芳基烷基醚化合物及其衍生物,制备方法、药物组合物和应用转让专利
申请号 : CN202110062227.9
文献号 : CN112778154B
文献日 : 2022-05-13
发明人 : 赖宜生 , 刘文斌 , 马雪薇 , 葛书山 , 李月珍 , 徐强 , 郭文洁 , 钟海清 , 刘雯
申请人 : 中国药科大学 , 南京中澳转化医学研究院有限公司
摘要 :
权利要求 :
1.一种芳基烷基醚化合物及其衍生物,其特征在于,所述芳基烷基醚化合物具有式(I)的结构,所述芳基烷基醚化合物衍生物为所述芳基烷基醚化合物的立体异构体、药学上可接受的盐或它们的混合物:
,
所述芳基烷基醚化合物选自以下任一化合物:N‑(2‑乙氧基苯基)‑4‑(2‑((4‑溴苯基)氨基)‑2‑氧代乙氧基)苯甲酰胺(1),N‑(2‑乙氧基苯基)‑4‑((2‑甲基‑1‑((4‑溴苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(2),
N‑(2‑乙氧基苯基)‑4‑((1‑((3‑氟苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(5),N‑(2‑乙氧基苯基)‑4‑((1‑((3‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(6),N‑(2‑乙氧基苯基)‑4‑((1‑((2‑氟苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(7),N‑(2‑乙氧基苯基)‑4‑((1‑((2‑氟‑3‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(8),
N‑(2‑乙氧基苯基)‑4‑((1‑((3‑氟‑4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(9),
N‑(2‑乙氧基苯基)‑4‑((1‑((2‑氟‑4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(10),
N‑(2‑甲基苯基)‑4‑((1‑((4‑溴苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(12),N‑苯基‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(13),N‑(2‑异丙基苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(14),
N‑(3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(16),(S)‑N‑(4‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(17),
N‑(2‑甲基‑3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(18),
N‑(2‑氟‑3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(20),
(S)‑N‑(2‑氟‑4‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(21),
N‑环己基‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(22),N‑(四氢‑2H‑吡喃)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(23),
N‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(24),
N‑(1‑叔丁氧羰基哌啶‑4‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(25),
N‑(哌啶‑4‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(26),(S)‑N‑(2‑甲基苯基)‑4‑((1‑((4‑溴苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(27),
(R)‑N‑(2‑甲基苯基)‑4‑((1‑((4‑溴苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(28),
(S)‑N‑(3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(31),
(R)‑N‑(3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑溴苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(32),
N‑(3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑2‑甲基‑1‑氧丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(33),
N‑(2‑氟‑3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑2‑甲基‑1‑氧丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(34),
N‑(2‑甲基‑3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑2‑甲基‑1‑氧丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(35),
(S)‑N‑(3‑氯苯基)‑4‑((1‑((2‑氟‑4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(36),
(S)‑N‑(2‑甲基苯基)‑4‑((1‑((2‑氟‑4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(37),
(S)‑N‑(2‑氟‑3‑氯苯基)‑4‑((1‑((2‑氟‑4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(38),
(S)‑N‑苯基‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(39),(S)‑N‑(2‑甲基‑3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(41),
(S)‑N‑(2‑氟‑3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(42),
(S)‑N‑((2‑三氟甲基)苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(43),
(S)‑N‑(2‑氟‑5‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(44),
N‑(2‑甲基苯基)‑4‑((1‑((5‑氯吡啶‑2‑基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(45),
(S)‑N‑(3‑氯苯基)‑4‑((1‑((6‑氯吡啶‑3‑基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(46),
(S)‑N‑(6‑氯吡啶‑2‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(47),
(S)‑N‑(2‑氯吡啶‑4‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(48),
(S)‑N‑(5‑氯吡啶‑3‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(49),
(S)‑N‑(4‑氯吡啶‑2‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(50),
(S)‑N‑(3‑氯苯基)‑6‑(((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧丙烷‑2‑基)氧基)烟酰胺(51),(S)‑N‑(3‑氯苯基)‑5‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧丙烷‑2‑基)氧基)吡啶啉酰胺(52),
(S)‑N‑(2‑甲基‑3‑氯苯基)‑4‑((1‑((2‑氟‑4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(54),
(S)‑N‑((3‑氟苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(55),
(S)‑N‑(3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氰基苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(56),
(S)‑N‑(3‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氰基苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(57),
N‑(3‑氯苯基)‑4‑((1‑((6‑氯吡啶‑3‑基)氨基)‑2‑甲基‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(58),
N‑(6‑氯吡啶‑2‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑2‑甲基‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(59),
N‑(6‑氟吡啶‑2‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑2‑甲基‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(60),
(S)‑N‑(6‑氟吡啶‑2‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(61),
(S)‑N‑(3‑氯苯基)‑4‑((1‑((5‑氯吡啶‑2‑基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(62)。
2.根据权利要求1所述的芳基烷基醚化合物及其衍生物,其特征在于,所述药学上可接受的盐为所述芳基烷基醚化合物与酸形成的盐,所述酸为盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、萘磺酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸、琥珀酸、富马酸、水杨酸、苯基乙酸或杏仁酸。
