一种喹唑啉基丁烯酰胺类化合物的制备方法

摘要

本发明公开了一种喹唑啉基丁烯酰胺类化合物的制备方法，通过选择合适的混合碱体系，使用1,8‑二氮杂双环[5.4.0]十一碳‑7‑烯和氢氧化钾的混合物，有效降低合成工艺中杂质的生成，避免药品存放过程中降解杂质额外产生，实现了杂质生成与降解的精准控制。

权利要求

1.一种式(I)化合物或其药学上可接受盐的制备方法，使用有机碱和无机碱的混合体系，使所得的通式(II)化合物与式(5)所示的醛发生反

1 2 3

应，制备式(I)化合物，其中R 代表直链或者支链的C1‑6的烷基或 R 和R 相同或不同，代表直链或者支链的C1‑6的烷基，其特征在于，所述有机碱和无机碱的混合体系中有机碱为1,8‑二氮杂双环[5.4.0]十一碳‑7‑烯，无机碱选自氢氧化锂、氢氧化钠或者氢氧化钾中的一种或几种，所述有机碱和无机碱的摩尔比为1:3‑70。

1

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述R代表乙基或

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述有机碱和无机碱的混合体系为1，8‑二氮杂双环[5.4.0]十一碳‑7‑烯和氢氧化钾的混合物。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于通式(II)化合物与式(5)所示的醛的摩尔比为

1:1‑5。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于通式(II)化合物与式(5)所示的醛的摩尔比为

1:2‑3。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于有机碱和无机碱的总用量与通式(II)化合物的摩尔比为1:1‑12。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于有机碱和无机碱的总用量与通式(II)化合物的摩尔比为1:6‑8。

说明书

一种喹唑啉基丁烯酰胺类化合物的制备方法

技术领域

[0001] 本发明属于药物化学领域，具体涉及制备一类喹唑啉基丁烯酰胺抗肿瘤小分子衍生物或其药学上可接受盐的制备方法。

背景技术

[0002] 丁烯酰胺类药效团在体内可与靶点半胱氨酸的巯基发生迈克尔加成反应，使药物与靶点共价不可逆地结合。一般来说，共价药物具备更高的靶点亲和力和活性。此类结构在小分子抗肿瘤药物设计中被广泛应用，例如德国勃林格殷翰姆公司研发的式(1)化合物阿法替尼，深圳海王药业有限公司研发的式(2)化合物萘普替尼，辉瑞公司和Puma公司联合研发的式(3)化合物来那替尼。

[0003]

[0004] 阿法替尼是一种具备丁烯酰胺药效团的口服小分子酪氨酸激酶不可逆抑制剂。该化合物的二马来酸盐，即马来酸阿法替尼，在2013年7月12日通过美国FDA的审批上市，商品名为吉泰瑞(Gilotrif)。

[0005]

[0006] 根据勃林格殷翰姆公司公开资料(WO2005037824)显示，马来酸阿法替尼商业化的合成路线如上所示，其中由式(4)化合物在氯化锂和碱作用下与式(5)化合物发生的Wittig‑Horner‑Emmons反应制备化合物(1)，即阿法替尼游离碱。然而，由化合物(1)在乙醇中与马来酸成盐直接获得原料药的成盐步骤清除杂质能力很弱。因此，化合物(1)的制备工艺直接关系到药品最终质量的是关键步骤，特别是有关物质和稳定性需要符合化学原料药的要求。

[0007] 上述专利文献中使用适宜的有机或者无机碱(例如1，8‑二氮杂双环[5.4.0]十一碳‑7‑烯(DBU)、氢氧化钠或者氢氧化钾)，具体优选使用氢氧化钾或者DBU进行反应。然而，上述反应制得的阿法替尼即使HPLC纯度达到99.4F1％，其重要的有关物质的含量却无法符合化学原料药的要求，人们不得不开发新的纯化工艺对合成产物进行精制纯化，(如中国专利文献CN105669658A，CN104402872A，CN108467389A中公开的纯化方法)。

[0008]

[0009] 阿法替尼原料药中的杂质D和P是药品生命周期中质量风险最大的特定杂质。杂质D是由化合物(4)合成化合物(1)阿法替尼的Horner–Wadsworth–Emmons反应固有的副产物，属于WO2005037824中工艺产生的含量最大的杂质。于此同时，光照也可以促进阿法替尼的双键构型翻转，形成杂质D。

