淫羊藿素类似物及其制备方法和应用转让专利
申请号 : CN202110072324.6
文献号 : CN112442004B
文献日 : 2021-04-27
发明人 : 杨鹏 , 辛贵忠 , 后毅 , 丁佳雨 , 谢逸石 , 姬明慧
申请人 : 中国药科大学
摘要 :
权利要求 :
1.如式Ⅱ所示的淫羊藿素类似物,或其药学上可接受的盐:其中,X为C或N;R2、R3、R4分别独立选自氢、氘、羟基、巯基、氰基、硝基、卤素、C1‑C8烷基、卤代C1‑C8烷基、C1‑C8烷氧基;
R5选自:
。
2.根据权利要求1所述的淫羊藿素类似物,其特征在于,选自以下化合物Ⅱ‑1至Ⅱ‑7:Ⅱ‑1:2‑(2,4‑二甲氧基苯基)‑3‑羟基‑9‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)‑9,10‑二氢‑4H,8H‑色满[8,7‑e] [1,3]噁嗪 ‑4‑一酮;
Ⅱ‑2:9‑(3,4‑二氯苄基)‑2‑(2,4‑二甲氧基苯基)‑3‑羟基‑9,10‑二氢‑4H,8H‑色满[8,
7‑e] [1,3]噁嗪‑4酮;
Ⅱ‑3:2‑(2,3‑二氯苯基)‑3‑羟基‑9‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)‑9,10‑二氢‑4H,8H‑色满[8,
7‑e] [1,3]噁嗪 ‑4‑酮;
Ⅱ‑4:2‑(3,4‑二氯苯基)‑3‑羟基‑9‑((四氢‑2H‑吡喃‑4‑基)甲基)‑9,10‑二氢‑4H,8H‑色满[8,7‑e] [ 1,3]噁嗪‑4‑酮;
Ⅱ‑5:2‑(3,4‑二氯苯基)‑9‑(3‑氟苄基)‑3‑羟基‑9,10‑二氢‑4H,8H‑色满[8,7‑e] [1,
3]噁嗪‑4‑酮;
Ⅱ‑6:2‑(3,4‑二氯苯基)‑3‑羟基‑9‑(吡啶‑4‑基甲基)‑9,10‑二氢‑4H,8H‑色满[8,7‑e] [1,3]噁嗪‑4 ‑酮;
Ⅱ‑7:9‑(3,4‑二氯苄基)‑3‑羟基‑2‑(吡啶‑4‑基)‑9,10‑二氢‑4H,8H‑色满[8,7‑e] [1,3]噁嗪‑4 ‑酮。
3.权利要求1所述淫羊藿素类似物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:。
4.一种药物制剂,其特征在于,包含权利要求1所述的淫羊藿素类似物,以及药学上可接受的辅料。
5.根据权利要求4所述的药物制剂,其特征在于,所述制剂为片剂、胶囊、颗粒剂、散剂、糖浆剂、口服液或注射剂。
6.权利要求1所述淫羊藿素类似物、权利要求4或5所述药物制剂在制备治疗乳腺癌、多发性骨髓瘤、急性早幼粒细胞白血病、急性淋巴母细胞性白血病、肺癌、肝癌、骨肉瘤、结直肠癌、胃癌、宫颈癌、神经胶质瘤、前列腺癌、肾癌的药物中的应用。
说明书 :
淫羊藿素类似物及其制备方法和应用
技术领域
背景技术
~
髓瘤(MM)的特征在于细胞增殖不受控制,导致整个骨髓中积累了突变的浆细胞(PC)。过多
的异常PC产生会导致骨髓过度拥挤,并阻碍其他正常和健康血细胞的完全形成。另外,多发
性骨髓瘤的特征是染色体异质性和一系列基因中的大量突变,这两种突变均难以靶向该疾
病。MM在许多地区的发病率和患病率正在上升,并且已经经历了复发过程,这使其成为一项
重大且不断增长的医学挑战。多发性骨髓瘤的治疗通常包括皮质类固醇,蛋白酶体抑制剂
(例如来那度胺,沙利度胺),免疫调节或单克隆抗体的组合。尽管新的治疗方法和药物改善
了结局,但大多数患者最终还是复发了并且具有多重耐药性。因此,扩展现有的治疗应用并
设计其他有效的疗法是迫切且未得到满足的需求。
用,特别是在抗肿瘤药的研究中,超过60%的抗肿瘤药与天然产物密切相关。黄酮是一大类
天然产物,具有广泛的生物活性。这些化合物大多数具有差的溶解度,低的生物利用度和弱
的生物活性,这限制了它们的药物开发。淫羊藿素是淫羊藿中主要活性成分淫羊藿苷的水
解产物,是异戊烯基取代的黄酮醇,具有多种生物活性,例如抗肿瘤、调节骨代谢、神经保护
作用、抗炎和抗氧化作用。淫羊藿素已被用作临床候选天然小分子药物来治疗肿瘤。但是,
由于淫羊藿素的抗肿瘤效果一般,限制了其在临床的应用。
发明内容
法以及其在制备治疗乳腺癌、多发性骨髓瘤、急性早幼粒细胞白血病、急性淋巴母细胞性白
血病的药物中的应用。
癌、宫颈癌、神经胶质瘤、前列腺癌、肾癌的药物中的应用。
胞性白血病、肺癌、肝癌、骨肉瘤、结直肠癌、胃癌、宫颈癌、神经胶质瘤、前列腺癌、肾癌的药
物,具有开发应用前景。
具体实施方式
环境温度并搅拌12h。加入饱和NH4Cl水溶液(5mL)和乙酸乙酯(10mL)。分离有机层,并将水
层用乙酸乙酯萃取两次(每次10mL)。合并的有机萃取物用MgSO4干燥,过滤并蒸发。残留物
通过硅胶柱色谱纯化,使用极性增加的己烷/乙酸乙酯混合物,得到B(133mg,0.68mmol,
1
92%):黄色油状液体。 H NMR (300 MHz, DMSO‑d6) δ 12.50 (s, 1H), 7.87 (d, J =
8.9 Hz, 1H), 6.60 (dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 5.27 (s, 3H), 3.38
(s, 4H), 2.57 (s, 4H).
