天后才能集中处理,这
些新鲜桑枝桑叶很容易就会因会受微生物攻击等原因发生腐败变质,影响同位素数据的准
确性。因此在采集到这些样品后,急需当即对样品进行处理,防止微生物(需氧菌、厌氧菌
等)对其进行侵蚀,影响样品碳氮同位素的值使同位素溯源数据产生误差,并且减少碳氮同
位素的自然分馏,尽可能保留产地信息。因此进行碳氮稳定同位素检测之前,需要先解决样
品在处理之前的贮存问题。
发明内容
用,解决了对产地的桑叶及桑枝处理之前的贮存问题,可排除微生物对样品的影响,减少碳
氮元素的自然分馏,降低产地同位素信息的流失,进而可确保碳氮同位素检测的准确性。
40min,得到均一稳定的溶液。
拌1,得到白色乳状液,即茶树精油壳聚糖微胶囊悬液。
微胶囊。
微胶囊。
产生时,由于氧化钙具有出色的吸湿性,因此水分会被氧化钙迅速吸收。进一步的,氧化钙
在吸水后释放出热量,导致材料表面升温,促进其内部包裹的茶树精油壳聚糖微胶囊中茶
树精油的挥发,从而提高材料总体的杀菌效果(潮湿环境下容易滋生微生物,因此需要加强
杀菌效果),而当水分被吸收后,则氧化钙反应结束,不再放热,茶树精油不被加速释放,从
而起到长效杀菌的功能。
一些外源性的影响,例如虫蛀后的桑叶桑枝的同位素影响和病斑带来的桑叶桑枝自身的同
位素变化
状态下,样品的贮存时间会延长,并且内部的桑叶桑枝不易变质导致同位素的变化,影响之
后的碳氮稳定同位素的检测。
8‑12∶1
杂质,同时又具有良好的保水效果,而75%的乙醇溶液是医用消毒酒精,用它进行擦拭,能
够除去桑叶表面的部分微生物以及一些微小的灰尘。
空度检测感应器和操作按钮;所述集成芯片上集成有电池;所述储水槽可拆卸式安装于底
座上位于中控台的外侧,储水槽的周侧设有下密封圈;所述抽真空机构的抽气口设于下密
封圈的内测边沿;所述加热条设于底座上位于储水槽的外侧,加热条与集成芯片联接。
对于科研工作者在野外进行易腐败样品采集来说,使用极为不便利。因此需要一种携带方
便、适合户外使用、并且不需要特制封口袋的真空封口机。
用),合上上翻盖,上下密封圈接触。根据贮存袋的材质调节调温旋钮,点击操作按钮,开始
抽真空,抽真空完毕后进行加热条对调温旋钮进行加热封口。
压),在泵抽气口处与外界大气压产生压力差,在压力差的作用下,将气体压(吸)入泵腔,再
从排气口排出。
示屏和温度显示屏采用防水屏幕。
效,能够尽可能保留相关同位素信息。
分产生时,由于氧化钙具有出色的吸湿性,因此水分会被氧化钙迅速吸收。进一步的,氧化
钙在吸水后释放出热量,导致材料表面升温,促进其内部包裹的茶树精油壳聚糖微胶囊中
茶树精油的挥发,从而提高材料总体的杀菌效果(潮湿环境下容易滋生微生物,因此需要加
强杀菌效果),而当水分被吸收后,则氧化钙反应结束,不再放热,茶树精油不被加速释放,
从而起到长效杀菌的功能。
部分的微生物,并且75%的酒精溶液易挥发,不会残留在样品的表面。
此外还设有电量显示屏,便于信息交互。设有4档温度可调,可满足不同材质的贮存袋的封
口要求,无需使用特质的封口袋,极大方便了户外采集工作者在收集样品时,可以针对不同
体积的样品,选取合适其体积的不同材质的封口袋。
附图说明
充电口14、调温旋钮15、上密封圈16、耐热压条17、微型真空泵18、抽气管19、排气管20、卡扣
21、卡槽22、锁扣23、防滑橡胶垫24、散热口25。
具体实施方式
到均一稳定的溶液。
白色乳状液,即茶树精油壳聚糖微胶囊悬液。
后保存,获得茶树精油壳聚糖微胶囊。
灰包裹的茶树精油壳聚糖微胶囊。
抗菌效果的材料。
处理。
到均一稳定的溶液。
色乳状液,即茶树精油壳聚糖微胶囊悬液。
保存,获得茶树精油壳聚糖微胶囊。
石灰包裹的茶树精油壳聚糖微胶囊。
