用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针

摘要

本发明公开了用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针，所述荧光探针，其特征是具有式(I)所示结构：本发明的用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针能够直接用在细胞体系中分析和检测高表达GLUT肿瘤细胞，从而完成对肿瘤细胞的筛选和识别。本发明的靶向肿瘤沃伯格效应的用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针能够直接用在细胞系中分析和检测肿瘤细胞GLUT蛋白的表达程度，从而完成对肿瘤细胞的筛选。为肿瘤早期筛选和诊断，开发新的抗肿瘤药物等提供了有效的手段和有用的工具。

权利要求

1.用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针，其特征是具有式(I)所示结构：其中，

R1选自(A‑1)或(A‑2)；

所述(A‑1)的结构式为：所述(A‑2)的结构式为：R2选自：

2.权利要求1的用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针在制备检测肿瘤试剂中的应用。

说明书

用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针

技术领域

[0001] 本发明属于生物分析检测领域，特别涉及用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针及应用。

背景技术

[0002] 目前，肿瘤已成为当今世界上严重威胁人类健康的重大疾病之一，随着抗肿瘤药物研究的发展，关于肿瘤早期诊断、靶向诊疗的研究也越来越引起人们的重视。

[0003] 靶向诊断和治疗肿瘤的方法有很多，其基本原理是利用肿瘤细胞或肿瘤组织特异性存在，或者与正常细胞或正常组织具有显著差异的肿瘤生物标志物，通过选择性识别、抑
制这些生物标志物而达到检测或者靶向治疗肿瘤的目的。研究表明，恶性肿瘤之所以能够
持续增殖、扩散和转移，其重要的生理机制之一是不断吸收和摄取它所需要的特殊营养。这
些营养包括，糖分子、氨基酸、维生素、核苷等。早在1924年，德国生物化学家奥托·沃伯格
就发现健康细胞能有效利用有氧代谢，从有限的糖类营养源制备足够的能量，而大多数肿
瘤细胞由于处于缺氧环境，则通过大量的糖吸收和糖代谢为自身提供能源。这种现象被称
为沃伯格效应。沃伯格因此于1931年获得了生理学或医学诺贝尔奖(参考文献：Warburg,
O.Science,123:309(1956)；"The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1931"
.Nobelprize.org.1931/>)。

[0004] 综上所述：基于肿瘤沃伯格效应，由于肿瘤细胞与健康细胞相比特异性高表达糖转运通道蛋白GLUT，因此以GLUT为肿瘤特异性标志物有望实现对肿瘤的靶向识别。

[0005] 糖基杯芳烃的合成方法及其与凝集素的作用已有文献报道(参考文献：Sansone,F.Chem.Soc.Rev.,2013,42,4623)，然而目前尚未有糖基杯芳烃荧光探针及应用的报道。

发明内容

[0006] 本发明的目的是克服现有技术的不足，提供用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针。

[0007] 本发明的第二个目的是提供用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针在制备检测肿瘤试剂中的应用。

[0008] 本发明的技术方案概述如下：

[0009] 用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针，具有式I所示结构：

[0010]

[0011] 其中，

[0012] R1选自(A‑1)或(A‑2)；

[0013] 所述(A‑1)的结构式为：

[0014]

[0015] 所述(A‑2)的结构式为：

[0016]

[0017] R2选自：

[0018]

[0019] 上述用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针在制备检测肿瘤试剂中的应用。

[0020] 有益效果

[0021] 本发明的用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针能够直接用在细胞体系中分析和检测高表达GLUT肿瘤细胞，从而完成对肿瘤细胞的筛选和识别。本发明的靶向肿瘤沃伯格
效应的用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针能够直接用在细胞系中分析和检测肿瘤细胞
GLUT蛋白的表达程度，从而完成对肿瘤细胞的筛选。为肿瘤早期筛选和诊断，开发新的抗肿
瘤药物等提供了有效的手段和有用的工具。

附图说明

[0022] 图1为实施例1探针的激发及发射荧光光谱；

[0023] 图2为实施例2探针的激发及发射荧光光谱；

[0024] 图3为实施例3探针的激发及发射荧光光谱；

[0025] 图4为实施例4探针的激发及发射荧光光谱；

[0026] 图5为实施例5探针的激发及发射荧光光谱；

[0027] 图6为实施例6探针的激发及发射荧光光谱；

[0028] 图7为本发明用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针(实施例1制备)用于检测和诊断肿瘤的效果；