~
1
并从乙醇中重结晶以产生D1(6g,17.4mmol,72%)。 H NMR (300 MHz, DMSO‑d6) δ 13.52
(s, 1H), 8.22 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 7.98 (d, J =
9.4 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 5.30 (s, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.86 (s,
3H), 3.41 (s, 3H).
下搅拌2h。将混合物用1N HCl水溶液酸化至pH 1 2。通过过滤收集沉淀的固体,用EtOH洗
~
1
涤,干燥并从乙醇中重结晶以产生E1(348mg,0.97mmol,83.7%)。 H NMR (300 MHz, DMSO‑
d6) δ 8.71 (s, 1H), 8.04 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15‑
7.09 (m, 2H), 6.71 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.65 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 5.34
(s, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.41 (s, 3H).
1
体,用甲醇洗涤并从乙醇中重结晶以产生F1(306.4mg,0.97mmol,97.5%)。 H NMR (300
MHz, DMSO‑d6) δ 10.68 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.37
(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.90 (dd, J = 8.8, 2.2 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 2.2 Hz,
1H), 6.70 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.64 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H),
3.78 (s, 3H).
Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.31 (s, 2H), 3.39 (s, 3H).
1H), 5.34 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 3.40 (s, 3H).
1H), 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 2.2 Hz,
1H), 6.93 (dd, J = 8.8, 2.2 Hz, 1H).
J = 2.2 Hz, 2H), 7.55 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.46
(dd, J = 8.3, 2.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.60 (dd, J = 8.9, 2.5
Hz, 1H), 5.24 (s, 2H), 3.50 (s, 3H).
J = 2.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.46
(dd, J = 8.3, 2.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.60 (dd, J = 8.9, 2.5
Hz, 1H), 5.24 (s, 2H), 3.50 (s, 3H).
1H), 7.96 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 2.2 Hz,
1H), 6.94 (dd, J = 8.7, 2.2 Hz, 1H).
J = 9.1, 1.7 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 7.83 (d, J = 15.6 Hz, 1H),
6.68 (dd, J = 9.0, 2.4 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 3.41
(s, 3H).
Hz, 1H), 8.14 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H),
7.15 (dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 1H), 5.39 (s, 2H), 3.44 (s, 3H).
8.13 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 8.8 Hz, 1H),
7.00 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 8.8, 2.2 Hz, 1H).
下搅拌约8小时。然后将溶液冷却至室温,并通过过滤收集沉淀的固体,用甲醇洗涤并从乙
1
醇中重结晶以产生黄色固体产率为80%。 H NMR (300 MHz, Chloroform‑d) δ 8.04 (d,
J = 8.9 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.86 (d, J = 8.8 Hz,
1H), 6.64 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 4.07 (s, 2H),
3.88 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 2.70 (q, J = 7.2 Hz, 4H), 1.16 (t, J = 7.2 Hz,
6H).
6.64 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 4.14 (s, 2H), 3.88
(s, 3H), 3.86 (s, 3H), 2.73 (s, 4H), 1.90 (m, J = 3.5 Hz, 4H).
Hz, 1H), 6.64 (dd, J = 8.4, 2.3 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 4.02 (s,
2H), 3.89 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.80 (s, 4H), 2.65 (s, 4H).
(d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.66 (dd, J = 8.6, 2.3 Hz, 1H), 4.08 (s, 2H), 3.85 (s,
3H), 3.82 (s, 3H), 3.81 (t, J= 6, 6 Hz, 2H), 3.24 (td, J = 11.7, 2.0 Hz, 2H),
2.50 (t, J = 4, 4 Hz, 2H), 1.71 (ddt, J = 11.2, 7.8, 3.9 Hz, 1H), 1.64‑1.52
(m, 2H), 1.23‑1.05 (m, 2H).
