一类稠和氰基吡啶类化合物、制备方法和用途转让专利
申请号 : CN202011126559.0
文献号 : CN112142735B
文献日 : 2021-09-17
发明人 : 万惠新 , 查传涛 , 马金贵 , 潘建峰
申请人 : 上海凌达生物医药有限公司 , 上海凌济生物科技有限公司
摘要 :
权利要求 :
1.一种如通式I‑1或I‑2所示的稠和氰基吡啶类化合物,或其药学上可接受的盐,式中:
R1独立地选自氢、卤素;
R2、R3独立地为氢;
R4为 其中,p为1或2;
R5独立地选自氢、卤素,m独立地选自0‑6的整数;
M为O;Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、Rg、Rh分别独立地选自氢、C1‑C6烷基;其中,C1‑C6烷基上一个或多个氢原子可以被选自下组的取代基取代:氘、氰基;
Ar独立地选自取代或未取代的苯基和吡啶基,或者取代或未取代的萘基、萘啶基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基;所述取代是指被选自下组的一个或多个取代基取代:卤素、C1‑C4的烷基、羟基、氨基、氰基、C1‑C4烷氧基、C1‑C4卤代烷基、C1‑C4卤代烷氧基。
2.如权利要求1所述的化合物,或其药学上可接受的盐,其特征在于,m为0、1或2。
3.如权利要求1所述的化合物,或其药学上可接受的盐,其特征在于,p为1。
4.如权利要求1所述的化合物,或其药学上可接受的盐,其特征在于,Ar独立地选自取代或未取代的苯基,或者取代或未取代的萘基、吲唑基、苯并噻唑基;所述的一个或多个取代基选自下组:氢、卤素、C1‑C4的烷基、羟基、氨基。
5.如权利要求1所述的化合物,或其药学上可接受的盐,其特征在于,Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、Rg、Rh分别独立地选自:氢、甲基、氰基亚甲基。
6.如权利要求1所述的化合物,或其药学上可接受的盐,其特征在于,Ar独立地选自其中Rp选自:卤素、C1‑C4的烷基、羟基、氨基,q为1、2、3、4。
7.如权利要求1所述的化合物,或其药学上可接受的盐,其特征在于,R1独立地选自氢、氟;R2、R3独立地为氢。
8.如权利要求1所述的化合物,或其药学上可接受的盐,其特征在于,R1选自氢、氟;
R2、R3独立地为氢;
Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、Rg、Rh分别独立地选自氢、甲基、氰基亚甲基;
M为O;
R4为 其中,p为1;
R5独立地选自氢、卤素;
m选自0、1或2;
Ar独立地选自取代或未取代的苯基,或者取代或未取代的萘基、吲唑基、苯并噻唑基;
所述的一个或多个取代基选自下组:氢、卤素、C1‑C4的烷基、羟基、氨基。
9.如权利要求1‑8中任一项所述的化合物,或其药学上可接受的盐,其特征在于,所述化合物具有如下结构:
10.如权利要求1‑9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐的用途,其特征在于,用于制备治疗与Ras蛋白突变相关的疾病的药物。
11.如权利要求10所述的用途,其特征在于,所述药物为肿瘤的治疗药物。
12.如权利要求11所述的用途,其特征在于,所述肿瘤独立地选自肺癌、胰腺癌、肝癌、结直肠癌、胆管癌、脑癌、白血病、淋巴癌、黑色素瘤、甲状腺癌、鼻咽癌。
13.一种药物组合物,其特征在于,所述的药物组合物包括:(i)有效量的如权利要求1‑9中任一项所述的化合物,或其药学上可接受的盐;和(ii)药学上可接受的载体。
说明书 :
一类稠和氰基吡啶类化合物、制备方法和用途
技术领域
背景技术
常见,约占85%。先前研究表明,K‑Ras突变之所以能致癌,是因为第12号密码子发生了错义
突变,改变了K‑Ras蛋白质的结构并使其一直处于激活状态。Ras在信号通路传递中的作用
主要是活化控制基因转录的激酶,从而调节细胞分化和增生,与肿瘤细胞的生存、增殖、迁
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移、转移和血管生成密切相关。据统计,有11%‑16%的肺腺癌病例中存在K‑Ras 突变,胰
腺癌、结直肠癌、卵巢癌、胆管癌里也有一部分是‑Rras突变导致。然而,距离首次发现K‑Ras
致癌基因已过去三十余年,EGFR、BCL等常见原癌基因的靶向药物已历经数代,针对K‑Ras的
靶向药却始终未能成功研发出来。一直以来,针对K‑Ras通路突变型肿瘤的靶向药物主要集
中在法尼基转移酶抑制剂和Raf‑MEK通路抑制剂上,但是收效甚微。近年来,针对K‑Ras特定
基因突变的抑制剂研发成为热点,部分抑制剂逐渐由临床前孵化走向临床研究,如K‑
G12C
Ras 抑制剂AMG510,MRTX1257等,并且在早期临床实验中显示了一定的疗效。全球首款
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Kras 抑制剂AMG 510的第一项临床数据终于在2019年6月举行的美国临床肿瘤学会正式
公布,在这项临床研究中,安进药物AMG 510显示出能够阻止大多数具有K‑Ras突变的非小
细胞肺癌和结直肠癌患者的肿瘤生长。因此,发现和寻找特异性高、成药性优异的针对K‑