[0010] 杂质P是阿法替尼或者马来酸阿法替尼发生分子间环合反应产生，两者在自身存放过程中也能够降解成杂质P，而加热和碱均能够独立地、显著地促进这一降解过程。杂质P在该步工艺中产生，并在后续成盐、原料药存放、制剂工艺和制剂存放中持续增加，成为药品生命周期中含量最大杂质。

[0011] 根据海王医药公开专利CN105777656B和CN105777655B，萘普替尼合成参考勃林格殷翰姆报道阿法替尼的合成方法。2017至2018年，海王医药二甲苯磺酸萘普替尼获得中国和美国的药物临床试验批件。

[0012]

[0013] 与阿法替尼类似，由化合物(6)制备萘普替尼和二甲苯磺酸萘普替尼、原料药存放、制剂工艺和制剂存放阶段也会大量降解出萘普替尼分子间环合杂质A。在后续处方研究中，研究人员必须在处方中额外增加化学稳定剂来减缓杂质A的生成(CN106389435B)。目前未有公开资料提及异构体杂质化合物(7)。

[0014]

[0015] 除了上述两种喹唑啉基丁烯酰胺化合物，喹啉基丁烯酰胺衍生物来那替尼也可通过活性磷酯中间体(8)制备来那替尼。同样的，在药品生产和保存过程中会产生丁烯酰胺药效团环合杂质WAY‑188954(Drug Development and Industrial Pharmacy,2012,38,307)。目前未有公开资料提及异构体杂质。

[0016]

[0017] 综上所述，上述丁烯酰胺抗肿瘤小分子衍生物药物在生产和存放中均能产生双键异构杂质和/或丁烯酰胺药效团环合杂质。例如，已知的特定杂质D和杂质P是马来酸阿法替尼游离体、原料药和制剂中质量风险最大两个杂质，而现有合成方法无法得到符合要求的原料药，需要额外开发纯化工艺，导致收率降低，污染增加，成本上升等结果。依据ICH倡导的药物杂质“避免‑控制‑清除”的三步走理念，有必要开发新的、适合工业化生产的制备新工艺，从源头控制有关物质生成，避免药品存放过程中降解杂质额外产生，特别是精准控制丁烯酰胺抗肿瘤小分子药物生成与降解出上述两类杂质。

发明内容

[0018] 本发明所要解决的技术问题是提供一种杂质可控的喹唑啉基丁烯酰胺类化合物或其药学上可接受盐的制备方法。

[0019] 本发明技术方案如下：

[0020] 一种通式(I)化合物或其药学上可接受盐的制备方法，

[0021]

[0022] 包括下述合成步骤：

[0023] 使用有机碱和无机碱的混合体系，使所得的通式(II)化合物与式(5)所示的醛发1
生反应，制备通式(I)化合物，其中R ＝直链或者支链的C1‑6的烷基或 优选乙基或
2 3
R和R相同或不同，代表直链或者支链的C1‑6的烷基，

[0024]

[0025] 所述有机碱和无机碱的混合体系中有机碱为DBU，无机碱选自氢氧化锂、氢氧化钠或者氢氧化钾中的一种或几种。

[0026] 优选的，所述有机碱和无机碱的混合体系为DBU和氢氧化钾的混合物。

[0027] 在本发明所述制备方法中，混合碱体系既用于中和制备化合物(5)的化学环境的盐酸，还用于拔除通式(II)化合物酰胺α位氢，推进反应。因此，混合碱总量与通式(II)的量与化合物(5)含有酸量直接相关。

[0028] 所述制备方法中，通式(II)化合物与式(5)所示的醛的摩尔比为1:1至1:5，更优选为1:2～1:3。而制备和存贮化合物(5)的化学环境中的酸是化合物(5)摩尔量的2倍。因此，所述制备方法中实际混合碱的用量适当放宽为与通式(II)化合物的摩尔比为1:1至1:12，优选为1:6～1:8。

[0029] 在本发明所述制备方法中，混合碱中有机碱和无机碱比例对控制双键异构杂质和/或丁烯酰胺环合杂质的产生有直接关系。优选的，有机碱和无机碱的摩尔比为1:1至1:130，更优选为1:3至1:70。

