包含依特那斯汀衍生物的抗体药物共轭物转让专利
申请号 : CN201980084790.7
文献号 : CN113226377B
文献日 : 2022-10-18
发明人 : 马里亚·德尔·卡门·库瓦斯马昌特 , A·弗兰切斯凯索洛索 , 阿方索·拉托雷洛萨诺 , 瓦伦丁·马丁内斯巴拉萨
申请人 : 法马马有限公司
摘要 :
药物共轭物，其具有式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab，其中：D为具有下式(I)的药物部分或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中D经由羟基或氨基共价附接至(X)b(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(T)g(若存在)、或(L)；其可用于治疗癌症。
权利要求 :
1.一种药物共轭物，其包含共价附接至所述药物共轭物的其余部分的药物部分，所述药物共轭物具有式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab，其中：D为具有下式(I)的药物部分或其医药学上可接受的盐，其中：
D经由羟基或氨基共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L)；
Y为‑NH‑或‑O‑；
R1为‑OH或‑CN；
R2为‑C(＝O)Ra基团；
R3为氢或‑ORb基团；
R4选自‑CH2O‑、以及‑CH2NH‑；
Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
X及T为可相同或不同的延伸基团；
各AA独立地为氨基酸单元；
L为连接子基团；
w为在0至12范围内的整数；
b为0或1的整数；
g为0或1的整数；
Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分；且
n为所述基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]与所述包含至少一个抗原结合位点的部分的比率且在1至20的范围内；
其中所述药物部分D通过所述R4位置共轭。
2.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中D选自式Ia或Ib，或其医药学上可接受的盐：其中：
Y为‑NH‑或‑O‑；
R1为‑OH或‑CN；
R2为‑C(＝O)Ra基团；
R3为氢或‑ORb基团；
R4选自‑CH2O‑、以及‑CH2NH‑；
Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基。
3.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中R4为‑CH2O‑。
4.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中R4为‑CH2NH‑。
5.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中D为下式化合物：或其医药学上可接受的盐；
其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L)的点。
6.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中D为下式化合物：或其医药学上可接受的盐，
其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L)的点。
7.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中D为下式化合物：或其医药学上可接受的盐；
其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L)的点。
8.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中D为下式化合物：或其医药学上可接受的盐；
其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L)的点。
9.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中D为下式化合物：或其医药学上可接受的盐；
其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L)的点。
10.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中D为下式化合物：或其医药学上可接受的盐；
其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L)的点。
11.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中D为下式化合物：或其医药学上可接受的盐；
其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L)的点。
12.一种药物共轭物，其包含共价附接于所述药物共轭物的其余部分的药物部分，所述药物共轭物具有式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab，其中：D为具有下式(IH)的药物部分或其医药学上可接受的盐：其中：
波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L)的点；
各Y及Z独立地选自‑NH‑及‑O‑；
R1为‑OH或‑CN；
R2为‑C(＝O)Ra基团；
R3为氢或‑ORb基团；
Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；且Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
取代基Rx选自由以下组成的组：可视需要经至少一个基团Ry取代的C1‑C12烷基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12烯基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12炔基、卤素原子、氧代、硫基、氰基、硝基、ORy、OCORy、OCOORy、CORy、COORy、OCONRyRz、CONRyRz、S(O)Ry、SO2Ry、P(O)(Ry)ORz、NRyRz、NRyCORz、NRyC(＝O)NRyRz、NRyC(＝NRy)NRyRz、呈一或多个环的具有
6至18个碳原子的芳基，所述芳基可视需要经一或多个可相同或不同的选自由Ry、ORy、OCORy、OCOORy、NRyRz、NRyCORz及NRyC(＝NRy)NRyRz组成的组的取代基取代、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷基的芳烷基、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷氧基的芳烷氧基及具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基，所述杂环基视需要经一或多个取代基Ry取代且在任何既定基团上存在超过一个视需要选用的取代基的情况下，所述视需要选用的取代基Ry可相同或不同；
各Ry及Rz独立地选自由以下组成的组：氢、C1‑C12烷基、经至少一个卤素原子取代的C1‑C12烷基、包含经呈一或多个环的具有6至18个碳原子的芳基取代的C1‑C12烷基的芳烷基及包含经具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基取代的C1‑C12烷基的杂环烷基；
X及T为可相同或不同的延伸基团；
各AA独立地为氨基酸单元；
L为连接子基团；
w为在0至12范围内的整数；
b为0或1的整数；
g为0或1的整数；
Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分；且
n为所述基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]与所述包含至少一个抗原结合位点的部分的比率且在1至20的范围内。
13.根据权利要求12所述的药物共轭物，或其医药学上可接受的盐，其中D为选自式(IHa)及(IHb)的药物部分：
其中：
波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L)的点；
各Y及Z独立地选自‑NH‑及‑O‑；
R1为‑OH或‑CN；
R2为‑C(＝O)Ra基团；
R3为氢或‑ORb基团；
Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；且Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
取代基Rx选自由以下组成的组：可视需要经至少一个基团Ry取代的C1‑C12烷基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12烯基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12炔基、卤素原子、氧代、硫基、氰基、硝基、ORy、OCORy、OCOORy、CORy、COORy、OCONRyRz、CONRyRz、S(O)Ry、SO2Ry、P(O)(Ry)ORz、NRyRz、NRyCORz、NRyC(＝O)NRyRz、NRyC(＝NRy)NRyRz、呈一或多个环的具有
6至18个碳原子的芳基，所述芳基可视需要经一或多个可相同或不同的选自由Ry、ORy、OCORy、OCOORy、NRyRz、NRyCORz及NRyC(＝NRy)NRyRz组成的组的取代基取代、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷基的芳烷基、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷氧基的芳烷氧基及具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基，所述杂环基视需要经一或多个取代基Ry取代且在任何既定基团上存在超过一个视需要选用的取代基的情况下，所述视需要选用的取代基Ry可相同或不同；
各Ry及Rz独立地选自由以下组成的组：氢、C1‑C12烷基、经至少一个卤素原子取代的C1‑C12烷基、包含经呈一或多个环的具有6至18个碳原子的芳基取代的C1‑C12烷基的芳烷基及包含经具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基取代的C1‑C12烷基的杂环烷基。
14.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中Y为‑NH‑。
15.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中Y为‑O‑。
16.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中R1为‑OH。
17.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中R1为‑CN。
18.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中R2为‑C(＝O)Ra基团，其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
19.根据权利要求18所述的药物共轭物，其中R2为乙酰基。
20.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中R3为氢或‑ORb，其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
21.根据权利要求20所述的药物共轭物，其中R3为氢。
22.根据权利要求20所述的药物共轭物，其中R3为‑ORb，其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
23.根据权利要求22所述的药物共轭物，其中R3为甲氧基。
24.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中所述盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、顺丁烯二酸盐、反丁烯二酸盐、柠檬酸盐、乙二酸盐、丁二酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、杏仁酸盐、甲烷磺酸盐、对甲苯磺酸盐、钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、乙二胺、乙醇胺、N，N‑二亚烷基乙醇胺、三乙醇胺及碱性氨基酸。
25.根据权利要求12所述的药物共轭物，其中L为选自由以下组成的组的连接子基团：其中
右边的波浪线表示共价附接至Ab的点，及左边的波浪线表示共价附接至(T)g、或(AA)w、或(X)b、或D的点；
R19选自‑C1‑C12亚烷基‑、‑C3‑C8碳环基、‑O‑(C1‑C12亚烷基)、可视需要经一或多个取代基Rx取代的呈单环或多环的‑C6‑C18亚芳基、‑C1‑C12亚烷基‑C6‑C18亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C6‑C18亚芳基‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑、‑(C3‑C8碳环基)‑C1‑C12亚烷基‑、‑C5‑C14杂环基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C5‑C14杂环基)‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(C5‑C14杂环基)‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(OCH2CH2)r‑及‑CH2‑(OCH2CH2)r‑，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
R30为‑C1‑C6亚烷基‑基团；
M选自由以下组成的组：‑C1‑C6亚烷基‑、‑C1‑C6亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑、‑(CH2CH2O)s‑、‑C1‑C6亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑CON(H或C1‑C6烷基)‑C1‑C6亚烷基‑、可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基、亚苯基‑C1‑C6亚烷基‑，其中所述亚苯基部分可视需要经一或多个取代基Rx取代、及‑C1‑C6亚烷基‑CON(H或C1‑C6烷基)C1‑C6亚烷基‑；
Q选自由以下组成的组：‑N(H或C1‑C6烷基)亚苯基‑及‑N(H或C1‑C6烷基)‑(CH2)s；
r为1至10范围内的整数；且
s为1至10范围内的整数。
26.根据权利要求25所述的药物共轭物，其中L为选自由以下组成的组的连接子基团：及
其中：
右边的波浪线表示共价附接至Ab的点，及左边的波浪线表示共价附接至(T)g、或(AA)w、或(X)b的点；
R19选自‑C1‑C12亚烷基‑、‑O‑(C1‑C12亚烷基)、呈单环或多环的可视需要经一或多个取代基Rx取代的‑C6‑C12亚芳基、‑C1‑C12亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C5‑C12杂环基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C5‑C12杂环基)‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(C5‑C12杂环基)‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(OCH2CH2)r‑及‑CH2‑(OCH2CH2)r‑，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
R30为‑C1‑C6亚烷基‑基团；
M选自由以下组成的组：‑C1‑C6亚烷基‑、‑C1‑C6亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑及可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基；且r为在1‑6范围内的整数。
27.根据权利要求26所述的药物共轭物，其选自式(IV)、(V)及(VI)：其中：
X及T为可相同或不同的延伸基团；
各AA独立地为氨基酸单元；
w为在0至12范围内的整数；
b为0或1的整数；
g为0或1的整数；
D为药物部分；
Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分；
n在1至20的范围内；
R19选自‑C1‑C8亚烷基‑、‑O‑(C1‑C8亚烷基)、‑C1‑C8亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、及‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C8亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
R30为‑C2‑C4亚烷基‑基团；且
M选自由以下组成的组：‑C1‑C3亚烷基‑及‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑。
28.根据权利要求27所述的药物共轭物，其选自式(IV)、(V)及(VI)：其中：
X及T为可相同或不同的延伸基团；
各AA独立地为氨基酸单元；
w为在0至12范围内的整数；
b为0或1的整数；
g为0或1的整数；
D为药物部分；
Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分；
n在1至20的范围内；
R19选自‑C1‑C6亚烷基‑、亚苯基‑C1‑C6亚烷基‑，其中所述亚苯基可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至碳链中的另一部分均可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至
12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代；
R30为‑C2‑C4亚烷基‑基团；且
M为‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑。
29.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中(AA)w具有式(II)：其中左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或至所述药物部分的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或至所述连接子的点；且
R21在每次出现时选自由以下组成的组：氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、苯甲基、对羟基苯甲基、‑CH2OH、‑CH(OH)CH3、‑CH2CH2SCH3、‑CH2CONH2、‑CH2COOH、‑CH2CH2CONH2、‑CH2CH2COOH、‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2、‑(CH2)3NH2、‑(CH2)3NHCOCH3、‑(CH2)3NHCHO、‑(CH2)4NHC(＝NH)NH2、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)4NHCOCH3、‑(CH2)4NHCHO、‑(CH2)3NHCONH2、‑(CH2)4NHCONH2、‑CH2CH2CH(OH)CH2NH2、2‑吡啶基甲基‑、3‑吡啶基甲基‑、4‑吡啶基甲基‑、苯基、环己基、及且w为在0至12范围内的整数。
30.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中(AA)w具有式(II)：其中左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或至所述药物部分的点，及右边的波浪线表示共价附接至至(T)g、或至所述连接子的点，并且：R21在每次出现时选自由以下组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苯甲基、吲哚基甲基、‑(CH2)3NHCONH2、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2及‑(CH2)4NHC(＝NH)NH2；且w为在0至6范围内的整数。
31.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：
其中：
左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或至所述药物部分的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或至所述连接子的点；
R22选自甲基、苯甲基、异丙基、仲丁基及吲哚基甲基；且R23选自甲基、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHCONH2及‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2。
32.根据权利要求12所述的药物共轭物，其中X为选自以下的延伸基团：在D经由氨基共价附接的情况下：
‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NH‑；
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一或多个取代基Rx取代；
‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一或多个取代基Rx取代；
‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑；
‑COCH2NH‑；
‑COO‑(C1‑C6亚烷基)S‑；
‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NHCO(C1‑C6亚烷基)S‑；且在D经由羟基共价附接的情况下：
‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NH‑；
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一个或多个取代基Rx取代；
‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一个或多个取代基Rx取代；
‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑；
‑COCH2NH‑；
‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)S‑；
‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NHCO(C1‑C6亚烷基)S‑；且b为0或1。
33.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中X为选自由以下组成的组的延伸基团：在D经由氨基共价附接的情况下：
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑；
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代；
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代；
‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑；
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑；
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；或在D经由羟基共价附接的情况下：
‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑；
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代；
‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代；
‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑；
‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)S‑；
‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；且b为0或1。
34.根据权利要求33所述的药物共轭物，其中X为选自由以下组成的组的延伸基团：在D经由氨基共价附接的情况下：
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑
‑COO(CH2)3NHCOOCH2‑亚苯基‑NH‑；
‑COO(CH2)3NH‑；
‑COO(CH2)3‑S‑；
‑COO(CH2)3NHCO(CH2)2S‑；或在D经由羟基共价附接的情况下：
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑
‑CONH(CH2)3NHCOOCH2‑亚苯基‑NH‑；
‑CONH(CH2)3NH‑；
‑CONH(CH2)3‑S‑；
‑CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S‑；且b为0或1。
35.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中T为选自由以下组成的组的延伸基团：‑CO‑(C1‑C6亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C6亚烷基)‑[O‑(C2‑C6亚烷基)]j‑NH‑、‑COO‑(C1‑C6亚烷基)‑[O‑(C2‑C6亚烷基)]j‑NH‑；其中j为1至25的整数且g为0或1。
36.根据权利要求35所述的药物共轭物，其中T为选自由以下组成的组的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑、‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至10的整数；且g为0或1。
37.根据权利要求36所述的药物共轭物，其中T为选自由以下组成的组的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑、‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑；其中j为1至5的整数；且g为0或1。
38.根据权利要求13所述的药物共轭物，其中D为式(IHa)或式(IHb)的药物部分或其医药学上可接受的盐，其中：
R1为CN或OH；
R2为C(＝O)Ra，其中Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
R3为氢或‑ORb基团，其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx，Y为‑NH‑或‑O‑；且
Z为‑NH‑或‑O‑。
39.根据权利要求38所述的药物共轭物，其中D为式(IHa)或式(IHb)的药物部分，或其医药学上可接受的盐，其中：
R1为CN或OH；
R2为乙酰基；
R3为氢或甲氧基；
Y为‑NH‑或‑O‑；且
Z为‑NH‑或‑O‑。
40.根据权利要求39所述的药物共轭物，其中D为式(IHa)或式(IHb)的药物部分，或其医药学上可接受的盐，其中：
R1为CN；
R2为乙酰基：
R3为氢；
Y为‑NH‑或‑O‑；且
Z为‑NH‑。
41.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中D选自：及
或其医药学上可接受的盐，其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或至(L)的点。
42.根据权利要求41所述的药物共轭物，其中D为及
或其医药学上可接受的盐，其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或至(L)的点。
43.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为抗原结合肽。
44.根据权利要求43所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为抗体、单域抗体或其抗原结合片段。
45.根据权利要求43所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为单株抗体、多株抗体或双特异性抗体且其中所述抗体或其抗原结合片段来源于任何物种。
46.根据权利要求44所述的药物共轭物，其中所述抗体或其抗原结合片段选自由以下组成的组：人类抗体、人类抗体的抗原结合片段、人类化抗体、人类化抗体的抗原结合片段、嵌合抗体、嵌合抗体的抗原结合片段、糖基化抗体及糖基化抗原结合片段。
47.根据权利要求44所述的药物共轭物，其中所述抗体或其抗原结合片段为选自由Fab片段、Fab'片段、F(ab')2片段及Fv片段组成的组的抗原结合片段。
48.根据权利要求44所述的药物共轭物，其中所述抗体或其抗原结合片段为免疫特异性结合于癌细胞抗原、病毒抗原、产生与自体免疫性疾病相关联的自体免疫抗体的细胞的抗原、微生物抗原的单株抗体。
49.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为选自由以下组成的组的抗体：阿昔单抗(Abciximab)、阿仑单抗(Alemtuzumab)、阿奈妥单抗(Anetumab)、阿特珠单抗(Atezolizumab)、阿维鲁单抗(Avelumab)、巴利昔单抗(Basiliximab)、贝伐单抗(Bevacizumab)、博纳吐单抗(Blinatomumab)、本妥昔单抗(Brentuximab)、卡妥索单抗(Catumaxomab)、西妥昔单抗(Cetuximab)、考妥昔单抗(Coltuximab)、达利珠单抗(DaclIzumab)、达雷木单抗(Daratumumab)、地宁妥珠单抗(Denintuzumab)、地诺单抗(Denosumab)、德帕妥昔珠单抗(Depatuxizumab)、地努妥昔单抗(Dinutuximab)、德瓦鲁单抗(Durvalumab)、埃罗妥珠单抗(Elotuzumab)、因福土单抗(Enfortumab)、格巴妥木单抗(Glembatumumab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、替伊莫单抗(Ibritumomab)、英达妥昔单抗(Indatuximab)、英度妥单抗(Indusatumab)、奥英妥珠单抗(Inotuzumab)、伊匹单抗(Ipilimumab)、拉贝珠单抗(Labetuzumab)、拉妥珠单抗(Ladiratuzumab)、拉妥昔单抗(Laprituximab)、利法妥珠单抗(Lifastuzumab)、洛沃妥珠单抗(Lorvotuzumab)、米拉组单抗(Milatuzumab)、米妥昔单抗(Mirvetuximab)、那妥昔单抗(Naratuximab)、耐昔妥珠单抗(Necitumumab)、尼妥珠单抗(Nimotuzumab)、纳武单抗(Nivolumab)、奥滨尤妥珠单抗(Obinutuzumab)、奥法木单抗(Ofatumumab)、奥拉单抗(Olaratumab)、奥马珠单抗(Omalizumab)、帕利珠单抗(Palivizumab)、帕尼单抗(Panitumumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)、帕妥珠单抗(Pertuzumab)、匹那妥珠单抗(Pinatuzumab)、泊洛妥珠单抗(Polatuzumab)、雷莫芦单抗(Ramucirumab)、洛伐妥珠单抗(Rovalpituzumab)、沙西妥珠单抗(Sacituzumab)、司妥昔单抗(Siltuximab)、司曲妥单抗(Sirtratumab)、索非妥珠单抗(Sofituzumab)、伐达妥昔单抗(Vadastuximab)、沃瑟妥珠单抗(Vorsetuzumab)、曲妥珠单抗(Trastuzumab)、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD
30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
50.根据权利要求49所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为选自由以下组成的组的抗体：阿昔单抗、阿仑单抗、阿奈妥单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地宁妥珠单抗、地诺单抗、德帕妥昔珠单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、因福土单抗、格巴妥木单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、英达妥昔单抗、英度妥单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、拉妥珠单抗、拉妥昔单抗、米妥昔单抗、那妥昔单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、泊洛妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、萨西土珠单抗、司妥昔单抗、司曲妥单抗、伐达妥昔单抗、沃瑟妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
51.根据权利要求49所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为选自由以下组成的组的抗体：阿昔单抗、阿仑单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地诺单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、司妥昔单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
52.根据权利要求13所述的药物共轭物，其中：L为选自由以下组成的组的连接子基团：
及
其中：
右边的波浪线表示共价附接至Ab的点，及左边的波浪线表示共价附接至(T)g、或(AA)w、或(X)b、或至D的点；
R19选自‑C1‑C12亚烷基‑、‑O‑(C1‑C12亚烷基)、呈单环或多环的可视需要经一或多个取代基Rx取代的‑C6‑C12亚芳基、‑C1‑C12亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C5‑C12杂环基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C5‑C12杂环基)‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(C5‑C12杂环基)‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(OCH2CH2)r‑及‑CH2‑(OCH2CH2)r‑，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
R30为‑C1‑C6亚烷基‑基团；
M选自由以下组成的组：‑C1‑C6亚烷基‑、‑C1‑C6亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑及可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基；
r为在1‑6范围内的整数；
(AA)w具有式(II)：
其中左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或至所述药物部分的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或至所述连接子的点；
R21在每次出现时选自由以下组成的组：氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、苯甲基、对羟基苯甲基、‑CH2OH、‑CH(OH)CH3、‑CH2CH2SCH3、‑CH2CONH2、‑CH2COOH、‑CH2CH2CONH2、‑CH2CH2COOH、‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2、‑(CH2)3NH2、‑(CH2)3NHCOCH3、‑(CH2)3NHCHO、‑(CH2)4NHC(＝NH)NH2、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)4NHCOCH3、‑(CH2)4NHCHO、‑(CH2)3NHCONH2、‑(CH2)4NHCONH2、‑CH2CH2CH(OH)CH2NH2、2‑吡啶基甲基‑、3‑吡啶基甲基‑、4‑吡啶基甲基‑、苯基、环己基、及w为在0至12范围内的整数；
其中X为选自以下的延伸基团：
在Z为‑NH‑的情况下：
‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NH‑，
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基基团可视需要经一或多个取代基Rx取代，‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基基团可视需要经一或多个取代基Rx取代，‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑，
‑COCH2‑NH‑，
‑COO‑(C1‑C6亚烷基)S‑，
‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NHCO(C1‑C6亚烷基)S‑；或在Z为‑O‑的情况下：
‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NH‑，
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基基团可视需要经一或多个取代基Rx取代，‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基基团可视需要经一或多个取代基Rx取代，‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑，
‑COCH2NH‑，
‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)S‑，
‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NHCO(C1‑C6亚烷基)S‑；
b为0或1；
其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C6亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C6亚烷基)‑[O‑(C2‑C6亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C6亚烷基)‑[O‑(C2‑C6亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至25的整数；
g为0或1；
D为式(IHa)或式(IHb)的药物部分，或其医药学上可接受的盐，其中：R1为CN或OH；
R2为C(＝O)Ra，其中Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
R3为氢或‑ORb基团，其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
Y为‑NH‑或‑O‑；
Z为‑NH‑或‑O‑；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为抗体或其抗原结合片段且其选自由以下组成的组：人类抗体、人类抗体的抗原结合片段、人类化抗体、人类化抗体的抗原结合片段、嵌合抗体、嵌合抗体的抗原结合片段、糖基化抗体及糖基化抗原结合片段；且n为所述基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]与所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率且在1至12范围内。
53.根据权利要求13所述的药物共轭物，其选自式(IV)、(V)及(VI)：其中：
R19选自‑C1‑C8亚烷基‑、‑O‑(C1‑C8亚烷基)、‑C1‑C8亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、及‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C8亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
R30为‑C2‑C4亚烷基‑基团；
M选自由以下组成的组：‑C1‑C3亚烷基‑及‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑；
(AA)w具有式(II)
其中：
左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或至所述药物部分的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或至所述连接子的点；
R21在每次出现时选自由以下组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苯甲基、吲哚基甲基、‑(CH2)3NHCONH2、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2及‑(CH2)4NHC(＝NH)NH2；
w为0至6的整数；
X为选自由以下组成的组的延伸基团：
在Z为‑NH‑的情况下：
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑，
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基基团可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑，
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑，
及‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；或在Z为‑O‑的情况下：
‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑，
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基基团可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑，
‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)S‑，及
‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；
b为0或1；
其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至10的整数；
g为0或1；
D为式(IHa)或式(IHb)的药物部分，或其医药学上可接受的盐，其中：R1为CN或OH；
R2为乙酰基；
R3为氢或甲氧基；
Y为‑NH‑或‑O‑；
Z为‑NH‑或‑O‑；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段为免疫特异性结合于癌细胞抗原、病毒抗原、产生与自体免疫性疾病相关联的自体免疫抗体的细胞的抗原、微生物抗原的单株抗体；且n在3至8范围内。
54.根据权利要求13所述的药物共轭物，其选自式(IV)、(V)及(VI)：其中：
R19选自‑C1‑C6亚烷基‑、‑亚苯基‑C1‑C6亚烷基‑，其中所述亚苯基可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至碳链中的另一部分均可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代；
R30为‑C2‑C4亚烷基‑基团；
M为‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑；
w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：其中左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或至所述药物部分的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或至所述连接子的点；
R22选自甲基、苯甲基、异丙基、仲丁基及吲哚基甲基；
R23选自甲基、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHCONH2及‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2；
X为选自由以下组成的组的延伸基团：
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑，
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基基团可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基或氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑，
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑，及
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；
b为0或1；
其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至5的整数；
g为0或1；
D为式(IHa)或式(IHb)的药物部分，或其医药学上可接受的盐，其中：R1为CN；
R2为乙酰基：
R3为氢；
Y为‑NH‑或‑O‑；
Z为‑NH‑；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为选自由以下组成的组的单株抗体：阿昔单抗、阿仑单抗、阿奈妥单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、考妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地宁妥珠单抗、地诺单抗、德帕妥昔珠单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、因福土单抗、格巴妥木单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、英达妥昔单抗、英度妥单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、拉妥珠单抗、拉妥昔单抗、利法妥珠单抗、洛沃妥珠单抗、米拉组单抗、米妥昔单抗、那妥昔单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、匹纳土珠单抗、泊洛妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、萨西土珠单抗、司妥昔单抗、司曲妥单抗、索非土珠单抗、伐达妥昔单抗、沃瑟妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分；且n在3至5范围内。
55.根据权利要求54所述的药物共轭物，所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为选自由以下组成的组的抗体：阿昔单抗、阿仑单抗、阿奈妥单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地宁妥珠单抗、地诺单抗、德帕妥昔珠单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、因福土单抗、格巴妥木单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、英达妥昔单抗、英度妥单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、拉妥珠单抗、拉妥昔单抗、米妥昔单抗、那妥昔单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、泊洛妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、萨西土珠单抗、司妥昔单抗、司曲妥单抗、伐达妥昔单抗、沃瑟妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
56.根据权利要求54所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为选自由以下组成的组的抗体：阿昔单抗、阿仑单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地诺单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、司妥昔单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
57.根据权利要求12所述的药物共轭物，其选自式(IV)、(V)及(VI)：其中：
R19为‑C2‑C6亚烷基‑；
R30为‑C2‑C4亚烷基‑；
M为‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑；
w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：其中R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2，其中左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或至所述药物部分的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或至所述连接子的点；
X为选自由以下组成的组的延伸基团：
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑，
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基基团可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑，
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑，及
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S；
b为0或1；
其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至5的整数；
g为0或1；
D为选自以下的药物部分：
及
或其医药学上可接受的盐；其中波浪线表示共价附接至(X)b、或至(AA)w、或至(T)g、或至连接子的点；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分；且n在3至5范围内。
58.根据权利要求57所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
59.根据权利要求57所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
60.根据权利要求13所述的药物共轭物，其选自式(IV)、(V)及(VI)：其中：
R19为‑C2‑C6亚烷基‑；
R30为‑C2‑C4亚烷基‑；
M为‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑；
w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：其中R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2且左边的波浪线表示共价附接至(X)b或至所述药物部分的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或至所述连接子的点；
X为选自由以下组成的组的延伸基团：
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑，
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基基团可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑，
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑，及
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；
b为0或1；
其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至5的整数；
g为0或1；
D为选自以下的药物部分：
及
或其医药学上可接受的盐；其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或至连接子的点；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分；且n在3至5范围内。
61.根据权利要求60所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
62.根据权利要求60所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
63.根据权利要求13所述的药物共轭物，其具有式(IV)：其中：
R19为C2‑C5亚烷基‑；
w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：其中R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2且左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或至所述药物部分的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或至所述连接子的点；
X为‑COOCH2‑亚苯基‑NH‑基团；
b为1；
T为式‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]4‑NH‑的延伸基团；
g为0或1；
D为选自以下的药物部分：
及
或其医药学上可接受的盐；其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w，或至(T)g、或至所述连接子的点；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分；且n在3至5范围内。
64.根据权利要求13所述的药物共轭物，其具有式(V)其中M为‑甲基‑亚环己基‑；
b为1；
w为0；
X为选自‑(CH2)3S‑及‑(CH2)3NHCO(CH2)2S‑的延伸基团；
g为0；
D为选自以下的药物部分：
及
或其医药学上可接受的盐；其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w，或至(T)g、或至所述连接子的点；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分；且n在3至5范围内。
65.根据权利要求13所述的药物共轭物，其具有式(VI)其中R19为‑C2‑C5亚烷基‑；
R30为‑C3亚烷基‑；
w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：其中R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2且左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或至所述药物部分的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或至所述连接子的点；且X为‑COOCH2‑亚苯基‑NH基团；
b为1；
T为式‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]4‑NH‑的延伸基团；
g为0或1；
D为选自以下的药物部分：
及
或其医药学上可接受的盐；其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w，或至(T)g、或至所述连接子的点；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分；且n在3至5范围内。
66.根据权利要求63所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
67.根据权利要求63所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
68.根据权利要求64所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
69.根据权利要求64所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
70.根据权利要求65所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
71.根据权利要求65所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
72.根据权利要求1所述的药物共轭物，其为抗体药物共轭物，其选自由以下组成的组：其中n为2至6，且各 及 独立地选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
73.根据权利要求72所述的药物共轭物，其中n为3、4或5。
74.根据权利要求72所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
75.根据权利要求72所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
76.根据权利要求1所述的药物共轭物，其选自由以下组成的组：其中n为2至6且各 及 独立地选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
77.根据权利要求76所述的药物共轭物，其中n为3、4或5。
78.根据权利要求1所述的药物共轭物，其具有下式其中n为2至6，且 为抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
79.根据权利要求78所述的药物共轭物，其中n为3、4或5。
80.根据权利要求76所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
81.根据权利要求76所述的药物共轭物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
82.根据权利要求1所述的药物共轭物，其呈分离或纯化的形式。
83.一种式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物，其中：L1为选自由以下组成的式的组的连接子：
其中各波浪线表示共价附接至(T)g、或(AA)w、或至(X)b或至D的点；
G选自卤基、‑O‑甲磺酰基及‑O‑甲苯磺酰基；
J选自卤基、羟基、‑N‑丁二酰亚胺氧基、‑O‑(4‑硝基苯基)、‑O‑五氟苯基、‑O‑四氟苯基及‑O‑C(O)‑OR20；
R19选自‑C1‑C12亚烷基‑、‑C3‑C8碳环基、‑O‑(C1‑C12亚烷基)、呈单环或多环的可视需要经一或多个取代基Rx取代的‑C6‑C18亚芳基、‑C1‑C12亚烷基‑C6‑C18亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C6‑C18亚芳基‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑、‑(C3‑C8碳环基)‑C1‑C12亚烷基‑、‑C5‑C14杂环基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C5‑C14杂环基)‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(C5‑C14杂环基)‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(OCH2CH2)r‑及‑CH2‑(OCH2CH2)r‑，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
R20为C1‑C12烷基或呈一或多个芳环的具有6至18个碳原子的芳基，所述芳基视需要经一或多个取代基Rx取代；
取代基Rx选自由以下组成的组：可视需要经至少一个基团Ry取代的C1‑C12烷基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12烯基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12炔基、卤素原子、氧代、硫基、氰基、硝基、ORy、OCORy、OCOORy、CORy、COORy、OCONRyRz、CONRyRz、S(O)Ry、SO2Ry、P(O)(Ry)ORz、NRyRz、NRyCORz、NRyC(＝O)NRyRz、NRyC(＝NRy)NRyRz、呈一或多个环的具有
6至18个碳原子的芳基，所述芳基可视需要经一或多个可相同或不同的选自由Ry、ORy、OCORy、OCOORy、NRyRz、NRyCORz及NRyC(＝NRy)NRyRz组成的组的取代基取代、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷基的芳烷基、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷氧基的芳烷氧基及具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基，所述杂环基视需要经一或多个取代基Ry取代且在任何既定基团上存在超过一个视需要选用的取代基的情况下，所述视需要选用的取代基Ry可相同或不同；
各Ry及Rz独立地选自由以下组成的组：氢、C1‑C12烷基、经至少一个卤素原子取代的C1‑C12烷基、包含经呈一或多个环的具有6至18个碳原子的芳基取代的C1‑C12烷基的芳烷基及包含经具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基取代的C1‑C12烷基的杂环烷基；
r为在1‑10范围内的整数；
b为0或1的整数；
g为0或1的整数；
w为在0至12范围内的整数；
D为具有下式(I)的药物部分或其医药学上可接受的盐，其中：
D经由羟基或氨基共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L1)；
Y为‑NH‑或‑O‑；
R1为‑OH或‑CN；
R2为‑C(＝O)Ra基团；
R3为氢或‑ORb基团；
R4选自‑CH2O‑、以及‑CH2NH‑；
Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
X及T为可相同或不同的延伸基团；
各AA独立地为氨基酸单元；
其中所述药物部分D通过所述R4位置共轭。
84.根据权利要求83所述的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物，其中D为具有下式(IH)的药物部分或其医药学上可接受的盐：
其中：
波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或(L1)的点；
各Y及Z独立地选自‑NH‑及‑O‑；
R1为‑OH或‑CN；
R2为‑C(＝O)Ra基团；
R3为氢或‑ORb基团；
Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；且Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
取代基Rx选自由以下组成的组：可视需要经至少一个基团Ry取代的C1‑C12烷基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12烯基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12炔基、卤素原子、氧代、硫基、氰基、硝基、ORy、OCORy、OCOORy、CORy、COORy、OCONRyRz、CONRyRz、S(O)Ry、SO2Ry、P(O)(Ry)ORz、NRyRz、NRyCORz、NRyC(＝O)NRyRz、NRyC(＝NRy)NRyRz、呈一或多个环的具有
6至18个碳原子的芳基，所述芳基可视需要经一或多个可相同或不同的选自由Ry、ORy、OCORy、OCOORy、NRyRz、NRyCORz及NRyC(＝NRy)NRyRz组成的组的取代基取代、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷基的芳烷基、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷氧基的芳烷氧基、及具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基，所述杂环基视需要经一或多个取代基Ry取代且在任何既定基团上存在超过一个视需要选用的取代基的情况下，所述视需要选用的取代基Ry可相同或不同；
各Ry及Rz独立地选自由以下组成的组：氢、C1‑C12烷基、经至少一个卤素原子取代的C1‑C12烷基、包含经呈一或多个环的具有6至18个碳原子的芳基取代的C1‑C12烷基的芳烷基及包含经具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基取代的C1‑C12烷基的杂环烷基。
85.根据权利要求84所述的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物，其中D为选自式(IHa)和(IHb)的药物部分：其中波浪线、R1、R2、R3、Y和Z如针对式(IH)所定义的。
86.根据权利要求83所述的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物，其中：L1为下式连接子：
其中：
波浪线表示共价附接至(T)g、或(AA)w、或至(X)b、或至D的点；
R19选自‑C1‑C12亚烷基‑、‑O‑(C1‑C12亚烷基)、呈单环或多环的可视需要经一或多个取代基Rx取代的‑C6‑C12亚芳基、‑C1‑C12亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C5‑C12杂环基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C5‑C12杂环基)‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(C5‑C12杂环基)‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(OCH2CH2)r‑及‑CH2‑(OCH2CH2)r‑，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
r为在1‑6范围内的整数；
b为0或1的整数；
g为0或1的整数；并且
w为在0至12范围内的整数。
87.根据权利要求83所述的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物，其中：L1为下式连接子：
其中：
波浪线表示共价附接至(T)g、或(AA)w、或至(X)b、或至D的点；
R19选自‑C1‑C8亚烷基‑、‑O‑(C1‑C8亚烷基)、‑C1‑C8亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、及‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C8亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
(AA)w具有式(II)：
其中左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或D的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或L1或至氢原子的点；
其中R21在每次出现时选自由以下组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苯甲基、吲哚基甲基、‑(CH2)3NHCONH2、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2及‑(CH2)4NHC‑(＝NH)NH2，且w为0至
6的整数；
X为选自由以下组成的组的延伸基团：
在D经由氨基共轭的情况下：
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑，
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基基团可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑，
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑，及
‑COO‑(C2‑C4亚烷基)‑NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑，或在D经由羟基共轭的情况下：
‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑，
‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基基团可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑，
‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)S‑，及
‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；
T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至10的整数；
b为0或1；
g为0或1；且
D为式(Ia)或式(Ib)的药物部分，或其医药学上可接受的盐：R1为‑OH或‑CN；
R2为‑C(＝O)Ra基团，其中Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
R3为氢或‑ORb基团，其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
Y为‑NH‑或‑O‑；且
R4为‑CH2OH或‑CH2NH2。
88.根据权利要求83所述的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物，其中：L1为下式基团：
其中：
波浪线表示共价附接至(T)g、或(AA)w、或至(X)b或至D的点；
R19选自‑C1‑C6亚烷基‑、亚苯基‑C1‑C6亚烷基‑，其中所述亚苯基可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至碳链中的另一部分均可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至
12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代；
w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：其中左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或D的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或L1或至氢原子的点；
R22选自甲基、苯甲基、异丙基、仲丁基及吲哚基甲基；
R23选自甲基、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHCONH2及‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2；
X为选自以下的延伸基团：
在D经由氨基共轭的情况下：‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH、‑COO(CH2)3)NHCOO‑CH2‑亚苯基‑NH、‑COO‑(CH2)3NH‑、‑COO(CH2)3‑S‑及‑COO‑(CH2)3NHCO‑(CH2)2S‑；或在D经由羟基共轭的情况下：‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑、‑CONH(CH2)3NHCOOCH2‑亚苯基‑NH‑、‑CONH(CH2)3NH‑、‑CONH(CH2)3‑S‑及‑CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S‑；
其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至5的整数；
b为0或1的整数；
g为0或1；且
D为式(Ia)或式(Ib)的药物部分，或其医药学上可接受的盐：R1为CN或OH；
R2为乙酰基；
R3为氢或甲氧基；
Y为‑NH‑或‑O‑；且
R4为‑CH2OH或‑CH2NH2。
89.根据权利要求83所述的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物，其中：L1为下式连接子：
其中：
波浪线表示共价附接至(T)g、或(AA)w、或至(X)b、或至(D)的点；
R19为‑C2‑C6亚烷基‑；
w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2，其中左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或D的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或L1或至氢原子的点；
X为选自以下的延伸基团：‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑、‑COO(CH2)3NHCOO‑CH2‑亚苯基‑NH、‑COO‑(CH2)3)NH‑、‑COO(CH2)3‑S‑及‑COO‑(CH2)3NHCO‑(CH2)2S‑；
其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至5的整数；
b为0或1；
g为0或1；且
D为选自以下的药物：
及
或其医药学上可接受的盐；其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或至L1的点。
90.根据权利要求83所述的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物，其中：L1为下式基团：
其中：
波浪线表示共价附接至(T)g、或(AA)w、或至(X)b、或至D的点；
R19为‑C2‑C5亚烷基‑；
w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：其中R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2，其中左边的波浪线表示共价附接至(X)b、或至D的点，及右边的波浪线表示共价附接至(T)g、或L1或至氢原子的点；
X为‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑基团；
T为‑CO‑(CH2)2‑[O‑(CH2)2]4‑NH‑基团；
b为0或1的整数；
g为0或1；且
D为选自以下的药物部分：
及
或其医药学上可接受的盐；其中波浪线表示共价附接至(X)b、或(AA)w、或至(T)g、或至L1的点。
91.根据权利要求83所述的式D‑X‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物，其选自以下：及
92.根据权利要求83所述的式D‑X‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物，其选自以下：及
93.一种式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物，其中D、X、AA、T、L1、b、g及w中的每一者根据权利要求1至81中的任一项中所定义。
94.根据权利要求1所述的药物共轭物或权利要求83所述的化合物，其中b+g+w不为0。
95.根据权利要求1所述的药物共轭物或权利要求83所述的化合物，其中b+w不为0。
96.根据权利要求1所述的药物共轭物或权利要求83所述的化合物，其中当w不为0时，b为1。
97.药物部分D用作根据权利要求1至82中任一项所述的药物共轭物中的有效负载的用途，其中药物部分D具有下式(IH)或其药学上可接受的盐，其中：
波浪线表示共价附接的点；
各Y及Z独立地选自‑NH‑及‑O‑；
R1为‑OH或‑CN；
R2为‑C(＝O)Ra基团；
R3为氢或‑ORb基团；
Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；且Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
取代基Rx选自由以下组成的组：可视需要经至少一个基团Ry取代的C1‑C12烷基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12烯基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12炔基、卤素原子、氧代、硫基、氰基、硝基、ORy、OCORy、OCOORy、CORy、COORy、OCONRyRz、CONRyRz、S(O)Ry、SO2Ry、P(O)(Ry)ORz、NRyRz、NRyCORz、NRyC(＝O)NRyRz、NRyC(＝NRy)NRyRz、呈一或多个环的具有
6至18个碳原子的芳基，所述芳基可视需要经一或多个可相同或不同的选自由Ry、ORy、OCORy、OCOORy、NRyRz、NRyCORz及NRyC(＝NRy)NRyRz组成的组的取代基取代、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷基的芳烷基、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷氧基的芳烷氧基、及具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基，所述杂环基视需要经一或多个取代基Ry取代且在任何既定基团上存在超过一个视需要选用的取代基的情况下，所述视需要选用的取代基Ry可相同或不同；
各Ry及Rz独立地选自由以下组成的组：氢、C1‑C12烷基、经至少一个卤素原子取代的C1‑C12烷基、包含经呈一或多个环的具有6至18个碳原子的芳基取代的C1‑C12烷基的芳烷基及包含经具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基取代的C1‑C12烷基的杂环烷基。
98.药物部分D用于制造根据权利要求1至82中任一项所述的药物共轭物中的用途，其中药物部分D具有下式(IH)或其药学上可接受的盐，其中：
波浪线表示共价附接的点；
各Y及Z独立地选自‑NH‑及‑O‑；
R1为‑OH或‑CN；
R2为‑C(＝O)Ra基团；
R3为氢或‑ORb基团；
Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；且Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中所述视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
取代基Rx选自由以下组成的组：可视需要经至少一个基团Ry取代的C1‑C12烷基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12烯基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12炔基、卤素原子、氧代、硫基、氰基、硝基、ORy、OCORy、OCOORy、CORy、COORy、OCONRyRz、CONRyRz、S(O)Ry、SO2Ry、P(O)(Ry)ORz、NRyRz、NRyCORz、NRyC(＝O)NRyRz、NRyC(＝NRy)NRyRz、呈一或多个环的具有
6至18个碳原子的芳基，所述芳基可视需要经一或多个可相同或不同的选自由Ry、ORy、OCORy、OCOORy、NRyRz、NRyCORz及NRyC(＝NRy)NRyRz组成的组的取代基取代、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷基的芳烷基、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷氧基的芳烷氧基、及具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基，所述杂环基视需要经一或多个取代基Ry取代且在任何既定基团上存在超过一个视需要选用的取代基的情况下，所述视需要选用的取代基Ry可相同或不同；
各Ry及Rz独立地选自由以下组成的组：氢、C1‑C12烷基、经至少一个卤素原子取代的C1‑C12烷基、包含经呈一或多个环的具有6至18个碳原子的芳基取代的C1‑C12烷基的芳烷基及包含经具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基取代的C1‑C12烷基的杂环烷基。
99.根据权利要求1所述的药物共轭物，其用作医药品。
100.根据权利要求1所述的药物共轭物，其用于治疗癌症。
101.根据权利要求100使用的药物共轭物，其中所述癌症选自肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌。
102.一种医药组成物，其包含根据权利要求1至82中任一项所述的药物共轭物及医药学上可接受的载剂。
103.一种根据权利要求1至82中任一项所述的药物共轭物或根据权利要求102所述的组成物的用途，其用于制备供治疗癌症用的医药品。
104.根据权利要求103所述的用途、其中所述癌症选自肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌。
105.一种套组，其包含治疗有效量的根据权利要求1至82中任一项所述的药物共轭物及医药学上可接受的载剂。
106.根据权利要求105所述的套组，其用于治疗癌症。
107.根据权利要求106所述的套组，其中所述癌症选自肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌。
108.根据权利要求1所述的药物共轭物，其中n在1‑12的范围内。
109.根据权利要求108所述的药物共轭物，其中n在1‑8的范围内。
110.根据权利要求108所述的药物共轭物，其中n在3‑8的范围内。
111.根据权利要求108所述的药物共轭物，其中n为1、2、3、4、5或6。
112.根据权利要求111所述的药物共轭物，其中n为3、4或5。
说明书 :
包含依特那斯汀衍生物的抗体药物共轭物
【技术领域】
[0001] 本发明涉及新颖的药物共轭物、药物连接子化合物、其制备方法、含有所述药物共轭物的医药组成物及其用作抗肿瘤剂的用途。【现有技术】
[0002] 国际专利申请案第PCT/EP2018/060868号涉及新颖的依特那斯汀(ecteinascidin)衍生物，其显示极有前景的抗肿瘤活性。此类专利申请案中所公开的化合物之一当前正处于I期临床试验中，用于预防及治疗实体肿瘤。
[0003] 近年来，随着靶向癌细胞且更有效地杀灭癌细胞的医药实体的发展，癌症的治疗已得到显著进展。研究人员已利用由诸如癌细胞的目标细胞选择性表现的细胞表面受体及抗原来发展基于结合肿瘤特异性或肿瘤相关抗原(在肿瘤的实例中)的抗体的医药实体。为达成此，诸如化疗药物、细菌及植物毒素及放射核种的细胞毒性分子已化学连接于结合肿瘤特异性或肿瘤相关的细胞表面抗原的单株抗体。
[0004] 因此，考虑到复杂的有效负载、连接子及抗体结构，ADC代表一个具挑战性的发展领域，但仍需要发展进一步的ADC。【发明内容】
[0005] 需要新颖的活性药物共轭物。本发明解决此需要。其进一步提供用于制备本发明的药物共轭物的新颖的药物连接子化合物、用于制备本发明的新颖的药物共轭物的方法、含有所述药物共轭物的医药组成物及其用作抗肿瘤剂的用途，以及用于治疗癌症的包含本发明的药物共轭物的套组。
[0006] 在本发明的第一方面中，提供一种药物共轭物，其包含共价附接至所述药物共轭物的其余部分的药物部分，所述药物共轭物具有式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab，其中：
[0007] D为具有下式(I)的药物部分或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，
[0008]
[0009] 其中：
[0010] D经由羟基或氨基共价附接至(X)b(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(T)g(若存在)、或(L)；
[0011] Y为‑NH‑或‑O‑；
[0012] R1为‑OH或‑CN；
[0013] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0014] R3为氢或‑ORb基团；
[0015] R4选自氢、‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0016] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0017] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0018] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0019] ProtNH为氨基保护基，
[0020] 视需要存在的限制条件为当R4为氢时Y为‑O‑；
[0021] X及T为可相同或不同的延伸基团；
[0022] 各AA独立地为氨基酸单元；
[0023] L为连接子基团；
[0024] w为在0至12范围内的整数；
[0025] b为0或1的整数；
[0026] g为0或1的整数；
[0027] Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分(moiety)；且
[0028] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]与包含至少一个抗原结合位点的部分的比率且在1至20的范围内。
[0029] 在本发明的另一方面中，提供一种药物共轭物，其包含共价附接至所述药物共轭物的其余部分的药物部分，所述化合物具有式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab，其中：
[0030] D为具有下式(IH)的药物部分或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，
[0031]
[0032] 其中：
[0033] 波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(T)g(若存在)、或至(L)的点；
[0034] Y及Z各独立地选自‑NH‑及‑O‑；
[0035] R1为‑OH或‑CN；
[0036] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0037] R3为氢或‑ORb基团；
[0038] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
[0039] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基，其中视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
[0040] 取代基Rx选自由以下组成的组：可视需要经至少一个基团Ry取代的C1‑C12烷基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12烯基、可视需要经至少一个基团Ry取代的C2‑C12炔基、卤素原子、氧基、硫基、氰基、硝基、ORy、OCORy、OCOORy、CORy、COORy、OCONRyRz、CONRyRz、S(O)Ry、SO2Ry、P(O)(Ry)ORz、NRyRz、NRyCORz、NRyC(＝O)NRyRz、NRyC(＝NRy)NRyRz、呈一或多个环的具有6至18个碳原子的芳基，所述芳基可视需要经一或多个可相同或不同的选自由Ry、ORy、OCORy、OCOORy、NRyRz、NRyCORz及NRyC(＝NRy)NRyRz组成的组的取代基取代、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷基的芳烷基、包含经如上所定义的视需要经取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷氧基的芳烷氧基及具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基，所述杂环基视需要经一或多个取代基Ry取代且在任何既定基团上存在超过一个视需要选用的取代基的情况下，视需要选用的取代基Ry可相同或不同；
[0041] 各Ry及Rz独立地选自由以下组成的组：氢、C1‑C12烷基、经至少一个卤素原子取代的C1‑C12烷基、包含经呈一或多个环的具有6至18个碳原子的芳基取代的C1‑C12烷基的芳烷基及包含经具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元饱和或不饱和杂环基取代的C1‑C12烷基的杂环烷基；
[0042] X及T为可相同或不同的延伸基团；
[0043] 各AA独立地为氨基酸单元；
[0044] L为连接子基团；
[0045] w为在0至12范围内的整数；
[0046] b为0或1的整数；
[0047] g为0或1的整数；
[0048] 其中b+g+w视需要不为0；
[0049] Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分；且
[0050] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]与包含至少一个抗原结合位点的部分的比率且在1至20的范围内。
[0051] 在本发明的另一方面中，提供一种药物共轭物，其包含共价附接至所述药物共轭物的其余部分的药物部分，所述药物共轭物具有式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab，其中：
[0052] D为具有下式(I)的药物部分或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，
[0053]
[0054] 其中：
[0055] D经由羟基或氨基共价附接至(X)b(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(T)g(若存在)、或(L)；
[0056] Y为‑NH‑或‑O‑；
[0057] R1为‑OH或‑CN；
[0058] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0059] R3为氢或‑ORb基团；
[0060] R4选自氢、‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2、以及‑CH2NHProtNH；
[0061] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0062] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0063] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0064] ProtNH为氨基保护基，
[0065] 视需要存在的限制条件为当R4为氢时Y为‑O‑；
[0066] X及T为可相同或不同的延伸基团；
[0067] 各AA独立地为氨基酸单元；
[0068] L为连接子基团；
[0069] w为在0至12范围内的整数；
[0070] b为1；
[0071] g为0或1的整数；
[0072] Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分；且
[0073] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]与包含至少一个抗原结合位点的部分的比率且在1至20的范围内。
[0074] 在本发明的另一方面中，提供一种药物共轭物，其包含共价附接至所述药物共轭物的其余部分的药物部分，所述药物共轭物具有式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab，其中：
[0075] D为具有下式(I)的药物部分或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，
[0076]
[0077] 其中：
[0078] D经由羟基或氨基共价附接至(X)b(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(T)g(若存在)、或(L)；
[0079] Y为‑NH‑或‑O‑；
[0080] R1为‑OH或‑CN；
[0081] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0082] R3为氢或‑ORb基团；
[0083] R4选自氢、‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0084] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0085] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0086] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0087] ProtNH为氨基保护基，
[0088] 视需要存在的限制条件为当R4为氢时Y为‑O‑；
[0089] X及T为可相同或不同的延伸基团；
[0090] 各AA独立地为氨基酸单元；
[0091] L为连接子基团；
[0092] w为2；
[0093] b为1；
[0094] g为0或1的整数；
[0095] Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分；且
[0096] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]与包含至少一个抗原结合位点的部分的比率且在1至20的范围内。
[0097] 如在下文更详细地解释及例示，本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物代表解决以上概述的问题的突破，除基于迄今已用作有效负载的细胞毒性药物三大家族的药物共轭物之外，还需要展示极佳抗肿瘤活性的进一步的药物共轭物。
[0098] 在本发明的优选的具体实例中，提供一种如本文所定义的药物共轭物或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中D为选自式(IHa)及(IHb)的药物部分：
[0099]
[0100] 其中波浪线、R1、R2、R3、Y及Z如针对式(IH)所定义。
[0101] 在本发明的另一方面中，提供一种式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1或式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，其中：
[0102] L1为选自由以下组成的式的组的连接子：
[0103]
[0104] 各波浪线表示共价附接至(T)g(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(X)b(若存在)、或至D的点；
[0105] G选自卤基、‑O‑甲磺酰基及‑O‑甲苯磺酰基；
[0106] J选自卤基、羟基、‑N‑丁二酰亚胺氧基、‑O‑(4‑硝基苯基)、‑O‑五氟苯基、‑O‑四氟苯基及‑OC(O)‑OR20；