Ras特定突变基因的靶向药物成为工业界一大热点。
发明内容
多晶型物或前药,
基‑SO‑、N(R2a)(R2b)‑(CH2)x‑;其中,R2a和R2b各自独立地选自氢或C1‑C6烷基,x选自0‑5(即0、
1、2、3、4或5)中的任一整数;
Rg与R6形成3‑8元的饱和或部分不饱和环系;
基、C1‑C6卤代烷氧基、C2‑C6烯基、C2‑C6炔基、取代或未取代的氨基、酰胺基、磺酰胺基等;
杂环烷基、C1‑C8烷氧基、C1‑C8烷氨基、烯基、炔基、酰基或磺酰基、脲或磺酰脲、5~8元芳基
或杂芳基;其中,所述的杂芳基包含1‑3个选自下组的杂原子:N、O、P或S,所述的杂环烷基包
含1‑3个选自下组的杂原子:N、O、P或S,所述的环系包含螺环、桥环、稠环、并环等饱和或部
分不饱和的环系。
可以被选自下组的取代基取代:氘、卤素、羟基、氨基或环氨基、氰基、硝基、砜基或亚砜基、
C1‑C8烷基、3‑8元环烷基或杂环烷基、C1‑C8烷氧基、C1‑C8烷氨基、烯基、炔基、酰基或磺酰
基、脲或磺酰脲、5~8元芳基或杂芳基。
亚砜基、C1‑C8烷基、3‑8元环烷基或杂环烷基、C1‑C8烷氧基、C1‑C8烷氨基、烯基、炔基、酰基
或磺酰基、脲或磺酰脲、5~8元芳基或杂芳基;
C6烷基、3‑8元环烷基或杂环烷基。
基或环氨基、氰基、硝基、砜基或亚砜基、C1‑C8烷基、3‑8元环烷基或杂环烷基、C1‑C8烷氧
基、C1‑C8烷氨基、烯基、炔基、酰基或磺酰基、脲或磺酰脲、5~8元芳基或杂芳基。
取代基取代:氢、卤素、C1‑C4的烷基、羟基、氨基、氰基、C1‑C4烷氧基、C1‑C4卤代烷基、C1‑C4
卤代烷氧基。
烷氧基,q为1、2、3、4或5。
氨基、5‑6元杂环烷基取代的烷基,其中,所述的烷氧基、烷基、杂环烷基中的一个或多个氢原
子可以被选自下组的取代基取代:氘、卤素、C1‑C8烷基;更优选地为CH3OCH2‑、CH3CH2OCH2‑、
CH3NHCH2‑、CH3CH2NHCH2‑、(CH3)2NCH2‑、(CH3CH2)2NCH2‑、
其中,p为1或2。
代基优选自下组:氢、卤素、C1‑C4的烷基、羟基、氨基、氰基、C1‑C4烷氧基、C1‑C4卤代烷基、
C1‑C4卤代烷氧基等。
砜,四氢呋喃、甲苯、二氯甲烷、1,2‑二氯乙烷、乙腈、N,N‑二甲基甲酰胺、N,N‑二甲基乙酰
胺、二氧六环,或其组合物。
酸钯、[1,1'‑双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、双(三邻苯甲基膦)二氯化钯、1,2‑二(二苯
基膦基)乙烷二氯化钯,或其组合物;所述催化剂配体选自下组:三叔丁基膦、四氟硼酸三叔
丁基膦、三正丁基膦、三苯基膦、三对苯甲基膦、三环己基膦、三邻苯甲基膦,或其组合物。
氮苯并三氮唑HOAt、1‑羟基苯并三唑HOBt、苯并三氮唑‑1‑基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟
磷酸盐BOP、六氟磷酸苯并三唑‑1‑基‑氧基三吡咯烷基磷PyBOP、2‑(7‑氮杂苯并三氮唑)‑N,
N,N',N'‑四甲基脲六氟磷酸酯HATU、O‑苯并三氮唑‑N,N,N',N'‑四甲基脲四氟硼酸TBTU等,
或其组合物。
碱选自下组:吡啶,三乙胺,N,N‑二异丙基乙胺、1,8‑二氮杂二环[5.4.0]十一碳‑7‑烯
(DBU)、六甲基二硅基锂、六甲基二硅基钠、二甲基吡啶,或其组合物。
异构体、溶剂化物、多晶型物或前药和(ii)药学上可接受的载体。
制剂(如Ceritinib、奥卡替尼)、PI3K抑制剂(如Idelalisib、Duvelisib等)、BTK抑制剂(如
Ibrutinib)、EGFR抑制剂(如Afatinib、Gefitinib等)或其组合。
构体、互变异构体、溶剂化物、多晶型物或前药进行混合,从而形成药物组合物。
变蛋白活性或表达量相关的疾病的药物,特别是肿瘤的治疗药物。所述的肿瘤独立地选自
非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、皮肤癌、胃癌、肠癌、
胆管癌、脑癌、白血病、淋巴癌、纤维瘤、肉瘤、基底细胞癌、胶质瘤、肾癌、黑色素瘤、骨癌、甲
状腺癌、鼻咽癌、胰腺癌等。
是能高效地杀死K‑Ras 突变蛋白信号通路异常相关的肿瘤,是一类全新作用机制的治疗
药物。
此不再一一累述。
具体实施方式
现其具有较好的抑制K‑Ras 蛋白抑制活性,且所述的化合物在极低浓度(可低至小于
G12C G12C
100nM)下,即对K‑Ras 蛋白产生特异性抑制作用,并且对K‑Ras 相关的细胞增殖抑制活
G12C
性相当优异,且所述的化合物在极低浓度(可低至小于10nM)下,即对K‑Ras 阳性的肿瘤
G12C
细胞具有较强的杀伤作用,因而可以用于治疗与K‑Ras 突变或表达量异常引起的相关疾
病如肿瘤。基于上述发现,发明人完成了本发明。
通过引用方式整体并入本文。
另有清楚的说明,否则在本说明书和权利要求书中所用的单数形式包括所指事物的复数形
式。还应注意,除非另有说明,否则所用“或”、“或者”表示“和/或”。此外,所用术语“包括”以
及其它形式,例如“包含”、“含”和“含有”并非限制性。
除非另有说明,否则采用本领域技术范围内的常规方法,如质谱、NMR、IR和UV/VIS光谱法和