[0030] 发明优点：

[0031] 现有技术下(WO2005037824)中公开了使用单一的有机碱或无机碱体系——氢氧化钾或DBU用于通式(II)化合物与式(5)反应合成喹唑啉基丁烯酰胺类药物(如阿法替尼)，然而在本发明工艺研究中，研究人员发现单独使用氢氧化钾会导致反应中双键异构杂质(如阿法替尼杂质D)明显增多，虽然在后续处理中可以大量清除，但依然在游离体精制品和原料药成品中存在单一杂质超标问题。单独使用DBU时，虽然反应中双键异构杂质生成明显减少，但是游离碱中DBU残留明显，工艺中难以彻底去除DBU，残留的DBU会导致产品在后续精制过程以及存放过程中丁烯酰胺环合杂质(如阿法替尼杂质P)显著增长。本发明在合成工艺中选择氢氧化钾‑DBU混合碱体系，精确使用适量的DBU有效地控制了双键异构杂质的生成，在后续的精制及成盐制成原料药成品的过程中，稳定清除至0.1％质控限以下，精确控制DBU的使用量，大大减少残留风险(100ppm级降至1ppm级或未检出)，控制后续加热成盐工艺过程中丁烯酰胺环合杂质的增长，并有效避免药品制剂工艺和制剂产品存放过程中降解杂质额外产生，实现了双键异构杂质和丁烯酰胺环合杂质生成与降解的精准控制。

附图说明

[0032] 图1实施例1阿法替尼游离碱粗品的HPLC图。

[0033] 图2实施例4阿法替尼游离碱粗品的HPLC图。

[0034] 图3实施例8萘普替尼游离碱粗品的HPLC图。

[0035] 图4实施例9萘普替尼游离碱粗品的HPLC图。

具体实施方式

[0036] 以下将通过具体实施例进一步阐述本发明，但并不用于限制本发明的保护范围。本领域技术人员可在权利要求范围内对制备方法和使用仪器做出改进，这些改进也应视为本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

[0037] 本发明实施例所述化合物(4)和(6)的合成按照WO2005037824专利公开方法制备获得，纯度>98％。所述化合物(8)的合成按照CN103588755A专利公开方法制备获得，纯度>95％。

[0038] 本发明所述的喹唑啉基丁烯酰胺类药物有关物质分析方法按照阿法替尼进口药品注册标准优化，例如色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(ODS‑3(4.0mm×100mm，3μm)或效能相当的色谱柱)，以磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钠二水合物3.0g，加水
850mL使溶解，加三乙胺4mL，用磷酸调节pH 6.6，加水至900mL)‑乙腈(90:10)为流动相A；以磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钠二水合物1.2g，加水350mL使溶解，加三乙胺4mL，用磷酸调节pH 6.6加水至400mL)‑乙腈(40:60)为流动相B。柱温为26℃，流速为0.8mL/min，检测波长为
245nm。

[0039] 本发明所述的DBU分析方法参照公开专利CN109725097A优化而来，采用高效液相色谱法检测，检测限为0.05μg/mL(8ppm)，定量限为0.019μg/mL(3ppm)。

[0040] 本发明所使用的阿法替尼原研参比制剂购自勃林格殷翰姆公司在中国市场上市销售的药物，商品名为吉泰瑞，批号802858，生产日期为2018年3月19日。

[0041] 本发明原料药或相关制剂的加速稳定性研究方法按照《中国药典》2015年版四部通则9001原料药物与制剂稳定性试验指导原则。加速试验条件为40℃±2℃，RH75％±5％。

[0042] 本发明实施例1‑5的涉及的碱投料量和构成方案如表1所示。

[0043] 表1.实施例1‑5的涉及的碱投料量和构成方案

[0044]

[0045] 实施例1

[0046] 将含有16.5g(452.0mmol)氯化氢的浓盐酸加入至38mL水中，然后在30℃下20分钟内逐滴加入36.4g(226.0mmol)二甲氨基乙醛缩二乙醇(CAS号3616‑56‑6)。在30‑40℃温度下搅拌该反应溶液8小时，获得化合物(5)溶液，冷却至0‑5℃并在氩气中保持。该溶液被称为溶液B。

[0047] 同时将32.4g(578.6mmol)氢氧化钾溶解于200mL水中并冷却至‑5℃。该溶液被称为溶液C。

[0048] 同时再将50g(90.4mmol)的化合物(4)和3.8g(90.4mmol)氯化锂加入200mL四氢呋喃中，冷却至‑7℃备用。该溶液被称为溶液A。

