出芽盖奥酵母在低温环境下降解油脂中的应用及其培养方法

摘要

出芽盖奥酵母在低温环境下降解油脂中的应用及其培养方法，属于微生物去除含油废物技术领域，具体涉及出芽盖奥酵母的新应用及其培养方法。为了解决冬季低温气候中难以处理污水中油脂的问题。出芽盖奥酵母在低温环境下降解油脂中的应用。产酶优化培养方法：一、将出芽盖奥酵母接种到PDA液体培养基中活化，然后接种于培养基中培养；二、将菌液接种于产酶液体培养基中培养。出芽盖奥酵母的吸附优化培养方法：一、将出芽盖奥酵母接种到培养基中活化，然后接种于培养基中培养；二、将菌液接种于吸附培养基中，先扩繁，再在低温吸附。本发明的芽盖奥酵母菌剂成本低廉，生物安全性高，无公害。对于多种油类都表现出优异的降解效果。

权利要求

1.出芽盖奥酵母在低温环境下降解油脂中的应用；

所述出芽盖奥酵母（Guehomyces pullulans）的保藏编号为NBRC 0114；所述低温环境为5 15℃的温度环境；所述油脂包括菜籽油、大豆油、猪油、橄榄油、葵花籽油、芝麻油或玉~

米油。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于具体方法是将出芽盖奥酵母（Guehomyces 

4 5

pullulans）添加到待降解油脂中，使出芽盖奥酵母的活菌含量为5×10 5×10CFU/mL。

~

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述出芽盖奥酵母的产酶优化培养方法包括以下步骤：

一、将出芽盖奥酵母接种到PDA液体培养基中，于25 32℃培养15 35小时，转速为160‑~ ~

180rpm/min，得到活化菌液，然后将活化菌液按照1% 5%的接种量接种于PDA液体培养基中，~

于25 32℃培养3 8天，得到出芽盖奥酵母菌液；

~ ~

二、将步骤一得到的出芽盖奥酵母菌液按照2% 4%的接种量接种于产酶液体培养基中，~

于20 30℃培养48 72小时，转速为160‑180rpm/min，pH值为7.0 9.0。

~ ~ ~

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于步骤二所述产酶液体培养基包括：碳源5g/L、氮源10g/L、磷酸二氢钾2g/L、金属化合物0.5g/L、乳化液20mL/L、硫酸铵1g/L和蒸馏水。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述碳源为葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉、乳糖或麦芽糖。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述氮源为氯化铵、蛋白胨、牛肉浸粉、硫酸铵、硝酸铵或酵母浸粉。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述金属化合物为氯化钙、硫酸亚铁、硫酸镁或硫酸钙。

8.根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述乳化液为橄榄油乳化液、玉米油乳化液、大豆油乳化液、猪油乳化液、葵花籽油乳化液、芝麻油乳化液或菜籽油乳化液。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于所述乳化液的配置方法如下：将6g聚乙烯醇溶于300mL去离子水中，用微波炉帮助加热溶解，冷却后加入100mL油，使用高速组织捣碎机分三次搅打15min，至乳白色；所述油为橄榄油、玉米油、大豆油、猪油、葵花籽油、芝麻油或菜籽油。

10.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述出芽盖奥酵母的吸附优化培养方法包括以下步骤：

一、将出芽盖奥酵母接种到PDA液体培养基中，于25 32℃培养15 35小时，转速为~ ~

180rpm/min，得到活化菌液，然后将活化菌液按照1% 5%的接种量接种于PDA液体培养基中，~

于25 32℃培养3 8天，得到出芽盖奥酵母菌液；

~ ~

二、将步骤一得到的出芽盖奥酵母菌液按照10% 15%的接种量接种于吸附培养基中，装~

液量为在250mL锥形瓶中装液75 125mL，先在20 30℃、160‑180rpm/min条件下扩繁至少~ ~

24h，再在低温、80‑90rpm/min条件下吸附30 42小时；所述低温为5 15℃的温度环境；

~ ~

所述吸附培养基包括：硫酸铵5g/L、磷酸二氢钾2g/L、氯化钠5g/L、硫酸镁0.5g/L、油脂

15g/L和蒸馏水。

11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于所述吸附培养基中的油脂为橄榄油、玉米油、大豆油、猪油、葵花籽油、芝麻油或菜籽油。