[0029] 图8A为实施列1的用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针在GLUT高表达细胞和GLUT正常表达细胞中富集效果的比较；B为实施列2的用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针在
GLUT高表达细胞和GLUT正常表达细胞中富集效果的比较；C为实施列3的用于检测肿瘤的糖
基杯芳烃荧光探针在GLUT高表达细胞和GLUT正常表达细胞中富集效果的比较。

具体实施方式

[0030] 下面通过具体实施例对本发明作进一步详细的说明，各实施例是对本发明的解释而不是限定。

[0031] 实施例1

[0032] 用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑a的制备

[0033]

[0034] 1)中间体化合物3的制备：

[0035]

[0036] 化合物1(市售)(500mg)与溴乙酸乙酯(化合物2，170μL)溶于10mL干燥N,N‑二甲基甲酰胺(DMF)中,加入140mg氟化铯，加热至40℃搅拌16小时。反应液用300mL乙酸乙酯稀释，
用150mL饱和氯化铵水溶液在分液漏斗中洗涤，有机相分别用150mL水和150mL饱和氯化钠
水溶液洗涤。分离有机相，用无水硫酸钠干燥、过滤，粗产物用硅胶柱分离纯化得到目标产
物中间体化合物3(328mg，58％，白色固体)

[0037] 1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.02(s,4H),6.81(s,4H),4.72(s,2H),4.45(d,J＝13.2Hz,4H),4.30(q,J＝7.1Hz,4H),3.32(d,J＝13.2Hz,4H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H),1.26
(s,18H),0.97(s,18H).

[0038] 2)中间体化合物4的制备：

[0039]

[0040] 化合物3(328mg)溶于9mL无水乙醇(EtOH)中，得化合物3的乙醇溶液，将89mg氢氧化钠溶于6mL水中，滴加到化合物3的乙醇溶液中，混匀，升温至80℃搅拌4小时，反应完成后
减压旋蒸除去大部分溶剂，将浓缩后反应液用5％稀盐酸调pH＝1后有固体析出，减压抽滤
后烘干，得到目标产物中间体化合物4(300mg，95.2％，白色固体)。

[0041] 1H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ14.72(s,2H),7.08(d,J＝2.3Hz,2H),6.90(s,2H),6.86–6.74(m,4H),4.32(d,J＝11.8Hz,2H),4.08(d,J＝12.5Hz,2H),3.74(s,2H),3.14(d,J
＝12.2Hz,4H),1.16(d,J＝13.7Hz,27H),1.04(s,9H).

[0042] 3)中间体化合物6的合成：

[0043]

[0044] 化合物4(100mg)溶于410μL二氯亚砜(SOCl2)中，升温至80℃搅拌4小时。反应完成后，减压旋蒸除去二氯亚砜，得到的粗产品不经处理直接滴加至由原料化合物5(166mg)和
12μL吡啶(Pyridine)溶于2mL干燥二氯甲烷(DCM)中形成的溶液中，在室温和氩气保护下搅
拌过夜；减压旋蒸去除大部分有机溶剂，将残液用20mL乙酸乙酯稀释，分别用10mL水，10mL
饱和氯化钠水溶液洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压旋蒸除去有机溶剂后粗产物
进行硅胶柱分离纯化，获得目标产物化合物6(60mg，49％，黄色固体)。

[0045] 1H NMR(600MHz,CDCl3)δ11.22(s,1H),9.77(s,1H),9.21(s,2H),8.25(d,J＝7.8Hz,1H),7.47(d,J＝7.8Hz,1H),7.08(d,J＝3.5Hz,6H),7.04(d,J＝2.1Hz,2H),4.80(s,
2H),4.36(d,J＝13.9Hz,2H),4.22(d,J＝13.3Hz,2H),3.51(t,J＝13.0Hz,4H),1.22(d,J＝
2.8Hz,27H),1.17(s,9H).