1H), 7.20‑7.14 (m, 2H), 7.07 (ddt, J = 9.0, 7.6, 1.4 Hz, 1H), 6.87 (d, J =
8.8 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.64 (dd, J = 8.6, 2.3 Hz, 1H), 4.03
(s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.79 (s, 2H), 3.71 (s, 3H).
(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33‑7.30 (m, 2H), 6.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.70‑6.63
(m, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.77 (s, 2H), 3.70 (s, 3H).
(m, 1H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.64 (dd, J =
8.5, 2.3 Hz, 1H), 4.06 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.76 (s, 2H), 3.71 (s, 3H).
(s, 1H), 6.66 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 4.15 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.83 (s,
3H), 3.28 (s, 2H).
1H), 6.72 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.66 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 4.10‑3.90 (m,
2H), 3.85 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.50 (dd, J = 7.5, 5.8 Hz, 1H), 2.91 (ddd, J
= 60.0, 13.8, 6.7 Hz, 2H).
7.9 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.08 (s, 2H), 2.71 (q, J = 7.2 Hz,
4H), 1.17 (t, J = 7.2 Hz, 6H).
Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.16 (s, 2H), 2.76 (s, 4H), 1.98‑1.83 (m,
4H).
7.9 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.08 (s, 2H), 2.71 (q, J = 7.2 Hz,
4H), 1.17 (t, J = 7.2 Hz, 4H).
Hz, 1H), 7.55 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.13 (s, 2H),
3.51 (dd, J = 9.4, 6.0 Hz, 2H), 3.01 (ddd, J = 10.0, 7.2, 3.0 Hz, 1H), 2.19
(dq, J = 12.9, 8.7 Hz, 1H), 1.92‑1.74 (m, 2H), 1.68 (dt, J = 12.3, 8.3 Hz,
1H).
Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.14 (s, 2H),
3.83 (s, 4H), 2.73 (s, 4H).
混合物在80℃下搅拌约8小时。然后将溶液冷却至室温,并通过过滤收集沉淀的固体,用甲
1
醇洗涤并从乙醇中重结晶以产生黄色固体,产率为81%。 H NMR (300 MHz, DMSO‑d6) δ
8.71 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.85 (d, J
= 8.8 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.66 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 5.09
(s, 2H), 4.14 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 2.72 (d, J = 11.4 Hz, 2H),
2.69‑2.55 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.85‑1.71 (m, 4H), 1.46 (qd, J = 12.1, 3.7
Hz, 2H).
(d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.40‑7.36 (m, 1H), 6.93 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.67 (d, J
= 2.3 Hz, 1H), 6.62 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.02 (s, 2H),
3.93 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.60 (s, 3H).
1H), 5.12 (s, 2H), 4.36 (s, 2H), 2.76 (s, 1H), 2.73 (s, 2H), 2.11 (s, 3H),
1.83 (s, 2H), 1.25 (s, 4H).
8.8, 3.5 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.28 (s, 2H), 3.94‑
3.75 (m, 2H), 2.59 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 1.65 (d, J = 13.0 Hz, 2H), 1.33‑1.08
(m, 5H).
Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.40 (q, J = 7.5 Hz, 1H), 7.26‑7.18 (m,
2H), 7.17‑7.07 (m, 1H), 6.94 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.29 (s, 2H),
3.95 (s, 2H).
1H), 7.87 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.48‑7.37 (m, 2H),
6.95 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.02 (s, 2H), 4.31 (s, 2H), 3.99 (s, 2H).
= 8.9 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.40 (dd,
J = 8.3, 1.9 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.02 (s, 2H), 4.34 (s, 2H),
3.94 (s, 2H).
骨肉瘤(U‑2‑OS)细胞系、结直肠癌(DLD1)细胞系、胃癌(MGC‑803)细胞系、人急性早幼粒细
胞白血病(HL‑60)细胞系、人急性淋巴母细胞性白血病(MOLT‑4)细胞系、人宫颈癌(SiHa)细
胞系、人神经胶质瘤(U251)细胞系、人前列腺癌(DU‑145)细胞系和人胚肾HEK293细胞系增
殖抑制作用实验,具体通过下述实验步骤进行测试。
对照溶于100μl培养基中,加入不同浓度的目标化合物,在37℃孵育72小时,加入10μl CCK8
试剂。培养后,可以通过Synergy H1(BioTek)测定吸光度。由对照百分比和浓度的对数曲线
确定IC50值。所有样品和对照均进行三次重复测试。
F12K培养基或MEM培养基或F‑12培养基或IMDM培养基孵育2 h使细胞同步化。
8226、U266多发性骨髓瘤细胞增殖抑制的IC50值可达到1.37μM和1.58μM;对白血病HL‑60、
MOLT‑4细胞增殖抑制的IC50值可达到7.23μM和6.14μM;I‑14、Ⅱ‑4、Ⅱ‑6对RPMI 8226多发性
骨髓瘤细胞增殖抑制的IC50值可达到4.91μM、4.33μM、4.17μM。