药理学方法。除非提出具体定义,否则本文在分析化学、有机合成化学以及药物和药物化学
的有关描述中采用的术语是本领域已知的。可在化学合成、化学分析、药物制备、制剂和递
送,以及对患者的治疗中使用标准技术。例如,可利用厂商对试剂盒的使用说明,或者按照
本领域公知的方式或本发明的说明来实施反应和进行纯化。通常可根据本说明书中引用和
讨论的多个概要性和较具体的文献中的描述,按照本领域熟知的常规方法实施上述技术和
方法。在本说明书中,可由本领域技术人员选择基团及其取代基以提供稳定的结构部分和
化合物。
册和论文,均通过引用方式整体并入本文。
原子总数不包括可能存在于所述基团的取代基中的碳。
“氰基”是指‑CN;“氨基”是指‑NH2;“取代的氨基”是指被一个或两个如下文所定义的烷基、
烷基羰基、芳烷基、杂芳烷基取代的氨基,例如,单烷基氨基(如CH3‑NH‑、CH3CH2‑NH‑、
CH3CH2CH2‑NH‑)、二烷基氨基(如(CH3)2‑N‑、(CH3CH2)2‑N‑、(CH3CH2CH2)2‑N‑)、烷基酰氨基、芳
烷基氨基、杂芳烷基氨基;“羧基”是指‑COOH。
至8个,更优选为1至6个)碳原子且通过单键与分子的其余部分连接的直链或支链的烃链基
团。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、
正戊基、2‑甲基丁基、2,2‑二甲基丙基、正己基、庚基、2‑甲基己基、3‑甲基己基、辛基、壬基
和癸基等。
且通过单键与分子的其余部分连接的直链或支链的烃链基团,例如但不限于乙烯基、丙烯
基、烯丙基、丁‑1‑烯基、丁‑2‑烯基、戊‑1‑烯基、戊‑1,4‑二烯基等。
个,更优选为2至6个)碳原子且通过单键与分子的其余部分连接的直链或支链的烃链基团,
例如但不限于乙炔基、丙‑1‑炔基、丁‑1‑炔基、戊‑1‑烯‑4‑炔基等。
系,具有3至15个碳原子,优选具有3至10个碳原子,更优选具有3至8个碳原子,且其为饱和
或不饱和并可经由任何适宜的碳原子通过单键与分子的其余部分连接。除非本说明书中另
外特别指明,环烷基中的碳原子可以任选地被氧化。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环
丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、1H‑茚基、2,3‑二
氢化茚基、1,2,3,4‑四氢‑萘基、5,6,7,8‑四氢‑萘基、8,9‑二氢‑7H‑苯并环庚烯‑6‑基、6,7,
8,9‑四氢‑5H‑苯并环庚烯基、5,6,7,8,9,10‑六氢‑苯并环辛烯基、芴基、二环[2.2.1]庚基、
7,7‑二甲基‑二环[2.2.1]庚基、二环[2.2.1]庚烯基、二环[2.2.2]辛基、二环[3.1.1]庚基、
二环[3.2.1]辛基、二环[2.2.2]辛烯基、二环[3.2.1]辛烯基、金刚烷基、八氢‑4,7‑亚甲基‑
1H‑茚基和八氢‑2,5‑亚甲基‑并环戊二烯基等。
非本说明书中另外特别指明,否则杂环基可以为单环、双环、三环或更多环的环体系,其可
包括稠合环体系、桥环体系或螺环体系;其杂环基中的氮、碳或硫原子可任选地被氧化;氮
原子可任选地被季铵化;且杂环基可为部分或完全饱和。杂环基可以经由碳原子或者杂原
子并通过单键与分子其余部分连接。在包含稠环的杂环基中,一个或多个环可以是下文所
定义的芳基或杂芳基,条件是与分子其余部分的连接点为非芳香族环原子。就本发明的目
的而言,杂环基优选为包含1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的稳定的4元至11元非芳香性单
环、双环、桥环或螺环基团,更优选为包含1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的稳定的4元至8
元非芳香性单环、双环、桥环或螺环基团。杂环基的实例包括但不限于:吡咯烷基、吗啉基、
哌嗪基、高哌嗪基、哌啶基、硫代吗啉基、2,7‑二氮杂‑螺[3.5]壬烷‑7‑基、2‑氧杂‑6‑氮杂‑
螺[3.3]庚烷‑6‑基、2,5‑二氮杂‑双环[2.2.1]庚烷‑2‑基、氮杂环丁烷基、吡喃基、四氢吡喃
基、噻喃基、四氢呋喃基、噁嗪基、二氧环戊基、四氢异喹啉基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、咪
唑烷基、喹嗪基、噻唑烷基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、二氢吲哚基、八氢吲哚基、八氢异吲哚
基、吡咯烷基、吡唑烷基、邻苯二甲酰亚氨基等。
环、双环、三环或更多环的环体系,还可以与上文所定义的环烷基或杂环基稠合,条件是芳
基经由芳香环上的原子通过单键与分子的其余部分连接。芳基的实例包括但不限于苯基、
萘基、蒽基、菲基、芴基、2,3‑二氢‑1H‑异吲哚基、2‑苯并噁唑啉酮、2H‑1,4‑苯并噁嗪‑3
(4H)‑酮‑7‑基等。
系基团。除非本说明书中另外特别指明,否则杂芳基可为单环、双环、三环或更多环的环体
系,还可以与上文所定义的环烷基或杂环基稠合,条件是杂芳基经由芳香环上的原子通过
单键与分子的其余部分连接。杂芳基中的氮、碳或硫原子可任选地被氧化;氮原子可任选地
被季铵化。就本发明的目的而言,杂芳基优选为包含1至5个选自氮、氧和硫的杂原子的稳定