[0107] R19选自‑C1‑C12亚烷基‑、‑C3‑C8碳环基、‑O‑(C1‑C12亚烷基)、呈单环或多环的可视需要经一或多个取代基Rx取代的‑C6‑C18亚芳基、‑C1‑C12亚烷基‑C6‑C18亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C6‑C18亚芳基‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑、‑(C3‑C8碳环基)‑C1‑C12亚烷基‑、‑C5‑C14杂环基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C5‑C14杂环基)‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(C5‑C14杂环基)‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(OCH2CH2)r‑及‑CH2‑(OCH2CH2)r‑，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
[0108] R20为C1‑C12烷基或呈一或多个芳环的具有6至18个碳原子的芳基，所述芳基视需要经一或多个取代基Rx取代；
[0109] r为在1‑10范围内的整数；
[0110] g为0或1的整数；
[0111] b为0或1的整数；
[0112] w为在0至12范围内的整数；且
[0113] D、Rx、X、T及AA中的每一者如本发明的第一方面中所定义。
[0114] 在本发明的优选的具体实例中，b+g+w不为0。在其他具体实例中，b+w不为0。在其他具体实例中，当w不为0时，b为1。在另一具体实例中，当w为0时，b为1。
[0115] 在本发明的另一方面中，提供一种式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1或式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体；其中D、X、AA、T、L1、b、g及w中的每一者如本文所定义；但进一步其中若化合物为式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，则b+w+g≠0。
[0116] 在根据本发明的方面的优选的具体实例中，n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]与包含至少一个抗原结合位点的部分的比率且在1至20的范围内。在其他具体实例中，n在1‑12、1‑8、3‑8、3‑6、3‑5的范围内或为1、2、3、4、5或6，优选为3、4或5或4。
[0117] 在本发明的另一方面中，提供一种药物部分D，其用于抗体药物共轭物中。在本发明的另一方面中，提供一种药物部分D，其用作抗体药物共轭物中的有效负载。在本发明的另一方面中，提供如本文所述的药物部分D的用途，其用于制造抗体药物共轭物。
[0118] 在本发明的另一方面中，提供一种根据本发明的药物共轭物，其用作医药品。
[0119] 在本发明的另一方面中，提供一种根据本发明的药物共轭物，其用于治疗癌症且更优选用于治疗选自肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌的癌症。最优选癌症为乳癌。
[0120] 在本发明的另一方面中，提供一种医药组成物，其包含根据本发明的药物共轭物及医药学上可接受的载剂。
[0121] 在本发明的另一方面中，提供一种用于预防或治疗癌症的方法，其包含向有需要的患者投予有效量的根据本发明的药物共轭物。优选地，癌症选自肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌。最优选癌症为乳癌。
[0122] 在本发明的另一方面中，提供根据本发明的药物共轭物的用途，其用于制备用于治疗癌症且更优选用于治疗选自以下的癌症的医药品：肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌。最优选癌症为乳癌。
[0123] 在本发明的另一方面中，提供一种套组，其包含治疗有效量的根据本发明的药物共轭物及医药学上可接受的载剂。套组用于治疗癌症且更优选用于治疗选自肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌的癌症。最优选癌症为乳癌。根据本发明的套组可包含治疗有效量的根据本发明的药物共轭物且视需要包含药物共轭物用于治疗癌症、尤其选自以下的癌症的说明书：肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌；药物共轭物最优选用于治疗乳癌。
[0124] 在本发明的另一方面中，提供一种用于制备根据本发明的药物共轭物的方法，其包含使包含至少一个抗原结合位点的部分Ab与药物D共轭，Ab及D如本文所定义。【附图说明】
[0125] 本发明借助于实例，在附图中概略说明，其中：
[0126] 图1为根据本发明的一方法的示意图，其中与抗体的共轭经由自由硫醇基。
[0127] 图2为根据本发明的一方法的示意图，其中与抗体的共轭经由自由氨基。
[0128] 图3.与用于评估ADC 1在HER2阳性(黑色符号)或HER2阴性(空心符号)细胞系中的抗增生潜能的一个代表性实验对应的剂量反应曲线。点与一式三份值的平均值对应，其中误差条表示SD，绘图线与通过实验点的非线性回归，与用于获得表13中所报导的IC50值的四参数对数曲线的最优选拟合对应。
[0129] 图4.展示在HER2阳性(SK‑BR‑3及HCC‑1954)或HER2阴性(MDA‑MB‑231及MCF‑7)的几个细胞系中20μg/mL曲妥珠单抗或16或2.5μg/mL ADC 1对细胞存活的作用的柱状图。条柱与三次测定的平均值对应，其中误差条表示SD。使用未配对双尾t检验来量测统计显著性，p值概述如下：***，p<0.001；**，p<0.01；*，p<0.05。
[0130] 图5.展示ADC 2在HER2阳性(黑色符号)或HER2阴性(空心符号)细胞系中的抗增生潜能的剂量反应曲线。点与一式三份值的平均值对应，其中误差条表示SD，绘图线与通过实验点的非线性回归，与用于获得表15中所报导的IC50值的四参数对数曲线的最优选拟合对应。
[0131] 图6.展示在HER2阳性(SK‑BR‑3及HCC‑1954)或HER2阴性(MDA‑MB‑231及MCF‑7)的几个细胞系中20μg/mL曲妥珠单抗或16或2.5μg/mL ADC 2对细胞存活的作用的柱状图。条柱与三次测定的平均值对应，其中误差条表示SD。使用未配对双尾t检验来量测统计显著性，p值概述如下：***，p<0.001；**，p<0.01；*，p<0.05。
[0132] 图7.展示ADC 3在HER2阳性(黑色符号)或HER2阴性(空心符号)细胞系中的抗增生潜能的剂量反应曲线。点与一式三份值的平均值对应，其中误差条表示SD，绘图线与通过实验点的非线性回归，与用于获得表17中所报导的IC50值的四参数对数曲线的最优选拟合对应。
[0133] 图8.展示在HER2阳性(SK‑BR‑3及HCC‑1954)或HER2阴性(MDA‑MB‑231及MCF‑7)的几个细胞系中20μg/mL曲妥珠单抗或20或3μg/mL ADC 3对细胞存活的作用的柱状图。条柱与三次测定的平均值对应，其中误差条表示SD。使用未配对双尾t检验来量测统计显著性，p值概述如下：***，p<0.001；**，p<0.01；*，p<0.05。
[0134] 图9.展示ADC 4在HER2阳性(黑色符号)或HER2阴性(空心符号)细胞系中的抗增生潜能的剂量反应曲线。点与一式三份值的平均值对应，其中误差条表示SD，绘图线与通过实验点的非线性回归，与用于获得表18中所报导的IC50值的四参数对数曲线的最优选拟合对应。
[0135] 图10.展示在HER2阳性(SK‑BR‑3及HCC‑1954)或HER2阴性(MDA‑MB‑231及MCF‑7)的几个细胞系中3μg/mL曲妥珠单抗或3或0.2μg/mL ADC 4对细胞存活的作用的柱状图。条柱与三次测定的平均值对应，其中误差条表示SD。使用未配对双尾t检验来量测统计显著性，p值概述如下：***，p<0.001；**，p<0.01；*，p<0.05。
[0136] 图11.展示ADC 6在HER2阳性(黑色符号)或HER2阴性(空心符号)细胞系中的抗增生潜能的剂量反应曲线。点与一式三份值的平均值对应，其中误差条表示SD，绘图线与通过实验点的非线性回归，与用于获得表21中所报导的IC50值的四参数对数曲线的最优选拟合对应。
[0137] 图12.用安慰剂、11‑R(5mg/kg)、ADC 1(2.2TCEP)(1.6及6.5mg/kg)及ADC 1(2.24mg/kg)处理的小鼠中BT‑474肿瘤的肿瘤体积评估。
[0138] 图13.用安慰剂、11‑R(5.0mg/kg)及ADC 1(5、10及30mg/kg)处理的小鼠中JIMT‑1肿瘤的肿瘤体积评估。
[0139] 图14.用安慰剂、11‑R(5.0mg/kg)及ADC 1(5、10及30mg/kg)处理的小鼠中SKOV3肿瘤的肿瘤体积评估。
[0140] 图15.用安慰剂、11‑R(5mg/kg)及ADC 1(2.2TCEP)(5、10及30mg/kg)处理的小鼠中N87肿瘤的肿瘤体积评估。
[0141] 图16.用安慰剂、11‑R(5mg/kg)及ADC 1(5、10及30mg/kg)处理的小鼠中Gastric‑008(PDX)肿瘤的肿瘤体积评估。
[0142] 【实施方式】
[0143] 以下适用于本发明的所有方面：
[0144] 在本发明化合物中，烷基可支化或未支化，且优选具有1至约12个碳原子。烷基的一个更优选类别具有1至约6个碳原子。甚至更优选具有1个、2个、3个或4个碳原子的烷基。甲基、乙基、正丙基、异丙基及丁基(包括正丁基、异丁基、仲丁基及叔丁基)为本发明化合物中尤其优选的烷基。
[0145] 在本发明化合物中，烯基可支化或未支化，具有一或多个双键及2个至约12个碳原子。烯基的一个更优选类别具有2个至约6个碳原子。甚至更优选为具有2、3或4个碳原子的烯基。乙烯基、1‑丙烯基、2‑丙烯基、1‑甲基乙烯基、1‑丁烯基、2‑丁烯基及3‑丁烯基为本发明化合物中尤其优选的烯基。
[0146] 在本发明化合物中，炔基可支化或未支化，具有一或多个三键及2个至约12个碳原子。炔基的一个更优选类别具有2至约6个碳原子。甚至更优选为具有2、3或4个碳原子的炔基。
[0147] 本发明化合物中的合适芳基包括单环及多环化合物，包括含有独立及/或稠合芳基的多环化合物。典型芳基含有1至3个独立及/或稠合环及6至约18个碳环原子。芳基优选含有6至约10个碳环原子。特别优选的芳基包括经取代或未经取代的苯基、经取代或未经取代的萘基、经取代或未经取代的联苯基、经取代或未经取代的菲基及经取代或未经取代的蒽基。
[0148] 合适杂环基包括含有1至3个独立及/或稠合环及5至约18个环原子的杂芳族基及杂脂环基。优选地，杂芳族基及杂脂环基含有5至约10个环原子，最优选5、6或7个环原子。本发明化合物中的合适杂芳族基含有一个、两个或三个选自N、O或S原子的杂原子，且包括例如香豆素基(包括8‑香豆素基)、喹啉基(包括8‑喹啉基)、异喹啉基、吡啶基、吡嗪基、吡唑基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、四唑基、异恶唑基、恶唑基、咪唑基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、吲哚嗪基、酞嗪基、喋啶基、嘌呤基、恶二唑基、噻二唑基、呋呫基、哒嗪基、三嗪基、噌啉基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋呫基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并恶唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基及呋喃并吡啶基。本发明化合物中的合适杂脂环基含有一个、两个或三个选自N、O或S的杂原子，且包括例如吡咯啶基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢硫代哌喃基、哌啶基、啉基、硫代啉基、硫氧杂环己烷基、哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚基、恶氮蒎基、二氮蒎基、噻氮蒎基、1,2,3,6‑四氢吡啶基、2‑吡咯啉基、3‑吡咯啉基、吲哚啉基、2H‑哌喃基、4H‑哌喃基、二恶烷基、1,3‑二氧戊环基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫杂环戊烷基、二氢哌喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑啶基、咪唑啉基、咪唑啶基、3‑氮杂双环[3.1.0]己基、
3‑氮杂双环[4.1.0]庚基、3H‑吲哚基及喹嗪基。
3‑氮杂双环[4.1.0]庚基、3H‑吲哚基及喹嗪基。
[0149] 上文所提及的基团可在一或多个可利用位置处经一或多个合适基团取代，所述基团诸如OR'、＝O、SR'、SOR'、SO2R'、NO2、NHR'、NR'R'、＝N‑R'、NHCOR'、N(COR')2、NHSO2R'、NR'C(＝NR')NR'R'、CN、卤素、COR'、COOR'、OCOR'、OCONHR'、OCONR'R'、CONHR'、CONR'R'、经保护的OH、经保护的氨基、经保护的SH、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基、经取代或未经取代的C2‑C12炔基、经取代或未经取代的芳基及经取代或未经取代的杂环基，其中R'基团各独立地选自由以下组成的组：氢、OH、NO2、NH2、SH、CN、卤素、COH、CO烷基、CO2H、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基、经取代或未经取代的C2‑C12炔基、经取代或未经取代的芳基及经取代或未经取代的杂环基。在此类基团自身经取代的情况下，取代基可选自上述清单。另外，在取代基上存在超过一个R'基团的情况下，各R'可相同或不同。
[0150] 在本发明的化合物中，卤素取代基包括F、Cl、Br及I。
[0151] 更特定地，在本发明化合物中，R20、Ra、Rb、Rc、Rx、Ry及Rz的定义中的烷基可为具有1至12个碳原子的直链或支链烷基链基团，且其优选为具有1至6个碳原子的烷基，更优选为甲基、乙基或异丙基，且最优选为甲基。在M及Q的定义中，其可为具有1至6个碳原子的直链或支链烷基链基团。甲基、乙基、正丙基、异丙基及丁基(包括正丁基、异丁基、仲丁基及叔丁基)为本发明化合物中尤其优选的烷基。
[0152] 在本发明化合物中，Ra、Rb、Rc及Rx的定义中的烯基支化或未支化，且可具有一或多个双键及2至12个碳原子。优选地，其具有2至6个碳原子，且更优选地，其为具有2、3或4个碳原子的支化或未支化烯基。乙烯基、1‑丙烯基、2‑丙烯基、1‑甲基乙烯基、1‑丁烯基、2‑丁烯基及3‑丁烯基为本发明化合物中尤其优选的烯基。
[0153] 在本发明化合物中，Ra、Rb、Rc及Rx的定义中的炔基支化或未支化，且可具有一或多个三键及2至12个碳原子。优选地，其具有2至6个碳原子，且更优选地，其为具有2、3或4个碳原子的支化或未支化炔基。
[0154] 在本发明化合物中，Rx、Ry及Rz的定义中的卤素取代基包括F、Cl、Br及I，优选为Cl。
[0155] 在本发明化合物中，Rx的定义中的5至14元饱和或不饱和杂环基为具有一或多个环的在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的杂环基。杂环基为可为杂芳族基或杂脂环基的基团，后者可为部分不饱和的，芳族与脂环杂环基均含有1至3个独立或稠合环。优选地，杂芳族基及杂脂环基含有5至10个环原子。本发明化合物中的合适杂芳族基含有一个、两个或三个选自N、O或S原子的杂原子，且包括例如喹啉基(包括8‑喹啉基)、异喹啉基、香豆素基(包括8‑香豆素基)、吡啶基、吡嗪基、吡唑基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、四唑基、异恶唑基、恶唑基、咪唑基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、吲哚嗪基、酞嗪基、喋啶基、嘌呤基、恶二唑基、噻二唑基、呋呫基、哒嗪基、三嗪基、噌啉基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋呫基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并恶唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基及呋喃并吡啶基。本发明化合物中的合适杂脂环基含有一个、两个或三个选自N、O或S原子的杂原子，且包括例如吡咯啶基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢硫代哌喃基、哌啶基、啉基、硫代啉基、硫氧杂环己烷基、哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚基、恶氮蒎基、二氮蒎基、噻氮蒎基、1,2,
3,6‑四氢吡啶基、2‑吡咯啉基、3‑吡咯啉基、吲哚啉基、2H‑哌喃基、4H‑哌喃基、二恶烷基、1,
3‑二氧戊环基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫杂环戊烷基、二氢哌喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑啶基、咪唑啉基、咪唑啶基、3‑氮杂双环[3.1.0]己基、3‑氮杂双环[4.1.0]庚基、3H‑吲哚基及喹嗪基。
3,6‑四氢吡啶基、2‑吡咯啉基、3‑吡咯啉基、吲哚啉基、2H‑哌喃基、4H‑哌喃基、二恶烷基、1,
3‑二氧戊环基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫杂环戊烷基、二氢哌喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑啶基、咪唑啉基、咪唑啶基、3‑氮杂双环[3.1.0]己基、3‑氮杂双环[4.1.0]庚基、3H‑吲哚基及喹嗪基。
[0156] 在本发明化合物中，Rx及R20的定义中的芳基为含有独立及/或稠合芳基且具有6至18个环原子且视需要经取代的单环或多环化合物。典型芳基含有1至3个独立或稠合环。芳基优选含有6至12个碳环原子。尤其优选的芳基包括经取代或未经取代的苯基、经取代或未经取代的萘基、经取代或未经取代的联苯基、经取代或未经取代的菲基及经取代或未经取代的蒽基，且最优选为经取代或未经取代的苯基，其中取代基如上所指出。
[0157] 在本发明化合物中，Rx、Ry及Rz的定义中的芳烷基包含经如以上所定义及例示的一或多个芳基取代的如以上所定义及例示的烷基。优选实例包括视需要经取代的苯甲基、视需要经取代的苯基乙基及视需要经取代的萘基甲基。
[0158] 在本发明化合物中，Rx的定义中的芳烷氧基包含经一或多个如以上所定义及例示的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷氧基。优选地，烷氧基部分具有1至6个碳原子且芳基含有6至约12个碳环原子，且最优选芳烷氧基为视需要经取代的苯甲氧基、视需要经取代的苯基乙氧基及视需要经取代的萘甲氧基。
[0159] 在本发明化合物中，Ry及Rz的定义中的杂环烷基包含经一或多个如以上所定义及例示的杂环基取代的如以上所定义及例示的烷基。优选地，杂环烷基包含经在1或2个环原子中具有5至10个环原子且可为芳族、部分饱和或完全饱和的杂环基取代的具有1至6个碳原子的烷基。更优选地，杂环烷基包含经选自由以下组成的组的杂环基取代的甲基或乙基：吡咯啶基、咪唑啶基、哌啶基、哌嗪基、啉基、四氢呋喃基、氧杂环己基、硫杂环己烷基、8‑喹啉基、异喹啉基、吡啶基、吡嗪基、吡唑基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、四唑基、异恶唑基、恶唑基及苯并咪唑。
[0160] 在本发明化合物中，R19的定义中的亚烷基为具有1至12个碳原子的直链或支化链亚烷基且M、X、T及R30的定义中的亚烷基为具有1至6个碳原子的直链或支化链亚烷基。优选地，R19的定义中的亚烷基为具有1至8个碳原子的直链或支化链亚烷基，更优选为具有1至6个碳原子的直链或支化链亚烷基。对于M而言，优选为具有1至3个碳原子的直链或支化链亚烷基。在X的定义中，X的定义中的亚烷基优选为具有2至4个碳原子的直链或支化链亚烷基。对于T而言，优选为具有2至4个碳原子的直链或支化链亚烷基。在R30的定义中，优选为具有2至4个碳原子的直链或支化链亚烷基，最优选为具有3个碳原子的直链亚烷基。为避免疑问，术语“亚烷基”用以指烷二基。
[0161] 在本发明化合物中，R19及M的定义中的碳环基为具有3至8个碳原子的环烷基，其在环烷基环上的任何位置处具有将所述环烷基连接至药物共轭物的其余部分的两个共价键。优选地，R19及M的定义中的碳环基为具有3至7个碳原子的环烷基，且更优选为具有5至7个碳原子的碳环基。
[0162] 在本发明化合物中，R19的定义中的亚芳基为呈一或多个环的具有6至18个碳原子的芳基，其在芳环系统上的任何位置处具有将所述亚芳基连接至药物共轭物的其余部分的两个共价键。优选地，R19的定义中的亚芳基为呈一或多个环的具有6至12个碳原子的芳基，其在芳环系统上的任何位置处具有两个共价键，且其最优选为亚苯基。
[0163] 在本发明化合物中，R19的定义中的杂环基为含有1至3独立或稠合环的具有5至14个环原子且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的杂环基，其中在所述杂环基的环系统上的任何位置处存在两个共价键。杂环基为可为杂芳族基或杂脂环基的基团(后者可为部分不饱和的)。优选地，R19的定义中的杂环基为含有1至3独立或稠合环的具有5至12个环原子且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的杂环基，其中在所述杂环基的环系统上的任何位置处存在两个共价键。
[0164] 在取代基上存在超过一个视需要选用的取代基Rx、Ry或Rz的情况下，各取代基Rx可相同或不同，各取代基Ry可相同或不同且各Rz可相同或不同。
[0165] 在一具体实例中，D可为式I化合物或其医药学上可接受的盐或酯：
[0166]
[0167] 其中：
[0168] Y为‑NH‑或‑O‑；
[0169] R1为‑OH或‑CN；
[0170] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0171] R3为氢或‑ORb基团；
[0172] R4选自氢、‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0173] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0174] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0175] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0176] ProtNH为氨基的保护基。
[0177] 在一具体实例中，式I化合物具有当R4为氢时Y为‑O‑的限制条件。
[0178] 在另一具体实例中，式I化合物可为式IC化合物，或其医药学上可接受的盐或酯：
[0179]
[0180] 其中：
[0181] Y为‑NH‑；
[0182] R1为‑OH或‑CN；
[0183] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0184] R3为氢或‑ORb基团；
[0185] R4选自‑CH2OH、‑CH2O‑(C＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0186] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0187] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0188] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0189] ProtNH为氨基的保护基。
[0190] 在又一具体实例中，式I化合物可为式ID化合物，或其医药学上可接受的盐或酯：
[0191]
[0192] 其中：
[0193] Y为‑O‑；
[0194] R1为‑OH或‑CN；
[0195] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0196] R3为氢或‑ORb基团；
[0197] R4选自氢、‑CH2OH、‑CH2O‑(C＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0198] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0199] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0200] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0201] ProtNH为氨基的保护基。
[0202] 在又一具体实例中，式I化合物可为式IE化合物，或其医药学上可接受的盐或酯：
[0203]
[0204] 其中：
[0205] Y为‑NH‑或‑O‑；
[0206] R1为‑OH或‑CN；
[0207] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0208] R3为氢或‑ORb基团；
[0209] R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0210] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0211] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0212] ProtNH为氨基的保护基。
[0213] 在又一具体实例中，式I化合物可为式IA化合物或其医药学上可接受的盐或酯：
[0214]
[0215] 其中：
[0216] Y为‑NH‑或‑O‑；
[0217] R1为‑OH或‑CN；
[0218] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0219] R3为氢；
[0220] R4选自氢、‑CH2OH、‑CH2O‑(C＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0221] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0222] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0223] ProtNH为氨基的保护基。
[0224] 在一具体实例中，式IA化合物具有当R4为氢时Y为‑O‑的限制条件。
[0225] 在又一具体实例中，式I化合物可为式IB化合物或其医药学上可接受的盐或酯：
[0226]
[0227] 其中：
[0228] Y为‑NH‑或‑O‑；
[0229] R1为‑OH或‑CN；
[0230] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0231] R3为‑ORb基团；
[0232] R4选自氢、‑CH2OH、‑CH2O‑(C＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0233] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0234] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0235] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0236] ProtNH为氨基的保护基。
[0237] 在一具体实例中，式IB化合物具有当R4为氢时Y为‑O‑的限制条件。
[0238] 在又一具体实例中，式I化合物可为式IF化合物或其医药学上可接受的盐或酯：
[0239]
[0240] 其中：
[0241] Y为‑NH‑或‑O‑；
[0242] R1为‑OH；
[0243] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0244] R3为氢或‑ORb基团；
[0245] R4选自氢、‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0246] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0247] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0248] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0249] ProtNH为氨基的保护基。
[0250] 在一具体实例中，式IF化合物具有当R4为氢时Y为‑O‑的限制条件。
[0251] 在又一具体实例中，式I化合物可为式IG化合物或其医药学上可接受的盐或酯：
[0252]
[0253] 其中：
[0254] Y为‑NH‑或‑O‑；
[0255] R1为‑OH或‑CN；
[0256] R2为乙酰基；
[0257] R3为氢或‑ORb基团；
[0258] R4选自氢、‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0259] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；
[0260] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0261] ProtNH为氨基的保护基。
[0262] 在一具体实例中，式IG化合物具有当R4为氢时Y为‑O‑的限制条件。
[0263] 式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF或IG的化合物的优选化合物为具有通式a或b的化合物或其医药学上可接受的盐或酯：
[0264]
[0265] 注意其中化合物具有通式a或b，R4可不为氢。
[0266] 式I、IA、IB、ID、IF或IG的化合物的优选化合物可为具有式c的化合物或其医药学上可接受的盐或酯：
[0267]
[0268] 其中：
[0269] R1为‑OH或‑CN；
[0270] R2为‑C(＝O)Ra基团；
[0271] R3为氢或‑ORb基团；
[0272] Ra选自氢、经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基；且
[0273] Rb选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基。
[0274] 为避免疑问，以上化合物可为药物部分D且经由羟基或氨基共价附接至(X)b(若存在)或(AA)w(若存在)或至(T)g(若存在)或(L)。因此，当共轭时，共价键替换化合物上的羟基或氨基上的质子。
[0275] 优选化合物包括通式I、IA、IB、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0276] Y为‑NH‑；
[0277] 且R1、R2、R3、R4、Ra、Rb、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0278] 优选化合物包括通式I、IA、IB、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0279] Y为‑O‑；
[0280] 且R1、R2、R3、R4、Ra、Rb、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0281] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、ID、IE、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb及IGb的化合物，其中：
[0282] R1为‑OH；
[0283] 且Y、R2、R3、R4、Ra、Rb、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0284] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb及IFb的化合物，其中：
[0285] R2为‑C(＝O)Ra基团，其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0286] 且Y、R1、R3、R4、Rb、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0287] 其他优选化合物包括通式I、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0288] 对于式I、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团，且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0289] 且Y、R1、R2、R4、Ra、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0290] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0291] 对于式I、IA、IB、IC、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、NHIDb、IFb或IGb的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式NH
IE、IEa或IEb的化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
IE、IEa或IEb的化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0292] 且Y、R1、R2、R3、Ra及Rb如以上所定义。
[0293] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0294] Y为‑NH‑；
[0295] R1为‑OH；
[0296] 且R2、R3、R4、Ra、Rb、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0297] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0298] Y为‑NH‑；
[0299] 对于式I、IA、IB、IC、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0300] 且R1、R3、R4、Rb、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0301] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0302] Y为‑NH‑；
[0303] 对于式I、IC、IE、IF、IG、Ia、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0304] 且R1、R2、R4、Ra、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0305] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0306] Y为‑NH‑；
[0307] 对于式I、IA、IB、IC、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基或经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基或经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0308] 且R1、R2、R3、Ra及Rb如以上所定义。
[0309] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0310] Y为‑NH‑；
[0311] R1为‑OH；
[0312] 对于式I、IA、IB、IC、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0313] 且R3、R4、Rb、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0314] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0315] Y为‑NH‑；
[0316] R1为‑OH；
[0317] 对于式I、IC、IE、IF、IG、Ia、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0318] 且R2、R4、Ra、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0319] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0320] Y为‑NH‑；
[0321] R1为‑OH；
[0322] 对于式I、IA、IB、IC、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0323] 且R2、R3、Ra及Rb如以上所定义。
[0324] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0325] Y为‑NH‑；
[0326] 对于式I、IA、IB、IC、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0327] 对于式I、IC、IE、IF、IG、Ia、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0328] 且R1、R4、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0329] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0330] Y为‑NH‑；
[0331] 对于式I、IA、IB、IC、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0332] 对于式I、IA、IB、IC、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0333] 且R1、R3及Rb如以上所定义。
[0334] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0335] Y为‑NH‑；
[0336] 对于式I、IC、IE、IF、IG、Ia、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0337] 对于式I、IA、IB、IC、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0338] 且R1、R2及Ra如以上所定义。
[0339] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0340] Y为‑NH‑；
[0341] R1为‑OH；
[0342] 对于式I、IA、IB、IC、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0343] 对于式I、IC、IE、IF、IG、Ia、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0344] 且R4、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0345] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0346] Y为‑NH‑；
[0347] R1为‑OH；
[0348] 对于式I、IA、IB、IC、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0349] 对于式I、IA、IB、IC、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0350] 且R3及Rb如以上所定义。
[0351] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0352] Y为‑NH‑；
[0353] 对于式I、IA、IB、IC、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0354] 对于式I、IC、IE、IF、IG、Ia、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0355] 对于式I、IA、IB、IC、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0356] 且R1如以上所定义。
[0357] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0358] Y为‑NH‑；
[0359] R1为‑OH；
[0360] 对于式I、IA、IB、IC、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0361] 对于式I、IC、IE、IF、IG、Ia、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0362] 对于式I、IA、IB、IC、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH。
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH。
[0363] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0364] Y为‑O‑；
[0365] R1为‑OH；
[0366] 且R2、R3、R4、Ra、Rb、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0367] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0368] Y为‑O‑；
[0369] 对于式I、IA、IB、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0370] 且R1、R3、R4、Rb、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0371] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0372] Y为‑O‑；
[0373] 对于式I、ID、IE、IF、IG、Ia、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0374] 且R1、R2、R4、Ra、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0375] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0376] Y为‑O‑；
[0377] 对于式I、IA、IB、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0378] 且R1、R2、R3、Ra及Rb如以上所定义。
[0379] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0380] Y为‑O‑；
[0381] R1为‑OH；
[0382] 对于式I、IA、IB、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0383] 且R3、R4、Rb、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0384] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0385] Y为‑O‑；
[0386] R1为‑OH；
[0387] 对于式I、ID、IE、IF、IG、Ia、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0388] 且R2、R4、Ra、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0389] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0390] Y为‑O‑；
[0391] R1为‑OH；
[0392] 对于式I、IA、IB、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0393] 且R2、R3、Ra及Rb如以上所定义。
[0394] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0395] Y为‑O‑；
[0396] 对于式I、IA、IB、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0397] 对于式I、ID、IE、IF、IG、Ia、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0398] 且R1、R4、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0399] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0400] Y为‑O‑；
[0401] 对于式I、IA、IB、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0402] 对于式I、IA、IB、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0403] 且R1、R3及Rb如以上所定义。
[0404] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0405] Y为‑O‑；
[0406] 对于式I、ID、IE、IF、IG、Ia、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0407] 对于式I、IA、IB、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0408] 且R1、R2及Ra如以上所定义。
[0409] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0410] Y为‑O‑；
[0411] R1为‑OH；
[0412] 对于式I、IA、IB、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0413] 对于式I、ID、IE、IF、IG、Ia、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0414] 且R4、Rc及ProtNH如以上所定义。
[0415] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0416] Y为‑O‑；
[0417] R1为‑OH；
[0418] 对于式I、IA、IB、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0419] 对于式I、IA、IB、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0420] 且R3及Rb如以上所定义。
[0421] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0422] Y为‑O‑；
[0423] 对于式I、IA、IB、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0424] 对于式I、ID、IE、IF、IG、Ia、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0425] 对于式I、IA、IB、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH；
[0426] 且R1如以上所定义。
[0427] 其他优选化合物包括通式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0428] Y为‑O‑；
[0429] R1为‑OH；
[0430] 对于式I、IA、IB、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0431] 对于式I、ID、IE、IF、IG、Ia、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0432] 对于式I、IA、IB、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IFb或IGbNH的化合物，R4选自‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的NH
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH。
化合物，R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自‑CH2OH及‑CH2NH2。更优选地，R4可为‑CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH。
[0433] 其他优选化合物包括通式Ic、IAc、IBc、IDc及IGc的化合物，其中：
[0434] R1为‑OH；
[0435] 且R2、R3、Ra及Rb如以上所定义。
[0436] 其他优选化合物包括通式Ic、IAc、IBc、IDc、IFc及IGc的化合物，其中：
[0437] 对于式Ic、IAc、IBc、IDc或IFc的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IGc的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0438] 且R1、R3、Rb如以上所定义。
[0439] 其他优选化合物包括通式Ic、IAc、IBc、IDc、IFc及IGc的化合物，其中：
[0440] 对于式Ic、IDc、IFc或IGc的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IAc的化合物，R3为氢；且对于式IBc的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0441] 且R1、R2及Ra如以上所定义。
[0442] 其他优选化合物包括通式Ic、IAc、IBc、IDc、IFc及IGc的化合物，其中：
[0443] R1为‑OH；
[0444] 对于式Ic、IAc、IBc、IDc或IFc的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IGc的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0445] 且R3及Rb如以上所定义。
[0446] 其他优选化合物包括通式Ic、IAc、IBc、IDc、IFc及IGc的化合物，其中：
[0447] R1为‑OH；
[0448] 对于式Ic、IDc、IFc或IGc的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IAc的化合物，R3为氢；且对于式IBc的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0449] 且R2及Ra如以上所定义。
[0450] 其他优选化合物包括通式Ic、IAc、IBc、IDc、IFc及IGc的化合物，其中：
[0451] 对于式Ic、IAc、IBc、IDc或IFc的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IGc的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0452] 对于式Ic、IDc、IFc或IGc的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IAc的化合物，R3为氢；且对于式IBc的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢；
[0453] 且R1如以上所定义。
[0454] 其他优选化合物包括通式Ic、IAc、IBc、IDc、IFc及IGc的化合物，其中：
[0455] R1为‑OH；
[0456] 对于式Ic、IAc、IBc、IDc或IFc的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IGc的化合物，R2为乙酰基；其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基；
[0457] 对于式Ic、IDc、IFc或IGc的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IAc的化合物，R3为氢；且对于式IBc的化合物，R3为‑ORb基团；其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢。
[0458] 以下优选取代基(在可能取代基允许的情况下)适用于式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb、Ic、IAc、IBc、IDc、IFc及IGc的化合物：
[0459] 在本发明化合物中，尤其优选的R1为‑OH。
[0460] 在本发明化合物中，尤其优选的R2为‑C(＝O)Ra基团，其中Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Ra选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选R2为乙酰基。
[0461] 在本发明化合物中，尤其优选的R3为氢或‑ORb基团，其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rb选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。更优选R3为氢及甲氧基，最优选R3基团为氢。
[0462] 在本发明化合物中，尤其优选的R4选自H、‑CH2OH、‑CH2OC(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑NHCH2NHProt ，其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc选自经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自H、CH2OH及CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH。
[0463] 在通式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物中，对于式I、IA、IB、IC、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IFb或IGb的化合物，尤其优选的R4选自‑CH2OH、‑CH2OCNH(＝O)Rc、‑CH2NH2及‑CH2NHProt ；且对于式IE、IEa或IEb的化合物，R4选自‑CH2NH2及‑NH
CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc为经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH。
CH2NHProt ；其中Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。尤其优选的Rc为经取代或未经取代的甲基、经取代或未经取代的乙基、经取代或未经取代的正丙基、经取代或未经取代的异丙基、经取代或未经取代的正丁基、经取代或未经取代的异丁基、经取代或未经取代的仲丁基及经取代或未经取代的叔丁基。最优选Rc为甲基。更优选R4选自CH2OH及CH2NH2。最优选R4为‑CH2OH。
[0464] 当R4为‑CH2OH或‑CH2OC(＝O)Rc时，为尤其优选的式Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、IGaNH的化合物，且当R4为‑CH2NH2或‑CH2NHProt 时为尤其优选的式Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb的化合物。
[0465] 在本发明化合物中，尤其优选的Y为‑NH‑。
[0466] 或者，在本发明化合物中，尤其优选的Y为‑O‑。
[0467] 根据本发明的优选化合物包括：
[0468] ·式I、IA、IB、IC、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IFb及IGb的化合物，其中：
[0469] R4选自‑CH2OH及‑CH2OC(＝O)Rc；
[0470] 尤其优选为式Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa及IGa的化合物及/或其中R4为‑CH2OH的化合物。
[0471] ·式I、IA、IB、IC、ID、IE IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0472] R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；且
[0473] ProtNH为氨基的保护基。
[0474] 尤其优选为式的化合物Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb及/或其中R4为‑CH2NH2的化合物。
[0475] ·式Ic、IAc、IBc、IDc、IFc、IGc的化合物，其中
[0476] 对于式Ic、IAc、IBc、IDc或IFc的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IGc的化合物，R2为乙酰基；
[0477] 对于式Ic、IDc、IFc、IGc的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IAc的化合物，R3为氢；或对于式IBc的化合物，R3为‑ORb基团；
[0478] Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0479] Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
[0480] 尤其优选的根据本发明的化合物包括：
[0481] ·式I、IA、IB、IC、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa、IB、IAb、IBb、ICb、IFb及IGb的化合物，其中
[0482] Y为‑NH‑；
[0483] R4选自‑CH2OH及‑CH2OC(＝O)Rc；
[0484] 且
[0485] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基。
[0486] 更优选为式Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa的化合物及/或其中R4为‑CH2OH的化合物。
[0487] ·式I、IA、IB、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IFb及IGb的化合物，其中
[0488] Y为‑O‑；
[0489] R4选自‑CH2OH及‑CH2OC(＝O)Rc；
[0490] 且
[0491] Rc选自经取代或未经取代的C1‑C12烷基、经取代或未经取代的C2‑C12烯基及经取代或未经取代的C2‑C12炔基。
[0492] 更优选为式Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、IGa的化合物及/或其中R4为‑CH2OH的化合物。
[0493] ·式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0494] Y为‑NH‑；
[0495] R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0496] 且
[0497] ProtNH为氨基的保护基。
[0498] 更优选为式Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb、IGb的化合物及/或其中R4为‑CH2NH2的化合物。
[0499] ·式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0500] Y为‑O‑；
[0501] R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0502] 且
[0503] ProtNH为氨基的保护基。
[0504] 更优选为式Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb、IGb的化合物及/或其中R4为‑CH2NH2的化合物。
[0505] ·式I、IA、IB、IC、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IFb、IGb的化合物，其中
[0506] 对于式I、IA、IB、IC、ID、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0507] 对于式I、IC、ID、IF、IG、Ia、ICa、IDa、IFa、IGa、Ib、ICb、IDb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；
[0508] R4选自‑CH2OH及‑CH2OC(＝O)Rc；
[0509] Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基；
[0510] Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0511] Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
[0512] 更优选为式Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、IGa的化合物及/或其中R4为‑CH2OH的化合物。
[0513] ·式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0514] 对于式I、IA、IB、IC、ID、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0515] 对于式I、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；
[0516] R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0517] Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基；
[0518] Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0519] ProtNH为氨基的保护基。
[0520] 更优选为式Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb的化合物及/或其中R4为‑CH2NH2的化合物。
[0521] ·式Ic、IAc、IBc、IDc、IFc、IGc的化合物，其中
[0522] 对于式Ic、IAc、IBc、IDc或IFc的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IGc的化合物，R2为乙酰基；
[0523] 对于式Ic、IDc、IFc、IGc的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IAc的化合物，R3为氢；或对于式IBc的化合物，R3为‑ORb基团；
[0524] Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0525] Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
[0526] 更优选的根据本发明的化合物包括
[0527] ·式I、IA、IB、IC、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IFb及IGb的化合物，其中
[0528] Y为‑NH‑；
[0529] 对于式I、IA、IB、IC、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0530] 对于式I、IC、IF、IG、Ia、ICa、IFa、IGa、Ib、ICb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；
[0531] R4为‑CH2OH；
[0532] Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0533] Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
[0534] 尤其更优选为式Ia、IAa或IBa、ICa、IFa、IGa的化合物。
[0535] ·式I、IA、IB、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IFb及IGb的化合物，其中
[0536] Y为‑O‑；
[0537] 对于式I、IA、IB、ID、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0538] 对于式I、ID、IF、IG、Ia、IDa、IFa、IGa、Ib、IDb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；
[0539] R4为‑CH2OH；
[0540] Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0541] Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
[0542] 尤其更优选为式Ia、IAa、IBa、IDa、IFa或IGa的化合物。
[0543] ·式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0544] Y为‑NH‑；
[0545] 对于式I、IA、IB、IC、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0546] 对于式I、IC、IE、IF、IG、Ia、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；
[0547] R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0548] Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基；
[0549] Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0550] ProtNH为氨基的保护基。
[0551] 尤其更优选为式Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb、IGb的化合物及/或其中R4为‑CH2NH2的化合物。
[0552] ·式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0553] Y为‑O‑；
[0554] 对于式I、IA、IB、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0555] 对于式I、ID、IE、IF、IG、Ia、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；
[0556] R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0557] Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基；
[0558] Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0559] ProtNH为氨基的保护基。
[0560] 尤其更优选为式Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb、IGb的化合物及/或其中R4为CH2NH2的化合物。
[0561] ·式I、IA、IB、IC、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IFb及IGb的化合物，其中
[0562] 对于式I、IA、IB、IC、ID、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0563] 对于式I、IC、ID、IF、IG、Ia、ICa、IDa、IFa、IGa、Ib、ICb、IDb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；
[0564] R4为‑CH2OH；
[0565] Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0566] Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
[0567] 尤其更优选为式Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa或IGa的化合物。
[0568] ·式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0569] 对于式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0570] 对于式I、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；
[0571] R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0572] Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基；
[0573] Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0574] ProtNH为氨基的保护基。
[0575] 尤其更优选为式Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb的化合物及/或其中R4为‑CH2NH2的化合物。
[0576] ·式I、IA、IB、IC、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IFb及IGb的化合物，其中
[0577] Y为‑NH‑；
[0578] 对于式I、IA、IB、IC、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0579] 对于式I、IC、IF、IG、Ia、ICa、IFa、IGa、Ib、ICb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或‑ORb基团；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为‑ORb基团；
[0580] R4为‑CH2OC(＝O)Rc；
[0581] Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基；
[0582] Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基及
[0583] Rc为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
[0584] 更优选为式Ia、IAa、IBa、ICa、IFa或IGa的化合物。
[0585] ·式Ic、IAc、IBc、IDc、IFc及IGc的化合物，其中
[0586] 对于式Ic、IAc、IBc、IDc或IFc的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IGc的化合物，R2为乙酰基；
[0587] 对于式Ic、IDc、IFc或IGc的化合物，R3为氢或甲氧基；对于式IAc的化合物，R3为氢；或对于式IBc的化合物，R3为甲氧基；且
[0588] Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
[0589] 尤其更优选的根据本发明的化合物包括：
[0590] ·式I、IA、IB、IC、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IFb及IGb的化合物，其中
[0591] Y为‑NH‑；
[0592] 对于式I、IA、IB、IC、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0593] 对于式I、IC、IF、IG、Ia、ICa、IFa、IGa、Ib、ICb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或甲氧基；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢且对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为甲氧基；
[0594] R4为‑CH2OH；且
[0595] Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
[0596] 甚至更优选为式Ia、IAa、IBa、ICa、IFa、IGa的化合物。
[0597] ·式I、IA、IB、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IFb及IGb的化合物，其中
[0598] Y为‑O‑；
[0599] 对于式I、IA、IB、ID、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0600] 对于式I、ID、IF、IG、Ia、IDa、IFa、IGa、Ib、IDb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或甲氧基；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为甲氧基；
[0601] R4为‑CH2OH；且
[0602] Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基。
[0603] 甚至更优选为式Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa的化合物。
[0604] ·式I、IA、IB、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0605] Y为‑NH‑；
[0606] 对于式I、IA、IB、IC、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0607] 对于式I、IC、IE、IF、IG、Ia、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或甲氧基；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为甲氧基；
[0608] R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0609] Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0610] ProtNH为氨基的保护基。
[0611] 甚至更优选为式Ib、IAb、IBb、ICb、IEb、IFb、IGb的化合物及/或其中R4为‑CH2NH2的化合物。
[0612] ·式I、IA、IB、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0613] Y为‑O‑；
[0614] 对于式I、IA、IB、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0615] 对于式I、ID、IE、IF、IG、Ia、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物，R3为氢或甲氧基；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为甲氧基；
[0616] R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0617] Ra为经取代或未经取代的C1‑C6烷基；且
[0618] ProtNH为氨基的保护基。
[0619] 甚至更优选为式Ib、IAb、IBb、IDb、IEb、IFb、IGb的化合物及/或其中R4为‑CH2NH2的化合物。
[0620] ·式I、IA、IB、IC、ID、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IFb及IGb的化合物，其中
[0621] 对于式I、IA、IB、IC、ID、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0622] 对于式I、IC、ID、IF、IG、Ia、ICa、IDa、IFa、IGa、Ib、ICb、IDb、IFb及IGb的化合物，R3为氢或甲氧基；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为甲氧基；
[0623] R4为‑CH2OH；且
[0624] Ra选自甲基、乙基、正丙基、异丙基及丁基(包括正丁基、仲丁基、异丁基及叔丁基)。
[0625] 甚至更优选为式Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa或IGa的化合物。
[0626] ·式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0627] 对于式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb或IFb的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IG、IGa或IGb的化合物，R2为乙酰基；
[0628] 对于式I、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，R3为氢或甲氧基；对于式IA、IAa或IAb的化合物，R3为氢；或对于式IB、IBa或IBb的化合物，R3为甲氧基；
[0629] R4选自‑CH2NH2及‑CH2NHProtNH；
[0630] Ra选自甲基、乙基、正丙基、异丙基及丁基(包括正丁基、仲丁基、异丁基及叔丁基)；且
[0631] ProtNH为氨基的保护基。
[0632] 甚至更优选为式Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb的化合物及/或其中R4为‑CH2NH2的化合物。
[0633] ·式Ic或IAc、IDc、IFc及IGc的化合物，其中
[0634] 对于式Ic、IAc、IDc或IFc的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IGc的化合物，R2为乙酰基；
[0635] R3为氢；且
[0636] Ra选自甲基、乙基、正丙基、异丙基及丁基(包括正丁基、仲丁基、异丁基及叔丁基)。
[0637] ·式Ic、IBc、IDc、IFc及IGc的化合物，其中
[0638] 对于式Ic、IBc、IDc或IFc的化合物，R2为‑C(＝O)Ra基团；且对于式IGc的化合物，R2为乙酰基；
[0639] R3为甲氧基；且
[0640] Ra选自甲基、乙基、正丙基、异丙基及丁基(包括正丁基、仲丁基、异丁基及叔丁基)。
[0641] 甚至更优选的根据本发明的化合物包括：
[0642] ·式I、IA、IC、IF、IG、Ia、IAa、ICa、IFa、IGa、Ib、IAb、ICb、IFb及IGb的化合物，其中[0643] Y为‑NH‑；
[0644] R2为乙酰基；
[0645] R3为氢；且
[0646] R4为‑CH2OH。
[0647] 最优选为式Ia、IAa、ICa、IFa或IGa的化合物。
[0648] ·式I、IA、ID、IF、IG、Ia、IAa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、IDb、IFb及IGb的化合物，其中[0649] Y为‑O‑；
[0650] R2为乙酰基；
[0651] R3为氢；且
[0652] R4为‑CH2OH。
[0653] 最优选为式Ia、IAa、IDa、IFa或IGa的化合物
[0654] ·式I、IA、IC、IE、IF、IG、Ia、IAa、ICa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、ICb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0655] Y为‑NH‑；
[0656] R2为乙酰基；
[0657] R3为氢；且
[0658] R4为‑CH2NH2。
[0659] 最优选为式Ib、IAb、ICb、IEb、IFb或IGb的化合物。
[0660] ·式I、IA、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0661] Y为‑O‑；
[0662] R2为乙酰基；
[0663] R3为氢；且
[0664] R4为‑CH2NH2。
[0665] 最优选为式Ib、IAb、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物。
[0666] ·式I、IA、IC、ID、IF、IG、Ia、IAa、ICa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、ICb、IDb、IFb及IGb的化合物，其中
[0667] R2为乙酰基；
[0668] R3为氢；且
[0669] R4为‑CH2OH。
[0670] 最优选为式Ia、IAa、ICa、IDa、IFa或IGa的化合物。
[0671] ·式I、IA、IC、ID、IF、IG、Ia、IAa、ICa、IDa、IFa、IGa、Ib、IAb、ICb、IDb、IFb及IGb的化合物，其中
[0672] R1为‑OH；
[0673] R2为乙酰基；
[0674] R3为氢；且
[0675] R4为‑CH2OH。
[0676] 最优选为式Ia、IAa、ICa、IDa、IFa或IGa的化合物。
[0677] ·式I、IA、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb的化合物，其中
[0678] R2为乙酰基；
[0679] R3为氢；且
[0680] R4为‑CH2NH2。
[0681] 最优选为式Ib、IAb、ICb、IDb、IEb、IFb或IGb的化合物。
[0682] ·式Ic或IAc、IDc、IFc、IGc的化合物，其中
[0683] R2为乙酰基；且
[0684] R3为氢。
[0685] ·式Ic或IBc、IDc、IFc、IGc的化合物，其中
[0686] R2为乙酰基；且
[0687] R3为甲氧基。
[0688] ·下式的根据本发明的化合物：
[0689]
[0690]
[0691]
[0692] 或其医药学上可接受的盐或酯。
[0693] 尤其优选为以下各式的化合物：
[0694]
[0695]
[0696] 或其医药学上可接受的盐或酯。
[0697] ·下式的根据本发明的化合物：
[0698]
[0699]
[0700] 或其医药学上可接受的盐或酯。
[0701] 尤其优选为以下各式的化合物：
[0702]
[0703] 或其医药学上可接受的盐或酯。
[0704] 更优选为以下各式的化合物：
[0705]
[0706] 或其医药学上可接受的盐或酯。
[0707] 甚至更优选的根据本发明的化合物为以下各式的化合物：
[0708]
[0709]
[0710] 或其医药学上可接受的盐或酯。
[0711] 进一步优选的根据本发明的化合物为以下各式的化合物：
[0712]
[0713] 或其医药学上可接受的盐或酯。
[0714] 在另一具体实例中，根据本发明的优选化合物为以下各式的化合物：
[0715]
[0716] 或其医药学上可接受的盐或酯。
[0717] 进一步优选化合物包括以下各式的化合物：
[0718]
[0719]
[0720] 或其医药学上可接受的盐或酯。
[0721] 进一步优选化合物包括以下各式的化合物：
[0722]
[0723]
[0724] 或其医药学上可接受的盐或酯。
[0725] 在额外优选的具体实例中，以上针对不同取代基所述的优选情况进行组合。本发明也针对根据本发明的式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb、Ic、IAc、IBc、IDc、IFc或IGc的化合物中优选取代的此类组合(在可能取代基允许的情况下)。
[0726] 为避免疑问，以上化合物可为药物部分D且经由羟基或氨基共价附接至(X)b(若存在)或(AA)w(若存在)或至(T)g(若存在)或(L)。因此，当共轭时，共价键替换化合物上的羟基或氨基上的质子。
[0727] 以下给出根据本发明的优选药物共轭物。如以下阐述的(X)b、(AA)w、(T)g及(L)的优选定义可适用于上述所有药物部分D化合物。根据本发明的优选药物共轭物包括：
[0728] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物，其中L为选自由以下组成的组的连接子基团：
[0729]
[0730] 其中
[0731] 波浪线表示共价附接至Ab(右边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(X)b(若存在)、或至D(左边的波浪线)的点；
[0732] R19选自‑C1‑C12亚烷基‑、‑C3‑C8碳环基、‑O‑(C1‑C12亚烷基)、呈单环或多环的可视需要经一或多个取代基Rx取代的‑C6‑C18亚芳基、‑C1‑C12亚烷基‑C6‑C18亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C6‑C18亚芳基‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑、‑(C3‑C8碳环基)‑C1‑C12亚烷基‑、‑C5‑C14杂环基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C5‑C14杂环基)‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(C5‑C14杂环基)‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(OCH2CH2)r‑及‑CH2‑(OCH2CH2)r‑，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
[0733] R30为‑C1‑C6亚烷基‑基团；
[0734] M选自由以下组成的组：‑C1‑C6亚烷基‑、‑C1‑C6亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑、‑(CH2CH2O)s‑、‑C1‑C6亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑CON(H或C1‑C6烷基)‑C1‑C6亚烷基‑、可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基、亚苯基‑C1‑C6亚烷基‑，其中所述亚苯基部分可视需要经一或多个取代基Rx取代、及‑C1‑C6亚烷基‑CON(H或C1‑C6烷基)C1‑C6亚烷基‑；
[0735] Q选自由以下组成的组：‑N(H或C1‑C6烷基)亚苯基‑及‑N(H或C1‑C6烷基)‑(CH2)s；
[0736] r为1至10范围内的整数；且
[0737] s为1至10范围内的整数。
[0738] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物，其中L选自由以下组成的组：
[0739] 及
[0740] 其中：
[0741] 波浪线表示共价附接至Ab(右边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(X)b(若存在)、或至D(左边的波浪线)的点；
[0742] R19选自‑C1‑C12亚烷基‑、‑O‑(C1‑C12亚烷基)、呈单环或多环的可视需要经一或多个取代基Rx取代的‑C6‑C12亚芳基、‑C1‑C12亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C5‑C12杂环基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C5‑C12杂环基)‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(C5‑C12杂环基)‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(OCH2CH2)r‑及‑CH2‑(OCH2CH2)r‑，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
[0743] R30为‑C1‑C6亚烷基‑基团；
[0744] M选自由以下组成的组：‑C1‑C6亚烷基‑、‑C1‑C6亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑及可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基；且
[0745] r为在1‑6范围内的整数。
[0746] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物，其选自式(IV)、(V)及(VI)：
[0747]
[0748] 其中：
[0749] X及T为如本文所定义的延伸基团；
[0750] 各AA独立地为如本文所定义的氨基酸单元；
[0751] w为在0至12范围内的整数；
[0752] b为0或1的整数；
[0753] g为0或1的整数；
[0754] 其中b+g+w视需要不为0；
[0755] D为药物部分；
[0756] Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分；
[0757] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑](其中L如式(IV)、(V)或(VI)中所定义)与包含至少一个抗原结合位点的部分的比率且在1至20的范围内；
[0758] R19选自‑C1‑C8亚烷基‑、‑O‑(C1‑C8亚烷基)、‑C1‑C8亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、及‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C8亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
[0759] R30为‑C2‑C4亚烷基‑基团；且
[0760] M选自由以下组成的组：‑C1‑C3亚烷基‑及‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑。
[0761] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物，其选自式(IV)、(V)及(VI)：
[0762]
[0763] 其中：
[0764] X及T为可相同或不同的延伸基团；
[0765] 各AA独立地为氨基酸单元；
[0766] w为在0至12范围内的整数；
[0767] b为0或1的整数；
[0768] g为0或1的整数；
[0769] 其中b+g+w视需要不为0；
[0770] D为药物部分；
[0771] Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分；
[0772] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑](其中L如式(IV)、(V)或(VI)中所定义)与包含至少一个抗原结合位点的部分的比率且在1至20的范围内；
[0773] R19选自‑C1‑C6亚烷基‑、亚苯基‑C1‑C6亚烷基‑，其中所述亚苯基可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至碳链中的另一部分均可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代且R19优选为‑C1‑C6亚烷基基团；
[0774] R30为‑C2‑C4亚烷基‑基团；且
[0775] M为‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑。
[0776] ·优选地，在式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物的定义中，L如以上针对所述基团的优选定义中所定义且(AA)w具有式(II)：
[0777]
[0778] 其中波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或至药物部分(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或至连接子(右边的波浪线)的点；且
[0779] R21在每次出现时选自由以下组成的组：氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、苯甲基、对羟基苯甲基、‑CH2OH、‑CH(OH)CH3、‑CH2CH2SCH3、‑CH2CONH2、‑CH2COOH、‑CH2CH2CONH2、‑CH2CH2COOH、‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2、‑(CH2)3NH2、‑(CH2)3NHCOCH3、‑(CH2)3NHCHO、‑(CH2)4NHC(＝NH)NH2、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)4NHCOCH3、‑(CH2)4NHCHO、‑(CH2)3NHCONH2、‑(CH2)4NHCONH2、‑CH2CH2CH(OH)CH2NH2、2‑吡啶基甲基‑、3‑吡啶基甲基‑、4‑吡啶基甲基‑、苯基、环己基、[0780]
[0781] 及
[0782] 且w为在0至12范围内的整数。
[0783] ·根据本发明的第一方面的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物，其中L如以上在所述基团的优选定义中所定义且(AA)w具有式(II)，其中：
[0784] R21在每次出现时选自由以下组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苯甲基、吲哚基甲基、‑(CH2)3NHCONH2、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2及‑(CH2)4NHC(＝NH)NH2；且[0785] w为在0至6范围内的整数。
[0786] ·根据本发明的第一方面的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物，其中L如以上在所述基团的优选定义中所定义，其中w为0或2且当w为2时，(AA)w具有式(III)，其中：
[0787]
[0788] 波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或至药物部分(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或至连接子(右边的波浪线)的点；
[0789] R22选自甲基、苯甲基、异丙基、仲丁基及吲哚基甲基；且
[0790] R23选自甲基、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHCONH2及‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2。
[0791] ·在本发明的具体实例中，b+g+w不为0。在其他具体实例中，b+w不为0。在其他具体实例中，当w不为0时，b为1。此外，优选在式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物的定义中，L及(AA)w如以上在所述基团的优选定义中所定义且X为选自以下的延伸基团：
[0792] 在D经由氨基共轭的情况下(例如在Z为‑NH‑的情况下)：
[0793] ‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NH‑；
[0794] ‑COO‑CH2‑(可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑；
[0795] ‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑；
[0796] ‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑；
[0797] ‑COCH2NH‑；
[0798] ‑COO‑(C1‑C6亚烷基)S‑；
[0799] ‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NHCO(C1‑C6亚烷基)S‑；或
[0800] 在D经由羟基共轭的情况下(例如在Z为‑O‑的情况下)：
[0801] ‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NH‑；
[0802] ‑COO‑CH2‑(可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑；