3.一种权利要求1 2任一所述的芳基烷基醚化合物及其衍生物的制备方法,其特征在~
于,所述制备方法为以下任一方法:方法一:化合物i经醚化、水解、酰化、水解、酰化反应得到化合物(I);
方法二:化合物ii经酰化反应得到中间体a,化合物iii经酰化、酰化、水解反应得到中间体d,中间体a与中间体d经醚化反应得到化合物(I);
1 2 3 4
其中,X、Y、R、R、R和R的定义如权利要求1所述;
将相应的酸的溶液加入到以上方法制备的化合物(I)的溶液中,成盐完全后减压除去溶剂,即得所述芳基烷基醚化合物的药学上可接受的盐。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述醚化反应是在无水溶剂中进行,所述溶剂为二氯甲烷、二氧六环、甲苯或四氢呋喃。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述酰化反应是在碱和/或缩合剂的作用下进行,所述碱为三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、K2CO3或Cs2CO3,所述缩合剂为HATU、HOBT或EDCI。
6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述水解反应是在碱的作用下进行,所述碱选自LiOH、NaOH或KOH。
7.一种药物组合物,其特征在于,所述药物组合物包含权利要求1 2任一所述芳基烷基~
醚化合物和/或其衍生物以及药学上可接受的载体。
8.一种权利要求1 2任一所述的芳基烷基醚化合物及其衍生物在制备吲哚胺2,3‑双加~
氧酶1抑制剂药物中的应用。
9.一种以下任一化合物在制备吲哚胺2,3‑双加氧酶1抑制剂药物中的应用,所述化合物选自:
(S)‑N‑(2‑乙氧基苯基)‑4‑((1‑((4‑氟苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(3),
(S)‑N‑(2‑乙氧基苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(4),
(S)‑N‑(2‑甲氧基苯基)‑4‑((1‑((4‑溴苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(11),
(R)‑N‑(2‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(15),
(S)‑N‑(2‑甲基‑4‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(19),
(S)‑N‑(2‑甲基苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(29),
(R)‑N‑(2‑甲基苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(30),
(S)‑N‑(2‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(40),
(S)‑N‑((3‑三氟甲基)苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(53)。
10.一种权利要求7所述的药物组合物在制备吲哚胺2,3‑双加氧酶1抑制剂药物中的应用。
11.根据权利要求8 10任一所述的应用,其特征在于,所述药物为治疗吲哚胺2,3‑双加~
氧酶1介导的免疫抑制相关疾病的药物。
12.根据权利要求11所述的应用,其特征在于,所述吲哚胺2,3‑双加氧酶1介导的免疫抑制相关疾病为肿瘤。
说明书 :
芳基烷基醚化合物及其衍生物,制备方法、药物组合物和应用
技术领域
制备方法、药物组合物和应用。
背景技术
胞)中表达,细胞因子如IFN‑γ、TNF‑α、IL‑1β和IL‑6可诱导IDO1表达。
的调控作用:一方面,色氨酸的耗竭可通过激活GCN2通路诱导T细胞分裂周期停滞于G1期,
+
从而抑制T细胞的增殖,同时还抑制初始CD4T细胞分化为辅助性T细胞17(Th17),进而产生
免疫抑制;另一方面,犬尿氨酸等色氨酸代谢产物具有细胞毒性,可以杀灭T细胞和自然杀
+
伤(NK)细胞,而且这些代谢产物还可以通过激活芳香烃受体(AhR)来诱导CD4T细胞分化为
调节性T细胞(Treg),并促进树突状细胞(DC)转化成致耐受性DC;此外,色氨酸代谢产物可
以通过下调NK细胞受体的表达来抑制NK细胞的功能,这些都可以进一步抑制机体的免疫反
应。
导致色氨酸耗竭和犬尿氨酸等代谢产物聚积,从而抑制母体的T细胞反应,诱导母体免疫耐
受,确保胎儿不被母体的免疫系统排斥。而在宿主微环境中的色氨酸耗竭使其不能为病原
微生物复制提供所必需的色氨酸,从而导致病原微生物死亡,与此同时IDO1介导的免疫抑
制可以避免机体免疫系统的过度激活。IDO1对移植组织在新宿主中的存活也发挥免疫抑制
作用。这些研究结果说明IDO1是一种免疫调节酶,参与机体的免疫耐受。
中,过度表达的IDO1所介导的色氨酸局部耗竭及其代谢产物的聚积可以抑制T细胞的激活,
导致机体的免疫耐受。
帕金森病、帕金森综合症和运动障碍性疾病的发生密切相关。神经精神疾病如抑郁症、精神
分裂症、焦虑症也与IDO1过度表达和犬尿氨酸等代谢产物水平升高有关。IDO1的过度表达
造成色氨酸耗竭,从而减少用于合成神经递质5‑羟色胺的色氨酸的量,导致5‑羟色胺缺乏,
再加上具有神经毒性的犬尿氨酸和喹啉酸等代谢产物的聚积,共同促进神经精神疾病的发
生,而且是多种心境障碍的因素。
犬尿氨酸/色氨酸比值均明显升高。
积,从而诱导肿瘤免疫逃逸,帮助肿瘤细胞逃避机体免疫系统的攻击。
强机体的免疫应答,因此IDO1抑制剂可用于治疗或预防由IDO1介导的免疫抑制所引起的上
述相关疾病,包括癌症、病毒感染、神经变性疾病、白内障、器官移植排斥、抑郁症和自身免
疫性疾病等。此外,IDO1抑制剂还可以和其他化疗剂、靶向抗肿瘤药物、免疫检查点抑制剂、
免疫检查点激动剂、抗肿瘤疫苗、抗病毒剂、抗病毒疫苗、细胞因子疗法、过继性细胞免疫治
疗和放射治疗联合使用,达到协同或增强疗法的目的。
床上侧重开发与不含血红素的IDO1结合的新一代apo‑IDO1抑制剂。人们希望通过研发有别
于早期发现的第一代IDO1抑制剂(与含血红素的IDO1结合的holo‑IDO1抑制剂)来获得临床
试验的突破。因此新一代的apo‑IDO1抑制剂也许是未来IDO1抑制剂研发的主流方向。
发明内容
基烷基醚化合物和/或其衍生物的药物组合物,第四目的是提供所述芳基烷基醚化合物及
其衍生物在制备吲哚胺2,3‑双加氧酶1抑制剂药物中的应用。
体、前药、溶剂化物、溶剂化物的盐、结晶、药学上可接受的盐或它们的混合物:
基;
哚基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并呋喃基、苯
并噻吩基、2,3‑二氢苯并[1,4]二氧杂环己烯基、或苯并[1,3]二氧杂环戊烯基。
乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸、琥珀酸、富马酸、水杨酸、苯基乙酸或杏仁酸。
吡啶、K2CO3或Cs2CO3,所述缩合剂为HATU、HOBT或EDCI;水解反应是在碱的作用下进行,所述
碱选自LiOH、NaOH或KOH。
体、悬浮液和针剂(溶液和悬浮液)。
常用的载体。例如:水、乙醇、丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、聚乙氧基化的异硬脂醇和聚乙
烯脱水山梨醇的脂肪酸酯等。此外,还可以加入通常溶解剂和缓冲剂等。
癌症、病毒感染、神经变性疾病、白内障、器官移植排斥、抑郁症或自身免疫性疾病。其中,所
述癌症为恶性黑色瘤、肺癌、乳腺癌、胃癌、结肠癌、膀胱癌、胰腺癌、淋巴癌、白血病、前列腺
癌、睾丸癌、肾癌、脑癌、头颈癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、间皮癌、甲状腺瘤、肝癌、食管
癌中的一种或多种;所述病毒感染为人类免疫缺陷病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、流
感病毒、脊髓灰质病毒、巨细胞病毒、柯萨奇病毒、人类乳头状瘤病毒、爱泼斯坦‑巴尔病毒、
水痘‑带状疱疹病毒中的一种或多种引起的感染;所述神经变性疾病为记忆障碍症、阿尔茨
海默病、认知障碍症、老年痴呆症、帕金森症和运动障碍性疾病中的一种或多种;所述自身
免疫性疾病为类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、皮肌炎、硬皮病、结节性脉管炎、多发性硬
化症、重症肌无力、混合性结缔组织病、银屑病、由于感染引起的自身免疫反应中的一种或
多种。
方法包括但不限于一种或多种化疗剂、靶向抗肿瘤药物、免疫检查点抑制剂、免疫检查点激
动剂、抗肿瘤疫苗、抗病毒剂、抗病毒疫苗、细胞因子疗法、过继性细胞免疫治疗或放射治
疗。其中,所述化疗剂不限于烷化剂、微管蛋白抑制剂、拓扑酶抑制剂、铂类药物、抗代谢类
药物或激素类抗肿瘤药物;所述靶向抗肿瘤药物不限于蛋白激酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、蛋
白酶体抑制剂、异柠檬酸脱氢酶抑制剂、基于表观遗传学的抗肿瘤药物或细胞周期信号通
路抑制剂;所述免疫检查点抑制剂不限于CTLA‑4抑制剂、PD‑1抑制剂、PD‑L1抑制剂、PD‑L2
抑制剂、TIM‑3抑制剂、VISTA抑制剂、LAG3抑制剂、TIGIT抑制剂、A2AR抑制剂或VTCN1抑制
剂;所述免疫检查点激动剂不限于STING激动剂、4‑1BB激动剂、OX40激动剂、RORγ激动剂或
ICOS激动剂。
子水平、细胞水平和生物体内均可以发挥药效,并且治疗效果更优异,最优可达到级别;
具体实施方式
谱仪测定;薄层层析(TLC)使用青岛海洋化学有限公司生产HG/T2354‑92型GF254薄层层析
硅胶,ZF7型三用紫外分析仪254nm显色;柱色谱使用青岛海洋化工厂粗孔(ZCX‑II)型300‑
400目柱层析硅胶。
19.72mmol),滴毕后保持低温反应2h,撤去冰盐浴,室温反应5h,减压旋除溶剂,缓慢加入
30mL水,乙酸乙酯萃取(3×15mL),合并有机相,饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减
压浓缩,硅胶柱层析纯化(PE:EA=20:1),得白色固体2.05g,收率69%。MS(ESI)m/z:223.1
‑ 1
[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)7.91(d,J=8.6Hz,2H),7.05(d,J=8.6Hz,2H),
4.91(s,2H),3.82(s,3H),3.71(s,3H)。
水,用稀盐酸调pH至4,乙酸乙酯萃取(3×15mL),饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,
‑
减压浓缩,得白色固体1.50g,收率93.8%,MS(ESI)m/z:209.1[M‑H]。
