用于检测黄体酮的碳点及黄体酮检测方法

摘要

本发明公开了一种用于检测黄体酮的碳点及黄体酮检测方法，该碳点通过以下步骤制备得到：1)将姜黄素放入容器中，加热，得到中间产物；2)中间产物冷却至室温后，溶于乙醇中，离心；3)得到的离心液用透析袋透析，透析后的产物再冷冻干燥，得到碳点。本发明制备的碳点稳定性好、发光强度大，制备简单、成本低，黄体酮可对该碳点特异性增强荧光；本发明通过该碳点建立的黄体酮检测方法具有检测限低、检测准确可靠、检测速度快的特点，可提供灵敏准确的检测结果，在黄体酮特异性检测领域具有广阔的应用前景。

权利要求

1.一种黄体酮的检测方法，其特征在于，其采用碳点进行检测，具体检测步骤包括：

1）构建用于黄体酮检测的标准曲线：

将n份体积均为v1的具有一定浓度梯度的黄体酮溶液各与一份体积为v2、浓度为c的碳点溶液混合，静置；

将得到的n份混合液分别于激发波长为410 nm处，测试混合溶液的荧光强度值；

以黄体酮浓度为横坐标，荧光强度值为纵坐标，拟合得到用于黄体酮检测的标准曲线；

2）对待测溶液中的黄体酮浓度进行检测：

取体积为v1的待测溶液与体积为v2、浓度为c的碳点溶液混合，静置；

将得到的混合液于激发波长为410 nm处，测试混合溶液的荧光强度值，对照步骤1）得到的标准曲线，计算出待测溶液中的黄体酮浓度；

所述碳点通过以下步骤制备得到：

1）将0.1‑2g姜黄素放入容器中，在170‑190℃下加热6小时，得到中间产物；

2）中间产物冷却至室温后，溶于乙醇中，5000rpm下离心30分钟；

3）得到的离心液用透析袋透析，透析后的产物再冷冻干燥，得到碳点。

2.根据权利要求1所述的黄体酮的检测方法，其特征在于，其通过以下步骤制备得到：

1）将0.5g姜黄素放入容器中，在180℃下加热6小时，得到中间产物；

2）中间产物冷却至室温后，溶于乙醇中，5000rpm下离心30分钟；

3）得到的离心液用透析袋透析，透析后的产物再冷冻干燥，得到碳点。

3.根据权利要求1所述的黄体酮的检测方法，其特征在于，具体检测步骤包括：

1）构建用于黄体酮检测的标准曲线：

将体积均为v1，浓度分别为0、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130 μmol/L的14份黄体酮溶液各与一份体积为1ml、浓度为0.2mg/mL的碳点溶液混合，静置1分钟；

将得到的14份混合液分别于激发波长为410nm处，测试混合溶液的荧光强度值；

以黄体酮浓度为横坐标，荧光强度值为纵坐标，拟合得到用于黄体酮检测的标准曲线；

2）对待测溶液中的黄体酮浓度进行检测：

取体积为v1的待测溶液与体积为1ml、浓度为0.2mg/mL的碳点溶液混合，静置；

将得到的混合液于激发波长为410nm处，测试混合溶液的荧光强度值，对照步骤1）得到的标准曲线，计算出待测溶液中的黄体酮浓度。

说明书

用于检测黄体酮的碳点及黄体酮检测方法

技术领域

[0001] 本发明涉及纳米材料领域，特别涉及一种用于检测黄体酮的碳点及黄体酮检测方法。

背景技术

[0002] 黄体酮(P4)是卵巢分泌的一种类固醇激素，在维持和调节女性月经周期、胚胎发育、妊娠和乳房发育等生理进程中起着至关重要的作用，同时也在人类的药物和临床治疗中也被广泛应用。然而，滥用黄体酮可能会引起不良的副作用，如虚弱、情绪抑郁、乳房不适、一定的潜在致癌作用等。临床医学、畜牧业和环境保护中对黄体酮监测的灵敏度分析有着很高的要求。因此，高效、灵敏地检测黄体酮有着重要意义。

[0003] 检测黄体酮的方法有色谱分析法、比色法、电化学方法等等，然而这些方法存在着一定的缺点，比如样品预处理时间较长、所需试剂昂贵、运行时间长、灵敏性不高。

[0004] 所以现在需要一种更可靠的方案。

发明内容

[0005] 本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，提供一种用于检测黄体酮的碳点及黄体酮检测方法。