[0803] ‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑；
[0804] ‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑；
[0805] ‑COCH2NH‑；
[0806] ‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)S‑；
[0807] ‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NHCO(C1‑C6亚烷基)S‑；且
[0808] b为0或1，优选为1。
[0809] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物，其中L及(AA)w如以上在所述基团的优选定义中所定义且X为选自由以下组成的组的延伸基团：
[0810] 其中D经由氨基共轭的情况下(例如在Z为‑NH‑的情况下)：
[0811] ‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑；
[0812] ‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代；
[0813] ‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑；
[0814] ‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑；
[0815] ‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑；
[0816] ‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；或
[0817] 在D经由羟基共轭的情况下(例如在情况下Z为‑O‑)：
[0818] ‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑；
[0819] ‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代；
[0820] ‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑；
[0821] ‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑；
[0822] ‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)S‑；
[0823] ‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；且
[0824] b为0或1，优选为1。
[0825] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物，其中L及(AA)w如以上在所述基团的优选定义中所定义且X为选自由以下组成的组的延伸基团：
[0826] 其中D经由氨基共轭的情况下(例如在Z为‑NH‑的情况下)：
[0827] ‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑
[0828] ‑COO(CH2)3NHCOOCH2‑亚苯基‑NH‑；
[0829] ‑COO(CH2)3NH‑；
[0830] ‑COO(CH2)3‑S‑；
[0831] ‑COO(CH2)3NHCO(CH2)2S‑；或
[0832] 在D经由羟基共轭的情况下(例如在情况下Z为‑O‑)：
[0833] ‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑
[0834] ‑CONH(CH2)3NHCOOCH2‑亚苯基‑NH‑；
[0835] ‑CONH(CH2)3NH‑；
[0836] ‑CONH(CH2)3‑S‑；
[0837] ‑CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S‑；且
[0838] b为0或1，优选为1。
[0839] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物，其中L、(AA)w及(X)b如以上在所述基团的优选定义中所定义且T为选自由以下组成的组的延伸基团：
[0840] ‑CO‑(C1‑C6亚烷基)‑NH‑；
[0841] ‑CO‑(C1‑C6亚烷基)‑[O‑(C2‑C6亚烷基)]j‑NH‑；
[0842] ‑COO‑(C1‑C6亚烷基)‑[O‑(C2‑C6亚烷基)]j‑NH‑；
[0843] 其中j为1至25的整数，且
[0844] g为0或1。
[0845] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物，其中L、(AA)w及(X)b如以上在所述基团的优选定义中所定义且T为选自由以下组成的组的延伸基团：
[0846] ‑CO‑(C1‑C4亚烷基)NH‑
[0847] ‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑；
[0848] ‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑；
[0849] 其中j为1至10的整数；且
[0850] g为0或1。
[0851] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物，其中L、(AA)w及(X)b如以上在所述基团的优选定义中所定义且T为选自由以下组成的组的延伸基团：
[0852] ‑CO‑(C1‑C4亚烷基)NH‑
[0853] ‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑；
[0854] ‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑；
[0855] 其中j为1至5的整数；且
[0856] g为0或1。
[0857] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b及(T)g如上所定义且其中D为式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb、(IH)、(IHa)或(IHb)的化合物，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中在式I、IA、IB、IC、ID、IE、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IGb、(IH)、(IHa)或(IHb)的化合物中R1为CN或OH；在式IF、IFa及IFb的化合物中R1为OH且更优选R1为CN。
[0858] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b及(T)g如上所定义且其中D为式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、(IH)、(IHa)或(IHb)的化合物，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中R2为C(＝O)Ra，其中Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx且更优选R2为乙酰基。
[0859] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b及(T)g如上所定义且其中D为式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb、(IH)、(IHa)或(IHb)的化合物，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中在式I、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb、(IH)、(IHa)或(IHb)的化合物中R3为氢或‑ORb基团；在式IA、IAa或IAb的化合物中R3为氢；在式IB、IBa或IBb的化合物中R3为‑ORb基团，其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx且更优选R3为氢或甲氧基。最优选R3为氢。
[0860] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b及(T)g如上所定义且其中D为式(IH)、(IHa)或(IHb)的化合物，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中Y为‑NH‑或‑O‑。
[0861] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b及(T)g如上所定义且其中D为式(IH)、(IHa)或(IHb)的化合物，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中Z为‑NH‑或‑O‑且更优选Z为‑NH‑。
[0862] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b及(T)g如上所定义且其中D为式(IHa)或(IHb)的化合物，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中：
[0863] R1为‑CN或‑OH；
[0864] R2为‑C(＝O)Ra，其中Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
[0865] R3为氢或‑ORb基团，其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx，
[0866] Y为‑NH‑或‑O‑；且
[0867] Z为‑NH‑或‑O‑。
[0868] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b及(T)g如上所定义且其中D为式(IHa)或(IHb)的化合物，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中：
[0869] R1为‑CN或‑OH；
[0870] R2为乙酰基；
[0871] R3为氢或甲氧基，更优选为氢；
[0872] Y为‑NH‑或‑O‑；且
[0873] Z为‑NH‑或‑O‑。
[0874] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b及(T)g如上所定义且其中D为式(IHa)或(IHb)的化合物，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中：
[0875] R1为‑CN；
[0876] R2为乙酰基：
[0877] R3为氢；
[0878] Y为‑NH‑或‑O‑；且
[0879] Z为‑NH‑。
[0880] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b及(T)g如上所定义且其中D选自：
[0881] 及
[0882] 或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体；其中波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(T)g(若存在)、或(L)的点。
[0883] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b及(T)g如上所定义且其中D选自：
[0884] 及
[0885] 或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体；其中波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(T)g(若存在)、或(L)的点。
[0886] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b、(T)g及D如上所定义且其中包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为抗原结合肽。
[0887] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b、(T)g及D如上所定义且包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为抗体、单域抗体或其抗原结合片段。
[0888] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b、(T)g及D如上所定义且包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为单株、多株抗体或双特异性抗体且其中所述抗体或其抗原结合片段来源于任何物种，优选人类、小鼠或兔。
[0889] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b、(T)g及D如上所定义且包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为选自由以下组成的组的抗体或其抗原结合片段：人类抗体、人类抗体的抗原结合片段、人类化抗体、人类化抗体的抗原结合片段、嵌合抗体、嵌合抗体的抗原结合片段、糖基化抗体及糖基化抗原结合片段。
[0890] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b、(T)g及D如上所定义且包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段为选自由以下组成的组的抗原结合片段：Fab片段、Fab'片段、F(ab')2片段及Fv片段。
[0891] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b、(T)g及D如上所定义且包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段为免疫特异性结合于癌细胞抗原、病毒抗原、产生与自体免疫性疾病相关联的自体免疫抗体的细胞的抗原、微生物抗原的单株抗体，且优选为免疫特异性结合于癌细胞抗原的单株抗体。
[0892] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的另一优选药物共轭物为如下药物共轭物，其中L、(AA)w、(X)b、(T)g及D如本文所定义且包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为选自由以下组成的组的抗体：阿昔单抗(Abciximab)、阿仑单抗(Alemtuzumab)、阿奈妥单抗(Anetumab)、阿特珠单抗(Atezolizumab)、阿维鲁单抗(Avelumab)、巴利昔单抗(Basiliximab)、贝伐单抗(Bevacizumab)、博纳吐单抗(Blinatomumab)、本妥昔单抗
(Brentuximab)、卡妥索单抗(Catumaxomab)、西妥昔单抗(Cetuximab)、考妥昔单抗
(Coltuximab)、达利珠单抗(Daclizumab)、达雷木单抗(Daratumumab)、地宁妥珠单抗
(Denintuzumab)、地诺单抗(Denosumab)、德帕妥昔珠单抗(Depatuxizumab)、地努妥昔单抗(Dinutuximab)、德瓦鲁单抗(Durvalumab)、埃罗妥珠单抗(Elotuzumab)、因福土单抗
(Enfortumab)、格巴妥木单抗(Glembatumumab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、替伊莫单抗(Ibritumomab)、英达妥昔单抗(Indatuximab)、英度妥单抗(Indusatumab)、奥英妥珠单抗(Inotuzumab)、伊匹单抗(Ipilimumab)、拉贝珠单抗(Labetuzumab)、拉妥珠单抗
(Ladiratuzumab)、拉妥昔单抗(Laprituximab)、利法妥珠单抗(Lifastuzumab)、洛沃妥珠单抗(Lorvotuzumab)、米拉组单抗(Milatuzumab)、米妥昔单抗(Mirvetuximab)、那妥昔单抗(Naratuximab)、耐昔妥珠单抗(Necitumumab)、尼妥珠单抗(Nimotuzumab)、纳武单抗(Nivolumab)、奥滨尤妥珠单抗(Obinutuzumab)、奥法木单抗(Ofatumumab)、奥拉单抗
(Olaratumab)、奥马珠单抗(Omalizumab)、帕利珠单抗(Palivizumab)、帕尼单抗
(Panitumumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)、帕妥珠单抗(Pertuzumab)、匹那妥珠单抗
(Pinatuzumab)、泊洛妥珠单抗(Polatuzumab)、雷莫芦单抗(Ramucirumab)、洛伐妥珠单抗(Rovalpituzumab)、沙西妥珠单抗(Sacituzumab)、司妥昔单抗(Siltuximab)、司曲妥单抗(Sirtratumab)、索非妥珠单抗(Sofituzumab)、伐达妥昔单抗(Vadastuximab)、沃瑟妥珠单抗(Vorsetuzumab)、曲妥珠单抗(Trastuzumab)、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD
30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，其中优选所述抗体选自阿昔单抗、阿仑单抗、阿奈妥单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地宁妥珠单抗、地诺单抗、德帕妥昔珠单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、因福土单抗、格巴妥木单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、英达妥昔单抗、英度妥单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、拉妥珠单抗、拉妥昔单抗、米妥昔单抗、那妥昔单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、泊洛妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、沙西妥珠单抗、司妥昔单抗、司曲妥单抗、伐达妥昔单抗、沃瑟妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，且更优选为阿昔单抗、阿仑单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地诺单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、司妥昔单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。其中，尤其优选为本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗(Inozutumab)、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分；或所述抗体选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，尤其曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
(Brentuximab)、卡妥索单抗(Catumaxomab)、西妥昔单抗(Cetuximab)、考妥昔单抗
(Coltuximab)、达利珠单抗(Daclizumab)、达雷木单抗(Daratumumab)、地宁妥珠单抗
(Denintuzumab)、地诺单抗(Denosumab)、德帕妥昔珠单抗(Depatuxizumab)、地努妥昔单抗(Dinutuximab)、德瓦鲁单抗(Durvalumab)、埃罗妥珠单抗(Elotuzumab)、因福土单抗
(Enfortumab)、格巴妥木单抗(Glembatumumab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、替伊莫单抗(Ibritumomab)、英达妥昔单抗(Indatuximab)、英度妥单抗(Indusatumab)、奥英妥珠单抗(Inotuzumab)、伊匹单抗(Ipilimumab)、拉贝珠单抗(Labetuzumab)、拉妥珠单抗
(Ladiratuzumab)、拉妥昔单抗(Laprituximab)、利法妥珠单抗(Lifastuzumab)、洛沃妥珠单抗(Lorvotuzumab)、米拉组单抗(Milatuzumab)、米妥昔单抗(Mirvetuximab)、那妥昔单抗(Naratuximab)、耐昔妥珠单抗(Necitumumab)、尼妥珠单抗(Nimotuzumab)、纳武单抗(Nivolumab)、奥滨尤妥珠单抗(Obinutuzumab)、奥法木单抗(Ofatumumab)、奥拉单抗
(Olaratumab)、奥马珠单抗(Omalizumab)、帕利珠单抗(Palivizumab)、帕尼单抗
(Panitumumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)、帕妥珠单抗(Pertuzumab)、匹那妥珠单抗
(Pinatuzumab)、泊洛妥珠单抗(Polatuzumab)、雷莫芦单抗(Ramucirumab)、洛伐妥珠单抗(Rovalpituzumab)、沙西妥珠单抗(Sacituzumab)、司妥昔单抗(Siltuximab)、司曲妥单抗(Sirtratumab)、索非妥珠单抗(Sofituzumab)、伐达妥昔单抗(Vadastuximab)、沃瑟妥珠单抗(Vorsetuzumab)、曲妥珠单抗(Trastuzumab)、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD
30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，其中优选所述抗体选自阿昔单抗、阿仑单抗、阿奈妥单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地宁妥珠单抗、地诺单抗、德帕妥昔珠单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、因福土单抗、格巴妥木单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、英达妥昔单抗、英度妥单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、拉妥珠单抗、拉妥昔单抗、米妥昔单抗、那妥昔单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、泊洛妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、沙西妥珠单抗、司妥昔单抗、司曲妥单抗、伐达妥昔单抗、沃瑟妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，且更优选为阿昔单抗、阿仑单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地诺单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、司妥昔单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。其中，尤其优选为本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗(Inozutumab)、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分；或所述抗体选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，尤其曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
[0893] ·根据本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的尤其优选药物共轭物包括以下：
[0894] (a)根据本发明的药物共轭物，其中：
[0895] L选自由以下组成的组：
[0896] 及
[0897] 其中：
[0898] 波浪线表示共价附接至Ab(右边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(X)b(若存在)、或至D(左边的波浪线)的点；
[0899] R19选自‑C1‑C12亚烷基‑、‑O‑(C1‑C12亚烷基)、呈单环或多环的可视需要经一或多个取代基Rx取代的‑C6‑C12亚芳基、‑C1‑C12亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C5‑C12杂环基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C5‑C12杂环基)‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(C5‑C12杂环基)‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(OCH2CH2)r‑及‑CH2‑(OCH2CH2)r‑，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
[0900] R30为‑C1‑C6亚烷基‑基团；
[0901] M选自由以下组成的组：‑C1‑C6亚烷基‑、‑C1‑C6亚烷基‑(C3‑C8碳环基)‑及可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基；
[0902] r为在1‑6范围内的整数；
[0903] (AA)w具有式(II)：
[0904]
[0905] 其中波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或至药物部分(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或至连接子(右边的波浪线)的点；
[0906] R21在每次出现时选自由以下组成的组：氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、苯甲基、对羟基苯甲基、‑CH2OH、‑CH(OH)CH3、‑CH2CH2SCH3、‑CH2CONH2、‑CH2COOH、‑CH2CH2CONH2、‑CH2CH2COOH、‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2、‑(CH2)3NH2、‑(CH2)3NHCOCH3、‑(CH2)3NHCHO、‑(CH2)4NHC(＝NH)NH2、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)4NHCOCH3、‑(CH2)4NHCHO、‑(CH2)3NHCONH2、‑(CH2)4NHCONH2、‑CH2CH2CH(OH)CH2NH2、2‑吡啶基甲基‑、3‑吡啶基甲基‑、4‑吡啶基甲基‑、苯基、环己基、[0907]及
[0908] w为在0至12范围内的整数；
[0909] 其中X为选自以下的延伸基团：
[0910] 在D经由氨基共轭的情况下(例如在Z为‑NH‑的情况下)：‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NH‑、‑COO‑CH2‑(可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑、‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑、‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑、‑COCH2‑NH‑、‑COO‑(C1‑C6亚烷基)S‑、‑COO‑(C1‑C6亚烷基)NHCO(C1‑C6亚烷基)S‑；或[0911] 在D经由羟基共轭的情况下(例如在情况下Z为‑O‑)：‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NH‑、‑COO‑CH2‑(可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑、‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一或多个取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑、‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑、‑COCH2NH‑、‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)S‑及‑CONH‑(C1‑C6亚烷基)NHCO(C1‑C6亚烷基)S‑；
[0912] b为0或1，优选为1；
[0913] 其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C6亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C6亚烷基)‑[O‑(C2‑C6亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C6亚烷基)‑[O‑(C2‑C6亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至25的整数；
[0914] g为0或1；
[0915] D为式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、IH、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb、(IHa)或(IHb)的药物部分，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中：
[0916] 在式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、(IH)、(IHa)或(IHb)的化合物中R2为C(＝O)Ra；在式IG、IGa或IGb的化合物中R2为乙酰基，其中Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
[0917] 在式I、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb、(IH)、(IHa)或(IHb)的化合物中R3为氢或‑ORb基团；在式IA、IAa或IAb的化合物中R3为氢；在式IB、IBa或IBb的化合物中R3为‑ORb基团，其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
[0918] 包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为抗体或其抗原结合片段且其选自由以下组成的组：人类抗体、人类抗体的抗原结合片段、人类化抗体、人类化抗体的抗原结合片段、嵌合抗体、嵌合抗体的抗原结合片段、糖基化抗体及糖基化抗原结合片段；以及
[0919] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率且1至12范围内。
[0920] (b)选自式(IV)、(V)及(VI)的根据本发明的药物共轭物：
[0921]
[0922] 其中：
[0923] R19选自‑C1‑C8亚烷基‑、‑O‑(C1‑C8亚烷基)、‑C1‑C8亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、及‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C8亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
[0924] R30为‑C2‑C4亚烷基‑基团；
[0925] M选自由以下组成的组：‑C1‑C3亚烷基‑及‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑；
[0926] (AA)w具有式(II)
[0927]
[0928] 其中：
[0929] 波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或至药物部分(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或至连接子(右边的波浪线)的点；
[0930] R21在每次出现时选自由以下组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苯甲基、吲哚基甲基、‑(CH2)3NHCONH2、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2及‑(CH2)4NHC(＝NH)NH2；
[0931] w为0至6的整数；
[0932] X为选自由以下组成的组的延伸基团：
[0933] 在D经由氨基共轭的情况下(例如在Z为‑NH‑的情况下)：‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑、‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代、‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑、‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑、‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑及‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；或[0934] 在D经由羟基共轭的情况下(例如在情况下Z为‑O‑)：‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑、‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代、‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑、‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑、‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)S‑及‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；
[0935] b为0或1，优选为1；
[0936] 其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至10的整数；
[0937] g为0或1；
[0938] D为式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、IH、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb、(IHa)或(IHb)的药物部分，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中：
[0939] R2为乙酰基；
[0940] 在式I、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、ICb、IDb、IEb、IFb、IGb、(IH)、(IHa)或(IHb)的化合物中R3为氢或甲氧基；在式IA、IAa或IAb的化合物中R3为氢；在式IB、IBa或IBb的化合物中R3为甲氧基，优选R3为氢；
[0941] 包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段为免疫特异性结合于癌细胞抗原、病毒抗原、产生与自体免疫性疾病相关联的自体免疫抗体的细胞的抗原、微生物抗原的单株抗体，且优选为免疫特异性结合于癌细胞抗原的单株抗体；且
[0942] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑](其中L如式(IV)、(V)或(VI)中所定义)与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率且3至8范围内。
[0943] (c)选自式(IV)、(V)及(VI)的根据本发明的药物共轭物：
[0944]
[0945] 其中：
[0946] R19选自‑C1‑C6亚烷基‑、‑亚苯基‑C1‑C6亚烷基‑，其中所述亚苯基可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至碳链中的另一部分均可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代且R19优选为C1‑C6亚烷基；
[0947] R30为‑C2‑C4亚烷基‑基团；
[0948] M为‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑；
[0949] w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：
[0950]
[0951] 其中波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或至药物部分(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或至连接子(右边的波浪线)的点；
[0952] R22选自甲基、苯甲基、异丙基、仲丁基及吲哚基甲基；
[0953] R23选自甲基、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHCONH2及‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2；
[0954] X为选自由以下组成的组的延伸基团：‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑、‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代、‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基或氰基组成的组的取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑、‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑、‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑及‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；
[0955] b为0或1，优选为1；
[0956] 其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至5的整数；
[0957] g为0或1；
[0958] D为式I、IA、IC、ID、IE、IG、IH、Ia、IAa、ICa、IDa、IEa、IGa、Ib、IAb、ICb、IDb、IEb、IGb、(IHa)或(IHb)的药物部分，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中：
[0959] R1为CN；
[0960] R2为乙酰基：
[0961] R3为氢；
[0962] Y为‑NH‑或‑O‑；
[0963] Z为‑NH‑；
[0964] ·包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为选自由以下组成的组的单株抗体：阿昔单抗、阿仑单抗、阿奈妥单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、考妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地宁妥珠单抗、地诺单抗、德帕妥昔珠单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、因福土单抗、格巴妥木单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、英达妥昔单抗、英度妥单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、拉妥珠单抗、拉妥昔单抗、利法妥珠单抗、洛沃妥珠单抗、米拉组单抗、米妥昔单抗、那妥昔单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、匹那妥珠单抗、泊洛妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、沙西妥珠单抗、司妥昔单抗、司曲妥单抗、索非妥珠单抗、伐达妥昔单抗、沃瑟妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，其中所述抗体优选选自阿昔单抗、阿仑单抗、阿奈妥单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地宁妥珠单抗、地诺单抗、德帕妥昔珠单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、因福土单抗、格巴妥木单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、英达妥昔单抗、英度妥单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、拉妥珠单抗、拉妥昔单抗、米妥昔单抗、那妥昔单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、泊洛妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、萨西土珠单抗、司妥昔单抗、司曲妥单抗、伐达妥昔单抗、沃瑟妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，且更优选为阿昔单抗、阿仑单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐单抗、博纳吐单抗、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地诺单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、奥英妥珠单抗、伊匹单抗、拉贝珠单抗、耐昔妥珠单抗、尼妥珠单抗、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、雷莫芦单抗、洛伐妥珠单抗、司妥昔单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。其中，尤其优选为本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体，或其抗原结合片段或免疫活性部分；或所述抗体选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，尤其曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分；且
[0965] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑](其中L如式(IV)、(V)或(VI)中所定义)与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率且在3至5范围内。
[0966] (d)选自式(IV)、(V)及(VI)的根据本发明的药物共轭物：
[0967]
[0968] 其中：
[0969] R19为‑C2‑C6亚烷基‑；
[0970] R30为‑C2‑C4亚烷基‑；
[0971] M为‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑；
[0972] w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：
[0973]
[0974] 其中R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2，其中波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或至药物部分(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或至连接子(右边的波浪线)的点；
[0975] X为选自由以下组成的组的延伸基团：‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑、‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代、‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑、‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑、‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑及‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；
[0976] b为0或1，优选为1；其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至5的整数；
[0977] g为0或1；
[0978] D为选自以下的药物部分：
[0979] 及
[0980] 或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体；其中波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(T)g(若存在)、或至(L)的点；
[0981] 包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体，或其抗原结合片段或免疫活性部分，且更优选其选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，尤其曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分；且
[0982] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑](其中L如式(IV)、(V)或(VI)中所定义)与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率且在3至5范围内。
[0983] (e)选自式(IV)、(V)及(VI)的根据本发明的药物共轭物：
[0984]
[0985] 其中：
[0986] R19为‑C2‑C6亚烷基‑；
[0987] R30为‑C2‑C4亚烷基‑；
[0988] M为‑C1‑C3亚烷基‑(C5‑C7碳环基)‑；
[0989] w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：
[0990]
[0991] 其中R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2且波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或至药物部分(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或至连接子(右边的波浪线)的点；
[0992] X为选自由以下组成的组的延伸基团：‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑、‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代、‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑、‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑、‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑及‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；
[0993] b为0或1，优选为1；
[0994] 其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至5的整数；
[0995] g为0或1；
[0996] D为选自以下的药物部分：
[0997] 及
[0998] 或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体；其中波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(T)g(若存在)、或至(L)的点；
[0999] 包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体，或其抗原结合片段或免疫活性部分，且更优选其选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，尤其曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分；且
[1000] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑](其中L如式(IV)、(V)或(VI)中所定义)与包含至少一个抗原结合位点的部分的比率且在3至5范围内。
[1001] (f)式(IV)的根据本发明的药物共轭物：
[1002]
[1003] 其中：
[1004] R19为C2‑C5亚烷基‑；
[1005] w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：
[1006]
[1007] 其中R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2且波浪线表示共价附接至(X)b(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或至连接子(右边的波浪线)的点；且
[1008] X为‑COOCH2‑亚苯基‑NH基团；
[1009] b为1；
[1010] T为式‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]4‑NH‑的延伸基团；
[1011] g为0或1；
[1012] 或具有式(V)
[1013]
[1014] 其中M为‑甲基‑亚环己基‑；
[1015] b为1；
[1016] w为0；
[1017] X为选自以下的延伸基团：‑(CH2)3S‑及‑(CH2)3NHCO(CH2)2S‑
[1018] g为0；
[1019] 或具有式(VI)
[1020]
[1021] 其中R19为‑C2‑C5亚烷基‑；
[1022] R30为‑C3亚烷基‑；
[1023] w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：
[1024]
[1025] 其中R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2且波浪线表示共价附接至(X)b(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或至连接子(右边的波浪线)的点；且
[1026] X为‑COOCH2‑亚苯基‑NH基团；
[1027] b为1；
[1028] T为式‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]4‑NH‑的延伸基团；
[1029] g为0或1；
[1030] D为选自以下的药物部分：
[1031] 及
[1032] 或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体；其中波浪线表示共价附接至(X)b的点；
[1033] 包含至少一个抗原结合位点的部分Ab为本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体，或其抗原结合片段或免疫活性部分，且更优选其选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，尤其曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分；且
[1034] n为基团[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑](其中L如式中所定义(IV))与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率且在3至5范围内且优选为4。
[1035] g)选自由以下组成的组的根据本发明的抗体药物共轭物：
[1036]
[1037]
[1038] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且各 及 独立地选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体，或其抗原结合片段或免疫活性部分，且更优选其选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，尤其曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
[1039] 在一具体实例中，根据本发明的抗体药物共轭物排除：
[1040]
[1041] 更优选地，抗体药物共轭物选自由以下组成的组：
[1042]
[1043] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，更优选为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1044]
[1045] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1046]
[1047] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，更优选为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1048]
[1049] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1050]
[1051] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，且
[1052]
[1053] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，更优选为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
[1054] h)选自由以下组成的组的根据本发明的抗体药物共轭物：
[1055]
[1056]
[1057]
[1058] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且各 及 独立地选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体，或其抗原结合片段或免疫活性部分且更优选其选自曲妥珠单抗及抗
CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，尤其曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分；或
CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，尤其曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分；或
[1059]
[1060] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
[1061] 更优选地，抗体药物共轭物选自由以下组成的组：
[1062]
[1063] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
[1064]
[1065] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1066]
[1067] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1068]
[1069] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1070]
[1071] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1072]
[1073] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1074]
[1075] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1076]
[1077] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1078]
[1079] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1080]
[1081] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1082]
[1083] 其中n为2至6，更优选为3、4或5且 为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分，
[1084] 尤其优选地，根据本发明的抗体药物共轭物应呈分离或纯化形式。
[1085] 根据本发明的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1或式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的优选化合物包括：
[1086] ·式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1或式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，其中D、X、AA、T、L1、b、g及w各如本发明文中所定义；但进一步，若化合物为式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，则b+w+g≠0。
[1087] ·根据本发明的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1或式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，其中：
[1088] L1为下式连接子：
[1089]
[1090] 其中：
[1091] 波浪线表示共价附接至(T)g(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(X)b(若存在)、或至D的点；
[1092] R19选自‑C1‑C12亚烷基‑、‑O‑(C1‑C12亚烷基)、呈单环或多环的可视需要经一或多个取代基Rx取代的‑C6‑C12亚芳基、‑C1‑C12亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑、其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C5‑C12杂环基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑C1‑C12亚烷基‑(C5‑C12杂环基)‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(C5‑C12杂环基)‑C1‑C12亚烷基‑，其中所述杂环基可为具有一或多个环且在所述环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团视需要经一或多个取代基Rx取代、‑(OCH2CH2)r‑及‑CH2‑(OCH2CH2)r‑，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
[1093] r为在1‑6范围内的整数；且
[1094] D、Rx、X、AA、T、b、g及w各如本发明中所定义；但其中若化合物为式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，则b+w+g≠0。
[1095] ·根据本发明的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1或式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，其中：
[1096] L1为下式连接子：
[1097]
[1098] 其中：
[1099] 波浪线表示共价附接至(T)g(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(X)b(若存在)、或至D的点；
[1100] R19选自‑C1‑C8亚烷基‑、‑O‑(C1‑C8亚烷基)、‑C1‑C8亚烷基‑C6‑C12亚芳基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代、及‑C6‑C12亚芳基‑C1‑C8亚烷基‑，其中所述亚芳基呈单环或多环，其可视需要经一或多个取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至另一部分，碳链均可视需要经一或多个取代基Rx取代；
[1101] (AA)w具有式(II)：
[1102]
[1103] 其中波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或至D(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或L1或至氢原子(右边的波浪线)的点；
[1104] 其中R21在每次出现时选自由以下组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苯甲基、吲哚基甲基、‑(CH2)3NHCONH2、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2及‑(CH2)4NHC‑(＝NH)NH2且w为0至6的整数；
[1105] X为选自由以下组成的组的延伸基团：
[1106] 在D经由氨基共轭的情况下(例如在Z为‑NH‑的情况下)：‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑、‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代、‑COO‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑、‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑、‑COO‑(C2‑C4亚烷基)S‑及‑COO‑(C2‑C4亚烷基)‑NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑或[1107] 在D经由羟基共轭的情况下(例如在情况下Z为‑O‑)：‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑、‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑，其中所述亚苯基可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代、‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NH‑COO‑CH2‑(可视需要经一至四个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代的亚苯基)‑NH‑、‑COCH2NH‑COCH2‑NH‑、‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)S‑及‑CONH‑(C2‑C4亚烷基)NHCO(C1‑C3亚烷基)S‑；
[1108] T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至10的整数；
[1109] b为0或1；
[1110] g为0或1；
[1111] 其中若化合物为式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，则b+w+g≠0；且
[1112] D为式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb的药物部分；且经由羟基或氨基共价附接；或
[1113] 为式(IHa)或式(IHb)的药物部分，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体，其中：
[1114]
[1115] 其中(IHa)及(IHb)的波浪线表示共价附接至(X)b(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(T)g(若存在)、或至L1的点；
[1116] R1为‑OH或‑CN；
[1117] R2为‑C(＝O)Ra基团，其中Ra选自氢及经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx；
[1118] R3为氢或‑ORb基团，其中Rb为经取代或未经取代的C1‑C6烷基，其中视需要选用的取代基为一或多个取代基Rx。
[1119] Y为‑NH‑或‑O‑；且
[1120] Z为‑NH‑或‑O‑。
[1121] ·根据本发明的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1或式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，其中：
[1122] L1为下式基团：
[1123]
[1124] 其中：
[1125] 波浪线表示共价附接至(T)g(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(X)b(若存在)、或至D的点；
[1126] R19选自‑C1‑C6亚烷基‑、亚苯基‑C1‑C6亚烷基‑，其中所述亚苯基可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代，其中以上各亚烷基取代基无论单独还是附接至碳链中的另一部分均可视需要经一或多个选自由具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基及氰基组成的组的取代基Rx取代且R19优选为C1‑C6亚烷基；
[1127] w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：
[1128]
[1129] 其中波浪线表示共价附接至X(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或L1或至氢原子(右边的波浪线)的点；
[1130] R22选自甲基、苯甲基、异丙基、仲丁基及吲哚基甲基；
[1131] R23选自甲基、‑(CH2)4NH2、‑(CH2)3NHCONH2及‑(CH2)3NHC(＝NH)NH2；
[1132] X为选自以下的延伸基团：
[1133] 在D经由氨基共轭的情况下(例如在Z为‑NH‑的情况下)：‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑、‑COO(CH2)3NHCOO‑CH2‑亚苯基‑NH、‑COO‑(CH2)3)NH‑、‑COO(CH2)3‑S‑及‑COO‑(CH2)3NHCO‑(CH2)2S‑或
[1134] 在D经由羟基共轭的情况下(例如在情况下Z为‑O‑)：‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑、‑CONH(CH2)3NHCOOCH2‑亚苯基‑NH‑、‑CONH(CH2)3NH‑、‑CONH(CH2)3‑S‑及‑CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S‑。
[1135] 其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至5的整数；
[1136] b为0或1；
[1137] g为0或1；
[1138] 其中若化合物为式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，则b+w+g≠0；且
[1139] D为式I、IA、IB、IC、ID、IE、IF、IG、Ia、IAa、IBa、ICa、IDa、IEa、IFa、IGa、Ib、IAb、IBb、ICb、IDb、IEb、IFb及IGb的药物部分；且经由羟基或氨基共价附接；或
[1140] 为式(IHa)或式(IHb)的药物部分，或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体：
[1141]
[1142] 其中(IHa)或式(IHb)的波浪线表示共价附接点；
[1143] R1为‑CN或‑OH；
[1144] R2为乙酰基；
[1145] R3为氢或甲氧基，优选氢；
[1146] Y为‑NH‑或‑O‑；且
[1147] Z为‑NH‑或‑O‑。
[1148] ·根据本发明的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1或式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，其中：
[1149] L1为下式连接子：
[1150]
[1151] 其中：
[1152] 波浪线表示共价附接至(T)g(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(X)b(若存在)、或至D的点；
[1153] R19为‑C2‑C6亚烷基‑；
[1154] w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：
[1155]
[1156] R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2，其中波浪线表示共价附接至X(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或L1或至氢原子(右边的波浪线)的点；
[1157] X为选自以下的延伸基团：‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑、‑COO(CH2)3NHCOO‑CH2‑亚苯基‑NH、‑COO‑(CH2)3)NH‑、‑COO(CH2)3‑S‑及‑COO‑(CH2)3NHCO‑(CH2)2S‑；
[1158] 其中T为选自以下的延伸基团：‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑NH‑、‑CO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑及‑COO‑(C1‑C4亚烷基)‑[O‑(C2‑C4亚烷基)]j‑NH‑，其中j为1至5的整数；
[1159] b为0或1；
[1160] g为0或1；
[1161] 其中若化合物为式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，则b+w+g≠0；且
[1162] D为选自以下的药物部分：
[1163] 及
[1164] 或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体；其中波浪线表示共价附接点。
[1165] ·根据本发明的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1或式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，其中：
[1166] L1为下式基团：
[1167]
[1168] 其中：
[1169] 波浪线表示共价附接至(T)g(若存在)、或(AA)w(若存在)、或至(X)b(若存在)、或至D的点；
[1170] R19为‑C2‑C5亚烷基‑；
[1171] w为0或2且在w为2的情况下，(AA)w具有式(III)：
[1172]
[1173] 其中R22为异丙基，R23选自甲基及‑(CH2)3NHCONH2，其中波浪线表示共价附接至X(左边的波浪线)及至(T)g(若存在)、或L1或至氢原子(右边的波浪线)的点；
[1174] X为‑COO‑CH2‑亚苯基‑NH‑基团；
[1175] T为‑CO‑(CH2)2‑[O‑(CH2)2]4‑NH‑基团；
[1176] b为0或1；
[1177] g为0或1；
[1178] 其中若化合物为式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物，则b+w+g≠0；且
[1179] D为选自以下的药物部分：
[1180] 及
[1181] 或其医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体；其中波浪线表示共价附接点。
[1182] ·选自以下的式D‑X‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物：
[1183]
[1184]
[1185] 及
[1186] ·选自以下的式D‑X‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物：
[1187]
[1188]及
[1189] 本发明的药物共轭物中的术语“医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、互变异构体或立体异构体”是指在投予患者时能够提供如本文所述的化合物的任何医药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、水合物或立体异构体形式或任何其他化合物，无论直接或间接。然而，应了解，非医药学上可接受的盐也在本发明的范畴内，因为所述盐适用于制备医药学上可接受的盐。盐、前药及衍生物的制备可通过本技术领域中已知的方法进行。
[1190] 举例而言，本文所提供的化合物的医药学上可接受的盐由含有碱性或酸性部分的母体化合物通过常规的化学方法合成。一般而言，此类盐例如通过使这些化合物的自由酸或碱形式与化学计算量的适当碱或酸在水中或有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备。一般而言，优选非水性介质，如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。酸加成盐的实例包括无机酸加成盐，诸如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐；及有机酸加成盐，诸如乙酸盐、三氟乙酸盐、顺丁烯二酸盐、反丁烯二酸盐、柠檬酸盐、乙二酸盐、丁二酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、杏仁酸盐、甲烷磺酸盐及对甲苯磺酸盐。碱加成盐的实例包括无机盐，诸如钠盐、钾盐、钙盐及铵盐；及有机碱盐，诸如乙二胺、乙醇胺、N，N‑二亚烷基乙醇胺、三乙醇胺及碱性氨基酸盐。
[1191] 本发明的药物共轭物可呈结晶形式，呈自由化合物或呈溶剂合物(例如水合物)，且意欲两种形式在本发明的范畴内。溶剂化方法一般为本技术领域中已知的。
[1192] 作为本发明的药物共轭物的前药的任何化合物在本发明的范畴及精神内。术语“前药”以其最广泛的含义使用且涵盖在活体内转化为本发明化合物的那些衍生物。本领域技术人员容易想到此类衍生物，且包括例如其中自由羟基转化成酯衍生物的化合物。许多合适前药为本领域技术人员所熟知且可见于例如Burger“Medicinal Chemistry and Drug Discovery第6版(Donald J.Abraham编辑，2001，Wiley)及“Design and Applications of Prodrugs”(H.Bundgaard编辑，1985，Harwood Academic Publishers)，其内容以引用的方式并入本文中。
[1193] 在关于本发明化合物时，药理学上可接受的酯不特别受限，且可由本领域技术人员选择。在所述酯的情况下，优选此类酯可通过诸如在活体内水解的生物过程而裂解。构成酯的基团(当酯表示为‑COOR时，基团展示为R)可为例如C1‑C4烷氧基C1‑C4烷基，诸如甲氧基乙基、1‑乙氧基乙基、1‑甲基‑1‑甲氧基乙基、1‑(异丙氧基)乙基、2‑甲氧基乙基、2‑乙氧基乙基、1，1‑二甲基‑1‑甲氧基甲基、乙氧基甲基、丙氧基甲基、异丙氧基甲基、丁氧基甲基或叔丁氧基甲基；C1‑C4烷氧基化C1‑C4烷氧基C1‑C4烷基，诸如2‑甲氧基乙氧基甲基；C6‑C10芳基氧基C1‑C4烷基，诸如苯氧基甲基；卤化C1‑C4烷氧基C1‑C4烷基，诸如2，2，2‑三氯乙氧基甲基或双(2‑氯乙氧基)甲基；C1‑C4烷氧基羰基C1‑C4烷基，诸如甲氧基羰基甲基；氰基C1‑C4烷基，诸如氰基甲基或2‑氰基乙基；C1‑C4烷基硫甲基，诸如甲基硫甲基或乙基硫甲基；C6‑C10芳基硫甲基，诸如苯基硫甲基或萘基硫甲基；C1‑C4烷基磺酰基C1‑C4低碳烷基，其可视需要经卤素原子取代，诸如2‑甲烷磺酰基乙基或2‑三氟甲烷磺酰基乙基；C6‑C10芳基磺酰基C1‑C4烷基，诸如2‑苯磺酰基乙基或2‑甲苯磺酰基乙基；C1‑C7脂族酰氧基C1‑C4烷基，诸如甲酰氧基甲基、乙酰氧基甲基、丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、特戊酰氧基甲基、戊酰氧基甲基、异戊酰氧基甲基、己酰氧基甲基、1‑甲酰氧基乙基、1‑乙酰氧基乙基、1‑丙酰氧基乙基、1‑丁酰氧基乙基、1‑特戊酰氧基乙基、1‑戊酰氧基乙基、1‑异戊酰氧基乙基、1‑己酰氧基乙基、2‑甲酰氧基乙基、2‑乙酰氧基乙基、2‑丙酰氧基乙基、2‑丁酰氧基乙基、2‑特戊酰氧基乙基、2‑戊酰氧基乙基、2‑异戊酰氧基乙基、2‑己酰氧基乙基、1‑甲酰氧基丙基、1‑乙酰氧基丙基、1‑丙酰氧基丙基、1‑丁酰氧基丙基、1‑特戊酰氧基丙基、1‑戊酰氧基丙基、1‑异戊酰氧基丙基、1‑己酰氧基丙基、1‑乙酰氧基丁基、1‑丙酰氧基丁基、1‑丁酰氧基丁基、1‑特戊酰氧基丁基、1‑乙酰氧基戊基、1‑丙酰氧基戊基、1‑丁酰氧基戊基、1‑特戊酰氧基戊基或1‑特戊酰氧基己基；C5‑C6环烷基羰氧基C1‑C4烷基，诸如环戊基羰氧基甲基、环己基羰氧基甲基、1‑环戊基羰氧基乙基、1‑环己基羰氧基乙基、1‑环戊基羰氧基丙基、1‑环己基羰氧基丙基、1‑环戊基羰氧基丁基或1‑环己基羰氧基丁基；C6‑C10芳基羰氧基C1‑C4烷基，诸如苯甲酰氧基甲基；C1‑C6烷氧基羰氧基C1‑C4烷基，诸如甲氧基羰氧基甲基、1‑(甲氧基羰氧基)乙基、1‑(甲氧基羰氧基)丙基、1‑(甲氧基羰氧基)丁基、1‑(甲氧基羰氧基)戊基、1‑(甲氧基羰氧基)己基、乙氧基羰氧基甲基、1‑(乙氧基羰氧基)乙基、1‑(乙氧基羰氧基)丙基、1‑(乙氧基羰氧基)丁基、1‑(乙氧基羰氧基)戊基、1‑(乙氧基羰氧基)己基、丙氧基羰氧基甲基、1‑(丙氧基羰氧基)乙基、1‑(丙氧基羰氧基)丙基、1‑(丙氧基羰氧基)丁基、异丙氧基羰氧基甲基、1‑(异丙氧基羰氧基)乙基、1‑(异丙氧基羰氧基)丁基、丁氧基羰氧基甲基、1‑(丁氧基羰氧基)乙基、1‑(丁氧基羰氧基)丙基、1‑(丁氧基羰氧基)丁基、异丁氧基羰氧基甲基、1‑(异丁氧基羰氧基)乙基、1‑(异丁氧基羰氧基)丙基、1‑(异丁氧基羰氧基)丁基、叔丁氧基羰氧基甲基、1‑(叔丁氧基羰氧基)乙基、戊氧基羰氧基甲基、1‑(戊氧基羰氧基)乙基、1‑(戊氧基羰氧基)丙基、己氧基羰氧基甲基、1‑(己氧基羰氧基)乙基或1‑(己氧基羰氧基)丙基；C5‑C6环烷基氧基羰氧基C1‑C4烷基，诸如环戊基氧基羰氧基甲基、1‑(环戊基氧基羰氧基)乙基、1‑(环戊基氧基羰氧基)丙基、1‑(环戊基氧基羰氧基)丁基、环己基氧基羰氧基甲基、1‑(环己基氧基羰氧基)乙基、1‑(环己基氧基羰氧基)丙基或1‑(环己基氧基羰氧基)丁基；[5‑(C1‑C4烷基)‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基]甲基，诸如(5‑甲基‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基)甲基、(5‑乙基‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基)甲基、(5‑丙基‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基)甲基、(5‑异丙基‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基)甲基或(5‑丁基‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基)甲基；[5‑(苯基，其可视需要经C1‑C4烷基、C1‑C4烷氧基或卤素原子取代)‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基]甲基，诸如(5‑苯基‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基)甲基、[5‑(4‑甲基苯基)‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基]甲基、[5‑(4‑甲氧基苯基)‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基]甲基、[5‑(4‑氟苯基)‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基]甲基或[5‑(4‑氯苯基)‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基]甲基；或酞基，其可视需要经C1‑C4烷基或C1‑C4烷氧基(s)取代，诸如酞基、二甲基酞基或二甲氧基酞基，且优选为特戊酰氧基甲基、酞基或(5‑甲基‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基)甲基且更优选为(5‑甲基‑2‑氧代‑1，3‑间二氧杂环戊烯‑4‑基)甲基。
[1194] 本文所提及的任何化合物意欲代表此类特定化合物以及某些变体或形式。具体地，本文所提及的化合物可具有不对称中心且因此以不同对映异构形式存在。本文所提及的化合物的所有光学异构体及立体异构体及其混合物视为在本发明的范畴内。因此，本文所提及的任何给定化合物意欲表示外消旋体、一或多种对映异构形式、一或多种非对映异构形式、一或多种阻旋异构形式及其混合物中的任一者。特定而言，式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)]n‑Ab的药物共轭物及式DX‑(AA)w‑(T)g‑L1或DX‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物可包括对映异构体或非对映异构体，视其不对称性而定。关于双键的立体异构也是可能的，因此在一些情况下，分子可以(E)‑异构体或(Z)‑异构体的形式存在。若分子含有几个双键，则每个双键将具有其自身立体异构，可与分子其他双键的立体异构相同或不同。单一异构体及异构体的混合物在本发明的范畴内。
[1195] 此外，本文所提及的化合物可以几何异构体(也即，顺式及反式异构体)、互变异构体或阻旋异构体形式存在。具体而言，术语互变异构体是指平衡存在且容易自一种异构形式转化成另一种异构形式的化合物的两种或更多种结构异构体中的一者。常见互变异构体对为胺‑亚胺、酰胺‑酰亚胺、酮‑烯醇、内酰胺‑内酰亚胺等。另外，当介质中存在水合物、溶剂合物及多晶形物及其混合物时本文所提及的任何化合物意欲代表此类形式。另外，本文所提及的化合物可以经同位素标记的形式存在。本文所提及的化合物的所有几何异构体、互变异构体、阻旋异构体、水合物、溶剂合物、多晶形物及同位素标记形式及其混合物视为在本发明的范畴内。
[1196] 本文所公开的化合物的保护形式视为在本发明的范畴内。合适保护基是本领域技术人员所熟知的。关于有机化学中的保护基的综述由Wuts，PGM及Greene TW在Protecting Groups in Organic Synthesis，第4版Wiley‑Interscience及Kocienski PJ在Protecting Groups，第3版Georg Thieme Verlag中提供。这些参考文献提供关于OH、氨基及SH基团的保护基的章节。所有这些参考文献以全文引用的方式并入。
[1197] 在本发明的范畴内，OH保护基定义为经由形成合适的经保护的OH基团来保护OH所产生的O‑键结部分。此类经保护的OH基团的实例包括醚、硅烷基醚、酯、磺酸酯、次磺酸酯及亚磺酸酯、碳酸酯及氨基甲酸酯。在醚的情况下，OH保护基可选自甲基、甲氧基甲基、甲基硫甲基、(苯基二甲基硅烷基)甲氧基甲基、苯甲基氧基甲基、对甲氧基苯甲基氧基甲基、[(3，4‑二甲氧基苯甲基)氧基]甲基、对硝基苯甲基氧基甲基、邻硝基苯甲基氧基甲基、[(R)‑1‑(2‑硝基苯基)乙氧基]甲基、(4‑甲氧基苯氧基)甲基、愈创木酚甲基、[(对苯基苯基)氧基]甲基、叔丁氧基甲基、4‑戊烯氧基甲基、硅氧基甲基、2‑甲氧基乙氧基甲基、2‑氰基乙氧基甲基、双(2‑氯乙氧基)甲基、2，2，2‑三氯乙氧基甲基、2‑(三甲基硅烷基)乙氧基甲基、薄荷氧基甲基、O‑双(2‑乙酰氧基‑乙氧基)甲基、四氢哌喃基、氟四氢哌喃基、3‑溴四氢哌喃基、四氢硫哌喃基、1‑甲氧基环己基、4‑甲氧基四氢哌喃基、4‑甲氧基‑四氢硫哌喃基、4‑甲氧基四氢硫哌喃基S，S‑二氧化物、1‑[(2‑氯‑4‑甲基)‑苯基]‑4‑甲氧基哌啶‑4‑基、1‑(2‑氟苯基)‑
4‑甲氧基哌啶‑4‑基、1‑(4‑氯苯基)‑4‑甲氧基哌啶‑4‑基、1，4‑二恶烷‑2‑基、四氢呋喃基、四氢硫呋喃基、2，3，3a，4，5，6，7，7a‑八氢‑7，8，8‑三甲基‑4，7‑甲桥苯并呋喃‑2‑基、1‑乙氧基乙基、1‑(2‑氯乙氧基)乙基、2‑羟基乙基、2‑溴乙基、1‑[2‑(三甲基硅烷基)乙氧基]乙基、
1‑甲基‑1‑甲氧基乙基、1‑甲基‑1‑苯甲基氧基乙基、1‑甲基‑1‑苯甲基氧基‑2‑氟乙基、1‑甲基‑1‑苯氧基乙基、2，2，2‑三氯乙基、1，1‑双大茴香基‑2，2，2‑三氯乙基、1，1，1，3，3，3‑六氟‑2‑苯基异丙基、1‑(2‑氰基乙氧基)乙基、2‑三甲基硅烷基乙基、2‑(苯甲基硫基)乙基、2‑(苯基硒基)乙基、叔丁基、环己基、1‑甲基‑1'‑环丙基甲基、烯丙基、异戊二烯基、肉桂基、2‑苯烯丙基、炔丙基、对氯苯基、对甲氧基苯基、对硝基苯基、2，4‑二硝基苯基、2，3，5，6‑四氟‑
4‑(三氟甲基)苯基、苯甲基、对甲氧基苯甲基、3，4‑二甲氧基苯甲基、2，6‑二甲氧基苯甲基、邻硝基苯甲基、对硝基苯甲基、戊二烯基硝基苯甲基、戊二烯基硝基胡椒基、卤基苯甲基、2，
6‑二氯苯甲基、2，4‑二氯苯甲基、2，6‑二氟苯甲基、对氰基苯甲基、氟苯甲基、4‑氟烷氧基苯甲基、三甲基硅烷基二甲苯基、对苯基苯甲基、2‑苯基‑2‑丙基、对酰基氨基苯甲基、对叠氮基苯甲基、4‑叠氮基‑3‑氯苯甲基、2‑三氟甲基苯甲基、4‑三氟甲基苯甲基、对(甲基亚磺酰基)苯甲基、对硅杂环丁烷基苯甲基、4‑乙酰氧基苯甲基、4‑(2‑三甲基硅烷基)乙氧基甲氧基苯甲基、2‑萘基甲基、2‑吡啶甲基、4‑吡啶甲基、3‑甲基‑2‑吡啶甲基N‑氧化物、2‑喹啉基甲基、6‑甲氧基‑2‑(4‑甲基苯基)‑4‑喹啉甲基、1‑芘基甲基、二苯基甲基、4‑甲氧基二苯基甲基、4‑苯基二苯基甲基、p，p'‑二硝基二苯甲基、5‑二苯并环庚基、三苯基甲基、三(4‑叔丁基苯基)甲基、α‑萘基二苯基甲基、对甲氧基苯基二苯基甲基、二(对甲氧基苯基)苯基‑甲基、三(对甲氧基苯基)甲基、4‑(4'‑溴苯甲酰甲基氧基)苯基二苯基甲基、4，4'，4”‑三(4，5‑二氯邻苯二酰亚胺基苯基)甲基、4，4'，4”‑三(乙酰丙酰基氧基苯基)甲基、4，4'，4”‑三(苯甲酰氧基苯基)甲基、4，4'‑二甲氧基‑3”‑[N‑(咪唑基甲基)]三苯甲基、4，4'‑二甲氧基‑3”‑[N‑(咪唑基乙基)氨甲酰基]三苯甲基、双(4‑甲氧基苯基)‑1'‑芘基甲基、4‑(17‑四苯并[a，c，g，i]芴基甲基)‑4，4”‑二甲氧基三苯甲基、9‑蒽基、9‑(9‑苯基)二苯并哌喃基、9‑苯基噻吨酮基、9‑(9‑苯基‑10‑氧代)蒽基、1，3‑苯并二硫杂环戊烷‑2‑基、4，5‑双(乙氧基羰基)‑[1，3]‑二氧杂环戊烷‑2‑基、苯并异噻唑基S，S‑二氧化物。在硅烷基醚的情况下，OH保护基可选自三甲基硅烷基、三乙基硅烷基、三异丙基硅烷基、二甲基异丙基硅烷基、二乙基异丙基硅烷基、二甲基己基硅烷基、2‑降冰片基二甲基硅烷基、叔丁基二甲基硅烷基、叔丁基二苯基硅烷基、三苯甲基硅烷基、三‑对二甲苯基硅烷基、三苯基硅烷基、二苯基甲基硅烷基、二叔丁基甲基硅烷基、双(叔丁基)‑1‑芘基甲氧基硅烷基、三(三甲基硅烷基)硅烷基、(2‑羟基苯乙烯基)二甲基硅烷基、(2‑羟基苯乙烯基)二异丙基硅烷基、叔丁基甲氧基苯基硅烷基、叔丁氧基二苯基硅烷基、1，1，3，3‑四异丙基‑3‑[2‑(三苯基甲氧基)乙氧基]二硅氧烷‑
1‑基及氟硅烷基。在酯的情况下，OH保护基连同其附接的未保护OH的氧原子一起形成可选自以下的酯：甲酸酯、苯甲酰基甲酸酯、乙酸酯、氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三氯乙酰胺酯、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、对氯苯氧基乙酸酯、苯基乙酸酯、二苯基乙酸酯、3‑苯基丙酸酯、双氟链型丙酰基、4‑戊烯酸酯、4‑氧代戊酸酯、4，4‑(亚乙基二硫基)戊酸酯、5[3‑双(4‑甲氧基苯基)羟基甲基苯氧基]乙酰丙烯酯、特戊酸酯、1‑金刚烷酸酯、巴豆酸酯、4‑甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸酯、对苯基苯甲酸酯、2，4，6‑三甲基苯甲酸酯、4‑溴苯甲酸酯、2，5‑二氟苯甲酸酯、对硝基苯甲酸酯、吡啶甲酸酯、烟酸酯、2‑(叠氮基甲基)苯甲酸酯、4‑叠氮基‑丁酸酯、(2‑叠氮基甲基)苯基乙酸酯、2‑{[(三苯甲基硫基)氧基]甲基}苯甲酸酯、2‑{[(4‑甲氧基三苯甲基硫基)氧基]甲基}苯甲酸酯、2‑{[甲基(三苯甲基硫基)氨基]甲基}苯甲酸酯、2‑{{[(4‑甲氧基三苯甲基)硫基]甲基氨基}甲基}苯甲酸酯、2‑(烯丙基氧基)苯基乙酸酯、2‑(异戊二烯基氧基甲基)苯甲酸酯、6‑(乙酰丙基氧基甲基)‑3‑甲氧基‑2‑硝基苯甲酸酯、6‑(乙酰丙基氧基甲基)‑3‑甲氧基‑4‑硝基苯甲酸酯、4‑苯甲基氧基丁酸酯、4‑三烷基硅烷基氧基‑丁酸酯、4‑乙酰氧基‑2，2‑二甲基丁酸酯、2，2‑二甲基‑4‑戊烯酸酯、2‑碘苯甲酸酯、4‑硝基‑4‑甲基戊酸酯、间(二溴甲基)苯甲酸酯、2‑甲酰基苯磺酸酯、4‑(甲基硫基‑甲氧基)丁酸酯、2‑(甲基硫基甲氧基甲基)苯甲酸酯、
2‑(氯乙酰氧基甲基)苯甲酸酯、2‑[(2‑氯乙酰氧基)乙基]苯甲酸酯、2‑[2‑(苯甲基氧基)乙基]苯甲酸酯、2‑[2‑(4‑甲氧基苯甲基‑氧基)乙基]苯甲酸酯、2，6‑二氯‑4‑甲基苯氧基乙酸酯、2，6‑二氯‑4‑(1，1，3，3‑四甲基丁基)苯氧基乙酸酯、2，4‑双(1，1‑二甲基丙基)苯氧基乙酸酯、氯二苯基‑乙酸酯、异丁酸酯、单琥珀酸酯、(E)‑2‑甲基‑2‑丁烯酸酯、间(甲氧基羰基)苯甲酸酯、α‑萘甲酸酯、硝酸酯、烷基N，N，N'，N'‑四甲基磷二酰胺酸酯及2‑氯苯甲酸酯。在磺酸酯、次磺酸酯及亚磺酸酯的情况下，OH保护基连同其附接的未保护OH的氧原子一起形成可选自以下的磺酸酯、次磺酸酯及亚磺酸酯：硫酸酯、烯丙基磺酸酯、甲烷磺酸酯、苯甲基磺酸酯、甲苯磺酸酯、2‑[(4‑硝基苯基)乙基]磺酸酯、2‑三氟甲基苯磺酸酯、4‑单甲氧基三苯甲基次磺酸酯、2，4‑二硝基苯基次磺酸烷酯、2，2，5，5‑四甲基吡咯啶‑3‑酮‑1‑亚磺酸酯及二甲基膦基亚硫酰基。在碳酸酯的情况下，OH保护基连同其附接的未保护OH的氧原子一起形成可选自以下的碳酸酯：碳酸甲酯、碳酸甲氧基甲酯、碳酸9‑芴基甲酯、碳酸乙酯、碳酸溴乙酯、碳酸2‑(甲基硫基甲氧基)乙酯、碳酸2，2，2‑三氯乙酯、碳酸1，1‑二甲基‑2，2，2‑三氯乙酯、碳酸2‑(三甲基硅烷基)乙酯、碳酸2‑[二甲基(2‑萘基甲基)硅烷基]乙酯、碳酸2‑(苯基磺酰基)乙酯、碳酸2‑(三苯基磷基)乙酯、顺‑[4‑[[(甲氧基三苯甲基)次磺酰基]氧基]四氢呋喃‑3‑基]氧基碳酸酯、碳酸异丁酯、碳酸叔丁酯、碳酸乙烯酯、碳酸烯丙酯、碳酸肉桂酯、碳酸炔丙酯、碳酸对氯苯酯、碳酸对硝基苯酯、碳酸4‑乙氧基‑1‑萘酯、碳酸6‑溴‑7‑羟基香豆素‑4‑基甲酯、碳酸苯甲酯、碳酸邻硝基苯甲酯、碳酸对硝基苯甲酯、碳酸对甲氧基苯甲酯、碳酸3，4‑二甲氧基苯甲酯、碳酸蒽醌‑2‑基甲酯、碳酸2‑丹磺酰基乙酯、碳酸2‑(4‑硝基苯基)乙酯、碳酸2‑(2，4‑二硝基苯基)乙酯、碳酸2‑(2‑硝基苯基)丙酯、碳酸2‑(3，4‑亚甲基二氧基‑6‑硝基苯基)丙酯、碳酸2‑氰基‑1‑苯基乙酯、碳酸2‑(2‑吡啶基)氨基‑1‑苯基乙酯、碳酸2‑[N‑甲基‑N‑(2‑吡啶基)]氨基‑1‑苯基乙酯、碳酸苯甲酰甲酯、碳酸3'，5'‑二甲氧基安息香酯、二硫基碳酸甲酯及硫基碳酸S‑苯甲酯。且在氨基甲酸酯的情况下，OH保护基连同其附接的未保护OH的氧原子一起形成可选自以下的氨基甲酸酯：硫基氨基甲酸二甲
酯、氨基甲酸N‑苯酯及氨基甲酸N‑甲基‑N‑(邻硝基苯基)酯。
4‑甲氧基哌啶‑4‑基、1‑(4‑氯苯基)‑4‑甲氧基哌啶‑4‑基、1，4‑二恶烷‑2‑基、四氢呋喃基、四氢硫呋喃基、2，3，3a，4，5，6，7，7a‑八氢‑7，8，8‑三甲基‑4，7‑甲桥苯并呋喃‑2‑基、1‑乙氧基乙基、1‑(2‑氯乙氧基)乙基、2‑羟基乙基、2‑溴乙基、1‑[2‑(三甲基硅烷基)乙氧基]乙基、
1‑甲基‑1‑甲氧基乙基、1‑甲基‑1‑苯甲基氧基乙基、1‑甲基‑1‑苯甲基氧基‑2‑氟乙基、1‑甲基‑1‑苯氧基乙基、2，2，2‑三氯乙基、1，1‑双大茴香基‑2，2，2‑三氯乙基、1，1，1，3，3，3‑六氟‑2‑苯基异丙基、1‑(2‑氰基乙氧基)乙基、2‑三甲基硅烷基乙基、2‑(苯甲基硫基)乙基、2‑(苯基硒基)乙基、叔丁基、环己基、1‑甲基‑1'‑环丙基甲基、烯丙基、异戊二烯基、肉桂基、2‑苯烯丙基、炔丙基、对氯苯基、对甲氧基苯基、对硝基苯基、2，4‑二硝基苯基、2，3，5，6‑四氟‑
4‑(三氟甲基)苯基、苯甲基、对甲氧基苯甲基、3，4‑二甲氧基苯甲基、2，6‑二甲氧基苯甲基、邻硝基苯甲基、对硝基苯甲基、戊二烯基硝基苯甲基、戊二烯基硝基胡椒基、卤基苯甲基、2，
6‑二氯苯甲基、2，4‑二氯苯甲基、2，6‑二氟苯甲基、对氰基苯甲基、氟苯甲基、4‑氟烷氧基苯甲基、三甲基硅烷基二甲苯基、对苯基苯甲基、2‑苯基‑2‑丙基、对酰基氨基苯甲基、对叠氮基苯甲基、4‑叠氮基‑3‑氯苯甲基、2‑三氟甲基苯甲基、4‑三氟甲基苯甲基、对(甲基亚磺酰基)苯甲基、对硅杂环丁烷基苯甲基、4‑乙酰氧基苯甲基、4‑(2‑三甲基硅烷基)乙氧基甲氧基苯甲基、2‑萘基甲基、2‑吡啶甲基、4‑吡啶甲基、3‑甲基‑2‑吡啶甲基N‑氧化物、2‑喹啉基甲基、6‑甲氧基‑2‑(4‑甲基苯基)‑4‑喹啉甲基、1‑芘基甲基、二苯基甲基、4‑甲氧基二苯基甲基、4‑苯基二苯基甲基、p，p'‑二硝基二苯甲基、5‑二苯并环庚基、三苯基甲基、三(4‑叔丁基苯基)甲基、α‑萘基二苯基甲基、对甲氧基苯基二苯基甲基、二(对甲氧基苯基)苯基‑甲基、三(对甲氧基苯基)甲基、4‑(4'‑溴苯甲酰甲基氧基)苯基二苯基甲基、4，4'，4”‑三(4，5‑二氯邻苯二酰亚胺基苯基)甲基、4，4'，4”‑三(乙酰丙酰基氧基苯基)甲基、4，4'，4”‑三(苯甲酰氧基苯基)甲基、4，4'‑二甲氧基‑3”‑[N‑(咪唑基甲基)]三苯甲基、4，4'‑二甲氧基‑3”‑[N‑(咪唑基乙基)氨甲酰基]三苯甲基、双(4‑甲氧基苯基)‑1'‑芘基甲基、4‑(17‑四苯并[a，c，g，i]芴基甲基)‑4，4”‑二甲氧基三苯甲基、9‑蒽基、9‑(9‑苯基)二苯并哌喃基、9‑苯基噻吨酮基、9‑(9‑苯基‑10‑氧代)蒽基、1，3‑苯并二硫杂环戊烷‑2‑基、4，5‑双(乙氧基羰基)‑[1，3]‑二氧杂环戊烷‑2‑基、苯并异噻唑基S，S‑二氧化物。在硅烷基醚的情况下，OH保护基可选自三甲基硅烷基、三乙基硅烷基、三异丙基硅烷基、二甲基异丙基硅烷基、二乙基异丙基硅烷基、二甲基己基硅烷基、2‑降冰片基二甲基硅烷基、叔丁基二甲基硅烷基、叔丁基二苯基硅烷基、三苯甲基硅烷基、三‑对二甲苯基硅烷基、三苯基硅烷基、二苯基甲基硅烷基、二叔丁基甲基硅烷基、双(叔丁基)‑1‑芘基甲氧基硅烷基、三(三甲基硅烷基)硅烷基、(2‑羟基苯乙烯基)二甲基硅烷基、(2‑羟基苯乙烯基)二异丙基硅烷基、叔丁基甲氧基苯基硅烷基、叔丁氧基二苯基硅烷基、1，1，3，3‑四异丙基‑3‑[2‑(三苯基甲氧基)乙氧基]二硅氧烷‑
1‑基及氟硅烷基。在酯的情况下，OH保护基连同其附接的未保护OH的氧原子一起形成可选自以下的酯：甲酸酯、苯甲酰基甲酸酯、乙酸酯、氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三氯乙酰胺酯、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、对氯苯氧基乙酸酯、苯基乙酸酯、二苯基乙酸酯、3‑苯基丙酸酯、双氟链型丙酰基、4‑戊烯酸酯、4‑氧代戊酸酯、4，4‑(亚乙基二硫基)戊酸酯、5[3‑双(4‑甲氧基苯基)羟基甲基苯氧基]乙酰丙烯酯、特戊酸酯、1‑金刚烷酸酯、巴豆酸酯、4‑甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸酯、对苯基苯甲酸酯、2，4，6‑三甲基苯甲酸酯、4‑溴苯甲酸酯、2，5‑二氟苯甲酸酯、对硝基苯甲酸酯、吡啶甲酸酯、烟酸酯、2‑(叠氮基甲基)苯甲酸酯、4‑叠氮基‑丁酸酯、(2‑叠氮基甲基)苯基乙酸酯、2‑{[(三苯甲基硫基)氧基]甲基}苯甲酸酯、2‑{[(4‑甲氧基三苯甲基硫基)氧基]甲基}苯甲酸酯、2‑{[甲基(三苯甲基硫基)氨基]甲基}苯甲酸酯、2‑{{[(4‑甲氧基三苯甲基)硫基]甲基氨基}甲基}苯甲酸酯、2‑(烯丙基氧基)苯基乙酸酯、2‑(异戊二烯基氧基甲基)苯甲酸酯、6‑(乙酰丙基氧基甲基)‑3‑甲氧基‑2‑硝基苯甲酸酯、6‑(乙酰丙基氧基甲基)‑3‑甲氧基‑4‑硝基苯甲酸酯、4‑苯甲基氧基丁酸酯、4‑三烷基硅烷基氧基‑丁酸酯、4‑乙酰氧基‑2，2‑二甲基丁酸酯、2，2‑二甲基‑4‑戊烯酸酯、2‑碘苯甲酸酯、4‑硝基‑4‑甲基戊酸酯、间(二溴甲基)苯甲酸酯、2‑甲酰基苯磺酸酯、4‑(甲基硫基‑甲氧基)丁酸酯、2‑(甲基硫基甲氧基甲基)苯甲酸酯、