[0049] 在保持搅拌和‑7℃条件下，10分钟内将已经冷却的溶液C滴加入溶液A中；然后再将溶液B缓慢滴加入混合溶液中。混合物在‑5℃下搅拌1‑2小时后，加入130mL水至反应体系，体系保持在0‑5℃析晶，抽滤，所得固体用水洗涤，干燥，得粗品47.0g,含水量6.5％。粗品进而使用乙酸丁酯和甲基环己烷混合溶剂进行重结晶，固体干燥，得阿法替尼游离碱精制品31.2g，收率71％。

[0050] 参照WO2005037824制备方法，阿法替尼游离碱溶解在70℃乙醇中，与2.05当量马来酸搅拌成盐，降温析出，干燥获得原料药成品。

[0051] 该实施例获得的游离碱粗品、精制品和原料药成品分别进行HPLC检验，结果见表2之实施例1。HPLC色谱图如图1所示，其中杂质D和P的峰面积积分结果如下所示：

[0052] 有关物质 保留时间(min) 相对峰面积(％)杂质P 17.143 0.145％
杂质D 27.947 1.733％
阿法替尼 32.952 97.396％

[0053] 实施例2

[0054] 将含有16.5g(452.0mmol)氯化氢的浓盐酸加入至38mL水中，然后在30℃下20分钟内逐滴加入36.4g(226.0mmol)二甲氨基乙醛缩二乙醇(CAS号3616‑56‑6)。在30‑40℃温度下搅拌该反应溶液8小时，获得化合物(5)溶液，冷却至0‑5℃并在氩气中保持。该溶液被称为溶液B。

[0055] 同时将71.9g(578.6mmol)DBU溶解于200mL水中并冷却至‑5℃。该溶液被称为溶液C。

[0056] 同时再将50g(90.4mmol)的式(4)所示化合物和3.8g(90.4mmol)氯化锂加入200mL四氢呋喃中，冷却至‑7℃备用。该溶液被称为溶液A。

[0057] 在保持搅拌和‑7℃条件下，10分钟内将已经冷却的溶液C滴加入溶液A中；然后再将溶液B缓慢滴加入混合溶液中。混合物在‑5℃下搅拌1‑2小时后，停止反应，反应液分层，有机层分别加入130mL饱和食盐水洗涤，130mL水析晶，体系始终保持在0‑5℃，抽滤，所得固体用水洗涤，干燥，得粗品48.1g,含水量6.1％。粗品进而使用乙酸丁酯和甲基环己烷混合溶剂进行重结晶，固体干燥，得阿法替尼游离碱精制品32.9g，收率75％。

[0058] 参照WO2005037824制备方法，阿法替尼游离碱溶解在70℃乙醇中，与2.05当量马来酸搅拌成盐，降温析出，干燥获得原料药成品。

[0059] 该实施例获得的游离碱粗品、精制品和原料药成品分别进行HPLC检验，结果见表2之实施例2。

[0060] 实施例3

[0061] 将含有16.5g(452.0mmol)氯化氢的浓盐酸加入至38mL水中，然后在30℃下20分钟内逐滴加入36.4g(226.0mmol)二甲氨基乙醛缩二乙醇(CAS号3616‑56‑6)。在30‑40℃温度下搅拌该反应溶液8小时，获得化合物(5)溶液，冷却至0‑5℃并在氩气中保持。该溶液被称为溶液B。

[0062] 同时将25.4g(452.0mmol)氢氧化钾和15.7g(126.6mmol)DBU溶解于200mL水中并冷却至‑5℃。该溶液被称为溶液C。

[0063] 同时再将50g(90.4mmol)的式(4)所示化合物和3.8g(90.4mmol)氯化锂加入200mL四氢呋喃中，冷却至‑7℃备用。该溶液被称为溶液A。

[0064] 在保持搅拌和‑7℃条件下，10分钟内将已经冷却的溶液C滴加入溶液A中；然后再将溶液B缓慢滴加入混合溶液中。混合物在‑5℃下搅拌1‑2小时后，加入130mL水至反应体系，体系保持在0‑5℃析晶，抽滤，所得固体用水洗涤，干燥，得粗品49.5g,含水量6.6％。粗品进而使用乙酸丁酯和甲基环己烷混合溶剂进行重结晶，固体干燥，得阿法替尼游离碱精制品33.3g，收率76％。