[0046] 4)中间体化合物8‑1的合成：

[0047]

[0048] 化合物7‑1(2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑1‑(2‑溴乙氧基)‑甘露糖187mg，该化合物按照文献：The Journal of Antibiotics(2015)68,302–312报道的合成方法制备得到)溶于
10mL无水乙腈中，加入催化量的碘化钾，加热，回流搅拌1小时，加入300mg化合物6和58mg碳
酸钾，继续加热回流，搅拌48小时，减压旋蒸去除大部分有机溶剂，将残液用100mL乙酸乙酯
稀释，进而用50mL水，50mL饱和氯化钠水溶液洗涤。最后的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，
减压旋蒸除去有机溶剂后粗产物进行硅胶柱分离纯化，获得目标产物化合物8‑1(200mg，
46％，黄色固体)。

[0049] 1H NMR(600MHz,CDCl3)δ10.75(s,1H),8.48(d,J＝7.9Hz,1H),7.44(d,J＝7.9Hz,1H),7.14–7.04(m,4H),6.77(s,3H),6.74(d,J＝4.5Hz,2H),6.68(s,1H),5.28–5.19(m,
3H),4.86–4.77(m,2H),4.63(d,J＝15.8Hz,1H),4.54–4.45(m,2H),4.39–4.15(m,8H),3.95
(d,J＝12.1Hz,1H),3.87(s,1H),3.47(d,J＝13.6Hz,2H),3.39–3.29(m,2H),2.10(s,3H),
2.04(s,3H),1.90(s,3H),1.75(s,3H),1.29(s,18H),0.90(d,J＝8.9Hz,18H).

[0050] 5)用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑a的制备：

[0051]

[0052] 化合物8‑1(200mg)溶于6mL无水甲醇(MeOH)中，冷却至0℃后，将2mL的氢氧化钠水溶液(0.4mmol/mL)滴加到反应混合物中，升温至65℃搅拌1小时，减压旋蒸除去大部分溶
剂，将浓缩后反应液用100mL乙酸乙酯稀释，用50mL水在分液漏斗中洗涤，有机相用50mL饱
和氯化钠水溶液洗涤。分离有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，粗产物用硅胶柱分离纯化得
到目标产物用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑a(80mg，收率47％，黄色固体)

[0053] 1H NMR(600MHz,CDCl3)δ10.79(s,1H),8.42(d,J＝7.9Hz,1H),7.39(d,J＝7.9Hz,1H),7.08(d,J＝3.4Hz,4H),6.84–6.76(m,4H),6.69(d,J＝2.1Hz,2H),4.91(s,1H),4.73
(d,J＝15.6Hz,1H),4.63(d,J＝15.6Hz,1H),4.37(dd,J＝29.8,13.6Hz,4H),4.21(dd,J＝
24.2,13.0Hz,2H),4.04(s,1H),3.89(s,1H),3.82–3.64(m,4H),3.55(d,J＝8.4Hz,1H),
3.49–3.38(m,3H),3.31(dd,J＝25.1,13.1Hz,2H),1.29(d,J＝2.6Hz,18H),0.94(s,9H),
0.87(s,9H).

[0054] 13C NMR(150MHz,CDCl3)δ169.35,150.22,149.99,149.92,149.18,148.78,147.71,147.14,142.24,142.17,132.14,132.05,132.00,128.15,127.96,127.24,127.17,
126.00,125.86,125.82,125.78,125.28,125.18,125.14,118.38,115.61,100.42,75.78,
74.06,72.34,71.48,70.66,66.29,65.79,60.89,33.98,33.89,33.88,31.90,31.86,
31.70,31.40,31.31,30.97,30.93.

[0055] HRMS:Calcd.For C60H74ClN3O12+[M+Na]+:1086.4961,found:1086.4856.

[0056] 实施例2

[0057] 用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑b的制备：

[0058]

[0059] 步骤1)‑3)同实施例1的步骤1)‑3)；

[0060] 4)中间体化合物8‑2的合成：

[0061]

[0062] 用中间体7‑2(2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑1‑(2‑溴乙氧基)‑葡萄糖187mg，该化合物按照文献：The Journal of Antibiotics(2015)68,302–312报道的合成方法制备得到)替代
实施例1步骤4)中的7‑1(2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑1‑(2‑溴乙氧基)‑甘露糖187mg)，其它同实
施例1的步骤4)；得到中间体化合物8‑2。

[0063] 5)用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑b的制备：

[0064] 用化合物8‑2替代实施例1步骤5)中的化合物8‑1，其它同实施例1步骤5)，得黄色固体目标产物用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑b(75mg，收率43％)。