氯,加入3mL无水二氯甲烷溶解,在冰浴下将其缓慢滴入4‑溴苯胺(1.06g,6.17mmol)和三乙
胺(2.50g,24.67mmol)混合的二氯甲烷(4mL)溶液中,撤去冰浴,室温反应5h。旋除溶剂,加
入20mL水,乙酸乙酯萃取(3×15mL),合并有机相,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,硅胶柱
‑ 1
层析纯化(PE:EA=15:1),得白色固体1.5g,收率66.7%。MS(ESI)m/z:362.0[M‑H] ;H NMR
(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.23(s,1H),7.91(d,J=8.9Hz,2H),7.69(d,J=9.0Hz,2H),
7.50(d,J=9.0Hz,2H),7.05(d,J=9.0Hz,2H),4.91(s,2H),3.79(s,3H)。
‑
干燥,得白色固体630mg,收率65%,MS(ESI)m/z:348.0[M‑H]。
反应1.5h,加入2‑乙氧基苯胺(90.10mg,656.83μmol),室温反应8h,加入10mL水,乙酸乙酯
萃取(3×15mL),合并有机相,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,硅胶柱层析纯化(PE:EA=
‑ 1
10:1),得白色固体150mg,收率49%。MS(ESI)m/z:467.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ
(ppm)10.30(s,1H),9.95(s,1H),8.00‑7.91(m,2H),7.83(dd,J=7.8,1.6Hz,1H),7.69‑
7.59(m,2H),7.58‑7.49(m,2H),7.20‑7.05(m,4H),6.95(t,J=7.6Hz,1H),4.82(s,2H),
4.10(q,J=6.9Hz,2H),1.36(t,J=6.9Hz,3H)。
DEAD(3.43g,19.72mmol),滴毕后保持低温反应2h,撤去冰盐浴,室温反应5h,减压旋除溶
剂,缓慢加入30mL水,乙酸乙酯萃取(3×15mL),合并有机相,饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠
干燥,过滤,减压浓缩,硅胶柱层析纯化(PE:EA=20:1),得白色固体2.50g,收率75.3%。MS
‑ 1
(ESI)m/z:251.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)7.87(dd,J=8.8,7.1Hz,2H),6.87
(dd,J=8.8,7.3Hz,2H),3.65(s,3H),1.57(s,6H)。
用稀盐酸调pH至4,乙酸乙酯萃取(3×15mL),饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压
‑ 1
浓缩,得白色固体1.73g,收率91.5%。MS(ESI)m/z:237.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ
(ppm)12.98(s,1H),7.85(dd,J=8.5,7.1Hz,2H),6.85(dd,J=8.6,7.3Hz,2H),3.89(s,
3H),1.57(s,6H)。
的草酰氯,加入3mL无水二氯甲烷溶解,在冰浴下将其缓慢滴入4‑溴苯胺(0.95g,5.49mmol)
和三乙胺(2.22g,21.97mmol)混合的二氯甲烷(4mL)溶液中,撤去冰浴,室温反应5h,减压旋
除溶剂,加入20mL水,乙酸乙酯萃取(3×15mL),合并有机相,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓
缩,硅胶柱层析纯化(PE:EA=15:1),得白色固体1.70g,收率79%。MS(ESI)m/z:390.0[M‑
‑ 1
H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.15(s,1H),7.95‑7.89(m,2H),7.66‑7.57(m,2H),
7.55‑7.43(m,2H),7.04‑6.92(m,2H),3.79(s,3H),1.60(s,6H)。
‑
干燥,得白色固体730mg,收率75%,MS(ESI)m/z:376.0[M‑H]。
反应1.5h,加入2‑乙氧基苯胺(90mg,656.83μmol),室温反应8h,加入10mL水,乙酸乙酯萃取
(3×15mL),合并有机相,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,硅胶柱层析纯化(PE:EA=10:
‑ 1
1),得白色固体105mg,收率53%。MS(ESI)m/z:495.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ
(ppm)10.20(s,1H),9.22(s,1H),8.00‑7.93(m,2H),7.83(dd,J=7.9,1.6Hz,1H),7.70‑
7.59(m,2H),7.58‑7.49(m,2H),7.20‑7.05(m,4H),6.95(t,J=7.7Hz,1H),4.15(q,J=
6.9Hz,2H),1.65(s,6H),1.36(t,J=6.9Hz,3H)。
19.72mmol),滴毕后保持低温反应2h,撤去冰盐浴,室温反应5h,减压旋除溶剂,缓慢加入
30mL水,乙酸乙酯萃取(3×15mL),合并有机相,饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减
压浓缩,硅胶柱层析纯化(PE:EA=20:1),得无色油状液体2.25g,收率72%。MS(ESI)m/z:
‑ 1
237.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)7.94‑7.87(m,2H),7.02‑6.96(m,2H),5.14
(q,J=6.7Hz,1H),3.82(s,3H),3.69(s,3H),1.54(d,J=6.8Hz,3H)。
用稀盐酸调pH至4,乙酸乙酯萃取(3×15mL),饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压
‑ 1
浓缩,得无色油状液体1.80g,收率95.7%。MS(ESI)m/z:224.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑
d6)δ(ppm)12.99(s,1H),7.87(dd,J=8.8,7.1Hz,2H),6.87(dd,J=8.8,7.3Hz,2H),5.14
(q,J=6.7Hz,1H),3.82(s,3H),1.54(d,J=6.8Hz,3H)。
加入3mL无水二氯甲烷溶解,在冰浴下将其缓慢滴入4‑氟苯胺(0.49g,4.45mmol)和三乙胺
(1.80g,17.80mmol)混合的二氯甲烷(4mL)溶液中,撤去冰浴,室温反应5h。旋除溶剂,加入
20mL水,乙酸乙酯萃取(3×15mL),合并有机相,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,硅胶柱层
‑ 1
析纯化(PE:EA=15:1),得白色固体1.2g,收率85%。MS(ESI)m/z:316.1[M‑H] ;H NMR
(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.30(s,1H),7.92(d,J=8.9Hz,2H),7.59(d,J=9.0Hz,2H),
7.49(d,J=9.0Hz,2H),7.02(d,J=9.0Hz,2H),5.00(q,J=6.8Hz,1H),3.80(s,3H),1.57
(d,J=6.7Hz,3H)。
‑
干燥,得白色固体550mg,收率57%,MS(ESI)m/z:362.0[M‑H]。
入2‑乙氧基苯胺(135.7mg,989.15μmol),室温反应8h,加入10mL水,乙酸乙酯萃取(3×
15mL),合并有机相,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,硅胶柱层析纯化(PE:EA=10:1),得
‑ 1
白色固体205mg,收率49%。MS(ESI)m/z:421.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)
10.26(s,1H),9.21(s,1H),7.92(d,J=8.4Hz,2H),7.83(dd,J=7.8,1.6Hz,1H),7.66(dd,J
=9.0,5.0Hz,2H),7.27‑7.01(m,6H),7.00‑6.90(m,1H),5.00(q,J=6.6Hz,1H),4.09(q,J
=6.9Hz,2H),1.60(d,J=6.6Hz,3H),1.36(t,J=6.9Hz,3H)。
332.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.33(s,1H),7.90(d,J=8.5Hz,2H),7.62
(d,J=8.6Hz,2H),7.35(d,J=8.6Hz,2H),7.05(d,J=9.0Hz,2H),5.01(q,J=6.8Hz,1H),
3.80(s,3H),1.57(d,J=6.7Hz,3H)。(S)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧
基)苯甲酸(4D)的合成
的合成
H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.34(s,1H),9.20(s,1H),8.05‑7.89(m,2H),7.82
(dd,J=7.9,1.6Hz,1H),7.68(dd,J=10.5,3.8Hz,2H),7.39(td,J=7.3,6.6Hz,2H),7.21‑
7.04(m,4H),6.94(td,J=7.6,1.4Hz,1H),5.01(q,J=6.6Hz,1H),4.09(q,J=7.1Hz,2H),
1.59(d,J=6.5Hz,3H),1.34(t,J=7.0Hz,3H)。
状液体,收率87%,MS(ESI)m/z:224.1[M‑H]。
316.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.41(s,1H),7.90‑7.80(m,2H),7.62(d,J=
8.6Hz,2H),7.33(d,J=8.6Hz,2H),7.09‑6.98(m,2H),5.01(q,J=6.8Hz,1H),3.80(s,3H),
1.57(d,J=6.7Hz,3H)。
m/z:421.1[M‑H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.41(s,1H),9.20(s,1H),7.97‑7.90
(m,2H),7.82(dd,J=7.9,1.7Hz,1H),7.64‑7.59(m,1H),7.45‑7.32(m,2H),7.17‑7.05(m,