[0065] 参照WO2005037824制备方法，阿法替尼游离碱溶解在70℃乙醇中，与2.05当量马来酸搅拌成盐，降温析出，干燥获得原料药成品。

[0066] 该实施例获得的游离碱粗品、精制品和原料药成品分别进行HPLC检验，结果见表2之实施例3。

[0067] 实施例4

[0068] 将含有16.5g(452.0mmol)氯化氢的浓盐酸加入至38mL水中，然后在30℃下20分钟内逐滴加入36.4g(226.0mmol)二甲氨基乙醛缩二乙醇(CAS号3616‑56‑6)。在30‑40℃温度下搅拌该反应溶液8小时，获得化合物(5)溶液，冷却至0‑5℃并在氩气中保持。该溶液被称为溶液B。

[0069] 同时将31.9g(569.5mmol)氢氧化钾和1.4g(9.0mmol)DBU溶解于200mL水中并冷却至‑5℃。该溶液被称为溶液C。

[0070] 同时再将50g(90.4mmol)的式(4)所示化合物和3.8g(90.4mmol)氯化锂加入200mL四氢呋喃中，冷却至‑7℃备用。该溶液被称为溶液A。

[0071] 在保持搅拌和‑7℃条件下，10分钟内将已经冷却的溶液C滴加入溶液A中；然后再将溶液B缓慢滴加入混合溶液中。混合物在‑5℃下搅拌1‑2小时后，加入130mL水至反应体系，体系保持在0‑5℃析晶，抽滤，所得固体用水洗涤，干燥，得粗品47.6g,含水量6.9％。粗品进而使用乙酸丁酯和甲基环己烷混合溶剂进行重结晶，固体干燥，得阿法替尼游离碱精制品34.3g，收率78％。

[0072] 参照WO2005037824制备方法，阿法替尼游离碱溶解在70℃乙醇中，与2.05当量马来酸搅拌成盐，降温析出，干燥获得原料药成品。

[0073] 该实施例获得的游离碱粗品、精制品和原料药成品分别进行HPLC检验，结果见表2之实施例4。HPLC色谱图如图2所示。其中杂质D和P的峰面积积分结果如下所示：

[0074]有关物质 保留时间(min) 相对峰面积(％)
杂质P 17.145 0.074％
杂质D 27.998 1.065％
阿法替尼 32.932 98.326％

[0075] 由于阿法替尼游离碱与马来酸成盐步骤清除杂质能力很弱，因此在马来酸游离碱合成和精制过程中，有效控制特定杂质D、P和其他有关物质是生产环节最为关键步骤。

[0076] 表2.实施例产品HPLC检测指标与结果

[0077]

[0078] 由表2及图1和2可知，在阿法替尼合成中，使用混合碱体系，可以稳定减少杂质D的生成(实施例3和4)。特别是实施例4只添加0.1当量有机碱(6.3当量氢氧化钾和0.1当量DBU混合体系)，相比实施例1(6.4当量氢氧化钾)，使反应中杂质D直接下降了42％，伴随既有后处理，可稳定清除杂质D至0.15％质控限以下，获得合格游离体精制品和原料药。

[0079] 使用混合碱体系，减少DBU使用量，不但成本下降(DBU价格比KOH贵)，环境友好(KOH比DBU相对环保)，残留风险小(DBU脂溶性水溶性均好，易残留)。相比实施例2(6.4当量DBU)，实施例4所使用DBU量减少98％，DBU杂质残留量从100ppm级降至1ppm级乃至未检出。更为重要的是，杂质DBU残留会在后续成盐工艺、原料药存放期(2年)、制剂工艺和制剂存放期(3年)显著促进阿法替尼降解为杂质P(具体试验见实施例6和7)。

[0080] 实施例5

[0081] 将含有16.5g(452.0mmol)氯化氢的浓盐酸加入至38mL水中，然后在30℃下20分钟内逐滴加入36.4g(226.0mmol)二甲氨基乙醛缩二乙醇(CAS号3616‑56‑6)。在30‑40℃温度下搅拌该反应溶液8小时，获得化合物(5)溶液，冷却至0‑5℃并在氩气中保持。该溶液被称为溶液B。

[0082] 同时将25.4g(574.0mmol)氢氧化钾和0.69g(4.5mmol)DBU溶解于200mL水中并冷却至‑5℃。该溶液被称为溶液C。

[0083] 同时再将50g(90.4mmol)的式(4)所示化合物和3.8g(90.4mmol)氯化锂加入200mL四氢呋喃中，冷却至‑7℃备用。该溶液被称为溶液A。