说明书

出芽盖奥酵母在低温环境下降解油脂中的应用及其培养方法

技术领域

[0001] 本发明属于微生物去除含油废物技术领域，具体涉及出芽盖奥酵母的新应用及其培养方法。

背景技术

[0002] 随着社会的发展，油脂相关的化工厂及餐饮业在不断地增多，含油脂废水也就在不断产生，如果油脂污水未经妥善的处理就被排放到其他生活污水的处理系统中，使得生
活污水难以处理还会堵塞下水道，严重时会产生爆炸。如果任其肆意排放到大自然的水体
中，油脂会在水面形成一层油膜使得水体中的溶解氧减少，水体中的生物活性下降甚至死
亡，破坏了水体的生态环境，最终会对人类的健康产生影响。对于油脂污水的处理，最为关
键的就是油脂的去除。常采用的物理方法有隔油等，化学方法有吸附、电解除油等，然而这
些方法投资较大、工艺复杂，常常需要更换被油脂堵塞的处理管道，维护维修成本较高，而
且还会有二次污染的可能性。采用微生物处理污水不仅成本低、处理的彻底，减少二次污染
的可能性，而且操作工艺方便，已成为污水处理中最重要的一环。但微生物对环境因素有一
定的要求，其中温度是微生物污水处理的关键影响因素，尤其在冬季低温时寒冷地区含油
脂污水的微生物处理效果很差。然而我们国家疆土辽阔，有不少的城镇处在北纬40°以北的
地方，大部分地区有3个多月的时间会处在低温环境中，在北方某些地区甚至有着超过6个
月的低温，这些区域所排出的污水温度都很低，一般在15℃，这种情况下对于生物污水的处
理设备产生了巨大的挑战。所以如何在冬季等低温气候中使生物污水处理厂可以正常的工
作是亟需解决的问题。

[0003] 目前普遍采用的方法有：可以通过增加保温系统来提高污水温度、增加曝气等，但实际操作起来所需的费用巨大而且效果不是很好。低温环境所导致的水体温度较低这一难
题，可以把试图人工提高水体温度这一解决方向转移到生物法处理污水的关键性的一个因
素：微生物。虽然我们有不少时间要面临低温环境给人类生活带来的困扰，但是在低温环境
中已经应运而生可以在低温中生存的生物，它们在低温环境的长期自然选择和进化过程下
已经形成了一整套适冷策略，在低温环境中仍然拥有着正常的生理状态，其中的低温微生
物是数量最为巨大的一个群落，目前已经从极地、海洋、冰川、积雪和陆地土壤中被大量筛
选出来，物种资源丰富，还可以生产很多种有应用价值的低温酶，是低温酶类的生产宝库，
有研究表明低温微生物可以降解包括油脂在内的许多污染物，如有学者发现莫拉氏菌在低
温时仍具有较高的脂肪酶活力。对于可以分解利用油脂的菌株而言，油脂是微生物生长发
育所需碳源、能源的营养源。因此，筛选出去除油脂能力强、生长繁殖所需温度较低且维度
较为宽泛的低温微生物是解决生物污水处理厂所面临的冬季低温问题的关键切入点之一。

[0004] 油脂是降解油脂微生物的营养来源，微生物在分解利用油脂的同时使得油脂污水得到净化。微生物是通过释放脂肪酶使油脂、脂肪被分解成可以吸收利用的小分子物质，将
油脂最终转变成脂肪酸和细胞质等。脂肪酶在催化方面有着很大的潜能脂肪酶在有机溶剂
中也很稳定，有着很好的化学、区域选择性，可以在非水介质或交界面进行生物转化，无需
任何辅助因子催化有机碳酸盐水解。低温微生物产生的低温脂肪酶在低温下仍然有较高的
催化效率，低温脂肪酶对于在低温油脂污水的处理，还有食物冷加工等方面有着极其重要
的作用。

发明内容

[0005] 本发明为了解决冬季低温气候中难以处理污水中油脂的问题，提供一种促进低温环境下油脂降解的微生物菌剂，即出芽盖奥酵母，对于多种油类都表现出优异的降解效果。

[0006] 本发明提供出芽盖奥酵母(Guehomyces pullulans)在低温环境下降解油脂中的应用。

[0007] 进一步的，所述低温环境为≤15℃的温度环境。

[0008] 所述出芽盖奥酵母(Guehomyces pullulans)购买自日本国立技术与评价研究所生物研究中心NBRC，保藏编号为NBRC 0114。

[0009] 以上的应用，可以将出芽盖奥酵母(Guehomyces pullulans)添加到待降解油脂4 5
中，使出芽盖奥酵母的活菌含量为5×10～5×10CFU/mL。