2‑(氯乙酰氧基甲基)苯甲酸酯、2‑[(2‑氯乙酰氧基)乙基]苯甲酸酯、2‑[2‑(苯甲基氧基)乙基]苯甲酸酯、2‑[2‑(4‑甲氧基苯甲基‑氧基)乙基]苯甲酸酯、2，6‑二氯‑4‑甲基苯氧基乙酸酯、2，6‑二氯‑4‑(1，1，3，3‑四甲基丁基)苯氧基乙酸酯、2，4‑双(1，1‑二甲基丙基)苯氧基乙酸酯、氯二苯基‑乙酸酯、异丁酸酯、单琥珀酸酯、(E)‑2‑甲基‑2‑丁烯酸酯、间(甲氧基羰基)苯甲酸酯、α‑萘甲酸酯、硝酸酯、烷基N，N，N'，N'‑四甲基磷二酰胺酸酯及2‑氯苯甲酸酯。在磺酸酯、次磺酸酯及亚磺酸酯的情况下，OH保护基连同其附接的未保护OH的氧原子一起形成可选自以下的磺酸酯、次磺酸酯及亚磺酸酯：硫酸酯、烯丙基磺酸酯、甲烷磺酸酯、苯甲基磺酸酯、甲苯磺酸酯、2‑[(4‑硝基苯基)乙基]磺酸酯、2‑三氟甲基苯磺酸酯、4‑单甲氧基三苯甲基次磺酸酯、2，4‑二硝基苯基次磺酸烷酯、2，2，5，5‑四甲基吡咯啶‑3‑酮‑1‑亚磺酸酯及二甲基膦基亚硫酰基。在碳酸酯的情况下，OH保护基连同其附接的未保护OH的氧原子一起形成可选自以下的碳酸酯：碳酸甲酯、碳酸甲氧基甲酯、碳酸9‑芴基甲酯、碳酸乙酯、碳酸溴乙酯、碳酸2‑(甲基硫基甲氧基)乙酯、碳酸2，2，2‑三氯乙酯、碳酸1，1‑二甲基‑2，2，2‑三氯乙酯、碳酸2‑(三甲基硅烷基)乙酯、碳酸2‑[二甲基(2‑萘基甲基)硅烷基]乙酯、碳酸2‑(苯基磺酰基)乙酯、碳酸2‑(三苯基磷基)乙酯、顺‑[4‑[[(甲氧基三苯甲基)次磺酰基]氧基]四氢呋喃‑3‑基]氧基碳酸酯、碳酸异丁酯、碳酸叔丁酯、碳酸乙烯酯、碳酸烯丙酯、碳酸肉桂酯、碳酸炔丙酯、碳酸对氯苯酯、碳酸对硝基苯酯、碳酸4‑乙氧基‑1‑萘酯、碳酸6‑溴‑7‑羟基香豆素‑4‑基甲酯、碳酸苯甲酯、碳酸邻硝基苯甲酯、碳酸对硝基苯甲酯、碳酸对甲氧基苯甲酯、碳酸3，4‑二甲氧基苯甲酯、碳酸蒽醌‑2‑基甲酯、碳酸2‑丹磺酰基乙酯、碳酸2‑(4‑硝基苯基)乙酯、碳酸2‑(2，4‑二硝基苯基)乙酯、碳酸2‑(2‑硝基苯基)丙酯、碳酸2‑(3，4‑亚甲基二氧基‑6‑硝基苯基)丙酯、碳酸2‑氰基‑1‑苯基乙酯、碳酸2‑(2‑吡啶基)氨基‑1‑苯基乙酯、碳酸2‑[N‑甲基‑N‑(2‑吡啶基)]氨基‑1‑苯基乙酯、碳酸苯甲酰甲酯、碳酸3'，5'‑二甲氧基安息香酯、二硫基碳酸甲酯及硫基碳酸S‑苯甲酯。且在氨基甲酸酯的情况下，OH保护基连同其附接的未保护OH的氧原子一起形成可选自以下的氨基甲酸酯：硫基氨基甲酸二甲
酯、氨基甲酸N‑苯酯及氨基甲酸N‑甲基‑N‑(邻硝基苯基)酯。
[1198] 在本发明的范畴内，氨基保护基定义为经由形成合适的经保护的氨基来保护氨基所产生的N‑键结部分。经保护的氨基的实例包括氨基甲酸酯、脲、酰胺、杂环系统、N‑烷基胺、N‑烯基胺、N‑炔基胺、N‑芳基胺、亚胺、烯胺、N‑金属衍生物、N‑N衍生物、N‑P衍生物、N‑Si衍生物及N‑S衍生物。在氨基甲酸酯的情况下，氨基保护基连同其附接的氨基一起形成可选自以下的氨基甲酸酯：氨基甲酸甲酯、氨基甲酸乙酯、氨基甲酸9‑芴基甲酯、氨基甲酸2，6‑二叔丁基‑9‑芴基甲酯、氨基甲酸2，7‑双(三甲基硅烷基)芴基甲酯、氨基甲酸9‑(2‑磺基)芴基甲酯、氨基甲酸9‑(2，7‑二溴)芴基甲酯、氨基甲酸17‑四苯并[a，c，g，i]芴基甲酯、氨基甲酸2‑氯‑3‑茚基甲酯、苯并[f]茚‑3‑基甲基氨基甲酸酯、1，1‑二氧代苯并[b]‑噻吩‑2‑基甲基氨基甲酸酯、氨基甲酸2‑甲基磺酰基‑3‑苯基‑1‑丙‑2‑烯酯、氨基甲酸2，7‑二叔丁基‑[9，(10，10‑二氧代‑10，10，10，10‑四氢噻吨酮基)]甲酯、氨基甲酸2，2，2‑三氯乙酯、氨基甲酸2‑三甲基硅烷基乙酯、氨基甲酸(2‑苯基‑2‑三甲基硅烷基)乙酯、氨基甲酸2‑苯基乙酯、氨基甲酸2‑氯乙酯、氨基甲酸1，1‑二甲基‑2‑卤基乙酯、氨基甲酸1，1‑二甲基‑2，2‑二溴乙酯、氨基甲酸1，1‑二甲基‑2，2，2‑三氯乙酯、氨基甲酸2‑(2'‑吡啶基)乙酯、氨基甲酸2‑(4'‑吡啶基)乙酯、氨基甲酸2，2‑双(4'‑硝基苯基)乙酯、氨基甲酸2‑[(2‑硝基苯基)二硫基]‑1‑苯基乙酯、氨基甲酸2‑(N，N‑二环己基甲酰氨基)乙酯、氨基甲酸叔丁酯、氟BOC氨基甲酸酯、氨基甲酸1‑金刚烷酯、氨基甲酸2‑金刚烷酯、氨基甲酸1‑(1‑金刚烷基)‑1‑甲基乙酯、氨基甲酸1‑甲基‑1‑(4‑联苯基)乙酯、氨基甲酸1‑(3，5‑二叔丁基苯基)‑1‑甲基乙酯、氨基甲酸三异丙基硅烷氧基酯、氨基甲酸乙烯酯、氨基甲酸烯丙酯、氨基甲酸异戊二烯酯、氨基甲酸1‑异丙基烯丙酯、氨基甲酸肉桂酯、氨基甲酸4‑硝基肉桂酯、氨基甲酸3‑(3'‑吡啶基)丙‑2‑烯酯、氨基甲酸己二烯酯、氨基甲酸炔丙酯、双氨基甲酸1，4‑丁‑2‑炔酯、氨基甲酸8‑喹啉酯、氨基甲酸N‑羟基哌啶酯、二硫基氨基甲酸烷酯、氨基甲酸苯甲酯、氨基甲酸3，5‑二叔丁基苯甲酯、氨基甲酸对甲氧基苯甲酯、氨基甲酸对硝基苯甲酯、氨基甲酸对溴苯甲酯、氨基甲酸对氯苯甲酯、氨基甲酸2，4‑二氯苯甲酯、氨基甲酸4‑甲基亚磺酰基苯甲酯、氨基甲酸4‑三氟甲基苯甲酯、氨基甲酸氟苯甲酯、氨基甲酸2‑萘基甲酯、氨基甲酸9‑蒽基甲酯、氨基甲酸二苯基甲酯、氨基甲酸4‑苯基乙酰氧基苯甲酯、氨基甲酸4‑叠氮基苯甲酯、氨基甲酸4‑叠氮基‑甲氧基苯甲酯、氨基甲酸间氯‑对酰氧基苯甲酯、氨基甲酸对(二羟基氧硼基)‑苯甲酯、氨基甲酸5‑苯并异恶唑基甲酯、氨基甲酸2‑(三氟甲基)‑6‑色酮基甲酯、氨基甲酸2‑甲硫基乙酯、氨基甲酸2‑甲基磺酰基乙酯、氨基甲酸2‑(对甲苯磺酰基)乙酯、氨基甲酸2‑(4‑硝基苯基磺酰基)乙酯、氨基甲酸2‑(2，4‑二硝基苯基磺酰基)乙酯、氨基甲酸2‑(4‑三氟甲基苯基磺酰基)乙酯、氨基甲酸[2‑(1，3‑二噻烷基)]甲酯、氨基甲酸2‑磷基乙酯、氨基甲酸2‑[苯基(甲基)二氢硫基]乙酯、氨基甲酸1‑甲基‑1‑(三苯基磷基)乙酯、氨基甲酸1，1‑二甲基‑2‑氰基乙酯、氨基甲酸2‑丹磺酰基乙酯、氨基甲酸2‑(4‑硝基苯基)乙酯、氨基甲酸4‑甲硫基苯酯、氨基甲酸2，4‑二甲硫基苯基酯、氨基甲酸间硝基苯酯、氨基甲酸3，5‑二甲氧基苯甲酯、氨基甲酸1‑甲基‑1‑(3，5‑二甲氧基苯基)乙酯、氨基甲酸α‑甲基硝基胡椒基酯、氨基甲酸邻硝基苯甲酯、氨基甲酸3，4‑二甲氧基‑6‑硝基苯甲酯、氨基甲酸苯基(邻硝基苯基)甲酯、氨基甲酸2‑硝基苯基乙酯、氨基甲酸6‑硝基藜芦基酯、氨基甲酸4‑甲氧基苯甲酰甲酯、氨基甲酸3'，5'‑二甲氧基安息香酯、氨基甲酸9‑二苯并哌喃基甲酯、氨基甲酸N‑甲基‑N‑(邻硝基苯基)酯、氨基甲酸叔戊酯、氨基甲酸1‑甲基环丁酯、氨基甲酸1‑甲基环己酯、氨基甲酸1‑甲基‑1‑环丙基甲酯、氨基甲酸环丁酯、氨基甲酸环戊酯、氨基甲酸环己酯、氨基甲酸异丁酯、氨基甲酸异降冰片酯、氨基甲酸环丙基甲酯、氨基甲酸对癸氧基苯甲酯、氨基甲酸二异丙基甲酯、氨基甲酸2，2‑二甲氧基‑羰基乙烯酯、氨基甲酸邻(N，N‑二甲基甲酰氨基)苯甲酯、氨基甲酸1，1‑二甲基‑3‑(N，N‑二甲基‑甲酰氨基)丙酯、氨基甲酸丁炔酯、氨基甲酸1，1‑二甲基丙炔酯、氨基甲酸2‑碘乙酯、氨基甲酸1‑甲基‑1‑(4'‑吡啶基)乙酯、氨基甲酸1‑甲基‑1‑(对苯偶氮基苯基)乙酯、氨基甲酸p‑(p'‑甲氧基苯偶氮基)苯甲酯、氨基甲酸对(苯偶氮基)苯甲酯、氨基甲酸2，4，6‑三甲基苯甲酯、氨基甲酸异烟碱酯、4‑(三甲基‑铵)苯甲基氨基甲酸酯、氨基甲酸对氰基苯甲酯、氨基甲酸二(2‑吡啶基)甲酯、氨基甲酸2‑呋喃基甲酯、氨基甲酸苯酯、氨基甲酸2，4，6‑三叔丁基苯酯、氨基甲酸1‑甲基‑1‑苯基乙酯及氨基甲酸S‑苯甲硫酯。在脲的情况下，氨基保护基可选自吩噻嗪基‑(10)‑羰基、N'‑对甲苯磺酰基氨基羰基、N'‑苯基氨基硫基羰基、4‑羟基苯基氨基羰基、3‑羟基色氨基羰基及N'‑苯基氨基硫基羰基。
在酰胺的情况下，氨基保护基连同其附接的氨基一起形成可选自以下的酰胺：甲酰胺、乙酰胺、氯乙酰胺、三氯乙酰胺、三氟乙酰胺、苯基乙酰胺、3‑苯基丙酰胺、戊‑4‑烯酰胺、吡啶甲酰胺、3‑吡啶基甲酰胺、N‑苯甲酰基苯基丙胺酰基酰胺、苯甲酰胺、对苯基苯甲酰胺、邻硝基苯基乙酰胺、2，2‑二甲基‑2‑(邻硝基苯基)乙酰胺、邻硝基苯氧基乙酰胺、3‑(邻硝基苯基)丙酰胺、2‑甲基‑2‑(邻硝基苯氧基)丙酰胺、3‑甲基‑3‑硝基丁酰胺、邻硝基肉桂酰胺、邻硝基苯甲酰胺、3‑(4‑叔丁基‑2，6‑二硝基苯基)‑2，2‑二甲基丙酰胺、邻(苯甲酰氧基甲基)苯甲酰胺、2‑(乙酰氧基甲基)苯甲酰胺、2‑[(叔丁基二苯基硅氧基)甲基]苯甲酰胺、3‑(3'，
6'‑二氧代‑2'，4'，5'‑三甲基环己‑1'，4'‑二烯)‑3，3‑二甲基丙酰胺、邻羟基‑反式‑肉桂酰胺、2‑甲基‑2‑(邻苯偶氮基苯氧基)丙酰胺、4‑氯丁酰胺、乙酰‑乙酰胺、3‑(对羟基苯基)丙酰胺、(N'‑二硫基苯甲基氧基羰基氨基)乙酰胺及N‑乙酰基甲硫胺酸酰胺。在杂环系统的情况下，氨基保护基连同其附接的氨基一起形成可选自以下的杂环系统：4，5‑二苯基‑3‑恶唑啉‑2‑酮、N‑邻苯二甲酰亚胺、N‑二氯邻苯二甲酰亚胺、N‑四氯邻苯二甲酰亚胺、N‑4‑硝基邻苯二甲酰亚胺、N‑硫基二乙二醇酰基、N‑二硫杂丁二酰亚胺、N‑2，3‑二苯基顺丁烯二酰亚胺、N‑2，3‑二甲基顺丁烯二酰亚胺、N‑2，5‑二甲基吡咯、N‑2，5‑双(三异丙基硅氧基)吡咯、N‑1，1，4，4‑四甲基二硅烷基氮杂环戊烷加合物、N‑1，1，3，3‑四甲基‑1，3‑二硅异吲哚啉、N‑二苯基硅烷基二亚乙基、N‑5‑取代的1，3‑二甲基‑1，3，5‑三氮杂环己‑2‑酮、N‑5‑取代的1，
3‑苯甲基‑1，3，5‑三氮杂环己‑2‑酮、1‑取代的3，5‑二硝基‑4‑吡啶酮及1，3，5‑二恶。在N‑烷基、N‑烯基、N‑炔基或N‑芳基胺的情况下，氨基保护基可选自N‑甲基、N‑叔丁基、N‑烯丙基、N‑异戊二烯基、N‑肉桂基、N‑苯基烯丙基、N‑炔丙基、N‑甲氧基甲基、N‑[2‑(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基、N‑3‑乙酰氧基丙基、N‑氰基甲基、N‑2‑氮杂降冰片烯、N‑苯甲基、N‑4‑甲氧基苯甲基、N‑2，4‑二甲氧基苯甲基、N‑2‑羟基苯甲基、N‑二茂铁基甲基、N‑2，4‑二硝基苯基、邻甲氧基苯基、对甲氧基苯基、N‑9‑苯基芴基、N‑芴基、N‑2‑吡啶甲基胺N'‑氧化物、N‑7‑甲氧基香豆素‑4‑基甲基、N‑二苯基甲基、N‑双(4‑甲氧基苯基)甲基、N‑5‑二苯并环庚基、N‑三苯基甲基、N‑(4‑甲基苯基)二苯基甲基及N‑(4‑甲氧基苯基)二苯基甲基。在亚胺的情况下，氨基保护基可选自N‑1，1‑二甲基硫亚甲基、N‑苯亚甲基、N‑对甲氧基苯亚甲基、N‑二苯基亚甲基、N‑[2‑吡啶基)均三甲苯基]亚甲基、N‑(N'，N'‑二甲基氨基亚甲基)、N‑(N'，N'‑二苯甲基氨基亚甲基)、N‑(N'‑叔丁基氨基亚甲基)、N，N'‑亚异丙基、N‑对硝基苯亚甲基、N‑亚水杨基、N‑5‑氯亚水杨基、N‑(5‑氯‑2‑羟基苯基)苯基亚甲基、N‑亚环己基及N‑亚叔丁基。在烯胺的情况下，氨基保护基可选自N‑(5，5‑二甲基‑3‑氧代‑1‑环己烯基)、N‑2，7‑二氯‑9‑芴基亚甲基、N‑1‑(4，4‑二甲基‑2，6‑二氧代亚环己基)乙基、N‑(1，3‑二甲基‑2，4，6‑(1H，3H，5H)‑三氧代亚嘧啶‑5‑基)‑甲基、N‑4，4，4‑三氟‑3‑氧代‑1‑丁烯基及N‑(1‑异丙基‑4‑硝基‑2‑氧代‑3‑吡咯啉‑3‑基)。在N‑金属衍生物的情况下，氨基保护基可选自N‑硼烷、N‑二苯基硼酸酯、N‑二乙基硼酸酯、N‑9‑硼双环壬烷、N‑二氟硼酸酯及3，5‑双(三氟甲基)苯基硼酸；以及包括N‑苯基(五羰基铬)碳烯基、N‑苯基(五羰基钨)碳烯基、N‑甲基(五羰基铬)碳烯基、N‑甲基(五羰基钨)碳烯基、N‑铜螯合物、N‑锌螯合物及18‑冠‑6‑衍生物。在N‑N衍生物的情况下，氨基保护基连同其附接的氨基一起形成可选自以下的N‑N衍生物：N‑硝基氨基、N‑亚硝基氨基、胺N‑氧化物、叠氮化物、三氮烯衍生物及N‑三甲基硅烷基甲基‑N‑苯甲基肼。在N‑P衍生物的情况下，氨基保护基连同其附接的氨基一起形成可选自以下的N‑P衍生物：二苯基膦酰胺、二甲基硫基膦酰胺、二苯基硫基膦酰胺、氨基磷酸二烷酯、氨基磷酸二苯甲酯、氨基磷酸二苯酯及亚氨基三苯基磷烷。在N‑Si衍生物的情况下，NH2保护基可选自叔丁基二苯基硅烷基及三苯基硅烷基。在N‑S衍生物的情况下，经保护的氨基可选自N‑次磺酰基或N‑磺酰基衍生物。N‑次磺酰基衍生物可选自苯次磺酰胺、2‑硝基苯次磺酰胺、2，4‑二硝基苯次磺酰胺、五氯苯次磺酰胺、2‑硝基‑4‑甲氧基苯次磺酰胺、三苯基甲基苯次磺酰胺、1‑(2，2，2‑三氟‑
1，1‑二苯基)乙基苯次磺酰胺及N‑3‑硝基‑2‑吡啶苯次磺酰胺。N‑磺酰基衍生物可选自甲烷磺酰胺、三氟甲烷磺酰胺、叔丁基磺酰胺、苯甲基磺酰胺、2‑(三甲基硅烷基)乙烷磺酰胺、对甲苯磺酰胺、苯磺酰胺、邻大茴香基磺酰胺、2‑硝基苯磺酰胺、4‑硝基苯磺酰胺、2，4‑二硝基苯磺酰胺、2‑萘磺酰胺、4‑(4'，8'‑二甲氧基萘基甲基)苯磺酰胺、2‑(4‑甲基苯基)‑6‑甲氧基‑4‑甲基磺酰胺、9‑蒽磺酰胺、吡啶‑2‑磺酰胺、苯并噻唑‑2‑磺酰胺、苯甲酰甲基磺酰胺、
2，3，6‑三甲基‑4‑甲氧基苯磺酰胺、2，4，6‑三甲氧基苯磺酰胺、2，6‑二甲基‑4‑甲氧基‑苯磺酰胺、五甲基苯磺酰胺、2，3，5，6‑四甲基‑4‑甲氧基苯磺酰胺、4‑甲氧基苯磺酰胺、2，4，6‑三甲基苯磺酰胺、2，6‑二甲氧基‑4‑甲基苯磺酰胺、3‑甲氧基‑4‑叔丁基苯磺酰胺及2，2，5，7，
8‑五甲基色满‑6‑磺酰胺。
在酰胺的情况下，氨基保护基连同其附接的氨基一起形成可选自以下的酰胺：甲酰胺、乙酰胺、氯乙酰胺、三氯乙酰胺、三氟乙酰胺、苯基乙酰胺、3‑苯基丙酰胺、戊‑4‑烯酰胺、吡啶甲酰胺、3‑吡啶基甲酰胺、N‑苯甲酰基苯基丙胺酰基酰胺、苯甲酰胺、对苯基苯甲酰胺、邻硝基苯基乙酰胺、2，2‑二甲基‑2‑(邻硝基苯基)乙酰胺、邻硝基苯氧基乙酰胺、3‑(邻硝基苯基)丙酰胺、2‑甲基‑2‑(邻硝基苯氧基)丙酰胺、3‑甲基‑3‑硝基丁酰胺、邻硝基肉桂酰胺、邻硝基苯甲酰胺、3‑(4‑叔丁基‑2，6‑二硝基苯基)‑2，2‑二甲基丙酰胺、邻(苯甲酰氧基甲基)苯甲酰胺、2‑(乙酰氧基甲基)苯甲酰胺、2‑[(叔丁基二苯基硅氧基)甲基]苯甲酰胺、3‑(3'，
6'‑二氧代‑2'，4'，5'‑三甲基环己‑1'，4'‑二烯)‑3，3‑二甲基丙酰胺、邻羟基‑反式‑肉桂酰胺、2‑甲基‑2‑(邻苯偶氮基苯氧基)丙酰胺、4‑氯丁酰胺、乙酰‑乙酰胺、3‑(对羟基苯基)丙酰胺、(N'‑二硫基苯甲基氧基羰基氨基)乙酰胺及N‑乙酰基甲硫胺酸酰胺。在杂环系统的情况下，氨基保护基连同其附接的氨基一起形成可选自以下的杂环系统：4，5‑二苯基‑3‑恶唑啉‑2‑酮、N‑邻苯二甲酰亚胺、N‑二氯邻苯二甲酰亚胺、N‑四氯邻苯二甲酰亚胺、N‑4‑硝基邻苯二甲酰亚胺、N‑硫基二乙二醇酰基、N‑二硫杂丁二酰亚胺、N‑2，3‑二苯基顺丁烯二酰亚胺、N‑2，3‑二甲基顺丁烯二酰亚胺、N‑2，5‑二甲基吡咯、N‑2，5‑双(三异丙基硅氧基)吡咯、N‑1，1，4，4‑四甲基二硅烷基氮杂环戊烷加合物、N‑1，1，3，3‑四甲基‑1，3‑二硅异吲哚啉、N‑二苯基硅烷基二亚乙基、N‑5‑取代的1，3‑二甲基‑1，3，5‑三氮杂环己‑2‑酮、N‑5‑取代的1，
3‑苯甲基‑1，3，5‑三氮杂环己‑2‑酮、1‑取代的3，5‑二硝基‑4‑吡啶酮及1，3，5‑二恶。在N‑烷基、N‑烯基、N‑炔基或N‑芳基胺的情况下，氨基保护基可选自N‑甲基、N‑叔丁基、N‑烯丙基、N‑异戊二烯基、N‑肉桂基、N‑苯基烯丙基、N‑炔丙基、N‑甲氧基甲基、N‑[2‑(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基、N‑3‑乙酰氧基丙基、N‑氰基甲基、N‑2‑氮杂降冰片烯、N‑苯甲基、N‑4‑甲氧基苯甲基、N‑2，4‑二甲氧基苯甲基、N‑2‑羟基苯甲基、N‑二茂铁基甲基、N‑2，4‑二硝基苯基、邻甲氧基苯基、对甲氧基苯基、N‑9‑苯基芴基、N‑芴基、N‑2‑吡啶甲基胺N'‑氧化物、N‑7‑甲氧基香豆素‑4‑基甲基、N‑二苯基甲基、N‑双(4‑甲氧基苯基)甲基、N‑5‑二苯并环庚基、N‑三苯基甲基、N‑(4‑甲基苯基)二苯基甲基及N‑(4‑甲氧基苯基)二苯基甲基。在亚胺的情况下，氨基保护基可选自N‑1，1‑二甲基硫亚甲基、N‑苯亚甲基、N‑对甲氧基苯亚甲基、N‑二苯基亚甲基、N‑[2‑吡啶基)均三甲苯基]亚甲基、N‑(N'，N'‑二甲基氨基亚甲基)、N‑(N'，N'‑二苯甲基氨基亚甲基)、N‑(N'‑叔丁基氨基亚甲基)、N，N'‑亚异丙基、N‑对硝基苯亚甲基、N‑亚水杨基、N‑5‑氯亚水杨基、N‑(5‑氯‑2‑羟基苯基)苯基亚甲基、N‑亚环己基及N‑亚叔丁基。在烯胺的情况下，氨基保护基可选自N‑(5，5‑二甲基‑3‑氧代‑1‑环己烯基)、N‑2，7‑二氯‑9‑芴基亚甲基、N‑1‑(4，4‑二甲基‑2，6‑二氧代亚环己基)乙基、N‑(1，3‑二甲基‑2，4，6‑(1H，3H，5H)‑三氧代亚嘧啶‑5‑基)‑甲基、N‑4，4，4‑三氟‑3‑氧代‑1‑丁烯基及N‑(1‑异丙基‑4‑硝基‑2‑氧代‑3‑吡咯啉‑3‑基)。在N‑金属衍生物的情况下，氨基保护基可选自N‑硼烷、N‑二苯基硼酸酯、N‑二乙基硼酸酯、N‑9‑硼双环壬烷、N‑二氟硼酸酯及3，5‑双(三氟甲基)苯基硼酸；以及包括N‑苯基(五羰基铬)碳烯基、N‑苯基(五羰基钨)碳烯基、N‑甲基(五羰基铬)碳烯基、N‑甲基(五羰基钨)碳烯基、N‑铜螯合物、N‑锌螯合物及18‑冠‑6‑衍生物。在N‑N衍生物的情况下，氨基保护基连同其附接的氨基一起形成可选自以下的N‑N衍生物：N‑硝基氨基、N‑亚硝基氨基、胺N‑氧化物、叠氮化物、三氮烯衍生物及N‑三甲基硅烷基甲基‑N‑苯甲基肼。在N‑P衍生物的情况下，氨基保护基连同其附接的氨基一起形成可选自以下的N‑P衍生物：二苯基膦酰胺、二甲基硫基膦酰胺、二苯基硫基膦酰胺、氨基磷酸二烷酯、氨基磷酸二苯甲酯、氨基磷酸二苯酯及亚氨基三苯基磷烷。在N‑Si衍生物的情况下，NH2保护基可选自叔丁基二苯基硅烷基及三苯基硅烷基。在N‑S衍生物的情况下，经保护的氨基可选自N‑次磺酰基或N‑磺酰基衍生物。N‑次磺酰基衍生物可选自苯次磺酰胺、2‑硝基苯次磺酰胺、2，4‑二硝基苯次磺酰胺、五氯苯次磺酰胺、2‑硝基‑4‑甲氧基苯次磺酰胺、三苯基甲基苯次磺酰胺、1‑(2，2，2‑三氟‑
1，1‑二苯基)乙基苯次磺酰胺及N‑3‑硝基‑2‑吡啶苯次磺酰胺。N‑磺酰基衍生物可选自甲烷磺酰胺、三氟甲烷磺酰胺、叔丁基磺酰胺、苯甲基磺酰胺、2‑(三甲基硅烷基)乙烷磺酰胺、对甲苯磺酰胺、苯磺酰胺、邻大茴香基磺酰胺、2‑硝基苯磺酰胺、4‑硝基苯磺酰胺、2，4‑二硝基苯磺酰胺、2‑萘磺酰胺、4‑(4'，8'‑二甲氧基萘基甲基)苯磺酰胺、2‑(4‑甲基苯基)‑6‑甲氧基‑4‑甲基磺酰胺、9‑蒽磺酰胺、吡啶‑2‑磺酰胺、苯并噻唑‑2‑磺酰胺、苯甲酰甲基磺酰胺、
2，3，6‑三甲基‑4‑甲氧基苯磺酰胺、2，4，6‑三甲氧基苯磺酰胺、2，6‑二甲基‑4‑甲氧基‑苯磺酰胺、五甲基苯磺酰胺、2，3，5，6‑四甲基‑4‑甲氧基苯磺酰胺、4‑甲氧基苯磺酰胺、2，4，6‑三甲基苯磺酰胺、2，6‑二甲氧基‑4‑甲基苯磺酰胺、3‑甲氧基‑4‑叔丁基苯磺酰胺及2，2，5，7，
8‑五甲基色满‑6‑磺酰胺。
[1199] 在本发明的范畴内，SH保护基定义为经由形成合适的经保护的SH基团来保护SH基团所产生的S‑键结部分。此类经保护的SH基团的实例包括硫醚、二硫化物、硅烷基硫醚、硫酯、硫代碳酸酯及硫代氨基甲酸酯。在硫醚的情况下SH保护基可选自S‑烷基、S‑苯甲基、S‑对甲氧基苯甲基、S‑邻羟基苯甲基、S‑对羟基苯甲基、S‑邻乙酰氧基苯甲基、S‑对乙酰氧基苯甲基、S‑对硝基苯甲基、S‑邻硝基苯甲基、S‑2，4，6‑三甲基苯甲基、S‑2，4，6‑三甲氧基苯甲基、S‑4‑吡啶甲基、S‑2‑吡啶甲基‑N‑氧化物、S‑2‑喹啉基甲基、S‑9‑蒽基甲基、S‑9‑芴基甲基、S‑二苯并哌喃基、S‑二茂铁基甲基、S‑二苯基甲基、S‑双(4‑甲氧基苯基)甲基、S‑5‑二苯并环庚基、S‑三苯基甲基、4‑甲氧基三苯甲基、S‑二苯基‑4‑吡啶基甲基、S‑苯基、S‑2，4‑二硝基苯基、S‑2‑喹啉基、S‑叔丁基、S‑1‑金刚烷基、S‑甲氧基甲基、S‑异丁氧基甲基、S‑苯甲基氧基甲基、S‑1‑乙氧基乙基、S‑2‑四氢哌喃基、S‑苯甲基硫甲基、S‑苯基硫甲基、S‑乙酰氨基甲基(Acm)、S‑三甲基乙酰氨基甲基、S‑苯甲酰氨基甲基、S‑烯丙氧基羰基氨基甲基、S‑N‑[2，3，5，6‑四氟‑4‑(N'‑哌啶基)‑苯基‑N‑烯丙氧基羰基氨基甲基、S‑邻苯二酰亚胺基甲基、S‑苯基乙酰氨基甲基、S‑乙酰基甲基、S‑羧基甲基、S‑氰基甲基、S‑(2‑硝基‑1‑苯基)乙基、S‑2‑(2，4‑二硝基苯基)乙基、S‑2‑(4'‑吡啶基)乙基、S‑2‑氰基乙基、S‑2‑(三甲基硅烷基)乙基、S‑2，2‑双(乙氧羰基)乙基、S‑(1‑间硝基苯基‑2‑苯甲酰基)乙基、S‑2‑苯基磺酰基乙基、S‑1‑(4‑甲基苯基磺酰基)‑2‑甲基丙‑2‑基及S‑对羟基苯甲酰甲基。在二硫化物的情况下经保护的SH基团可选自S‑乙基二硫化物、S‑叔丁基二硫化物、S‑2‑硝基苯基二硫化物、S‑2，4‑二硝基苯基二硫化物、S‑2‑苯偶氮基苯基二硫化物、S‑2‑羧基苯基二硫化物及S‑3‑硝基‑2‑吡啶基二硫化物。在硅烷基硫醚的情况下，SH保护基可选自以上针对OH经硅烷基醚保护所列出的基团清单。在硫酯的情况下，SH保护基可选自S‑乙酰基、S‑苯甲酰基、S‑2‑甲氧基异丁酰基、S‑三氟乙酰基、S‑N‑[[对联苯基)‑异丙基氧基]羰基]‑N‑甲基‑γ‑氨基硫基丁酸酯及S‑N‑(叔丁氧基羰基)‑N‑甲基‑γ‑氨基硫基丁酸酯。在硫代碳酸酯的情况下，SH保护基可选自S‑2，2，2‑三氯乙氧基羰基、S‑叔丁氧基羰基、S‑苯甲基氧基羰基、S‑对甲氧基苯甲基氧基羰基及S‑芴基甲基羰基。在硫氨基甲酸酯的情况下，经保护的SH基团可选自S‑(N‑乙基氨基甲酸酯)及S‑(N‑甲氧基甲基氨基甲酸酯)。
[1200] 对这些基团的提及不应解释为对本发明的范畴的限制，因为其纯粹作为OH、氨基及SH基团的保护基示例而提及，但本领域技术人员已知具有所述功能的其他基团，且应了解本发明也涵盖它们。
[1201] 为提供更简洁的描述，本文给出的一些定量表述并不用术语“约”限定。应了解，不论是否明确使用术语“约”，本文给出的每个量均意欲指实际给出值，且其也意欲指基于本技术领域中具有通常知识者合理推断的所述给出值的近似值，包括由于所述给出值的实验及/或量测条件而获得的等效值及近似值。
[1202] “抗体‑药物共轭物(ADC)”代表一种递送细胞毒性分子至癌细胞的靶向策略(参见例如国际专利申请案WO‑A‑2004/010957、WO‑A‑2006/060533及WO‑A‑2007/024536)。此类化合物典型地称为药物、毒素及放射性核素“共轭物”。在药物共轭物与肿瘤细胞结合且释放及/或活化药物部分的细胞毒活性时杀死肿瘤细胞。药物共轭物所提供的选择性使对正常细胞的毒性降至最低，由此增强药物在患者中的耐受性。已得到上市批准的此类型的药物抗体共轭物的三个实例为：用于急性骨髓性白血病的吉妥珠单抗奥唑米星(Gemtuzumab ozogamicn)、用于复发性及难治性霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin lymphoma)及多形性大细胞淋巴瘤的本妥昔单抗维多汀(Brentuximab vedotin)以及用于乳癌、尤其HER2+的曲妥珠单
抗‑美坦新共轭物(ado‑Trastuzumab emtansine)。
抗‑美坦新共轭物(ado‑Trastuzumab emtansine)。
[1203] 药物用于癌症化学疗法的效力通常依赖于癌症与正常组织之间的生长速率、生化途径及生理特征的差异。因此，大多数标准化学治疗剂是相对非特异性的，且展现出造成次优的治疗效果的剂量限制性毒性。一种选择性靶向恶性细胞及不健康组织的方法为使用识别在肿瘤细胞的表面上表现的肿瘤相关抗原的特异性单株抗体(mAb)[Meyer，DL及Senter，PD(2003)Recent advances in antibody drug conjugates for cancer therapy.Annu.Rep.Med.Chem.，38，229‑237；Chari，R.V.(2008)Targeted cancer
therapy:conferring specificity to cytotoxic drugs.Acc.Chem.Res.41，98‑107]。在过去25年间已批准超过30种G型免疫球蛋白(IgG)及相关药剂，主要用于癌症及炎性疾病。
therapy:conferring specificity to cytotoxic drugs.Acc.Chem.Res.41，98‑107]。在过去25年间已批准超过30种G型免疫球蛋白(IgG)及相关药剂，主要用于癌症及炎性疾病。
[1204] 一种替代策略为期望小的抗赘生性分子化学共轭至mAb，用作载剂(增加半衰期)与靶向剂(选择性)。大量工作已针对使用单株抗体(mAb)靶向递送药物，因为其对肿瘤相关抗原具有高度选择性、良好药物动力学及相对较低的内在毒性。mAb‑药物共轭物(ADC)通过抗癌药物通常经由条件性稳定的连接子系统共价连接至mAb来形成。在结合于细胞表面抗原时，用于大部分ADC的mAb主动输送至溶酶体或其他细胞内隔室，在隔室中酶、低pH值或还原剂促进药物释放。然而，当前处于研发中的ADC很有限。
[1205] 抗原必须具有高度肿瘤细胞选择性以限制毒性及脱靶作用。在临床前模型及临床试验中研究众多肿瘤相关抗原，包括在B细胞(例如CD20、CD22、CD40、CD79)、T细胞(CD25、CD30)、癌细胞(HER2、EGFR、EpCAM、EphB2、PSMA)、内皮(内皮因子)或基质细胞(纤维母细胞活化蛋白)中过度表现的抗原，仅举几例[Teicher BA.Antibody‑drug conjugate targets.Curr Cancer Drug Targets 9(8):982‑1004，2009]。ADC目标的一种重要特性为其内化能力；此可为抗原本身的内在特征，或其可通过抗体结合至其抗原诱发。实际上，ADC内化对于减少与药物有效负载的细胞外递送相关联的毒性而言是至关重要的。
[1206] 关于共轭小分子及与多种假定抗原目标对比，当前在临床试验中积极研究用作ADC中的有效负载的有限数目的细胞毒性药物家族：刺孢霉素(calicheamycin)(Pfizer)、倍癌霉素(duocarmycin)(Synthon)、吡咯并苯并二氮呯(Spirogen)、伊立替康
(irinotecan)(Immunomedics)、类美登素(maytansinoid)(DM1及DM4；ImmunoGen+
Genentech/Roche、Sanofi‑Aventis、Biogen Idec、Centocor/Johnson&Johnson、
Millennium/Takeda)及奥瑞他汀(auristatin)(MMAE及MMAF；Seattle Genetics+
Genentech/Roche，Medimmune/AstraZeneca，Bayer‑Schering，Celldex，Progenics，Genmab)。刺孢霉素、倍癌霉素及吡咯并苯并二氮呯为DNA小沟结合子，伊立替康为拓朴异构酶I抑制剂，而类美登素及奥瑞他汀为微管蛋白解聚剂。
(irinotecan)(Immunomedics)、类美登素(maytansinoid)(DM1及DM4；ImmunoGen+
Genentech/Roche、Sanofi‑Aventis、Biogen Idec、Centocor/Johnson&Johnson、
Millennium/Takeda)及奥瑞他汀(auristatin)(MMAE及MMAF；Seattle Genetics+
Genentech/Roche，Medimmune/AstraZeneca，Bayer‑Schering，Celldex，Progenics，Genmab)。刺孢霉素、倍癌霉素及吡咯并苯并二氮呯为DNA小沟结合子，伊立替康为拓朴异构酶I抑制剂，而类美登素及奥瑞他汀为微管蛋白解聚剂。
[1207] 有趣的是，三种这些获得细胞毒性的ADC的代表已进入后期临床试验。曲妥珠单抗‑美坦新(T‑DM1)，曲妥珠单抗通过稳定连接子连接于类美登素半合成药物(FDA于2013年
2月22日批准用于晚期HER2阳性乳癌)；奥英妥珠单抗(Inotuzumab ozogamicin，CMC‑544)，一种用酸不稳定连接子(乙酰基苯氧基‑丁酸)与刺孢霉素共轭的人类化抗CD22 mAb(G5/
44，IgG4)(B细胞非霍奇金氏淋巴瘤)；本妥昔单抗维多汀，一种经由顺丁烯二酰亚胺己酰基‑缬氨酰基‑瓜氨酸基‑对氨基苯甲基氨基甲酸酯连接子连接于单甲基奥瑞他汀E(MMAE)的人类化抗CD30 mAb(FDA于2011年8月19日批准用于多形性大细胞淋巴瘤及霍奇金氏淋巴瘤)。
2月22日批准用于晚期HER2阳性乳癌)；奥英妥珠单抗(Inotuzumab ozogamicin，CMC‑544)，一种用酸不稳定连接子(乙酰基苯氧基‑丁酸)与刺孢霉素共轭的人类化抗CD22 mAb(G5/
44，IgG4)(B细胞非霍奇金氏淋巴瘤)；本妥昔单抗维多汀，一种经由顺丁烯二酰亚胺己酰基‑缬氨酰基‑瓜氨酸基‑对氨基苯甲基氨基甲酸酯连接子连接于单甲基奥瑞他汀E(MMAE)的人类化抗CD30 mAb(FDA于2011年8月19日批准用于多形性大细胞淋巴瘤及霍奇金氏淋巴瘤)。
[1208] 连接子表示ADC结构的关键组分。已研究若干类别第二代连接子，包括酸不稳定的腙连接子(溶酶体)(例如吉妥珠单抗及奥英妥珠单抗)；基于二硫化物的连接子(还原性细胞内环境)；不可裂解的硫醚连接子(溶酶体中分解代谢降解)(例如曲妥珠单抗‑美坦新)；肽连接子(例如瓜氨酸‑缬氨酸)(溶酶体蛋白酶，如组织蛋白酶B)(例如本妥昔单抗维多
汀)：参见例如WO‑A‑2004/010957、WO‑A‑2006/060533及WO‑A‑2007/024536。也描述通过尺寸排阻层析(SEC)纯化抗体‑药物共轭物[参见例如Liu等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，93:
8618‑8623(1996)及Chari等人，Cancer Research，52:127‑131(1992)]。
汀)：参见例如WO‑A‑2004/010957、WO‑A‑2006/060533及WO‑A‑2007/024536。也描述通过尺寸排阻层析(SEC)纯化抗体‑药物共轭物[参见例如Liu等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，93:
8618‑8623(1996)及Chari等人，Cancer Research，52:127‑131(1992)]。
[1209] 曲妥珠单抗(赫赛汀(Herceptin))为干扰HER2/neu受体的单株抗体。其主要用途为治疗某些乳癌。HER受体为包埋于细胞膜中且将分子信号自细胞(称为EGF的分子)外部传达至细胞内部且打开及关闭基因的蛋白质。HER蛋白质刺激细胞增殖。在一些癌症、尤其某些类型乳癌中，HER2过度表现，且引起癌细胞不受控制地复制。
[1210] 在20％至30％的早期乳癌中HER2基因扩增，此使得其在细胞膜中过度表现表皮生长因子(EGF)受体。在一些类型癌症中，在生长因子未到达及结合于受体下，HER2可发送信号，使得其在细胞中的作用为组成性的；然而，曲妥珠单抗在此情况下无效。
[1211] 当HER2路径正常起作用时，其促进细胞生长及分裂；然而，当其过度表现时，细胞生长加速超出其正常限度。在一些类型癌症中，所述路径用以促进快速细胞生长及增殖，因此形成肿瘤。在癌细胞中，HER2蛋白可比正常细胞中多表现高达100倍(每细胞两百万对比20，000)。此过度表现引起强烈且恒定的增殖信号传导，因此形成肿瘤。HER2的过度表现也引起检查点失活，允许增殖增加更大。
[1212] 在本发明的化合物中，Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分。在一替代具体实例中，Ab可为能够结合于目标细胞，优选动物细胞且更优选人类细胞的任何适合的药剂。此类药剂的实例包括淋巴因子、激素、生长因子及养分输送分子(例如运铁蛋白)。在另一实例中，Ab可为适体，且可包括核酸或肽适体。
[1213] 在Ab为包含至少一个抗原结合位点的部分的情况下，部分优选为抗原结合肽或多肽。在一优选的具体实例中，部分为抗体或其抗原结合片段。
[1214] 在本发明的药物共轭物中术语“抗体”是指任何免疫球蛋白，优选全长免疫球蛋白。优选地，所述术语涵盖单株抗体、多株抗体、多特异性抗体(诸如双特异性抗体)及其抗体片段，只要抗体片段展现所需生物活性即可。抗体可来源于任何物种。但优选来源于啮齿动物，例如大鼠或小鼠、人类或兔来源。可替代地，抗体、优选单株抗体可为人类化抗体、嵌合抗体或其抗体片段。术语“嵌合抗体”也可包括“灵长类源化”抗体，其包含来源于非人类灵长类动物(例如旧大陆猴、猿等)的可变域抗原结合序列及人类恒定区序列。免疫球蛋白分子可为任何类型(例如IgG、IgE、IgM、IgD及IgA)、类别(例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgAl及IgA2)或子类别的免疫球蛋白分子。
[1215] 术语“单株抗体”是指通过B谱系细胞的单一纯系、常常杂交瘤产生的实质上均质的抗体分子群体(也即，构成所述群体的个别抗体除可能天然存在的可少量存在的突变以外其他均一致)。重要地，各单株具有相同抗原特异性，也即其针对抗原上的单一决定子。
[1216] 单株抗体可通过本技术领域中已知的方法产生。然而，举例而言，单株抗体可通过杂交瘤方法(Kohler等人(1975)Nature 256:495)、人类B细胞杂交瘤技术(Kozbor等人，1983，Immunology Today 4:72)或EBV‑杂交瘤技术(Cole等人，1985，Monoclonal
Antibodies and Cancer Therapy，Alan R.Liss，公司，第77‑96页)制造。可替代地，可使用重组DNA方法(参见US 4816567)产生单株抗体，或使用以下中所述的技术，自噬菌体抗体文库分离：Clackson等人(1991)Nature，352:624‑628；Marks等人(1991)J.Moi.Biol.，222:
581‑597。
Antibodies and Cancer Therapy，Alan R.Liss，公司，第77‑96页)制造。可替代地，可使用重组DNA方法(参见US 4816567)产生单株抗体，或使用以下中所述的技术，自噬菌体抗体文库分离：Clackson等人(1991)Nature，352:624‑628；Marks等人(1991)J.Moi.Biol.，222:
581‑597。
[1217] 多株抗体为针对不同决定子(抗原决定基)的抗体。此非均质的抗体群体可使用本技术领域中熟知的多种程序自免疫动物的血清获得。
[1218] 术语“双特异性抗体”是指由两种不同单株抗体构成的人工抗体。其可经设计以结合于单一抗原上的任一至两个相邻抗原决定基，借此增加亲合力与特异性，或结合两种不同抗原用于大量应用，但特定地，用于募集细胞毒性T细胞及自然杀伤(NK)细胞，或毒素、放射核种或细胞毒性药物的再靶向以进行癌症治疗(HollIgEr及Hudson，Nature BIotechnology，2005，23(9)，1126‑1136)。双特异性抗体可在一个臂中具有具第一结合特异性的混杂免疫球蛋白重链及在另一臂中具有混杂免疫球蛋白重链‑轻链对(提供第二结合特异性)。此不对称结构有助于所需双特异性化合物自非所需的免疫球蛋白链组合分离，因为双特异性分子仅二分之一中存在免疫球蛋白轻链提供一种便捷的分离方式(WO 94/
04690；Suresh等人，Methods in Enzymology，1986，121:210；Rodrigues等人，1993，J.of Immunology 151:6954‑6961；Carter等人，1992，Bio/Technology 10:163‑167；Carter等人，1995，J.of Hematotherapy 4:463‑470；Merchant等人，1998，Nature Biotechnology
16:677‑681)。
04690；Suresh等人，Methods in Enzymology，1986，121:210；Rodrigues等人，1993，J.of Immunology 151:6954‑6961；Carter等人，1992，Bio/Technology 10:163‑167；Carter等人，1995，J.of Hematotherapy 4:463‑470；Merchant等人，1998，Nature Biotechnology
16:677‑681)。
[1219] 制备混杂或双特异性抗体的方法是本技术领域中已知的。在一种方法中，双特异性抗体可通过两种不同Fab或scFv模组的化学交联或基因融合使两种融合瘤融合成单一“四源杂交瘤”来产生(HollIgEr及Hudson，Nature Biotechnology，2005，23(9)，1126‑
1136)。
1136)。
[1220] 术语“嵌合”抗体是指其中不同部分来源于不同动物物种的抗体。举例而言，嵌合抗体可自小鼠获得可变区且自人类获得恒定区。相比之下，“人类化抗体”主要来自人类，即使其含有非人类部分。具体而言，人类化抗体为其中来自接受者的高变区的残基经来自具有所需特异性、亲和力及能力的诸如小鼠、大鼠、兔或非人类灵长类动物的非人类物种的高变区的残基(供者抗体)置换的人类免疫球蛋白(接受者抗体)。在一些情况下，人类免疫球蛋白的构架区(FR)残基经相应非人类残基置换。此外，人类化抗体可包含在接受者抗体或供体抗体中未发现的残基。进行这些修饰以进一步优化抗体效能。一般而言，人类化抗体将包含至少一个及典型地两个可变域的大致全部，其中高变环的全部或大致全部与非人类免疫球蛋白的高变环对应且FR的全部或大致全部为人类免疫球蛋白序列的FR。人类化抗体可视需要也包含免疫球蛋白恒定区(Fc)、典型地人类免疫球蛋白恒定区的至少一部分。
[1221] 诸如嵌合及人类化单株抗体的重组抗体可通过本技术领域中已知的重组DNA技术产生。完全人类抗体可使用不能表现内源性免疫球蛋白重链及轻链基因但可表现人类重链及轻链基因的转殖基因小鼠产生。转殖基因小鼠以正常方式用所选抗原进行免疫接种。针对抗原的单株抗体可使用常规的融合瘤技术获得。转殖基因小鼠具有的人类免疫球蛋白转殖基因在B细胞分化期间重排，且随后进行类别转换及体细胞突变。因此，使用此类技术，可产生治疗上适用的IgG、IgA、IgM及IgE抗体。关于用于产生人类抗体的此技术的综述，参见Lonberg及Huszar(1995，Int.Rev.Immunol.13:65‑93)。关于用于产生人类抗体及人类单株抗体的此技术及用于产生此类抗体的方案的详细论述，参见例如美国专利第5625126号、第
5633425号、第5569825号、第5661016号、第5545806号；各文献以全文引用的方式并入本文中。其他人类抗体可购自例如Abgenix公司(Freemont，CA)及Genpharm(San Jose，CA)。
5633425号、第5569825号、第5661016号、第5545806号；各文献以全文引用的方式并入本文中。其他人类抗体可购自例如Abgenix公司(Freemont，CA)及Genpharm(San Jose，CA)。
[1222] 本发明的药物共轭物中术语“抗原结合片段”是指全长抗体的一部分，其中抗体的此类抗原结合片段保留对应全长抗体的抗原结合功能。抗原结合片段可包含抗体可变区的一部分，所述部分包含选自CDR1、CDR2及CDR3的至少一个、两个、优选三个CDR。抗原结合片段也可包含免疫球蛋白轻链及重链的一部分。抗体片段的实例包括Fab、Fab'、F(ab')2、scFv、di‑scFv、sdAb及BiTE(双特异性T细胞接合分子)、Fv片段，包括纳米抗体、双功能抗体、双功能抗体‑Fc融合物、三功能抗体及四功能抗体；微型抗体；线性抗体；通过Fab表现文库产生的片段、抗个体基因型(抗Id)抗体、CDR(互补决定区)及以上各者中任一者的免疫特异性结合于目标抗原(诸如癌细胞抗原、病毒抗原或微生物抗原)的抗原决定基结合片段；单链或单域抗体分子，包括仅重链抗体，例如骆驼科VhH域及鲨鱼V‑NAR；以及由抗体片段形成的多特异性抗体。相比之下，称为“抗体”的全长抗体为包含VL及VH结构域以及完整轻链及重链恒定域的抗体。
[1223] 抗体也可具有一或多个效应功能，效应功能是指可归因于抗体的Fc区(天然序列Fc区或根据本技术领域中的方法进行工程化以改变受体结合的氨基酸序列变异Fc区)的生物活性。抗体效应功能的实例包括CIq结合；补体依赖性细胞毒性；Fc受体结合；抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)；吞噬作用；细胞表面受体(诸如B细胞受体；BCR)的下调等。
[1224] 抗体也可为功能活性片段(在本文中也称为免疫活性部分)、免疫特异性结合于目标抗原(诸如癌细胞抗原、病毒抗原或微生物抗原)的抗体衍生物或类似物或结合于肿瘤细胞的其他抗体。在此方面，功能活性意谓所述片段、衍生物或类似物能够引发识别的抗原与所述片段、衍生物或类似物源自的抗体所识别的抗原相同的抗个体基因型抗体。特定地，在一例示性具体实例中，免疫球蛋白分子的个体基因型的抗原性可通过缺失作为特异性识别抗原的CDR序列中的C端的构架及CDR序列来增强。为确定哪些CDR序列结合抗原，含有所述CDR序列的合成肽可与抗原一起通过本技术领域中已知的任何结合分析方法(例如BIA核心分析)用于结合分析中，参见例如Kabat等人，1991，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第五版，National Institute of Health，Bethesda，Md；Kabat E等人，1980，J.of Immunology 125(3):961‑969)。
[1225] 术语“抗体”也可包括抗体或其功能活性片段的融合蛋白，例如其中抗体在N端或C端经由共价键(例如肽键)与非所述抗体的另一蛋白质的氨基酸序列(或其部分，诸如所述蛋白质的至少10个、20个或50个氨基酸部分)融合。抗体或其片段可在恒定域的N端共价连接至其他蛋白质。
[1226] 此外，本发明的抗体或抗原结合片段可包括诸如通过共价附接任何类型的分子进行修饰的抗体或其抗原结合片段的类似物及衍生物，只要此类共价附接允许所述抗体保留其抗原结合免疫特异性即可。修饰的实例包括糖基化、乙酰化、聚乙二醇化、磷酸化、酰胺化、通过已知的保护基/阻隔基衍生化、蛋白水解裂解、连接至细胞抗体单元或其他蛋白质等。众多化学修饰中的任一者可通过已知的技术进行，所述技术包括(但不限于)特定化学裂解、乙酰化、甲酰化、在衣霉素(tunicamycin)存在下代谢合成等。另外，类似物或衍生物可含有一或多个非天然氨基酸。
[1227] 本发明的抗体或抗原结合片段也可在抗体的Fc结构域中具有修饰(例如取代、缺失或添加)。具体而言，修饰可在Fc‑铰链区中且引起对FcRn受体的结合增加(WO 97/
34631)。
34631)。
[1228] 在一个具体实例中，本发明的药物共轭物中的抗体可为可用于治疗疾病、优选癌症的任何抗体或其抗原结合片段，优选单株抗体。癌症可为乳癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、肾癌黑素瘤、白血病、肺癌、多发性骨髓瘤、淋巴瘤(例如霍奇金氏病及非霍奇金氏淋巴瘤)、实体肿瘤(诸如肉瘤及癌瘤)、黑素瘤、间皮瘤、骨肉瘤、卵巢癌及肾癌。在一个优选的具体实例中，癌症为肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌。在一个更优选的具体实例中，癌症为结肠直肠癌、乳癌、白血病、淋巴瘤及卵巢癌。
[1229] 可适用于治疗癌症的抗体包括(但不限于)针对以下抗原的抗体：CA125(卵巢)、CA15‑3(癌瘤)、CA19‑9(癌瘤)、L6(癌瘤)、Lewis Y(癌瘤)、Lewis X(癌瘤)、α胎蛋白(癌瘤)、CA 242(结肠直肠)、胎盘碱性磷酸酶(癌瘤)、前列腺特异性抗原(前列腺)、前列腺酸性磷酸酶(前列腺)、表皮生长因子(癌瘤)(例如EGF受体2蛋白(乳癌))、MAGE‑I(癌瘤)、MAGE‑2(癌瘤)、MAGE‑3(癌瘤)、MAGE‑4(癌瘤)、抗运铁蛋白受体(癌瘤)、p97(黑素瘤)、MUCl‑KLH(乳癌)、CEA(结肠直肠)、gplOO(黑素瘤)、MARTl(黑素瘤)、PSA(前列腺)、IL‑2受体(T细胞白血病及淋巴瘤)、CD20(非霍奇金氏淋巴瘤)、CD52(白血病)、CD33(白血病)、CD22(淋巴瘤)、人类绒毛膜促性腺素(癌瘤)、CD38(多发性骨髓瘤)、CD40(淋巴瘤)、黏蛋白(癌瘤)、P21(癌瘤)、MPG(黑素瘤)及Neu致癌基因产物(癌瘤)。一些适用的特定抗体包括(但不限于)BR96 mAb(Trail，P.A.等人，Science(1993)261，212‑215)、BR64(Ttrail，PA等人，Cancer ReseaRch(1997)57，100‑105)；针对CD40抗原的mAb，诸如S2C6 mAb(Francisco，J.A.等人，Cancer Res.(2000)60:3225‑3231)；针对CD70抗原的mAb，诸如1F6 mAb；及针对CD30抗原的mAb，诸如AClO(Bowen，M.A.等人，(1993)J.Immunol.，151:5896‑5906；Wahl等人，
2002Cancer Res.62(13):3736‑3742)。可使用结合于肿瘤相关抗原的许多其他内化抗体且已予以评述(Franke，A.E.等人，Cancer Biother Radiopharm.(2000)15:459‑476；Murray，J.L.，(2000)Semin Oncol，27:64‑70；Breitling，F.及Dubel，S.，Recombinant
Antibodies，John Wiley，and Sons，New York，1998)。
2002Cancer Res.62(13):3736‑3742)。可使用结合于肿瘤相关抗原的许多其他内化抗体且已予以评述(Franke，A.E.等人，Cancer Biother Radiopharm.(2000)15:459‑476；Murray，J.L.，(2000)Semin Oncol，27:64‑70；Breitling，F.及Dubel，S.，Recombinant
Antibodies，John Wiley，and Sons，New York，1998)。
[1230] 本发明涵盖治疗与这些抗体相关的癌症。
[1231] 其他肿瘤相关抗原包括(但不限于)：BMPR1B、E16、STEAP1、STEAP2、0772P、MPF、Napi3b、Sema5b、PSCA hlg、ETBR、MSG783、TrpM4、CRIPTO、CD21、CD79b、FcRH2、HER2、NCA、MDP、IL20Rα、Brevican、EphB2R、ASLG659、PSCA、GEDA、BAFF‑R、CD79A、CXCR5、HLA‑DOB、P2X5、CD72、LY64、FCRH1、IRTA2及TENB2。
[1232] 在一替代具体实例中，本发明的药物共轭物中的抗体可为免疫特异性结合于病毒抗原、微生物抗原或产生与自体免疫性疾病相关的自体免疫抗体的细胞的抗原的抗体或其抗原结合片段，优选单株抗体。
[1233] 病毒抗原可包括(但不限于)诸如HIV gpl20、HIV nef、RSV F糖蛋白、流感病毒神经氨糖酸苷酶、流感病毒红血球凝集素、HTLV tax、单纯疱疹病毒糖蛋白(例如Gb、Gc、Gd及Ge)及B型肝炎表面抗原的能够引发免疫反应的任何病毒肽、多肽或蛋白质。
[1234] 微生物抗原可包括(但不限于)能够引发免疫反应的任何微生物肽、多肽、蛋白质、糖、多糖或脂质分子(例如细菌、真菌、病原性原虫或酵母多肽，包括例如LPS及荚膜多糖)。
[1235] 在另一具体实例中，抗体或抗原结合片段结合于诸如肿瘤细胞的细胞上存在的抗原决定基。优选地，在细胞为肿瘤细胞的情况下，肿瘤细胞抗原决定基不存在于非肿瘤细胞上，或以较低浓度或以不同于肿瘤细胞中的空间组态存在。
[1236] 在一个具体实例中，抗体或抗原结合片段结合于在以下抗原中的一者的情况下存在的抗原决定基：CA125、CA15‑3、CA19‑9 L6、Lewis Y、Lewis X、α胎蛋白、CA 242、胎盘碱性磷酸酶、前列腺特异性抗原、前列腺酸性磷酸酶、表皮生长因子(例如EGF受体2蛋白)、MAGE‑I、MAGE‑2、MAGE‑3、MAGE‑4、抗运铁蛋白受体、p97、MUCl‑KLH、CEA、gplOO、MARTl、PSA、IL‑2受体、CD20、CD52、CD33、CD22、人类绒毛膜促性腺素、CD38、CD40、黏蛋白、P21、MPG、Neu致癌基因产物、BMPR1B、E16、STEAP1、STEAP2、0772P、MPF、Napi3b、Sema5b、PSCA hlg、ETBR、MSG783、TrpM4、CRIPTO、CD21、CD79b、FcRH2、HER2、NCA、MDP、IL20Rα、短蛋白聚糖(Brevican)、EphB2R、ASLG659、PSCA、GEDA、BAFF‑R、CD79A、CXCR5、HLA‑DOB、P2X5、CD72、LY64、FCRH1、IRTA2、TENB2、病毒抗原(如诸如HIV gpl20、HIV nef、RSV F糖蛋白、流感病毒神经氨糖酸苷酶、流感病毒红血球凝集素、HTLV tax、单纯疱疹病毒糖蛋白(例如Gb、Gc、Gd及Ge)及B型肝炎表面抗原的能够引发免疫反应的任何病毒肽、多肽或蛋白质)、微生物抗原(能够引发免疫反应的任何微生物肽、多肽、蛋白质、糖、多糖或脂质分子(例如细菌、真菌、病原性原虫或酵母多肽，包括例如LPS及荚膜多糖))或产生与自体免疫性疾病相关的自体免疫抗体的细胞的抗原。
[1237] 在一个具体实例中，在抗原为ErBB2(也称为ErBB2、CD340或HER2；此类术语可互换使用)的情况下，抗体或抗原结合片段可结合于以下抗原决定基中的一或多者：ARHC L(SEQ ID NO:1)、QNGS(SEQ ID NO:2)及PPFCVARC PSG(SEQ ID NO:3)。这些抗原决定基分别与人类HER2多肽序列的位置557‑561、570‑573及593‑603对应(寄存号：NM_004448，版本：NM_004448.3)。
[1238] 在另一具体实例中，抗体可为已知用于治疗或预防病毒或微生物感染，也即感染性疾病的任何抗体。此类抗体的实例包括(但不限于)PRO542(Progenies)，其为适用于治疗HIV感染的CD4融合抗体；OsTAVIR(Protein Design Labs公司，CA)，其为适用于治疗B型肝炎病毒的人类抗体；PROTOVIR.(Protein Design Labs公司，CA)，其为适用于治疗细胞巨大病毒(CMV)的人类化IgG1抗体；以及抗LPS抗体。
[1239] 可用于治疗感染性疾病的其他抗体包括(但不限于)针对来自以下的病原性菌株的抗原的抗体：细菌(化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)、肺炎链球菌
(Streptococcus pneumoniae)、奈瑟氏淋球菌(Neisseria gonorrheae)、奈瑟氏脑膜炎菌(Neisseria meningitidis)、白喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheriae)、肉毒梭菌(Clostridium botulinum)、产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)、破伤风梭菌
(Clostridium tetani)、流感嗜血杆菌(Hemophilus influenzae)、肺炎克雷伯氏杆菌
(Klebsiella pneumoniae)、臭鼻克雷伯氏杆菌(Klebsiella ozaenas)、鼻硬结克雷伯氏杆菌(Klebsiella rhinoscleromotis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、霍乱弧菌(Vibrio colerae)、大肠杆菌(Escherichia coli)、绿脓杆菌(Pseudomonas
aeruginosa)、胚胎弯曲杆菌(Campylobacter fetus)(弧菌)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)、迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)、小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)、鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia
pestis)、假结核耶尔森氏菌(Yersinia pseudotuberculosis)、痢疾志贺氏菌(Shigella dysenteriae)、弗氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、宋内氏志贺氏菌(Shigella sonnei)、鼠伤寒沙门杆菌(Salmonella typhimurium)、梅毒密螺旋体(Treponema pallidum)、细弱密螺旋体(Treponema pertenue)、斑点病密螺旋体(Treponema carateneum)、奋森氏疏螺旋体(Borrelia vincentii)、伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)、出血性黄疸钩端螺旋体(LeptospiRa icterohernorrhagiae)、结核分枝杆菌(Mycobacterium
tuberculosis)、肺炎肺囊虫(Pneumocystis carinii)、土拉弗朗西斯菌(Francisella
tularensis)、流产布鲁氏菌(Brucella abortus)、猪布鲁氏菌(Brucella suis)、羊布鲁氏杆菌(Brucella melitensis)、支原体属(Mycoplasma spp.)、普氏立克次氏体(Rickettsia prowazeki)、恙虫病立克次氏体(Rickettsia tsutsugumushi)、披衣菌属(Chlamydia
spp.))；病原性真菌(粗球孢子菌(Coccidioides immitis)、烟曲霉菌(Aspergillus
fumigatus)、白色念珠菌(Candida albicans)、皮炎芽生菌(Blastomyces dermatitidis)、新型隐球菌(Cryptococcus neoformans)、荚膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum))；
原生动物(溶组织内阿米巴(Entomoeba histolytica)、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)、口腔毛滴虫(Trichomonas tenas)、人毛滴虫(Trichomonas hominis)、阴道毛滴虫
(Trichomonas vaginalis)、冈比亚锥虫(Tryoanosoma gambiense)、罗得西亚锥虫
(Trypanosoma rhodesiense)、克氏锥虫(Trypanosoma cruzi)、杜氏利什曼原虫
(Leishmania donovani)、热带利什曼原虫(Leishmania tropica)、巴西利什曼原虫
(Leishmania braziliensis)、肺炎肺囊虫(Pneumocystis pneumonia)、间日疟原虫
(Plasmodium vivax)、恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)、疟疾疟原虫(Plasmodium malaria))；或蠕虫(蠕形住肠线虫(Enterobius vermicularis)、毛首鞭形线虫(Trichuris trichiura)、似蚓蛔线虫(Ascaris lu mbricoides)、旋毛形线虫(Trichinella
spiralis)、肠类圆线虫(Strongyloides stercoralis)、日本血吸虫(Schistosoma
japonicum)、曼氏血吸虫(Schistosoma mansoni)、埃及血吸虫(Schistosoma
haematobium)及钩虫)。
(Streptococcus pneumoniae)、奈瑟氏淋球菌(Neisseria gonorrheae)、奈瑟氏脑膜炎菌(Neisseria meningitidis)、白喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheriae)、肉毒梭菌(Clostridium botulinum)、产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)、破伤风梭菌
(Clostridium tetani)、流感嗜血杆菌(Hemophilus influenzae)、肺炎克雷伯氏杆菌
(Klebsiella pneumoniae)、臭鼻克雷伯氏杆菌(Klebsiella ozaenas)、鼻硬结克雷伯氏杆菌(Klebsiella rhinoscleromotis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、霍乱弧菌(Vibrio colerae)、大肠杆菌(Escherichia coli)、绿脓杆菌(Pseudomonas
aeruginosa)、胚胎弯曲杆菌(Campylobacter fetus)(弧菌)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)、迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)、小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)、鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia
pestis)、假结核耶尔森氏菌(Yersinia pseudotuberculosis)、痢疾志贺氏菌(Shigella dysenteriae)、弗氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、宋内氏志贺氏菌(Shigella sonnei)、鼠伤寒沙门杆菌(Salmonella typhimurium)、梅毒密螺旋体(Treponema pallidum)、细弱密螺旋体(Treponema pertenue)、斑点病密螺旋体(Treponema carateneum)、奋森氏疏螺旋体(Borrelia vincentii)、伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)、出血性黄疸钩端螺旋体(LeptospiRa icterohernorrhagiae)、结核分枝杆菌(Mycobacterium
tuberculosis)、肺炎肺囊虫(Pneumocystis carinii)、土拉弗朗西斯菌(Francisella
tularensis)、流产布鲁氏菌(Brucella abortus)、猪布鲁氏菌(Brucella suis)、羊布鲁氏杆菌(Brucella melitensis)、支原体属(Mycoplasma spp.)、普氏立克次氏体(Rickettsia prowazeki)、恙虫病立克次氏体(Rickettsia tsutsugumushi)、披衣菌属(Chlamydia
spp.))；病原性真菌(粗球孢子菌(Coccidioides immitis)、烟曲霉菌(Aspergillus
fumigatus)、白色念珠菌(Candida albicans)、皮炎芽生菌(Blastomyces dermatitidis)、新型隐球菌(Cryptococcus neoformans)、荚膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum))；
原生动物(溶组织内阿米巴(Entomoeba histolytica)、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)、口腔毛滴虫(Trichomonas tenas)、人毛滴虫(Trichomonas hominis)、阴道毛滴虫
(Trichomonas vaginalis)、冈比亚锥虫(Tryoanosoma gambiense)、罗得西亚锥虫
(Trypanosoma rhodesiense)、克氏锥虫(Trypanosoma cruzi)、杜氏利什曼原虫
(Leishmania donovani)、热带利什曼原虫(Leishmania tropica)、巴西利什曼原虫
(Leishmania braziliensis)、肺炎肺囊虫(Pneumocystis pneumonia)、间日疟原虫
(Plasmodium vivax)、恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)、疟疾疟原虫(Plasmodium malaria))；或蠕虫(蠕形住肠线虫(Enterobius vermicularis)、毛首鞭形线虫(Trichuris trichiura)、似蚓蛔线虫(Ascaris lu mbricoides)、旋毛形线虫(Trichinella
spiralis)、肠类圆线虫(Strongyloides stercoralis)、日本血吸虫(Schistosoma
japonicum)、曼氏血吸虫(Schistosoma mansoni)、埃及血吸虫(Schistosoma
haematobium)及钩虫)。
[1240] 适用于治疗病毒性疾病的其他抗体包括(但不限于)针对病原性病毒的抗原的抗体，所述病原性病毒包括例如且不限于：痘病毒科(Poxviridae)、疱疹病毒科
(Herpesviridae)、单纯疱疹病毒1型(Herpes Simplex virus 1)、单纯疱疹病毒2型
(Herpes Simplex virus 2)、腺病毒科(Adenoviridae)、乳多空病毒科(Papovaviridae)、肠病毒科(Enteroviridae)、小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)、细小病毒科
(Parvoviridae)、呼肠孤病毒科(Reoviridae)、逆转录病毒科(Retroviridae)、流感病毒(influenza viruses)、副流感病毒(parainfluenza viruses)、腮腺炎、麻疹、呼吸道合胞病毒、风疹、虫媒病毒科(Arboviridae)、弹状病毒科(Rhabdoviridae)、沙粒病毒科
(Arenaviridae)、A型肝炎病毒、B型肝炎病毒、C型肝炎病毒、E型肝炎病毒、非A型/非B型肝炎病毒、鼻病毒科(Rhinoviridae)、冠状病毒科(Coronaviridae)、轮状病毒科
(Rotoviridae)及人类免疫缺陷病毒。
(Herpesviridae)、单纯疱疹病毒1型(Herpes Simplex virus 1)、单纯疱疹病毒2型
(Herpes Simplex virus 2)、腺病毒科(Adenoviridae)、乳多空病毒科(Papovaviridae)、肠病毒科(Enteroviridae)、小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)、细小病毒科
(Parvoviridae)、呼肠孤病毒科(Reoviridae)、逆转录病毒科(Retroviridae)、流感病毒(influenza viruses)、副流感病毒(parainfluenza viruses)、腮腺炎、麻疹、呼吸道合胞病毒、风疹、虫媒病毒科(Arboviridae)、弹状病毒科(Rhabdoviridae)、沙粒病毒科
(Arenaviridae)、A型肝炎病毒、B型肝炎病毒、C型肝炎病毒、E型肝炎病毒、非A型/非B型肝炎病毒、鼻病毒科(Rhinoviridae)、冠状病毒科(Coronaviridae)、轮状病毒科
(Rotoviridae)及人类免疫缺陷病毒。
[1241] 在一替代具体实例中，本发明的药物共轭物的抗体也可为已知用于治疗预防自体免疫性病症的任何抗体，所述自体免疫性病症诸如(但不限于)Th2淋巴球相关病症(例如异位性皮肤炎、特应性哮喘、鼻结膜炎、过敏性鼻炎、欧门氏症候群(Omenn's syndrome)、全身性硬化症及移植物抗宿主疾病)；Th1淋巴球相关病症(例如类风湿性关节炎、多发性硬化症、牛皮癣、斯耶格伦氏症候群(Sjorgren's syndrome)、桥本氏甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis)、格雷氏病(Grave's disease)、原发性胆汁性肝硬化、韦格纳氏肉芽肿病(Wegener's granulomatosis)及肺结核)；活化B淋巴球相关病症(例如全身性红斑狼疮、肺出血‑肾炎综合征(Goodpasture's syndrome)、类风湿性关节炎及I型糖尿病)；以及活动性慢性肝炎、艾迪森氏病(Addison's Disease)、过敏性肺泡炎(Allergic Alveolitis)、过敏性反应、过敏性鼻炎、阿尔波特氏症候群(Alport's Syndrome)、全身性过敏反应、僵直性脊椎炎、抗磷脂抗体症候群、关节炎、蛔虫病、曲霉病、异位性过敏、萎缩性皮肤炎、萎缩性鼻炎、白塞氏病(Behcet's Disease)、养鸟者肺病(Bird‑Fancier's Lung)、支气管哮喘、卡普兰氏症候群(Caplan's Syndrome)、心肌病、乳糜泻、恰加斯氏病(Chagas'Disease)、慢性丝球体肾炎、科干氏症候群(Cogan's Syndrome)、冷凝集素病、先天性风疹感染、CREST症候群、克罗恩氏病(Crohn's Disease)、冷凝球蛋白血症、库欣氏症候群(Cushing's Syndrome)、皮肌炎、盘状狼疮、德莱塞症候群(Dresser's Syndrome)、伊顿‑兰伯特症候群(Eaton‑Lambert Syndrome)、埃可病毒感染(Echovirus infection)、脑脊髓炎、内分泌性眼病、艾伯斯坦‑巴尔病毒感染(Epstein‑Barr Virus infection)、马气喘病、红斑、伊文氏综合征(Evan's Syndrome)、费尔蒂氏症候群(Felty's Syndrome)、肌肉纤维疼痛、法曲氏睫状体炎(Fuch's Cyclitis)、胃萎缩、胃肠道过敏、巨细胞动脉炎、丝球体肾炎、肺出血‑肾炎综合征(Goodpasture's Syndrome)、移植物抗宿主疾病、格雷夫氏病、格林‑巴利病
(Guillain‑Barre Disease)、桥本氏甲状腺炎、溶血性贫血、亨诺‑许兰紫癜(Henoch‑Schonlein Purpura)、特发性肾上腺萎缩、特发性肺纤维化、IgA肾病、发炎性肠病、胰岛素依赖型糖尿病、幼年型关节炎、幼年型糖尿病(I型)、兰伯特‑伊顿综合症(Lambert‑Eaton Syndrome)、蹄叶炎、扁平苔癣、类狼疮肝炎、狼疮性淋巴球减少症、美尼尔病(Meniere's Disease)、混合性结缔组织病、多发性硬化症、重症肌无力、恶性贫血、多腺症候群、早老性痴呆、原发性无γ球蛋白血症、原发性胆汁性肝硬化、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、雷诺现象(Raynauds Phenomenon)、复发性流产、莱特尔氏症候群(Reiter's Syndrome)、风湿热、类风湿性关节炎、萨姆普特氏症候群(Sampter's Syndrome)、血吸虫病、施密特氏症候群
(Schmidt's Syndrome)、硬皮病、舒尔曼氏症候群(Shulman's Syndrome)、斯耶格伦氏症候群、僵人症候群、交感性眼炎、全身性红斑狼疮、高安氏动脉炎(Takayasu's Arteritis)、颞动脉炎、甲状腺炎、血小板减少症、甲状腺中毒症、中毒性表皮坏死松解症、B型胰岛素抗性、I型糖尿病、溃疡性结肠炎、葡萄膜炎、白斑病、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症及韦格纳氏肉芽肿病。
(Guillain‑Barre Disease)、桥本氏甲状腺炎、溶血性贫血、亨诺‑许兰紫癜(Henoch‑Schonlein Purpura)、特发性肾上腺萎缩、特发性肺纤维化、IgA肾病、发炎性肠病、胰岛素依赖型糖尿病、幼年型关节炎、幼年型糖尿病(I型)、兰伯特‑伊顿综合症(Lambert‑Eaton Syndrome)、蹄叶炎、扁平苔癣、类狼疮肝炎、狼疮性淋巴球减少症、美尼尔病(Meniere's Disease)、混合性结缔组织病、多发性硬化症、重症肌无力、恶性贫血、多腺症候群、早老性痴呆、原发性无γ球蛋白血症、原发性胆汁性肝硬化、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、雷诺现象(Raynauds Phenomenon)、复发性流产、莱特尔氏症候群(Reiter's Syndrome)、风湿热、类风湿性关节炎、萨姆普特氏症候群(Sampter's Syndrome)、血吸虫病、施密特氏症候群
(Schmidt's Syndrome)、硬皮病、舒尔曼氏症候群(Shulman's Syndrome)、斯耶格伦氏症候群、僵人症候群、交感性眼炎、全身性红斑狼疮、高安氏动脉炎(Takayasu's Arteritis)、颞动脉炎、甲状腺炎、血小板减少症、甲状腺中毒症、中毒性表皮坏死松解症、B型胰岛素抗性、I型糖尿病、溃疡性结肠炎、葡萄膜炎、白斑病、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症及韦格纳氏肉芽肿病。
[1242] 抗体针对负责产生自体免疫抗体的细胞的抗原的免疫特异性可通过本领域技术人员已知的任何方法，诸如化学合成或重组表现技术产生。自体免疫抗体的实例包括(但不限于)抗核抗体；抗ds DNA；抗ss DNA、抗心磷脂抗体IgM、IgG；抗磷脂抗体IgM、IgG；抗SM抗体；抗粒线体抗体；甲状腺抗体；微粒体抗体；甲状球蛋白抗体；抗SCL‑70；抗Jo；抗U1RNP；抗La/SSB；抗SSA；抗SSB；抗壁细胞抗体；抗组蛋白；抗RNP；C‑ANCA；P‑ANCA；抗着丝点；抗纤维蛋白及抗GBM抗体。
[1243] 在另一具体实例中，本发明的药物共轭物的抗体可为结合于在活化淋巴球上表现的受体或受体复合物，诸如与自体免疫性疾病相关的受体或受体复合物的抗体。所述受体或受体复合物可包含免疫球蛋白基因超家族成员、TNF受体超家族成员、整合素、介白素、细胞介素受体、趋化因子受体、主要组织相容蛋白、凝集素或补体控制蛋白。合适免疫球蛋白超家族成员的非限制性实例为CD2、CD3、CD4、CD5、CD8、CD13、CD19、CD22、CD28、CD79、CD90、CD152/CTLA‑4、PD‑I及ICOS。合适TNF受体超家族成员的非限制性实例为CD27、CD40、CD95/Fas、CD134/OX40、CD137/4‑1BB、TNF‑Rl、TNFR‑2、RANK、TACI、BCMA、骨保护素、ApO2/TRAEL‑Rl、TAIL‑R2、TAIL‑R3、TRABL‑R4及APO‑3。合适整合素的非限制性实例为CDl Ia、CDlIb、CDlIc、CD18、CD29、CD41、CD49a、CD49b、CD49c、CD49d、CD49e、CD49f、CD103及CD104。合适凝集素的非限制性实例为C型、S型及I型凝集素。
[1244] 结合所关注的分子目标或抗原，例如ErbB2抗原的抗体为能够以足够亲和力结合所述抗原，使得抗体可用于靶向表现所述抗原的细胞的抗体。在抗体为结合ErbB2的抗体的情况下，通常与其他ErbB受体相反，其优先结合ErbB2，且可为不与诸如EGFR、ErbB 3或ErbB4的其他蛋白质显著交叉反应的抗体。在此类具体实例中，如通过萤光活化细胞分选(FACS)分析或放射免疫沉淀(RIA)所测定，抗体与这些非ErbB2蛋白的结合程度(例如与内源性受体的细胞表面结合)将小于10％。有时，抗ErbB2抗体不与大鼠neu蛋白显著交叉反应，例如如Schecter等人，Nature 312:513‑516(1984)及Drebin等人，Nature 312:545‑548(1984)中所述。
[1245] 在另一具体实例中，本发明的药物共轭物的抗体或目标可选自以下表中的抗体或目标。此类抗体对目标抗原具有免疫特异性，且可购得，或通过本技术领域中已知的任何方法(诸如重组表现技术)产生。
[1246] 表1：治疗性单株抗体
[1247]
[1248]
[1249]
[1250]
[1251]
[1252]
[1253]
[1254]
[1255]
[1256]
[1257]
[1258]
[1259]
[1260] 除以上之外，本发明的药物抗体共轭物的抗体可为Vitaxin，其为用于治疗肉瘤的人类化抗体；Smart IDIO，其为用于治疗非霍奇金氏淋巴瘤的人类化抗HLA‑DR抗体；Oncolym，其为用于治疗非霍奇金氏淋巴瘤的放射性标记鼠类抗HLA‑DrlO抗体；以及
Allomune，其为用于治疗霍奇金氏病或非霍奇金氏淋巴瘤的人类化抗CD2 mAb。
Allomune，其为用于治疗霍奇金氏病或非霍奇金氏淋巴瘤的人类化抗CD2 mAb。
[1261] 本发明的药物共轭物的抗体也可为已知用于治疗任何疾病，优选癌症的任何抗体片段。同样，此类抗体片段对目标抗原具有免疫特异性，且可购得，或通过本技术领域中已知的任何方法(诸如重组表现技术)产生。可利用的此类抗体的实例包括来自下表的任一者。
[1262] 表2：治疗性单株抗体片段
[1263]
[1264]
[1265]
[1266]
[1267] Fab抗原结合片段(一臂)
[1268] F(ab')2抗原结合片段，包括铰链区(两个臂)
[1269] Fab'抗原结合片段，包括铰链区(一个臂)
[1270] scFv单链可变片段
[1271] di‑scFv二聚单链可变片段
[1272] (Holliger及Hudson，Nature Biotechnology，2005，23(9)，1126‑1136)。
[1273] 在一优选的具体实例中，本发明的药物共轭物中的抗体靶向细胞表面抗原。
[1274] 在优选的具体实例中，本发明的药物共轭物中的抗体可结合于由ErbB基因编码的受体。抗体可特异性结合于选自EGFR、HER2、HER3及HER4的ErbB受体。优选地，药物共轭物中的抗体可特异性结合于HER2受体的细胞外域且抑制过度表现所述HER2受体的肿瘤细胞的生长。药物共轭物的抗体可为单株抗体，例如鼠类单株抗体、嵌合抗体或人类化抗体。优选地，人类化抗体可为huMAb4D5‑1、huMAb4D5‑2、huMAb4D5‑3、huMAb4D5‑4、huMAb4D5‑5、huMAb4D5‑6、huMAb4D5‑7或huMAb4D5‑8(曲妥珠单抗)，尤其优选曲妥珠单抗。抗体也可为抗体片段，例如Fab片段。
[1275] 其他优选抗体包括：
[1276] (i)抗CD4抗体。药物共轭物的抗体可为单株抗体，例如鼠类单株抗体、嵌合抗体或人类化抗体；
[1277] (ii)抗CD5抗体。药物共轭物的抗体可为单株抗体，例如鼠类单株抗体、嵌合抗体或人类化抗体；
[1278] (iii)抗CD13抗体。药物共轭物的抗体可为单株抗体，例如鼠类单株抗体、嵌合抗体或人类化抗体；
[1279] (iv)抗CD20抗体。药物共轭物的抗体可为单株抗体，例如鼠类单株抗体、嵌合抗体或人类化抗体。优选地，人类化抗体为利妥昔单抗或其抗体片段，例如Fab片段；以及
[1280] (v)抗CD30抗体。药物共轭物的抗体可为单株抗体，例如鼠类单株抗体、嵌合抗体或人类化抗体。优选地，人类化抗体为本妥昔单抗维多汀或其抗体片段。
[1281] 在本发明的一个具体实例中，药物抗体共轭物可显示以下各者中的一或多者：(i)细胞毒性增加(或细胞存活减少)、(ii)细胞生长抑制活性(细胞生长抑制)增加、(iii)与目标抗原或抗原决定基结合的亲和力增加、(iv)共轭物内化增加、(v)患者副作用减轻及/或(vi)毒性特征改善。此类增加可相对于本技术领域中结合相同或不同抗原决定基或抗原的已知药物抗体共轭物。
[1282] 用于制备药物抗体共轭物的方法
[1283] 本发明的药物抗体共轭物可根据本技术领域中熟知的技术制备。使用不同方法将包含至少一个抗原结合位点的共轭部分，诸如抗体与大量不同药物共轭的方法先前已描述及例示于例如WO‑A‑2004/010957、WO‑A‑2006/060533及WO‑A‑2007/024536中，其内容以引入的方式并入本文中。这些包括使用连接基团，所述连接基团以使药物、毒素或放射性核素接着可附接至诸如抗体的部分的方式将药物、毒素或放射性核素衍生化。典型地，通过三个途径之一附接至诸如抗体的部分：经由抗体中的二硫基部分还原之后半胱氨酸中的自由硫醇基；经由抗体中的离氨酸中的自由氨基；以及经由抗体中的丝氨酸及/或苏氨酸中的自由羟基。附接方法视诸如抗体的部分上附接的位点而变化。也描述了通过尺寸排阻层析(SEC)纯化抗体‑药物共轭物[参见例如Liu等人，Proc.Natl.Acad.Set(USA)，93:8618‑8623(1996)及Chari等人，Cancer Research，52:127‑131(1992)]。
[1284] 如前所指出，本发明的药物共轭物的药物有效负载为国际专利申请案第PCT/EP2018/060868号中所公开或在其范畴内的依特那斯汀衍生物，所述专利申请案的内容以引用的方式并入本文中。这些化合物根据本申请案中所述的方法合成。
[1285] 如前面所指出，提供一种制备根据本发明的药物共轭物的方法，其包含使包含至少一个抗原结合位点的部分Ab与式(IH)、(IHa)或(IHb)的药物D共轭，Ab及D如本文所定义。
[1286] 制备本发明的药物共轭物的方法的一实例包括制备如下本发明的式(G)或(G')的药物抗体共轭物：
[1287]
[1288]
[1289] 所述方法包含以下步骤：
[1290] (i)使式(IH)‑H的药物(D‑H)：
[1291]
[1292] 其中(IH)‑H的定义中的取代基如上文关于式(IH)所定义，与式(D')或(E)的化合物反应：
[1293]
[1294] 分别得到式(F)或(F')的化合物：
[1295]
[1296] (ii)使待共轭的抗体中的一或多个二硫键部分还原，得到经还原的具有自由硫醇基的抗体Ab‑SH：
[1297] 二硫键还原Ab‑SH；以及
[1298] (iii)使经部分还原的具有自由硫醇基的抗体Ab‑SH与步骤(i)中产生的式(F)或(F')的化合物反应，分别得到式(G)或(G')的所需药物抗体共轭物：
[1299]
[1300] 在此方法的另一个优选的具体实例中，所述抗体选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体，或其抗原结合片段或免疫活性部分，或其选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，且其最优选为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。此外，此单株抗体的部分还原使用三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)进行。
[1301] 用于制备本发明的药物共轭物的方法的另一实例包括制备如下式(W)或(W')的药物抗体共轭物：
[1302]
[1303] 所述方法包含以下步骤：
[1304] (i)使所述抗体与2‑亚氨基硫杂环戊烷盐酸盐(特氏试剂(Traut′s reagent))反应，得到硫醇活化的抗体：
[1305]
[1306] (ii)使所述硫醇活化的抗体与所述式(F)或(F')的化合物反应，分别得到式(W)或(W')的所需药物抗体共轭物。
[1307]
[1308]
[1309] 在此方法的另一个优选的具体实例中，所述抗体选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、奥英妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD13抗体及抗CD 30抗体，或其抗原结合片段或免疫活性部分，或其选自曲妥珠单抗及抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，且其最优选为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分。
[1310] 用于制备本发明的药物抗体共轭物的方法的另一实例包括制备如下式(O)或(P)的药物抗体共轭物：
[1311]
[1312] 所述方法包含以下步骤：
[1313] (i)：
[1314] (a)使式(IH)‑H的药物(D‑H)：
[1315]
[1316] 其中(IH)‑H的定义中的取代基如上所定义，与其中X1及X2为离去基的式X2‑C(O)‑X1的化合物反应，得到式(B)化合物：
[1317]
[1318] 且所述‑(C＝O)X1部分的附接点为式D‑H的化合物的自由‑NH2基团，或
[1319] (b)使如上所定义的式(IH)‑H的药物(D‑H)与4‑硝基‑苯基氯甲酸酯反应，得到式(J)化合物：
[1320]
[1321] 且所述(4‑硝基苯基)‑O‑CO‑基团的附接点与以上(a)中的X1(CO)部分的附接点相同；
[1322] (ii)：
[1323] (c)使步骤(i)中产生的所述式(B)化合物与式HO‑(CH2)1‑6NHProtNH的羟基化合物NH反应且自偶合的化合物移除Prot 基团，得到式(C)化合物：
[1324]
[1325] 且接着使式(C)化合物与式Me‑S‑S‑(CH2)1‑3‑CO2H的化合物反应，得到式(K)化合物：
[1326]
[1327] (d)使步骤(i)中产生的化合物(J)与式HO‑(CH2)1‑3SProtSH的化合物反应且自偶合SH的化合物移除Prot 基团，得到式(L)化合物：
[1328]
[1329] (iii)使步骤(ii)中产生的(K)或(L)与二硫苏糖醇在二硫键还原条件下反应，分别得到式(M)及(N)化合物：
[1330]
[1331] (iv)使待共轭的抗体与丁二酰亚胺基‑4‑(N‑顺丁烯二酰亚胺基甲基)环己烷‑1‑甲酸酯反应，以在一或多个离氨酸基处用丁二酰亚胺基‑4‑(N‑顺丁烯二酰亚胺基甲基)环己烷‑1‑羰基将所述抗体衍生化：
[1332]
[1333] (v)使步骤(iv)中产生的衍生抗体与步骤(iii)中产生的(M)或(N)反应，得到式(O)或(P)的所需药物抗体共轭物：
[1334]
[1335] 式X2‑C(O)‑X1的化合物优选为1，1'‑羰基二咪唑。类似地，与式(B)化合物反应的羟NH NH基化合物优选为HO‑(CH2)2‑4‑NHProt ，且更优选为HO‑(CH2)3‑NHProt 。
[1336] 在本发明的一个优选的具体实例中，与式(C)化合物反应得到式(K)化合物的化合物为3‑(甲基二硫烷基)丙酸。
[1337] 在另一优选的具体实例中，与式(J)化合物反应得到式(L)化合物的化合物HO‑SH SH
(CH2)1‑3SProt 为HO‑(CH2)3SProt 。
(CH2)1‑3SProt 为HO‑(CH2)3SProt 。
[1338] 在与药物连接部分的附接是经由诸如单株抗体的包含至少一个抗原结合位点的部分中的二硫键基团部分还原之后半胱氨酸中的自由硫醇基的情况下，所述部分还原典型地通过以下进行：首先稀释至合适浓度且缓冲溶液，接着借助于添加诸如三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)或二硫苏糖醇(DTT)的合适还原剂将二硫键部分还原。通过挑选诸如单株抗体的待还原的部分与还原剂的适当比率、还原的反应条件及时间，可获得所需的自由硫醇与部分的比率，例如每个单株抗体四个自由硫醇基。
[1339] 接着使如上所述制备的经部分还原的具有自由硫醇基的部分(诸如经部分还原的单株抗体)与式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑L1的本发明的药物‑连接子化合物(其中此类化合物中的基团L1为顺丁烯二酰亚胺基，其自由地与硫醇基反应)反应。所得药物抗体共轭物通过本技术领域中已知的任何适合方式，例如通过尺寸排阻层析(SEC)来纯化[参见例如Liu等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，93:8618‑8623(1996)及Chari等人，Cancer Research，52:127‑
131(1992)]。
131(1992)]。
[1340] 在本发明的一个优选的具体实例中，经部分还原的单株抗体为曲妥珠单抗或抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分，优选为曲妥珠单抗或其抗原结合片段或免疫活性部分；或优选为抗CD13抗体或其抗原结合片段或免疫活性部分。
[1341] 在本发明的一替代具体实例中，诸如单株抗体的包含至少一个抗原结合位点的部分中的离氨酸可首先与丁二酰亚胺基‑4‑(N‑顺丁烯二酰亚胺基甲基)环己烷‑1‑甲酸酯反应。抗体上的自由氨基可与N‑羟基丁二酰亚胺酯反应，得到顺丁烯二酰亚胺活化的抗体：
[1342]
[1343] 接着顺丁烯二酰亚胺活化的抗体可与具有反应性硫醇部分的式D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑H的化合物反应。
[1344] 在本发明的一替代具体实例中，诸如单株抗体的包含至少一个抗原结合位点的部分中的离氨酸可首先与2‑亚氨基硫杂环戊烷盐酸盐(特氏试剂)反应。抗体上的自由氨基可与亚胺硫代内酯反应，得到硫醇活化的抗体。
[1345]
[1346] 图1中展示通过经由抗体中的二硫键基团的部分还原之后半胱氨酸中的自由硫醇基进行共轭，用于制备本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物抗体共轭物的方法的一特定实例。
[1347] 图2中展示通过在抗体与特氏试剂反应的后离氨酸中的自由氨基进行共轭，用于制备本发明的式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物抗体共轭物的方法的另一特定实例。
[1348] 包含本发明的药物抗体共轭物的组成物及其用途
[1349] 也提供一种医药组成物，其包含根据本发明的药物共轭物及医药学上可接受的载剂。本发明的具有通式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物共轭物的投予形式的实例包括但不限于经口、局部、非经肠、舌下、经直肠、经阴道、经眼及鼻内。非经肠投予包括皮下注射、静脉内、肌肉内、胸骨内注射或输注技术。优选地，组成物非经肠投予。本发明的医药组成物可经调配以便允许在向动物、优选人类投予组成物后本发明的药物共轭物为生物可用的。组成物可采取一或多个剂量单元的形式，其中例如锭剂可为单一剂量单位，且呈气雾剂形式的本发明的药物抗体共轭物的容器可容纳多个剂量单元。
[1350] 医药学上可接受的载剂或媒剂可为微粒，以使得组成物例如呈锭剂或散剂形式。载剂可为液体，其中组成物为例如口服糖浆或可注射液体。另外，载剂可为气体，以便提供可用于例如吸入投予的气雾剂组成物。术语“载剂”是指稀释剂、佐剂或赋形剂，本发明的药物抗体共轭物与其一起投予。此类医药载剂可为液体，诸如水及油，包括石油、动物、植物或合成来源的油，诸如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油及其类似物。载剂可为盐水、阿拉伯胶、明胶、淀粉糊、滑石、角蛋白、胶态二氧化硅、尿素及其类似物。另外，可使用助剂、稳定剂、增稠剂、润滑剂及着色剂。在一个具体实例中，当投予动物时，本发明的药物抗体共轭物或组成物及医药学上可接受的载剂是无菌的。当本发明的药物抗体共轭物静脉内投予时水为优选的载剂。也可使用生理食盐水溶液及右旋糖水溶液及甘油溶液作为液体载剂，尤其用于可注射溶液。适合的医药载剂也包括赋形剂，诸如淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、稻谷、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙二醇、水、乙醇及其类似物。必要时，本发明的组成物也可含有少量润湿剂或乳化剂，或pH缓冲剂。
[1351] 当意欲经口投予时，医药组成物优选为固体或液体形式，其中半固体、半液体、悬浮液及凝胶形式包括在本文视为固体或液体的形式内。
[1352] 作为用于口服投药的固体组成物，组成物可调配为散剂、颗粒剂、压缩锭剂、丸剂、胶囊、口嚼锭、粉片或类似形式。此类固体组成物典型地含有一或多种惰性稀释剂。另外，可存在以下中的一或多者：黏合剂，诸如羧基甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤维素或明胶；赋形剂，诸如淀粉、乳糖或糊精；崩解剂，诸如海藻酸、海藻酸钠、玉米淀粉及其类似物；润滑剂，诸如硬脂酸镁；滑动剂，诸如胶态二氧化硅；甜味剂，诸如蔗糖或糖精；调味剂，诸如胡椒薄荷、水杨酸甲酯或柑橘调味剂；及着色剂。
[1353] 当组成物呈胶囊(例如明胶胶囊)形式时，除以上类型的材料之外，其也可含有液体载剂，诸如聚乙二醇、环糊精或脂肪油。
[1354] 组成物可呈液体形式，例如酏剂、糖浆、溶液、乳液或悬浮液。液体可用于经口投予或用于通过注射输送。当意欲用于经口投予时，组成物可包含甜味剂、防腐剂、染料/着色剂及味道增强剂中的一或多者。在通过注射投予的组成物中，也可包括表面活性剂、防腐剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、缓冲剂、稳定剂及等张剂中的一或多者。
[1355] 优选投予途径为非经肠投予，包括(但不限于)皮内、肌肉内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内、硬膜外、鼻内、脑内、室内、鞘内、阴道内或经皮。优选投药模式由执业医生来判断，且部分可视医学病状的部位(诸如癌症部位)而定。在一个更优选的具体实例中，本发明的药物抗体共轭物经静脉内投予。
[1356] 本发明的液体组成物无论为溶液、悬浮液还是其他类似形式，其也可包括以下各者中的一或多者：无菌稀释剂，诸如注射用水、盐水溶液(优选生理盐水)、林格氏溶液(Ringer's solution)、等张氯化钠、不挥发性油(诸如合成甘油单酯或甘油二酯、聚乙二醇、甘油)或其他溶剂；抗细菌剂，诸如苯甲醇或对羟基苯甲酸甲酯；以及用于调整张力的试剂，诸如氯化钠或右旋糖。非经肠组成物可封闭于由玻璃、塑胶或其他材料制成的安瓿、抛弃式注射器或多剂量小瓶中。生理盐水为优选的佐剂。
[1357] 本发明的药物共轭物有效治疗特定病症或病状的量将视病症或病状的性质而定，且可通过标准临床技术确定。另外，可视需要采用试管内或活体内分析来帮助鉴别最优选剂量范围。待用于组成物中的精确剂量也将视投药途径及疾病或病症的严重性而定，且应根据执业医师的判断及各患者的情况来决定。
[1358] 组成物包含有效量的本发明的药物共轭物，以便获得合适剂量。化合物的正确剂量将根据特定调配物、应用模式及其治疗的特定部位、宿主及疾病，例如癌症及何种类型肿瘤(若为癌症)变化。应顾及其他因素，如年龄、体重、性别、饮食、投予时间、分泌速率、宿主状况、药物组合、反应敏感性及疾病严重程度。投予可在最大耐受剂量内连续或周期性进行。
[1359] 本发明的药物共轭物或组成物可通过任何适宜途径投予，例如通过输注或快速注射，通过经上皮或黏膜皮肤内衬吸收。
[1360] 在特定具体实例中，可能需要局部投予本发明的一或多种药物共轭物或组成物至需要治疗的区域。在一个具体实例中，投药可通过直接注射在癌症、肿瘤或赘生性或肿瘤形成前组织的部位(或形成部位)。在另一具体实例中，投药可通过直接注射在自体免疫疾病的显现部位(或形成部位)。
[1361] 也可采用经肺投药，例如通过使用吸入器或喷雾器，且用气雾剂调配，或经由在氟碳化合物或合成的肺表面活性剂中的灌注液。在某些具体实例中，本发明的药物抗体共轭物或组成物可用传统黏合剂及载剂(诸如甘油三酯)调配为栓剂。
[1362] 本发明组成物可采取以下形式：溶液、悬浮液、乳液、锭剂、丸剂、丸粒、胶囊、含液体的胶囊、散剂、持续释放调配物、栓剂、乳液、气雾剂、喷雾剂、悬浮液或适用于使用的任何其他形式。合适医药载剂的其他实例描述于E.W.Martin的“Remington's Pharmaceutical Sciences”中。
[1363] 医药组成物可通过医药技术中熟知的方法制备。举例而言，意欲通过注射投予的组成物可通过本发明的药物共轭物与水组合形成溶液来制备。可添加表面活性剂以促进均匀溶液或悬浮液形成。
[1364] 已发现本发明的药物共轭物及组成物尤其有效地治疗癌症。
[1365] 因此，如前所述，本发明提供一种治疗患有癌症的有需要的患者、尤其人类的方法，其包含向所述患病个体投予治疗有效量的本发明的药物共轭物或组成物。本发明提供根据本发明的药物共轭物，其用于治疗癌症且更优选选自肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌的癌症。最优选癌症为乳癌。
[1366] 本发明的药物共轭物及组成物可用于抑制肿瘤细胞或癌细胞的繁殖，或用于治疗动物的癌症。本发明的药物共轭物及组成物因此可用于多种环境中用于治疗动物癌症。包含药物‑连接子‑包含至少一个抗原结合位点的部分的本发明的共轭物可用于递送药物或药物单元至肿瘤细胞或癌细胞。不受理论束缚，在一个具体实例中，本发明的药物共轭物的包含至少一个抗原结合位点的部分与癌细胞或肿瘤细胞相关抗原结合或缔合，且本发明的药物共轭物可经由受体介导的内吞作用吸收在肿瘤细胞或癌细胞内。抗原可连接至肿瘤细胞或癌细胞或可为与肿瘤细胞或癌细胞缔合的细胞外基质蛋白质。一旦在细胞内，连接单元内的一或多个特定序列由一或多种肿瘤细胞或癌细胞相关的蛋白酶或水解酶水解裂解，从而释放药物或药物‑连接子化合物。随后，所释放的药物或药物‑连接子化合物在细胞中自由迁移且诱发细胞毒性活性。在一替代具体实例中，药物或药物单元在肿瘤细胞或癌细胞外自本发明的药物共轭物裂解，且药物或药物‑连接子化合物随后会渗透细胞。
[1367] 在一个具体实例中，包含至少一个抗原结合位点的部分结合于肿瘤细胞或癌细胞。在另一具体实例中，包含至少一个抗原结合位点的部分结合于在肿瘤细胞或癌细胞的表面上的肿瘤细胞或癌细胞抗原。在另一具体实例中，包含至少一个抗原结合位点的部分结合于作为与肿瘤细胞或癌细胞相关联的细胞外基质蛋白的肿瘤细胞或癌细胞抗原。
[1368] 包含至少一个抗原结合位点的部分对特定肿瘤细胞或癌细胞的特异性对于确定最有效治疗的那些肿瘤或癌症而言是重要的。举例而言，具有曲妥珠单抗单元的本发明的药物共轭物可用于治疗抗原阳性癌，包括白血病、肺癌、结肠癌、淋巴瘤(例如霍奇金氏病、非霍奇金氏淋巴瘤)、实体肿瘤(诸如肉瘤及癌瘤)、多发性骨髓瘤、肾癌及黑素瘤。优选地，癌症可为肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤或卵巢癌。
举例而言，具有利妥昔单抗单元的本发明的药物共轭物可用于治疗表现CD‑20的肿瘤，诸如血液癌症，包括白血病及淋巴瘤。举例而言，具有抗CD4抗体单元的本发明的药物共轭物可用于治疗表现CD‑4的肿瘤，诸如血液癌症，包括淋巴瘤。举例而言，具有抗CD5抗体单元的本发明的药物共轭物可用于治疗表现CD‑5的肿瘤，诸如血液癌症，包括白血病及淋巴瘤。举例而言，具有抗CD13抗体单元的本发明的药物共轭物可用于治疗表现CD‑13的肿瘤，诸如血液癌症，包括白血病及淋巴瘤。
举例而言，具有利妥昔单抗单元的本发明的药物共轭物可用于治疗表现CD‑20的肿瘤，诸如血液癌症，包括白血病及淋巴瘤。举例而言，具有抗CD4抗体单元的本发明的药物共轭物可用于治疗表现CD‑4的肿瘤，诸如血液癌症，包括淋巴瘤。举例而言，具有抗CD5抗体单元的本发明的药物共轭物可用于治疗表现CD‑5的肿瘤，诸如血液癌症，包括白血病及淋巴瘤。举例而言，具有抗CD13抗体单元的本发明的药物共轭物可用于治疗表现CD‑13的肿瘤，诸如血液癌症，包括白血病及淋巴瘤。
[1369] 可用本发明的药物共轭物治疗的癌症的其他特定类型包括(但不限于)：血源性癌症，包括白血病的所有形式；淋巴瘤，诸如霍奇金氏病、非霍奇金氏淋巴瘤及多发性骨髓瘤。
[1370] 特定而言，本发明的药物共轭物及组成物展示治疗乳癌的极优活性。
[1371] 本发明的药物共轭物及组成物提供共轭物特定的肿瘤或癌症靶向，因此降低这些共轭物的总体毒性。连接子单元使药物抗体共轭物在血液中稳定，而可通过细胞内的肿瘤特异性蛋白酶及水解酶裂解，释出药物。
[1372] 可向也已经历手术作为癌症的治疗的动物投予本发明的药物共轭物及组成物。在本发明的一个具体实例中，额外的治疗方法为放射线疗法。
[1373] 在本发明的一特定具体实例中，本发明的药物共轭物或组成物可与放射线疗法一起投予。放射线疗法可与本发明的药物共轭物或组成物治疗同时、在其之前或之后投予。在一具体实例中，本发明的药物共轭物或组成物与放射线疗法同时投予。在另一特定具体实例中，在投予本发明的药物共轭物或组成物之前或之后，优选投予本发明的药物抗体共轭物或组成物之前或之后至少一小时、五小时、12小时、一天、一周、一个月、更优选几个月(例如长达三个月)投予。
[1374] 关于放射线，任何放射线疗法方案可视待治疗的癌症类型而使用。举例而言，但不限制，可投予x射线辐射；特定而言，高能兆伏数(超过1MeV能量的放射线)可用于深部肿瘤，且电子束及正电压射线辐射可用于皮肤癌。也可投予发射γ射线的放射性同位素，诸如镭、钴及其他元件的放射性同位素。
[1375] 在本发明中，提供一种套组，其包含治疗有效量的根据本发明的药物共轭物及医药学上可接受的载剂。在一具体实例中，提供一种套组，其包含根据本发明的组成物及视需要存在的治疗癌症且更优选选自肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌的癌症的使用说明书。
[1376] 在一个具体实例中，根据此方面的套组用于治疗癌症且更优选选自肺癌、结肠直肠癌、乳癌、胰脏癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、胃癌及卵巢癌的癌症。最优选套组用于治疗乳癌。实施例
[1377] 通过以下非限制性实施例进一步说明本发明。在实施例中，使用以下缩写：
[1378] CDI，1，1'‑羰基二咪唑
[1379] DIPEA，N，N‑二异丙基乙胺
[1380] Hex，己烷
[1381] EtOAc，乙酸乙酯
[1382] DCM，二氯甲烷
[1383] NMP，N‑甲基‑2‑吡咯啶酮
[1384] DMF，二甲基甲酰胺
[1385] EDC，N‑(3‑二甲氨基丙基)‑N'‑乙基碳化二亚胺盐酸盐
[1386] EDTA，乙二胺四乙酸
[1387] MeOH，甲醇
[1388] DTT，二硫苏糖醇
[1389] Py，吡啶
[1390] THF，四氢呋喃
[1391] TCEP，三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐
[1392] MC，6‑顺丁烯二酰亚胺基己酰基
[1393] Fmoc，9‑芴基甲氧基羰基
[1394] Cit，瓜氨酸
[1395] Val，缬氨酸
[1396] DMSO，二甲亚砜
[1397] Trt，三苯甲基
[1398] HOBt，1‑羟基苯并三唑
[1399] DIPCDI，N，N'‑二异丙基碳化二亚胺
[1400] TFA，三氟乙酸
[1401] PABOH，4‑氨基苯甲醇
[1402] bis‑PNP，碳酸双(4‑硝基苯基)酯
[1403] NAC，N‑乙酰半胱氨酸
[1404] SEC，尺寸排阻层析
[1405] HPLC，高效液相层析
[1406] ADC，抗体药物共轭物
[1407] ATCC，美国菌种保存中心
[1408] DMEM，达尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)
[1409] RPMI，洛斯维帕克纪念研究所(Roswell Park Memorial institute)培养基
[1410] ITS，胰岛素‑运铁蛋白‑亚硒酸钠培养基补充剂
[1411] FCS，胎牛血清
[1412] SRB，磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B)
[1413] PBS，磷酸盐缓冲盐水
[1414] DR，剂量反应
[1415] UV，紫外光
[1416] SMCC，丁二酰亚胺基‑4‑(N‑顺丁烯二酰亚胺基甲基)环己烷‑1‑甲酸酯
[1417] LAR，连接子与抗体的比率
[1418] 化合物的合成
[1419] 化合物1如WO 01/87895的实施例20中所描述来制备。
[1420] 实施例0‑1.