[0006] 为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种用于检测黄体酮的碳点，其通过以下步骤制备得到：

[0007] 1)将姜黄素放入容器中，加热，得到中间产物；

[0008] 2)中间产物冷却至室温后，溶于乙醇中，离心；

[0009] 3)得到的离心液用透析袋透析，透析后的产物再冷冻干燥，得到碳点。

[0010] 优选的是，其通过以下步骤制备得到：

[0011] 1)将0.1‑2g姜黄素放入容器中，在170‑190℃下加热6小时，得到中间产物；

[0012] 2)中间产物冷却至室温后，溶于乙醇中，5000rpm下离心30分钟；

[0013] 3)得到的离心液用透析袋透析，透析后的产物再冷冻干燥，得到碳点。

[0014] 优选的是，其通过以下步骤制备得到：

[0015] 1)将0.5g姜黄素放入容器中，在180℃下加热6小时，得到中间产物；

[0016] 2)中间产物冷却至室温后，溶于乙醇中，5000rpm下离心30分钟；

[0017] 3)得到的离心液用透析袋透析，透析后的产物再冷冻干燥，得到碳点。

[0018] 本发明还提供一种黄体酮的检测方法，其采用如上所述的用于检测黄体酮的碳点进行检测，具体检测步骤包括：

[0019] 1)构建用于黄体酮检测的标准曲线：

[0020] 将n份体积均为v1的具有一定浓度梯度的黄体酮溶液各与一份体积为v2、浓度为c的碳点溶液混合，静置；

[0021] 将得到的n份混合液分别于激发波长为410nm处，测试混合溶液的荧光强度值；

[0022] 以黄体酮浓度为横坐标，荧光强度值为纵坐标，拟合得到用于黄体酮检测的标准曲线；

[0023] 2)对待测溶液中的黄体酮浓度进行检测：

[0024] 取体积为v1的待测溶液与体积为v2、浓度为c的碳点溶液混合，静置；

[0025] 将得到的混合液于激发波长为410nm处，测试混合溶液的荧光强度值，对照步骤1)得到的标准曲线，计算出待测溶液中的黄体酮浓度。

[0026] 优选的是，具体检测步骤包括：

[0027] 1)构建用于黄体酮检测的标准曲线：

[0028] 将体积均为v1，浓度分别为0、10、20、30、40、50、60、70、80、90,、100、110、120、130μmol/L的14份黄体酮溶液各与一份体积为1ml、浓度为0.2mg/mL的碳点溶液混合，静置1分钟；

[0029] 将得到的14份混合液分别于激发波长为410nm处，测试混合溶液的荧光强度值；

[0030] 以黄体酮浓度为横坐标，荧光强度值为纵坐标，拟合得到用于黄体酮检测的标准曲线；

[0031] 2)对待测溶液中的黄体酮浓度进行检测：

[0032] 取体积为v1的待测溶液与体积为1ml、浓度为0.2mg/mL的碳点溶液混合，静置；

[0033] 将得到的混合液于激发波长为410nm处，测试混合溶液的荧光强度值，对照步骤1)得到的标准曲线，计算出待测溶液中的黄体酮浓度。

[0034] 本发明的有益效果是：

[0035] 本发明制备的碳点稳定性好、发光强度大，制备简单、成本低，黄体酮可对该碳点特异性增强荧光；本发明通过该碳点建立的黄体酮检测方法具有检测限低、检测准确可靠、检测速度快的特点，可提供灵敏准确的检测结果，在黄体酮特异性检测领域具有广阔的应用前景。

附图说明

[0036] 图1为实施例1制备的碳点的光学性质检测结果；

[0037] 图2为黄体酮检测的标准曲线的构建结果以及碳点用于黄体酮浓度检测的干扰实验结果。

具体实施方式

[0038] 下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

[0039] 应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。

[0040] 实施例1

[0041] 本实施例提供一种用于检测黄体酮的碳点，其通过以下步骤制备得到：

[0042] 1)将0.5g姜黄素放入烧杯中，在反应釜中于180℃下加热6小时，得到褐色的中间产物；

[0043] 2)中间产物自然冷却至室温后，溶于乙醇中，5000rpm下离心30分钟；

[0044] 3)得到的离心液用透析袋透析以除去未反应的小分子，透析后的产物再冷冻干燥，得到碳点。

[0045] 参照图1，图1A为实施例1制得的碳点的吸收光谱，图1B为碳点在不同波长的激发光下的发射光谱，图1B中，在箭头位置，从上至下波长依次增加，即该处曲线从上至下波长依次为360、380、400、420、440、460、480nm。可以看出，碳点最大激发光波长在410nm，最大发射峰在560nm(黄绿色荧光)处，且该碳点的发光强度较大。