[0010] 进一步的，所述油脂包括菜籽油、大豆油、猪油、橄榄油、葵花籽油、芝麻油、玉米油等，但不仅限于此。

[0011] 本发明进一步提供上述出芽盖奥酵母的产酶优化培养方法，包括以下步骤：

[0012] 一、将出芽盖奥酵母接种到PDA液体培养基中，于25～32℃培养15～35小时，转速为160‑180rpm/min，得到活化菌液，然后将活化菌液按照1％～5％的接种量接种于PDA液体
培养基中，于25～32℃培养3～8天，得到出芽盖奥酵母菌液；

[0013] 二、将步骤一得到的出芽盖奥酵母菌液按照2％～4％的接种量接种于产酶液体培养基中，于20～30℃培养48～72小时，转速为160‑180rpm/min，pH值为7.0～9.0。

[0014] 进一步的，步骤二所述产酶液体培养基包括：碳源5g/L、氮源10g/L、磷酸二氢钾2g/L、金属化合物0.5g/L、乳化液20mL/L、硫酸铵1g/L和蒸馏水。

[0015] 优选的，所述碳源为葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉、乳糖或麦芽糖。

[0016] 优选的，所述氮源为氯化铵、蛋白胨、牛肉浸粉、硫酸铵、硝酸铵或酵母浸粉。

[0017] 优选的，所述金属化合物为氯化钙、硫酸亚铁、硫酸镁或硫酸钙。

[0018] 优选的，所述乳化液为橄榄油乳化液、玉米油乳化液、大豆油乳化液、猪油乳化液、葵花籽油乳化液、芝麻油乳化液或菜籽油乳化液。

[0019] 进一步的，所述乳化液的配置方法如下：将6g聚乙烯醇溶于300mL去离子水中，用微波炉帮助加热溶解，冷却后加入100mL油，使用高速组织捣碎机分三次搅打15min，至乳白
色。所述油为橄榄油、玉米油、大豆油、猪油、葵花籽油、芝麻油或菜籽油。

[0020] 本发明还进一步提供上述出芽盖奥酵母的吸附优化培养方法，包括以下步骤：

[0021] 一、将出芽盖奥酵母接种到PDA液体培养基中，于25～32℃培养15～35小时，转速为180rpm/min，得到活化菌液，然后将活化菌液按照1％～5％的接种量接种于PDA液体培养
基中，于25～32℃培养3～8天，得到出芽盖奥酵母菌液；

[0022] 二、将步骤一得到的出芽盖奥酵母菌液按照10～15％的接种量接种于吸附培养基中，装液量为在250mL锥形瓶中装液75～125mL，先在20～30℃、160‑180rpm/min条件下扩繁
至少24h，再在低温、80‑90rpm/min条件下吸附30～42小时。所述低温为≤15℃的温度环境。

[0023] 进一步的，所述吸附培养基包括：硫酸铵5g/L、磷酸二氢钾2g/L、氯化钠5g/L、硫酸镁0.5g/L、油脂15g/L和蒸馏水。

[0024] 优选的，所述油脂为橄榄油、玉米油、大豆油、猪油、葵花籽油、芝麻油或菜籽油。

[0025] 本发明的有益效果：

[0026] 本发明首次将出芽盖奥酵母(Guehomyces pullulans)菌剂用于促进低温环境下油脂降解的应用，并且发现其在低温环境下有优异的油脂降解效果，在15℃下脂肪酶活为
108.9U/mL，高于目前已知的低温酵母类菌剂。经优化培养后，出芽盖奥酵母在15℃下脂肪
酶活为245.3U/mL，是优化前的2倍多。

[0027] 出芽盖奥酵母在实际应用的过程中会产生菌体‑油脂复合物，这种复合物即便在菌体死亡的情况下仍然能够进行对油脂的吸附作用，而且这种复合物通常是结成一块密度
较大的团装沉没于培养基底部，非常便于过滤去除。本发明提供的吸附条件优化的方法，旨
在更好的利用该菌剂自身的特性去降解油脂，通过提供在油脂中的接种方法和处理时间以
达到吸附油脂的最优效果。