[1421] A)
[1422] 向1(0.5g，0.80mmol)于乙酸(20mL，0.04M)中的溶液中添加L‑色氨醇(2‑S)(533mg，3.0mmol，SigMa‑Aldrich)。将反应混合物在23℃下搅拌16小时且接着乙酸蒸发。添加饱和NaHCO3水溶液且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，1:1)，得到化合物3‑S(616mg，97％)及3a‑S(12mg，
2％)。
2％)。
[1423] 3‑S
[1424] Rf＝0.50(己烷:EtOAc，1:1)。
[1425] 1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.71(s,1H),7.36(dd,J＝7.9,1.0Hz,1H),7.27(dd,J＝8.2,0.9Hz,1H),7.13(ddd,J＝8.3,7.0,1.2Hz,1H),7.03(ddd,J＝8.0,7.0,1.0Hz,1H),
6.62(s,1H),6.26(d,J＝1.4Hz,1H),6.04(d,J＝1.3Hz,1H),5.75(s,1H),5.14(dd,J＝
11.7,1.2Hz,1H),4.60(s,1H),4.41(s,1H),4.36‑4.24(m,2H),4.21(d,J＝2.7Hz,1H),3.82(s,3H),3.52(s,1H),3.50‑3.47(m,1H),3.45(dq,J＝8.4,2.2Hz,1H),3.35(t,J＝10.1Hz,
1H),3.01‑2.78(m,5H),2.62(dd,J＝15.3,4.7Hz,1H),2.41(s,1H),2.38(s,3H),2.37‑2.31(m,1H),2.28(s,3H),2.17(s,3H),2.06(s,3H)。
6.62(s,1H),6.26(d,J＝1.4Hz,1H),6.04(d,J＝1.3Hz,1H),5.75(s,1H),5.14(dd,J＝
11.7,1.2Hz,1H),4.60(s,1H),4.41(s,1H),4.36‑4.24(m,2H),4.21(d,J＝2.7Hz,1H),3.82(s,3H),3.52(s,1H),3.50‑3.47(m,1H),3.45(dq,J＝8.4,2.2Hz,1H),3.35(t,J＝10.1Hz,
1H),3.01‑2.78(m,5H),2.62(dd,J＝15.3,4.7Hz,1H),2.41(s,1H),2.38(s,3H),2.37‑2.31(m,1H),2.28(s,3H),2.17(s,3H),2.06(s,3H)。
[1426] ESI‑MS m/z:794.2(M+H)+。
[1427] 3a‑S
[1428] Rf＝0.70(己烷:EtOAc，1:1)。
[1429] 1H NMR(500MHz,CDCl3):δ7.83(s,1H),7.38(dt,J＝7.9,0.9Hz,1H),7.25(dt,J＝8.3,0.9Hz,1H),7.11(ddd,J＝8.2,7.1,1.2Hz,1H),7.02(ddd,J＝8.0,7.0,1.0Hz,1H),
6.62(s,1H),6.24(d,J＝1.4Hz,1H),6.03(d,J＝1.3Hz,1H),5.79(s,1H),5.13(d,J＝
11.7Hz,1H),4.60(s,1H),4.39(s,1H),4.36‑4.22(m,3H),4.17‑4.09(m,1H),3.91(dd,J＝
10.5,8.6Hz,1H),3.83(s,3H),3.51‑3.41(m,2H),3.04‑2.92(m,3H),2.72(dd,J＝15.1,
4.0Hz,1H),2.54‑2.41(m,2H),2.38(s,3H),2.35‑2.30(m,1H),2.29(s,3H),2.21‑2.16(m,
1H),2.18(s,3H),2.12(s,3H)；2.05(s,3H)。
6.62(s,1H),6.24(d,J＝1.4Hz,1H),6.03(d,J＝1.3Hz,1H),5.79(s,1H),5.13(d,J＝
11.7Hz,1H),4.60(s,1H),4.39(s,1H),4.36‑4.22(m,3H),4.17‑4.09(m,1H),3.91(dd,J＝
10.5,8.6Hz,1H),3.83(s,3H),3.51‑3.41(m,2H),3.04‑2.92(m,3H),2.72(dd,J＝15.1,
4.0Hz,1H),2.54‑2.41(m,2H),2.38(s,3H),2.35‑2.30(m,1H),2.29(s,3H),2.21‑2.16(m,
1H),2.18(s,3H),2.12(s,3H)；2.05(s,3H)。
[1430] 13C NMR(101MHz,CDCl3):δ171.2,170.7,168.6,147.5,145.8,143.0,141.1,140.4,135.6,130.1,129.5,126.7,122.2,121.2,120.9,119.4,118.4,118.2,118.2,
113.6,113.5,110.9,110.0,109.1,102.1,91.4,67.2,63.4,61.3,60.4,59.7,59.1,54.8,
54.6,47.7,42.0,41.6,31.6,24.0,22.6,21.0,15.9,14.2,9.7。
113.6,113.5,110.9,110.0,109.1,102.1,91.4,67.2,63.4,61.3,60.4,59.7,59.1,54.8,
54.6,47.7,42.0,41.6,31.6,24.0,22.6,21.0,15.9,14.2,9.7。
[1431] ESI‑MS m/z:836.2(M+H)+。
[1432] B)
[1433] 向3‑S(616mg，0.77mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，51mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(3.40g，23.3mmol)。在23℃下3小时后，将反应混合物用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到4‑S(471mg，78％)。
[1434] Rf＝0.50(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1435] 1H NMR(500MHz,CDCl3):δ7.71(s,1H),7.36(dd,J＝7.8,1.1Hz,1H),7.26(dd,J＝7.8,1.1Hz,1H),7.12(ddd,J＝8.2,7.0,1.2Hz,1H),7.03(ddd,J＝8.0,7.1,1.0Hz,1H),
6.64(s,1H),6.23(d,J＝1.3Hz,1H),6.01(d,J＝1.4Hz,1H),5.75(s,1H),5.25(d,J＝
11.4Hz,1H),4.92(s,1H),4.52(br s,3H),4.22(dd,J＝11.4,2.2Hz,1H),4.19(s,1H),3.83(s,3H),3.54(br s,2H),3.35(t,J＝10.2Hz,1H),3.26(s,1H),3.01‑2.93(m,3H),2.88(br s,3H),2.63(dd,J＝15.2,4.8Hz,1H),2.38(s,3H),2.36‑2.31(m,2H),2.28(s,3H),2.05(s,
3H)。
6.64(s,1H),6.23(d,J＝1.3Hz,1H),6.01(d,J＝1.4Hz,1H),5.75(s,1H),5.25(d,J＝
11.4Hz,1H),4.92(s,1H),4.52(br s,3H),4.22(dd,J＝11.4,2.2Hz,1H),4.19(s,1H),3.83(s,3H),3.54(br s,2H),3.35(t,J＝10.2Hz,1H),3.26(s,1H),3.01‑2.93(m,3H),2.88(br s,3H),2.63(dd,J＝15.2,4.8Hz,1H),2.38(s,3H),2.36‑2.31(m,2H),2.28(s,3H),2.05(s,
3H)。
[1436] 13C NMR(126MHz,CDCl3):δ171.9,168.6,147.5,145.4,142.9,141.2,140.7,135.5,130.4,126.8,122.3,122.0,121.3,119.4,118.4,115.2,112.8,111.0,110.0,
109.6,101.8,81.9,76.8,65.2,62.8,62.5,60.4,58.1,57.9,55.9,55.1,53.4,51.6,41.8,
41.3,39.6,24.1,23.8,20.5,15.8,9.7。
109.6,101.8,81.9,76.8,65.2,62.8,62.5,60.4,58.1,57.9,55.9,55.1,53.4,51.6,41.8,
41.3,39.6,24.1,23.8,20.5,15.8,9.7。
[1437] ESI‑MS m/z:767.3(M‑H2O+H)+。
[1438] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z 767.2788[M‑H2O+H]+(C41H43N4O9S的计算值:767.2745)。
[1439] B')
[1440] 向3a‑S(30mg，0.035mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，2.4mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(180mg，1.07mmol)。在23℃下3小时后，将反应混合物用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到4a‑S(24mg，83％)。
[1441] Rf＝0.60(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1442] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.81(s,1H),7.37(d,J＝7.8Hz,1H),7.30‑7.21(m,1H),7.06(dddt,J＝34.7,8.0,7.1,1.1Hz,2H),6.63(s,1H),6.22(d,J＝1.3Hz,1H),6.02(dd,J
＝12.9,1.4Hz,1H),5.74(s,1H),5.25‑5.21(m,1H),4.89(d,J＝8.7Hz,1H),4.55‑4.45(m,
2H),4.30‑4.18(m,1H),4.14(dd,J＝10.5,4.2Hz,1H),4.00‑3.88(m,2H),3.82(s,3H),
3.56‑3.44(m,2H),3.23(d,J＝9.0Hz,1H),2.95(d,J＝15.7Hz,2H),2.87‑2.78(m,2H),2.71(dd,J＝15.0,3.9Hz,1H),2.48(dd,J＝15.1,9.6Hz,1H),2.37(s,3H),2.35‑2.29(m,1H),
2.28(s,3H),2.22‑2.16(m,1H),2.15(s,3H),2.12(s,3H),2.03(s,3H)。
＝12.9,1.4Hz,1H),5.74(s,1H),5.25‑5.21(m,1H),4.89(d,J＝8.7Hz,1H),4.55‑4.45(m,
2H),4.30‑4.18(m,1H),4.14(dd,J＝10.5,4.2Hz,1H),4.00‑3.88(m,2H),3.82(s,3H),
3.56‑3.44(m,2H),3.23(d,J＝9.0Hz,1H),2.95(d,J＝15.7Hz,2H),2.87‑2.78(m,2H),2.71(dd,J＝15.0,3.9Hz,1H),2.48(dd,J＝15.1,9.6Hz,1H),2.37(s,3H),2.35‑2.29(m,1H),
2.28(s,3H),2.22‑2.16(m,1H),2.15(s,3H),2.12(s,3H),2.03(s,3H)。
[1443] ESI‑MS m/z:809.2(M‑H2O+H)+。
[1444] 实施例0‑2
[1445] A)
[1446] 向1(0.5g，0.80mmol)于乙酸(20mL，0.04M)中的溶液中添加D‑色氨醇(2‑R)(533mg，3.0mmol，Sigma‑Aldrich)。将反应混合物在23℃下搅拌16小时且接着蒸发乙酸。添加饱和NaHCO3水溶液且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，1:1)，得到化合物3‑R(479mg，75％)。
[1447] Rf＝0.44(己烷:EtOAc，1:1)。
[1448] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.61(s,1H),7.39(d,J＝7.8Hz,1H),7.29(d,J＝9.6Hz,1H),7.12(t,J＝7.3Hz,1H),7.03(t,J＝7.3Hz,1H),6.60(s,1H),6.25(s,1H),6.03(s,1H),
5.75(s,1H),5.04(d,J＝11.7Hz,1H),4.62(s,1H),4.37(s,1H),4.32‑4.25(m,1H),4.22(d,J＝2.7Hz,1H),4.19‑4.09(m,1H),3.82(s,3H),3.77(s,1H),3.64(d,J＝9.0Hz,1H),3.49‑
3.41(m,2H),3.02‑2.90(m,2H),2.60‑2.52(m,2H),2.45(d,J＝14.7Hz,2H),2.40(s,3H),
2.28(s,3H),2.22‑2.14(m,2H),2.18(s,3H),2.10(m,3H)。
5.75(s,1H),5.04(d,J＝11.7Hz,1H),4.62(s,1H),4.37(s,1H),4.32‑4.25(m,1H),4.22(d,J＝2.7Hz,1H),4.19‑4.09(m,1H),3.82(s,3H),3.77(s,1H),3.64(d,J＝9.0Hz,1H),3.49‑
3.41(m,2H),3.02‑2.90(m,2H),2.60‑2.52(m,2H),2.45(d,J＝14.7Hz,2H),2.40(s,3H),
2.28(s,3H),2.22‑2.14(m,2H),2.18(s,3H),2.10(m,3H)。
[1449] ESI‑MS m/z:794.3(M+H)+。
[1450] B)
[1451] 向3‑R(479mg，0.60mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，40mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(3.03g，18.1mmol)。在23℃下3小时后，将反应混合物用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到4‑R(428mg，91％)。
[1452] Rf＝0.45(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1453] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.62(s,1H),7.39(d,J＝8.1Hz,1H),7.28(d,J＝8.1Hz,1H),7.11(ddd,J＝8.2,7.0,1.2Hz,1H),7.02(ddd,J＝7.9,7.1,1.0Hz,1H),6.61(s,1H),
6.22(d,J＝1.3Hz,1H),5.99(d,J＝1.3Hz,1H),5.73(s,1H),5.17(dd,J＝11.5,1.2Hz,1H),
4.86(s,1H),4.56‑4.47(m,2H),4.17(dd,J＝5.1,1.6Hz,1H),4.08(dd,J＝11.5,2.1Hz,
1H),3.81(s,3H),3.78(d,J＝3.8Hz,1H),3.64(dd,J＝10.8,3.8Hz,2H),3.51(d,J＝5.1Hz,
1H),3.48‑3.43(m,2H),3.24(d,J＝8.6Hz,1H),3.00‑2.80(m,2H),2.57(s,1H),2.55‑2.43(m,1H),2.40(s,3H),2.27(s,3H),2.19‑2.12(m,1H),2.16(s,3H),2.08(s,3H)。
6.22(d,J＝1.3Hz,1H),5.99(d,J＝1.3Hz,1H),5.73(s,1H),5.17(dd,J＝11.5,1.2Hz,1H),
4.86(s,1H),4.56‑4.47(m,2H),4.17(dd,J＝5.1,1.6Hz,1H),4.08(dd,J＝11.5,2.1Hz,
1H),3.81(s,3H),3.78(d,J＝3.8Hz,1H),3.64(dd,J＝10.8,3.8Hz,2H),3.51(d,J＝5.1Hz,
1H),3.48‑3.43(m,2H),3.24(d,J＝8.6Hz,1H),3.00‑2.80(m,2H),2.57(s,1H),2.55‑2.43(m,1H),2.40(s,3H),2.27(s,3H),2.19‑2.12(m,1H),2.16(s,3H),2.08(s,3H)。
[1454] 13C NMR(101MHz,CDCl3):δ171.8,168.6,147.6,145.4,143.0,141.3,140.7,136.0,131.1,130.0,129.6,126.6,122.1,121.6,121.2,119.4,118.4,115.6,112.9,
111.1,110.6,101.8,81.7,65.8,62.7,61.8,60.4,60.3,57.9,57.8,56.1,55.0,52.1,
42.2,41.3,41.1,23.8,23.4,20.5,15.7,9.8。
111.1,110.6,101.8,81.7,65.8,62.7,61.8,60.4,60.3,57.9,57.8,56.1,55.0,52.1,
42.2,41.3,41.1,23.8,23.4,20.5,15.7,9.8。
[1455] ESI‑MS m/z:767.6(M‑H2O+H)+。
[1456] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:767.2799[M‑H2O+H]+(C41H43N4O9S的计算值:767.2745)。
[1457] 实施例0‑3.合成N‑[(R)‑(2‑氨基‑3‑(1H‑吲哚‑3‑基)丙基)]氨基甲酸烯丙酯(9‑R)
[1458]
[1459] 向D‑色氨醇(2‑R)(2.0g，10.4mmol)于CH3CN(42mL，4mL/mmol)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(4.6g，20.8mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌3小时且真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)，得到5‑R(2.2g，73％)。
[1460] Rf＝0.5(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1461] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.13(s,1H),7.67(dd,J＝7.8,1.1Hz,1H),7.38(dd,J＝8.1,1.3Hz,1H),7.29‑7.10(m,2H),7.06(s,1H),4.82(s,1H),4.00(s,1H),3.71(dd,J＝
11.0,3.8Hz,1H),3.62(dd,J＝11.0,5.5Hz,1H),3.01(d,J＝6.7Hz,2H),2.14(s,1H),1.44
(s,9H)。
11.0,3.8Hz,1H),3.62(dd,J＝11.0,5.5Hz,1H),3.01(d,J＝6.7Hz,2H),2.14(s,1H),1.44
(s,9H)。
[1462] B)
[1463] 向5‑R(2.4g，8.2mmol)于CH2Cl2(50mL，6mL/mmol)中的溶液中添加邻苯二甲酰亚胺(2.7g，18.2mmol)、三苯基膦(4.8g，18.2mmol)且混合物冷却在0℃下。历时15分钟添加偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)于CH2Cl2(25mL，3mL/mmol)中的溶液。将反应在23℃下搅拌16小时，真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到6‑R(3.3g，96％)。
[1464] Rf＝0.7(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1465] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.50(s,1H),7.81(dd,J＝5.5,3.1Hz,2H),7.66(dd,J＝5.6,3.2Hz,2H),7.60(d,J＝7.8Hz,1H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),7.19‑7.04(m,3H).,4.81
(s,1H),4.40(s,1H),3.83(dd,J＝13.9,3.7Hz,1H),3.72(dd,J＝13.9,9.9Hz,1H),3.08‑
3.01(m,2H),1.23(s,9H)。
(s,1H),4.40(s,1H),3.83(dd,J＝13.9,3.7Hz,1H),3.72(dd,J＝13.9,9.9Hz,1H),3.08‑
3.01(m,2H),1.23(s,9H)。
[1466] C)
[1467] 向6‑R(3.25g，7.74mmol)于乙醇(231mL，30mL/mmol)中的溶液中添加单水合肼(37mL，774mmol)。将反应混合物在密封管里在80℃下搅拌2.25小时，真空浓缩。进行快速柱层析(EtOAc:CH3OH，100:1至50:50)，得到7‑R(2.15g，96％)。
[1468] Rf＝0.2(EtOAc:CH3OH，6:4)。
[1469] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.60(d,J＝7.9Hz,1H),7.33(d,J＝8.1Hz,1H),7.13‑7.04(m,2H),7.05‑6.96(m,1H),4.02‑3.94(m,1H),2.99‑2.87(m,3H),2.78(dd,J＝13.1,
9.7Hz,1H),1.39(s,9H)。
9.7Hz,1H),1.39(s,9H)。
[1470] ESI‑MS m/z:290.2(M+H)+。
[1471] D)
[1472] 向7‑R(2.15g，7.4mmol)于CH3CN(74mL，10mL/mmol)及DMF(7.4mL，1mL/mmol)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(1.06mL，5.9mmol)及氯甲酸烯丙酯(7.9mL，74mmol)。将反应在23℃下搅拌16小时。将混合物用EtOAc稀释，添加NH4Cl且混合物用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，100:1至1:100)来纯化，得到8‑R(1.69g，61％)。
[1473] Rf＝0.4(己烷:EtOAc，1:1)。
[1474] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.25(s,1H),7.62(d,J＝7.8Hz,1H),7.35(dd,J＝8.1,0.9Hz,1H),7.16(dddd,J＝27.8,8.0,7.0,1.1Hz,2H),7.04(d,J＝2.4Hz,1H),5.90(ddt,J
＝17.3,10.7,5.6Hz,1H),5.34‑5.22(m,1H),5.20(dt,J＝10.5,1.4Hz,1H),5.12(s,1H),
4.82(s,1H),4.55(dq,J＝5.4,1.7Hz,2H),4.02(s,1H),3.35(dt,J＝10.0,4.7Hz,1H),3.21(s,1H),2.95(ddd,J＝21.6,15.4,9.1Hz,2H),1.42(s,9H)。
＝17.3,10.7,5.6Hz,1H),5.34‑5.22(m,1H),5.20(dt,J＝10.5,1.4Hz,1H),5.12(s,1H),
4.82(s,1H),4.55(dq,J＝5.4,1.7Hz,2H),4.02(s,1H),3.35(dt,J＝10.0,4.7Hz,1H),3.21(s,1H),2.95(ddd,J＝21.6,15.4,9.1Hz,2H),1.42(s,9H)。
[1475] ESI‑MS m/z:274.3(M‑Boc+H)+。
[1476] E)
[1477] 向8‑R(1.30g，3.50mmol)于CH2Cl2(58mL，16.6mL/mmol)中的溶液中添加三氟乙酸(30mL，8.3mL/mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌1.5小时，真空浓缩，得到粗9‑R，其未经进一步纯化即用于下一步。
[1478] Rf＝0.2(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1479] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.95(s,1H),7.53(d,J＝7.8Hz,1H),7.36(d,J＝8.1Hz,1H),7.17(s,1H),7.09(t,J＝7.5Hz,1H),7.03(t,J＝7.5Hz,1H),5.87(ddt,J＝16.4,10.8,
5.6Hz,1H),5.34‑5.13(m,2H),4.50(d,J＝5.5Hz,2H),3.62(bs,1H),3.42(dd,J＝14.9,
3.9Hz,1H),3.36‑3.20(m,1H),3.11‑3.00(m,2H)。
5.6Hz,1H),5.34‑5.13(m,2H),4.50(d,J＝5.5Hz,2H),3.62(bs,1H),3.42(dd,J＝14.9,
3.9Hz,1H),3.36‑3.20(m,1H),3.11‑3.00(m,2H)。
[1480] ESI‑MS m/z:274.3(M+H)+。
[1481] 实施例0‑4.合成N‑[(S)‑(2‑氨基‑3‑(1H‑吲哚‑3‑基)丙基)]氨基甲酸烯丙酯(9‑S)
[1482]
[1483] 向L‑色氨醇(2‑S)(2.0g，10.4mmol)于CH3CN(42mL，4mL/mmol)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(4.6g，20.8mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌3小时，真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)，得到5‑S(2.24g，73％)。
[1484] Rf＝0.5(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1485] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.10(s,1H),7.65(dd,J＝7.8,1.1Hz,1H),7.37(dd,J＝8.1,1.3Hz,1H),7.23‑7.11(m,2H),7.06(s,1H),4.81(s,1H),3.99(s,1H),3.70(dd,J＝
11.0,3.8Hz,1H),3.61(dd,J＝11.0,5.5Hz,1H),3.00(d,J＝6.7Hz,2H),2.01(s,1H),1.42
(s,9H)。
11.0,3.8Hz,1H),3.61(dd,J＝11.0,5.5Hz,1H),3.00(d,J＝6.7Hz,2H),2.01(s,1H),1.42
(s,9H)。
[1486] B)
[1487] 向5‑S(1.2g，4.13mmol)于CH2Cl2(24.8mL，6mL/mmol)中的溶液中添加邻苯二甲酰亚胺(1.33g，9.1mmol)、三苯基膦(2.4g，9.1mmol)且混合物冷却在0℃下。历时15分钟添加偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)(3mL，10.32mmol)于CH2Cl2(12.4mL，3mL/mmol)中的溶液。将反应在23℃下搅拌16小时，真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到6‑S(2.8g，>100％)。
[1488] Rf＝0.7(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1489] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.49(s,1H),7.80(dd,J＝5.4,3.1Hz,2H),7.66(dd,J＝5.6,3.2Hz,2H),7.60(d,J＝7.8Hz,1H),7.34(d,J＝8.0Hz,1H),7.21‑7.04(m,3H).,4.74
(s,1H),4.42(s,1H),3.83(dd,J＝13.9,3.7Hz,1H),3.72(dd,J＝13.9,9.9Hz,1H),3.10‑
3.01(m,2H),1.23(s,9H)。
(s,1H),4.42(s,1H),3.83(dd,J＝13.9,3.7Hz,1H),3.72(dd,J＝13.9,9.9Hz,1H),3.10‑
3.01(m,2H),1.23(s,9H)。
[1490] C)
[1491] 向6‑S(0.86g，2.07mmol)于乙醇(72mL，36mL/mmol)中的溶液中添加单水合肼(10mL，207mmol)。将反应混合物在密封管里在80℃下搅拌2.25小时，真空浓缩。进行快速柱层析(EtOAc:CH3OH，100:1至50:50)，得到7‑S(1.0g，84％)。
[1492] Rf＝0.2(EtOAc:CH3OH，6:4)。
[1493] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.61(d,J＝7.9Hz,1H),7.35(d,J＝8.1Hz,1H),7.13‑6.97(m,2H),7.09(s,1H),4.06‑3.96(m,1H),3.01‑2.76(m,4H),1.38(s,9H)。
[1494] ESI‑MS m/z:290.3(M+H)+。
[1495] D)
[1496] 向7‑S(0.95g，3.3mmol)于CH3CN(33mL，10mL/mmol)及DMF(3.3mL，1mL/mmol)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(0.5mL，2.6mmol)及氯甲酸烯丙酯(3.5mL，33mmol)。将反应在23℃下搅拌20小时。将混合物用EtOAc稀释，添加NH4Cl且混合物用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，100:1至1:100)来纯化，得到8‑S(0.88g，73％)。
[1497] Rf＝0.5(己烷:EtOAc，1:1)。
[1498] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.17(s,1H),7.63(d,J＝7.8Hz,1H),7.20(dd,J＝8.1,0.9Hz,1H),7.13(dddd,J＝27.8,8.0,7.0,1.1Hz,2H),7.06(d,J＝2.4Hz,1H),5.90(ddt,J
＝17.3,10.7,5.6Hz,1H),5.31‑5.18(m,2H),5.09(s,1H),4.80(s,1H),4.59‑4.52(m,2H),
4.03(s,1H),3.37(dt,J＝10.0,4.7Hz,1H),3.21(s,1H),3.05‑2.87(m,2H),1.42(s,9H)。
＝17.3,10.7,5.6Hz,1H),5.31‑5.18(m,2H),5.09(s,1H),4.80(s,1H),4.59‑4.52(m,2H),
4.03(s,1H),3.37(dt,J＝10.0,4.7Hz,1H),3.21(s,1H),3.05‑2.87(m,2H),1.42(s,9H)。
[1499] ESI‑MS m/z:274.3(M‑Boc+H)+。
[1500] E)
[1501] 向8‑S(0.875g，2.3mmol)于CH2Cl2(38mL，16.6mL/mmol)中的溶液中添加三氟乙酸(19mL，8.3mL/mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌2小时，真空浓缩，得到粗9‑S，其未经进一步纯化即用于下一步。
[1502] Rf＝0.2(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1503] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.56(d,J＝7.8Hz,1H),7.37(d,J＝8.1Hz,1H),7.21(s,1H),7.13(t,J＝7.5Hz,1H),7.05(t,J＝7.5Hz,1H),5.94(ddt,J＝16.4,10.8,5.6Hz,1H),
5.34‑5.16(m,2H),4.56(d,J＝5.5Hz,2H),3.60(bs,1H),3.43(dd,J＝14.9,3.9Hz,1H),
3.37‑3.31(m,1H),3.14‑2.99(m,2H)。
5.34‑5.16(m,2H),4.56(d,J＝5.5Hz,2H),3.60(bs,1H),3.43(dd,J＝14.9,3.9Hz,1H),
3.37‑3.31(m,1H),3.14‑2.99(m,2H)。
[1504] ESI‑MS m/z:274.3(M+H)+。
[1505] 实施例0‑5
[1506] A)
[1507] 向1(1.45g，2.33mmol)于乙酸(58mL，0.08M)中的溶液中添加9‑R(0.95g，3.50mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌18小时且接着蒸发乙酸。添加饱和NaHCO3水溶液且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，1:
1)，得到化合物10‑R(1.3g，64％)。
1)，得到化合物10‑R(1.3g，64％)。
[1508] Rf＝0.5(己烷:EtOAc，1:1)。
[1509] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.66(s,1H),7.36(d,J＝7.9Hz,1H),7.27(d,J＝7.9Hz,1H),7.10(ddd,J＝8.3,7.0,1.3Hz,1H),7.01(td,J＝7.5,7.0,1.0Hz,1H),6.62(s,1H),
6.23(d,J＝1.4Hz,1H),6.01(d,J＝1.4Hz,1H),5.99‑5.89(m,1H),5.79(s,1H),5.44‑5.21(m,2H),5.14‑4.99(m,2H),4.63(ddd,J＝7.3,4.4,1.5Hz,2H),4.36(s,1H),4.33‑4.24(m,
1H),4.29‑4.26(m,1H),4.21(d,J＝2.7Hz,1H),4.19‑4.13(m,3H),3.80(s,3H),3.56(s,
1H),3.48‑3.43(m,3H),3.27(dt,J＝13.2,4.0Hz,1H),3.04‑2.88(m,2H),2.56(dd,J＝
15.2,3.8Hz,1H),2.49‑2.35(m,2H),2.31(s,3H),2.28(s,3H),2.17(s,3H),2.07(s,3H)。
6.23(d,J＝1.4Hz,1H),6.01(d,J＝1.4Hz,1H),5.99‑5.89(m,1H),5.79(s,1H),5.44‑5.21(m,2H),5.14‑4.99(m,2H),4.63(ddd,J＝7.3,4.4,1.5Hz,2H),4.36(s,1H),4.33‑4.24(m,
1H),4.29‑4.26(m,1H),4.21(d,J＝2.7Hz,1H),4.19‑4.13(m,3H),3.80(s,3H),3.56(s,
1H),3.48‑3.43(m,3H),3.27(dt,J＝13.2,4.0Hz,1H),3.04‑2.88(m,2H),2.56(dd,J＝
15.2,3.8Hz,1H),2.49‑2.35(m,2H),2.31(s,3H),2.28(s,3H),2.17(s,3H),2.07(s,3H)。
[1510] ESI‑MS m/z:877.3(M+H)+。
[1511] B)
[1512] 向10‑R(600mg，0.68mmol)于CH2Cl2(12mL，18mL/mmol)中的溶液中添加二氯化双(三苯基膦)钯(II)(77mg，0.1mmol)及乙酸(0.4mL，6.8mmol)。在0℃下添加氢化三丁基锡(1.1mL，4.08mmol)，将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时且真空浓缩。所得粗物质用EtOAc稀释，添加饱和NH4Cl水溶液，且混合物用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，100:1至1:100及EtOAc:CH3OH，100:1至1:100)，得到11‑R(440mg，82％)。
[1513] Rf＝0.5(CH2Cl2:CH3OH，1:1)。
[1514] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.64(s,1H),7.38(d,J＝7.9Hz,1H),7.29(d,J＝8.1Hz,1H),7.11(ddt,J＝8.3,7.0,1.4Hz,1H),7.03(ddt,J＝8.3,7.0,1.4Hz,1H),6.58(s,1H),
6.24(d,J＝1.5Hz,1H),6.02(d,J＝1.5Hz,1H),5.02(d,J＝11.8Hz,1H),4.63(s,1H),4.36
(s,1H),4.28(d,J＝5.1Hz,1H),4.21(d,J＝2.2Hz,1H),4.16(s,1H),3.80(s,3H),3.51‑
3.39(m,4H),3.32‑3.13(m,3H),2.95(d,J＝8.9Hz,2H),2.89‑2.76(m,2H),2.73‑2.57(m,
1H),2.42(d,J＝14.8Hz,1H),2.36(s,3H),2.25(s,3H),2.16(s,3H),2.09(s,3H)。
6.24(d,J＝1.5Hz,1H),6.02(d,J＝1.5Hz,1H),5.02(d,J＝11.8Hz,1H),4.63(s,1H),4.36
(s,1H),4.28(d,J＝5.1Hz,1H),4.21(d,J＝2.2Hz,1H),4.16(s,1H),3.80(s,3H),3.51‑
3.39(m,4H),3.32‑3.13(m,3H),2.95(d,J＝8.9Hz,2H),2.89‑2.76(m,2H),2.73‑2.57(m,
1H),2.42(d,J＝14.8Hz,1H),2.36(s,3H),2.25(s,3H),2.16(s,3H),2.09(s,3H)。
[1515] ESI‑MS m/z:793.2(M+H)+。
[1516] C)
[1517] 向11‑R(850mg，1.07mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，70mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(3.64g，21.4mmol)。在23℃下17小时后，反应用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至
85:15)来纯化，得到12‑R(553mg，66％)。
85:15)来纯化，得到12‑R(553mg，66％)。
[1518] Rf＝0.3(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1519] 1H NMR(500MHz,CDCl3):δ7.60(s,1H),7.38(d,J＝7.9Hz,1H),7.28(d,J＝7.9Hz,1H),7.11(ddt,J＝8.3,7.1,1.2Hz,1H),7.02(ddt,J＝8.3,7.1,1.2Hz,1H),6.58(s,1H),
6.22(s,1H),6.00(s,1H),5.16(d,J＝11.5Hz,1H),4.87(s,1H),4.54(s,1H),4.51(d,J＝
3.3Hz,1H),4.17(d,J＝5.4Hz,1H),4.07(dd,J＝11.3,2.2Hz,1H),3.81(s,3H),3.52(d,J＝
5.1Hz,1H),3.24(d,J＝8.8Hz,2H),2.99‑2.78(m,4H),2.66(dd,J＝14.9,3.5Hz,1H),2.49‑
2.39(m,2H),2.38(s,3H),2.28(m,2H),2.25(s,3H),2.21‑2.16(m,2H),2.15(s,3H),2.08
(s,3H)。
6.22(s,1H),6.00(s,1H),5.16(d,J＝11.5Hz,1H),4.87(s,1H),4.54(s,1H),4.51(d,J＝
3.3Hz,1H),4.17(d,J＝5.4Hz,1H),4.07(dd,J＝11.3,2.2Hz,1H),3.81(s,3H),3.52(d,J＝
5.1Hz,1H),3.24(d,J＝8.8Hz,2H),2.99‑2.78(m,4H),2.66(dd,J＝14.9,3.5Hz,1H),2.49‑
2.39(m,2H),2.38(s,3H),2.28(m,2H),2.25(s,3H),2.21‑2.16(m,2H),2.15(s,3H),2.08
(s,3H)。
[1520] 13C NMR(101MHz,CD3OD):δ171.7,169.4,148.7,145.9,143.7,141.4,140.9,136.9,130.8,130.0,129.7,126.0,121.4,121.0,119.7,119.1,118.4,117.5,114.9,
110.8,107.5,106.4,102.1,91.3,63.2,60.0,59.0,58.6,55.3,54.6,52.7,52.4,48.4,
45.8,42.5,40.2,24.5,23.2,19.2,15.0,8.2。
110.8,107.5,106.4,102.1,91.3,63.2,60.0,59.0,58.6,55.3,54.6,52.7,52.4,48.4,
45.8,42.5,40.2,24.5,23.2,19.2,15.0,8.2。
[1521] ESI‑MS m/z:766.2(M‑H2O+H)+。
[1522] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:766.2972[M‑H2O+H]+(C41H44N5O8S+的计算值:766.2905)。
[1523] C')
[1524] 向10‑R(700mg，0.8mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，52.5mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(2.66g，16mmol)。在23℃下20小时后，将反应混合物用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到13‑R(438mg，63％)。
[1525] Rf＝0.40(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1526] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.64(s,1H),7.37(d,J＝7.9Hz,1H),7.32‑7.20(m,1H),7.11(t,J＝7.7Hz,1H),7.01(t,J＝7.4Hz,1H),6.62(s,1H),6.21(s,1H),6.05‑5.90(m,
1H),5.99(s,1H),5.75(d,J＝6.0Hz,1H),5.40‑5.07(m,4H),4.88(d,J＝14.7Hz,1H),4.68‑
4.50(m,3H),4.28‑4.13(m,1H),4.08(dt,J＝11.4,2.4Hz,1H),3.83(s,3H),3.68‑3.40(m,
4H),3.37‑3.19(m,2H),2.98‑2.79(m,2H),2.59‑2.36(m,3H),2.29(s,3H),2.27(s,3H),
2.14(s,3H),2.10‑2.16(m,1H),2.08(s,3H)。
1H),5.99(s,1H),5.75(d,J＝6.0Hz,1H),5.40‑5.07(m,4H),4.88(d,J＝14.7Hz,1H),4.68‑
4.50(m,3H),4.28‑4.13(m,1H),4.08(dt,J＝11.4,2.4Hz,1H),3.83(s,3H),3.68‑3.40(m,
4H),3.37‑3.19(m,2H),2.98‑2.79(m,2H),2.59‑2.36(m,3H),2.29(s,3H),2.27(s,3H),
2.14(s,3H),2.10‑2.16(m,1H),2.08(s,3H)。
[1527] ESI‑MS m/z:850.3(M‑H2O+H)+。
[1528] 实施例0‑6
[1529] A)
[1530] 向1(955mg，1.5mmol)于乙酸(37.5mL，0.08M)中的溶液中添加9‑S(627mg，2.29mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌18小时且接着蒸发乙酸。添加饱和NaHCO3水溶液且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，1:
1)，得到化合物10‑S(756mg，58％)。
1)，得到化合物10‑S(756mg，58％)。
[1531] Rf＝0.4(己烷：EtOAc，1:1)。
[1532] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.78(s,1H),7.36(d,J＝7.9Hz,1H),7.24(d,J＝7.9Hz,1H),7.10(ddd,J＝8.3,7.0,1.3Hz,1H),7.01(td,J＝7.5,7.0,1.0Hz,1H),6.68(s,1H),
6.23(d,J＝1.4Hz,1H),6.01(d,J＝1.4Hz,1H),6.07‑5.93(m,1H),5.82(s,1H),5.41‑5.19(m,2H),5.1(d,J＝11.7Hz,1H),4.66(dt,J＝5.9,1.3Hz,1H),4.57(s,1H),4.37(s,1H),
4.33‑4.20(m,3H),3.81(s,3H),3.46(d,J＝4.2Hz,2H),3.22‑3.13(m,1H),3.11‑2.88(m,
4H),2.66(dd,J＝15.2,4.2Hz,1H),2.51(dd,J＝15.3,6.0Hz,1H),2.43‑2.32(m,2H),2.31(s,3H),2.26(s,3H),2.19(s,3H),2.04(s,3H)。
6.23(d,J＝1.4Hz,1H),6.01(d,J＝1.4Hz,1H),6.07‑5.93(m,1H),5.82(s,1H),5.41‑5.19(m,2H),5.1(d,J＝11.7Hz,1H),4.66(dt,J＝5.9,1.3Hz,1H),4.57(s,1H),4.37(s,1H),
4.33‑4.20(m,3H),3.81(s,3H),3.46(d,J＝4.2Hz,2H),3.22‑3.13(m,1H),3.11‑2.88(m,
4H),2.66(dd,J＝15.2,4.2Hz,1H),2.51(dd,J＝15.3,6.0Hz,1H),2.43‑2.32(m,2H),2.31(s,3H),2.26(s,3H),2.19(s,3H),2.04(s,3H)。
[1533] ESI‑MS m/z:877.3(M+H)+。
[1534] B)
[1535] 向10‑S(650mg，0.72mmol)于CH2Cl2(13.3mL，18mL/mmol)中的溶液中添加二氯化双(三苯基膦)钯(II)(83mg，0.11mmol)及乙酸(0.42mL，7.4mmol)。在0℃下添加氢化三丁基锡(1.2mL，4.4mmol)，将反应混合物在23℃下搅拌0.5小时，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，100:1至1:100及EtOAc:CH3OH，100:1至1:100)，得到11‑S(445mg，78％)。
[1536] Rf＝0.5(CH2Cl2:CH3OH，1:1)。
[1537] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.74(s,1H),7.36(d,J＝7.9Hz,1H),7.26(d,J＝8.1Hz,1H),7.12(ddt,J＝8.3,7.0,1.4Hz,1H),7.02(ddt,J＝8.3,7.0,1.4Hz,1H),6.62(s,1H),
6.26(d,J＝1.5Hz,1H),6.04(d,J＝1.5Hz,1H),5.12(d,J＝11.8Hz,1H),4.59(s,1H),4.42
(s,1H),4.36‑4.17(m,3H),3.81(s,3H),3.51‑3.39(m,3H),2.98‑2.75(m,4H),2.69‑2.60(m,2H),2.47(d,J＝16.1Hz,1H),2.38(s,3H),2.35‑2.17(m,2H),2.28(s,3H),2.13(s,3H),
2.04(s,3H)。
6.26(d,J＝1.5Hz,1H),6.04(d,J＝1.5Hz,1H),5.12(d,J＝11.8Hz,1H),4.59(s,1H),4.42
(s,1H),4.36‑4.17(m,3H),3.81(s,3H),3.51‑3.39(m,3H),2.98‑2.75(m,4H),2.69‑2.60(m,2H),2.47(d,J＝16.1Hz,1H),2.38(s,3H),2.35‑2.17(m,2H),2.28(s,3H),2.13(s,3H),
2.04(s,3H)。
[1538] ESI‑MS m/z:793.3(M+H)+。
[1539] C)
[1540] 向11‑S(435mg，0.55mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，38.5mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(1.84g，11mmol)。在23℃下24小时后，反应用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到12‑S(152mg，35％)。
[1541] Rf＝0.2(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1542] 1H NMR(500MHz,CD3OD):δ7.34(dd,J＝7.7,1.5Hz,1H),7.28(dd,J＝7.7,1.5Hz,1H),7.04(ddt,J＝8.2,7.0,1.1Hz,1H),6.95(ddt,J＝8.2,7.0,1.2Hz,1H),6.55(s,1H),
6.31‑6.25(m,1H),6.15‑6.05(m,1H),5.31(d,J＝11.4Hz,1H),4.91(s,1H),4.64(s,1H),
4.40‑4.19(m,3H),3.76(s,3H),3.64(d,J＝5.2Hz,1H),3.44(d,J＝9.0Hz,1H),3.03‑2.85(m,4H),2.85‑2.65(m,2H),2.59(d,J＝15.6Hz,1H),2.52‑2.39(m,2H),2.37(s,3H),2.27(s,3H),2.09(s,3H),2.00(s,3H)。
6.31‑6.25(m,1H),6.15‑6.05(m,1H),5.31(d,J＝11.4Hz,1H),4.91(s,1H),4.64(s,1H),
4.40‑4.19(m,3H),3.76(s,3H),3.64(d,J＝5.2Hz,1H),3.44(d,J＝9.0Hz,1H),3.03‑2.85(m,4H),2.85‑2.65(m,2H),2.59(d,J＝15.6Hz,1H),2.52‑2.39(m,2H),2.37(s,3H),2.27(s,3H),2.09(s,3H),2.00(s,3H)。
[1543] 13C NMR(126MHz,CD3OD):δ171.4,169.3,148.6,145.8,143.5,141.2,140.8,136.5,131.2,130.3,129.5,126.3,121.6,121.2,119.8,119.4,118.6,117.5,114.9,
111.0,107.5,107.4,102.2,91.1,63.5,60.5,59.2,58.5,55.3,54.7,53.4,52.7,48.6,
44.7,42.7,39.9,24.3,23.4,19.2,15.1,8.2。
111.0,107.5,107.4,102.2,91.1,63.5,60.5,59.2,58.5,55.3,54.7,53.4,52.7,48.6,
44.7,42.7,39.9,24.3,23.4,19.2,15.1,8.2。
[1544] ESI‑MS m/z:766.2(M‑H2O+H)+。
[1545] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:766.2958[M‑H2O+H]+(C41H44N5O8S的计算值:766.2905)。
[1546] C')
[1547] 向10‑S(5mg，0.006mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，0.5mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(29mg，0.17mmol)。在23℃下20小时后，将反应混合物用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到13‑S(5mg，100％)。
[1548] Rf＝0.40(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1549] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.75(s,1H),7.37(d,J＝7.9Hz,1H),7.32‑7.20(m,1H),7.12(t,J＝7.7Hz,1H),7.02(t,J＝7.4Hz,1H),6.84(s,1H),6.24(s,1H),6.08‑5.97(m,
1H),6.01(s,1H),5.87(s,1H),5.42‑5.19(m,4H),4.88(s,1H),4.69‑4.65(m,2H),4.58(s,
1H),4.28‑4.13(m,2H),3.84(s,3H),3.68‑3.40(m,2H),3.24‑3.15(m,2H),3.08‑2.90(m,
2H),2.73‑2.57(m,2H),2.53‑2.37(m,3H),2.34(s,3H),2.25(s,3H),2.14(s,3H),2.10‑
2.16(m,1H),2.03(s,3H)。
1H),6.01(s,1H),5.87(s,1H),5.42‑5.19(m,4H),4.88(s,1H),4.69‑4.65(m,2H),4.58(s,
1H),4.28‑4.13(m,2H),3.84(s,3H),3.68‑3.40(m,2H),3.24‑3.15(m,2H),3.08‑2.90(m,
2H),2.73‑2.57(m,2H),2.53‑2.37(m,3H),2.34(s,3H),2.25(s,3H),2.14(s,3H),2.10‑
2.16(m,1H),2.03(s,3H)。
[1550] ESI‑MS m/z:850.3(M‑H2O+H)+。
[1551] 实施例0‑7.