4H),6.99‑6.88(m,2H),5.02(q,J=6.6Hz,1H),4.09(q,J=6.9Hz,2H),1.60(d,J=6.6Hz,
3H),1.35(t,J=6.9Hz,3H)。
332.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.39(s,1H),7.97‑7.87(m,2H),7.57‑7.49
(m,2H),7.36(d,J=8.6Hz,2H),7.09‑6.98(m,2H),5.01(q,J=6.9Hz,1H),3.82(s,3H),
1.57(d,J=6.9Hz,3H)。
H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.39(s,1H),9.21(s,1H),7.92(d,J=8.3Hz,2H),
7.88‑7.79(m,2H),7.54(d,J=8.2Hz,1H),7.36(t,J=8.2Hz,1H),7.20‑7.05(m,5H),6.94
(t,J=7.6Hz,1H),5.02(q,J=6.5Hz,1H),4.09(q,J=6.9Hz,2H),1.60(d,J=6.5Hz,3H),
1.35(t,J=6.9Hz,3H)。
316.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.04(s,1H),7.93(d,J=8.7Hz,2H),7.78‑
7.75(m,1H),7.33‑7.15(m,5H),5.20(q,J=6.9Hz,1H),3.80(s,3H),1.59(d,J=6.9Hz,
3H)。
H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.03(s,1H),9.25(s,1H),7.93(d,J=8.8Hz,2H),
7.85‑7.82(m,1H),7.79‑7.73(m,1H),7.35‑7.05(m,7H),6.95(t,J=7.7Hz,1H),5.21‑5.13
(m,1H),4.10(q,J=6.8Hz,2H),1.64‑1.53(m,3H),1.41‑1.30(m,3H)。
(ESI)m/z:350.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.23(s,1H),8.03‑7.89(m,2H),
7.78‑7.75(m,1H),7.72‑7.66(m,1H),7.42(t,J=7.9Hz,1H),7.21(t,J=8.2Hz,1H),6.94
(t,J=7.6Hz,1H),5.20(q,J=6.9Hz,1H),3.70(s,3H),1.59(d,J=6.9Hz,3H)。
合成
H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.22(s,1H),9.22(s,1H),8.05‑7.90(m,2H),7.82
(dd,J=7.9,1.6Hz,1H),7.72‑7.66(m,1H),7.40(t,J=7.9Hz,1H),7.21(t,J=8.2Hz,1H),
7.18‑7.05(m,4H),6.95(t,J=7.6Hz,1H),5.17(t,J=6.6Hz,1H),4.10(q,J=6.9Hz,2H),
1.60(d,J=6.6Hz,3H),1.35(t,J=6.9Hz,3H)。
(ESI)m/z:350.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.11(s,1H),8.00‑7.85(m,2H),
7.88‑7.75(m,2H),7.72‑7.65(m,2H),7.50(d,J=10.6Hz,1H),5.15(q,J=6.9Hz,1H),3.70
(s,3H),1.59(d,J=6.9Hz,3H)。
合成
H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.14(d,J=4.1Hz,1H),9.22(d,J=4.1Hz,1H),7.93
(dd,J=8.7,4.1Hz,2H),7.88‑7.74(m,2H),7.52(dd,J=10.6,4.1Hz,1H),7.33‑7.24(m,
1H),7.20‑7.04(m,4H),7.00‑6.91(m,1H),5.17(t,J=6.7Hz,1H),4.09(q,J=6.9Hz,2H),
1.59(d,J=6.6Hz,3H),1.35(t,J=6.9Hz,3H)。
(ESI)m/z:350.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.47(s,1H),8.00‑7.86(m,2H),
7.80(t,J=11.8Hz,2H),7.49(t,J=8.5Hz,1H),7.45(d,J=8.9Hz,1H),7.39(d,J=8.6Hz,
1H),5.01(q,J=6.5Hz,1H),3.68(s,3H),1.59(d,J=6.5Hz,3H)。
的合成
H];H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.49(s,1H),9.18(s,1H),7.97‑7.87(m,2H),7.81(t,
J=11.8Hz,2H),7.53(t,J=8.5Hz,1H),7.45(d,J=8.9Hz,1H),7.17‑7.03(m,4H),6.94(t,
J=7.5Hz,1H),5.02(q,J=6.5Hz,1H),4.10(q,J=7.1Hz,2H),1.59(d,J=6.6Hz,3H),1.35
(t,J=7.0Hz,3H)。
376.0[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.33(s,1H),8.01‑7.90(m,2H),7.75(d,J=
7.9,Hz,1H),7.66‑7.57(m,2H),7.55‑7.49(m,2H),7.14(d,J=8.9Hz,1H),5.01(q,J=
6.7Hz,1H),3.58(s,3H),1.59(d,J=6.6Hz,3H)。
H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.35(s,1H),9.28(s,1H),7.93(dd,J=9.0,2.2Hz,
2H),7.77(dt,J=7.9,2.2Hz,1H),7.66‑7.59(m,2H),7.55‑7.49(m,2H),7.16(dd,J=8.9,
7.4Hz,1H),7.07(d,J=9.7Hz,3H),7.00‑6.93(m,1H),5.01(d,J=6.7Hz,1H),3.82(s,3H),
1.59(d,J=6.6Hz,3H)。
376.0[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.32(s,1H),8.00‑7.90(m,2H),7.75(d,J=
7.9,Hz,1H),7.67‑7.57(m,2H),7.52‑7.49(m,2H),7.14(d,J=8.9Hz,1H),5.01(q,J=
6.7Hz,1H),3.58(s,3H),1.59(d,J=6.6Hz,3H)。
H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.35(s,1H),9.72(s,1H),8.00‑7.92(m,2H),7.66‑
7.58(m,2H),7.51(d,J=8.9Hz,2H),7.31(d,J=7.8Hz,1H),7.26(d,J=7.3Hz,1H),7.24‑
7.12(m,2H),7.11‑7.04(m,2H),5.02(d,J=7.0Hz,1H),2.21(s,3H),1.59(d,J=6.9,Hz,
3H)。
332.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.31(s,1H),7.90(d,J=8.5Hz,2H),7.62
(d,J=8.6Hz,2H),7.33(d,J=8.6Hz,2H),7.05(d,J=9.0Hz,2H),5.01(q,J=6.8Hz,1H),
3.80(s,3H),1.57(d,J=6.7Hz,3H)。
H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.35(s,1H),10.09(s,1H),7.99‑7.90(m,2H),7.82‑
7.72(m,2H),7.71‑7.64(m,2H),7.42‑7.30(m,4H),7.11‑7.04(m,3H),5.02(q,J=6.5Hz,
1H),1.59(d,J=6.5Hz,3H)。
(ESI)m/z:435.2[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.31(s,1H),9.74(s,1H),8.01‑
7.88(m,2H),7.73‑7.61(m,2H),7.45‑7.30(m,3H),7.23(d,J=11.0Hz,3H),7.13‑7.00(m,
2H),5.01(t,J=6.7Hz,1H),3.17(d,J=6.9Hz,1H),1.60(d,J=6.7Hz,3H),1.14(d,J=
6.9Hz,6H)。
收率68%,MS(ESI)m/z:237.1[M‑H]。
[M‑H]。(R)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酸甲酯(15C)的合成
z:332.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.31(s,1H),7.92(d,J=8.5Hz,2H),7.62
(d,J=8.5Hz,2H),7.33(d,J=8.6Hz,2H),7.07(d,J=9.0Hz,2H),5.00(q,J=6.8Hz,1H),
3.85(s,3H),1.57(d,J=6.7Hz,3H)。
氯,加入3mL无水二氯甲烷溶解,在冰浴下将其缓慢滴入2‑氯苯胺(59.85mg,0.47mmol)和三
乙胺(189.89mg,1.88mmol)混合的二氯甲烷(2mL)溶液中,撤去冰浴,40℃反应5h,旋除溶
剂,加入20mL水,乙酸乙酯萃取(3×15mL),合并有机相,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,
‑ 1
硅胶柱层析纯化(PE:EA=4:1),得白色固体130mg,收率65%。MS(ESI)m/z:427.1[M‑H] ;H
NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.34(s,1H),9.89(s,1H),8.07‑7.92(m,2H),7.76‑7.63(m,
2H),7.55(d,J=8.6Hz,2H),7.47‑7.33(m,2H),7.27(d,J=8.6Hz,2H),7.18‑7.05(m,2H),
5.05(q,J=6.5Hz,1H),1.60(d,J=6.6Hz,3H)。
(ESI)m/z:427.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.34(s,1H),10.24(s,1H),8.00‑