[0028] 本发明的芽盖奥酵母菌剂成本低廉，生物安全性高，无公害。对于菜籽油、大豆油、猪油、橄榄油、葵花籽油、芝麻油、玉米油等多种油类都表现出优异的降解效果。

[0029] 本发明有利于在寒冷的北方地区对于含有油脂的污水进行处理，具有良好的应用前景。

附图说明

[0030] 图1位本发明所提供的出芽盖奥酵母(Guehomyces pullulans)菌剂菌落形态

[0031] 图2位出芽盖奥酵母(Guehomyces pullulans)菌剂油镜下形态，放大倍数1000×。

具体实施方式

[0032] 本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

[0033] 具体实施方式一：本实施方式出芽盖奥酵母(Guehomyces pullulans)在低温环境下降解油脂中的应用。

[0034] 所述出芽盖奥酵母(Guehomyces pullulans)购买自日本国立技术与评价研究所生物研究中心NBRC，保藏编号为NBRC 0114。

[0035] 具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：所述低温环境为≤15℃的温度环境。其它与具体实施方式一相同。

[0036] 具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一不同的是：具体应用方法为：将出芽盖奥酵母(Guehomyces pullulans)添加到待降解油脂中，使出芽盖奥酵母的活菌含量为
4 5
5×10～5×10CFU/mL。其它与具体实施方式一相同。

[0037] 具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一不同的是：所述油脂包括菜籽油、大豆油、猪油、橄榄油、葵花籽油、芝麻油、玉米油等，但不仅限于此。其它与具体实施方式一
相同。

[0038] 具体实施方式五：本实施方式出芽盖奥酵母的产酶优化培养方法，包括以下步骤：

[0039] 一、将出芽盖奥酵母接种到PDA液体培养基中，于25～32℃培养15～35小时，转速为160‑180rpm/min，得到活化菌液，然后将活化菌液按照1％～5％的接种量接种于PDA液体
培养基中，于25～32℃培养3～8天，得到出芽盖奥酵母菌液；

[0040] 二、将步骤一得到的出芽盖奥酵母菌液按照2％～4％的接种量接种于产酶液体培养基中，于20～30℃培养48～72小时，转速为160‑180rpm/min，pH值为7.0～9.0。

[0041] 具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式五不同的是：步骤二所述产酶液体培养基包括：碳源5g/L、氮源10g/L、磷酸二氢钾2g/L、金属化合物0.5g/L、乳化液20mL/L、硫
酸铵1g/L和蒸馏水。其它与具体实施方式五相同。

[0042] 具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式六不同的是：所述碳源为葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉、乳糖或麦芽糖。其它与具体实施方式六相同。

[0043] 具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式六不同的是：所述氮源为氯化铵、蛋白胨、牛肉浸粉、硫酸铵、硝酸铵或酵母浸粉。其它与具体实施方式六相同。

[0044] 具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式六不同的是：所述金属化合物为氯化钙、硫酸亚铁、硫酸镁或硫酸钙。其它与具体实施方式六相同。

[0045] 具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式六不同的是：所述乳化液为橄榄油乳化液、玉米油乳化液、大豆油乳化液、猪油乳化液、葵花籽油乳化液、芝麻油乳化液或菜籽
油乳化液。其它与具体实施方式六相同。

[0046] 本实施方式中乳化液作为出芽盖奥酵母(Guehomyces pullulans)的产酶诱导剂。

[0047] 具体实施方式十一：本实施方式与具体实施方式六或十不同的是：所述乳化液的配置方法如下：将6g聚乙烯醇溶于300mL去离子水中，用微波炉帮助加热溶解，冷却后加入
100mL油，使用高速组织捣碎机分三次搅打15min，至乳白色。所述油为橄榄油、玉米油、大豆
油、猪油、葵花籽油、芝麻油或菜籽油。其它与具体实施方式六或十相同。

[0048] 具体实施方式十二：本实施方式出芽盖奥酵母的吸附优化培养方法，包括以下步骤：

[0049] 一、将出芽盖奥酵母接种到PDA液体培养基中，于25～32℃培养15～35小时，转速为180rpm/min，得到活化菌液，然后将活化菌液按照1％～5％的接种量接种于PDA液体培养
基中，于25～32℃培养3～8天，得到出芽盖奥酵母菌液；

[0050] 二、将步骤一得到的出芽盖奥酵母菌液按照10～15％的接种量接种于吸附培养基中，装液量为在250mL锥形瓶中装液75～125mL，先在20～30℃、160‑180rpm/min条件下扩繁
至少24h，再在低温、80‑90rpm/min条件下吸附30～42小时。所述低温为≤15℃的温度环境。

[0051] 具体实施方式十三：本实施方式与具体实施方式十二不同的是：所述吸附培养基包括：硫酸铵5g/L、磷酸二氢钾2g/L、氯化钠5g/L、硫酸镁0.5g/L、油脂15g/L和蒸馏水。其它
与具体实施方式十二相同。