[1552] A)合成(S)‑5‑甲氧基‑色氨醇(17‑S)
[1553]
[1554] 在‑40℃下向LiAlH4溶液(23.4mL，1.0M的THF溶液，23.4mmol)小心添加H2SO4(0.31mL，5.57mmol)及5‑甲氧基‑L‑色胺酸(16‑S)(1.0g，4.26mmol，Chem‑Impex)于THF(13.4mL，0.3M)中的悬浮液。使反应混合物在23℃下进展，在80℃下加热3小时且在23℃下
18小时。在‑21℃下冷却，反应混合物小心用NaOH 2N中止，直至碱性pH。添加EtOAc且混合物经 过滤且用CH3OH洗涤。粗物质经真空浓缩，得到呈粗物质的17‑S，其未经进一步纯
化即用于下一步。
18小时。在‑21℃下冷却，反应混合物小心用NaOH 2N中止，直至碱性pH。添加EtOAc且混合物经 过滤且用CH3OH洗涤。粗物质经真空浓缩，得到呈粗物质的17‑S，其未经进一步纯
化即用于下一步。
[1555] Rf＝0.2(CH2Cl2:CH3OH，4:1)。
[1556] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.19(dt,J＝8.8,0.7Hz,1H),7.06‑7.00(m,2H),6.72(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),3.77(s,3H),3.63‑3.48(m,1H),3.42‑3.33(m,1H),3.17‑3.06(m,
1H),2.86(ddt,J＝14.3,6.1,0.8Hz,1H),2.66(dd,J＝14.3,7.5Hz,1H)。
1H),2.86(ddt,J＝14.3,6.1,0.8Hz,1H),2.66(dd,J＝14.3,7.5Hz,1H)。
[1557] ESI‑MS m/z:221.4(M+H)+。
[1558] B)合成(R)‑5‑甲氧基‑色氨醇(17‑R)
[1559]
[1560] 在‑40℃下向LiAlH4(11.7mL，1.0M的THF溶液，11.7mmol)的溶液中小心添加H2SO4(0.31mL，5.75mmol)及5‑甲氧基‑D‑色胺酸(16‑R)(0.5g，2.13mmol，Aldrich)于THF(6.7mL，0.3M)中的悬浮液。使反应混合物在23℃下进展，在80℃下加热3.5小时且在23℃下18小时。
在‑21℃下冷却，反应混合物小心用NaOH 2N中止，直至碱性pH。添加EtOAc且混合物经
过滤且用CH3OH洗涤。粗物质经真空浓缩，得到呈粗物质的17‑R，其未经进一步纯化即
用于下一步。
在‑21℃下冷却，反应混合物小心用NaOH 2N中止，直至碱性pH。添加EtOAc且混合物经
过滤且用CH3OH洗涤。粗物质经真空浓缩，得到呈粗物质的17‑R，其未经进一步纯化即
用于下一步。
[1561] Rf＝0.2(CH2Cl2:CH3OH，4:1)。
[1562] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.20(d,J＝8.9Hz,1H),7.06‑6.96(m,2H),6.71(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),3.75(s,3H),3.62‑3.52(m,1H),3.37(dd,J＝10.8,7.0Hz,1H),3.09(br s,
1H),2.82(dd,J＝14.3,5.9Hz,1H),2.62(dd,J＝14.4,7.6Hz,1H)。
1H),2.82(dd,J＝14.3,5.9Hz,1H),2.62(dd,J＝14.4,7.6Hz,1H)。
[1563] ESI‑MS m/z:221.6(M+H)+。
[1564] 实施例0‑8
[1565] A)
[1566] 向1(530mg，0.85mmol)于乙酸(10.6mL，0.08M)中的溶液中添加17‑S(469mg，2.13mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌18小时且接着蒸发乙酸。添加饱和NaHCO3水溶液且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，1:1)，得到化合物18‑S(420mg，60％)。
[1567] Rf＝0.3(己烷:EtOAc，1:1)。
[1568] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.13(d,J＝8.8Hz,1H),6.80(d,J＝2.4Hz,1H),6.66(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.51(s,1H),6.27(s,1H),6.11(s,1H),5.21(d,J＝11.7Hz,1H),4.67(s,1H),4.49‑4.29(m,4H),3.75(s,3H),3.73(s,3H),3.47(t,J＝5.8Hz,3H),3.37(d,J＝
5.1Hz,1H),3.01‑2.81(m,2H),2.75(d,J＝7.4Hz,1H),2.66(dd,J＝15.1,4.1Hz,1H),2.55‑
2.35(m,4H),2.34(s,3H),2.28(s,3H),2.11(s,3H),1.99(s,3H)。
5.1Hz,1H),3.01‑2.81(m,2H),2.75(d,J＝7.4Hz,1H),2.66(dd,J＝15.1,4.1Hz,1H),2.55‑
2.35(m,4H),2.34(s,3H),2.28(s,3H),2.11(s,3H),1.99(s,3H)。
[1569] ESI‑MS m/z:824.3(M+H)+。
[1570] B)
[1571] 向18‑S(420mg，0.519mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，36mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(2.60g，15.3mmol)。在23℃下3小时后，将反应混合物用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到19‑S(250mg，60％)。
[1572] Rf＝0.45(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1573] 1H NMR(500MHz,CD3OD):δ7.15(dd,J＝8.9,0.6Hz,1H),6.82(dd,J＝2.4,0.6Hz,1H),6.68(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.54(s,1H),6.27(d,J＝1.3Hz,1H),6.08(d,J＝1.3Hz,
1H),5.30(d,J＝11.5Hz,1H),4.62(s,1H),4.34(dd,J＝11.4,2.0Hz,1H),4.31‑4.27(m,
2H),3.76(s,3H),3.75(s,3H),3.66‑3.58(m,1H),3.55‑3.45(m,2H),3.42(d,J＝7.8Hz,
1H),2.93‑2.73(m,3H),2.68(dd,J＝15.1,4.2Hz,1H),2.54(d,J＝15.4Hz,1H),2.42(dd,J＝15.1,10.1Hz,2H),2.35(s,3H),2.29(s,3H),2.09(s,3H),2.00(s,3H)。
1H),5.30(d,J＝11.5Hz,1H),4.62(s,1H),4.34(dd,J＝11.4,2.0Hz,1H),4.31‑4.27(m,
2H),3.76(s,3H),3.75(s,3H),3.66‑3.58(m,1H),3.55‑3.45(m,2H),3.42(d,J＝7.8Hz,
1H),2.93‑2.73(m,3H),2.68(dd,J＝15.1,4.2Hz,1H),2.54(d,J＝15.4Hz,1H),2.42(dd,J＝15.1,10.1Hz,2H),2.35(s,3H),2.29(s,3H),2.09(s,3H),2.00(s,3H)。
[1574] 13C NMR(126MHz,CD3OD):δ172.7,170.8,155.1,149.9,147.2,145.0,142.6,142.2,133.1,132.4,132.1,131.3,128.1,122.5,121.6,120.3,116.4,113.0,112.9,
111.4,109.0,103.6,100.8,92.5,66.6,65.0,61.7,60.4,59.9,56.7,56.1,54.8,54.1,
51.7,44.1,41.3,30.7,25.4,24.7,20.6,16.3,9.5。
111.4,109.0,103.6,100.8,92.5,66.6,65.0,61.7,60.4,59.9,56.7,56.1,54.8,54.1,
51.7,44.1,41.3,30.7,25.4,24.7,20.6,16.3,9.5。
[1575] ESI‑MS m/z:798.1(M‑H2O+H)+。
[1576] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:797.2899[M‑H2O+H]+(C42H45N4O10S的计算值797.2851)。
[1577] 实施例0‑9
[1578] A)
[1579] 向1(311mg，0.50mmol)于乙酸(6.25mL，0.08M)中的溶液中添加17‑R(220mg，1.0mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌18小时且接着蒸发乙酸。添加饱和NaHCO3水溶液且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，1:1)，得到化合物18‑R(280mg，68％)。
[1580] Rf＝0.3(己烷：EtOAc，1:1)。
[1581] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.53(s,1H),7.18(d,J＝8.7Hz,1H),6.82(d,J＝2.4Hz,1H),6.78(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),6.60(s,1H),6.23(s,1H),6.02(s,1H),5.76(s,1H),5.04(d,J＝11.7Hz,1H),4.62(s,1H),4.36(s,1H),4.28(d,J＝5.0Hz,1H),4.24‑4.09(m,3H),
3.81(s,3H),3.79(s,3H),3.64(s,1H),3.47‑3.40(m,3H),3.01‑2.90(m,2H),2.53(d,J＝
6.9Hz,2H),2.45‑2.41(m,1H),2.40(s,3H),2.27(s,3H),2.22‑2.14(m,1H),2.18(s,3H),
2.06(s,3H)。
3.81(s,3H),3.79(s,3H),3.64(s,1H),3.47‑3.40(m,3H),3.01‑2.90(m,2H),2.53(d,J＝
6.9Hz,2H),2.45‑2.41(m,1H),2.40(s,3H),2.27(s,3H),2.22‑2.14(m,1H),2.18(s,3H),
2.06(s,3H)。
[1582] ESI‑MS m/z:824.3(M+H)+。
[1583] B)
[1584] 向18‑R(330mg，0.40mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，28mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(2.04g，12.0mmol)。在23℃下3小时后，反应用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至
85:15)来纯化，得到19‑R(224mg，69％)。
85:15)来纯化，得到19‑R(224mg，69％)。
[1585] Rf＝0.44(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1586] 1H NMR(500MHz,CD3OD):δ7.14(dd,J＝8.8,0.5Hz,1H),6.83(d,J＝2.5Hz,1H),6.68(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.59(s,1H),6.26(d,J＝1.4Hz,1H),6.07(d,J＝1.4Hz,1H),
5.21(d,J＝11.5Hz,1H),4.68‑4.55(m,1H),4.32‑4.25(m,2H),4.12(dd,J＝11.5,2.1Hz,
1H),3.75(s,3H),3.74(s,3H),3.60(d,J＝5.2Hz,1H),3.57‑3.45(m,3H),3.41(d,J＝
8.8Hz,1H),2.97‑2.83(m,3H),2.73(dd,J＝15.0,3.4Hz,1H),2.69(d,J＝14.9Hz,1H),2.34(s,3H),2.30(s,3H),2.20(dd,J＝15.1,10.4Hz,1H),2.12(s,3H),2.11‑2.08(m,1H),2.05(s,3H)。
5.21(d,J＝11.5Hz,1H),4.68‑4.55(m,1H),4.32‑4.25(m,2H),4.12(dd,J＝11.5,2.1Hz,
1H),3.75(s,3H),3.74(s,3H),3.60(d,J＝5.2Hz,1H),3.57‑3.45(m,3H),3.41(d,J＝
8.8Hz,1H),2.97‑2.83(m,3H),2.73(dd,J＝15.0,3.4Hz,1H),2.69(d,J＝14.9Hz,1H),2.34(s,3H),2.30(s,3H),2.20(dd,J＝15.1,10.4Hz,1H),2.12(s,3H),2.11‑2.08(m,1H),2.05(s,3H)。
[1587] 13C NMR(126MHz,CD3OD):δ173.0,170.8,155.0,149.8,147.3,145.0,142.8,142.3,133.5,133.1,132.2,132.1,131.1,130.5,127.8,122.5,121.7,120.0,116.4,
113.5,112.9,111.4,110.2,103.5,100.9,92.6,66.8,64.5,61.3,60.4,60.0,56.8,56.1,
55.9,54.1,44.1,41.3,25.6,24.5,20.6,16.2,9.6。
113.5,112.9,111.4,110.2,103.5,100.9,92.6,66.8,64.5,61.3,60.4,60.0,56.8,56.1,
55.9,54.1,44.1,41.3,25.6,24.5,20.6,16.2,9.6。
[1588] ESI‑MS m/z:797.4(M‑H2O+H)+。
[1589] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:797.2896[M‑H2O+H]+(C42H45N4O10S的计算值797.2851)。
[1590] 实施例0‑10.合成N‑[(S)‑2‑氨基‑3‑(5‑甲氧基‑1H‑吲哚‑3‑基)丙基)]氨基甲酸烯丙酯(24‑S)
[1591]
[1592] 向17‑S(6.9g，31.4mmol)于CH3CN(126mL，4mL/mmol)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(13.7g，62.8mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌5.5小时，真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)，得到20‑S(4.5g，45％)。
[1593] Rf＝0.6(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1594] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.04(s,1H),7.25(d,J＝8.4Hz,1H),7.10(d,J＝2.4Hz,1H),7.03(s,1H),6.87(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),4.83(s,1H),3.98(s,1H),3.87(s,3H),
3.73‑3.58(m,2H),2.96(d,J＝6.6Hz,2H),1.42(s,9H)。
3.73‑3.58(m,2H),2.96(d,J＝6.6Hz,2H),1.42(s,9H)。
[1595] B)
[1596] 向20‑S(4.5g，14mmol)于CH2Cl2(84mL，6mL/mmol)中的溶液中添加邻苯二甲酰亚胺(4.5g，30.9mmol)、三苯基膦(8.1g，30.9mmol)且混合物冷却在0℃下。历时15分钟添加40％偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)于CH2Cl2(10.4mL，35mmol)中的溶液。将反应在23℃下搅拌18小时，真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，99:1至85:15)来纯化，得到21‑S(5.8g，92％)。
[1597] Rf＝0.55(己烷:EtOAc，1:1)。
[1598] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.48(s,1H),7.78(dd,J＝5.5,3.1Hz,2H),7.69‑7.61(m,2H),7.21(d,J＝8.8Hz,1H),7.06(dd,J＝18.5,2.4Hz,2H),6.81(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),
4.87(s,1H)；4.39(s,1H),3.87(s,3H),3.83‑3.66(m,2H),2.98(d,J＝6.1Hz,2H),1.20(s,
9H)。
4.87(s,1H)；4.39(s,1H),3.87(s,3H),3.83‑3.66(m,2H),2.98(d,J＝6.1Hz,2H),1.20(s,
9H)。
[1599] C)
[1600] 向21‑S(6.29g，14mmol)于乙醇(420mL，30mL/mmol)中的溶液中添加单水合肼(61.1mL，1260mmol)。将反应混合物在密封管里在80℃下搅拌2小时，真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，100:1至50:50)，得到22‑S(4.2g，95％)。
[1601] Rf＝0.1(CH2Cl2:CH3OH，8:2)。
[1602] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.22(d,J＝8.8Hz,1H),7.12(d,J＝2.4Hz,1H),7.06(s,1H),6.76(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),4.06‑3.97(m,1H),3.82(s,3H),3.06‑2.82(m,4H),1.37(s,9H)。
[1603] D)
[1604] 向22‑S(4.0g，12.52mmol)于CH3CN(125mL，10mL/mmol)及DMF(12mL，1mL/mmol)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(1.8mL，10mmol)及氯甲酸烯丙酯(13.3mL，125mmol)。将反应在23℃下搅拌5小时。将混合物用EtOAc稀释且添加NH4Cl且混合物用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，100:1至1:100)来纯化，得到23‑S(2.65g，52％)。
[1605] Rf＝0.5(己烷:EtOAc，1:1)。
[1606] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.11(s,1H),7.28‑7.20(m,1H),7.04(d,J＝13.1Hz,2H),6.85(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),5.97‑5.82(m,1H),5.33‑5.24(m,1H),5.19(dt,J＝10.4,
1.3Hz,1H),5.11(s,1H),4.82(s,1H),4.55(d,J＝5.6Hz,2H),4.01(s,1H),3.86(s,3H),
3.37(d,J＝13.7Hz,1H),3.21(s,1H),2.89(dd,J＝14.5,7.0Hz,1H),1.41(s,9H)。
1.3Hz,1H),5.11(s,1H),4.82(s,1H),4.55(d,J＝5.6Hz,2H),4.01(s,1H),3.86(s,3H),
3.37(d,J＝13.7Hz,1H),3.21(s,1H),2.89(dd,J＝14.5,7.0Hz,1H),1.41(s,9H)。
[1607] E)
[1608] 向23‑S(2.60g，6.44mmol)于CH2Cl2(106mL，16.6mL/mmol)中的溶液中添加三氟乙酸(54mL，8.3mL/mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌1.5小时，真空浓缩，得到24‑S(3.9g，100％)。
[1609] Rf＝0.1(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1610] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ8.27(s,1H),7.25(dd,J＝9.0,2.4Hz,1H),7.10(s,1H),6.96(d,J＝2.3Hz,1H),6.87(dd,J＝9.0,2.4Hz,1H),5.81(ddt,J＝16.3,10.9,5.7Hz,1H),
5.23(dd,J＝19.3,13.6Hz,2H),4.49(d,J＝5.9Hz,2H),3.82(s,3H),3.81‑3.55(m,1H),
3.62‑3.39(m,2H),3.08(qd,J＝15.1,7.3Hz,2H)。
5.23(dd,J＝19.3,13.6Hz,2H),4.49(d,J＝5.9Hz,2H),3.82(s,3H),3.81‑3.55(m,1H),
3.62‑3.39(m,2H),3.08(qd,J＝15.1,7.3Hz,2H)。
[1611] 实施例0‑11
[1612] A)
[1613] 向1(120mg，0.19mmol)于乙酸(6mL，0.08M)中的溶液中添加24‑S(117mg，0.35mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌18小时且接着蒸发乙酸。添加饱和NaHCO3水溶液且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，1:1)，得到化合物25‑S(95mg，54％)。
[1614] Rf＝0.4(己烷:EtOAc，1:1)。
[1615] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.64(s,1H),7.14(d,J＝8.8Hz,1H),6.80(s,1H),6.77(d,J＝8.8Hz,1H),6.68(s,1H),6.24(s,1H),6.03(s,1H),6.02‑5.93(m,1H),5.76(s,1H),
5.38(d,J＝10.5Hz,1H),5.26(d,J＝10.5Hz,1H),5.11(d,J＝11.7Hz,1H),4.66(d,J＝
5.6Hz,2H),4.57(s,1H),4.37(s,1H),4.33‑4.19(m,3H),3.82(s,3H),3.79(s,3H),3.46(s,
2H),3.17(s,1H),3.10‑2.90(m,3H),2.68‑2.45(m,2H),2.38‑2.33(m,1H),2.32(s,3H),
2.27(s,3H),2.16(s,3H),2.04(s,2H)。
5.38(d,J＝10.5Hz,1H),5.26(d,J＝10.5Hz,1H),5.11(d,J＝11.7Hz,1H),4.66(d,J＝
5.6Hz,2H),4.57(s,1H),4.37(s,1H),4.33‑4.19(m,3H),3.82(s,3H),3.79(s,3H),3.46(s,
2H),3.17(s,1H),3.10‑2.90(m,3H),2.68‑2.45(m,2H),2.38‑2.33(m,1H),2.32(s,3H),
2.27(s,3H),2.16(s,3H),2.04(s,2H)。
[1616] ESI‑MS m/z:907.1(M+H)+。
[1617] B)
[1618] 向25‑S(90mg，0.1mmol)于CH2Cl2(2mL，18mL/mmol)中的溶液中添加二氯化双(三苯基膦)钯(II)(12mg，0.1mmol)及乙酸(0.056mL，0.99mmol)。在0℃下添加氢化三丁基锡(0.16mL，0.60mmol)，将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，100:1至1:100及EtOAc:CH3OH，100:1至1:100)，得到26‑S(75mg，92％)。
[1619] Rf＝0.25(CH2Cl2:CH3OH，1:1)。
[1620] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.62(s,1H),7.15(d,J＝9.3Hz,1H),6.81‑6.76(m,2H),6.72(s,1H),6.25(d,J＝1.2Hz,1H),6.03(d,J＝1.2Hz,1H),5.12(d,J＝11.7Hz,1H),4.57
(s,1H),4.41(s,1H),4.36‑4.24(m,2H),4.20(d,J＝11.7Hz,1H),3.82(s,3H),3.79(s,3H),
3.44(dd,J＝22.0,7.1Hz,2H),3.08‑2.78(m,4H),2.73‑2.64(m,2H),2.41‑2.22(m,3H),
2.28(s,3H),2.25‑2.15(m,1H),2.14(s,3H),2.08(s,3H),2.04(s,3H)。
(s,1H),4.41(s,1H),4.36‑4.24(m,2H),4.20(d,J＝11.7Hz,1H),3.82(s,3H),3.79(s,3H),
3.44(dd,J＝22.0,7.1Hz,2H),3.08‑2.78(m,4H),2.73‑2.64(m,2H),2.41‑2.22(m,3H),
2.28(s,3H),2.25‑2.15(m,1H),2.14(s,3H),2.08(s,3H),2.04(s,3H)。
[1621] ESI‑MS m/z:823.3(M+H)+。
[1622] C)
[1623] 向26‑S(70mg，0.085mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，6mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(335mg，1.7mmol)。在23℃下18小时后，反应用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至
85:15)来纯化，得到27‑S(23mg，33％)。
85:15)来纯化，得到27‑S(23mg，33％)。
[1624] Rf＝0.2(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1625] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.62(s,1H),7.15(d,J＝7.8Hz,1H),6.78(s,1H),6.75(d,J＝7.8Hz,1H),6.21(d,J＝1.5Hz,1H),6.01(d,J＝1.5Hz,1H),5.78(s,1H),5.22(d,J＝
11.5Hz,1H),4.90(s,1H),4.58‑4.42(m,3H),4.29‑4.10(m,2H),3.84‑3.80(m,1H),3.83(s,
3H),3.79(s,3H),3.53‑3.48(m,2H),3.22(d,J＝8.7Hz,1H),3.12(s,1H),3.02(d,J＝
12.8Hz,1H),2.89‑2.64(m,3H),2.46(s,3H),2.42‑2.34(m,2H),2.27(s,3H),2.12(s,3H),
2.03(s,3H)。
11.5Hz,1H),4.90(s,1H),4.58‑4.42(m,3H),4.29‑4.10(m,2H),3.84‑3.80(m,1H),3.83(s,
3H),3.79(s,3H),3.53‑3.48(m,2H),3.22(d,J＝8.7Hz,1H),3.12(s,1H),3.02(d,J＝
12.8Hz,1H),2.89‑2.64(m,3H),2.46(s,3H),2.42‑2.34(m,2H),2.27(s,3H),2.12(s,3H),
2.03(s,3H)。
[1626] 13C NMR(126MHz,CDCl3):δ172.1,168.7,154.0,147.6,145.6,143.0,141.2,140.8,131.6,130.6,129.6,127.1,121.8,120.9,118.4,115.2,112.5,111.8,101.8,
100.2,81.5,62.6,60.6,58.0,57.8,56.0,55.8,55.0,42.3,41.4,31.9,29.7,27.8,26.9,
25.6,24.0,22.7,20.5,16.0,14.1,13.6,9.7。
100.2,81.5,62.6,60.6,58.0,57.8,56.0,55.8,55.0,42.3,41.4,31.9,29.7,27.8,26.9,
25.6,24.0,22.7,20.5,16.0,14.1,13.6,9.7。
[1627] ESI‑MS m/z:796.3(M‑H2O+H)+。
[1628] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:796.3062[M‑H2O+H]+(C42H46N5O9S的计算值796.3011)。
[1629] 实施例0‑12.合成N‑[(R)‑2‑氨基‑3‑(5‑甲氧基‑1H‑吲哚‑3‑基)丙基)]氨基甲酸烯丙酯(24‑R)
[1630]
[1631] 向17‑R(2.35g，10.7mmol)于CH3CN(43mL，4mL/mmol)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(4.67g，21.4mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌2.5小时，真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)，得到20‑R(1.7g，50％)。
[1632] Rf＝0.6(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1633] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.05(s,1H),7.25(d,J＝8.9Hz,1H),7.09(d,J＝2.4Hz,1H),7.02(d,J＝2.4Hz,1H),6.86(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),4.83(s,1H),3.98(s,1H),3.87
(s,3H),3.69(td,J＝9.2,7.5,5.3Hz,1H),3.61(dd,J＝10.9,5.6Hz,1H),2.95(d,J＝
6.8Hz,2H),1.42(s,9H)。
(s,3H),3.69(td,J＝9.2,7.5,5.3Hz,1H),3.61(dd,J＝10.9,5.6Hz,1H),2.95(d,J＝
6.8Hz,2H),1.42(s,9H)。
[1634] B)
[1635] 向20‑R(1.7g，5.3mmol)于CH2Cl2(32mL，6mL/mmol)中的溶液中添加邻苯二甲酰亚胺(1.72g，11.7mmol)、三苯基膦(3.06g，11.7mmol)且混合物冷却在0℃下。历时15分钟添加40％偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)于CH2Cl2(4.0mL，13.2mmol)中的溶液。将反应在23℃下搅拌
16小时，真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，99:1至85:15)来纯化，得到
21‑R(2.0g，84％)。
16小时，真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，99:1至85:15)来纯化，得到
21‑R(2.0g，84％)。
[1636] Rf＝0.45(己烷:EtOAc，1:1)。
[1637] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.31(s,1H),7.80(dd,J＝5.4,3.0Hz,2H),7.67(dd,J＝5.4,3.0Hz,2H),7.30‑7.12(m,2H),7.08(dd,J＝15.2,2.4Hz,1H),6.84(dd,J＝8.8,2.4Hz,
1H),4.85(d,J＝9.2Hz,1H),4.43(q,J＝5.3Hz,1H),3.86(s,3H),3.83‑3.68(m,2H),3.01
(d,J＝5.4Hz,2H),1.22(s,9H)。
1H),4.85(d,J＝9.2Hz,1H),4.43(q,J＝5.3Hz,1H),3.86(s,3H),3.83‑3.68(m,2H),3.01
(d,J＝5.4Hz,2H),1.22(s,9H)。
[1638] C)
[1639] 向21‑R(2.0g，4.45mmol)于乙醇(133mL，30mL/mmol)中的溶液中添加单水合肼(21.6mL，445mmol)。将反应混合物在密封管里在80℃下搅拌2小时，真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，100:1至50:50)，得到22‑R(1.15g，81％)。
[1640] Rf＝0.1(CH2Cl2:CH3OH，8:2)。
[1641] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.21(d,J＝8.8Hz,1H),7.12(s,1H),7.05(s,1H),6.75(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),3.95(ddd,J＝10.7,8.7,5.4Hz,1H),3.82(s,3H),2.98‑2.79(m,
3H),2.75(dd,J＝13.1,9.4Hz,1H),1.37(s,9H)。
3H),2.75(dd,J＝13.1,9.4Hz,1H),1.37(s,9H)。
[1642] D)
[1643] 向22‑R(1.1g，3.4mmol)于CH3CN(34mL，10mL/mmol)及DMF(3.4mL，1mL/mmol)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(0.5mL，2.7mmol)及氯甲酸烯丙酯(3.7mL，34mmol)。将反应在23℃下搅拌19小时。将混合物用EtOAc稀释且添加NH4Cl且混合物用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，100:1至1:100)来纯化，得到23‑R(0.95g，69％)。
[1644] Rf＝0.5(己烷:EtOAc，1:1)。
[1645] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.55(s,1H),7.20(d,J＝8.8Hz,1H),7.05(s,1H),6.98‑6.87(m,1H),6.82(dt,J＝8.8,1.8Hz,1H),5.96‑5.81(m,1H),5.37‑5.22(m,2H),5.22‑5.14(m,1H),5.02‑4.97(m,1H),4.60‑4.47(m,2H),4.00(s,1H),3.84(s,3H),3.31(s,1H),3.19(s,1H),2.88(td,J＝14.5,13.3,5.9Hz,2H),1.40(s,9H)。
[1646] E)
[1647] 向23‑R(0.94g，2.3mmol)于CH2Cl2(39mL，16.6mL/mmol)中的溶液中添加三氟乙酸(19mL，8.3mL/mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌1.5小时，真空浓缩，得到24‑R(0.72g，100％)。
[1648] Rf＝0.1(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1649] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.27(d,J＝8.8,1H),7.18(s,1H),7.04(d,J＝2.4Hz,1H),6.80(ddd,J＝8.8,2.4,0.9Hz,1H),5.95(ddt,J＝16.4,10.8,5.5Hz,1H),5.32(d,J＝
17.1Hz,1H),5.20(d,J＝10.5Hz,1H),4.60‑4.53(m,2H),3.83(s,3H),3.59(dt,J＝11.4,
5.5Hz,1H),3.47‑3.30(m,2H),3.13‑2.94(m,2H)。
17.1Hz,1H),5.20(d,J＝10.5Hz,1H),4.60‑4.53(m,2H),3.83(s,3H),3.59(dt,J＝11.4,
5.5Hz,1H),3.47‑3.30(m,2H),3.13‑2.94(m,2H)。
[1650] 实施例0‑13
[1651] A)
[1652] 向1(0.71g，1.14mmol)于乙酸(45mL，0.08M)中的溶液中添加24‑R(0.54mg，1.8mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌7小时且接着蒸发乙酸。添加饱和NaHCO3水溶液且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，1:1)，得到化合物25‑R(670mg，65％)。
[1653] Rf＝0.4(己烷：EtOAc，1:1)。
[1654] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.52(s,1H),7.17(d,J＝8.8Hz,1H),6.83‑6.73(m,2H),6.61(s,1H),6.23(d,J＝1.0Hz,1H),6.02(d,J＝1.0Hz,1H),6.05‑5.89(m,1H),5.75(s,
1H),5.44‑5.30(m,1H),5.25(d,J＝10.4Hz,1H),5.13‑4.99(m,2H),4.71‑4.59(m,2H),4.36(s,1H),4.30‑4.07(m,3H),3.80(s,3H),3.79(s,3H),3.61‑3.53(m,1H)；3.48‑3.41(m,3H),
3.26(dt,J＝13.3,3.8Hz,1H),3.04‑2.88(m,2H),2.52(dd,J＝14.9,3.7Hz,1H),2.46‑2.35(m,2H),2.31(s,3H),2.29(s,3H),2.16(s,3H),2.12‑2.02(m,1H),2.09(s,3H)。
1H),5.44‑5.30(m,1H),5.25(d,J＝10.4Hz,1H),5.13‑4.99(m,2H),4.71‑4.59(m,2H),4.36(s,1H),4.30‑4.07(m,3H),3.80(s,3H),3.79(s,3H),3.61‑3.53(m,1H)；3.48‑3.41(m,3H),
3.26(dt,J＝13.3,3.8Hz,1H),3.04‑2.88(m,2H),2.52(dd,J＝14.9,3.7Hz,1H),2.46‑2.35(m,2H),2.31(s,3H),2.29(s,3H),2.16(s,3H),2.12‑2.02(m,1H),2.09(s,3H)。
[1655] ESI‑MS m/z:907.3(M+H)+。
[1656] B)
[1657] 向25‑R(745mg，0.82mmol)于CH2Cl2(15mL，18mL/mmol)中的溶液中添加二氯化双(三苯基膦)钯(II)(92mg，0.1mmol)及乙酸(0.47mL，8.2mmol)。在0℃下添加氢化三丁基锡(1.33mL，4.9mmol)，将反应混合物在0℃下搅拌0.75小时且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，100:1至1:100及EtOAc:CH3OH，100:1至1:100)，得到26‑R(680mg，>100％)。
[1658] Rf＝0.25(CH2Cl2:CH3OH，1:1)。
[1659] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.57(s,1H),7.16(d,J＝8.8Hz,1H),6.85‑6.72(m,2H),6.57(s,1H),6.21(d,J＝1.4Hz,1H),6.00(d,J＝1.3Hz,1H),5.05‑4.97(m,1H),4.63(s,
1H),4.35(s,1H),4.31‑4.09(m,4H),3.80(s,3H),3.78(s,3H),3.50‑3.40(m,3H),3.24(dq,J＝9.9,5.3Hz,1H),2.95(s,1H),2.91‑2.75(m,2H),2.62(dd,J＝14.8,3.6Hz,1H),2.43‑
2.28(m,2H),2.36(s,3H),2.25(s,3H),2.22‑2.14(m,1H),2.15(s,3H),2.08(s,3H)。
1H),4.35(s,1H),4.31‑4.09(m,4H),3.80(s,3H),3.78(s,3H),3.50‑3.40(m,3H),3.24(dq,J＝9.9,5.3Hz,1H),2.95(s,1H),2.91‑2.75(m,2H),2.62(dd,J＝14.8,3.6Hz,1H),2.43‑
2.28(m,2H),2.36(s,3H),2.25(s,3H),2.22‑2.14(m,1H),2.15(s,3H),2.08(s,3H)。
[1660] ESI‑MS m/z:823.3(M+H)+。
[1661] C)
[1662] 向26‑R(660mg，0.80mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，56mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(2.70g，16.0mmol)。在23℃下16.5小时后，反应用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到27‑R(271mg，42％)。
[1663] Rf＝0.1(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1664] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.46(s,1H),7.16(d,J＝8.9Hz,1H),6.83(s,1H),6.72(d,J＝8.9Hz,1H),6.58(s,1H),6.20(d,J＝1.8Hz,1H),5.99(d,J＝1.8Hz,1H),5.76(s,
1H),5.15(d,J＝11.4Hz,1H),4.86(s,1H),4.52(m,2H),4.17(d,J＝5.3Hz,1H),4.07(d,J＝
11.4Hz,1H),3.80(s,3H),3.78(s,3H),3.55‑3.43(m,2H),3.32‑3.20(m,2H),3.01‑2.82(m,
4H),2.68‑2.59(m,1H),2.44‑2.31(m,1H),2.38(s,3H),2.30‑2.19(m,1H),2.26(s,3H),
2.15(s,3H),2.07(s,3H)。
1H),5.15(d,J＝11.4Hz,1H),4.86(s,1H),4.52(m,2H),4.17(d,J＝5.3Hz,1H),4.07(d,J＝
11.4Hz,1H),3.80(s,3H),3.78(s,3H),3.55‑3.43(m,2H),3.32‑3.20(m,2H),3.01‑2.82(m,
4H),2.68‑2.59(m,1H),2.44‑2.31(m,1H),2.38(s,3H),2.30‑2.19(m,1H),2.26(s,3H),
2.15(s,3H),2.07(s,3H)。
[1665] 13C NMR(101MHz,CD3OD):δ171.7,171.3,153.8,153.3,148.0,147.6,145.4,145.4,143.1,141.3,140.7,131.6,131.4,131.2,129.3,126.8,121.6,120.9,118.3,
115.6,112.2,111.8,101.8,100.2,81.7,63.5,63.1,61.7,58.0,57.8,56.1,55.8,55.0,
42.2,42.1,41.4,41.0,25.1,23.8,20.5,16.0,9.7。
115.6,112.2,111.8,101.8,100.2,81.7,63.5,63.1,61.7,58.0,57.8,56.1,55.8,55.0,
42.2,42.1,41.4,41.0,25.1,23.8,20.5,16.0,9.7。
[1666] ESI‑MS m/z:796.3(M‑H2O+H)+。
[1667] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:796.3045[M‑H2O+H]+(C42H46N5O9S的计算值796.3011)。
[1668] 实施例0‑14
[1669] A)
[1670] 向化合物1(2.0g，3.21mmol)于乙腈(200mL，0.01M)中的溶液中添加2‑苯并呋喃‑3‑基‑乙基胺盐酸盐(30)(1.90g，9.65mmol，Sigma Aldrich)及三聚氯氰(TCT)(200mg，
10％)。将反应混合物在85℃下搅拌24小时且接着添加饱和NaHCO3水溶液且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，9:
1至1:9)，得到化合物31(1.95g，79％)。
10％)。将反应混合物在85℃下搅拌24小时且接着添加饱和NaHCO3水溶液且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，9:
1至1:9)，得到化合物31(1.95g，79％)。
[1671] Rf＝0.5(己烷:EtOAc，1:1)。
[1672] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.38‑7.36(m,2H),7.19‑7.10(m,2H),6.64(s,1H),6.20(d,J＝1.5Hz,1H),6.05(d,J＝1.5Hz,1H),5.76(s,1H),5.05(d,J＝11.7Hz,1H),4.54(s,1H),4.33‑4.24(m,2H),4.23‑4.16(m,2H),3.81(s,3H),3.49‑3.38(m,2H),3.28‑3.21(m,
1H),3.06‑2.78(m,5H),2.57‑2.50(m,2H),2.37(s,3H),2.27(s,3H),2.21(m,3H),2.08(s,
3H)。
1H),3.06‑2.78(m,5H),2.57‑2.50(m,2H),2.37(s,3H),2.27(s,3H),2.21(m,3H),2.08(s,
3H)。
[1673] ESI‑MS m/z:765.3(M+H)+。
[1674] B)
[1675] 向化合物31(380mg，0.49mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，25mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(1.30g，7.45mmol)。在23℃下5小时后，添加饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到化合物32(175mg，47％)。
[1676] Rf＝0.40(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1677] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.35(ddd,J＝10.7,7.6,1.1Hz,2H),7.14(dtd,J＝19.7,7.3,1.3Hz,2H),6.65(s,1H),6.16(d,J＝1.5Hz,1H),6.01(d,J＝1.5Hz,1H),5.75(s,1H),
5.15(dd,J＝11.5,1.2Hz,1H),4.80(s,1H),4.48(d,J＝3.2Hz,1H),4.44(s,1H),4.20‑4.06(m,2H),3.81(s,1H),3.50(d,J＝18.8Hz,1H),3.30(ddd,J＝12.6,7.9,5.1Hz,1H),3.22(d,J＝9.1Hz,1H),2.99(d,J＝17.9Hz,1H),2.84(dd,J＝19.2,12.0Hz,3H),2.59‑2.49(m,2H),
2.36(s,3H),2.27(s,3H),2.21‑2.14(m,1H),2.18(s,3H),2.06(s,3H)。
5.15(dd,J＝11.5,1.2Hz,1H),4.80(s,1H),4.48(d,J＝3.2Hz,1H),4.44(s,1H),4.20‑4.06(m,2H),3.81(s,1H),3.50(d,J＝18.8Hz,1H),3.30(ddd,J＝12.6,7.9,5.1Hz,1H),3.22(d,J＝9.1Hz,1H),2.99(d,J＝17.9Hz,1H),2.84(dd,J＝19.2,12.0Hz,3H),2.59‑2.49(m,2H),
2.36(s,3H),2.27(s,3H),2.21‑2.14(m,1H),2.18(s,3H),2.06(s,3H)。
[1678] 13C NMR(101MHz,CDCl3):δ171.2,168.7,154.4,150.0,147.9,145.5,142.9,140.9,140.8,131.3,129.0,127.7,123.7,122.2,121.2,120.8,118.9,118.3,115.5,
113.5,111.7,101.7,82.1,62.7,61.7,60.3,57.8,57.4,55.9,55.0,42.2,41.3,39.7,
38.2,29.7,23.7,21.3,20.6,15.9,9.7。
113.5,111.7,101.7,82.1,62.7,61.7,60.3,57.8,57.4,55.9,55.0,42.2,41.3,39.7,
38.2,29.7,23.7,21.3,20.6,15.9,9.7。
[1679] ESI‑MS m/z:738.6(M‑H2O+H)+。
[1680] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:756.2654[M+H]+(C40H42N3O10S的计算值756.2585)。
[1681] 实施例0‑15
[1682] A)
[1683] 向1(500mg，0.80mmol)于乙酸(10mL，0.08M)中的溶液中添加2‑(5‑甲氧基苯并呋喃‑3‑基)‑乙基胺盐酸盐(33)(Diverchim，ref：DW04590)(444mg，1.60mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌6天且接着蒸发乙酸。添加饱和NaHCO3水溶液且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，1:1)，得到34(270mg，43％)。
[1684] Rf＝0.3(己烷:EtOAc，1:1)。
[1685] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.25(d,J＝9.1Hz,1H),6.80‑6.73(m,2H),6.63(s,1H),6.18(d,J＝1.4Hz,1H),6.03(d,J＝1.4Hz,1H),5.78(s,1H),5.03(dd,J＝11.5,1.3Hz,1H),
4.52(s,1H),4.29(s,1H),4.26(dd,J＝4.7,1.5Hz,1H),4.23‑4.16(m,2H),3.80(s,3H),
3.78(s,3H),3.46‑3.43(m,1H),3.43‑3.37(m,1H),3.24(s,1H),3.03(d,J＝18.0Hz,1H),
2.91(dd,J＝17.9,9.2Hz,1H),2.87‑2.72(m,2H),2.53‑2.47(m,2H),2.36(s,3H),2.27(s,
3H),2.20(s,3H),2.06(s,3H)。
4.52(s,1H),4.29(s,1H),4.26(dd,J＝4.7,1.5Hz,1H),4.23‑4.16(m,2H),3.80(s,3H),
3.78(s,3H),3.46‑3.43(m,1H),3.43‑3.37(m,1H),3.24(s,1H),3.03(d,J＝18.0Hz,1H),
2.91(dd,J＝17.9,9.2Hz,1H),2.87‑2.72(m,2H),2.53‑2.47(m,2H),2.36(s,3H),2.27(s,
3H),2.20(s,3H),2.06(s,3H)。
[1686] ESI‑MS m/z:795.8(M+H)+。
[1687] B)
[1688] 向34(345mg，0.43mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，30mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(2.20g，13.0mmol)。在23℃下3小时后，添加饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到35(175mg，51％)。
[1689] Rf＝0.35(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1690] 1H NMR(500MHz,CD3OD):δ7.27(d,J＝9.0Hz,1H),6.90(d,J＝2.6Hz,1H),6.80(dd,J＝9.0,2.6Hz,1H),6.57(s,1H),6.23(d,J＝1.2Hz,1H),6.05(d,J＝1.2Hz,1H),5.23(d,J＝11.5Hz,1H),4.27‑4.08(m,4H),3.77(s,3H),3.75(s,3H),3.63(d,J＝14.1Hz,2H),3.40‑
3.34(m,2H),2.93‑2.87(m,5H),2.80(d,J＝15.5Hz,1H),2.57‑2.54(m,2H),2.34(s,3H),
2.30(s,3H),2.14(s,3H),2.05(s,3H)。
3.34(m,2H),2.93‑2.87(m,5H),2.80(d,J＝15.5Hz,1H),2.57‑2.54(m,2H),2.34(s,3H),
2.30(s,3H),2.14(s,3H),2.05(s,3H)。
[1691] 13C NMR(126MHz,CD3OD):δ171.9,170.6,157.5,147.0,145.0,142.3,141.0,132.2,131.1,129.1,122.2,120.9,120.2,116.3,115.1,114.0,112.7,111.4,103.5,
102.7,92.9,62.0,60.3,59.8,59.4,56.5,56.2,56.0,54.0,43.8,41.2,40.7,30.8,30.3,
28.7,24.5,21.6,20.6,16.2,9.6。
102.7,92.9,62.0,60.3,59.8,59.4,56.5,56.2,56.0,54.0,43.8,41.2,40.7,30.8,30.3,
28.7,24.5,21.6,20.6,16.2,9.6。
[1692] ESI‑MS m/z:768.6(M‑H2O+H)+。
[1693] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:768.2630[M‑H2O+H]+(C41H42N3O10S的计算值768.2585)。
[1694] 实施例0‑16
[1695]
[1696] 在‑40℃下向LiAlH4溶液(148mL，1.0M的THF溶液，148mmol)中小心添加H2SO4(7.14mL，72.9mmol)及(S)‑2‑氨基‑3‑(苯并呋喃‑3‑基)丙酸(36‑S)(如Tetrahedron Asymmetry 2008，19，500‑511中所述制备)(5.54g，26.9mmol)于THF(85mL，0.003M)中的悬浮液。使反应混合物在23℃下进展，在80℃下加热3小时且在23℃下18小时。在‑21℃下冷却，反应混合物小心用NaOH 2N中止，直至碱性pH。添加EtOAc且混合物经 过滤且用
CH3OH洗涤。粗物质经真空浓缩，得到化合物37‑S(3.93g，>100％)。
CH3OH洗涤。粗物质经真空浓缩，得到化合物37‑S(3.93g，>100％)。
[1697] Rf＝0.1(CH2Cl2:CH3OH，4:1)。
[1698] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.67‑7.62(m,1H),7.61(s,1H),7.51‑7.41(m,1H),7.34‑7.18(m,2H),3.69‑3.48(m,1H),3.44(dd,J＝10.8,6.6Hz,1H),3.18(dtd,J＝7.4,6.4,
4.6Hz,1H),2.88(ddd,J＝14.4,6.1,1.0Hz,1H),2.68(ddd,J＝14.4,7.5,0.9Hz,1H)。
4.6Hz,1H),2.88(ddd,J＝14.4,6.1,1.0Hz,1H),2.68(ddd,J＝14.4,7.5,0.9Hz,1H)。
[1699] 实施例0‑17
[1700]
[1701] 在‑40℃下向LiAlH4溶液(118mL，1.0M的THF溶液，118mmol)中小心添加H2SO4(3.1mL，57.8mmol)及(R)‑2‑氨基‑3‑(苯并呋喃‑3‑基)丙酸(36‑R)(如Tetrahedron Asymmetry 2008，19，500‑511中所述制备)(4.4g，21.4mmol)于THF(67.4mL，0.003M)中的悬浮液。使反应混合物在23℃下进展，在80℃下加热3小时且在23℃下18小时。在‑21℃下冷却，反应混合物小心用NaOH 2N中止，直至碱性pH。EtOAc添加且混合物经 过滤且用
CH3OH洗涤。粗物质经真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15，Silice amine)，得到化合物37‑R(2.77g，68％)。
CH3OH洗涤。粗物质经真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15，Silice amine)，得到化合物37‑R(2.77g，68％)。
[1702] Rf＝0.1(CH2Cl2:CH3OH，4:1)。
[1703] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.63‑7.52(m,1H),7.56(s,1H),7.46‑7.33(m,1H),7.21(dtd,J＝19.9,7.3,1.3Hz,2H),3.57(dd,J＝10.7,4.6Hz,1H),3.42(dd,J＝10.8,6.6Hz,1H),3.15(dtd,J＝7.6,6.3,4.6Hz,1H),2.84(ddd,J＝14.4,6.0,1.0Hz,1H),2.64(ddd,J＝
14.4,7.5,0.9Hz,1H)。
14.4,7.5,0.9Hz,1H)。
[1704] 实施例0‑18
[1705] A)
[1706] 向化合物1(850mg，1.36mmol)于CH3CN(136mL，0.01M)中的溶液中添加(S)‑2‑氨基‑3‑(苯并呋喃‑3‑基)丙‑1‑醇(37‑S)(1.30g，6.83mmol及三聚氯氰(TCT)(170mg，20％)。将反应混合物在85℃下搅拌24小时且接着添加饱和水溶液NaHCO3且混合物用CH2Cl2萃取。
合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，9:1至1:
9)，得到化合物38‑S(750mg，69％)。
合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，9:1至1:
9)，得到化合物38‑S(750mg，69％)。
[1707] Rf＝0.25(己烷:EtOAc，1:1)。
[1708] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.39‑7.33(m,1H),7.33‑7.29(m,1H),7.20(ddd,J＝8.3,7.2,1.4Hz,1H),7.14(td,J＝7.4,1.0Hz,1H),6.61(s,1H),6.21(d,J＝1.4Hz,1H),6.06(d,J＝1.4Hz,1H),5.74(s,1H),5.08(d,J＝11.2Hz,1H),4.58(s,1H),4.37(s,1H),4.32‑4.23(m,2H),4.19(d,J＝2.7Hz,1H),3.81(s,3H),3.52‑3.41(m,3H),3.36‑3.29(m,1H),3.13(d,J＝9.8Hz,1H),3.00‑2.81(m,3H),2.57(dd,J＝15.7,4.9Hz,1H),2.50(d,J＝15.2Hz,1H),
2.37(s,3H),2.31‑2.25(m,1H),2.29(s,3H),2.16(s,3H),2.10(d,J＝7.2Hz,1H),2.05(s,
3H)。
2.37(s,3H),2.31‑2.25(m,1H),2.29(s,3H),2.16(s,3H),2.10(d,J＝7.2Hz,1H),2.05(s,
3H)。
[1709] ESI‑MS m/z:795.2(M)+。
[1710] B)
[1711] 向化合物38‑S(890mg，1.12mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，75mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(4.70g，28.0mmol)。在23℃下18小时后，添加饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到化合物39‑S(500mg，57％)。
[1712] Rf＝0.30(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1713] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.38‑7.33(m,1H),7.33‑7.28(m,1H),7.23‑7.16(m,1H),7.16‑7.09(m,1H),6.62(s,1H),6.18(d,J＝1.4Hz,1H),6.03(d,J＝1.4Hz,1H),5.71(s,
1H),5.19(d,J＝11.2Hz,1H),4.85(s,1H),4.49(s,2H),4.24‑4.10(m,3H),3.81(s,3H),
3.54(d,J＝4.9Hz,1H),3.49(d,J＝2.3Hz,3H),3.33(t,J＝10.1Hz,2H),3.22(s,1H),2.98
(s,1H),2.84(d,J＝7.6Hz,2H),2.62‑2.53(m,2H),2.37(s,3H),2.30‑2.24(m,1H),2.28(s,
3H),2.14(s,3H),2.04(s,3H)。
1H),5.19(d,J＝11.2Hz,1H),4.85(s,1H),4.49(s,2H),4.24‑4.10(m,3H),3.81(s,3H),
3.54(d,J＝4.9Hz,1H),3.49(d,J＝2.3Hz,3H),3.33(t,J＝10.1Hz,2H),3.22(s,1H),2.98
(s,1H),2.84(d,J＝7.6Hz,2H),2.62‑2.53(m,2H),2.37(s,3H),2.30‑2.24(m,1H),2.28(s,
3H),2.14(s,3H),2.04(s,3H)。
[1714] 13C NMR(126MHz,CDCl3):δ172.0,170.7,156.1,150.6,149.9,147.1,145.0,142.4,142.2,132.0,131.4,128.7,125.5,123.8,122.6,121.6,120.1,116.5,114.4,
112.3,103.5,92.6,66.0,65.1,62.2,60.4,59.7,56.6,56.1,54.8,54.1,51.6,44.0,41.3,
38.3,30.8,24.8,20.6,16.3,9.6。
112.3,103.5,92.6,66.0,65.1,62.2,60.4,59.7,56.6,56.1,54.8,54.1,51.6,44.0,41.3,
38.3,30.8,24.8,20.6,16.3,9.6。
[1715] ESI‑MS m/z:768.2(M‑H2O+H)+。
[1716] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:768.2652[M‑H2O+H]+(C41H42N3O10S的计算值768.2585)[1717] 实施例0‑19
[1718] A)
[1719] 向化合物1(100mg，0.16mmol)于CH3CN(16mL，0.01M)中的溶液中添加(R)‑2‑氨基‑3‑(苯并呋喃‑3‑基)丙‑1‑醇(37‑R)(307mg，1.6mmol)及三聚氯氰(TCT)(40mg，40％)。将反应混合物在85℃下搅拌44小时且接着添加饱和水溶液NaHCO3且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，9:1至1:9)，得到化合物38‑R(95mg，75％)。
[1720] Rf＝0.3(己烷:EtOAc，1:1)。
[1721] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.42‑7.27(m,2H),7.28‑7.09(m,2H),6.58(s,1H),6.20(d,J＝1.4Hz,1H),6.05(d,J＝1.4Hz,1H),5.79(s,1H),5.00(d,J＝11.4Hz,1H),4.59(s,1H),4.34(s,1H),4.31‑4.16(m,4H),3.80(s,3H),3.79‑3.76(m,1H),3.63(s,1H),3.54‑
3.40(m,4H),2.99‑2.87(m,2H),2.68(d,J＝15.0Hz,1H),2.56‑2.47(m,1H),2.38(s,3H),
2.27(s,3H),2.17(s,3H),2.07(s,3H)。
3.40(m,4H),2.99‑2.87(m,2H),2.68(d,J＝15.0Hz,1H),2.56‑2.47(m,1H),2.38(s,3H),
2.27(s,3H),2.17(s,3H),2.07(s,3H)。
[1722] ESI‑MS m/z:795.2(M+H)+。
[1723] B)
[1724] 向化合物38‑R(95mg，0.11mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，11mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(601mg，3.58mmol)。在23℃下18小时后，添加饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:
15)来纯化，得到化合物39‑R(66mg，70％)。
15)来纯化，得到化合物39‑R(66mg，70％)。
[1725] Rf＝0.3(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1726] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.39‑7.31(m,2H),7.23‑7.07(m,2H),6.59(s,1H),6.17(d,J＝1.4Hz,1H),6.01(d,J＝1.4Hz,1H),5.75(s,1H),5.12(dd,J＝11.3,1.2Hz,1H),4.84(s,1H),4.56‑4.43(m,2H),4.19‑4.07(m,3H),3.79(s,3H),3.83‑3.74(m,1H),3.66‑3.51(m,3H),3.24(s,1H),2.99‑2.79(m,2H),2.75‑2.64(m,1H),2.59‑2.43(m,2H),2.38(s,3H),2.27(s,3H),2.16(s,3H),2.07(s,3H)。
[1727] 13C NMR(101MHz,CD3OD)δ170.5,169.1,154.9,148.9,148.5,145.7,143.6,141.1,140.8,130.6,129.9,127.1,124.1,122.4,122.4,121.2,120.3,118.7,118.2,115.1,
113.6,110.9,102.1,91.1,65.0,63.3,60.2,59.0,58.4,55.4,54.5,52.7,52.3,42.5,
38.7,29.4,23.5,23.2,19.1,14.8,8.3。
113.6,110.9,102.1,91.1,65.0,63.3,60.2,59.0,58.4,55.4,54.5,52.7,52.3,42.5,
38.7,29.4,23.5,23.2,19.1,14.8,8.3。
[1728] ESI‑MS m/z:768.2(M‑H2O+H)+。
[1729] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:767.2628[M‑H2O+H]+(C41H42N3O10S的计算值768.2585)。
[1730] 实施例0‑20.合成烯丙基‑N‑[(S)‑2‑氨基‑3‑(苯并呋喃‑3‑基)丙基]氨基甲酸酯(44‑S)
[1731]
[1732] 向化合物37‑S(1.0g，5.22mmol)于CH3CN(21mL，4mL/mmol)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(2.28g，10.4mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌2小时，真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)，得到化合物40‑S(0.5g，33％)。
[1733] Rf＝0.7(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1734] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.64(d,J＝7.6Hz,1H),7.49(s,1H),7.46(d,J＝7.6Hz,1H),7.36‑7.19(m,2H),4.94(s,1H),3.98(s,1H),3.71‑3.56(m,2H),2.93(d,J＝6.9Hz,
2H),1.41(s,9H)。
2H),1.41(s,9H)。
[1735] B)
[1736] 向化合物40‑S(0.5g，1.71mmol)于CH2Cl2(11mL，6mL/mmol)中的溶液中添加邻苯二甲酰亚胺(0.55g，3.77mmol)、三苯基膦(0.99g，3.77mmol)且混合物冷却在0℃下。历时15分钟添加40％偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)于CH2Cl2(1.26mL，4.29mmol)中的溶液。将反应在23℃下搅拌18小时，真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，99:1至40:60)来纯化，得到化合物41‑S(0.68g，94％)。
[1737] Rf＝0.8(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1738] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.89‑7.79(m,2H),7.83‑7.62(m,2H),7.65‑7.55(m,2H),7.49‑7.42(m,1H),7.33‑7.20(m,2H),4.83(d,J＝9.0Hz,1H),4.39(ddt,J＝12.1,6.3,
2.9Hz,1H),3.88‑3.70(m,2H),2.96(d,J＝6.4Hz,2H),1.24(s,9H)。
2.9Hz,1H),3.88‑3.70(m,2H),2.96(d,J＝6.4Hz,2H),1.24(s,9H)。
[1739] C)
[1740] 向化合物41‑S(345mg，0.82mmol)于乙醇(25mL，30mL/mmol)中的溶液中添加单水合肼(3.6mL，73.8mmol)。将反应混合物在密封管里在80℃下搅拌2小时，真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，100:1至50:50)，得到化合物42‑S(233mg，98％)。
[1741] Rf＝0.1(CH2Cl2:CH3OH，8:2)。
[1742] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.62(d,J＝7.5Hz,1H),7.49‑7.42(m,2H),7.33‑7.18(m,2H),4.85(d,J＝8.8Hz,1H),3.91(s,1H),2.91‑2.76(m,3H),2.67(dd,J＝13.1,6.8Hz,1H),
1.25(s,9H)。
1.25(s,9H)。
[1743] D)
[1744] 向化合物42‑S(280mg，0.96mmol)于CH3CN(10mL，10mL/mmol)及DMF(16mL，1mL/mmol)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(0.14mL，0.77mmol)及氯甲酸烯丙酯(1.02mL，9.64mmol)。将反应在23℃下搅拌2小时。将混合物用EtOAc稀释且添加NH4Cl且混合物用
EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，100:1至1:100)来纯化，得到化合物43‑S(445mg，>100％)。
EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，100:1至1:100)来纯化，得到化合物43‑S(445mg，>100％)。
[1745] Rf＝0.5(己烷:EtOAc，1:1)。
[1746] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.60(d,J＝7.6Hz,1H),7.52‑7.43(m,2H),7.34‑7.20(m,2H),5.90(ddt,J＝16.4,10.8,5.6Hz,1H),5.32‑5.17(m,2H),4.93‑4.86(m,1H),4.56(d,J＝5.6Hz,2H),4.08‑3.98(m,1H),3.40‑3.21(m,2H),2.88(m,2H),1.25(s,9H)。
[1747] E)
[1748] 向化合物43‑S(160mg，0.43mmol)于CH2Cl2(8mL，16.6mL/mmol)中的溶液中添加三氟乙酸(4mL，8.3mL/mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌1.5小时，真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，100:1至50:50)，得到化合物44‑S(175mg，>100％)。
[1749] Rf＝0.2(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1750] 1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.72(s,1H),7.64(dt,J＝8.4,0.9Hz,1H),7.49(dt,J＝8.4,0.9Hz,1H),7.37‑7.22(m,2H),5.94(ddt,J＝16.3,10.7,5.5Hz,1H),5.32(dq,J＝
17.3,1.7Hz,1H),5.19(dq,J＝10.6,1.5Hz,1H),4.56(dt,J＝5.7,1.5Hz,2H),3.56(qd,J＝
7.0,4.4Hz,1H),3.46‑3.32(m,1H),3.32‑3.24(m,1H),3.03(dd,J＝14.8,6.9Hz,1H),2.91(ddd,J＝14.8,7.1,0.9Hz,1H)。
17.3,1.7Hz,1H),5.19(dq,J＝10.6,1.5Hz,1H),4.56(dt,J＝5.7,1.5Hz,2H),3.56(qd,J＝
7.0,4.4Hz,1H),3.46‑3.32(m,1H),3.32‑3.24(m,1H),3.03(dd,J＝14.8,6.9Hz,1H),2.91(ddd,J＝14.8,7.1,0.9Hz,1H)。
[1751] 实施例0‑21.合成烯丙基‑N‑[(R)‑2‑氨基‑3‑(苯并呋喃‑3‑基)丙基]氨基甲酸酯(44‑R)
[1752]
[1753] 向化合物37‑R(2.75g，14.4mmol)于CH3CN(58mL，4mL/mmol)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(6.27g，28.76mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌2.5小时，真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)，得到化合物40‑R(3.7g，88％)。
[1754] Rf＝0.6(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1755] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.64(d,J＝7.6Hz,1H),7.52‑7.43(m,2H),7.35‑7.20(m,2H),4.85(d,J＝8.2Hz,1H),4.00(bs,1H),3.69(dd,J＝11.0,4.0Hz,1H),3.62(dd,J＝
10.9,5.1Hz,1H),2.94(d,J＝6.9Hz,2H),1.42(s,9H)。
10.9,5.1Hz,1H),2.94(d,J＝6.9Hz,2H),1.42(s,9H)。
[1756] B)
[1757] 向化合物40‑R(3.7g，12.7mmol)于CH2Cl2(76mL，6mL/mmol)中的溶液中添加邻苯二甲酰亚胺(4.1g，28mmol)、三苯基膦(7.3g，28mmol)且混合物冷却在0℃下。历时15分钟添加40％偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)于CH2Cl2(9.4mL，31.7mmol)中的溶液。将反应在23℃下搅拌
16小时，真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到化合物41‑R(4.05g，76％)。
16小时，真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到化合物41‑R(4.05g，76％)。
[1758] Rf＝0.8(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1759] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.67‑7.68(m,4H),7.61(d,J＝7.5Hz,1H),7.58(s,1H),7.46(d,J＝7.5Hz,1H),7.27(dtd,J＝17.2,7.3,1.4Hz,2H),4.84(d,J＝9.0Hz,1H),4.46‑
4.30(m,1H),3.89‑3.66(m,2H),2.97(d,J＝6.4Hz,2H),1.24(s,9H)。
4.30(m,1H),3.89‑3.66(m,2H),2.97(d,J＝6.4Hz,2H),1.24(s,9H)。
[1760] C)
[1761] 向化合物41‑R(4.0g，9.5mmol)于乙醇(285mL，30mL/mmol)中的溶液中添加单水合肼(41.5mL，856mmol)。将反应混合物在密封管里在80℃下搅拌2小时，真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，100:1至50:50)，得到化合物42‑R(2.2g，80％)。
[1762] Rf＝0.1(CH2Cl2:CH3OH，8:2)。
[1763] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.60(d,J＝7.5Hz,1H),7.45(s,1H),7.44(d,J＝7.1Hz,1H),7.25(dtd,J＝18.8,7.3,1.3Hz,2H),4.94(d,J＝8.8Hz,1H),3.98‑3.78(m,1H),2.90‑
2.77(m,2H),2.65(dd,J＝13.1,7.0Hz,1H),1.40(s,9H)。
2.77(m,2H),2.65(dd,J＝13.1,7.0Hz,1H),1.40(s,9H)。
[1764] D)
[1765]
[1766] 向化合物42‑R(2.2g，7.6mmol)于CH3CN(76mL，10mL/mmol)及DMF(7.6mL，1mL/mmol)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(1.1mL，6.08mmol)及氯甲酸烯丙酯(8.05mL，
76mmol)。将反应在23℃下搅拌7小时。将混合物用EtOAc稀释且添加NH4Cl且混合物用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，100:1至1:100)来纯化，得到化合物43‑R(2.3g，81％)。
76mmol)。将反应在23℃下搅拌7小时。将混合物用EtOAc稀释且添加NH4Cl且混合物用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(己烷:EtOAc，100:1至1:100)来纯化，得到化合物43‑R(2.3g，81％)。
[1767] Rf＝0.7(己烷:EtOAc，1:1)。
[1768] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.60(d,J＝7.5Hz,1H),7.52‑7.43(m,2H),7.34‑7.20(m,2H),5.90(ddt,J＝17.3,10.8,5.6Hz,1H),5.29(d,J＝17.2,1H),5.20(d,J＝10.4,1H),
5.10(t,J＝6.2Hz,1H),4.86(d,J＝8.4Hz,1H),4.56(d,J＝5.4,2H),4.08‑3.97(m,1H),
3.36(dt,J＝10.7,4.7Hz,1H),3.30‑3.23(m,1H),2.87(td,J＝14.8,6.5Hz,2H),1.41(s,
9H)。
5.10(t,J＝6.2Hz,1H),4.86(d,J＝8.4Hz,1H),4.56(d,J＝5.4,2H),4.08‑3.97(m,1H),
3.36(dt,J＝10.7,4.7Hz,1H),3.30‑3.23(m,1H),2.87(td,J＝14.8,6.5Hz,2H),1.41(s,
9H)。
[1769] E)
[1770] 向化合物43‑R(1.32g，3.52mmol)于CH2Cl2(60mL，16.6mL/mmol)中的溶液中添加三氟乙酸(30mL，8.3mL/mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌1.5小时，真空浓缩。进行快速柱层析(CH2Cl2:CH3OH，100:1至50:50)，得到化合物44‑R(0.90g，94％)。
[1771] Rf＝0.2(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1772] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.75(s,1H),7.69‑7.61(m,1H),7.54‑7.46(m,1H),7.39‑7.24(m,2H),5.95(ddt,J＝16.3,10.8,5.5Hz,1H),5.32(dd,J＝17.3,1.8Hz,1H),5.24‑
5.16(m,1H),4.57(dt,J＝5.7,1.5Hz,2H),3.68(qd,J＝7.1,4.2Hz,1H),3.48(dd,J＝14.8,
4.2Hz,1H),3.42‑3.30(m,1H),3.14‑2.95(m,2H)。
5.16(m,1H),4.57(dt,J＝5.7,1.5Hz,2H),3.68(qd,J＝7.1,4.2Hz,1H),3.48(dd,J＝14.8,
4.2Hz,1H),3.42‑3.30(m,1H),3.14‑2.95(m,2H)。
[1773] 实施例0‑22
[1774] A)
[1775] 向化合物1(750mg，1.2mmol)于CH3CN(120mL，0.01M)中的溶液中添加化合物44‑S(1370mg，6mmol)及三聚氯氰(TCT)(184mg，20％)。将反应混合物在85℃下搅拌23小时且接着添加饱和水溶液NaHCO3且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，9:1至1:9)，得到化合物45‑S(755mg，72％)。
[1776] Rf＝0.36(己烷:EtOAc，1:1)。
[1777] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.38‑7.28(m,2H),7.23‑7.08(m,2H),6.67(s,1H),6.19(d,J＝1.4Hz,1H),6.09‑5.95(m,1H),6.04(d,J＝1.4Hz,1H),5.92(s,1H),5.80(s,1H),5.44‑5.34(m,1H),5.26(dq,J＝10.4,1.3Hz,1H),5.08(dd,J＝11.4,1.1Hz,1H),4.70‑4.63(m,2H),4.56(s,1H),4.34(s,1H),4.31‑4.18(m,3H),3.80(s,3H),3.50‑3.39(m,2H),3.24‑
3.15(m,1H),3.00(dt,J＝12.2,6.0Hz,2H),2.95(d,J＝5.2Hz,2H),2.60(dd,J＝15.4,
4.5Hz,2H),2.44(dd,J＝15.6,5.2Hz,1H),2.29(s,3H),2.27(s,3H),2.25‑2.20(m,1H),
2.18(s,3H),2.12(s,1H),2.04(s,3H)。
3.15(m,1H),3.00(dt,J＝12.2,6.0Hz,2H),2.95(d,J＝5.2Hz,2H),2.60(dd,J＝15.4,
4.5Hz,2H),2.44(dd,J＝15.6,5.2Hz,1H),2.29(s,3H),2.27(s,3H),2.25‑2.20(m,1H),
2.18(s,3H),2.12(s,1H),2.04(s,3H)。
[1778] ESI‑MS m/z:878.2(M+H)+。
[1779] B)
[1780] 向化合物45‑S(750mg，0.85mmol)于CH2Cl2(15.3mL，18mL/mmol)中的溶液中添加二氯化双(三苯基膦)钯(II)(96mg，0.14mmol)及乙酸(0.5mL，8.5mmol)。在0℃下添加氢化三丁基锡(1.4mL，5.1mmol)，且将反应混合物在0℃下搅拌30分钟，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，100:1至1:100及CH2Cl2:CH3OH，100:1至1:100)，得到化合物46‑S(430mg，64％)。
[1781] Rf＝0.3(CH2Cl2:CH3OH，1:1)。
[1782] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.37‑7.29(m,2H),7.22‑7.11(m,2H),6.57(s,1H),6.21(d,J＝1.5Hz,1H),6.06(d,J＝1.5Hz,1H),5.07(d,J＝11.5Hz,1H),4.57(s,1H),4.37(s,1H),4.29‑4.23(m,2H),4.14(s,1H),3.79(s,3H),3.50‑3.47(m,2H),3.38(d,J＝8.7Hz,
1H),2.95‑2.71(m,4H),2.68‑2.52(m,2H),2.51‑2.38(m,1H),2.35(s,3H),2.33‑2.26(m,
1H),2.29(s,3H),2.17‑2.08(m,1H),2.10(s,3H),2.04(s,3H)。
1H),2.95‑2.71(m,4H),2.68‑2.52(m,2H),2.51‑2.38(m,1H),2.35(s,3H),2.33‑2.26(m,
1H),2.29(s,3H),2.17‑2.08(m,1H),2.10(s,3H),2.04(s,3H)。
[1783] ESI‑MS m/z:794.3(M+H)+。
[1784] C)
[1785] 向化合物46‑S(550mg，0.7mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，49mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(2.4g，14mmol)。在23℃下16小时后，反应用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至
85:15)来纯化，得到化合物47‑S(53mg，10％)。
85:15)来纯化，得到化合物47‑S(53mg，10％)。
[1786] Rf＝0.1(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1787] 1H NMR(500MHz,CDCl3):δ7.36(d,7.9Hz,1H),7.33(d,7.4Hz,1H),7.23(t,J＝7.4Hz,1H),7.16(t,J＝7.4Hz,1H),6.77(s,1H),6.20(s,1H),6.04(s,1H),5.92(s,1H),
5.20(d,J＝11.1Hz,1H),4.90(s,1H),4.50(s,1H),4.46‑4.39(m,1H),4.25(d,J＝11.1Hz,
1H),4.20(s,1H),3.84(s,3H),3.81(d,J＝4.2Hz,1H),3.58(s,1H),3.40‑3.14(m,3H),2.90(t,J＝13.0Hz,1H),2.76(m,3H),2.50(s,3H),2.46‑2.37(m,1H),2.32‑2.26(m,2H),2.30(s,3H),2.15(s,3H),2.04(s,3H)。
5.20(d,J＝11.1Hz,1H),4.90(s,1H),4.50(s,1H),4.46‑4.39(m,1H),4.25(d,J＝11.1Hz,
1H),4.20(s,1H),3.84(s,3H),3.81(d,J＝4.2Hz,1H),3.58(s,1H),3.40‑3.14(m,3H),2.90(t,J＝13.0Hz,1H),2.76(m,3H),2.50(s,3H),2.46‑2.37(m,1H),2.32‑2.26(m,2H),2.30(s,3H),2.15(s,3H),2.04(s,3H)。
[1788] 13C NMR(126MHz,CD3OD)δ170.5,169.2,154.6,149.1,148.7,145.7,143.5,141.0,140.9,131.2,129.6,126.9,124.4,122.5,121.4,119.7,118.7,115.0,112.7,111.0,
110.7,102.1,91.2,63.5,61.2,59.2,58.5,55.3,54.7,53.4,52.7,43.3,42.5,39.9,36.9,
29.3,24.1,23.6,19.1,15.0,8.2。
110.7,102.1,91.2,63.5,61.2,59.2,58.5,55.3,54.7,53.4,52.7,43.3,42.5,39.9,36.9,
29.3,24.1,23.6,19.1,15.0,8.2。
[1789] ESI‑MS m/z:767.2(M‑H2O+H)+。
[1790] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:767.2794[M‑H2O+H]+(C41H43N4O9S的计算值767.2745)。
[1791] 实施例0‑23.