[0065] 1H NMR(600MHz,CDCl3)δ10.67(s,1H),8.50(d,J＝7.9Hz,1H),7.68(s,1H),7.48(d,J＝7.9Hz,1H),7.15(d,J＝2.1Hz,1H),7.08(d,J＝5.3Hz,3H),7.05(d,J＝2.1Hz,1H),
6.93(s,2H),6.69(d,J＝6.0Hz,2H),4.90(d,J＝15.4Hz,1H),4.40–4.32(m,4H),4.27(t,J
＝13.0Hz,3H),4.16(d,J＝10.4Hz,1H),4.07(dd,J＝10.4,2.4Hz,1H),3.85(d,J＝7.6Hz,
1H),3.81(dd,J＝11.9,3.5Hz,1H),3.72(dd,J＝11.9,4.7Hz,1H),3.54(d,J＝13.8Hz,1H),
3.49–3.44(m,2H),3.35–3.26(m,3H),3.21(t,J＝9.1Hz,1H),3.03(dd,J＝9.0,4.4Hz,1H),
1.29(d,J＝13.4Hz,18H),1.03(s,9H),0.86(s,9H).

[0066] 13C NMR(150MHz,CDCl3)δ170.18,150.75,149.99,149.01,148.82,148.72,147.73,146.59,145.45,142.83,142.28,132.59,132.48,132.27,132.23,131.79,129.07,
128.50,126.35,126.27,126.09,126.05,125.85,125.76,125.65,125.55,125.40,124.95,
124.81,118.20,115.44,103.38,76.06,75.55,74.09,73.40,69.77,67.84,62.04,34.15,
33.93,33.90,33.84,32.21,31.68,31.60,31.52,31.33,31.00,30.92,14.14.

[0067] 实施例3

[0068] 用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑c的制备：

[0069]

[0070] 步骤1)‑3)同实施例1的步骤1)‑3)；

[0071]

[0072] 4)中间体化合物8‑3的合成：用中间体7‑3(2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑1‑(2‑溴乙氧基)‑半乳糖187mg，该化合物按照文献：The Journal of Antibiotics(2015)68,302–312报
道的合成方法制备得到)替代实施例1步骤4)中的7‑1(2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑1‑(2‑溴乙氧
基)‑甘露糖187mg)，其它同实施例1的步骤4)；得到中间体化合物8‑3。

[0073] 5)用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑c的制备：

[0074] 用化合物8‑3替代实施例1步骤5)中的化合物8‑1，其它同实施例1步骤5)，得黄色固体目标产物用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑c(60mg，收率35％)。

[0075] 1H NMR(600MHz,CDCl3)δ10.69(s,1H),8.48(d,J＝7.9Hz,1H),7.72(s,1H),7.46(d,J＝7.9Hz,1H),7.15(d,J＝14.7Hz,2H),7.10–7.03(m,5H),6.94(d,J＝3.6Hz,2H),6.69
(d,J＝15.0Hz,2H),4.90(d,J＝15.5Hz,1H),4.35(dd,J＝14.0,8.5Hz,4H),4.30–4.21(m,
4H),4.19(s,1H),4.11(d,J＝7.2Hz,2H),3.86(dd,J＝17.4,8.6Hz,3H),3.78(dd,J＝11.8,
4.7Hz,2H),3.63–3.57(m,1H),3.54(d,J＝13.9Hz,1H),3.45(d,J＝13.8Hz,2H),3.34–3.25
(m,3H),3.24–3.15(m,1H),2.86(d,J＝22.9Hz,2H),1.30(s,9H),1.28(s,9H),1.03(s,9H),
0.86(s,9H).

[0076] 13C NMR(151MHz,CDCl3)δ171.18,170.16,169.49,150.88,150.70,149.96,148.95,148.84,148.80,147.64,146.53,145.46,142.85,142.33,132.56,132.50,132.21,
132.12,131.69,129.08,128.58,127.20,126.40,126.34,126.31,126.04,126.02,125.86,
125.76,125.73,125.71,125.65,125.55,125.52,125.48,125.03,124.92,124.87,118.34,
118.13,115.44,103.61,99.24,75.65,75.48,74.22,74.14,73.14,71.13,70.61,70.15,
68.88,67.58,66.29,62.50,62.21,62.09,60.42,53.27,34.15,34.13,34.07,33.95,
33.89,33.82,32.88,32.20,32.05,31.69,30.91,29.70,21.00,14.13.