[0084] 在保持搅拌和‑7℃条件下，10分钟内将已经冷却的溶液C滴加入溶液A中；然后再将溶液B缓慢滴加入混合溶液中。混合物在‑5℃下搅拌1‑2小时后，加入130mL水至反应体系，体系保持在0‑5℃析晶，抽滤，所得固体用水洗涤，干燥，得粗品48.1g,含水量6.1％。

[0085] 该实施例获得的游离碱粗品进行HPLC检验，结果见表3之实施例5。

[0086] 表3.实施例3‑5的阿法替尼游离碱粗品HPLC检测指标与结果

[0087]实施例 样品 DBU/氢氧化钾 纯度 杂质D 杂质P DBU残留
3 游离碱粗品 1：3.6 98.33％ 1.07％ 0.07％ 760ppm
4 游离碱粗品 1：63 98.55％ 1.08％ ND 33ppm
5 游离碱粗品 1：127 96.10％ 1.53％ 0.079 23ppm

[0088] 由结果比较可知，相比实施例3和4，DBU使用比例过低(实施例5)，虽然残留DBU的风险降低30％，但同时导致杂质D在反应粗品中显著增长41％，未能达到本发明预期的，在阿法替尼合成中，使用混合碱体系，均衡控制杂质D、DBU和杂质P的目的。

[0089] 实施例6市售原研参比制剂加速稳定性试验

[0090] 依据药品进口注册方法等相关资料，该原料药保存期为2年，制剂保存期3年。制剂中杂质P出厂标准为小于1.5％，货架期小于3.0％。

[0091] 利用采购的市售原研制剂，依据《中国药典》2015年版四部通则9001制剂稳定性试验指导原则，设定加速试验条件为40℃±2℃，RH75％±5％。根据原研制剂0‑6个月加速稳定性实验数据结果分析，降解杂D在避光外包装保护下，几乎不增长(0.1％以内)，而降解杂质P是唯一、含量最大、不断增长的有关物质(表4)。因此杂质P是关乎本品(包括原料药和制剂)存放稳定性的最为关键的质量属性。

[0092] 表4.原研制剂杂质P降解稳定性相关试验结果

[0093]

[0094] 实施例7杂质P稳定性与DBU加标试验

[0095] 利用实施例4所制备的原料药成品马来酸阿法替尼分为6组，每组约5g。再根据每组样品重量，分别称取0、1000、500、100、50和10ppm的DBU，溶于10mL乙醇中，分别加入各组马来酸阿法替尼中形成悬浮混合液。混合液在40℃下减压蒸馏，除去乙醇至恒重。各组样品依据《中国药典》2015年版四部通则9001原料药物稳定性试验指导原则，设定加速试验条件为40℃±2℃，RH75％±5％。各组样品的杂质P降解情况如表5所述。

[0096] 实施例4所制备的原料药成品马来酸阿法替尼DBU残留结果为未检出(检测限3.0ppm)，在药典规定的药品稳定性加速6个月试验条件下，样品中杂质P从初始0.06％增长至0.59％(表5，序列1)。

[0097] 在上述分组原料药中依序加标0.1％、0.05％、0.01％、0.005％和0.001％的DBU，模拟DBU残留对标准的药品稳定性加速试验结果的影响(表5，序列2‑6)。结果显示，加标0.1％、0.05％、0.01％、0.005％的DBU，均可严重促进马来酸阿法替尼降解为杂质P(表5，序列2‑5)。加标0.001％的DBU影响不显著(表5，序列6)。因此，控制DBU杂质残留对控制杂质P生成，具有重要意义。

[0098] 本发明使用氢氧化钾为主、DBU为辅的混合碱体系，相比原研工艺独立碱体系，在发挥DBU显著抑制合成过程中含量最大杂质D生成的同时，又能精准控制原料药中DBU杂质残留(低于检测限3ppm)，进而控制后续包括成盐工艺、原料药存放期、制剂工艺和制剂存放期内，本品最大质量风险杂质P的增长。

[0099] 表5.杂质P稳定性与DBU加标研究试验结果

[0100]

[0101] a未检测。

[0102] 实施例8

[0103] 将含有2.0g(55.0mmol)氯化氢的浓盐酸加入至4mL水中，然后在30℃下20分钟内逐滴加入4.4g(27.5mmol)二甲氨基乙醛缩二乙醇(CAS号3616‑56‑6)。在30‑40℃温度下搅拌该反应溶液8小时，获得化合物(5)溶液，冷却至0‑5℃并在氩气中保持。该溶液被称为溶液B。