[1792] A)
[1793] 向化合物1(621mg，1mmol)于CH3CN(100mL，0.01M)中的溶液中添加化合物44‑R(825mg，3mmol)及三聚氯氰(TCT)(248mg，40％)。将反应混合物在85℃下搅拌66小时且接着添加饱和水溶液NaHCO3且混合物用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，9:1至1:9)，得到化合物45‑R(530mg，58％)。
[1794] Rf＝0.4(己烷:EtOAc，1:1)。
[1795] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.42‑7.28(m,2H),7.23‑7.08(m,2H),6.60(s,1H),6.20(d,J＝1.4Hz,1H),6.04(d,J＝1.4Hz,1H),6.01‑5.92(m,1H),5.77(s,1H),5.44‑5.20(m,2H),5.09(s,1H),5.04‑4.96(m,1H),4.71‑4.55(m,2H),4.34(s,1H),4.30‑4.18(m,3H),
3.79(s,3H),3.53(dd,J＝10.2,4.4Hz,1H),3.46(m,2H),3.50‑3.40(m,1H),3.03‑2.87(m,
2H),2.67(d,J＝15.0Hz,1H),2.47(dd,J＝15.6,3.7Hz,1H),2.40‑2.32(m,2H),2.30(s,
3H),2.29(s,3H),2.19‑2.12(m,2H),2.16(s,3H),2.09(s,3H)。
3.79(s,3H),3.53(dd,J＝10.2,4.4Hz,1H),3.46(m,2H),3.50‑3.40(m,1H),3.03‑2.87(m,
2H),2.67(d,J＝15.0Hz,1H),2.47(dd,J＝15.6,3.7Hz,1H),2.40‑2.32(m,2H),2.30(s,
3H),2.29(s,3H),2.19‑2.12(m,2H),2.16(s,3H),2.09(s,3H)。
[1796] ESI‑MS m/z:878.3(M+H)+。
[1797] B)
[1798] 向化合物45‑R(552mg，0.63mmol)于CH2Cl2(11.3mL，18mL/mmol)中的溶液中添加二氯化双(三苯基膦)钯(II)(70.7mg，0.1mmol)及乙酸(0.36mL，6.3mmol)。在0℃下添加氢化三丁基锡(1.02mL，3.8mmol)且将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时，且真空浓缩。所得粗物质用EtOAc稀释，添加饱和水溶液NH4Cl且混合物用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。进行快速柱层析(己烷:EtOAc，100:1至1:100及EtOAc:CH3OH，100:1至1:100)，得到化合物46‑R(423mg，85％)。
[1799] Rf＝0.3(CH2Cl2:CH3OH，1:1)。
[1800] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.45‑7.28(m,2H),7.23‑7.08(m,2H),6.56(s,1H),6.19(d,J＝1.4Hz,1H),6.05(d,J＝1.4Hz,1H),4.98(d,J＝11.5Hz,1H),4.59(s,1H),4.34(s,1H),4.27(dd,J＝5.1,1.7Hz,1H),4.22‑4.16(m,2H),3.80(s,3H),3.49‑3.39(m,2H),3.31(dq,J＝9.8,5.5,4.5Hz,2H),2.95(s,1H),2.83(d,J＝5.6Hz,2H),2.74‑2.51(m,3H),2.35(s,3H),2.32‑2.21(m,2H),2.26(s,3H)；2.16(s,3H),2.06(s,3H)。
[1801] ESI‑MS m/z:794.3(M+H)+。
[1802] C)
[1803] 向化合物46‑R(412mg，0.52mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，36mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(1.76g，10.4mmol)。在23℃下22小时后，反应用饱和NaCl水溶液与饱和NaHCO3水溶液1:1的混合物中止，搅拌15分钟，用CH2Cl2稀释，搅拌5分钟，且用CH2Cl2萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过快速柱层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至85:15)来纯化，得到化合物47‑R(175mg，43％)。
[1804] Rf＝0.1(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1805] 1H NMR(500MHz,CDCl3):δ7.34(dd,J＝11.1,7.9Hz,2H),7.22‑7.07(m,2H),6.57(s,1H),6.17(d,J＝1.2Hz,1H),6.01(d,J＝1.2Hz,1H),5.11(d,J＝11.2Hz,1H),4.84(s,1H),4.53‑4.47(m,2H),4.21‑4.07(m,2H),3.80(s,3H),3.56(d,J＝5.1Hz,1H),3.43(s,
1H),3.24(d,J＝9.1Hz,1H),2.98‑2.78(m,4H),2.72‑2.58(m,2H),2.38(s,3H),2.35‑2.27(m,2H),2.28(s,3H),2.14(s,3H),2.08(s,3H)。
1H),3.24(d,J＝9.1Hz,1H),2.98‑2.78(m,4H),2.72‑2.58(m,2H),2.38(s,3H),2.35‑2.27(m,2H),2.28(s,3H),2.14(s,3H),2.08(s,3H)。
[1806] 13C NMR(101MHz,CD3OD)δ170.6,169.1,155.0,148.8,145.6,143.7,141.1,140.8,130.9,129.7,126.9,124.2,122.4,121.1,119.6,118.9,118.7,115.0,113.2,112.5,
111.0,102.1,91.3,63.3,60.4,59.0,58.4,55.3,54.6,52.6,51.1,44.9,42.4,39.8,38.7,
29.4,24.0,23.2,19.1,15.0,8.3。
111.0,102.1,91.3,63.3,60.4,59.0,58.4,55.3,54.6,52.6,51.1,44.9,42.4,39.8,38.7,
29.4,24.0,23.2,19.1,15.0,8.3。
[1807] ESI‑MS m/z:767.2(M‑H2O+H)+。
[1808] (+)‑HR‑ESI‑TOF‑MS m/z:767.2806[M‑H2O+H]+(C41H43N4O9S的计算值767.2745)。
[1809] 有效负载的生物活性实施例
[1810] 此分析的目标为评估所测试样品的试管内细胞生长抑制(延迟或阻止肿瘤细胞生长的能力)或细胞毒性(杀死肿瘤细胞的能力)活性。
[1811] 细胞系
[1812]
[1813]
[1814] 使用SRB及MTT比色分析评估细胞毒性活性
[1815] 已修改使用磺酰罗丹明B(SRB)反应的比色分析，以提供细胞生长及存活力的定量量测(根据Skehan等人.J.Natl.Cancer inst.1990，82，1107‑1112所述的技术)。基于3‑(4，5‑二甲基噻唑‑2‑基)‑2，5‑二苯基四唑溴化物(MTT)还原成紫色甲臜的另一比色分析也用于评定抗增生活性(根据Mosmann等人.J.Immunol.Meth.1983，65，55‑63所述的技术)。
[1816] 这些分析形式采用遵循美国国家标准协会及实验室自动化及筛选协会的标准(ANSI SLAS 1‑2004(R2012)10/12/2011)的96孔细胞培养物微量培养盘。在此研究中使用的所有细胞系均获自美国菌种保存中心(ATCC)且来源于不同类型人类癌症。
[1817] A549、HT29、MDA‑MB‑231及PSN1细胞维持于达尔伯克氏改良伊格尔培养基(DMEM)中，而PC‑3及22Rv1细胞维持于洛斯维帕克纪念研究所培养基(RPMI)中。所有细胞系均补充有10％胎牛血清(FBS)、2mM L‑麸酰胺酸、100U/mL青霉素及100U/mL链霉素，处于37℃、5％CO2及98％湿度下。对于实验而言，细胞使用胰蛋白酶消化自亚汇合培养物收获，且再悬浮于新鲜培养基中，接着计数(counting)及接种(plating)。
[1818] A549、HT29、MDA‑MB‑231及PSN1细胞呈150μL的等分试样以每孔5000个细胞接种于96孔微量滴定盘中，且在无药物培养基中使其附接至盘表面18小时(隔夜)。此后，各细胞系的一个对照(未处理)盘固定(如下所述)且用于时间零参考值。接着用测试化合物(完全培养基加4％DMSO中4X储备溶液的50μL等分试样)，使用十次2/5连续稀释(浓度在10至0.003μg/mL范围内)及一式三份培养物(DMSO中1％最终浓度)处理培养盘。在处理72小时之后，通过使用SRB方法量测抗肿瘤作用：简言之，细胞用PBS洗涤两次，在室温下在1％戊二醛溶液中固定15分钟，在PBS中冲洗两次，且在室温下在0.4％SRB溶液中染色30分钟。接着用1％乙酸溶液冲洗细胞数次且在室温下风干。接着在10mM trizma基础溶液中萃取SRB，且在自动化分光光度盘式读取器中在490nm下量测吸光度。
[1819] 使分析中最终细胞密度在视细胞系而定每孔5，000至15，000个细胞范围内的适当数目的PC‑3及22Rv1细胞在96孔盘中接种，且使其静置在培养基中37℃下5％CO2及98％湿度下24小时。接着，将培养基中的化合物或DMSO添加至达到200μL的最终体积且预期化合物浓度在覆盖十次连续2/5稀释的范围内，自1％(v/v)DMSO中0.1μg/mL开始。此时，一组用1％(v/v)DMSO处理的「时间零的对照盘」如下所述经MTT处理。盘的其余部分在以上提及的环境条件下培育72小时。随后，将50μL 1mg/mL于培养基中的MTT溶液添加至孔中且在37℃下培育6‑8小时，以允许甲臜晶体产生。接着移除培养基且将100μL纯DMSO添加至各孔以使甲臜产物溶解成有色溶液，最终在PolarStar Omega微定量盘式多标记读数器(BMG Labtech，Ortenberg，Germany)中量测540nm下的吸光度。
[1820] 通过应用NCI演算法(Boyd MR及Paull KD.Drug Dev.Res.1995，34，91‑104)估计对细胞生长及存活的作用。通过非线性回归分析，将在一式三份培养物中获得的值通过非线性回归与四参数对数曲线拟合。通过经由此类拟合获得的曲线进行自动内插法计算三个参考参数(根据以上提及的NCI演算法)：GI50＝与对照培养物相比，引起50％细胞生长抑制的化合物浓度；TGI＝与对照培养物相比的总细胞生长抑制(细胞生长抑制作用)；及LC50＝引起50％净细胞杀死细胞毒性作用的化合物浓度)。
[1821] 表3‑9说明关于本发明的化合物的生物活性的资料。
[1822] 表3.生物活性(摩尔浓度)
[1823]
[1824]
[1825] 表4.生物活性(摩尔浓度)
[1826]
[1827]
[1828] 表5.生物活性(摩尔浓度)
[1829]
[1830] 表6.生物活性(摩尔浓度)
[1831]
[1832] 表7.生物活性(摩尔浓度)
[1833]
[1834] 表8.生物活性(摩尔浓度)
[1835]
[1836] 表9.生物活性(摩尔浓度)
[1837]
[1838] 此数据证明用于本发明中的有效负载在试管内具有高效能。
[1839] 连接子的合成
[1840] 制备LIN 1：MC‑Val‑Cit‑PABC‑PNP
[1841] 反应流程
[1842]
[1843] (a)制备LIN 1‑1：MC‑Val‑Cit‑OH
[1844] LIN 1‑1
[1845]
[1846] 将Cl‑TrtCl‑树脂(20g，1.49mmol/g)(Iris Biotech，参考：BR‑1065，2‑氯三苯甲基氯树脂(200‑400目，1％DVB，1.0‑1.6mmol/g)，CAS 42074‑68‑0)置于滤板中。将100mL DCM添加至树脂且搅拌混合物1小时。通过在真空下过滤来除去溶剂。添加Fmoc‑Cit‑OH(11.83g，29.78mmol)及DIPEA(17.15mL，98.45mmol)于DCM(80mL)中的溶液且搅拌混合物10分钟。此后，添加DIPEA(34.82mmol，199.98mmol)且搅拌混合物1小时。在搅拌15分钟之后通过添加MeOH(30mL)终止反应。因此产生的Fmoc‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂经受以下洗涤/处理：DCM(5×50mL×0.5min)、DMF(5×50mL×0.5min)、哌啶:DMF(1:4，1×1min，2×10min)、DMF(5×50mL×0.5min)、DCM(5×50mL×0.5min)。最终哌啶洗涤得到NH2‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂。计算负载量：1.15mmol/g。
[1847] 将以上产生的NH2‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂用DMF(5×50mL×0.5min)洗涤，且将Fmoc‑Val‑OH(31.22g，91.98mmol)、HOBt(11.23g，91.98mmol)于DMF(100mL)中的溶液添加至NH2‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂，搅拌且添加DIPCDI(14.24mL，91.98mmol)且搅拌混合物1.5小时。通过用DMF(5×50mL×0.5min)洗涤来终止反应。因此产生的Fmoc‑Val‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂用哌啶:DMF(1:4，1×1min、2×10min)处理且用DMF(5×50mL×0.5min)洗涤。最终哌啶洗涤得到NH2‑Val‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂。
[1848] 将6‑顺丁烯二酰亚胺基己酸(MC‑OH)(9.7g，45.92mmol)、HOBt(6.21g，45.92mmol)于DMF(100mL)中的溶液添加至以上产生的NH2‑Val‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂，搅拌且添加DIPCDI(7.12mL，45.92mmol)且搅拌混合物1.5小时。通过用DMF(5×50mL×0.5min)及DCM(5×50mL×0.5min)洗涤来终止反应。
[1849] 通过用TFA:DCM(1:99，5×100mL)处理，使肽自树脂裂解。将树脂用DCM(7×50mL×0.5min)洗涤。合并的滤液在减压下蒸发至干且将所获得的固体用Et2O湿磨且过滤，以获得呈白色固体的LIN 1‑1(7.60g，71％)。
[1850] 1H NMR(500MHz,DMSO‑d6):δ12.47(s,1H),8.13(d,J＝7.3Hz,1H),7.74(d,J＝9.0Hz,1H),6.99(s,2H),5.93(s,1H),5.35(s,2H),4.20(dd,J＝9.0,6.8Hz,1H),4.15‑4.07(m,1H),3.36(t,J＝7.0Hz,2H),3.00‑2.88(m,2H),2.21‑2.12(m,1H),2.11‑2.03(m,1H),
1.98‑1.86(m,1H),1.74‑1.62(m,1H),1.61‑1.50(m,1H),1.50‑1.31(m,6H),1.21‑1.11(m,
2H),0.84(d,J＝6.8Hz,3H),0.80(d,J＝6.8Hz,3H)。
1.98‑1.86(m,1H),1.74‑1.62(m,1H),1.61‑1.50(m,1H),1.50‑1.31(m,6H),1.21‑1.11(m,
2H),0.84(d,J＝6.8Hz,3H),0.80(d,J＝6.8Hz,3H)。
[1851] ESI‑MS m/z:C21H33N5O7的计算值:467.2。实验值:468.3(M+H)+。
[1852] (b)制备LIN 1‑2：MC‑Val‑Cit‑PABOH
[1853] LIN 1‑2
[1854]
[1855] 向LIN 1‑1(1.6g，3.42mmol)及4‑氨基苯甲醇(PABOH)(0.84g，6.84mmol)于DCM(60mL)中的溶液中添加HOBt(0.92g，6.84mmol)于DMF(5mL)中的溶液。添加DIPCDI(1.05mL，6.84mmol)，将反应混合物在23℃下搅拌2小时，添加Et2O(150mL)，且所得固体在过滤板中在真空下过滤，得到LIN 1‑2(1.31g，67％)。
[1856] 1H NMR(500MHz,DMSO‑d6):δ9.88(s,1H),8.03(d,J＝7.6Hz,1H),7.77(dd,J＝12.2,8.5Hz,1H),7.53(d,J＝8.2Hz,2H),7.21(d,J＝8.2Hz,2H),6.99(s,3H),6.01‑5.92
(m,1H),5.39(s,2H),5.07(s,1H),4.41(s,2H),4.39‑4.31(m,1H),4.23‑4.12(m,1H),3.36(t,J＝7.0Hz,2H),3.06‑2.97(m,1H),2.96‑2.90(m,1H),2.22‑2.03(m,2H),2.01‑1.88(m,
1H),1.76‑1.62(m,1H),1.63‑1.28(m,6H),1.25‑1.11(m,2H),0.84(d,J＝6.9Hz,3H),0.81(d,J＝6.8Hz,3H)。
(m,1H),5.39(s,2H),5.07(s,1H),4.41(s,2H),4.39‑4.31(m,1H),4.23‑4.12(m,1H),3.36(t,J＝7.0Hz,2H),3.06‑2.97(m,1H),2.96‑2.90(m,1H),2.22‑2.03(m,2H),2.01‑1.88(m,
1H),1.76‑1.62(m,1H),1.63‑1.28(m,6H),1.25‑1.11(m,2H),0.84(d,J＝6.9Hz,3H),0.81(d,J＝6.8Hz,3H)。
[1857] ESI‑MS m/z:C28H40N6O7的计算值:572.3。实验值:573.3(M+H)+。
[1858] (c)制备LIN 1：MC‑Val‑Cit‑PAB‑PNP
[1859] LIN 1
[1860]
[1861] 向LIN 1‑2(500mg，0.87mmol)及碳酸双(4‑硝基苯基)酯(bis‑PNP)(2.64g，8.72mmol)于DCM:DMF(8:2，25mL)中的溶液中添加DIPEA(0.45mL，2.61mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌20小时且倾倒至硅胶管柱上(DCM:CH3OH，50:1至10:1)，得到纯目标LIN 1
(364mg，57％)。
(364mg，57％)。
[1862] Rf＝0.40(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1863] 1H NMR(400MHz,CDCl3/CD3OD):δ9.45(s,1H),8.23(d,J＝8.3Hz,2H),7.59(d,J＝8.5Hz,2H),7.35(d,J＝8.3Hz,2H),7.34(d,J＝8.5Hz,2H),6.65(s,2H),5.20(s,2H),4.56
(dt,J＝10.5,5.4Hz,1H),4.15(d,J＝7.2Hz,1H),3.46(dd,J＝8.0,6.4Hz,2H),3.16‑2.89(m,2H),2.21(dd,J＝8.3,6.6Hz,2H),2.06‑1.97(m,1H),1.90‑1.83(m,1H),1.73‑1.46(m,
7H),1.34‑1.20(m,2H),0.91(d,J＝6.7Hz,3H),0.90(d,J＝6.7Hz,3H)。
(dt,J＝10.5,5.4Hz,1H),4.15(d,J＝7.2Hz,1H),3.46(dd,J＝8.0,6.4Hz,2H),3.16‑2.89(m,2H),2.21(dd,J＝8.3,6.6Hz,2H),2.06‑1.97(m,1H),1.90‑1.83(m,1H),1.73‑1.46(m,
7H),1.34‑1.20(m,2H),0.91(d,J＝6.7Hz,3H),0.90(d,J＝6.7Hz,3H)。
[1864] 13C NMR(125MHz,CDCl3/CD3OD)δ174.4,172.4,171.1,170.6,160.5,155.5,152.5,145.3,138.7,134.1,129.9,129.5,125.2,121.8,120.0,70.6,59.0,53.2,37.5,35.8,
30.6,29.6,29.3,28.1,26.2,26.2,25.1,19.1,18.1。
30.6,29.6,29.3,28.1,26.2,26.2,25.1,19.1,18.1。
[1865] ESI‑MS m/z:C35H43N7O11的计算值:737.3。实验值:738.3(M+H)+。
[1866] 制备LIN‑2：MC2‑PEG4‑Val‑Cit‑PABC‑PNP
[1867] 反应流程
[1868]
[1869] a)制备LIN 2‑1：MC2‑PEG4‑Val‑Cit‑OH
[1870] LIN 2‑1
[1871]
[1872] 将Cl‑TrtCl‑树脂(5g，1.49mmol/g)置于滤板中。向树脂添加CH2Cl2(25mL)且在23℃下搅拌混合物1小时。通过在真空下过滤来除去溶剂。添加Fmoc‑Cit‑OH(2.95g，7.44mmol)及DIPEA(4.29mL，24.61mmol)于CH2Cl2(20mL)中的溶液且在23℃下搅拌混合物10分钟。另外添加DIPEA(8.70mL，49.99mmol)且在23℃下搅拌混合物1小时。通过添加MeOH(10mL)停止反应，且在23℃下搅拌15分钟。Fmoc‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂经受以下洗涤/处理：
CH2Cl2(5×15mL×0.5min)、DMF(5×15mL×0.5min)、哌啶:DMF(1:4，15mL，1×1min、2×
10min)、DMF(5×15mL×0.5min)、CH2Cl2(5×15mL×0.5min)。计算负载量：1.17mmol/g。
CH2Cl2(5×15mL×0.5min)、DMF(5×15mL×0.5min)、哌啶:DMF(1:4，15mL，1×1min、2×
10min)、DMF(5×15mL×0.5min)、CH2Cl2(5×15mL×0.5min)。计算负载量：1.17mmol/g。
[1873] 将NH2‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤且将Fmoc‑Val‑OH(7.80g，22.99mmol)及HOBt(2.80g，24.5mmol)于DMF(25mL)中的溶液添加至NH2‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂，接着在23℃下添加DIPCDI(3.56mL，24.5mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌
1.5小时。通过用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤来停止反应。Fmoc‑Val‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂用哌啶:DMF(1:4，15mL，1×1min、2×10min)处理且用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤。
1.5小时。通过用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤来停止反应。Fmoc‑Val‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂用哌啶:DMF(1:4，15mL，1×1min、2×10min)处理且用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤。
[1874] 将15‑(9‑芴基甲氧基羰基)氨基‑4，7，10，13‑四氧杂‑十五烷酸(Fmoc‑NH‑PEG4‑OH)(4.27g，8.75mmol)及HOBt(1.18g，8.72mmol)于DMF(30mL)中的溶液添加至NH2‑Val‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂，接着在23℃下添加DIPCDI(1.35mL，8.72mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌24小时。通过用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤来停止反应。Fmoc‑NH‑PEG4‑Val‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂用哌啶:DMF(1:4，15mL，1×1min、2×10min)处理且用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤。
[1875] 将3‑(顺丁烯二酰亚胺基)丙酸(MC2‑OH)(3.95g，23.35mmol)及HOBt(3.16g，23.37mmol)于DMF(30mL)中的溶液添加至NH2‑PEG4‑Val‑Cit‑O‑TrtCl‑树脂，接着在23℃下添加DIPCDI(3.62mL，23.37mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌2小时。通过用DMF(5×15mL×0.5min)及CH2Cl2(5×15mL×0.5min)洗涤停止反应。
[1876] 通过用TFA:CH2Cl2(1:99，5×50mL)处理，使肽自树脂裂解。将树脂用CH2Cl2(7×50mL×0.5min)洗涤。合并的滤液在减压下蒸发至干，将所获得的固体用Et2O湿磨且过滤，以获得呈白色固体的LIN 2‑1(4.59g，87％产率)。
[1877] 1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.67‑7.57(m,1H),7.44(d,J＝8.3Hz,1H),7.11(t,J＝5.4Hz,1H),6.73(s,2H),4.49(d,J＝7.2Hz,1H),4.35(t,J＝7.7Hz,1H),3.82(t,J＝7.0Hz,
2H),3.74(t,J＝6.2Hz,2H),3.68‑3.56(m,13H),3.56‑3.45(m,2H),3.39(q,J＝5.4Hz,2H),
3.17(s,2H),2.55(q,J＝7.0,6.0Hz,4H),2.16‑1.99(m,1H),1.91(s,1H),1.75(s,1H),1.43(s,2H),0.94(d,＝9.7Hz,3H),0.93(d,＝9.7Hz,3H)。
2H),3.74(t,J＝6.2Hz,2H),3.68‑3.56(m,13H),3.56‑3.45(m,2H),3.39(q,J＝5.4Hz,2H),
3.17(s,2H),2.55(q,J＝7.0,6.0Hz,4H),2.16‑1.99(m,1H),1.91(s,1H),1.75(s,1H),1.43(s,2H),0.94(d,＝9.7Hz,3H),0.93(d,＝9.7Hz,3H)。
[1878] ESI‑MS m/z:673.3(M+H)+。
[1879] (b)制备LIN 2‑2：MC2‑PEG4‑Val‑Cit‑PABOH
[1880] LIN 2‑2
[1881]
[1882] 在23℃下向LIN 2‑1(1.5g，2.22mmol)及4‑氨基苯甲醇(PABOH)(0.55g，4.45mmol)于CH2Cl2(60mL)中的溶液中添加HOBt(0.60g，4.45mmol)于DMF(5mL)中的溶液，接着添加DIPCDI(0.69mL，4.45mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌5小时，添加Et2O(150mL)，且真空过滤所得固体，得到粗LIN 2‑2(2.37g，>100％产率)，其未经进一步纯化即用于下一步。
[1883] 1H NMR(500MHz,DMSO‑d6):δ7.57(d,J＝8.6Hz,2H),7.30(d,J＝8.6Hz,2H),6.81(s,2H),4.58(s,1H),4.56(s,2H),4.50(dd,J＝9.1,5.1Hz,1H),4.21(d,J＝7.0Hz,1H),3.80‑3.68(m,4H),3.65‑3.59(m,12H),3.55‑3.47(m,1H),3.20(dd,J＝13.6,6.9Hz,1H),
3.12(dt,J＝13.5,6.7Hz,1H),2.55(td,J＝6.1,2.1Hz,2H),2.46(t,J＝6.9Hz,2H),2.15‑
2.07(m,1H),1.95‑1.88(m,1H),1.79‑1.70(m,1H),1.67‑1.50(m,2H),0.99(d,J＝7.0Hz,
3H),0.98(d,J＝7.0Hz,3H)。
3.12(dt,J＝13.5,6.7Hz,1H),2.55(td,J＝6.1,2.1Hz,2H),2.46(t,J＝6.9Hz,2H),2.15‑
2.07(m,1H),1.95‑1.88(m,1H),1.79‑1.70(m,1H),1.67‑1.50(m,2H),0.99(d,J＝7.0Hz,
3H),0.98(d,J＝7.0Hz,3H)。
[1884] ESI‑MS m/z:778.4(M+H)+。
[1885] (c)制备LIN 2：MC2‑PEG4‑Val‑Cit‑PABC‑PNP
[1886]
[1887] 在23℃下向LIN 2‑2(1.73g，2.22mmol)及碳酸双(4‑硝基苯基)酯(bis‑PNP)(3.38g，11.12mmol)于DCM:DMF(8:2，75mL)中的溶液中添加DIPEA(1.16mL，6.07mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌19小时且倾倒至硅胶管柱(CH2Cl2:CH3OH，50:1至10:1)上，得到纯LIN 2(945mg，45％产率)。
[1888] 1H NMR(500MHz,CD3OD):δ8.22(d,J＝9.2Hz,2H),7.61(d,J＝8.6Hz,2H),7.34(d,J＝9.2Hz,2H),7.33(d,J＝8.6Hz,2H),6.67(s,2H),4.57‑4.47(m,1H),4.23‑4.12(m,1H),3.78‑3.76(m,12H),3.63‑3.50(m,16H),3.49‑3.41(m,2H),3.34‑3.25(m,2H),3.18‑3.03(m,2H),2.51(t,J＝5.9Hz,2H),2.45(t,J＝7.2Hz,2H),2.13‑1.99(m,1H),1.92‑1.84(m,
1H),1.73‑1.62(m,1H),1.55‑1.45(m,2H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H),0.90(d,J＝6.8Hz,3H)。
1H),1.73‑1.62(m,1H),1.55‑1.45(m,2H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H),0.90(d,J＝6.8Hz,3H)。
[1889] 13C NMR(75MHz,CDCl3/CD3OD):δ174.4,172.9,172.4,172.4,171.6,170.9,170.8,170.7,163.7,155.8,155.7,152.5,145.4,138.8,134.1,131.3,130.4,129.2,128.7,
125.7,124.9,121.8,119.8(×2),115.1,70.2(×2),70.1(×2),70.0,69.9,69.8,69.0,
66.9,59.2,53.5,39.0,36.0,34.4,34.1,30.4,29.0,18.5,17.5。
125.7,124.9,121.8,119.8(×2),115.1,70.2(×2),70.1(×2),70.0,69.9,69.8,69.0,
66.9,59.2,53.5,39.0,36.0,34.4,34.1,30.4,29.0,18.5,17.5。
[1890] ESI‑MS m/z:943.4(M+H)+。
[1891] Rf＝0.20(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1892] 制备LIN 3：MC2‑PEG4‑Val‑Ala‑PABC‑PNP
[1893] 反应流程
[1894]
[1895] (a)制备LIN 3‑1：MC2‑PEG4‑Val‑Ala‑OH
[1896] LIN 3‑1
[1897]
[1898] 将Cl‑TrtCl‑树脂(5g，1.49mmol/g)置于滤板中。向树脂添加CH2Cl2(25mL)且在23℃下搅拌混合物1小时。通过在真空下过滤来除去溶剂。添加Fmoc‑Ala‑OH(2.31g，7.41mmol)及DIPEA(4.28mL，24.61mmol)于CH2Cl2(20mL)中的溶液且在23℃下搅拌混合物10分钟。另外添加DIPEA(8.60mL，49.37mmol)且在23℃下搅拌反应混合物1小时。通过添加MeOH(10mL)停止反应，且在23℃下搅拌15分钟。Fmoc‑Ala‑O‑TrtCl‑树脂经受以下洗涤/处理：CH2Cl2(5×15mL×0.5min)、DMF(5×15mL×0.5min)、哌啶:DMF(1:4，15mL，1×1min、2×
10min)、DMF(5×15mL×0.5min)、CH2Cl2(5×15mL×0.5min)。计算负载量：1.34mmol/g。
10min)、DMF(5×15mL×0.5min)、CH2Cl2(5×15mL×0.5min)。计算负载量：1.34mmol/g。
[1899] 将NH2‑Ala‑O‑TrtCl‑树脂用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤且将Fmoc‑Val‑OH(9.09g，26.79mmol)及HOBt(3.62g，26.79mmol)于DMF(25mL)中的溶液添加至NH2‑Ala‑O‑TrtCl‑树脂，接着在23℃下添加DIPCDI(4.14mL，26.79mmol)。将混合物在23℃下搅拌1.5小时。通过用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤来停止反应。Fmoc‑Val‑Ala‑O‑TrtCl‑树脂用哌啶:
DMF(1:4，15mL，1×1min、2×10min)处理且用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤。
DMF(1:4，15mL，1×1min、2×10min)处理且用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤。
[1900] 将15‑(9‑芴基甲氧基羰基)氨基‑4，7，10，13‑四氧杂‑十五烷酸(Fmoc‑NH‑PEG4‑OH)(4.90g，8.75mmol)及HOBt(1.35g，9.98mmol)于DMF(30mL)中的溶液添加至NH2‑Val‑Ala‑O‑TrtCl‑树脂，接着在23℃下添加DIPCDI(1.55mL，10.0mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌22小时。通过用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤来停止反应。Fmoc‑NH‑PEG4‑Val‑Ala‑O‑TrtCl‑树脂用哌啶:DMF(1:4，15mL，1×1min、2×10min)处理且用DMF(5×15mL×0.5min)洗涤。
[1901] 将3‑(顺丁烯二酰亚胺基)丙酸(MC2‑OH)(4.53g，26.78mmol)及HOBt(3.62g，26.77mmol)于DMF(30mL)中的溶液添加至NH2‑PEG4‑Val‑Ala‑O‑TrtCl‑树脂，接着在23℃下添加DIPCDI(4.15mL，26.80mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌2小时。通过用DMF(5×15mL×0.5min)及CH2Cl2(5×15mL×0.5min)洗涤停止反应。
[1902] 通过用TFA:CH2Cl2(1:99，5×50mL)处理，使肽自树脂裂解。将树脂用CH2Cl2(7×50mL×0.5min)洗涤。合并的滤液在减压下蒸发至干，将所获得的固体用Et2O湿磨且过滤，以获得呈白色固体的L 3‑1(4.73g，87％产率)。
[1903] 1H NMR(500MHz,CDCl3):δ7.67(bs,1H),7.31(d,J＝8.9Hz,1H),7.17(d,J＝7.0Hz,1H),6.85(t,J＝5.6Hz,1H),6.72(s,2H),4.51(q,J＝7.1Hz,1H),4.38(dd,J＝8.9,6.9Hz,
1H),3.84(t,J＝7.1Hz,2H),3.75(t,J＝5.9Hz,2H),3.69‑3.59(m,12H),3.55(t,J＝5.1Hz,
2H),3.41(qd,J＝5.0,1.7Hz,2H),2.62‑2.49(m,4H),2.19‑2.01(m,1H),1.44(d,J＝7.2Hz,
3H),0.95(d,J＝11.9Hz,1H),0.94(d,J＝11.9Hz,1H)。
1H),3.84(t,J＝7.1Hz,2H),3.75(t,J＝5.9Hz,2H),3.69‑3.59(m,12H),3.55(t,J＝5.1Hz,
2H),3.41(qd,J＝5.0,1.7Hz,2H),2.62‑2.49(m,4H),2.19‑2.01(m,1H),1.44(d,J＝7.2Hz,
3H),0.95(d,J＝11.9Hz,1H),0.94(d,J＝11.9Hz,1H)。
[1904] (b)制备LIN 3‑2：MC2‑PEG4‑Val‑Ala‑PABOH
[1905] LIN 3‑2
[1906]
[1907] 在23℃下向LIN 3‑1(1.84g，3.13mmol)及4‑氨基苯甲醇(PABOH)(0.77g，6.27mmol)于CH2Cl2(70mL)中的溶液中添加HOBt(0.84g，6.27mmol)于DMF(5mL)中的溶液，接着添加DIPCDI(0.97mL，6.27mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌5小时，添加Et2O(150mL)，且真空过滤所得固体，得到粗LIN 3‑2(1.74g，81％产率)，其未经进一步纯化即用于下一步。
[1908] 1H NMR(500MHz,DMSO‑d6):δ7.58(d,J＝8.5Hz,2H),7.30(d,J＝8.5Hz,2H),6.81(s,2H),4.56(s,2H),4.52‑4.41(m,1H),4.21(d,J＝6.7Hz,1H).3.91(p,J＝6.5Hz,1H),3.81‑3.67(m,4H),3.65‑3.54(m,12H),3.49(t,J＝5.5Hz,2H),2.56(dd,J＝6.6,5.5Hz,
2H),2.46(t,J＝6.9Hz,2H),2.12(h,J＝6.8Hz,1H),1.45(d,J＝7.2Hz,3H),1.00(d,J＝
12.1Hz,3H),0.98(d,J＝12.1Hz,3H)。
2H),2.46(t,J＝6.9Hz,2H),2.12(h,J＝6.8Hz,1H),1.45(d,J＝7.2Hz,3H),1.00(d,J＝
12.1Hz,3H),0.98(d,J＝12.1Hz,3H)。
[1909] (c)制备LIN 3：MC2‑PEG4‑Val‑Ala‑PABC‑PNP
[1910] LIN 3
[1911]
[1912] 在23℃下向LIN 3‑2(1.74g，2.51mmol)及碳酸双(4‑硝基苯基)酯(bis‑PNP)(3.82g，12.57mmol)于CH2Cl2:DMF(8:1，70mL)中的溶液中添加DIPEA(1.31mL，7.54mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌20小时且倾倒至硅胶管柱上(CH2Cl2:CH3OH，50:1至10:1)，得到纯LIN 3(1.26g，59％产率)。
[1913] 1H NMR(500MHz,CDCl3):δ8.82(s,1H),8.27(d,J＝9.2Hz,2H),7.73(d,J＝8.6Hz,2H),7.38(d,J＝9.1Hz,4H),7.15(dd,J＝21.8,7.2Hz,2H),6.69(s,2H),6.62(t,J＝5.7Hz,
1H),5.24(s,2H),4.67(p,J＝7.2Hz,1H),4.24(dd,J＝6.8,5.7Hz,1H),3.91‑3.76(m,2H),
3.71(ddd,J＝10.1,6.1,4.3Hz,1H),3.66‑3.54(m,14H),3.53(t,J＝5.1Hz,1H),3.46‑3.33(m,2H),2.76‑2.57(m,1H),2.57‑2.42(m,2H),2.33‑2.19(m,1H),1.46(d,J＝7.1Hz,3H),
1.01(d,J＝12.1Hz,3H),1.00(d,J＝12.1Hz,3H)。
1H),5.24(s,2H),4.67(p,J＝7.2Hz,1H),4.24(dd,J＝6.8,5.7Hz,1H),3.91‑3.76(m,2H),
3.71(ddd,J＝10.1,6.1,4.3Hz,1H),3.66‑3.54(m,14H),3.53(t,J＝5.1Hz,1H),3.46‑3.33(m,2H),2.76‑2.57(m,1H),2.57‑2.42(m,2H),2.33‑2.19(m,1H),1.46(d,J＝7.1Hz,3H),
1.01(d,J＝12.1Hz,3H),1.00(d,J＝12.1Hz,3H)。
[1914] 13C NMR(75MHz,CD3OD):δ173.0,172.1,171.6(×2),170.7,163.8,155.7,152.5,145.4,140.3,138.9,134.1,130.4,129.1,125.6,124.8,121.9,119.7,115.1,70.2,70.1
(x3),70.0,69.9,69.8,69.0,66.9,59.1,53.4,49.7,39.0,36.0,34.3,34.1,30.4,18.3,
17.3,16.6。
(x3),70.0,69.9,69.8,69.0,66.9,59.1,53.4,49.7,39.0,36.0,34.3,34.1,30.4,18.3,
17.3,16.6。
[1915] ESI‑MS m/z:857.3(M+H)+。
[1916] Rf＝0.45(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1917] 实施例1：合成式D‑X‑(AA)w‑(T)g‑L1的化合物
[1918] 制备化合物DL‑1
[1919]
[1920] 在23℃下向11‑R(100mg，0.12mmol)及LIN 1(465mg，0.63mmol)于N‑甲基‑2‑吡咯啶酮(NMP)(15mL)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)(111μL，0.63mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌3天，用EtOAc(50mL)稀释且用H2O(4×30mL)及饱和NaCl水溶液(30mL)洗涤。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。残余物通过快速硅胶层析法来纯化(CH2Cl2:CH3OH，99:1至90:10)，得到DL 1，其通过制备型HPLC来纯化，得到纯DL 1(69mg，40％产率)。
[1921] 1H NMR(400MHz,CD3OD/CDCl3):δ7.85(d,J＝7.9Hz,1H),7.59(d,J＝8.1Hz,2H),7.36(d,J＝8.2Hz,2H),7.30(d,J＝7.9Hz,1H),7.22(d,J＝8.2Hz,1H),7.01(t,J＝7.6Hz,
1H),6.91(t,J＝7.5Hz,1H),6.72(s,2H),6.58(s,1H),6.26(s,1H),6.07(s,1H),5.25‑5.14(m,2H),5.14‑5.01(m,2H),4.67(bs,1H),4.51(d,J＝6.7Hz,2H),4.28(dd,J＝16.2,7.1Hz,
4H),4.21‑4.05(m,3H),3.71(s,3H),3.51‑3.40(m,2H),3.36‑3.32(m,2H),3.23‑2.99(m,
2H),2.99‑2.72(m,2H),2.65(d,J＝14.9Hz,2H),2.28(s,·3H),2.25(s,·3H),2.10(s,·
3H),2.04(s,·3H),1.96‑1.83(m,1H),1.80‑1.68(m,2H),1.65‑1.50(m,10H),1.35‑1.23(m,2H),0.95(d,J＝6.8Hz,3H),0.94(d,J＝6.8Hz,3H)。
1H),6.91(t,J＝7.5Hz,1H),6.72(s,2H),6.58(s,1H),6.26(s,1H),6.07(s,1H),5.25‑5.14(m,2H),5.14‑5.01(m,2H),4.67(bs,1H),4.51(d,J＝6.7Hz,2H),4.28(dd,J＝16.2,7.1Hz,
4H),4.21‑4.05(m,3H),3.71(s,3H),3.51‑3.40(m,2H),3.36‑3.32(m,2H),3.23‑2.99(m,
2H),2.99‑2.72(m,2H),2.65(d,J＝14.9Hz,2H),2.28(s,·3H),2.25(s,·3H),2.10(s,·
3H),2.04(s,·3H),1.96‑1.83(m,1H),1.80‑1.68(m,2H),1.65‑1.50(m,10H),1.35‑1.23(m,2H),0.95(d,J＝6.8Hz,3H),0.94(d,J＝6.8Hz,3H)。
[1922] 13C NMR(75MHz,CD3OH/CDCl3):δ174.9,172.5,171.5,171.1,170.7,169.5,160.8,157.4,148.6,146.1,143.6,141.1,140.9,138.0,136.8,133.9,132.6,130.5,129.8,
129.6,128.6,126.0,121.6,120.4,119.8,119.0,118.6,118.0,117.8,116.7,113.5,
112.8,110.9,109.1,102.3,66.0,63.1,62.9,61.6,60.2,59.9,59.2,59.1,58.9,54.6,
54.6,53.5,50.7,45.3,42.1,40.5,37.1,35.3,30.3,29.1,27.9,26.3,26.0,25.0,24.5,
23.6,19.4,18.6,17.7,15.1,8.6。
129.6,128.6,126.0,121.6,120.4,119.8,119.0,118.6,118.0,117.8,116.7,113.5,
112.8,110.9,109.1,102.3,66.0,63.1,62.9,61.6,60.2,59.9,59.2,59.1,58.9,54.6,
54.6,53.5,50.7,45.3,42.1,40.5,37.1,35.3,30.3,29.1,27.9,26.3,26.0,25.0,24.5,
23.6,19.4,18.6,17.7,15.1,8.6。
[1923] ESI‑MS m/z:1391.4(M+H)+。
[1924] Rf＝0.40(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1925] 制备化合物DL 2
[1926]
[1927] 在23℃下向11‑R(50mg，0.063mmol)及LIN 2(118mg，0.12mmol)于CH2Cl2(2mL)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)(22μL，0.12mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌18小时且倾倒至硅胶管柱(CH2Cl2:CH3OH，99:1至90:10)上，得到DL 2，其通过制备型HPLC来纯化，得到纯DL 2(30mg，30％产率)。
[1928] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.63(d,J＝7.9Hz,1H),7.59(d,J＝8.1Hz,2H),7.39(d,J＝8.2Hz,2H),7.30(d,J＝7.9Hz,1H),7.23(d,J＝8.2Hz,1H),7.01(t,J＝7.6Hz,1H),6.92(t,J＝7.5Hz,1H),6.76(s,2H),6.58(s,1H),6.28(s,1H),6.09(s,1H),5.25‑5.14(m,2H),
5.14‑5.01(m,2H),4.67(bs,1H),4.51(d,J＝6.7Hz,2H),4.36‑4.24(m,4H),4.23‑4.15(m,
3H),3.73(s,3H),3.75‑3.69(m 3H),3.58‑3.50(m,14H),3.51‑3.40(m,2H),3.36‑3.32(m,
2H),3.23‑3.05(m,2H),2.99‑2.88(m,2H),2.68(d,J＝14.9Hz,2H),2.56‑2.41(m,2H),2.29(s,·3H),2.27(s,·3H),2.10(s,·3H),2.05(s,·3H),1.96‑1.83(m,1H),1.80‑1.68(m,
2H),1.65‑1.50(m,10H),1.35‑1.23(m,2H),0.96(d,J＝6.8Hz,3H),0.95(d,J＝6.8Hz,3H)。
5.14‑5.01(m,2H),4.67(bs,1H),4.51(d,J＝6.7Hz,2H),4.36‑4.24(m,4H),4.23‑4.15(m,
3H),3.73(s,3H),3.75‑3.69(m 3H),3.58‑3.50(m,14H),3.51‑3.40(m,2H),3.36‑3.32(m,
2H),3.23‑3.05(m,2H),2.99‑2.88(m,2H),2.68(d,J＝14.9Hz,2H),2.56‑2.41(m,2H),2.29(s,·3H),2.27(s,·3H),2.10(s,·3H),2.05(s,·3H),1.96‑1.83(m,1H),1.80‑1.68(m,
2H),1.65‑1.50(m,10H),1.35‑1.23(m,2H),0.96(d,J＝6.8Hz,3H),0.95(d,J＝6.8Hz,3H)。
[1929] 13C NMR(75MHz,CD3OD):δ173.0,172.34,171.6,171.5(×2),170.8(×2),170.7,169.4,160.8,157.4,155.8,148.7,148.5,146.2,146.1,143.7,141.2,141.1,140.9,
138.4,136.9,134.0,131.3,129.8,128.7,128.5,126.0,121.5,120.5,119.9,119.7,
118.5,117.7,112.7,102.4,70.1(×5),70.0(×2),69.9,69.8,69.7,69.0,68.9,66.8,
61.6,59.9,59.2,54.6,54.0,53.5,40.4,40.0,39.0,36.0,35.1,34.4,34.1,30.4,29.0,
26.4,24.6,23.6,19.3,18.5,17.4,15.1,8.4。
138.4,136.9,134.0,131.3,129.8,128.7,128.5,126.0,121.5,120.5,119.9,119.7,
118.5,117.7,112.7,102.4,70.1(×5),70.0(×2),69.9,69.8,69.7,69.0,68.9,66.8,
61.6,59.9,59.2,54.6,54.0,53.5,40.4,40.0,39.0,36.0,35.1,34.4,34.1,30.4,29.0,
26.4,24.6,23.6,19.3,18.5,17.4,15.1,8.4。
[1930] ESI‑MS m/z:1596.6(M+H)+。
[1931] Rf＝0.48(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1932] 制备化合物DL 3
[1933]
[1934] 在23℃下向11‑R(50mg，0.063mmol)及LIN 3(108mg，0.12mmol)于CH2Cl2(2mL)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)(22μL，0.12mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌18小时且倾倒至硅胶管柱(CH2Cl2:CH3OH，99:1至90:10)上，得到DL 3，其通过制备型HPLC来纯化，得到纯DL 3(25mg，26％产率)。
[1935] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.64(d,J＝8.2Hz,2H),7.39(d,J＝8.4Hz,2H),7.30(dt,J＝7.8,1.0Hz,1H),7.23(dt,J＝8.4,0.9Hz,1H),7.01(ddd,J＝8.2,7.0,1.2Hz,1H),6.91(ddd,J＝7.9,7.0,1.0Hz,1H),6.76(s,2H),6.61(s,1H),6.28(s,1H),6.10(s,1H),5.26‑
5.15(m,1H),5.07(dd,J＝12.1,4.7Hz,2H),4.66(s,1H),4.57(s,1H),4.47(t,J＝7.1Hz,
1H),4.36(s,1H),4.32‑4.22(m,2H),4.18(d,J＝6.5Hz,2H),3.75‑3.68(m,6H),3.72(s,
3H),3.59‑3.46(m,8H),3.44(t,J＝5.3Hz,2H),3.33‑3.25(m,10H),3.15(dd,J＝9.7,
5.0Hz,1H),2.95(d,J＝17.9Hz,1H),2.81(dd,J＝18.0,9.9Hz,2H),2.73‑2.59(m,2H),2.52(t,J＝6.1Hz,2H),2.43(t,J＝6.9Hz,2H),2.29(s,3H),2.27(s,3H),2.11(s,3H),2.05(s,
3H),1.45(t,J＝8.7Hz,2H),0.99(d,J＝9.9Hz,3H),0.97(d,J＝9.9Hz,3H)。
5.15(m,1H),5.07(dd,J＝12.1,4.7Hz,2H),4.66(s,1H),4.57(s,1H),4.47(t,J＝7.1Hz,
1H),4.36(s,1H),4.32‑4.22(m,2H),4.18(d,J＝6.5Hz,2H),3.75‑3.68(m,6H),3.72(s,
3H),3.59‑3.46(m,8H),3.44(t,J＝5.3Hz,2H),3.33‑3.25(m,10H),3.15(dd,J＝9.7,
5.0Hz,1H),2.95(d,J＝17.9Hz,1H),2.81(dd,J＝18.0,9.9Hz,2H),2.73‑2.59(m,2H),2.52(t,J＝6.1Hz,2H),2.43(t,J＝6.9Hz,2H),2.29(s,3H),2.27(s,3H),2.11(s,3H),2.05(s,
3H),1.45(t,J＝8.7Hz,2H),0.99(d,J＝9.9Hz,3H),0.97(d,J＝9.9Hz,3H)。
[1936] 13C NMR(75MHz,CD3OD):δ173.1,172.1,172.1,171.6,171.5,170.7,169.4,148.7,146.1,143.6,140.9,138.1,136.9,135.7,134.0,134.0,132.7,127.1,126.0,121.5,
120.5,119.8,119.7,119.1,118.5,117.6,113.4,110.8,105.8,102.4,99.9,86.9,70.1,
70.1,70.1,70.0,70.0,69.9,69.8,69.0,67.7,66.8,65.9,63.0,62.0,61.6,60.1,59.9,
59.2,59.1,54.7,54.6,50.8,49.6,42.1,40.3,40.0,39.0,36.0,34.3,34.1,30.4,28.8,
23.6,19.2,18.4,17.3,16.6,14.9,8.4。
120.5,119.8,119.7,119.1,118.5,117.6,113.4,110.8,105.8,102.4,99.9,86.9,70.1,
70.1,70.1,70.0,70.0,69.9,69.8,69.0,67.7,66.8,65.9,63.0,62.0,61.6,60.1,59.9,
59.2,59.1,54.7,54.6,50.8,49.6,42.1,40.3,40.0,39.0,36.0,34.3,34.1,30.4,28.8,
23.6,19.2,18.4,17.3,16.6,14.9,8.4。
[1937] ESI‑MS m/z:1511.2(M+H)+。
[1938] Rf＝0.50(CH2Cl2:CH3OH，9:1)。
[1939] 制备化合物DL 4
[1940]
[1941] 在23℃下向46‑R(26mg，0.032mmol)及LIN 1(48mg，0.64mmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)(12μL，0.64mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌18小时，用EtOAc(50mL)稀释且用H2O(4×30mL)及饱和NaCl水溶液(30mL)洗涤。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。残余物通过制备型HPLC来纯化，得到纯DL 4(14mg，31％产率)。
[1942] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.88(d,J＝7.9Hz,1H),7.60(d,J＝8.2Hz,2H),7.39‑7.36(m,3H),7.20‑7.11(m,3H),6.74(s,2H),6.57(s,1H),6.24(s,1H),6.08(s,1H),5.30‑
5.05(m,2H),4.64(s,1H),4.50(d,J＝6.1Hz,2H),4.34‑4.27(m,4H),4.21‑4.13(m,3H),
3.70(s,3H),3.45(t,J＝7.2Hz,2H),3.19‑3.06(m,4H),2.93‑2.76(m,2H),2.70‑2.56(m,
2H),2.29‑2.19(m,4H),2.25(s,3H),2.29‑2.11(m,2H),2.11(s,3H),2.06(s,3H),1.93‑
1.72(m,2H),1.64‑1.52(m,9H),1.32‑1.26(m,3H),0.96‑0.93(m,8H)。
5.05(m,2H),4.64(s,1H),4.50(d,J＝6.1Hz,2H),4.34‑4.27(m,4H),4.21‑4.13(m,3H),
3.70(s,3H),3.45(t,J＝7.2Hz,2H),3.19‑3.06(m,4H),2.93‑2.76(m,2H),2.70‑2.56(m,
2H),2.29‑2.19(m,4H),2.25(s,3H),2.29‑2.11(m,2H),2.11(s,3H),2.06(s,3H),1.93‑
1.72(m,2H),1.64‑1.52(m,9H),1.32‑1.26(m,3H),0.96‑0.93(m,8H)。
[1943] 13C NMR(100MHz,CD3OD):δ173.4,171.1,169.7,169.3,169.1,167.7,159.3,155.9,153.5,147.2,147.1,144.3,142.1,139.6,139.2,136.6,132.5,131.1,129.1,
128.3,127.2,125.6,122.7,121.0,119.2(×2),118.3,117.5,117.4,112.2,112.1,111.7,
109.7,100.8,97.0,64.6,61.7,60.0,58.9,58.4,57.7(×2),57.4,53.2,53.1,52.0,48.9,
43.6,40.5,39.0,35.6,33.8,28.8,28.1,27.6,26.5,24.6,23.6,22.6,22.2,21.5,17.9,
17.1,16.2,13.6,7.1。
128.3,127.2,125.6,122.7,121.0,119.2(×2),118.3,117.5,117.4,112.2,112.1,111.7,
109.7,100.8,97.0,64.6,61.7,60.0,58.9,58.4,57.7(×2),57.4,53.2,53.1,52.0,48.9,
43.6,40.5,39.0,35.6,33.8,28.8,28.1,27.6,26.5,24.6,23.6,22.6,22.2,21.5,17.9,
17.1,16.2,13.6,7.1。
[1944] ESI‑MS m/z:1392.4(M+H)+。
[1945] 制备化合物DL 5
[1946]
[1947] 向DL 3(30mg，0.026mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，6mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(132mg，0.79mmol)。在23℃下18小时后，反应混合物用NaHCO3的水溶液中止且用
CH2Cl2(3次)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物在自动快速柱层析系统(SiO2，CH2Cl2:CH3OH，95:5至50:50)中纯化，得到纯DL 5(34mg，87％)。
CH2Cl2(3次)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物在自动快速柱层析系统(SiO2，CH2Cl2:CH3OH，95:5至50:50)中纯化，得到纯DL 5(34mg，87％)。
[1948] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.64(d,J＝8.4Hz,2H),7.38(d,J＝8.3Hz,2H),7.29(d,J＝7.8Hz,1H),7.22(d,J＝8.1Hz,1H),7.00(ddd,J＝8.2,7.0,1.2Hz,1H),6.91(ddd,J＝8.0,7.0,1.1Hz,1H),6.75(s,2H),6.64(s,1H),6.25(d,J＝1.4Hz,1H),6.06(d,J＝1.4Hz,
1H),5.23‑5.06(m,3H),4.60(s,1H),4.47(q,J＝7.1Hz,1H),4.31(dd,J＝16.3,4.1Hz,2H),
4.18(d,J＝6.6Hz,1H),4.12(d,J＝11.6Hz,1H),3.76‑3.66(m,2H),3.61(d,J＝5.3Hz,1H),
3.57‑3.48(m,16H),3.44(t,J＝7.2Hz,4H),3.27(t,J＝5.3Hz,3H),3.13(dd,J＝13.4,
6.7Hz,1H),2.96(d,J＝18.0Hz,1H),2.85(dd,J＝18.1,9.3Hz,1H),2.75‑2.61(m,2H),
2.56‑2.48(m,2H),2.43(t,J＝6.9Hz,2H),2.28(s,6H),2.24(s,1H),2.14(s,3H),2.12‑
2.05(m,2H),2.04(s,3H),1.43(d,J＝7.2Hz,3H),0.99(d,J＝6.8Hz,3H),0.96(d,J＝
6.8Hz,3H)。
1H),5.23‑5.06(m,3H),4.60(s,1H),4.47(q,J＝7.1Hz,1H),4.31(dd,J＝16.3,4.1Hz,2H),
4.18(d,J＝6.6Hz,1H),4.12(d,J＝11.6Hz,1H),3.76‑3.66(m,2H),3.61(d,J＝5.3Hz,1H),
3.57‑3.48(m,16H),3.44(t,J＝7.2Hz,4H),3.27(t,J＝5.3Hz,3H),3.13(dd,J＝13.4,
6.7Hz,1H),2.96(d,J＝18.0Hz,1H),2.85(dd,J＝18.1,9.3Hz,1H),2.75‑2.61(m,2H),
2.56‑2.48(m,2H),2.43(t,J＝6.9Hz,2H),2.28(s,6H),2.24(s,1H),2.14(s,3H),2.12‑
2.05(m,2H),2.04(s,3H),1.43(d,J＝7.2Hz,3H),0.99(d,J＝6.8Hz,3H),0.96(d,J＝
6.8Hz,3H)。
[1949] 13C NMR(100MHz,CD3OD):δ173.1,172.1,171.7,171.6,171.5,170.7,169.3,162.5,157.5,148.9,146.1,144.1,141.4,140.9,138.2,136.9,134.0,132.7,131.2,
129.7,128.4,126.0,121.4,120.1,119.8,119.7,118.5,117.6,114.3,112.5,110.8,
102.3,90.5,70.1(×2),70.0(×2),69.9,69.8,69.0,66.8,65.9,63.1,60.2,59.2,59.1,
57.9,55.6,55.1,53.6,50.8,49.6,45.4,42.1,40.3,39.5,39.0,35.9,34.3,34.0(×2),
29.3,24.7,23.2,19.1,18.3,17.3,16.5,15.0,8.2。
129.7,128.4,126.0,121.4,120.1,119.8,119.7,118.5,117.6,114.3,112.5,110.8,
102.3,90.5,70.1(×2),70.0(×2),69.9,69.8,69.0,66.8,65.9,63.1,60.2,59.2,59.1,
57.9,55.6,55.1,53.6,50.8,49.6,45.4,42.1,40.3,39.5,39.0,35.9,34.3,34.0(×2),
29.3,24.7,23.2,19.1,18.3,17.3,16.5,15.0,8.2。
[1950] ESI‑MS m/z:1483.4(M‑H2O+H)+。
[1951] 制备化合物DL 6
[1952]
[1953] 向DL 1(50mg，0.035mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，2.39mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(181mg，1.07mmol)。在23℃下18小时后，反应混合物用NaHCO3:NaCl的水溶液(1:1)中止且用CH2Cl2(3次)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物通过制备型HPLC来纯化，得到纯DL 6(23mg，47％产率)。
[1954] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.62(d,J＝8.1Hz,2H),7.41(d,J＝8.1Hz,2H),7.39(d,J＝8.2Hz,1H),7.29(d,J＝8.2Hz,1H),7.12(ddd,J＝8.0,7.0,0.9Hz,1H),7.01(ddd,J＝8.0,7.0,0.9Hz,1H),6.82(s,1H),6.75(s,2H),6.32(d,J＝1.3Hz,1H),6.12(d,J＝1.3Hz,
1H),5.32(d,J＝11.8Hz,1H),5.24‑5.12(m,3H),4.81(m,2H),4.65(s,1H),4.47(s,1H),
4.31(d,J＝11.6Hz,1H),4.18(d,J＝9.0Hz,1H),4.12(d,J＝7.4Hz,1H),3.93‑3.83(m,2H),
3.76(s,3H),3.65(d,J＝12.3Hz,1H),3.44(t,J＝7.1Hz,2H),3.23‑2.99(m,2H),2.92(d,J＝15.9Hz,1H),2.62(s,3H),2.45(d,J＝15.5Hz,1H),2.35(s,3H),2.30(s,3H),2.28(d,J＝
13.3Hz,6H),2.07(s,3H),2.13‑2.00(m,2H),1.90(m,1H),1.80‑1.70(m,2H),1.65‑1.50(m,
4H),1.34‑1.22(m,2H),0.96(d,J＝6.8Hz,3H),0.95(d,J＝6.8Hz,3H)。
1H),5.32(d,J＝11.8Hz,1H),5.24‑5.12(m,3H),4.81(m,2H),4.65(s,1H),4.47(s,1H),
4.31(d,J＝11.6Hz,1H),4.18(d,J＝9.0Hz,1H),4.12(d,J＝7.4Hz,1H),3.93‑3.83(m,2H),
3.76(s,3H),3.65(d,J＝12.3Hz,1H),3.44(t,J＝7.1Hz,2H),3.23‑2.99(m,2H),2.92(d,J＝15.9Hz,1H),2.62(s,3H),2.45(d,J＝15.5Hz,1H),2.35(s,3H),2.30(s,3H),2.28(d,J＝
13.3Hz,6H),2.07(s,3H),2.13‑2.00(m,2H),1.90(m,1H),1.80‑1.70(m,2H),1.65‑1.50(m,
4H),1.34‑1.22(m,2H),0.96(d,J＝6.8Hz,3H),0.95(d,J＝6.8Hz,3H)。
[1955] 13C NMR(100MHz,CD3OD):δ175.0,172.6,171.1,170.9,169.2,169.1,160.9,157.7,149.5,147.0,146.0,144.8,141.7,141.2,137.3,136.8,133.9,132.5,130.5,
129.8,129.6,128.5,127.9,122.6,120.3,119.8,119.2,118.4,117.9,116.7,113.1,
112.8,111.1,108.4,102.7,101.5,89.1,66.2,63.1,62.9,61.6,59.3,56.9,56.1,55.5,
54.7,53.6,50.7,45.3,42.2,39.0,38.9,37.0,35.1,30.1,29.3,27.9,26.5,26.3,26.0,
25.0,23.1,19.1,18.4,17.6,15.2,8.3。
129.8,129.6,128.5,127.9,122.6,120.3,119.8,119.2,118.4,117.9,116.7,113.1,
112.8,111.1,108.4,102.7,101.5,89.1,66.2,63.1,62.9,61.6,59.3,56.9,56.1,55.5,
54.7,53.6,50.7,45.3,42.2,39.0,38.9,37.0,35.1,30.1,29.3,27.9,26.5,26.3,26.0,
25.0,23.1,19.1,18.4,17.6,15.2,8.3。
[1956] ESI‑MS m/z:1364.4(M‑H2O+H)+。
[1957] 制备化合物DL 7
[1958]
[1959] 在23℃下向12‑R(100mg，0.12mmol)及LIN 2(180mg，0.19mmol)于二甲基甲酰胺(DMF)(2mL，0.06M)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)(90μL，0.51mmol)。18小时后，反应混合物通过制备型HPLC来纯化，得到纯DL 7(125mg，62％产率)。
[1960] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.65(d,J＝8.1Hz,2H),7.41(d,J＝8.1Hz,2H),7.39(d,J＝8.2Hz,1H),7.29(d,J＝8.2Hz,1H),7.13(ddd,J＝8.2,7.0,1.1Hz,1H),7.01(ddd,J＝8.2,7.0,1.1Hz,1H),6.82(s,1H),6.76(s,2H),6.32(d,J＝1.3Hz,1H),6.12(d,J＝1.3Hz,
1H),5.32(d,J＝11.8Hz,1H),5.18(d,J＝5.7Hz,2H),4.82(m,2H),4.64(d,J＝2.8Hz,1H),
4.47(s,1H),4.33(dd,J＝12.0,2.1Hz,1H),4.22‑4.12(m,2H),3.96(bs,1H),3.88(d,J＝
5.0Hz,1H),3.78‑3.67(m,8H),3.60‑3.52(m,14H),3.56‑3.41(m,3H),3.27(t,J＝5.4Hz,
2H),3.22‑3.04(m,4H),2.93(d,J＝16.0Hz,1H),2.70‑2.58(m,3H),2.55(t,J＝6.9Hz,2H),
2.43(t,J＝6.9Hz,2H),2.36(s,3H),2.30(s,3H),2.15‑2.07(m,1H),2.06(s,3H),2.02(s,
2H),1.95‑1.87(m,1H),1.80‑1.70(m,1H),1.65‑1.50(m,2H),0.97(d,J＝6.8Hz,3H),0.96(d,J＝6.8Hz,3H)。
1H),5.32(d,J＝11.8Hz,1H),5.18(d,J＝5.7Hz,2H),4.82(m,2H),4.64(d,J＝2.8Hz,1H),
4.47(s,1H),4.33(dd,J＝12.0,2.1Hz,1H),4.22‑4.12(m,2H),3.96(bs,1H),3.88(d,J＝
5.0Hz,1H),3.78‑3.67(m,8H),3.60‑3.52(m,14H),3.56‑3.41(m,3H),3.27(t,J＝5.4Hz,
2H),3.22‑3.04(m,4H),2.93(d,J＝16.0Hz,1H),2.70‑2.58(m,3H),2.55(t,J＝6.9Hz,2H),
2.43(t,J＝6.9Hz,2H),2.36(s,3H),2.30(s,3H),2.15‑2.07(m,1H),2.06(s,3H),2.02(s,
2H),1.95‑1.87(m,1H),1.80‑1.70(m,1H),1.65‑1.50(m,2H),0.97(d,J＝6.8Hz,3H),0.96(d,J＝6.8Hz,3H)。
[1961] 13C NMR(125MHz,CD3OD):δ173.1,172.5,171.6,171.0,170.7(×2),169.3,168.5,160.9,160.0,149.6,147.1,144.9,141.8,141.3,138.2,137.4,134.1,132.4,128.6,
127.9,125.2,122.9,120.2,119.9,119.4,118.1(×2),117.1,114.8,113.2,112.7,111.3,
108.3,102.7,89.0,70.2,70.1(×2),70.0,69.9,69.8,69.0,66.9,66.3,65.5,65.4,61.9,
59.4,56.9,56.1,55.4(×2),54.6,53.7,43.7,42.4,39.1,39.0,36.0,34.4,34.1,31.4,
30.3,28.9,26.5,23.1,22.3,19.2,18.5,17.5,15.3,13.2,8.5。
127.9,125.2,122.9,120.2,119.9,119.4,118.1(×2),117.1,114.8,113.2,112.7,111.3,
108.3,102.7,89.0,70.2,70.1(×2),70.0,69.9,69.8,69.0,66.9,66.3,65.5,65.4,61.9,
59.4,56.9,56.1,55.4(×2),54.6,53.7,43.7,42.4,39.1,39.0,36.0,34.4,34.1,31.4,
30.3,28.9,26.5,23.1,22.3,19.2,18.5,17.5,15.3,13.2,8.5。
[1962] ESI‑MS m/z:1570.4(M‑H2O+H)+。
[1963] 制备化合物DL 8
[1964]
[1965] 在23℃下向11‑S(30mg，0.037mmol)及LIN 1(56mg，0.075mmol)于二甲基甲酰胺(DMF)(2mL，0.018M)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)(26μL，0.15mmol)及1‑羟基苯并三唑(HOBt，10mg，0.075mmol)。18小时后反应混合物通过制备型HPLC来纯化，得到纯DL 8(30mg，58％产率)。
[1966] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.59(d,J＝8.1Hz,2H),7.36(d,J＝8.2Hz,2H),7.28(d,J＝7.9Hz,1H),7.23(d,J＝8.2Hz,1H),7.00(t,J＝7.6Hz,1H),6.91(t,J＝7.5Hz,1H),6.74(s,2H),6.50(s,1H),6.27(s,1H),6.09(s,1H),5.20‑5.03(m,2H),4.65(bs,1H),4.54‑4.46(m,1H),4.43‑4.37(m,1H),4.34‑4.30(m,1H),4.17‑4.12(m,1H),3.75(s,3H),3.45(t,J＝
7.0Hz,4H),3.32‑3.23(m,2H),3.38(d,J＝7.6Hz,2H),3.23‑2.99(m,2H),3.21‑2.97(m,
3H),2.94‑2.83(m,3H),2.61‑2.53(m,2H),2.48‑2.34(m,2H),2.28(s,·3H),2.27‑2.22(m,
1H),2.21(s,·3H),2.11(s,·3H),2.08‑2.02(m,1H),1.99(s,·3H),1.91‑1.82(m,1H),
1.77‑1.68(m,1H),1.65‑1.50(m,6H),1.31‑1.24(m,2H),0.94(d,J＝6.8Hz,3H),0.93(d,J＝6.8Hz,3H)。
7.0Hz,4H),3.32‑3.23(m,2H),3.38(d,J＝7.6Hz,2H),3.23‑2.99(m,2H),3.21‑2.97(m,
3H),2.94‑2.83(m,3H),2.61‑2.53(m,2H),2.48‑2.34(m,2H),2.28(s,·3H),2.27‑2.22(m,
1H),2.21(s,·3H),2.11(s,·3H),2.08‑2.02(m,1H),1.99(s,·3H),1.91‑1.82(m,1H),
1.77‑1.68(m,1H),1.65‑1.50(m,6H),1.31‑1.24(m,2H),0.94(d,J＝6.8Hz,3H),0.93(d,J＝6.8Hz,3H)。
[1967] 13C NMR(100MHz,CD3OD):δ174.9,174.8,172.5,172.0,171.2,170.8,169.4,160.8,157.5,148.6,146.0,143.6,140.9,140.8,138.0,136.6,136.5,134.0,132.7,
130.2,129.9,129.7,128.7,128.4,126.3,121.6,120.5,120.0,119.8,119.3,118.7,
118.0,117.7,113.5,112.9,111.0,107.8,102.4,65.9,63.5,61.4,60.6,59.7,59.3,59.2,
59.1,58.8,54.6,54.6,53.4,44.8,42.3,40.6,38.3,37.1,35.3(×2),30.3,29.1,28.0,
26.3,26.0,25.1,24.0,23.7,19.5,18.6,17.7,15.2,8.6。
130.2,129.9,129.7,128.7,128.4,126.3,121.6,120.5,120.0,119.8,119.3,118.7,
118.0,117.7,113.5,112.9,111.0,107.8,102.4,65.9,63.5,61.4,60.6,59.7,59.3,59.2,
59.1,58.8,54.6,54.6,53.4,44.8,42.3,40.6,38.3,37.1,35.3(×2),30.3,29.1,28.0,
26.3,26.0,25.1,24.0,23.7,19.5,18.6,17.7,15.2,8.6。
[1968] ESI‑MS m/z:1391.4(M+H)+。
[1969] 制备化合物DL 9
[1970]
[1971] 在23℃下向11‑S(110mg，0.13mmol)及LIN‑3(119mg，0.13mmol)于二甲基甲酰胺(DMF)(4mL，0.032M)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)(97μL，0.55mmol)及1‑羟基苯并三唑(HOBt，38mg，0.27mmol)。18小时后反应混合物通过制备型HPLC来纯化，得到纯DL 9(120mg，57％产率)。
[1972] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.62(d,J＝8.6Hz,2H),7.36(d,J＝8.5Hz,2H),7.28(d,J＝8.2Hz,1H),7.23(d,J＝8.2Hz,1H),7.00(ddd,J＝8.2,7.0,1.2Hz,1H),6.91(td,J＝7.5,7.0,1.1Hz,1H),6.75(s,2H),6.50(s,1H),6.26(d,J＝1.3Hz,1H),6.08(d,J＝1.4Hz,1H),
5.19(d,J＝11.4Hz,1H),5.09(d,J＝10.4Hz,2H),4.65(s,1H),4.48(p,J＝6.9Hz,1H),
4.42‑4.38(m,2H),4.34‑4.30(m,2H),4.22‑4.14(m,1H),3.78‑3.64(m,5H),3.61‑3.50(m,
8H),3.45(t,J＝5.4Hz,2H),3.38(d,J＝5.1Hz,1H),3.33‑3.23(m,3H),3.02(dd,J＝13.5,
5.5Hz,1H),2.89(d,J＝9.4Hz,2H),2.62‑2.33(m,7H),2.27(s,3H),2.22(s,3H),2.12(s,
3H),2.15‑2.05(m,1H),1.99(m,3H),1.42(d,J＝7.1Hz,3H),0.97(dd,J＝6.8Hz,3H),0.95(dd,J＝6.8Hz,3H)。
5.19(d,J＝11.4Hz,1H),5.09(d,J＝10.4Hz,2H),4.65(s,1H),4.48(p,J＝6.9Hz,1H),
4.42‑4.38(m,2H),4.34‑4.30(m,2H),4.22‑4.14(m,1H),3.78‑3.64(m,5H),3.61‑3.50(m,
8H),3.45(t,J＝5.4Hz,2H),3.38(d,J＝5.1Hz,1H),3.33‑3.23(m,3H),3.02(dd,J＝13.5,
5.5Hz,1H),2.89(d,J＝9.4Hz,2H),2.62‑2.33(m,7H),2.27(s,3H),2.22(s,3H),2.12(s,
3H),2.15‑2.05(m,1H),1.99(m,3H),1.42(d,J＝7.1Hz,3H),0.97(dd,J＝6.8Hz,3H),0.95(dd,J＝6.8Hz,3H)。
[1973] 13C NMR(100MHz,CD3OD):δ173.1(×2),172.1,171.9,171.6,171.5,171.5,170.7,169.3,148.6,146.0,143.6,140.9,140.8,138.1,136.5,134.1,132.8,130.3,129.8,
128.4,126.3,121.6,120.5,120.0,119.7,119.3,118.7,118.0,117.7,113.5,112.9,
111.0,107.8,102.4,70.2,70.1(×2),70.0(×2),69.8,69.1,66.9,65.9,63.5,61.4,
60.6,59.7,59.3,59.2,59.1,58.8,54.7,54.6,49.6,42.3,40.5,39.1,39.0,36.0,34.4(×
2),34.1,30.4,24.0,23.7,19.4,18.5,17.4,16.8,15.1,8.5。
128.4,126.3,121.6,120.5,120.0,119.7,119.3,118.7,118.0,117.7,113.5,112.9,
111.0,107.8,102.4,70.2,70.1(×2),70.0(×2),69.8,69.1,66.9,65.9,63.5,61.4,
60.6,59.7,59.3,59.2,59.1,58.8,54.7,54.6,49.6,42.3,40.5,39.1,39.0,36.0,34.4(×
2),34.1,30.4,24.0,23.7,19.4,18.5,17.4,16.8,15.1,8.5。
[1974] ESI‑MS m/z:1511.4(M+H)+。
[1975] 制备化合物DL 10
[1976]
[1977] 在23℃下向12‑S(30mg，0.058mmol)及LIN 1(98mg，0.13mmol)于N‑甲基‑2‑吡咯啶酮(NMP)(4mL，0.014M)中的溶液中添加N，N‑二异丙基乙胺(DIPEA)(83μL，0.13mmol)。18小时后，反应混合物用EtOAc(25mL)稀释且用H2O(4×25mL)及饱和NaCl水溶液洗涤。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。残余物通过快速硅胶层析法(CH2Cl2:CH3OH，99:1至90:10)来纯化且所得化合物通过制备型HPLC来纯化，得到纯DL 10(11mg，21％产率)。
[1978] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.61(d,J＝8.1Hz,2H),7.39(d,J＝8.1Hz,2H),7.35(d,J＝8.2Hz,1H),7.29(d,J＝8.2Hz,1H),7.08(ddd,J＝8.0,7.0,0.9Hz,1H),6.98(ddd,J＝8.0,7.0,0.9Hz,1H),6.76(s,2H),6.66(s,1H),6.29(d,J＝1.3Hz,1H),6.14(d,J＝1.3Hz,
1H),5.13(q,J＝12.3Hz,2H),4.93‑.4.81(m,3H),4.69(s,1H),4.48(s,1H),4.23(d,J＝
10.0Hz,1H),4.13(dd,J＝7.5,4.0Hz,1H),3.90(d,J＝5.0,1H),3.76(s,3H),3.49‑3.41(m,
2H),3.40‑3.27(m,1H),3.28‑3.24(m,4H),3.22‑3.05(m,4H),2.80‑2.65(m,3H),2.63(s,
3H),2.29(s,3H),2.28(s,3H),2.13‑2.00(m,2H),2.03(s,3H),1.93‑1.83(m,1H),1.79‑
1.69(m,2H),1.65‑1.51(m,6H),1.34‑1.22(m,2H),0.96(d,J＝6.8Hz,3H),0.95(d,J＝
6.8Hz,3H)。
1H),5.13(q,J＝12.3Hz,2H),4.93‑.4.81(m,3H),4.69(s,1H),4.48(s,1H),4.23(d,J＝
10.0Hz,1H),4.13(dd,J＝7.5,4.0Hz,1H),3.90(d,J＝5.0,1H),3.76(s,3H),3.49‑3.41(m,
2H),3.40‑3.27(m,1H),3.28‑3.24(m,4H),3.22‑3.05(m,4H),2.80‑2.65(m,3H),2.63(s,
3H),2.29(s,3H),2.28(s,3H),2.13‑2.00(m,2H),2.03(s,3H),1.93‑1.83(m,1H),1.79‑
1.69(m,2H),1.65‑1.51(m,6H),1.34‑1.22(m,2H),0.96(d,J＝6.8Hz,3H),0.95(d,J＝
6.8Hz,3H)。
[1979] 13C NMR(100MHz,CD3OD):δ174.9,172.7,172.6,171.1,170.8(×2),169.1,160.9,149.4,146.6,144.7,142.3,141.5,141.0,138.1,136.8,133.9,133.5,132.6,128.5,