7.90(m,3H),7.72‑7.64(m,3H),7.42‑7.33(m,3H),7.14(d,J=8.1Hz,1H),7.11‑7.06(m,
2H),5.03(q,J=6.5Hz,1H),1.59(d,J=6.6Hz,3H)。
(ESI)m/z:427.1[M‑H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.36(s,1H),10.22(s,1H),7.98‑
7.89(m,2H),7.86‑7.75(m,2H),7.71‑7.62(m,2H),7.45‑7.32(m,4H),7.13‑7.01(m,2H),
5.02(q,J=6.5Hz,1H),1.59(d,J=6.5Hz,3H)。
60%。MS(ESI)m/z:441.1[M‑H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.36(s,1H),9.97(s,
1H),7.99‑7.91(m,2H),7.68(d,J=1.9Hz,1H),7.42‑7.31(m,3H),7.31‑7.27(m,2H),7.24
(t,J=7.9Hz,1H),7.10(d,J=1.8Hz,1H),7.07(d,J=1.8Hz,1H),5.06‑4.99(m,1H),2.21
(d,J=5.7Hz,3H),1.59(dd,J=6.8,1.7Hz,3H)。
57%。MS(ESI)m/z:441.1[M‑H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.34(s,1H),9.76(s,
1H),7.99‑7.90(m,2H),7.71‑7.62(m,2H),7.44‑7.33(m,4H),7.26(dd,J=8.5,2.5Hz,1H),
7.12‑7.04(m,2H),5.02(q,J=6.5Hz,1H),2.21(s,3H),1.59(d,J=6.6Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:445.1[M‑H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.34(s,1H),10.13(s,1H),
7.95(d,J=8.8Hz,2H),7.66(d,J=8.7Hz,2H),7.55(dd,J=8.4,5.1Hz,1H),7.44(dd,J=
8.4,6.7Hz,1H),7.38(d,J=9.0,2.5Hz,2H),7.24(td,J=8.2,7.5Hz,1H),7.09(d,J=
9.0Hz,2H),5.04(q,J=6.6Hz,1H),1.59(dd,J=6.6,2.2Hz,3H)。
MS(ESI)m/z:445.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.31(s,1H),10.00(s,1H),
7.95(t,J=5.7Hz,2H),7.65(dd,J=8.6,6.3Hz,2H),7.55‑7.45(m,1H),7.47‑7.35(m,2H),
7.30(d,J=8.6Hz,1H),7.09(d,J=8.4Hz,3H),5.02(q,J=6.6Hz,1H),1.59(d,J=6.6Hz,
3H)。
m/z:399.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.27(s,1H),7.98(d,J=7.9Hz,1H),
7.80(dd,J=8.9,4.5Hz,2H),7.66(t,J=6.7Hz,2H),7.51‑7.31(m,2H),7.15‑6.93(m,2H),
5.10‑4.92(m,1H),3.73(s,1H),1.76(d,J=21.9Hz,6H),1.57(t,J=5.8Hz,3H),1.29(s,
4H)。
75%。MS(ESI)m/z:401.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,Chloroform‑d)δ(ppm)8.10(s,1H),7.78
(d,J=8.4Hz,2H),7.50(d,J=8.5Hz,2H),7.31(d,J=8.5Hz,2H),7.02(d,J=8.4Hz,2H),
5.92(d,J=7.7Hz,1H),4.86(q,J=6.7Hz,1H),4.30‑4.13(m,1H),4.02(dd,J=11.7,
3.7Hz,2H),3.55(t,J=11.8Hz,2H),2.02(dd,J=11.8,3.7Hz,2H),1.69(d,J=6.7Hz,3H),
1.66‑1.58(m,2H)。
69%。MS(ESI)m/z:414.2[M‑H];H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.29(s,1H),8.05(d,J=
7.8Hz,1H),7.80(d,J=8.4Hz,2H),7.65(d,J=8.4Hz,2H),7.37(d,J=8.5Hz,2H),6.99(d,
J=8.4Hz,2H),4.97(q,J=6.7Hz,1H),3.67(s,1H),2.74(d,J=11.3Hz,2H),2.15(s,3H),
1.92(t,J=11.5Hz,2H),1.72(d,J=12.5Hz,2H),1.62‑1.48(m,5H)。
65%。MS(ESI)m/z:500.2[M‑H];H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.27(s,1H),8.07(d,J=
7.7Hz,1H),7.80(d,J=8.6Hz,2H),7.65(d,J=8.3Hz,2H),7.37(t,J=6.0Hz,2H),7.01(d,
J=8.6Hz,2H),4.97(q,J=6.5Hz,1H),4.07‑3.85(m,3H),2.84(s,2H),1.85‑1.69(m,4H),
1.56(d,J=6.6Hz,3H),1.41(s,9H)。
‑ 1
NaOH水溶液将pH至8,抽滤,干燥,得白色固体110mg,收率92%。MS(ESI)m/z:400.1[M‑H] ;H
NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.32(s,1H),8.06(d,J=7.8Hz,1H),7.91‑7.74(m,3H),7.65
(dd,J=8.9,2.6Hz,2H),7.36(dd,J=8.9,2.5Hz,2H),7.09‑6.92(m,2H),4.97(q,J=
5.7Hz,1H),3.79(s,1H),2.94(d,J=11.0Hz,2H),2.05‑1.92(m,3H),1.70(d,J=12.3Hz,
2H),1.56(d,J=5.9Hz,3H),1.38(d,J=12.1Hz,2H)。
燥,过滤,减压浓缩,硅胶柱层析纯化(PE:EA=4:1),得白色固体850mg,收率59.8%。MS
‑ 1
(ESI)m/z:242.0[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)9.79(s,1H),7.77‑7.66(m,2H),
7.48(dd,J=8.9,2.0Hz,2H),5.75(d,J=5.0Hz,1H),1.30(dd,J=6.7,1.7Hz,3H)。
‑
179.0[M‑H]。
加入3mL无水二氯甲烷溶解,在冰浴下将其缓慢滴入2‑甲基苯胺(549.31mg,5.13mmol)和三
乙胺(2.07g,20.51mmol)混合的二氯甲烷(4mL)溶液中,撤去冰浴,室温反应5h。旋除溶剂,
加入20mL水,乙酸乙酯萃取(3×15mL),合并有机相,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,硅胶
‑
柱层析纯化(PE:EA=4:1),得白色固体1.2g,收率82.7%,MS(ESI)m/z:268.1[M‑H]。
‑ 1
用稀盐酸调pH至4,抽滤,干燥,得白色固体0.89g,收率92.5%。MS(ESI)m/z:226.1[M‑H] ;H
NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.05(s,1H),9.59(s,1H),7.91‑7.79(m,2H),7.37‑7.08(m,
4H),6.90‑6.80(m,2H),2.22(s,3H)。
mol),反应2h之后,转移至室温反应8h,有白色固体析出,缓慢滴加1mL甲醇进行淬灭处理,
减压旋除溶剂,加入20mL水,加入乙酸乙酯(3×15mL)萃取,合并有机相,无水硫酸钠干燥,
过滤,减压浓缩,硅胶柱层析纯化(PE:EA=3:1),得白色固体105mg,收率52.8%。MS(ESI)m/
‑ 1
z:451.1[M‑H] ;H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.35(s,1H),9.72(s,1H),8.00‑7.92(m,
2H),7.66‑7.58(m,2H),7.51(d,J=8.9Hz,2H),7.31(d,J=7.8Hz,1H),7.26(d,J=7.3Hz,
1H),7.24‑7.12(m,2H),7.11‑7.04(m,2H),5.02(d,J=7.0Hz,1H),2.21(s,3H),1.59(d,J=
6.9,Hz,3H)。
m/z:242.0[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)9.72(s,1H),7.75‑7.68(m,2H),7.48(d,
J=8.9Hz,2H),5.73(d,J=6.5Hz,1H),1.30(dd,J=6.7,1.7Hz,3H)。
z:451.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.33(s,1H),9.72(s,1H),8.00‑7.92(m,
2H),7.66‑7.58(m,2H),7.50(d,J=8.9Hz,2H),7.31(d,J=7.8Hz,1H),7.26(d,J=7.3Hz,
1H),7.22‑7.12(m,2H),7.11‑7.04(m,2H),5.02(d,J=7.0Hz,1H),2.21(s,3H),1.59(d,J=
6.9,Hz,3H)。
m/z:198.0[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)9.82(s,1H),7.75‑7.66(m,2H),7.48
(dd,J=8.9,2.5Hz,2H),5.75(d,J=6.5Hz,1H),1.30(dd,J=6.7,1.7Hz,3H)。
z:407.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.39(s,1H),9.70(s,1H),8.03‑7.95(m,
2H),7.66‑7.58(m,2H),7.50(d,J=8.9Hz,2H),7.31(d,J=7.8Hz,1H),7.26(d,J=7.3Hz,
1H),7.20‑7.10(m,2H),7.11‑7.04(m,2H),5.00(d,J=7.0Hz,1H),2.19(s,3H),1.59(d,J=
6.9,Hz,3H).