的5元至12元芳香性基团,更优选为包含1至4个选自氮、氧和硫的杂原子的稳定的5元至10
元芳香性基团或者包含1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的5元至6元芳香性基团。杂芳基的
实例包括但不限于噻吩基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、噁二唑基、异噁唑基、吡啶基、
嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、吲哚基、呋喃基、吡咯基、三唑基、四唑
基、三嗪基、吲嗪基、异吲哚基、吲唑基、异吲唑基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、二氮萘基、萘
啶基、喹噁啉基、蝶啶基、咔唑基、咔啉基、菲啶基、菲咯啉基、吖啶基、吩嗪基、异噻唑基、苯
并噻唑基、苯并噻吩基、噁三唑基、噌啉基、喹唑啉基、苯硫基、中氮茚基、邻二氮杂菲基、异
噁唑基、吩噁嗪基、吩噻嗪基、4,5,6,7‑四氢苯并[b]噻吩基、萘并吡啶基、[1,2,4]三唑并
[4,3‑b]哒嗪、[1,2,4]三唑并[4,3‑a]吡嗪、[1,2,4]三唑并[4,3‑c]嘧啶、[1,2,4]三唑并
[4,3‑a]吡啶、咪唑并[1,2‑a]吡啶、咪唑并[1,2‑b]哒嗪、咪唑并[1,2‑a]吡嗪等。
表示芳基被取代或未被取代,且该描述同时包括被取代的芳基与未被取代的芳基。
个基团取代:氘、卤素、羟基、氨基或环氨基、氰基、硝基、砜基或亚砜基、C1‑C8烷基、3‑8元环
烷基或杂环烷基、C1‑C8烷氧基、C1‑C8烷氨基、烯基、炔基、酰基或磺酰基、脲或磺酰脲、5~8
元芳基或杂芳基,优选地选自:氘、卤素、C1‑C8烷基、3‑8元环烷基或杂环烷基。
化物、多晶型物或前药。
5‑6元杂环烷基取代的烷基,其中,所述的烷氧基、烷基、杂环烷基中的一个或多个氢原子可
以被选自下组的取代基取代:氘、卤素、C1‑C8烷基;更优选地为CH3OCH2‑、CH3CH2OCH2‑、
CH3NHCH2‑、CH3CH2NHCH2‑、(CH3)2NCH2‑、(CH3CH2)2NCH2‑、
其中,p为1或2。
氢原子可以被选自下组的取代基取代:氘、卤素、羟基、氨基或环氨基、氰基、硝基、砜基或亚
砜基、C1‑C8烷基、3‑8元环烷基或杂环烷基、C1‑C8烷氧基、C1‑C8烷氨基、烯基、炔基、酰基或
磺酰基、脲或磺酰脲、5~8元芳基或杂芳基。
亚砜基、C1‑C8烷基、3‑8元环烷基或杂环烷基、C1‑C8烷氧基、C1‑C8烷氨基、烯基、炔基、酰基
或磺酰基、脲或磺酰脲、5~8元芳基或杂芳基;优选地,环C为取代或未取代的3‑8元的环烷
基或杂环烷基,所述的取代基选自氘、卤素、羟基、氨基、氰基、酰胺基、磺酰胺基、单烷基氨
基、二烷基氨基、烷氧基、C1‑C6烷基、3‑8元环烷基或杂环烷基,
氨基或环氨基、氰基、硝基、砜基或亚砜基、C1‑C8烷基、3‑8元环烷基或杂环烷基、C1‑C8烷氧
基、C1‑C8烷氨基、烯基、炔基、酰基或磺酰基、脲或磺酰脲、5~8元芳基或杂芳基。
多个取代基取代:氢、卤素、C1‑C4的烷基、羟基、氨基、氰基、C1‑C4烷氧基、C1‑C4卤代烷基、
C1‑C4卤代烷氧基,更优选地,Ar独立地选自
其中Rp选自:卤素、C1‑C4的烷基、羟基、氨基、氰基、C1‑C4烷氧基、C1‑C4卤代烷基、C1‑C4卤
代烷氧基,q为1、2、3、4或5。
学而被定义为(R)‑或(S)‑。本发明旨在包括所有可能的异构体,以及其外消旋体和光学纯
形式。本发明的化合物的制备可以选择外消旋体、非对映异构体或对映异构体作为原料或
中间体。光学活性的异构体可以使用手性合成子或手性试剂来制备,或者使用常规技术进
行拆分,例如采用结晶以及手性色谱等方法。
Gübitz and Martin G.Schmid(Eds.),Chiral Separations,Methods and Protocols,
Methods in Molecular Biology,Vol.243,2004;A.M.Stalcup,Chiral Separations,
Annu.Rev.Anal.Chem.3:341‑63,2010;Fumiss et al.(eds.),VOGEL'S ENCYCLOPEDIA OF
PRACTICAL ORGANIC CHEMISTRY 5.sup.TH ED.,Longman Scientific and Technical
Ltd.,Essex,1991,809‑816;Heller,Acc.Chem.Res.1990,23,128。
盐、磷酸盐等;有机酸盐包括但不限于甲酸盐、乙酸盐、2,2‑二氯乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸
盐、己酸盐、辛酸盐、癸酸盐、十一碳烯酸盐、乙醇酸盐、葡糖酸盐、乳酸盐、癸二酸盐、己二酸
盐、戊二酸盐、丙二酸盐、草酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、棕榈
酸盐、硬脂酸盐、油酸盐、肉桂酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、谷氨酸盐、焦谷氨酸盐、天冬氨酸
盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、水杨酸盐、4‑氨
基水杨酸盐、萘二磺酸盐等。这些盐可通过本专业已知的方法制备。
盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等。优选的无机盐为铵盐、钠盐、钾盐、钙盐及镁
盐。衍生自有机碱的盐包括但不限于以下的盐:伯胺类、仲胺类及叔胺类,被取代的胺类,包
括天然的被取代胺类、环状胺类及碱性离子交换树脂,例如氨、异丙胺、三甲胺、二乙胺、三
乙胺、三丙胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二甲基乙醇胺、2‑二甲氨基乙醇、2‑二乙氨基乙
醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡萄糖胺、
甲基葡萄糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N‑乙基哌啶、聚胺树脂等。优选的有机碱包括异丙
胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己基胺、胆碱及咖啡因。这些盐可通过本专业已知的方法
制备。
明旨在包括各种晶型及其混合物。
水,该情况下的溶剂化物为水合物。或者,溶剂可以是有机溶剂。因此,本发明的化合物可以
以水合物存在,包括单水合物、二水合物、半水合物、倍半水合物、三水合物、四水合物等,以
及相应的溶剂化形式。本发明化合物可形成真实的溶剂化物,但在某些情况下,也可以仅保
留不定的水或者水加上部分不定溶剂的混合物。本发明的化合物可以在溶剂中反应或者从
溶剂中沉淀析出或结晶出来。本发明化合物的溶剂化物也包含在本发明的范围之内。
本发明的化合物的药学上可接受的代谢前体。当被给予有需要的个体时,前药可以不具有
活性,但在体内被转化成本发明的活性化合物。前药通常在体内迅速转化,而产生本发明的
母体化合物,例如通过在血液中水解来实现。前药化合物通常在哺乳动物生物体内提供溶
解度、组织相容性或缓释的优点。前药包括已知的氨基保护基和羧基保护基。具体的前药制
备方法可参照Saulnier,M.G.,et al.,Bioorg.Med.Chem.Lett.1994,4,1985‑1990;
Greenwald,R.B.,et al.,J.Med.Chem.2000,43,475。
组合物的目的是促进生物体的给药,利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
或以不良方式与组合物中包含的任意组分相互作用。
料/着色剂、矫味剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、助悬剂、稳定剂、等渗剂、溶剂或乳化剂。
腺癌、肝癌、皮肤癌、上皮细胞癌、宫颈癌、卵巢癌、肠癌、鼻咽癌、脑癌、骨癌、食道癌、黑色素
瘤、肾癌、口腔癌等疾病。
可以为迹象、症状或病因的消减和/或缓解,或生物系统的任何其它所需变化。例如,用于治
疗的“有效量”是在临床上提供显著的病症缓解效果所需的包含本文公开化合物的组合物
的量。可使用诸如剂量递增试验的技术测定适合于任意个体病例中的有效量。
射(包括静脉内、皮下、腹膜内、肌内、动脉内注射或输注)、局部给药和经直肠给药。本领域
技术人员熟知可用于本文所述化合物和方法的施用技术,例如在Goodman and Gilman,The
Pharmacological Basis of Therapeutics,current ed.;Pergamon;and Remington's,
Pharmaceutical Sciences(current edition),Mack Publishing Co.,Easton,Pa中讨论
的那些。在优选的实施方案中,本文讨论的化合物和组合物通过口服施用。
的固定和不固定组合。术语“固定组合”是指以单个实体或单个剂型的形式向患者同时施用
至少一种本文所述的化合物和至少一种协同药剂。术语“不固定组合”是指以单独实体的形
式向患者同时施用、合用或以可变的间隔时间顺次施用至少一种本文所述的化合物和至少
一种协同制剂。这些也应用到鸡尾酒疗法中,例如施用三种或更多种活性成分。
括三烷基甲硅烷基或二芳基烷基甲硅烷基(例如叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲
硅烷基或三甲基甲硅烷基)、四氢吡喃基、苄基等。合适的氨基、脒基及胍基的保护基包括叔
丁氧羰基、苄氧羰基等。合适的巯基保护基包括‑C(O)‑R”(其中R”为烷基、芳基或芳烷基)、
对甲氧基苄基、三苯甲基等。合适的羧基保护基包括烷基、芳基或芳烷基酯类。
Synthesis,(1999),4th Ed.,Wiley中。保护基还可为聚合物树脂。
件、或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明、否则百分比和份数是重量百分比和重量
份数。
反应完全。加入1M氢氧化钠(NaOH)水溶液,调至pH=9,滤出固体,水相用DCM萃取后浓缩,合
并柱层析纯化得到5‑氨基‑1‑苄基‑1,2,3,6‑四氢吡啶‑4‑羧酸乙酯(29.2g,白色固体)。LC‑
+
MS:ESI[M+H]=261.4。