127.5,125.9,122.2,120.9,119.8,117.8,113.2,113.0,111.2,107.3,102.6,89.2,66.2,
61.7,61.3,60.2,59.4,59.3,57.4,56.9,55.8,55.7,55.2,54.8,53.5,42.0,39.1,37.1,
35.2,31.7,30.2,29.4,29.1,29.0(×2),27.9,26.4,26.0,25.0,23.3,22.4,19.2,18.5,
17.7,15.2,13.2,8.5。
127.5,125.9,122.2,120.9,119.8,117.8,113.2,113.0,111.2,107.3,102.6,89.2,66.2,
61.7,61.3,60.2,59.4,59.3,57.4,56.9,55.8,55.7,55.2,54.8,53.5,42.0,39.1,37.1,
35.2,31.7,30.2,29.4,29.1,29.0(×2),27.9,26.4,26.0,25.0,23.3,22.4,19.2,18.5,
17.7,15.2,13.2,8.5。
[1980] ESI‑MS m/z:1364.4(M‑H2O+H)+。
[1981] 制备化合物DL 11
[1982]
[1983] 向DL 9(90mg，0.059mmol)于CH3CN:H2O(1.39:1，4mL，0.015M)中的溶液中添加AgNO3(298mg，1.78mmol)。在23℃下21小时后，反应混合物用NaHCO3:NaCl的水溶液(1:1)中止且用CH2Cl2(3次)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4脱水，过滤，且真空浓缩。所得残余物在自动快速柱层析系统中纯化(SiO2，CH2Cl2:CH3OH，95:5至50:50)，得到纯DL 11(65mg，
73％产率)。
73％产率)。
[1984] 1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.62(d,J＝8.6Hz,1H),7.37(d,J＝8.5Hz,2H),7.28(d,J＝7.8Hz,1H),7.23(d,J＝8.2Hz,1H),6.99(ddd,J＝8.2,7.0,1.2Hz,1H),6.90(ddd,J＝8.0,7.0,1.1Hz,1H),6.76(s,2H),6.52(s,1H),6.25(d,J＝1.3Hz,1H),6.06(d,J＝1.3Hz,
1H),5.28(d,J＝11.4Hz,1H),5.09(d,J＝10.4Hz,1H),4.59(s,1H),4.47(q,J＝7.1Hz,1H),
4.33(dd,J＝11.5,1.9Hz,1H),4.33‑4.25(m,2H),4.19(d,J＝6.6Hz,1H),3.75(s,3H),
3.75‑3.67m,3H),3.61(d,J＝5.3Hz,1H),3.58‑3.51(m,12H),3.45(dd,J＝10.6,5.2Hz,
2H),3.34(s,3H),3.27(t,J＝5.5Hz,3H),3.04(dd,J＝13.4,6.7Hz,1H),2.88‑2.82(m,3H),
2.64‑2.35(m,7H),2.27(s,3H),2.23(s,3H),2.17‑2.04(m,1H),2.09(s,3H),2.01(d,J＝
7.2Hz,1H),1.98(s,3H),1.42(d,J＝7.2Hz,3H),0.98(dd,J＝6.8Hz,3H),0.95(dd,J＝
6.8Hz,3H)。
1H),5.28(d,J＝11.4Hz,1H),5.09(d,J＝10.4Hz,1H),4.59(s,1H),4.47(q,J＝7.1Hz,1H),
4.33(dd,J＝11.5,1.9Hz,1H),4.33‑4.25(m,2H),4.19(d,J＝6.6Hz,1H),3.75(s,3H),
3.75‑3.67m,3H),3.61(d,J＝5.3Hz,1H),3.58‑3.51(m,12H),3.45(dd,J＝10.6,5.2Hz,
2H),3.34(s,3H),3.27(t,J＝5.5Hz,3H),3.04(dd,J＝13.4,6.7Hz,1H),2.88‑2.82(m,3H),
2.64‑2.35(m,7H),2.27(s,3H),2.23(s,3H),2.17‑2.04(m,1H),2.09(s,3H),2.01(d,J＝
7.2Hz,1H),1.98(s,3H),1.42(d,J＝7.2Hz,3H),0.98(dd,J＝6.8Hz,3H),0.95(dd,J＝
6.8Hz,3H)。
[1985] 13C NMR(100MHz,CD3OD):δ173.1,172.1,172.0,171.6,171.5,170.7,169.4,157.6,148.6,145.8,143.7,141.1,140.8,138.1,136.5,134.1,132.8,130.4,130.0,
129.8,128.4,126.4,126.2,121.5,120.9,120.1,119.8,118.6,117.7,114.9,112.4,
111.0,107.7,102.1,91.0,70.2,70.1(×2),70.0(×2),69.8,69.1,66.9,65.9,63.5,
60.5,59.3,59.1,58.2,55.2,54.7,52.9,49.6,44.9,42.6,40.0,39.0,38.3,36.0,34.4,
34.1,30.4,29.4,24.0,23.3,19.4,18.5,17.4,16.8,15.1,8.4。
129.8,128.4,126.4,126.2,121.5,120.9,120.1,119.8,118.6,117.7,114.9,112.4,
111.0,107.7,102.1,91.0,70.2,70.1(×2),70.0(×2),69.8,69.1,66.9,65.9,63.5,
60.5,59.3,59.1,58.2,55.2,54.7,52.9,49.6,44.9,42.6,40.0,39.0,38.3,36.0,34.4,
34.1,30.4,29.4,24.0,23.3,19.4,18.5,17.4,16.8,15.1,8.4。
[1986] ESI‑MS m/z:1483.4(M‑H2O+H)+。
[1987] 实施例2：制备抗体‑药物共轭物(ADC)
[1988] 在此实施例中，描述本发明的抗体‑药物共轭物的合成。应注意，这些合成为例示性的，且所述方法可应用于本文所述的所有化合物及抗体。
[1989] 实施例2a制备抗CD13单株抗体
[1990] 遵循本技术领域中常用的熟知程序获得抗CD13单株抗体。简言之，BALB/c小鼠经自脐带分离的人类内皮细胞免疫接种。为此，在第‑45天及第‑30天将1.5E7个细胞经腹膜内注射至小鼠，且在第‑3天经静脉内注射至小鼠。在第0天，从这些动物移除脾脏，且根据标准技术将脾脏细胞与SP2小鼠骨髓瘤细胞以4:1的比率融合，以产生杂交瘤且分配在96孔组织培养盘(Costar公司，Cambridge，MA)上。在2周之后，收获杂交瘤培养上清液，且通过流动式细胞测量术测试其针对免疫接种步骤中使用的细胞系的反应性。通过将用作抗原的对应细胞进行免疫萤光染色来分析阳性上清液。选择展示特定染色、免疫沉淀模式及细胞分布的融合瘤且通过限制稀释法克隆及压克隆。
[1991] 一旦选择纯系，就将细胞在补充有10％(v/v)胎牛血清、2mM麸酰胺酸、100U/mL青霉素及100μg/mL链霉素的RPMI‑1640培养基中在37℃下在3‑4天期间培养，直至培养基变成淡黄色。彼时，移除三分之二培养基体积，在1，000×g下离心10分钟，以使细胞集结，且再次在3，000×g下离心上清液10分钟以进一步清洗，或经由22μm孔径膜过滤。澄清上清液用55％饱和的硫酸铵沉淀，且所得集结粒再悬浮于100mM Tris‑HCl pH 7.8(每100mL原始澄清上清液1mL)中且在4℃下针对5L具有150mM NaCl的100mM Tris‑HCl pH 7.8透析16‑24小时，更换透析溶液至少三次。将透析材料最终负载至蛋白A‑琼脂糖凝胶管柱上且对应单株抗体用100mM柠檬酸钠pH 3.0或可替代地用1M甘胺酸pH 3.0洗脱。含有抗体的那些洗脱份经2M Tris‑HCl pH 9.0中和且最终用PBS透析，且储存于‑80℃下，直至其使用。
[1992] 制备具有曲妥珠单抗及DL 1的抗体‑药物共轭物ADC1
[1993] (a)曲妥珠单抗的部分还原以得到经部分还原的曲妥珠单抗
[1994] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(13.9mg/mL)。
[1995] 用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.33mL，4.6mg，30.6nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过添加5.0mM三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(17.5μL，87.6nmol，3当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析(Ellman assay)，得到4.0的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[1996] (b)制备ADC1
[1997] 向经部分还原的曲妥珠单抗(140μL，1.4mg，9nmol)的溶液添加N，N‑二甲基乙酰胺(DMA)(28.2μL)，接着添加刚制备的DL 1溶液(DMA中10mM，6.8μL，67.5nmol，7.5当量)。在添加DL 1后，溶液变混浊。将共轭反应在20℃下搅拌30分钟且在共轭反应期间混浊消失。通过添加N‑乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，6.8μL，67.5nmol)中止过量药物，接着搅拌溶液20分钟。中止的共轭反应通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 1浓缩至6.05mg/mL的最终浓度，且获得232μL(1.4mg，9.3nmol，
103％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(89％)。
103％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(89％)。
[1998] 制备具有曲妥珠单抗及DL 2的抗体‑药物共轭物ADC 2
[1999] (a)曲妥珠单抗的部分还原以得到经部分还原的曲妥珠单抗
[2000] 用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.33mL，4.6mg，30.6nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过添加5.0mM三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(17.5μL，87.6nmol，3当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到3.9的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2001] (b)制备ADC 2
[2002] 向经部分还原的曲妥珠单抗(140μL，1.4mg，9nmol)的溶液添加N，N‑二甲基乙酰胺(DMA)(28.2μL)，接着添加刚制备的DL 2溶液(DMA中10mM，6.8μL，67.5nmol，7.5当量)。在添加DL 2后，将溶液在20℃下搅拌30分钟。通过添加N‑乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，6.8μL，67.5nmol)中止过量药物，接着搅拌溶液20分钟。中止的共轭反应通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 2浓缩至
5.19mg/mL的最终浓度，且获得270μL(1.4mg，9.3nmol，103％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(65％)。
5.19mg/mL的最终浓度，且获得270μL(1.4mg，9.3nmol，103％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(65％)。
[2003] 制备具有曲妥珠单抗及化合物DL 3的抗体‑药物共轭物ADC 3
[2004] (a)曲妥珠单抗的部分还原以得到经部分还原的曲妥珠单抗
[2005] 用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.33mL，4.6mg，30.6nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过添加5.0mM三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(17.5μL，87.6nmol，3当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到3.9的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2006] (b)制备ADC 3
[2007] 向经部分还原的曲妥珠单抗(140μL，1.4mg，9nmol)的溶液添加N，N‑二甲基乙酰胺(DMA)(28.2μL)，接着添加刚制备的DL 3溶液(DMA中10mM，6.8μL，67.5nmol，7.5当量)。在添加DL 3后，将溶液在20℃下搅拌30分钟。通过添加N‑乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，6.8μL，67.5nmol)中止过量药物，接着搅拌溶液20分钟。中止的共轭反应通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 3浓缩至
5.15mg/mL的最终浓度，且获得280μL(1.44mg，9.6nmol，107％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(93％)。
5.15mg/mL的最终浓度，且获得280μL(1.44mg，9.6nmol，107％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(93％)。
[2008] 制备具有曲妥珠单抗及化合物DL 1的抗体‑药物共轭物ADC 4
[2009] (a)曲妥珠单抗与2‑亚氨基硫杂环戊烷盐酸盐(特氏试剂)反应以得到硫醇活化的曲妥珠单抗
[2010] 用磷酸盐缓冲液(50mM磷酸盐、2mM EDTA，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.65mL，9mg，60nmol)稀释至10mg/mL的浓度。添加特氏试剂(64.4μL，900nmol，15当量)且在25℃下搅拌反应2小时。使用两个Sephadex G25 NAP‑5管柱将混合物经缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至1.2mL(7.5mg/mL)的体积。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到7.9的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2011] (b)制备ADC 4
[2012] 向硫醇活化的曲妥珠单抗(300μL，2.25mg，15nmol)的溶液添加DMA(59.8μL)，接着添加刚制备的DL 1溶液(DMA中10mM，22.5μL，225nmol，15当量)。在添加DL 1后，溶液变混浊。在25℃下搅拌共轭反应2小时，且通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 4浓缩至3.49mg/mL的最终浓度，且获得252μL(0.88mg，5.86nmol，39％)ADC溶液。
[2013] 制备具有曲妥珠单抗及化合物DL 4的抗体‑药物共轭物ADC 5
[2014] (a)曲妥珠单抗的部分还原以得到经部分还原的曲妥珠单抗
[2015] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(17.1mg/mL)。
[2016] 用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.5mL，8.55mg，57nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过添加5.0mM三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(24.5μL，122.4nmol，
2.2当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到3.4的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
2.2当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到3.4的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2017] (b)制备ADC 5
[2018] 向经部分还原的曲妥珠单抗(200μL，1.9mg，13.2nmol)的溶液添加N，N‑二甲基乙酰胺(DMA)(42.1μL)，接着添加刚制备的DL 4溶液(DMA中10mM，7.9μL，79.2nmol，6当量)。在添加DL 4后，溶液变混浊。将共轭反应在20℃下搅拌30分钟且在共轭反应期间混浊消失。通过添加N‑乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，7.9μL，79.2nmol)中止过量药物，接着搅拌溶液20分钟。中止的共轭反应通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 5浓缩至5.30mg/mL的最终浓度，且获得290μL(1.54mg，1.0nmol，81％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(91％)。
[2019] 制备具有曲妥珠单抗及化合物DL 5的抗体‑药物共轭物ADC 6
[2020] (a)曲妥珠单抗的部分还原以得到经部分还原的曲妥珠单抗
[2021] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(17.6mg/mL)。
[2022] 用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.55mL，9.7mg，64.6nmol)稀释至12.8mg/mL的浓度。通过添加5.0mM三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(29.2μL，146nmol，2.2当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到3.4的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2023] (b)制备ADC 6
[2024] 向经部分还原的曲妥珠单抗(140μL，1.8mg，12nmol)的溶液添加N，N‑二甲基乙酰胺(DMA)(28.2μL)，接着添加刚制备的DL 5溶液(DMA中10mM，6.8μL，67.5nmol，5.6当量)。在添加DL 5后，将溶液在20℃下搅拌30分钟。通过添加N‑乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，6.8μL，67.5nmol)中止过量药物，接着搅拌溶液20分钟。中止的共轭反应通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 6浓缩至
4.29mg/mL的最终浓度，且获得320μL(1.37mg，9.1nmol，76％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(83％)。
4.29mg/mL的最终浓度，且获得320μL(1.37mg，9.1nmol，76％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(83％)。
[2025] 制备具有抗CD13及化合物DL 1的抗体‑药物共轭物ADC 7
[2026] (a)抗CD13的部分还原以得到经部分还原的抗CD13
[2027] 用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将抗CD13溶液(0.5mL，8.2mg，54.6nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过添加5.0mM三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(31.9μL，159nmol，3当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到4.7的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2028] (b)制备ADC 7
[2029] 向经部分还原的抗CD13(200μL，2.0mg，13.3nmol)的溶液添加N，N‑二甲基乙酰胺(DMA)(40μL)，接着添加刚制备的DL 1溶液(DMA中10mM，10μL，100nmol，7.5当量)。在添加DL 1后，将溶液在20℃下搅拌30分钟。通过添加N‑乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，10μL，100nmol)中止过量药物，接着搅拌溶液20分钟。中止的共轭反应通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 7浓缩至5.58mg/mL的最终浓度，且获得350μL(1.95mg，13nmol，98％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(90％)。制备具有抗CD13及化合物DL 3的抗体‑药物共轭物ADC 8
[2030] (a)抗CD13的部分还原以得到经部分还原的抗CD13
[2031] 用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将抗CD13溶液(0.5mL，8.2mg，54.6nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过添加5.0mM三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(31.9μL，159nmol，3当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到4.7的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2032] (b)制备ADC 8
[2033] 向经部分还原的抗CD13(200μL，2.0mg，13.3nmol)的溶液添加N，N‑二甲基乙酰胺(DMA)(40μL)，接着添加刚制备的DL 3溶液(DMA中10mM，10μL，100nmol，7.5当量)。在添加DL 3后，将溶液在20℃下搅拌30分钟。通过添加N‑乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，10μL，100nmol)中止过量药物，接着搅拌溶液20分钟。中止的共轭反应通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 8浓缩至5.83mg/mL的最终浓度，且获得380μL(2.21mg，14.7nmol，111％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(94％)。制备具有抗CD13及化合物DL 5的抗体‑药物共轭物ADC 9
[2034] (a)抗CD13的部分还原以得到经部分还原的抗CD13
[2035] 用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将抗CD13溶液(0.5mL，8.2mg，54.6nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过添加5.0mM三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(31.9μL，159nmol，3当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到4.7的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2036] (b)制备ADC 9
[2037] 向经部分还原的抗CD13(200μL，2.0mg，13.3nmol)的溶液添加N，N‑二甲基乙酰胺(DMA)(40μL)，接着添加刚制备的DL 5溶液(DMA中10mM，10μL，100nmol，7.5当量)。在添加DL 5后，将溶液在20℃下搅拌30分钟。通过添加N‑乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，10μL，100nmol)中止过量药物，接着搅拌溶液20分钟。中止的共轭反应通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 9浓缩至5.82mg/mL的最终浓度，且获得380μL(2.21mg，14.7nmol，111％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(89％)。
[2038] 制备具有抗CD13及化合物DL 2的抗体‑药物共轭物ADC 10
[2039] (a)抗CD13的部分还原以得到经部分还原的抗CD13
[2040] 用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将抗CD13溶液(0.5mL，8.2mg，54.6nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过添加5.0mM三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(31.9μL，159.6nmol，
3当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到4.7的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
3当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到4.7的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2041] (b)制备ADC 10
[2042] 向经部分还原的抗CD13(200μL，2mg，13.3nmol)的溶液添加DMA(40μL)，接着添加刚制备的DL 2溶液(DMA中10mM，10μL，100nmol，7.5当量)。在添加DL 2后，溶液变混浊。将共轭反应在20℃下搅拌30分钟。通过添加N‑乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，10μL，100nmol)中止过量药物，接着搅拌溶液20分钟。中止的共轭反应通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 10浓缩至6.61mg/mL的最终浓度，且获得250μL(1.65mg，11nmol，85％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(23％)。制备具有曲妥珠单抗及化合物DL 6的抗体‑药物共轭物ADC 11
[2043] (a)曲妥珠单抗的部分还原以得到经部分还原的曲妥珠单抗
[2044] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(13.9mg/mL)。
[2045] 用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.33mL，4.6mg，30.6nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过添加5.0mM三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(17.5μL，87.6nmol，3当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到4.0的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2046] (b)制备ADC 11
[2047] 向经部分还原的曲妥珠单抗(140μL，1.4mg，9nmol)的溶液添加DMA(28.2μL)，接着添加刚制备的DL 6溶液(DMA中10mM，6.8μL，67.5nmol，7.5当量)。在添加DL 6后，溶液变混浊。将共轭反应在20℃下搅拌30分钟。通过添加N‑乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，6.8μL，67.5nmol)中止过量药物，接着搅拌溶液20分钟。中止的共轭反应通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 11浓缩至
6.14mg/mL的最终浓度，且获得218μL(1.33mg，8.9nmol，99％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(38％)。
6.14mg/mL的最终浓度，且获得218μL(1.33mg，8.9nmol，99％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(38％)。
[2048] 制备具有曲妥珠单抗及化合物DL 7的抗体‑药物共轭物ADC 12
[2049] (a)曲妥珠单抗的部分还原以得到经部分还原的曲妥珠单抗
[2050] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(17.1mg/mL)。
[2051] 用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.5mL，8.5mg，57nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过添加5.0mM三[2‑羧基乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(24.5μL，122.4nmol，
2.2当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到3.4的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
2.2当量)将抗体中的二硫键部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。紧接在还原之后进行埃尔曼分析，得到3.4的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2052] (b)制备ADC 12
[2053] 向经部分还原的曲妥珠单抗(200μL，2mg，13.2nmol)的溶液添加DMA(42.1μL)，接着添加刚制备的DL 7溶液(DMA中10mM，7.9μL，79nmol，6当量)。在添加DL 7后，溶液变混浊。将共轭反应在20℃下搅拌30分钟。通过添加N‑乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，7.9μL，79nmol)中止过量药物，接着搅拌溶液20分钟。中止的共轭反应通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 12浓缩至5.38mg/mL的最终浓度，且获得270μL(1.45mg，9.6nmol，72％)ADC溶液。进行HIC HPLC操作以确定共轭反应百分比(76％)。
[2054] 制备具有进行特氏修饰的曲妥珠单抗及化合物DL 2的抗体‑药物共轭物ADC 13
[2055] (a)曲妥珠单抗与2‑亚氨基硫杂环戊烷(特氏试剂)反应以得到硫醇活化的曲妥珠单抗
[2056] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(16.1mg/mL)。
[2057] 用磷酸盐缓冲液(50mM磷酸盐、2mM EDTA，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.5mL，8.0mg，53.7nmol)稀释至10mg/mL的浓度。添加特氏试剂(14mM，46.0μL，644nmol，12当量)，且在20℃下搅拌反应2小时。使用Sephadex G25 NAP‑5管柱将混合物经缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至0.8mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到4.4的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2058] (b)制备ADC 13
[2059] 向硫醇活化的曲妥珠单抗(200μL，2.0mg，13nmol)的溶液添加DMA(37μL)，接着添加刚制备的DL 2溶液(DMA中10mM，13μL，130nmol，10当量)。在添加DL 2后，溶液变混浊。在25℃下搅拌共轭反应2小时，且通过使用Sephadex G25NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 13浓缩至2.83mg/mL的最终浓度，且获得340μL(0.96mg，6.4nmol，49％)ADC溶液。
[2060] 制备具有进行特氏修饰的曲妥珠单抗及化合物DL 3的抗体‑药物共轭物ADC 14
[2061] (a)曲妥珠单抗与2‑亚氨基硫杂环戊烷(特氏试剂)反应以得到硫醇活化的曲妥珠单抗
[2062] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(16.1mg/mL)。
[2063] 用磷酸盐缓冲液(50mM磷酸盐、2mM EDTA，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.5mL，8.0mg，53.7nmol)稀释至10mg/mL的浓度。添加特氏试剂(14mM，46.0μL，644nmol，12当量)，且在20℃下搅拌反应2小时。使用Sephadex G25 NAP‑5管柱将混合物经缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至0.8mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到4.4的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2064] (b)制备ADC 14
[2065] 向硫醇活化的曲妥珠单抗(200μL，2.0mg，13nmol)的溶液添加DMA(37μL)，接着添加刚制备的DL 3溶液(DMA中10mM，13μL，130nmol，10当量)。在添加DL 3后，溶液变混浊。在25℃下搅拌共轭反应2小时，且通过使用Sephadex G25NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 14浓缩至0.75mg/mL的最终浓度，且获得380μL(0.28mg，1.9nmol，15％)ADC溶液。
[2066] 制备具有进行特氏修饰的曲妥珠单抗及化合物DL 5的抗体‑药物共轭物ADC 15
[2067] (a)曲妥珠单抗与2‑亚氨基硫杂环戊烷(特氏试剂)反应以得到硫醇活化的曲妥珠单抗
[2068] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(16.1mg/mL)。
[2069] 用磷酸盐缓冲液(50mM磷酸盐、2mM EDTA，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.5mL，8.0mg，53.7nmol)稀释至10mg/mL的浓度。添加特氏试剂(14mM，46.0μL，644nmol，12当量)，且在20℃下搅拌反应2小时。使用Sephadex G25 NAP‑5管柱将混合物经缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至0.8mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到4.4的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2070] (b)制备ADC 15
[2071] 向硫醇活化的曲妥珠单抗(200μL，2.0mg，13nmol)的溶液添加DMA(37μL)，接着添加刚制备的DL 5溶液(DMA中10mM，13μL，130nmol，10当量)。在添加DL 5后，溶液变混浊。在25℃下搅拌共轭反应2小时，且通过使用Sephadex G25NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 15浓缩至1.79mg/mL的最终浓度，且获得440μL(0.79mg，5.2nmol，40％)ADC溶液。
[2072] 制备具有进行特氏修饰的曲妥珠单抗及化合物DL 6的抗体‑药物共轭物ADC 16
[2073] (a)曲妥珠单抗与2‑亚氨基硫杂环戊烷盐酸盐(特氏试剂)反应以得到硫醇活化的曲妥珠单抗
[2074] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(17.1mg/mL)。
[2075] 用磷酸盐缓冲液(50mM磷酸盐、2mM EDTA，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.25mL，4.3mg，28.5nmol)稀释至10mg/mL的浓度。添加特氏试剂(14mM，24.4μL，342nmol，12当量)，且在20℃下搅拌反应2小时。使用Sephadex G25 NAP‑5管柱将混合物经缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至0.43mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到4.6的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2076] (b)制备ADC 16
[2077] 向硫醇活化的曲妥珠单抗(200μL，2.0mg，13nmol)的溶液添加DMA(37μL)，接着添加刚制备的DL 6溶液(DMA中10mM，13μL，130nmol，10当量)。在添加DL 6后，溶液变混浊。在25℃下搅拌共轭反应2小时，且通过使用Sephadex G25NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 16浓缩至5.63mg/mL的最终浓度，且获得230μL(1.29mg，8.6nmol，66％)ADC溶液。
[2078] 制备具有进行特氏修饰的曲妥珠单抗及化合物DL 8的抗体‑药物共轭物ADC 17
[2079] (a)曲妥珠单抗与2‑亚氨基硫杂环戊烷(特氏试剂)反应以得到硫醇活化的曲妥珠单抗
[2080] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(17.7mg/mL)。
[2081] 用磷酸盐缓冲液(50mM磷酸盐、2mM EDTA，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(1.5mL，26.5mg，177nmol)稀释至10mg/mL的浓度且分在两个小瓶(各1.3mL)中。将特氏试剂添加
(14mM，61.8μL，866nmol，10当量)在每个小瓶中，且在20℃下搅拌反应2小时。将反应混合且使用Sephadex G25 NAP‑10管柱，缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至2.6mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到5.6的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
(14mM，61.8μL，866nmol，10当量)在每个小瓶中，且在20℃下搅拌反应2小时。将反应混合且使用Sephadex G25 NAP‑10管柱，缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至2.6mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到5.6的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2082] (b)制备ADC 17
[2083] 向硫醇活化的曲妥珠单抗(500μL，5.0mg，33nmol)的溶液添加DMA(98.6μL)，接着添加刚制备的DL 8溶液(DMA中10mM，26.4μL，264nmol，8当量)。在添加DL 8后，溶液变混浊。在25℃下搅拌共轭反应2小时，且通过使用Sephadex G25NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 17浓缩至3.21mg/mL的最终浓度，且获得390μL(1.25mg，8.3nmol，25％)ADC溶液。
[2084] 制备具有进行特氏修饰的曲妥珠单抗及化合物DL 9的抗体‑药物共轭物ADC 18
[2085] (a)曲妥珠单抗与2‑亚氨基硫杂环戊烷(特氏试剂)反应以得到硫醇活化的曲妥珠单抗
[2086] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(17.7mg/mL)。
[2087] 用磷酸盐缓冲液(50mM磷酸盐、2mM EDTA，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(1.5mL，26.5mg，177nmol)稀释至10mg/mL的浓度且分在两个小瓶(各1.3mL)中。将特氏试剂添加
(14mM，61.8μL，866nmol，10当量)在每个小瓶中，且在20℃下搅拌反应2小时。将反应混合且使用Sephadex G25 NAP‑10管柱，缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至2.6mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到5.6的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
(14mM，61.8μL，866nmol，10当量)在每个小瓶中，且在20℃下搅拌反应2小时。将反应混合且使用Sephadex G25 NAP‑10管柱，缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至2.6mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到5.6的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2088] (b)制备ADC 18
[2089] 向硫醇活化的曲妥珠单抗(500μL，5.0mg，33nmol)的溶液添加DMA(98.6μL)，接着添加刚制备的DL 9溶液(DMA中10mM，26.4μL，264nmol，8当量)。在添加DL 9后，溶液变混浊。在25℃下搅拌共轭反应2小时，且通过使用Sephadex G25NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 18浓缩至3.16mg/mL的最终浓度，且获得390μL(1.23mg，8.2nmol，25％)ADC溶液。
[2090] 制备具有进行特氏修饰的曲妥珠单抗及化合物DL 10的抗体‑药物共轭物ADC 19
[2091] (a)曲妥珠单抗与2‑亚氨基硫杂环戊烷(特氏试剂)反应以得到硫醇活化的曲妥珠单抗
[2092] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(17.7mg/mL)。
[2093] 用磷酸盐缓冲液(50mM磷酸盐、2mM EDTA，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(1.5mL，26.5mg，177nmol)稀释至10mg/mL的浓度且分在两个小瓶(各1.3mL)中。将特氏试剂添加
(14mM，61.8μL，866nmol，10当量)在每个小瓶中，且在20℃下搅拌反应2小时。将反应混合且使用Sephadex G25 NAP‑10管柱，缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至2.6mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到5.6的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
(14mM，61.8μL，866nmol，10当量)在每个小瓶中，且在20℃下搅拌反应2小时。将反应混合且使用Sephadex G25 NAP‑10管柱，缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至2.6mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到5.6的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2094] (b)制备ADC 19
[2095] 向硫醇活化的曲妥珠单抗(500μL，5.0mg，33nmol)的溶液添加DMA(98.6μL)，接着添加刚制备的DL 10溶液(DMA中10mM，26.4μL，264nmol，8当量)。在添加DL 10后，溶液变混浊。在25℃下搅拌共轭反应2小时，且通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 19浓缩至11.3mg/mL的最终浓度，且获得290μL(3.2mg，21.3nmol，64％)ADC溶液。
[2096] 制备具有进行特氏修饰的曲妥珠单抗及化合物DL 11的抗体‑药物共轭物ADC 20
[2097] (a)曲妥珠单抗与2‑亚氨基硫杂环戊烷(特氏试剂)反应以得到硫醇活化的曲妥珠单抗
[2098] 将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗自Roche购得，呈白色冻干粉末，用于制备供输注用的浓溶液)溶解于5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中且通过使用Sephadex G25 PD‑10管柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中来纯化。通过量测280nm下吸光度，确定曲妥珠单抗浓度(17.7mg/mL)。
[2099] 用磷酸盐缓冲液(50mM磷酸盐、2mM EDTA，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(1.5mL，26.5mg，177nmol)稀释至10mg/mL的浓度且分在两个小瓶(各1.3mL)中。将特氏试剂添加
(14mM，61.8μL，866nmol，10当量)在每个小瓶中，且在20℃下搅拌反应2小时。将反应混合且使用Sephadex G25 NAP‑10管柱，缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至2.6mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到5.6的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
(14mM，61.8μL，866nmol，10当量)在每个小瓶中，且在20℃下搅拌反应2小时。将反应混合且使用Sephadex G25 NAP‑10管柱，缓冲液交换成PBS缓冲液，且浓缩至2.6mL的体积。紧接之后进行埃尔曼分析，得到5.6的自由硫醇与抗体比率(FTAR)。
[2100] (b)制备ADC 20
[2101] 向硫醇活化的曲妥珠单抗(500μL，5.0mg，33nmol)的溶液添加DMA(98.6μL)，接着添加刚制备的DL 11溶液(DMA中10mM，26.4μL，264nmol，8当量)。在添加DL 11后，溶液变混浊。在25℃下搅拌共轭反应2小时，且通过使用Sephadex G25 NAP‑5管柱脱盐至PBS缓冲液中来纯化。如通过UV所测定，最终目标产物ADC 20浓缩至3.73mg/mL的最终浓度，且获得440μL(1.6mg，10.6nmol，32％)ADC溶液。
[2102] 实施例3：证明本发明的抗体‑药物共轭物的细胞毒性
[2103] 用于侦测抗肿瘤活性的生物分析
[2104] 此分析的目标为评估所测试样品的试管内细胞生长抑制(延迟或阻止肿瘤细胞生长的能力)或细胞毒性(杀死肿瘤细胞的能力)活性。
[2105] 细胞系及细胞培养
[2106] 以下人类细胞系是获自美国菌种保存中心(ATCC)：SK‑BR‑3(ATCC HB‑30)、HCC‑1954(ATCC CRL‑2338)(乳癌，HER2+)；MDA‑MB‑231(ATCC HTB‑26)及MCF‑7(ATCC HTB‑22)(乳癌，HER2‑)、HT‑1080(ATCC CCL‑121，纤维肉瘤，CD13+)、Raji(ATCC CCL‑86，伯基特氏淋巴瘤，CD13‑)及RPMI 8226(ATCC CRM‑CCL‑155，骨髓瘤，CD13‑)。自Leibniz‑institut DSMZ(BraunschweiG，Germany)获得人类急性前髓细胞性白血病细胞系NB 4(ACC 207，CD13+)。
细胞维持在达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)(SK‑BR‑3、MDA‑MB‑231及MCF‑7细胞)、伊格尔最低必需培养基(EMEM)(HT‑1080细胞)或RPMI‑1640(其余细胞系)中37℃、5％CO2及95％湿度下，所有培养基均补充有10％胎牛血清(FCS)、2mM L‑麸酰胺酸及100单元/毫升青霉素及链霉素。
细胞维持在达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)(SK‑BR‑3、MDA‑MB‑231及MCF‑7细胞)、伊格尔最低必需培养基(EMEM)(HT‑1080细胞)或RPMI‑1640(其余细胞系)中37℃、5％CO2及95％湿度下，所有培养基均补充有10％胎牛血清(FCS)、2mM L‑麸酰胺酸及100单元/毫升青霉素及链霉素。
[2107] 细胞毒性分析
[2108] 对于SK‑BR‑3、HCC‑1954、MDA‑MB‑231及MCF‑7细胞，使用磺酰罗丹明B(SRB)的比色分析适用于定量量测细胞生长及细胞毒性，如V.Vichai及K.Kirtikara，Sulforhodamine B colorimetric assay for cytotoxicity screening.Nature Protocols，2006，1，1112‑1116中所述。简言之，将细胞接种在96孔微量滴定盘中且使其在无药物培养基中静置24小时，接着用单独媒剂或测试物质处理72小时。为进行定量，将细胞用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤两次，在1％戊二醛溶液中固定15分钟，用PBS冲洗两次，在具有1％(v/v)乙酸溶液的
0.4％(w/v)SRB中染色30分钟，用1％乙酸溶液冲洗数次且风干。接着在10mM trizma基础溶液中萃取SRB，且在微定量盘式分光光度计中在490nm下量测吸光度。
0.4％(w/v)SRB中染色30分钟，用1％乙酸溶液冲洗数次且风干。接着在10mM trizma基础溶液中萃取SRB，且在微定量盘式分光光度计中在490nm下量测吸光度。
[2109] 对于HT‑1080、NB 4、Raji及RPMI‑8226细胞，使用基于3‑(4，5‑二甲基噻唑‑2‑基)‑2，5‑二苯基四唑溴化物(MTT)的还原的替代比色分析，用于定量量测细胞活力，如
T.Mosmann，“rapid colorimetric assay for cellular growth and survival:
application to proliFeration and cytotoxicity assays”，J immunol Methods，1983，
65:55‑63所描述。简言之，细胞接种在96孔盘中且如上处理，且在暴露于测试物质72小时之后，自MTT(Sigma，St Louis，MO，USA)转化成其有色反应产物MTT‑甲臜估计细胞存活力，MTT‑甲臜溶解于DMSO中以在微定量盘式分光光度计中在540nm下量测其吸光度。
T.Mosmann，“rapid colorimetric assay for cellular growth and survival:
application to proliFeration and cytotoxicity assays”，J immunol Methods，1983，
65:55‑63所描述。简言之，细胞接种在96孔盘中且如上处理，且在暴露于测试物质72小时之后，自MTT(Sigma，St Louis，MO，USA)转化成其有色反应产物MTT‑甲臜估计细胞存活力，MTT‑甲臜溶解于DMSO中以在微定量盘式分光光度计中在540nm下量测其吸光度。
[2110] 细胞存活表示为对照的未处理细胞存活的百分比。所有评定一式三份进行且所得数据通过非线性回归，与四参数对数曲线拟合，由此计算IC50值(与对照细胞存活相比引起50％细胞死亡的化合物浓度)。
[2111] 生物活性实施例1‑共轭物ADC 1及相关试剂针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2112] 评估ADC 1以及母体细胞毒性化合物DL 1及11‑R及曲妥珠单抗针对过度表现或不表现HER2受体的四种不同人类乳癌细胞系，包括SK‑BR‑3、HCC‑1954(HER2阳性细胞)以及MDA‑MB‑231及MCF‑7(HER2阴性细胞)的试管内细胞毒性。进行与测试物质一起培育72小时的标准剂量‑反应(DR)曲线。
[2113] 曲妥珠单抗的细胞毒性
[2114] 通过进行在50至0.01μg/mL(3.33E‑07‑8.74E‑11M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估曲妥珠单抗针对不同肿瘤细胞系的试管内细胞毒性。曲妥珠单抗完全非活性，在任一测试细胞系中均未达到IC50，与其HER2状态无关，如表10中所示，其中呈现与三个独立实验中获得的IC50值的几何平均值对应的结果。
[2115] 表10.曲妥珠单抗的试管内细胞毒性的概述
[2116]
[2117] 11‑R的细胞毒性
[2118] 通过进行在100至0.03ng/mL(1.26E‑07‑3.3E‑11M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估中间化合物11‑R针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。
[2119] 如呈现与三个独立实验中获得的IC50值的几何平均值对应的结果的表11中所示，此化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中类似，无论其HER2表现如何，其中IC50值在低纳摩尔范围内，0.4至1.4ng/mL(5.04E‑10至1.70E‑09M)。在全细胞图中几何平均IC50值为0.79ng/mL(9.94E‑10M)，其中标准几何偏差为1.8，符合四种细胞系中结果的均一性。
[2120] 表11. 11‑R的试管内细胞毒性的概述
[2121]
[2122] DL 1的细胞毒性
[2123] 通过进行在10μg/mL至2.6ng/mL(7.58E‑06‑1.99E‑09M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估中间化合物DL 1针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。
[2124] 如呈现与三个独立实验中获得的IC50值的几何平均值对应的结果的表12中所示，此化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中类似，无论其HER2表现如何，其中IC50值在高纳摩尔范围内，0.07至0.43μg/mL(5.23E‑08至3.11E‑07M)。在全细胞图中几何平均IC50值为0.16μg/mL(1.15E‑07M)，其中标准几何偏差为2.1，符合四种细胞系中结果的均一性。
[2125] 表12.DL 1的试管内细胞毒性的概述
[2126]
[2127] ADC 1的细胞毒性
[2128] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 1针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。评估在三个独立实验中进行，图3展示与这些实验的一对应的代表性DR曲线，且表13概述与在三个独立实验中获得的IC50值的几何平均值对应的结果。
[2129] 如表13中所观测，ADC 1显示与母体药物11‑R仅仅在HER2阳性细胞中显示的细胞毒性类似的细胞毒性。然而，在HER2阴性细胞中，此类毒性显著较低：根据通过HER2阴性细胞中的平均IC50值除以HER2阳性细胞中的平均IC50值所获得的选择性比率，低几乎40倍。此选择性使我们推断，共轭物经由抗体与肿瘤细胞上的膜相关HER2受体的相互作用起作用，接着细胞内递送细胞毒性药物。
[2130] 表13.ADC 1的试管内细胞毒性的概述
[2131]
[2132] 为以图形方式比较单独单株抗体曲妥珠单抗的细胞毒性与共轭物ADC 1的细胞毒性，图4中展示柱状图，其展示在用单独单株抗体(20μg/mL)或16或2.5μg/mL的ADC 1处理不同细胞系后细胞存活的百分比。如所观测的，在类似浓度(20μg/mL对比16μg/mL)下曲妥珠单抗显示可忽略的细胞毒性，无论细胞系的HER2表现量如何(细胞存活介于68％与100％之间)，而ADC 1展示针对表现HER2的细胞HCC‑1954及SK‑BR‑3的有效抗增生作用(细胞存活分别为23％及8％)及针对HER2阴性细胞系MCF‑7可忽略(100％细胞存活)。ADC对MDA‑MB‑231的作用在此浓度下明显(22％细胞存活)，但在较低浓度下极小(在2.5μg/mL下83％细胞存活)，而其在表现HER2的细胞中仍显著(SK‑BR‑3与HCC‑1954的细胞存活为30％)。
[2133] 这些结果清楚证明ADC 1在试管内针对表现HER2的人类肿瘤细胞的显著细胞毒性及特异性。
[2134] 生物活性实施例2‑共轭物ADC 2及相关试剂针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2135] 评估ADC 2以及母体细胞毒性化合物DL 2针对过度表现或不表现HER2受体的四种不同人类乳癌细胞系，包括SK‑BR‑3、HCC‑1954(HER2阳性细胞)以及MDA‑MB‑231及MCF‑7(HER2阴性细胞)的试管内细胞毒性。进行与测试物质一起培育72小时的标准剂量‑反应
(DR)曲线。结果也与上述母体细胞毒性化合物11‑R及单株抗体曲妥珠单抗相比较。
(DR)曲线。结果也与上述母体细胞毒性化合物11‑R及单株抗体曲妥珠单抗相比较。
[2136] DL 2的细胞毒性
[2137] 通过进行在10μg/mL至2.6ng/mL(6.26E‑06‑1.64E‑09M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估中间化合物DL 2针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。
[2138] 如表14中所示，此化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中类似，无论其HER2表现如何，其中IC50值在低于微摩尔范围内，0.2至0.47μg/mL(1.25E‑07至2.94E‑07M)。在全细胞图中几何平均IC50值为0.28μg/mL(1.73E‑07M)，其中标准几何偏差为1.5，符合四种细胞系中结果的均一性。
[2139] 表14.DL 2的试管内细胞毒性的概述
[2140]
[2141] ADC 2的细胞毒性
[2142] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 2针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。图5展示与此实验对应的DR曲线且表15概述所获得的IC50值。
[2143] 如表15中所观测，ADC 2显示在HER2阳性细胞中的细胞毒性比HER2阴性细胞中高：根据通过在HER2阴性细胞中的平均IC50值除以HER2阳性细胞中的平均IC50值所获得的选择性比率，ADC在前者中有效几乎10倍。虽然此选择性不大，但其仍使我们推断，共轭物经由抗体与肿瘤细胞上的膜相关HER2受体的相互作用起作用，接着细胞内递送细胞毒性药物。
[2144] 表15.ADC 2的试管内细胞毒性的概述
[2145]
[2146] 为以图形方式比较单独单株抗体曲妥珠单抗的细胞毒性与共轭物ADC 2的细胞毒性，图6中展示柱状图，其展示在用单独单株抗体(20μg/mL)或16或2.5μg/mL的ADC 2处理不同细胞系后细胞存活的百分比。如所观测的，在类似浓度(20μg/mL对比16μg/mL)下曲妥珠单抗显示可忽略的细胞毒性，不管细胞系的HER2表现量如何(细胞存活介于68％与100％之间)，而ADC 2展示针对表现HER2的细胞HCC‑1954及SK‑BR‑3的显著抗增生作用(细胞存活分别为31％及40％)，针对HER2阴性细胞系MCF‑7的此类作用可忽略(94％细胞存活)。虽然在此浓度下ADC对HER2阴性细胞系MDA‑MB‑231的作用也是显著的(58％细胞存活)，但其在较低浓度下无作用(2.5μg/mL下100％细胞存活)，而在表现HER2的细胞中其仍显著(HCC‑1954外63％细胞存活且SK‑BR‑3为51％)。
[2147] 生物活性实施例3‑共轭物ADC 3及相关试剂针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2148] 评估ADC 3以及母体细胞毒性化合物DL 3针对过度表现或不表现HER2受体的四种不同人类乳癌细胞系，包括SK‑BR‑3、HCC‑1954(HER2阳性细胞)以及MDA‑MB‑231及MCF‑7(HER2阴性细胞)的试管内细胞毒性。进行与测试物质一起培育72小时的标准剂量‑反应
(DR)曲线。结果也与上述母体细胞毒性化合物11‑R及单株抗体曲妥珠单抗相比较。
(DR)曲线。结果也与上述母体细胞毒性化合物11‑R及单株抗体曲妥珠单抗相比较。
[2149] DL 3的细胞毒性
[2150] 通过进行在10μg/mL至2.6ng/mL(6.62E‑06‑1.74E‑09M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估中间化合物DL 3针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。
[2151] 如表16中所示，此化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中类似，无论其HER2表现如何，其中IC50值在低于微摩尔范围内，0.15至0.28μg/mL(9.93E‑08至1.85E‑07M)。在全细胞图中几何平均IC50值为0.2μg/mL(1.33E‑07M)，其中标准几何偏差为1.4，符合四种细胞系中结果的均一性。
[2152] 表16.DL 3的试管内细胞毒性的概述
[2153]
[2154] ADC 3的细胞毒性
[2155] 通过进行在50μg/mL至13ng/mL(3.33E‑07‑8.74E‑11M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 3针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。图7展示与此实验对应的DR曲线且表17概述所获得的IC50值。
[2156] 如表17中所观测，ADC 3显示仅仅在HER2阳性细胞中与母体药物11‑R显示的细胞毒性类似的细胞毒性。然而，在HER2阴性细胞中，此类毒性显著较低：根据通过HER2阴性细胞中的平均IC50值除以HER2阳性细胞中的平均IC50值所获得的选择性比率，低23倍。此选择性使我们推断，共轭物经由抗体与肿瘤细胞上的膜相关HER2受体的相互作用起作用，接着细胞内递送细胞毒性药物，如前针对ADC 1及ADC 2所述。
[2157] 表17.ADC 3的试管内细胞毒性的概述
[2158]
[2159]
[2160] 为以图形方式比较单独单株抗体曲妥珠单抗的细胞毒性与共轭物ADC 3的细胞毒性，图8中展示柱状图，其展示在用单独单株抗体(20μg/mL)或20或3μg/mL的ADC 3处理不同细胞系后细胞存活的百分比。如所观测的，在20μg/mL下曲妥珠单抗显示可忽略的细胞毒性，不管细胞系的HER2表现量如何(细胞存活介于68％与100％之间)，而ADC 3展示针对表现HER2的细胞HCC‑1954及SK‑BR‑3的有效抗增生作用(细胞存活分别为23％及32％)，且针对HER2阴性细胞系MCF‑7仅仅为微小的(88％细胞存活)。ADC对MDA‑MB‑231的作用在此浓度下明显(32％细胞存活)，但在较低浓度下可忽略(在3μg/mL下91％细胞存活)，而其在表现HER2的细胞中仍显著(HCC‑1954的细胞存活为34％且SK‑BR‑3为45％)。
[2161] 生物活性实施例4‑共轭物ADC 4针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2162] 评估ADC ADC 4针对过度表现或不表现HER2受体的四种不同人类乳癌细胞系，包括SK‑BR‑3、HCC‑1954(HER2阳性细胞)以及MDA‑MB‑231及MCF‑7(HER2阴性细胞)的试管内细胞毒性。进行与ADC一起培育72小时的标准剂量‑反应(DR)曲线。结果也与上述母体细胞毒性化合物11‑R及DL 1以及单株抗体曲妥珠单抗相比较。
[2163] ADC 4的细胞毒性
[2164] 通过进行在50μg/mL至13ng/mL(3.33E‑07‑8.74E‑11M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 4针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。图9展示与此实验对应的DR曲线且表18概述所获得的IC50值。
[2165] 如表18中所观测，ADC 4显示仅仅在HER2阳性细胞中与母体药物11‑R显示的细胞毒性类似的细胞毒性。然而，根据通过HER2阴性细胞中的平均IC50值除以HER2阳性细胞中的平均IC50值所获得的选择性比率，在HER2阴性细胞中，此类毒性低几乎100倍。如已针对ADC 1所述，此选择性使我们推断，共轭物经由抗体与肿瘤细胞上的膜相关HER2受体的相互作用起作用，接着细胞内递送细胞毒性药物。此外，用ADC 4获得的这些结果显示由有效负载赋予的抗肿瘤潜能类似，无论参与共价键的抗体残基如何，Cys还是Lys。
[2166] 表18.ADC 4的试管内细胞毒性的概述
[2167]
[2168] 为以图形方式比较单独单株抗体曲妥珠单抗的细胞毒性与共轭物ADC 4的细胞毒性，图10中展示柱状图，其展示在用3μg/mL单独单株抗体或3或0.2μg/mL的ADC处理不同细胞系后细胞存活的百分比。如所观测的，在3μg/mL下曲妥珠单抗几乎未显示细胞毒性，不管细胞系的HER2表现量如何(细胞存活介于60％与90％之间)，而ADC 4展示针对表现HER2的细胞HCC‑1954及SK‑BR‑3的有效抗增生作用(细胞存活分别为11％及23％)，且针对HER2阴性细胞系MCF‑7几乎无作用。ADC对细胞系MDA‑MB‑231的作用在此浓度下明显(55％细胞存活)，但在较低浓度下可忽略(在0.2μg/mL下97‑100％细胞存活)，而其在表现HER2的细胞中显然显著(HCC‑1954的细胞存活为38％且SK‑BR‑3为26％)。
[2169] 生物活性实施例5‑共轭物ADC 6及相关试剂针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2170] 评估ADC 6以及母体细胞毒性化合物DL 5及12R及针对过度表现或不表现HER2受体的四种不同人类乳癌细胞系，包括SK‑BR‑3、HCC‑1954(HER2阳性细胞)以及MDA‑MB‑231及MCF‑7(HER2阴性细胞)的试管内细胞毒性。进行与测试物质一起培育72小时的标准剂量‑反应(DR)曲线。
[2171] 12‑R的细胞毒性
[2172] 通过进行在100至0.03ng/mL(1.28E‑07‑3.83E‑11M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估中间化合物12‑R针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。
[2173] 如呈现与三个独立实验中获得的IC50值的几何平均值对应的结果的表19中所示，此化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中类似，无论其HER2表现如何，其中IC50值在低纳摩尔范围内，0.4至1.3ng/mL(5.62E‑10至1.62E‑09M)。在全细胞图中几何平均IC50值为0.71ng/mL(9.06E‑10M)，其中标准几何偏差为1.7，符合四种细胞系中结果的均一性。
[2174] 表19. 12‑R的试管内细胞毒性的概述
[2175]
[2176] DL 5的细胞毒性
[2177] 通过进行在10μg/mL至2.6ng/mL(6.66E‑06‑1.73E‑09M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估中间化合物DL 5针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。
[2178] 如表20中所示，此化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中类似，无论其HER2表现如何，其中IC50值在高纳摩尔范围内，0.10至0.19μg/mL(6.53E‑08至1.27E‑07M)。在全细胞图中几何平均IC50值为0.13μg/mL(8.84E‑08M)，其中标准几何偏差为1.4，符合四种细胞系中结果的均一性。
[2179] 表20.DL 5的试管内细胞毒性的概述
[2180]
[2181] ADC 6的细胞毒性
[2182] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 6针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。图11展示获得的DR曲线且表21概述推断的IC50值。
[2183] 如表21中所观测，ADC 6的细胞毒性与母体药物12‑R仅仅在HER2阳性细胞中显示的细胞毒性相当。然而，在HER2阴性细胞中，此类毒性较低：根据通过HER2阴性细胞中的平均IC50值除以HER2阳性细胞中的平均IC50值所获得的选择性比率，低几乎10倍。这些数据使我们推断，共轭物经由抗体与肿瘤细胞上的膜相关HER2受体的相互作用起作用，接着细胞内递送细胞毒性药物。
[2184] 表21.ADC 6的试管内细胞毒性的概述
[2185]
[2186] 生物活性实施例6‑共轭物ADC 11及相关试剂针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2187] 评估ADC 11以及母体细胞毒性化合物DL 6及12R及针对过度表现或不表现HER2受体的四种不同人类乳癌细胞系，包括SK‑BR‑3、HCC‑1954(HER2阳性细胞)以及MDA‑MB‑231及MCF‑7(HER2阴性细胞)的试管内细胞毒性。进行与测试物质一起培育72小时的标准剂量‑反应(DR)曲线。
[2188] DL 6的细胞毒性
[2189] 通过进行在1μg/mL至0.26ng/mL(7.23E‑07‑1.88E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估中间化合物DL 6针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。
[2190] 如表22中所示，此化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中类似，无论其HER2表现如何，其中IC50值在高纳摩尔范围内，0.04至0.3μg/mL(3.1E‑08至1.97E‑07M)。在全细胞图中几何平均IC50值为0.11μg/mL(7.89E‑08M)，其中标准几何偏差为2.31，符合四种细胞系中结果的均一性。
[2191] 表22.DL 6的试管内细胞毒性的概述
[2192]
[2193]
[2194] ADC 11的细胞毒性
[2195] 通过进行在50μg/mL至13ng/mL(3.33E‑07‑8.74E‑11M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 11针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表23概述推断的IC50值。
[2196] 表23.ADC 11的试管内细胞毒性的概述
[2197]
[2198] 生物活性实施例7‑共轭物ADC 12针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2199] 评估ADC 12针对过度表现或不表现HER2受体的四种不同人类乳癌细胞系，包括SK‑BR‑3、HCC‑1954(HER2阳性细胞)以及MDA‑MB‑231及MCF‑7(HER2阴性细胞)的试管内细胞毒性。进行与测试物质一起培育72小时的标准剂量‑反应(DR)曲线。
[2200] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 12针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表24概述推断的IC50值。如所观测的，ADC 12在HER2阳性细胞中明显更具活性，产生高于20的显著选择性比率。
[2201] 表24.ADC 12的试管内细胞毒性的概述
[2202]
[2203]
[2204] 生物活性实施例8‑共轭物ADC 13针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2205] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 13针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表25概述推断的IC50值。如所观测的，ADC 13在HER2阳性细胞中明显更具活性，产生靠近100的优良选择性比率。
[2206] 表25.ADC 13的试管内细胞毒性的概述
[2207]
[2208] 生物活性实施例9‑共轭物ADC 14针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2209] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 14针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表26概述推断的IC50值。显著地，ADC 14显示在低nM范围内的细胞毒性活性，与母体药物11R相当，但仅仅在表现HER2的细胞中，而在测试的浓度范围内其在HER2阴性细胞中未展示任何活性，因此证实优良选择性。
[2210] 表26.ADC 14的试管内细胞毒性的概述
[2211]
[2212]
[2213] 生物活性实施例10‑共轭物ADC 15针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2214] 通过进行在50μg/mL至13ng/mL(3.33E‑07‑8.74E‑11M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 15针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表27概述推断的IC50值。如所观测的，ADC 15在HER2阳性细胞中明显更具活性，产生靠近200的优良选择性比率。
[2215] 表27.ADC 15的试管内细胞毒性的概述
[2216]
[2217] 生物活性实施例11‑共轭物ADC 16针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2218] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 16针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表28概述推断的IC50值。如所观测的，ADC 16在HER2阳性细胞中明显更具活性，产生靠近100的优良选择性比率。
[2219] 表28.ADC 16的试管内细胞毒性的概述
[2220]
[2221] 生物活性实施例12‑共轭物ADC 17针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2222] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 17针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表29概述推断的IC50值。
[2223] 表29.ADC 17的试管内细胞毒性的概述
[2224]
[2225] 生物活性实施例13‑共轭物ADC 18针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2226] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 18针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表30概述推断的IC50值。
[2227] 表30.ADC 18的试管内细胞毒性的概述
[2228]
[2229]
[2230] 生物活性实施例14‑共轭物ADC 19针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2231] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 19针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表31概述推断的IC50值。
[2232] 表31.ADC 19的试管内细胞毒性的概述
[2233]
[2234] 生物活性实施例15‑共轭物ADC 20针对HER2阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2235] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 20针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表32概述推断的IC50值。
[2236] 表32.ADC 20的试管内细胞毒性的概述
[2237]
[2238] 生物活性实施例16‑共轭物ADC 7及相关试剂针对CD13阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2239] 11‑R的细胞毒性
[2240] 通过进行在100μg/mL至0.03ng/mL(1.26E‑07‑3.3E‑11M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估中间化合物11‑R针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。
[2241] 如呈现与三个独立实验中获得的IC50值的几何平均值对应的结果的表33中所示，此化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中类似，无论其CD13表现如何，其中IC50值在低纳摩尔范围内，0.5至1.2ng/mL(5.8E‑10至1.51E‑09M)。在全细胞图中几何平均IC50值为0.84ng/mL(1.06E‑09M)，其中标准几何偏差为1.5，符合四种细胞系中结果的均一性。
[2242] 表33. 11‑R的试管内细胞毒性的概述
[2243]
[2244] ADC 7的细胞毒性
[2245] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 7针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表34概述推断的IC50值。显著地，ADC 7显示在低nM范围内的细胞毒性活性，与母体药物11‑R相当，但仅仅在表现CD13的细胞中，而其在CD13阴性细胞中的活性相当微小。因此，可观测到远超过100的优良选择性随CD13表现而变。
[2246] 表34.ADC 7的试管内细胞毒性的概述
[2247]
[2248]
[2249] 生物活性实施例17‑共轭物ADC 8针对CD13阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2250] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 8针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表35概述推断的IC50值。ADC
8显示在低nM范围内的细胞毒性活性，与母体药物11‑R相当，但仅仅在表现CD13的细胞中，而其在CD13阴性细胞中的活性相当微小。因此。获得随CD13表现而变的靠近200的优良选择性。
8显示在低nM范围内的细胞毒性活性，与母体药物11‑R相当，但仅仅在表现CD13的细胞中，而其在CD13阴性细胞中的活性相当微小。因此。获得随CD13表现而变的靠近200的优良选择性。
[2251] 表35.ADC 8的试管内细胞毒性的概述
[2252]
[2253] 生物活性实施例18‑共轭物ADC 9及相关试剂针对CD13阳性及阴性乳癌细胞的细胞毒性
[2254] 12‑R的细胞毒性
[2255] 通过进行在100至0.03ng/mL(1.28E‑07‑3.83E‑11M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估中间化合物12‑R针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。
[2256] 如呈现与三个独立实验中获得的IC50值的几何平均值对应的结果的表36中所示，此化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中类似，无论其CD13表现如何，其中IC50值在低纳摩尔范围内，0.3至1.1ng/mL(4.21E‑10至1.40E‑09M)。在全细胞图中几何平均IC50值为0.6ng/mL(7.8E‑10M)，其中标准几何偏差为1.7，符合四种细胞系中结果的均一性。
[2257] 表36. 12‑R的试管内细胞毒性的概述
[2258]
[2259]
[2260] ADC‑9的细胞毒性
[2261] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 9针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表37概述推断的IC50值。ADC
9显示在低nM范围内的细胞毒性活性，与母体药物12‑R相当，但仅仅在表现CD13的细胞中，而其在CD13阴性细胞中的活性相当微小。因此，得到随CD13表现而变的超过200的优良选择性比率。
9显示在低nM范围内的细胞毒性活性，与母体药物12‑R相当，但仅仅在表现CD13的细胞中，而其在CD13阴性细胞中的活性相当微小。因此，得到随CD13表现而变的超过200的优良选择性比率。
[2262] 表37.ADC 9的试管内细胞毒性的概述
[2263]
[2264] 生物活性实施例19‑共轭物ADC 10针对CD13阳性及阴性癌细胞的细胞毒性
[2265] 通过进行在100μg/mL至26ng/mL(6.67E‑07‑1.75E‑10M)范围内的一式三份的10点2.5倍稀释DR曲线，评估ADC 10针对不同肿瘤细胞系的细胞毒性。表38概述推断的IC50值。
ADC 10显示在低nM范围内的细胞毒性活性，与母体药物11‑R相当，但仅仅在表现CD13的细胞中，而其在CD13阴性细胞中的活性相当微小。因此，获得随CD13表现而变的靠近100的显著选择性。
ADC 10显示在低nM范围内的细胞毒性活性，与母体药物11‑R相当，但仅仅在表现CD13的细胞中，而其在CD13阴性细胞中的活性相当微小。因此，获得随CD13表现而变的靠近100的显著选择性。
[2266] 表38.ADC 10的试管内细胞毒性的概述
[2267]
[2268] 实施例4：证明本发明的抗体‑药物共轭物的活体内功效
[2269] 在几个活体内模型中测试基于曲妥珠单抗的抗体药物共轭物ADC 1。这些研究中使用的ADC‑1批料使用2.2当量TCEP(ADC 1 2.2TCEP)或3当量TCEP(ADC‑1)制备，使用上述程序制造这些批料，除了使用Hi Load 26/600SuperdexTM 200pg管柱及PBS(pH 7.4)作为洗脱剂进行尺寸排阻层析(SEC)来最终纯化。
[2270] 在乳房HER2阳性模型BT‑474中评估ADC‑1及ADC 1 2.2TCEP以及其有效负载化合物11‑R。值得注意地，尽管在此实验中投予负载肿瘤的小鼠的剂量低(次最优选)，但获得鼓舞人心的阳性结果(参见图12)。因此，进行一组新实验，旨在评估乳房及非乳房HER2阳性模型中的抗肿瘤活性。在乳房肿瘤模型JIMT‑1(参见图13)、一个卵巢肿瘤模型SK‑OV‑3(图14)及胃模型Gastric‑008(源自患者的异种移植物(PDX))(图16)中评估较高剂量水准下的ADC‑1。另外在另一胃模型N87中评估ADC‑1 2.2TCEP(图15)。
[2271] 简言之，4至6周龄无胸腺nu/nu(N87、Gastric‑008或SK‑OV‑3)或SCID(BT‑474或JIMT‑1)小鼠皮下植入先前在供体小鼠中产生的肿瘤细胞悬浮液(JIMT‑1或N87)或肿瘤片段(BT‑474、胃‑008或SK‑OV3)。
[2272] 每周记录肿瘤尺寸及体重3次，自处理第一天(第0天)开始。产生>20％致死率及/2
或20％净体重损失的处理视为有毒性。使用等式(a·b)/2计算肿瘤体积，其中a及b分别为
3
最长及最短直径。当肿瘤达到大约2，000mm 及/或看到严格坏死时处死动物。在每个量测
3
日，计算肿瘤体积中值。当连续2次或更多次量测的肿瘤体积＜63mm时确定肿瘤完全消退(CR)。
或20％净体重损失的处理视为有毒性。使用等式(a·b)/2计算肿瘤体积，其中a及b分别为
3
最长及最短直径。当肿瘤达到大约2，000mm 及/或看到严格坏死时处死动物。在每个量测
3
日，计算肿瘤体积中值。当连续2次或更多次量测的肿瘤体积＜63mm时确定肿瘤完全消退(CR)。
[2273] 如上所述植入动物且当肿瘤达到大约150‑200mm3时，根据以下实验设计，负载肿瘤的动物(N＝8‑10/组)随机分配至处理组中：
[2274]