m/z:198.0[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)9.82(s,1H),7.75‑7.66(m,2H),7.48
(dd,J=8.9,2.5Hz,2H),5.75(d,J=6.5Hz,1H),1.30(dd,J=6.7,1.7Hz,3H)。
z:407.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.39(s,1H),9.70(s,1H),8.03‑7.95(m,
2H),7.66‑7.58(m,2H),7.50(d,J=8.9Hz,2H),7.31(d,J=7.8Hz,1H),7.26(d,J=7.3Hz,
1H),7.20‑7.10(m,2H),7.11‑7.04(m,2H),5.00(d,J=7.0Hz,1H),2.19(s,3H),1.59(d,J=
6.9,Hz,3H)。
(ESI)m/z:288.0[M‑H]。
H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.15(s,1H),7.96(t,J=2.1Hz,1H),7.94‑7.81(m,
2H),7.69(dd,J=8.3,1.9Hz,1H),7.36(t,J=8.1Hz,1H),7.13(dd,J=7.9,2.1Hz,1H),
6.97‑6.83(m,2H)。
z:427.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.34(s,1H),10.24(s,1H),8.00‑7.90(m,
3H),7.72‑7.64(m,3H),7.42‑7.33(m,3H),7.14(d,J=8.1Hz,1H),7.10‑7.06(m,2H),5.00
(q,J=6.5Hz,1H),1.59(d,J=6.6Hz,3H)。
z:427.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.33(s,1H),10.22(s,1H),8.00‑7.90(m,
3H),7.72‑7.64(m,3H),7.42‑7.33(m,3H),7.14(d,J=8.1Hz,1H),7.10‑7.06(m,2H),5.00
(q,J=6.5Hz,1H),1.59(d,J=6.6Hz,3H)。
(ESI)m/z:346.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.12(s,1H),7.98‑7.89(m,2H),
7.65‑7.57(m,2H),7.55‑7.43(m,2H),7.04‑6.92(m,2H),3.79(s,3H),1.50(s,6H)。
(ESI)m/z:332.1[M‑H]。
H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.22(s,1H),10.17(s,1H),7.95‑7.83(m,3H),7.67
(dd,J=14.5,8.6Hz,3H),7.34(d,J=7.6Hz,3H),7.11(d,J=8.0Hz,1H),6.99(d,J=
8.4Hz,2H),1.60(s,6H)。
MS(ESI)m/z:459.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.19(s,1H),10.13(s,1H),
7.92(d,J=8.7Hz,2H),7.78‑7.67(m,2H),7.60‑7.49(m,1H),7.49‑7.33(m,3H),7.29‑7.19
(m,1H),7.10‑6.98(m,2H),1.62(s,6H)。
56%。MS(ESI)m/z:455.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.20(s,1H),9.97(s,
1H),8.00‑7.89(m,2H),7.79‑7.68(m,2H),7.36(d,J=9.4Hz,3H),7.31‑7.19(m,2H),7.08‑
6.97(m,2H),2.22(s,3H),1.62(s,6H)。
(ESI)m/z:216.0[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)9.88(s,1H),7.73‑7.66(m,1H),
7.52(d,J=8.9Hz,2H),5.60(d,J=6.5Hz,1H),1.30(d,J=6.7Hz,3H)。
z:445.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)δ10.24(s,1H),10.11(s,1H),7.99‑7.91
(m,3H),7.77(t,J=8.6Hz,1H),7.69(d,J=8.2Hz,1H),7.51(dd,J=10.5,2.3Hz,1H),7.37
(t,J=8.1Hz,1H),7.28(dd,J=8.7,2.1Hz,1H),7.13(d,J=10.8Hz,1H),7.09(d,J=
8.6Hz,2H),5.17(q,J=6.5Hz,1H),1.59(d,J=6.5Hz,3H)。
z:425.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.10(s,1H),9.70(s,1H),8.03‑7.89(m,
2H),7.77(q,J=7.8Hz,1H),7.51(dt,J=9.9,5.1Hz,1H),7.37‑7.12(m,5H),7.11‑7.01(m,
2H),5.16(q,J=6.7Hz,1H),2.21(d,J=6.8Hz,3H),1.59(d,J=6.7Hz,3H)。
(ESI)m/z:306.0[M‑H]。
H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.19(s,1H),10.01(s,1H),7.86(d,J=8.4Hz,2H),
7.63‑7.50(m,1H),7.49‑7.38(m,1H),7.29‑7.17(m,1H),6.87(d,J=8.4Hz,2H)。
z:463.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.12(s,2H),7.96(d,J=8.4Hz,2H),7.77
(t,J=8.5Hz,1H),7.54(q,J=10.2,8.8Hz,2H),7.44(t,J=7.4Hz,1H),7.25(q,J=8.0Hz,
2H),7.09(d,J=8.3Hz,2H),5.17(q,J=6.9Hz,1H),1.59(d,J=6.5Hz,3H)。
254.1[M‑H]。
H];H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.12(s,1H),10.00(s,1H),7.87(dd,J=10.0,3.8Hz,
2H),7.76(d,J=8.0Hz,2H),7.33(t,J=7.9Hz,2H),7.08(q,J=7.5Hz,1H),6.98‑6.82(m,
2H)。(S)‑N‑苯基‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(39)的合成
z:393.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.35(s,1H),10.09(s,1H),7.99‑7.90(m,
2H),7.82‑7.72(m,2H),7.71‑7.64(m,2H),7.42‑7.30(m,4H),7.10‑7.04(m,3H),5.02(q,J
=6.5Hz,1H),1.59(d,J=6.5Hz,3H)。
z:288.0[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.11(s,1H),8.04(d,J=8.4Hz,2H),
7.63‑7.53(m,2H),7.41(t,J=7.3Hz,1H),7.36‑7.27(m,3H),2.32(s,3H)。
H]。(S)‑N‑(2‑氯苯基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰胺(40)
的合成
z:427.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.34(s,1H),9.89(s,1H),8.07‑7.92(m,
2H),7.76‑7.63(m,2H),7.55(d,J=8.6Hz,2H),7.47‑7.33(m,2H),7.27(d,J=8.6Hz,2H),
7.18‑7.05(m,2H),5.05(q,J=6.5Hz,1H),1.60(d,J=6.6Hz,3H)。
(ESI)m/z:302.1[M‑H]。
H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.13(s,1H),9.88(s,1H),7.87(dd,J=8.6,1.8Hz,
2H),7.35(dd,J=7.6,1.7Hz,1H),7.32‑7.20(m,2H),6.92‑6.83(m,2H),2.23(s,3H)。