基乙酸乙酯(13.0g,115.0mmol),闷罐加热至120度反应四天。冷却后过滤,滤饼用乙醇洗涤
两次。滤液和洗涤液合并旋干,加水(300mL)稀释,二氯甲烷(DCM)(200mL)反萃三次。用稀盐
酸(3M)调节水相pH值至5,有固体析出,过滤。滤饼用乙醇(60mL)打浆纯化得到7‑苄基‑2,4‑
+
二羟基‑5,6,7,8‑四氢‑1,7‑萘啶‑3‑甲腈(9.0g,白色固体)。LC‑MS:ESI[M+H]=282.4。
20mL水,然后用饱和碳酸氢钠NaHCO3调节pH至9左右,室温搅拌过夜。过滤,滤液再用稀盐酸
调节pH至6‑7,有固体析出,过滤,乙酸乙酯打浆,干燥得到中间体1(9.5g,灰色固体)。LC‑
+
MS:ESI[M+H]=300.1。
缩,剩余物加入DCM溶解,用NaHCO3饱和溶液洗涤两次,再用饱和食盐水洗涤一次,干燥,减
+ 1
压浓缩得到2,6‑二氯‑5‑氟烟酸甲酯(106g,黄色油状物)。LC‑MS:ESI[M+H]=224.0;H NMR
(400MHz,CDCl3):δ8.01(d,J=7.6MHz,1H),3.98(s,3H)。
H2O)(200mL/20mL)中,加入Pd‑Xphos‑G3(3.75g,4.76mmol)和Ru‑phos(4.44g,9.52mmol),
氮气保护下60度反应过夜。反应液冷却至室温,过滤,滤液减压浓缩,柱层析纯化得到2‑氯‑
+ 1
5‑氟‑6‑(2‑氟‑6‑甲氧基苯基)烟酸甲酯(8.92g,黄色油状物)。LC‑MS:ESI[M+H]=314.3;H
NMR(400MHz,DMSO‑d6):δ8.39(d,J=8.4MHz,1H),7.57‑7.59(m,1H),6.99‑7.08(m,2H),
3.93(s,3H),3.79(s,3H)。
温反应5小时。反应液减压浓缩除去大部分有机溶剂,用3N盐酸HCl调pH到3~4,再用DCM萃
取,合并有机相,用饱和食盐水洗涤,干燥,减压浓缩得到2‑氯‑5‑氟‑6‑(2‑氟‑6‑甲氧基苯
+
基)烟酸(8.33g,黄色固体)。LC‑MS:ESI[M+H]=300.0。
DIEA(10.77g,83.5mmol),氮气保护下180度反应16小时。反应液冷却至室温,缓慢倒入饱和
氯化铵NH4Cl水溶液中,过滤,滤饼经甲醇溶解,干燥,减压浓缩,柱层析纯化得到5‑氟‑6‑
(2‑氟‑6‑甲氧基苯基‑2‑((4‑甲氧基苄基)氨基)烟酸(13.6g,棕褐色油状物,粗品)。LC‑MS:
+
ESI[M+H]=401.1。
小时。反应液减压浓缩,柱层析纯化得到5‑氟‑6‑(2‑氟‑6‑甲氧基苯基‑2‑((4‑甲氧基苄基)
+
氨基)烟酸甲酯(5.4g,黄色油状物)。LC‑MS:ESI[M+H]=415.4。
后溶于100mL乙酸乙酯中,用饱和Na2CO3水溶液洗涤两遍,无水硫酸钠干燥,减压浓缩得到2‑
+
氨基‑5‑氟‑6‑(2‑氟‑6‑甲氧基苯基)烟酸甲酯(3.7g,黄色固体)。LC‑MS:ESI[M+H] =
295.3。
二乙酯(4.0g,25.0mmol),闷罐加热至120度反应三天。反应液降至室温,减压浓缩,柱层析
纯化得到6‑氟‑7‑(2‑氟‑6‑甲氧基苯基)‑4‑羟基‑2‑氧代‑1,2‑二氢‑1,8‑萘啶‑3‑羧酸乙酯
+
(1.1g,黄色固体)。LC‑MS:ESI[M+H]=377.4。
三天。反应液降至室温,减压浓缩得到6‑氟‑7‑(2‑氟‑6‑甲氧基苯基)‑4‑羟基‑2‑氧代‑1,2‑
+
二氢‑1,8‑萘啶‑3‑甲酰胺(680mg,淡黄色固体,粗品)。LC‑MS:ESI[M+H]=348.6。
至室温,减压浓缩后溶于10mL乙酸乙酯中,用饱和NaHCO3水溶液调至碱性,分离出有机层,
+
干燥,减压浓缩得到中间体2A(670mg,红色固体)。LC‑MS:ESI[M+H]=366.3。
应液冷却至室温,减压浓缩,用饱和碳酸氢钠NaHCO3水溶液打浆,过滤,滤饼干燥后再用乙
酸乙酯打浆纯化得到4‑(7‑苄基‑3‑氰基‑2‑羟基‑5,6,7,8‑四氢‑1,7‑萘啶‑4‑基)哌嗪‑1‑
+ 1
羧酸叔丁酯(3.5g,墨绿色固体)。LC‑MS:ESI[M+H] =450.4;H NMR(400MHz,DMSO_d6):δ
11.53(brs,1H),7.28‑7.34(m,5H),3.62(s,2H),3.23‑3.42(m,10H),2.40‑2.56(m,4H),
1.42(s,9H)。
呋喃THF(20mL)中,在氮气保护下,加入三苯基膦PPh3(1.17g,4.57mmol)和偶氮二甲酸二异
丙酯DIAD(900mg,4.46mmol),室温搅拌过夜。反应液减压浓缩,柱层析纯化得到(S)‑4‑(7‑
苄基‑3‑氰基‑2‑((1‑甲基吡咯烷‑2‑基)甲氧基)‑5,6,7,8‑四氢‑1,7‑萘啶‑4‑基)哌嗪‑1‑
+ 1
羧酸叔丁酯(750mg,淡黄色固体)。LC‑MS:ESI[M+H]=547.8;H NMR(400MHz,CD3Cl):δ
7.26‑7.36(m,5H),4.24‑4.26(m,2H),3.68(s,2H),3.53‑3.58(m,6H),3.31(brs,4H),3.06‑
3.10(m,1H),2.64(brs,4H),2.50(s,3H),2.25‑2.29(m,1H),1.98‑2.03(m,1H),1.64‑1.84
(m,4H),1.47(s,9H)。