[0052] 具体实施方式十四：本实施方式与具体实施方式十三不同的是：所述油脂为橄榄油、玉米油、大豆油、猪油、葵花籽油、芝麻油或菜籽油。其它与具体实施方式十三相同。

[0053] 下面对本发明的实施例做详细说明，以下实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方案和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实
施例。

[0054] 实施例1：出芽盖奥酵母及其产酶优化培养后的油脂降解能力

[0055] (1)将出芽盖奥酵母接种到PDA液体培养基中，于25℃培养24小时，转速为180rpm/min，得到活化菌液，然后将活化菌液按照3％的接种量接种于新的大瓶PDA液体培养基中25
4
～32℃培养3天，得到出芽盖奥酵母菌液。该出芽盖奥酵母菌液中活菌含量为5×10～5×
5
10CFU/mL。

[0056] (2)将步骤一得到的出芽盖奥酵母菌液按照3％的接种量接种于产酶液体培养基中，装液量为在250mL锥形瓶中装液50mL，于25℃培养60小时，转速为180rpm/min，pH值为
8.0。

[0057] 所述产酶液体培养基配方为：可溶性淀粉5g/L、牛肉浸粉10g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸钙0.5g/L、大豆油乳化液20mL/L和硫酸铵1g/L。

[0058] 所述大豆油乳化液的制备方法为：将6g聚乙烯醇溶于300mL去离子水中，用微波炉帮助加热溶解，冷却后加入100mL大豆油，使用高速组织捣碎机分三次搅打15min，至乳白
色。

[0059] (3)利用p‑NPP(对硝基苯酚棕榈酸酯)比色法测定脂肪酶活，分别将步骤(1)和步骤(2)得到的发酵液于4℃，8000r/min离心2min，离心后所得上清液即为粗酶液，以通用的
滴定法进行酶活力测定。

[0060] 结果：

[0061] 通过滴定法测定计算出，步骤(1)中得到的出芽盖奥酵母菌液在15℃下脂肪酶活为108.9U/mL，在本实施例步骤(2)的产酶条件优化后，在15℃下脂肪酶活为245.3U/mL，是
优化前的2倍多。

[0062] 本实施例中步骤(1)是在PDA液体培养基中进行出芽盖奥酵母的复苏，而步骤(2)是促进该菌剂大量产脂肪酶。步骤(2)所用产酶液体培养基是通过对碳源、氮源、金属化合
物、诱导剂(各种油类的乳化液)以及对于产酶发酵的时间、温度、pH值、装液量、接种量等多
种因素进行调整，各个条件之间密切联系，共同作用，而使出芽盖奥酵母产脂肪酶的活性升
高。

[0063] 实施例2：出芽盖奥酵母在5℃下对于各类油脂的降解效果

[0064] (1)将出芽盖奥酵母接种到PDA液体培养基中，于25℃培养24小时，转速为180rpm/min，得到活化菌液，然后将活化菌液按照3％的接种量接种于新的大瓶PDA液体培养基中25
4
～32℃培养3天，得到出芽盖奥酵母菌液。该出芽盖奥酵母菌液的活菌含量为5×10～5×
5
10CFU/mL。

[0065] (2)将步骤一得到的出芽盖奥酵母菌液按照12％的接种量接种于吸附培养基中，装液量为在250mL锥形瓶中装液100mL，先以180rpm/min的转速在25℃扩繁24h；再在5℃下，
90rpm/min吸附36h。

[0066] 所述吸附培养基为含油的无机盐培养基，组成为：硫酸铵5g/L、磷酸二氢钾2g/L、氯化钠5g/L、硫酸镁0.5g/L以及油脂15g/L。

[0067] 所述油脂为橄榄油、玉米油、大豆油、猪油、葵花籽油、芝麻油或菜籽油。

[0068] (3)吸附完成后，将形成的菌体‑油脂复合物通过抽滤从培养基中分离出去。将剩下的培养液用10mL石油醚萃取两次，收集两次得到的上层有机层，将其放在水浴锅中加热
蒸发10min，然后再置于65℃烘箱中烘干后在干燥器中冷却后称重。除油率的计算公式如
下：

[0069]

[0070] 实施例3：出芽盖奥酵母在10℃下对于各类油脂的降解效果

[0071] (1)将出芽盖奥酵母接种到PDA液体培养基中，于2℃培养24小时，转速为180rpm/min，得到活化菌液，然后将活化菌液按照3％的接种量接种于新的大瓶PDA液体培养基中25
4
～32℃培养3天，得到出芽盖奥酵母菌液；该出芽盖奥酵母菌液的活菌含量为5×10～5×
5
10CFU/mL。