[0077] 实施例4

[0078] 用于检测或治疗肿瘤的荧光探针I‑d的制备：

[0079] 1)中间体化合物10的制备：

[0080]

[0081] 化合物9(77mg，该化合物按照文献J.Phys.Chem.A 2013,117,1474‑1482报道方法制备得到)溶于2mL无水丙酮中，加入催化量的碘化钾，升温至60℃搅拌1小时，加入100mg化
合物1和43mg碳酸钾，继续搅拌6小时后减压旋蒸去除大部分有机溶剂，将残液用20mL乙酸
乙酯稀释，进而用10mL水，10mL饱和氯化钠水溶液洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥、过滤，减
压旋蒸除去有机溶剂后粗产物进行硅胶柱分离纯化，获得目标产物10(50mg，38％，白色固
体)。

[0082] 2)用于检测或治疗肿瘤的荧光探针I‑d的制备：

[0083]

[0084] 中间体化合物8‑4的合成：用中间体化合物10替代实施例1步骤4)中的中间体化合物6，其它同实施例1的步骤4)；得到中间体化合物8‑4。

[0085] 用化合物8‑4替代实施例1步骤5)中的化合物8‑1，其它同实施例1步骤5)，得白色固体目标产物用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑d(75mg，收率43％)。

[0086] 1H NMR(600MHz,CDCl3)δ10.72(s,1H),8.02(d,J＝8.7Hz,1H),7.76(s,1H),7.58(d,J＝8.7Hz,1H),7.21(d,J＝3.8Hz,2H),7.11–7.05(m,5H),6.86(d,J＝12.1Hz,4H),6.14
(s,1H),4.77(s,1H),4.70(d,J＝15.3Hz,1H),4.58(d,J＝15.3Hz,1H),4.35(d,J＝13.2Hz,
1H),4.28(d,J＝12.9Hz,2H),4.23–4.17(m,3H),3.90–3.70(m,12H),3.47–3.35(m,6H),
2.37(s,3H),1.27(d,J＝5.3Hz,18H),0.99(d,J＝3.9Hz,18H).

[0087] 13C NMR(150MHz,CDCl3)δ168.03,161.32,154.09,152.64,149.76,149.59,149.34,149.14,147.80,142.70,141.36,132.41,132.26,132.17,127.98,127.72,126.12,
126.04,125.98,125.55,125.47,125.43,125.36,116.55,116.26,113.53,107.52,100.47,
75.30,74.12,72.50,71.62,70.72,66.67,65.92,61.18,34.01,33.90,32.19,32.10,
31.91,31.70,31.65,31.64,30.96,30.95,18.52.

[0088] HRMS:Calcd.For C64H79NO13+[M+Na]+:1092.5551,found:1092.5439.

[0089] 实施例5

[0090] 用于检测或治疗肿瘤的荧光探针I‑e的制备：

[0091]

[0092] 1)中间体化合物8‑5的合成：用中间体10替代实施例2步骤4)中的中间体6，其它同实施例2的步骤4)；得到中间体化合物8‑5。

[0093] 2)用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑e的制备：

[0094] 用化合物8‑5替代实施例2步骤5)中的化合物8‑2，其它同实施例2步骤5)，得白色固体目标产物用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑e(85mg，收率64％)。

[0095] 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.74(s,1H),8.26(d,J＝10.6Hz,1H),7.85(s,1H),7.72–7.66(m,2H),7.62(s,1H),7.16(s,1H),7.11(s,2H),7.03(d,J＝3.5Hz,3H),6.85(d,J＝
10.6Hz,2H),6.24(s,1H),4.96(d,J＝15.0Hz,1H),4.38–4.25(m,4H),4.21(d,J＝10.3Hz,
2H),4.17–4.09(m,2H),3.89(d,J＝7.7Hz,1H),3.80(dd,J＝13.7,5.6Hz,2H),3.70(dd,J＝
11.8,5.0Hz,1H),3.61(d,J＝13.7Hz,1H),3.51–3.29(m,6H),3.01(q,J＝8.8,7.1Hz,1H),
2.87(d,J＝14.4Hz,1H),2.46(s,3H),1.28(d,J＝9.8Hz,18H),1.10(s,9H),0.99(s,9H).