z:441.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.36(s,1H),9.97(s,1H),7.98‑7.90(m,
2H),7.68(d,J=1.9Hz,1H),7.42‑7.31(m,3H),7.31‑7.27(m,2H),7.24(t,J=7.9Hz,1H),
7.10(d,J=1.8Hz,1H),7.07(d,J=1.8Hz,1H),5.06‑4.99(m,1H),2.21(d,J=5.7Hz,3H),
1.59(d,J=6.8Hz,3H)。
z:445.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.34(s,1H),10.13(s,1H),7.95(d,J=
8.8Hz,2H),7.66(d,J=8.7Hz,2H),7.55(dd,J=8.4,5.1Hz,1H),7.44(dd,J=8.4,6.7Hz,
1H),7.38(d,J=9.0,2.5Hz,2H),7.24(td,J=8.2,7.5Hz,1H),7.09(d,J=9.0Hz,2H),5.04
(q,J=6.6Hz,1H),1.59(dd,J=6.6,2.2Hz,3H)。
(ESI)m/z:322.1[M‑H]。
H] .H NMR(300MHz,Chloroform‑d)δ(ppm)8.43(d,J=8.3Hz,1H),8.20(s,1H),7.93(dd,J
=9.0,2.4Hz,2H),7.78‑7.59(m,2H),7.41‑7.23(m,4H)。
z:461.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.32(s,1H),9.95(s,1H),7.93(d,J=
8.3Hz,2H),7.78(d,J=7.9Hz,2H),7.67(d,J=8.5Hz,2H),7.51(d,J=7.7Hz,2H),7.38(d,
J=8.4Hz,2H),7.09(d,J=8.4Hz,2H),5.02(q,J=6.5Hz,1H),1.59(d,J=6.4Hz,3H)。
(ESI)m/z:322.1[M‑H]。
H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.16(s,1H),9.98‑9.86(m,1H),7.84(dq,J=11.0,
6.4Hz,2H),7.73(dd,J=9.2,6.4Hz,1H),7.31(d,J=6.7Hz,2H),6.86(d,J=10.4Hz,2H)。
z:445.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.32(s,1H),10.05(s,1H),7.94(d,J=
8.5Hz,2H),7.75(dd,J=6.6,2.4Hz,1H),7.66(d,J=8.5Hz,2H),7.44‑7.27(m,4H),7.09
(d,J=8.5Hz,2H),5.02(q,J=6.5Hz,1H),1.59(d,J=6.5Hz,3H)。
(ESI)m/z:333.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.90(s,1H),8.06‑7.98(m,1H),
7.57‑7.49(m,2H),7.38(d,J=8.6Hz,2H),7.06‑6.97(m,2H),5.01(q,J=6.9Hz,1H),3.83
(s,3H),1.56(d,J=6.9Hz,3H).
合成
H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.98(s,1H),9.61(s,1H),8.06(d,J=8.8Hz,1H),
7.94(d,J=9.0Hz,2H),7.51‑7.25(m,4H),7.25‑6.98(m,4H),5.05(q,J=6.4Hz,1H),2.09
(d,J=4.5Hz,3H),1.53(d,J=6.5Hz,3H)。
氯‑5‑氨基吡啶和3‑氯苯胺,制得白色固体,收率58%。MS(ESI)m/z:428.1[M‑H] ;H NMR
(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.34(s,1H),10.14(s,1H),8.80(t,J=2.7Hz,1H),8.26(dt,J=
8.9,2.7Hz,1H),7.72‑7.64(m,3H),7.50(d,J=8.7Hz,1H),7.42‑7.33(m,2H),7.14(d,J=
8.1Hz,1H),7.10‑7.06(m,2H),5.00(q,J=6.5Hz,1H),1.59(d,J=6.6Hz,3H)。
(ESI)m/z:289.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)11.13(s,1H),8.19(d,J=7.9Hz,
1H),8.14‑8.05(m,2H),7.91(t,J=7.8Hz,1H),7.36‑7.24(m,3H),2.37‑2.26(m,3H)。
H]。(S)‑N‑(6‑氯吡啶‑2‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰
胺(47)的合成
z:428.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.90(s,1H),10.31(s,1H),8.19(d,J=
7.9Hz,1H),8.14‑8.05(m,2H),7.91(t,J=7.8Hz,1H),7.77(d,J=8.1Hz,2H),7.43‑7.33
(m,3H),7.23(d,J=8.1Hz,2H),5.02(q,J=6.4Hz,1H),1.59(d,J=6.5Hz,3H)。
(ESI)m/z:289.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.82(s,1H),8.33(d,J=5.7Hz,
1H),8.07‑7.99(m,2H),7.95(d,J=1.8Hz,1H),7.74(dd,J=5.7,1.9Hz,1H),7.35(d,J=
8.7Hz,2H),2.32(s,3H)。
H]。(S)‑N‑(2‑氯吡啶‑4‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰
胺(48)的合成
z:428.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.82(s,1H),10.33(s,1H),8.33(d,J=
5.7Hz,1H),8.07‑7.98(m,2H),7.95(d,J=1.8Hz,1H),7.79(d,J=8.0Hz,2H),7.74(dd,J=
5.7,1.9Hz,1H),7.40‑7.31(m,2H),7.23(d,J=8.0Hz,2H),5.00(q,J=6.4Hz,1H),1.59(d,
J=6.5Hz,3H)。
(ESI)m/z:289.1[M‑H]。
H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.36(s,1H),10.21(s,1H),8.86(d,J=2.1Hz,1H),
8.43‑8.30(m,2H),7.95‑7.81(m,2H),6.99‑6.83(m,2H)。
z:428.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.95(s,1H),10.35(s,1H),8.35‑8.27(m,
1H),8.07‑7.98(m,2H),7.96‑7.90(m,1H),7.79(d,J=8.0Hz,2H),7.67(dd,J=5.0,1.9Hz,
1H),7.40‑7.31(m,2H),7.23(d,J=8.0Hz,2H),5.10(q,J=6.4Hz,1H),1.65(d,J=6.5Hz,
3H)。
MS(ESI)m/z:289.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,Chloroform‑d)δ(ppm)8.61(s,1H),8.50(d,J=
1.9Hz,1H),8.20(d,J=5.3Hz,1H),8.05‑7.93(m,2H),7.28(dd,J=6.3,2.3Hz,2H),7.11
(dd,J=5.4,2.0Hz,1H),2.36(s,3H)。
H]。(S)‑N‑(4‑氯吡啶‑2‑基)‑4‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧代丙烷‑2‑基)氧基)苯甲酰
胺(50)的合成
z:428.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.75(s,1H),9.79(s,1H),8.36(d,J=
5.4Hz,1H),8.29(d,J=2.0Hz,1H),7.94(d,J=8.2Hz,2H),7.76(d,J=8.4Hz,3H),7.35(d,
J=8.4Hz,2H),7.27(dd,J=5.3,1.9Hz,1H),6.84(d,J=8.3Hz,3H),5.75(q,J=6.4Hz,
1H),1.30(d,J=6.5Hz,3H).