[0104] 同时将3.9g(70.4mmol)氢氧化钾溶解于20mL水中并冷却至‑5℃。该溶液被称为溶液C。

[0105] 同时再将5.6g(11.0mmol)的化合物(6)和0.47g(11.0mmol)氯化锂加入20mL四氢呋喃中，冷却至‑7℃备用。该溶液被称为溶液A。

[0106] 在保持搅拌和‑7℃条件下，10分钟内将已经冷却的溶液C滴加入溶液A中；然后再将溶液B缓慢滴加入混合溶液中。混合物在‑5℃下搅拌1‑2小时后，加入15mL水至反应体系，体系保持在0‑5℃析晶，抽滤，所得固体用水洗涤，干燥，得粗品4.70g，含水量6.9％。该实施例获得的游离碱粗品进行HPLC检验，结果见表6之实施例8，HPLC色谱图如图3所示。

[0107] 实施例9

[0108] 将含有2.0g(55.0mmol)氯化氢的浓盐酸加入至4mL水中，然后在30℃下20分钟内逐滴加入4.4g(27.5mmol)二甲氨基乙醛缩二乙醇(CAS号3616‑56‑6)。在30‑40℃温度下搅拌该反应溶液8小时，获得化合物(5)溶液，冷却至0‑5℃并在氩气中保持。该溶液被称为溶液B。

[0109] 同时将3.88g(69.3mmol)氢氧化钾和0.17g(1.1mmol)DBU溶解于20mL水中并冷却至‑5℃。该溶液被称为溶液C。

[0110] 同时再将5.6g(11.0mmol)的化合物(6)和0.47g(11.0mmol)氯化锂加入20mL四氢呋喃中，冷却至‑7℃备用。该溶液被称为溶液A。

[0111] 在保持搅拌和‑7℃条件下，10分钟内将已经冷却的溶液C滴加入溶液A中；然后再将溶液B缓慢滴加入混合溶液中。混合物在‑5℃下搅拌1‑2小时后，加入15mL水至反应体系，体系保持在0‑5℃析晶，抽滤，所得固体用水洗涤，干燥，得粗品4.56g，含水量6.8％。该实施例获得的游离碱粗品进行HPLC检验，结果见表6之实施例9，HPLC色谱图如图4所示。

[0112] 表6.实施例8‑9的萘普替尼游离碱粗品HPLC检测指标与结果

[0113]

[0114] a为双键异构体杂质由表6及图3和4可知，使用混合碱体系，可以减少萘普替尼最大杂质的生成。

[0115] 实施例10

[0116] 将含有2.5g(68.90mmol)氯化氢的浓盐酸加入至5mL水中，然后在30℃下20分钟内逐滴加入5.55g(34.45mmol)二甲氨基乙醛缩二乙醇(CAS号3616‑56‑6)。在30‑40℃温度下搅拌该反应溶液8小时，获得化合物(5)溶液，冷却至0‑5℃并在氩气中保持。该溶液被称为溶液B。

[0117] 同时将4.87g(86.81mmol)氢氧化钾和0.21g(1.4mmol)DBU溶解于20mL水中并冷却至‑5℃。该溶液被称为溶液C。

[0118] 同时再将8.6g(13.78mmol)的化合物(8)和0.58g(13.78mmol)氯化锂加入25mL四氢呋喃中，冷却至‑7℃备用。该溶液被称为溶液A。

[0119] 在保持搅拌和‑7℃条件下，10分钟内将已经冷却的溶液C滴加入溶液A中；然后再将溶液B缓慢滴加入混合溶液中。混合物在‑5℃下搅拌1‑2小时后。该实施例获得的反应液进行TLC检验显示反应未成功。

[0120] 综合实施例8‑10可知，在合成喹唑啉基丁烯酰胺抗肿瘤小分子药物(如阿法替尼等)中，本发明使用氢氧化钾为主、DBU为辅的混合碱体系，相比原研工艺独立碱体系，实现精确平衡控制双键异构杂质(例如阿法替尼杂质D)、DBU和丁烯酰胺环合杂质(例如阿法替尼杂质P)生成与降解的精准控制。但该合成方法暂不能应用于其他丁烯酰胺药物合成中(如喹啉基丁烯酰胺衍生物来那替尼)。