[0096] 13C NMR(150MHz,CDCl3)δ169.24,161.07,154.25,149.98,149.10,148.87,147.41,147.15,143.64,143.15,141.90,132.85,129.25,127.08,126.54,126.44,126.09,
125.86,125.76,125.29,124.94,116.12,113.59,107.21,103.33,76.08,75.56,75.51,
74.14,73.44,70.63,67.76,62.67,34.23,33.95,33.93,32.28,32.15,31.66,31.61,
31.59,31.55,30.99,30.93,18.62.

[0097]

[0098] 实施例6

[0099] 用于检测或治疗肿瘤的荧光探针I‑f的制备：

[0100]

[0101] 1)中间体化合物8‑6的合成：用中间体10替代实施例3步骤4)中的中间体6，其它同实施例3的步骤4)；得到中间体化合物8‑6。

[0102] 2)用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑f的制备：

[0103] 用化合物8‑6替代实施例3步骤5)中的化合物8‑3，其它同实施例3步骤5)，得白色固体目标产物用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针I‑f(70mg，收率40％)。

[0104] 1H NMR(600MHz,CDCl3)δ10.73(s,1H),8.11–8.02(m,1H),7.91–7.85(m,2H),7.62(d,J＝8.4Hz,2H),7.19–7.08(m,3H),7.04(d,J＝4.8Hz,3H),6.88–6.80(m,2H),6.24(s,
1H),4.90(d,J＝14.9Hz,1H),4.38–4.29(m,3H),4.27–4.19(m,3H),4.14(t,J＝14.5Hz,
2H),3.97(d,J＝3.0Hz,1H),3.91–3.79(m,3H),3.73(dd,J＝11.8,4.4Hz,1H),3.67–3.59
(m,2H),3.56(dd,J＝9.4,3.3Hz,1H),3.46(d,J＝13.7Hz,1H),3.42–3.35(m,2H),3.21(t,J
＝5.2Hz,1H),2.45(s,3H),1.28(d,J＝10.7Hz,18H),1.11(s,9H),0.99(s,9H).

[0105] 13C NMR(150MHz,CDCl3)δ169.07,161.03,154.37,149.25,149.07,148.78,147.32,147.09,143.72,143.23,132.93,132.52,132.05,129.40,128.70,126.94,126.66,
126.27,126.15,125.90,125.80,125.57,125.28,124.99,115.85,113.62,107.28,103.35,
77.07,75.67,74.39,74.15,73.10,71.07,68.98,67.32,62.65,34.29,34.00,33.98,
33.96,32.36,32.23,31.69,31.63,31.60,31.03,30.96,18.63.

[0106]

[0107] 试验例1：用于检测肿瘤的糖基杯芳烃荧光探针(简称荧光探针)荧光光谱的测定实验

[0108] 1)实验仪器：Thermo Scientific Varioskan LUX。

[0109] 2)实验化合物：以上各实施例制备的荧光探针I‑a,I‑b,I‑c,I‑d,I‑e,I‑f.

[0110] 测试溶剂：DMSO

[0111] 3)实验步骤

[0112] (1)称取各化合物。

[0113] (2)用DMSO溶解化合物至10mM，涡旋1min，使化合物充分溶解。

[0114] (3)取5μl溶解好的化合物加入到495μl DMSO中，涡旋均匀。取不同化合物溶液与测试溶剂各200ul，加入到黑色底透96孔培养板中，用多功能酶标仪检测吸收光谱、激发光
谱和发射光谱。

[0115] 表‑1：

[0116]  实施例1‑6荧光探针
吸收光谱(nm) 300‑800
激发光谱(nm) 200‑500
发射光谱(nm) 345‑700

[0117] 4)数据处理：用OriginPro 8.5处理，导出吸收谱、发射谱、激发及发射荧光光谱。

[0118] 5)结果：本发明各实施例的荧光探针的激发及发射荧光光谱见图1至图6。

[0119] 本发明所提供的荧光探针中，

[0120] I‑a,I‑b,I‑c的荧光探针的激发波长范围为：370nm至390nm，发射波长范围为：520nm。

[0121] I‑d,I‑e,I‑f的荧光探针的激发波长范围为：320nm至340nm，发射波长范围为：380nm。

[0122] 试验例2：荧光探针在制备检测肿瘤试剂中的应用

[0123] 1.称取1mg荧光探针，使用分析纯二甲基亚砜(DMSO)将荧光探针配制成10mM溶液，然后用PBS(pH＝7)稀释成100μM的检测试剂。在使用前配制，或配制后置于‑20℃冷冻避光
保存。