‑ 1
428.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.75(s,1H),9.75(s,1H),8.56‑8.45(m,
1H),8.29‑8.15(m,2H),7.74(d,J=8.1Hz,2H),7.85(d,J=8.4Hz,2H),7.46‑7.32(m,3H),
7.20(d,J=7.7Hz,1H),5.73(q,J=6.4Hz,1H),1.30(d,J=6.5Hz,3H)。
m/z:180.0[M‑H]。
[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.82(s,1H),8.60(t,J=2.7Hz,1H),8.29‑8.19
(m,1H),8.11(q,J=2.5Hz,1H),7.89(d,J=13.7Hz,2H),7.46‑7.35(m,1H),7.18(dq,J=
7.4,2.1Hz,1H),2.37(d,J=2.4Hz,3H)。
[M‑H] .(S)‑N‑(3‑氯苯基)‑5‑((1‑((4‑氯苯基)氨基)‑1‑氧丙烷‑2‑基)氧基)吡啶啉酰胺
(52)的合成
z:428.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.82(s,1H),9.79(s,1H),8.60(t,J=
2.7Hz,1H),8.29‑8.19(m,1H),8.11(q,J=2.5Hz,1H),7.89(dd,J=13.7,8.3Hz,2H),7.77
(d,J=8.1Hz,2H),7.46‑7.30(m,3H),7.18(d,J=7.4Hz,1H),5.78(q,J=6.4Hz,1H),1.31
(d,J=6.5Hz,3H)。
氯苯胺和3‑(三氟甲基)苯胺,制得白色固体,收率60%。MS(ESI)m/z:461.1[M‑H] ;H NMR
(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.34(s,1H),10.21(s,1H),8.05‑7.95(m,3H),7.72‑7.65(m,
3H),7.40‑7.33(m,3H),7.14(d,J=8.5Hz,1H),7.10‑7.05(m,2H),5.00(q,J=6.6Hz,1H),
1.57(d,J=6.6Hz,3H)。
氟‑4‑氯苯胺和2‑甲基‑3‑氯苯胺,制得白色固体,收率65%。MS(ESI)m/z:459.1[M‑H] ;H
NMR(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)δ10.22(s,1H),10.01(s,1H),7.97‑7.90(m,3H),7.74(t,J=
8.6Hz,1H),7.65(d,J=8.2Hz,1H),7.51(d,J=10.5Hz,1H),7.37(t,J=8.1Hz,1H),7.28
(dd,J=8.7,2.1Hz,1H),7.15(d,J=10.8Hz,1H),7.09(d,J=8.6Hz,2H),5.17(q,J=
6.5Hz,1H),2.21(d,J=6.8Hz,3H),1.59(d,J=6.5Hz,3H)。
氯苯胺和3‑氟苯胺,制得白色固体,收率57%。MS(ESI)m/z:411.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,
DMSO‑d6)δ(ppm)10.40(s,1H),10.25(s,1H),8.08‑7.97(m,3H),7.75‑7.67(m,3H),7.40‑
7.33(m,3H),7.14(d,J=8.5Hz,1H),7.10‑7.05(m,2H),5.11(q,J=6.6Hz,1H),1.57(d,J=
6.6Hz,3H)。
氰基苯胺和3‑氯苯胺,制得白色固体,收率55%。MS(ESI)m/z:418.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,
DMSO‑d6)δ(ppm)10.33(s,1H),10.22(s,1H),8.00‑7.90(m,3H),7.72‑7.64(m,3H),7.42‑
7.33(m,3H),7.14(d,J=8.1Hz,1H),7.10‑7.06(m,2H),5.00(q,J=6.5Hz,1H),1.59(d,J=
6.6Hz,3H)。
氯苯胺和3‑氰基苯胺,制得白色固体,收率58%。MS(ESI)m/z:418.1[M‑H] ;H NMR(300MHz,
DMSO‑d6)δ(ppm)10.33(s,1H),10.22(s,1H),8.00‑7.90(m,3H),7.73‑7.64(m,3H),7.42‑
7.35(m,3H),7.14(d,J=8.1Hz,1H),7.11‑7.06(m,2H),5.00(q,J=6.5Hz,1H),1.60(d,J=
6.6Hz,3H)。
5‑氨基吡啶和3‑氯苯胺,制得白色固体,收率43%。MS(ESI)m/z:442.1[M‑H] ;H NMR
(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.22(s,1H),10.17(s,1H),8.05‑7.95(m,2H),7.67(dd,J=
14.5,8.6Hz,3H),7.34(d,J=7.6Hz,3H),7.11(d,J=8.0Hz,1H),7.01(d,J=8.4Hz,2H),
1.60(s,6H)。
氯苯胺和2‑氨基‑6‑氯吡啶,制得白色固体,收率40%。MS(ESI)m/z:442.1[M‑H] ;H NMR
(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.85(s,1H),10.25(s,1H),7.98‑7.85(m,3H),7.67(d,J=
8.6Hz,3H),7.31(d,J=7.6Hz,2H),7.11(d,J=8.0Hz,1H),6.99(d,J=8.4Hz,2H),1.60(s,
6H)。
氯苯胺和2‑氨基‑6‑氟吡啶,制得白色固体,收率40%。MS(ESI)m/z:426.1[M‑H] ;H NMR
(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.80(s,1H),10.05(s,1H),7.95‑7.86(m,3H),7.77(d,J=
8.6Hz,3H),7.35(d,J=7.6Hz,2H),7.11(d,J=8.0Hz,1H),6.89(d,J=8.4Hz,2H),1.60(s,
6H)。
氯苯胺和2‑氨基‑6‑氟吡啶,制得白色固体,收率50%。MS(ESI)m/z:412.1[M‑H] ;H NMR
(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.91(s,1H),10.33(s,1H),8.25(d,J=7.9Hz,1H),8.15‑8.05
(m,2H),7.91(t,J=7.8Hz,1H),7.78(d,J=8.1Hz,2H),7.43‑7.33(m,3H),7.25(d,J=
8.1Hz,2H),5.05(q,J=6.4Hz,1H),1.59(d,J=6.5Hz,3H)。
氨基5‑氯吡啶和3‑氯苯胺,制得白色固体,收率55%。MS(ESI)m/z:428.1[M‑H] ;H NMR
(300MHz,DMSO‑d6)δ(ppm)10.37(s,1H),10.15(s,1H),8.80(t,J=2.7Hz,1H),8.28(d,J=
8.9Hz,1H),7.72‑7.66(m,3H),7.50(d,J=8.7Hz,1H),7.44‑7.33(m,2H),7.14(d,J=
8.1Hz,1H),7.10‑7.05(m,2H),5.00(q,J=6.5Hz,1H),1.59(d,J=6.6Hz,3H)。
司,三氟乙酸:上海凌峰化学试剂有限公司,电子天平:Sartorius,对二甲氨基苯甲醛(CAS:
100‑10‑7):Aladdin,Recombinant Human IFN‑γ(Catalog#AF‑300‑02):PEPROTECH。
37℃下将HeLa细胞保存在提供5%CO2的控湿培养箱中。实验设置空白组、模型组组(IFN‑γ
+L‑色氨酸)和加药组(IFN‑γ+L‑色氨酸+受试化合物)。
200μL培养基)加给细胞。温育24小时后将140μL上清液/孔移至新的96孔板中,加入10μ
L6.1mol/L的三氯乙酸,在恒温烘箱中50℃温育30min以使产生的N‑甲酰基犬尿氨酸水解为
犬尿氨酸。然后以4000rpm将反应混合物离心10min以去除沉淀物。将100μL上清液/孔移至
另一96孔板中,与等体积2%(w/v)对‑二甲氨基苯甲醛的乙酸溶液混合。使用酶标仪在
490nm处检测吸光值,所得结果利用GraphPad Prism软件处理。每个浓度设3个复孔,实验重
复三次。
离心后吸去孔内培养液。每孔加入200μL二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10min,使结晶物充
分溶解。在酶联免疫检测仪570nm处测量各孔的吸光值。
之间;指示为“C”的值表示IC50大于10nM并且小于100nM;指示为“D”的值表示IC50介于100nM
与1μM之间;指示为“E”的值表示IC50大于1μM。
组HeLa细胞的存活率均保持在90%以上,表明这些化合物不是通过抑制HeLa细胞的增殖来
抑制IDO1的活性。