AcOH(2mL)和10%Pd/C(100mg),氢气球氛围下,室温搅拌3天。反应液过滤,滤液减压浓缩,
残留物溶于乙酸乙酯,用饱和碳酸钠Na2CO3水溶液洗涤,无水硫酸镁MgSO4干燥,减压浓缩得
到(S)‑4‑(3‑氰基‑2‑((1‑甲基吡咯烷‑2‑基)甲氧基)‑5,6,7,8‑四氢‑1,7‑萘啶‑4‑基)哌
+
嗪‑1‑羧酸叔丁酯(260mg,淡黄色固体)。LC‑MS:ESI[M+H]=457.6。
乙氧基)甲基)‑1H‑吲唑(290mg,0.85mmol)溶于1,4‑dioxane(10mL)中,氩气保护下,分别加
入碳酸铯Cs2CO3(372mg,1.14mmol)、2‑双环已基膦‑2',6'‑二异丙氧基联苯Ru‑phos(51mg,
0.11mmol0.2)和Pd‑Ruphos‑G3(24mg,0.028mmol),加完后氩气置换三次,加热至90度反应
过夜。反应液冷却至室温,减压浓缩,柱层析纯化得到(S)‑4‑(3‑氰基‑7‑(5‑甲基‑1‑((2‑
(三甲基硅基)乙氧基)甲基)‑1H‑吲唑‑4‑基)‑2‑((1‑甲基吡咯烷‑2‑基)甲氧基)‑5,6,7,8‑
+ 1
四氢‑1,7‑萘啶‑4‑基)哌嗪‑1‑羧酸叔丁酯(70mg,白色固体)。LC‑MS:ESI[M+H] =717.9;H
NMR(400MHz,CDCl3):δ7.99(s,1H),7.29(s,2H),5.70(s,2H),4.31(s,2H),3.49‑3.57(m,
8H),3.39(brs,4H),3.13(brs,1H),2.73(brs,2H),2.53(brs,2H),1.62‑2.07(m,4H),1.70
(brs,3H),1.48(s,9H),0.86‑0.92(m,2H),‑0.07(s,9H)。
叔丁酯(70mg,0.10mmol)溶于三氟乙酸/二氯甲烷TFA/DCM(5mL/5mL)中,室温搅拌过夜。反
应液减压浓缩,加入饱和NaHCO3水溶液,水相用二氯甲烷萃取三次,合并有机相,无水MgSO4
干燥,过滤,浓缩得到(S)‑7‑(5‑甲基‑1H‑吲唑‑4‑基)‑2‑((1‑甲基吡咯烷‑2‑基)甲氧基)‑
+
4‑(哌嗪‑1‑基)‑5,6,7,8‑四氢‑1,7‑萘啶‑3‑甲腈(20mg,黄色固体)。LC‑MS:ESI[M+H] =
487.3。
度下依次加入二异丙基乙胺DIPEA(16mg,0.12mmol)和丙烯酰氯(4mg,0.044mmol),室温搅
拌2小时。反应液用饱和氯化铵溶液和饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,
+ 1
剩余物制备色谱纯化得到目标化合物(黄色固体)。LC‑MS:ESI[M+H] =541.3;H NMR
(400MHz,CD3OD):δ8.07(s,1H),7.23‑7.28(m,2H),6.78‑6.85(m,1H),6.25(dd,J=16.8,
2.0Hz,1H),5.78(dd,J=10.8,2.0Hz,1H),4.43‑4.47(m,1H),4.24‑4.31(m,3H),3.82(brs,
4H),3.52‑3.55(m,2H),3.48(brs,4H),3.06‑3.10(m,1H),2.87‑2.89(m,2H),2.76‑2.80(m,
1H),2.54(s,3H),2.34‑2.41(m,4H),2.06‑2.11(m,1H),1.78‑1.84(m,2H),1.65‑1.70(m,
1H)。
中,室温反应过夜。反应液加入100mL乙酸乙酯稀释,用水洗涤两遍,干燥,减压浓缩得到4‑
(2‑氯‑3‑氰基‑6‑氟‑7‑(2‑氟‑6‑6‑甲氧基苯基)‑1,8‑萘啶‑4‑基)哌嗪‑1‑羧酸苄酯
+
(605mg,红色固体)。LC‑MS:ESI[M+H]=550.6。
反应液冷却至室温,减压浓缩,剩余物加入乙酸乙酯再减压浓缩二次得到6‑氟‑7‑(2‑氟‑6‑
甲氧基苯基)‑2‑氧代‑4‑(哌嗪‑1‑基)‑1,2‑二氢‑1,8萘啶‑3‑甲腈(690mg,红色固体)。LC‑
+
MS:ESI[M+H]=398.5。
(828mg,3.8mmol),室温反应3小时。反应液减压浓缩,柱层析纯化得到4‑(3‑氰基‑6‑氟‑7‑
(2‑氟‑6‑甲氧基苯基)‑2‑氧代‑1,2‑二氢‑1,8‑萘啶‑4‑基)哌嗪‑1‑羧酸叔丁酯(280mg,黄
+
色固体)。LC‑MS:ESI[M+H]=498.5。
0.83mol)溶于THF(10mL)中,在氮气保护下,加入三苯基膦PPh3(287mg,1.12mmol)和偶氮二
甲酸二异丙酯DIAD(226mg,1.12mmol),室温搅拌过夜。反应液减压浓缩,柱层析纯化得到4‑
(3‑氰基‑6‑氟‑7‑(2‑氟‑6‑甲氧基苯基)‑2‑(((S)‑1‑甲基吡咯烷‑2‑基)甲氧基)‑1,8‑萘
+
啶‑4‑基)哌嗪‑1‑羧酸叔丁酯(180mg,淡黄色固体)。LC‑MS:ESI[M+H]=595.3。
度下滴加三溴化硼BBr3(1.0M in DCM,6mL),缓慢升至室温反应过夜。往反应液中加入甲醇
MeOH(10mL)淬灭反应,再加入Na2CO3固体中和,过滤,滤液减压浓缩得到6‑氟‑7‑(2‑氟‑6‑羟
基苯基)‑2‑(((S)‑1‑甲基吡咯烷‑2‑基)甲氧基)‑4‑(哌嗪‑1‑基)‑1,8‑萘啶‑3‑甲腈
+
(200mg,黄色固体,粗品)。LC‑MS:ESI[M+H]=481.4。