[0124] 2.肿瘤细胞培养：

[0125] (2017年5月从武汉普诺赛生命科技有限公司(https://www.procell.com.cn/)购得三阴性乳腺癌细胞MDA‑MB‑231、人肺癌细胞A549、人正常肺上皮细胞BEAS‑2B、人胚胎肾
细胞293FT)。

[0126] 分别按照相应的细胞培养条件进行培养并使用。

[0127] 具体培养条件如下：

[0128] 三阴性乳腺癌细胞MDA‑MB‑231：含谷胺酰胺DMEM液，10％血清，1％双抗，5％二氧化碳，37℃；

[0129] 人肺癌细胞A549：RPMI‑1640培养基，10％胎牛血清，95％空气，5％二氧化碳，37℃；

[0130] 人正常肺上皮细胞BEAS‑2B：DMEM培养基，10％血清，1％双抗，5％二氧化碳，37℃；

[0131] 人胚胎肾细胞293FT的培养参照文献：Biochemical and Biophysical Research Communications 487,(2017),34‑40；

[0132] GLUT1‑293FT细胞(GLUT1高表达的人胚胎肾细胞)的制备和培养参照文献：Biochemical and Biophysical Research Communications 487,(2017),34‑40。

[0133] 3.肿瘤检测：

[0134] 用本试验例步骤1配制的检测试剂进行肿瘤检测试验。

[0135] 1)在细胞培养箱中，在不同的96孔板中分别铺设三阴性乳腺癌细胞MDA‑MB‑231、人肺癌细胞A549，人正常肺上皮细胞BEAS‑2B。待细胞过夜贴壁后，分别加入步骤1配制的检
测试剂(其中的荧光探针为实施例1制备)，使所述荧光探针的终浓度为500nM，于37℃培养
60分钟。冰冷PBS(pH＝7.0)洗3遍，转移到酶标板中拍照，见图7。

[0136] 从图7可以看出：荧光探针I‑a在三阴性乳腺癌细胞MDA‑MB‑231、人肺癌细胞A549中呈现明显的绿色荧光，而在人正常肺上皮细胞BEAS‑2B中呈现出点状绿色荧光，证明荧光
探针I‑a能够用来检测肿瘤细胞。

[0137] 2)在细胞培养箱中，在不同的96孔板中分别铺设人胚胎肾细胞293FT、GLUT1‑293FT细胞。待细胞过夜贴壁后，分别加入检测试剂(其中的荧光探针为实施例1、2、3制备),
使所述荧光探针的终浓度3.125‑500μM，于37℃培养60分钟。冰冷PBS(pH＝7.0)洗3遍，转移
到酶标板中拍照。检测结果见图8。

[0138] 从图8A、图8B、图8C中可以看出，荧光探针I‑a、I‑b、I‑c在GLUT1高表达的人胚胎肾细胞GLUT1‑293FT中富集量是人胚胎肾细胞293FT的1.5‑3倍。

[0139] 实验证明，荧光探针I‑b、I‑c、I‑d、I‑e和I‑f对三阴性乳腺癌细胞MDA‑MB‑231、人肺癌细胞A549，人正常肺上皮细胞BEAS‑2B的检测效果与I‑a相似。

[0140] 荧光探针I‑d在GLUT1高表达的人胚胎肾细胞GLUT1‑293FT及人胚胎肾细胞293FT中的富集效果与I‑a相似。

[0141] 荧光探针I‑e在GLUT1高表达的人胚胎肾细胞GLUT1‑293FT及人胚胎肾细胞293FT中的富集效果与I‑b相似。

[0142] 荧光探针I‑f在GLUT1高表达的人胚胎肾细胞GLUT1‑293FT及人胚胎肾细胞293FT中的富集效果与I‑c相似。