[0072] (2)将步骤一得到的出芽盖奥酵母菌液按照12％的接种量接种于吸附培养基中，装液量为在250mL锥形瓶中装液100mL，先以180rpm/min的转速在25℃扩繁24h，再在10℃
下，90rpm/min吸附36h。

[0073] 所述吸附培养基为含油的无机盐培养基，组成为：硫酸铵5g/L、磷酸二氢钾2g/L、氯化钠5g/L、硫酸镁0.5g/L以及油脂15g/L。

[0074] 所述油脂为橄榄油、玉米油、大豆油、猪油、葵花籽油、芝麻油或菜籽油。

[0075] (3)吸附完成后，将形成的菌体‑油脂复合物通过抽滤从培养基中分离出去。将剩下的培养液用10mL石油醚萃取两次，收集两次得到的上层有机层，将其放在水浴锅中加热
蒸发10min，然后再置于65℃烘箱中烘干后在干燥器中冷却后称重。除油率的计算公式如
下：

[0076]

[0077] 实施例4：出芽盖奥酵母在5℃下对于各类油脂的降解效果

[0078] (1)将出芽盖奥酵母接种到PDA液体培养基中，于2℃培养24小时，转速为180rpm/min，得到活化菌液，然后将活化菌液按照3％的接种量接种于新的大瓶PDA液体培养基中25
4
～32℃培养3天，得到出芽盖奥酵母菌液；该出芽盖奥酵母菌液的活菌含量为5×10～5×
5
10CFU/mL。

[0079] (2)将步骤一得到的出芽盖奥酵母菌液按照12％的接种量接种于吸附培养基中，装液量为在250mL锥形瓶中装液100mL，先以180rpm/min的转速在25℃扩繁24h，再在15℃
下，90rpm/min吸附36h。

[0080] 所述吸附培养基为含油的无机盐培养基：硫酸铵5g/L、磷酸二氢钾2g/L、氯化钠5g/L、硫酸镁0.5g/L以及油脂15g/L。

[0081] 所述油脂可以等量的替换为橄榄油、玉米油、大豆油、猪油、葵花籽油、芝麻油或菜籽油。

[0082] (3)吸附完成后，将形成的菌体‑油脂复合物通过抽滤从培养基中分离出去。将剩下的培养液用10mL石油醚萃取两次，收集两次得到的上层有机层，将其放在水浴锅中加热
蒸发10min，然后再置于65℃烘箱中烘干后在干燥器中冷却后称重。除油率的计算公式如
下：

[0083]

[0084] 结果：

[0085] 以上实施例2‑4中获得的除油率结果如下表所示：

[0086] 表1实施例2‑4中出芽盖奥酵母的除油率

[0087]

[0088] 本发明所提供的出芽盖奥酵母对于大豆油的除油降解效果最好，在5℃、10℃、15℃中除油率可高达90.0％、92.3％和95.0％；出芽盖奥酵母对于其他组别的油分也有优异
的降解效果，在5℃的低温环境下除油率均可达到80％以上。

[0089] 出芽盖奥酵母在实际应用的过程中会产生菌体‑油脂复合物，这种复合物即便在菌体死亡的情况下仍然能够进行对油脂的吸附作用，而且这种复合物通常是结成一块密度
较大的团装沉没于培养基底部，非常便于过滤去除；本发明提供的吸附条件优化的方法，旨
在更好的利用该菌剂自身的特性去降解油脂，这种吸附条件优化方法是通过提供在油脂中
具体的接种方法和处理时间以达到吸附的最优效果。

[0090] 综合上述数据，本发明的出芽盖奥酵母对于在低温环境下的油脂降解具有优异的性能，适用于在冬季寒冷的北方地区对于含有餐饮、厨余垃圾的污水进行油脂降解，同样也
适用于在低温环境下对含油的工业废水进行油脂降解，废水处理中常常会提高废水的温度
来增进油脂去除效率，而应用本发明提供的菌剂则可直接进行处理，降低了废水的处理成
本，对于环境也更加友好，不会造成资源的浪费，且即便在菌剂中的活菌死亡后，其产生的
脂肪酶及菌体‑油脂复合物对于油脂仍然有降解和吸附作用，因此本发明所提供的菌剂还
具有长效降解油脂的优良特性。