入丙烯酰氯(2滴),室温反应2小时。反应液过滤,滤液减压浓缩,制备色谱纯化得到4‑(4‑丙
烯酰基哌嗪‑1‑基)‑6‑氟‑7‑(2‑氟‑6‑羟基苯基)‑2‑(((S)‑1‑甲基吡咯烷‑2‑基)甲氧基)‑
+ 1
1,8‑萘啶‑3‑甲腈(17mg,黄色固体)。LC‑MS:ESI[M+H]=535.5。H NMR(400MHz,CD3OD):δ
8.20(d,1H),7.20‑7.26(m,1H),6.62‑6.89(m,1H),6.69(d,1H),6.53(t,1H),6.28(dd,1H),
5.81(dd,1H),4.68‑4.72(m,1H),4.40‑4.45(m,1H),3.97(brs,4H),3.73(brs,4H),3.07‑
3.10(m,1H),2.81‑2.87(m,1H),2.56(s,3H),2.35‑2.41(m,1H),2.08‑2.15(m,1H),1.76‑
1.90(m,3H)。
SOS1与KRAS 之间的蛋白‑蛋白相互作用的功效,结果以IC50值表示。
移50nL 200倍终浓度的化合物。阴性对照孔和阳性对照孔中分别加50nL的100%DMSO;(2)
用Diluent buffer配制4倍终浓度的Tag1 SOS1溶液;(3)在384孔板中加入2.5μL的4倍终浓
G12C
度的Tag1 SOS1溶液;(4)用Diluent buffer配制4倍终浓度的Tag2 KRAS 溶液;(5)在化
G12C
合物孔和阳性对照孔分别加2.5μL的4倍终浓度的Tag2KRAS 溶液;在阴性对照孔中加2.5
μL的diluent buffer;(6)将384孔板1000rpm离心30秒,振荡混匀后室温孵育15min;(7)用
Detection buffer配制1倍终浓度的Anti Tag1 TB3+溶液和1倍终浓度的Anti Tag2 XL665
溶液,将两溶液混匀之后,每孔加5μL的混合溶液;(8)将384孔板1000rpm离心30秒,振荡混
匀后室温孵育120分钟;(9)用Envision酶标仪读数Em665/620;(10)数据分析,计算公式
其中Min signal阴性对照孔均值Max signal阳性对照孔均
值。拟合量效曲线以浓度的log值作为X轴,百分比抑制率为Y轴,采用分析软件GraphPad
Prism 5的log(inhibitor)vs.response Variable slope拟合量效曲线,从而得出各个化
合物对酶活性的IC50值。拟合公式为:Y=Bottom+(Top Bottom)/(1+10^((LogIC50X)*
HillSlope))。
素。用0.5%二甲亚砜作为空白对照,用起始浓度为10μM,八梯度三倍稀释的待测化合物溶
液处理细胞,并在5%CO2培养箱中孵育一定的时间(5‑7天)。在孵育结束时,向每个孔中加
入10μL的MTT储备溶液(5mg/mL)。将培养板在37℃下孵育4小时,然后去除培养基。将二甲亚
砜(100μL)加入每个孔中,然后充分摇动。在Thermo Scientific Varioskan Flash多模式
阅读器上,在570nm处测量甲臜产物的吸光度。通过使用GraphPad Prism 6.0软件将剂量反
应数据拟合到三参数非线性回归模型中获得IC50值,测试结果如表1所示,其中,A<500nM,
500nM≤B<5000,5000nM<C。
15。
板中加入系列稀释的受试化合物(10个浓度,3倍稀释),20μL/孔,培养箱孵育96h。取出板放
TM
置室温后加入等体积的 试剂孵育1h,En Vision 读板器检测信号。使用以
下公式将信号转换为百分比抑制:%抑制=100‑[(测试化合物信号‑中位最小信号)/(中位
最大信号‑中位最小信号)x 100]。最大信号是无抑制剂孔的信号值,最小信号是含有足以
完全抑制细胞增殖的参考抑制剂的孔的信号值,对化合物各个浓度的百分比抑制率进行四
参数非线性回归拟合曲线并计算IC50。测试结果如表2所示,其中,A<200nM,200nM≤B<
1000nM,1000nM<C
实施例1 B B
实施例2 B B
实施例3 A A
实施例4 A A
实施例5 B B
实施例6 A A
实施例7 A A
实施例8 B B
实施例9 A A
实施例10 A A
实施例11 B B
实施例12 B B
实施例13 A A
实施例14 A A
实施例15 A A
实施例16 B B
MiaPaca‑2的细胞增殖抑制活性IC50小于200nM。
浓度,3倍稀释)作用24h(Miapaca‑2)或3h(H358),然后加入含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的裂
解液裂解细胞提取蛋白,western blot方法检测p‑ERK的水平,测试结果如表3所示,其中,A
<500nM,500nM≤B<1000,1000nM≤C<5000nM,
实施例1 B
实施例2 B
实施例3 A
实施例4 A
实施例5 A
实施例6 A
实施例7 A
实施例8 B
实施例9 A
实施例10 A
实施例11 B
实施例12 A
实施例13 A
实施例14 A
实施例15 A
实施例16 C
IC50小于200nM。
以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范
围。