[0046] 实施例2

[0047] 本实施提供一种黄体酮的检测方法，其采用实施例1制得的碳点进行检测，具体检测步骤包括：

[0048] 1)构建用于黄体酮检测的标准曲线：

[0049] 将n份体积均为v1的具有一定浓度梯度的黄体酮溶液各与一份体积为v2、浓度为c的碳点溶液混合，静置；

[0050] 将得到的n份混合液分别于激发波长为410nm处，测试混合溶液的荧光强度值；

[0051] 以黄体酮浓度为横坐标，荧光强度值为纵坐标，拟合得到用于黄体酮检测的标准曲线；

[0052] 2)对待测溶液中的黄体酮浓度进行检测：

[0053] 取体积为v1的待测溶液与体积为v2、浓度为c的碳点溶液混合，静置；

[0054] 将得到的混合液于激发波长为410nm处，测试混合溶液的荧光强度值，对照步骤1)得到的标准曲线，计算出待测溶液中的黄体酮浓度。

[0055] 在一种更为具体的实施例中，具体检测步骤包括：

[0056] 1)构建用于黄体酮检测的标准曲线：

[0057] 将体积均为v1，浓度分别为0、10、20、30、40、50、60、70、80、90,、100、110、120、130μmol/L的14份黄体酮溶液各与一份体积为1ml、浓度为0.2mg/mL的碳点溶液混合，静置1分钟；

[0058] 将得到的14份混合液分别于激发波长为410nm处，测试混合溶液的荧光强度值；

[0059] 以黄体酮浓度为横坐标，荧光强度值为纵坐标，拟合得到用于黄体酮检测的标准曲线；

[0060] 2)对待测溶液中的黄体酮浓度进行检测：

[0061] 取体积为v1的待测溶液与体积为1ml、浓度为0.2mg/mL的碳点溶液混合，静置；

[0062] 将得到的混合液于激发波长为410nm处，测试混合溶液的荧光强度值，对照步骤1)得到的标准曲线，计算出待测溶液中的黄体酮浓度。

[0063] 参照图2A‑2C，图2A为不同浓度黄体酮与碳点混合后得到的混合液的荧光强度，如图中箭头所示，从下至上的曲线黄体酮浓度由0逐渐增加至130μmol/L，碳点的荧光强度则随之逐渐增强。图2B为得到的散点的折线图，图2C为拟合得到的标准曲线，图中显示碳点荧光强度与黄体酮浓度之间存在着良好的线性关系，计算所得该碳点对黄体酮的检测限为9.3nM。

[0064] 以下还提供上述黄体酮的检测方法的验证实验

[0065] 本实施例中采用以上的方法对黄体酮浓度分别为10、50、100μmol/L的标样进行检测，对应检测结果分别为10.02、49.97、99.95μmol/L；说明检测结果得到的浓度与标样浓度一致，体现了本发明的方法的准确性。

[0066] 实施例3

[0067] 本实施例中，进行碳点用于黄体酮浓度检测的干扰实验。

[0068] 本实施例中，采用的干扰物包括Cu2+,Fe3+,K+,Na+,Pb2+,Hg2+,Al3+,Mn2+,Ca2+,AA,Cys、H2O2，浓度均为120μmol/L。实验方法为：将碳点与120μmol/L的干扰物溶液混合，同时将相同浓度碳点与浓度为120μmol/L的黄体酮混合作为对比，静置3分钟；然后于激发波长为350nm处，测试两份混合溶液的荧光强度值；对所有干扰物分别进行上述实验。参照图2D，为实验结果，其中P4表示黄体酮，以看出，只有黄体酮对碳点溶液的荧光有着增强作用，而其他干扰物对其的荧光强度没有显著影响，可以说明黄体酮对碳点的荧光具有特异性增强作用，从而可用该碳点对黄体酮进行特异性检测，可以获得灵敏准确的检测结果。

[0069] 本发明的黄体酮对碳点的荧光具有特异性增强特性的机理为：碳点与黄体酮之间存在着有效的静电相互作用，能与黄体酮的某些成分接触后引起荧光增强。

[0070] 尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节。