抗菌效果的材料。
处理。
到均一稳定的溶液。
乳状液,即茶树精油壳聚糖微胶囊悬液。
保存,获得茶树精油壳聚糖微胶囊。
灰包裹的茶树精油壳聚糖微胶囊。
抗菌效果的材料。
度控制板8、温度显示屏9、电量显示屏10、真空度检测感应器11和操作按钮12。所述集成芯
片上集成有电池;所述储水槽可拆卸式安装于底座上位于中控台的外侧,储水槽的周侧设
有下密封圈;所述抽真空机构的抽气口13设于下密封圈的内测边沿;所述加热条设于底座
上位于储水槽的外侧,加热条与集成芯片联接。所述抽真空机构包括微型真空泵18以及与
微型真空泵连接的抽气管19和排气管20;所述排气管通向底座外部;所述抽气管与抽气口
连通。
防滑橡胶垫24,底座的底面还设有散热口25。
的内侧和底座的顶面上分别设有相配合的卡扣21和卡槽22。
上翻盖,上下密封圈接触。根据贮存袋的材质调节调温旋钮,点击操作按钮,开始抽真空,抽
真空完毕后进行加热条对调温旋钮进行加热封口。
均为现有技术中常用的部件及电路连接关系。
尺寸300mm*120mm*80mm,封接长度长达20em,电池的电压为12V,容量为5000mAh,尺寸大小
为95mm*60mm*18mm,稳定工作电流8A,最大工作电流10A,整体重量1.32kg。
2,对比例3,对比例4中所贮存的桑叶样品,自然条件下(江南,5月)室内放置7天后,均进行
与对比例1一样的烘干、研磨成粉末的操作后,随后与同样条件下放置同样天数的对比例1
样品的另一部分一起送去统一进行C、N稳定同位素的测试,每个样测试5次,最后取平均值。
其中对比例1的放置7天的样品所测数据我们以对比例5来表示。
实施例2 ‑29.731±0.314 4.218±1.197
对比例1 ‑29.734±0.371 4.213±1.211
对比例2 ‑29.115±0.697 3.186±3.201
对比例3 ‑28.672±0.812 2.735±4.113
对比例4 ‑27.706±0.923 2.528±3.897
对比例5 ‑29.732±0.382 4.217±1.205
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我们可以看到,实施例1,2和对比例5的δ C值和δ N值与对比例1相比误差在0.007‰之内,
而实施例1,2都采用真空贮存以及使用了抗菌材料,它们的区别在于使用的抗菌材料的浓
度不同,这说明本发明的效果显著,能够最大程度的保留样品产地的同位素信息。对比例2
是采用了真空贮存,但是没有用上抗菌材料,而对比例3用上了抗菌材料,但是采用自封袋
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进行保存,可以看到样品的δ C值在对比例2,3中趋于富集,对比例2与标准值的误差达到了
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0.6‰左右,对比例3与标准值的误差则达到了1‰左右。而δ N值在对比例2,3中不断贫化,
对比例2,3的误差分别达到了1.1‰和1.5‰。说明在保存过程中,样品的碳氮同位素发生了
显著的分馏效应,样品所携带的产地同位素信息已经有所流失。而对比例4,既没有采用真
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空贮存,也没有使用抗菌材料。对比例4样品的δ C值和δ N值与标准值相比,误差分别达到
了2‰和1.7‰,这在同位素分析中,属于巨大的误差,说明产地同位素信息流失较严重,对
于科研分析有着巨大的影响。
案的保护范围。